一种含有原小檗碱型生物碱的药物组合物.pdf

本发明涉及一种含有原小檗碱型生物碱的药物组合物，该药物组合物包括原小檗碱型生物碱和酚酸类或醛类的组合或者原小檗碱型生物碱和酚酸类或醛类衍生物的组合以及药学上可接受的辅剂，本发明提供了一种在预防与治疗心脑血管疾病方面具有明显的协同作用，更容易控制生产成本和产品质量，制剂稳定性和均一性好，产品质量可控，生物利用度高的含有原小檗碱型生物碱的药物组合物。

权利要求书
1、  一种含有原小檗碱型生物碱的药物组合物，其特征在于：所述含有原小檗碱型生物碱的药物组合物包括原小檗碱型生物碱和酚酸类或醛类化合物的组合或者原小檗碱型生物碱和酚酸类或醛类衍生物的组合。

2、  根据权利要求1所述的含有原小檗碱型生物碱的药物组合物，其特征在于：所述含有原小檗碱型生物碱的药物组合物的原小檗碱型生物碱与酚酸类或醛类化合物的重量比为1∶5～50∶1，优选重量比为1∶2～30∶1，更优选重量比为1∶1～20∶1。

3、  根据权利要求2所述的含有原小檗碱型生物碱的药物组合物，其特征在于：所述原小檗碱型生物碱以小檗碱([C20H18NO4]+)计的含量为50％以上，优选为90％以上，更优选为98％以上。

4、  根据权利要求2所述的含有原小檗碱型生物碱的药物组合物，其特征在于：所述酚酸类或醛类化合物中酚酸类或醛类含量为80％以上，优选为95％以上，更优选为98％以上。

5、  一种含有原小檗碱型生物碱的药物组合物的药物制剂，其特征在于：所述药物制剂包括含有原小檗碱型生物碱的药物组合物和药学上可接受的辅剂。

6、  根据权利要求5所述的含有原小檗碱型生物碱的药物组合物的药物制剂，其特征在于：所述药学上可接受的辅剂可以是药学上可以接受的载体、赋形剂、稀释剂、润滑剂、黏合剂的一种或者几种的组合。

