雪莲果提取物及提取方法和应用.pdf

本发明是雪莲果提取物及提取方法和应用。按以下步骤制备：(1)取雪莲果，洗净或去皮，与保护剂按100∶1～100∶10混合，匀浆，过滤，滤渣用少量保护剂洗涤2～3次，合并滤液；(2)滤液浓缩或干燥，滤渣干燥；(3)取干燥的滤渣加入滤液浓缩液中或与滤液干燥物混合，得雪莲果提取物。保护剂为酸溶液或盐溶液或它们的混合液，或者为惰性气体。本发明所得雪莲果提取物具有改善胃肠道功能，即润肠通便的保健作用。雪莲果提取物中的果寡糖很少为人体吸收，可调理血液，清除高血脂，有效地控制胆固醇和糖尿病。雪莲果提取物对肠道的蠕动具有一定的增强作用，食量减少可以避免摄人过多的脂肪，增加肠道蠕动，增加大便的排出，有助于驱除脂浊，可抑制脂肪的吸收、积聚，促进脂肪的排泄，从而延缓体重的增加。

权利要求书
1、  一种雪莲果提取物的提取方法，其特征在于按以下步骤进行：
(1)取雪莲果，洗净或去皮，与保护剂按100∶1～100∶10混合，匀浆，过滤，滤渣用少量保护剂洗涤2～3次，合并滤液；
(2)滤液浓缩或干燥，滤渣干燥；
(3)取干燥的滤渣加入滤液浓缩液中或与滤液干燥物混合，得雪莲果提取物。

2、  根据权利要求1所述的雪莲果提取物的提取方法，其特征在于所述的保护剂为酸溶液或盐溶液或它们的混合液，或者为惰性气体。

3、  根据权利要求2所述的雪莲果提取物的提取方法，其特征在于所述的酸溶液为柠檬酸或苹果酸或山梨酸溶液，或它们的混合溶液，浓度为0.1％～10％。

4、  根据权利要求2所述的雪莲果提取物的提取方法，其特征在于所述的盐溶液可为氯化钠溶液，浓度为0.3％～10％。

5、  根据权利要求1所述的雪莲果提取物的提取方法，其特征在于所述的保护剂中加入抗氧化剂：维生素C、亚硫酸钠。

6、  根据权利要求1或2所述的雪莲果提取物的提取方法，其特征在于所述的惰性气体保护剂为氮气。

7、  一种权利要求1所述的雪莲果提取物的提取方法提取的雪莲果提取物。

8、  权利要求7所述的雪莲果提取物的应用，其特征在于雪莲果提取物用于制备肠道微生态调节剂，血脂、胆固醇控制剂和减肥和糖尿病人的膳食和营养助剂。

说明书雪莲果提取物及提取方法和应用
技术领域
本发明涉及食品技术领域，具体地说是从雪莲果中提取果浆原汁提取物的方法以及所提取物在食品及药物、保健品中的应用。
背景技术
雪莲果(菊薯)，为菊科向日属植物Smallanthus sonchifolius，原产于南美安第斯山，是当地印第安人的传统食根茎品，已有500年历史。雪莲果是菊科多年生草本植物，根茎外形像蕃薯，果肉吃起来，口感却很像水梨，汁多而晶莹剔透，甘甜爽脆。
雪莲果的果寡糖含量是干物质的60-70％，其含量是所有植物中最高的，还含有丰富的矿物质及钙、镁、铁、锌、钾、硒等微量元素。雪莲果碳水化合物(果寡糖)很少为人体吸收，因此很适合糖尿病人及减肥者食用，同时果寡糖还具有：①促进消化，调理胃肠道；②促生有益菌，产生双歧因子；③调理血液，清除高血脂，有效地控制胆固醇和糖尿病；④通便润肠；⑤降火清毒、防治面疱、暗疮；