7、  根据权利要求6所述的含有原小檗碱型生物碱的药物组合物的药物制剂，其特征在于：所述赋形剂可以是水、生理盐水、葡萄糖、甘油、乙醇或其类似物及其组合。

说明书一种含有原小檗碱型生物碱的药物组合物
技术领域
本发明属于医药技术领域，尤其涉及一种含有原小檗碱型生物碱的药物组合物。
背景技术
原小檗碱(protoberberine)型生物碱系指苯甲基四氢异喹啉衍变而来，代表类型为：原小檗碱又名黄连素(Berberine)、四氢黄连碱(Tetrahydrocoptisine)、甲基黄连碱(worenine)、药根碱(jatrorrhizine)、巴马汀(palmatine)、木兰花碱(magnoflorine)等。原小檗碱型生物碱具有抗菌、镇痛和降糖作用是临床常用的药理作用。如：原小檗碱类生物碱在制备抗耐药菌药物中的用途(参见申请号为200710066144.7)、原小檗碱型衍生物对皮肤丝状真菌的真菌表现为体外杀菌活性(参见申请号为98813989.8)。有人又发现了原小檗碱在治疗精神活性物质依赖复吸药物中的应用(参见申请号为200410099287.4)。关于原小檗碱型生物碱的应用主要用在抗菌药与清热解毒方面。原小檗碱型生物碱代表物小檗碱具有抗菌、降压、扩冠及兴奋平滑肌的作用。小檗碱的盐酸盐(俗称盐酸黄连素)已广泛用于治疗胃肠炎、细菌性痢疾等，对肺结核、猩红热、急性扁桃腺炎和呼吸道感染也有一定疗效。目前原小檗碱型生物碱的生产与制备已经相当成熟，已经出现大量应用原小檗碱型生物碱单体如小檗碱又称黄连素的技术。
盐酸小檗碱作为抗菌药在临床上已应用多年，其疗效确切，为一种广谱抗菌药物。但研究表明人口服盐酸黄连素片剂，7天后，其血药浓度谷值仅约为0.3μg·L-1，而尿药浓度则达80μg·L-1。同时，累积尿药排泄量数据表明，口服给药后原形药物的尿排量仅为总量的0.013％，进而揭示小檗碱在人体口服吸收差、生物利用度低，影响疗效，因而在实践中广泛应用将产生困难。
酚酸类或醛类、是指具有以苯甲酸为母核，或以桂皮酸为母核，或以苯乙酸为母核的酚酸类化合物。中药酚酸类化合物广泛分布在药用植物中。如原儿茶酸(protocatechuic acid)是以苯甲酸为母核的代表物；原儿茶醛是以苯甲醛为母核的代表物；而从肉桂中提取分离得到的桂皮酸和桂皮醛也为酚酸或醛类。阿魏酸(ferulic acid)是以桂皮酸为母核的酚酸类成分的代表，从丹参中分离得到丹参酸B(紫草酸B，lithospermic acid B)，它是由两分子咖啡酸与两分子丹参素缩合而成。近些年来关于中药酚酸类化合物研究很多，它们具有很强的药理学活性，如清除自由基、抗炎、抗病毒、免疫调节、抗凝血及抗肿瘤作用已引起了越来越多的重视。其中原儿茶醛能显著提高耐缺氧能力和增加冠脉流量，试验也证明原儿茶醛体外及体内给药，对于致聚剂ADP诱导的小鼠、家兔血小板聚集性能上均有明显的抑制作用。研究表明丹皮酚能明显对抗心律失常的发生，缩短其持续时间，保护再灌注造成心肌损伤，降低心肌梗塞范围。也可以参见申请号：200410067903.8专利中关于丹酚酸B中的医药用途。
研究表明，心肌缺血再灌注过程中，许多因素参与心肌损伤及心律失常的产生，其中氧自由基的产生是重要的原因之一。而中药酚酸类化合物作为天然产物中有效的自由基清除剂，已经引起了很多人的重视。
经检索，尚未发现关于原小檗碱与酚酸类或醛类组合物应用于心脑血管疾病方面的相关报道，因此开发一种生物利用程度高、对预防与治疗心脑血管疾病疗效显著的心脑血管疾病药物相当有必要。
发明内容
为了解决背景技术中存在的上述技术问题，本发明提供了一种在预防与治疗心脑血管疾病方面具有明显的协同作用，更容易控制生产成本和产品质量，制剂稳定性和均一性好，产品质量可控，生物利用度高的含有原小檗碱型生物碱的药物组合物。
本发明的技术解决方案是：本发明提供了一种含有原小檗碱型生物碱的药物组合物，其特殊之处在于：所述含有原小檗碱型生物碱的药物组合物包括原小檗碱型生物碱和酚酸类或醛类化合物的组合或者原小檗碱型生物碱和酚酸类或醛类衍生物的组合。
含有原小檗碱型生物碱的药物组合物的原小檗碱型生物碱与酚酸类或醛类化合物的重量比为1∶5～50∶1，优选重量比为1∶2～30∶1，更优选为1∶1～20∶1。
上述原小檗碱型生物碱以小檗碱([C20H18NO4]+)计的含量为50％以上，优选为90％以上，更优选为98％以上。
上述酚酸类或醛类化合物的酚酸类或醛类含量为80％以上，优选为95％以上，更优选为98％以上。
一种含有原小檗碱型生物碱的药物组合物的药物制剂，其特殊之处在于：该药物制剂包括含有原小檗碱型生物碱的药物组合物和药学上可接受的辅剂。
上述辅剂可以是药学上可以接受的载体、赋形剂、稀释剂、润滑剂、黏合剂的一种或者几种的组合。
上述赋形剂可以是水、生理盐水、葡萄糖、甘油、乙醇或其类似物及其组合。
本发明的优点是：
1、在预防与治疗心脑血管疾病方面具有明显的协同作用。本发明将传统的中医药学与现代科学技术进行结合，通过无数次工艺试验研究与药效学试验将原小檗碱型生物碱与酚酸类或醛类进行组合，并制成制剂，惊人的发现在预防与治疗心脑血管疾病方面具有明显的协同作用，尤其在治疗抗心律失常方面疗效更为卓著，而且原小檗碱型生物碱在体内的血药浓度高于小檗碱单独，小檗碱与阿魏酸组合后，在体内的吸收几乎没有滞后时间，吸收程度比单用小檗碱好，药物各成分具有明显的增效协同作用。
2、产品质量可控、生物利用程度高。本发明明确了有效药物成分，并减少了不必要的无效成分，因此更容易控制生产成本和产品质量，而且作用机理明确，制剂稳定性和均一性好，产品质量可控，生物利用度高。
具体实施方式
本发明的药物组合物中含有原小檗碱型生物碱与酚酸类或醛类化合物的组合，在本文中简称复方原小檗碱。
本发明的酚酸或醛类化合物，如原儿茶醛、肉桂酸、阿魏酸、桂皮醛等也可以通过有机合成领域的技术人员所熟知合成技术合成制备的具有治疗心脑血管的酚酸类化合物。
本发明的药物组合物中有效成分的配比可以根据有效成分的活性来确定，一般原小檗碱型生物碱与酚酸类或醛类的重量比为1∶5～50∶1，优选为1∶2～30∶1，更优选为1∶1～20∶1。在本发明具体实施例一中合适的配比为原小檗碱型生物碱15mg/kg，酚酸类代表化合物原儿茶醛为3mg/kg，即原小檗碱型生物碱∶原儿茶醛的重量之比为5∶1；原小檗碱型生物碱15mg/kg，肉桂酸为0.9mg/kg，即原小檗碱型生物碱∶肉桂酸的重量之比为16.7∶1；原小檗碱型生物碱15mg/kg，阿魏酸0.9mg/kg，即原小檗碱型生物碱∶阿魏酸的重量比为16∶1；原小檗碱型生物碱15mg/kg，桂皮醛1.5mg/kg、即原小檗碱型生物碱∶桂皮醛的重量比为10∶1；原小檗碱型生物碱15mg/kg，丹参酸乙1.0mg/kg，即原小檗碱型生物碱∶丹参酸B的重量比为15∶1。通过一系列试验氯仿对小鼠室颤的影响、氯化钙对小鼠室颤的影响以及对抗肾上腺素诱发的家兔心律失常的作用，证明复方原小檗碱能明显的抗心律失常作用。
本发明提供了一种治疗心脑血管疾病的药物制剂，其包含本发明上述的药物组合物以及药学上可以接受的辅剂。药学上可以接受的辅剂包括药学上可以接受的载体、赋形剂、稀释剂、润滑剂、黏合剂等，它们与活性成分相容。运用药学上可以接受的辅剂制备药物制剂对本领域普通技术人员来讲是公知的。本发明的制剂可以为单位剂量形式，如片剂、丸剂、胶囊(包括持续释放或延迟释放形式)、粉剂、混旋剂、颗粒剂、酊剂、糖浆剂、乳液剂、悬浮剂、针剂、冻干粉针剂等剂型，以及各种缓释剂型，从而适合各种给药形式，例如口服、非肠道注射、粘膜、肌肉、静脉内、皮下、皮内等的给药形式。其中载体、赋形剂、稀释剂为药学上可以接受的并与活性成分相容，可以选用的赋形剂优选但不仅限于水、生理盐水、葡萄糖、甘油、乙醇或其类似物及其组合。
本发明还提供了一种含有原小檗碱型生物碱的药物组合物在治疗心脑血管疾病的药物中的应用，优选为抗凝血、心律失常、动脉粥硬化的预防与治疗。优选参照本发明的药物组合物制成相应的制剂给药，也可以参照本发明药物组合物的成分在制剂中的比例和给药剂量，同时给药这些药物，或者在能够不影响其中成分协同作用的一段时间内，分别给药这些药物。给药的剂量和形式一般由一事根据患者的具体情况(如年龄、体重、性别、患病时间、身体状况等)确定。一般而言，以药物组合物或药物制剂中原小檗碱型生物碱计，给药的剂量为0.01-50mg/kg患者体重，优选为0.1-30mg/kg，优选为：1-20mg/kg。在本发明的一个具体实施例中，给药剂量为原小檗碱型生物碱15mg/kg，酚酸类(桂皮醛)为1.5mg/kg，给药的形式根据各种药物制剂的剂型来确定，适合的给药形式有口服，非肠道注射、粘膜、肌肉、静脉内、皮下、皮内或经过皮肤等给药形式，优选口服、注射的给药形式。
为了便于理解，以下将通过具体的实施例对本发明进行描述。
实施例一：复方黄桂片的制备(黄连素与桂皮醛)
1.1处方 盐酸黄连素            100g
        桂皮醛                10g
        β-环糊精             80g
        乳糖                  80g
        微晶纤维素            40g
        交联PVP               25g
        3％PVPK30乙醇溶液     50ml
        硬脂酸镁              3g
                                        
        制成                  1000片
1.2制备方法
称取处方量的β-环糊精加200ml蒸馏水混合均匀，加热至完全溶解，放置室温，加入桂皮醛混合，充分振摇，搅拌3小时后，置(2-5℃)冰箱中冷藏过夜，抽滤。包合物用少量蒸馏水洗涤，抽干；再用少量的乙醚洗涤抽干。40℃下真空减压干燥，五氧化二磷作为吸水剂，干燥3个小时，即得粉末状的包合物，备用。
将处方中的黄连素与包合物分别过80目筛，混合均匀，备用；将处方中的乳糖、微晶纤维素、交联PVP分别过80目筛，混合均匀，然后与黄连素与包合物的混合物混合均匀，以3％PVPK30醇溶液制软材，20目筛制粒，60℃鼓风干燥2小时，18目筛整粒，加入适量的硬脂酸镁混合均匀，压片，包糖衣，即得。
实施例二：复方黄魏片(黄连素+阿魏酸)
2.1处方：
        盐酸黄连素            100g
        阿魏酸                6.25g
        乳糖                  80g
        微晶纤维素            40g
        交联PVP               25g
        3％PVPK30醇溶液       45ml
        微粉硅胶              4g
                                         
        制成                  1000片
2.2制备方法：
将处方中的黄连素与阿魏酸分别过100目筛，混合均匀，备用；将处方中的乳糖、微晶纤维素、交联PVP素分别过100目筛，混合均匀，然后与黄连素与阿魏酸的混合物混合均匀，以3％PVPK30醇溶液制软材，20目筛制粒，60℃鼓风干燥2小时，18目筛整粒，加入适量的硬脂酸镁混合均匀，压片，包衣，即得。
实施例三：复方黄原注射液(黄连素与原儿茶醛)
3.1处方
        盐酸黄连素            25g
(以小檗碱([C20H18NO4]+计98.5％)
        原儿茶醛              10g
        亚硫酸钠              2g
        EDTA-2Na              1g
        注射用水             加至2000ml
                                              
        制成                 1000支
3.2制作方法：
将处方量的黄连素加入到1600ml注射用水中，加热搅拌至全溶，然后加入处方量的亚硫酸钠与EDTA-2Na搅拌溶解，加入处方量的原儿茶醛，搅拌至溶，用稀盐酸调节pH值为7.82(7.5-8.0)，加入活性炭，70-80℃搅拌20min，精滤脱碳，以注射用水定容至全量，中间体检测合格后，灌装，2ml/支，115℃灭菌30min.检漏、灯检、即得。
实施例四：含有原小檗碱型生物碱组合物的制剂的药效学试验
1、实验材料
1.1)动物
昆明种小白鼠10-16g，雌雄各半，由西安交通大学医学院实验动物中心提供。质量合格证号：陕医动证字：07-008。
豚鼠，♀♂各半，体重200-220g，西安交通大学医学院实验动物中心提供。质量合格证：陕医动证字08-123号。
新西兰品系大白兔，♀♂各半，体重1.8-2.2kg，质量合格证：陕医动证字08-18号。
1.2)药品：实施例一中的复方黄桂片，由西安新通药物研究有限公司提供，
批号：070625
规格：100mg/片(每片含黄连素100mg，桂皮醛10mg)。
用法用量：临床上60kg体重每日吃3次，每次3片。计算成人日用量为：900mg/60kg体重/24h＝15mg/kg体重/24h。
临用前用蒸馏水配制成10mg/ml的溶液。
生理盐水陕西省康乐制药厂批号：071116
心得安片(盐酸普萘洛尔)江苏常州制药厂批号：200710503
规格：10mg/片，临用前加入蒸馏水配成10mg/ml溶液
盐酸肾上腺素  武汉制药股份集团有限公司  批号：0701225
1mg/ml
氯仿、氯化钙、氯化钡均为分析纯，西安化学试剂厂
2、对氯仿所致小鼠室颤的影响
小鼠100只，♂♀各半，随机分为5组，每组20只，分别为：生理盐水组、心得安、复方黄桂片大剂量组、复方黄桂片中剂量组、复方黄桂片小剂量组，连续灌胃给药或生理盐水5天，末次给药1小时后，将小鼠放置在倒置的500ml烧杯中，烧杯内放有3ml氯仿的棉球，以后每换一只小鼠，再添加氯仿0.5ml，至呼吸停止，立即取出，开胸，肉眼观察心室颤动(VF)的发生率。试验结果进行统计学处理，结果见表1。
表1对氯仿所致小鼠室颤的影响

与生理盐水比较*P＜0.05  **P＜0.01
试验结果表明：阳性对照组(心得安)与复方黄桂片各剂量组相比均能显著对氯仿所致小鼠室颤有明显的抑制作用。(P＜0.01，P＜0.05)
3、复方原小檗碱对氯化钙诱发小鼠室颤的影响
小鼠60只，♂♀各半，随机分为5组，每组12只，分别为：生理盐水组、心得安、复方黄桂片大剂量组、复方黄桂片中剂量组、复方黄桂片小剂量组，连续灌胃给药或生理盐水5天，末次给药1小时后，分别尾静脉注射氯化钙130mg/kg，5s内注完，比较各组死亡数，实验结果进行统计学处理，结果见表2。
表2复方原小檗碱片对氯化钙诱发小鼠室颤的影响

与生理盐水比较*P＜0.05    **P＜0.01
实验结果表明：复方黄桂片大剂量、中剂量组对氯化钙引起的室颤具有明显的对抗作用(P＜0.05，P＜0.01)，大剂量组与心得安(20mg/kg)作用相当。
4、不同的复方原小檗碱对抗肾上腺素诱发的家兔心律失常作用
观察肾上腺素诱发豚鼠心率失常心电图。豚鼠64只，随机分为8组，生理盐水组、心得安溶液组、复方原小檗碱(小檗碱+原儿茶酸100mg+20mg)组、复方原小檗碱(小檗碱+肉桂酸100mg+6mg)组、复方原小檗碱(小檗碱型+阿魏酸100mg+6.25mg)组、复方原小檗碱(小檗碱+桂皮醛100mg+10mg)组、复方原小檗碱(小檗碱+丹参酸乙100mg+4mg)组。以上药物均以蒸馏水配制成10mg/ml，除生理盐水组外，心得安溶液组每次灌胃2ml/kg，其余各组每次灌胃1.5ml/kg。1次/d，共3次。
第3次灌胃1h后，20％乌拉坦5ml/kg腹腔麻醉。豚鼠四肢安插针状电极，电压1mV为10mm，纸速25mm/s。描记2:1导正常心电图。剪开豚鼠上肢皮肤，暴露静脉，快速注入肾上腺素，0.3ml/kg。立即描记心电图，记录时间分别为即时、15s、30s、1.5min、2min，此后每分钟记录1次，直至心律恢复正常。记录期前收缩和室速出现时间、心律失常持续时间，进行统计学处理。结果见表3。
表3不同的复方原小檗碱对抗肾上腺素诱发的家兔心律失常作用

与生理盐水组比较：*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001
实验结果表明：小檗碱组与肉桂酸组与生理盐水在推迟室早和室速发生的时间，以及心律失常持续时间相比较没有明显差异。不同的复方原小檗碱和阳性对照组(心得安)均能推迟室早和室速发生的时间，与生理盐水组比较有差异(P＜0.05)；均能明显缩短心律失常持续时间，与生理盐水组比较具有非常显著的差异(P＜0.001)，表明原小檗碱型生物碱与不同的酚酸类组合均有抗心律失常的作用，而且明显的高于小檗碱与肉桂酸。再次表明本发明的组合物具有增效协同的作用。
实施例五：含有原小檗碱型生物碱组合物的制剂的药代学试验
盐酸小檗碱标准品  中国药品生物制品检定所
批号：110713-200208
盐酸黄连素  上饶新星制药有限公司  规格：100mg
批号：20070604
实施例二中的复方黄魏片  由西安新通药物研究有限公司提供
规格：100mg  批号：070806
新西兰品系大白兔，♀♂各半，体重1.8-2.2kg，质量合格证：陕医动证字08-18号。
采用HPLC法测定复方黄魏片中以及盐酸黄连素中的小檗碱在家兔中的血浆药物浓度。具体的药代动力学参数见表4。
表4复方黄魏片以及盐酸黄连素中的小檗碱的药代动力学参数(n＝6，x±s)

结论：从表中可以看出，复方黄魏片(黄连素+阿魏酸)中小檗碱在家兔体内的吸收提前，单用小檗碱时候，小檗碱在体内的吸收有一个滞后时间(Lag time)，复方黄魏片中的小檗碱在体内几乎没有滞后时间。复方黄魏片及小檗碱单制剂口服均可吸收，且达到一定浓度，经t检验，Kα、T1/2(kα)、AUC有显著差别(P＜0.05)，说明小檗碱与酚酸类组合后，小檗碱的吸收比单用小檗碱的效果好。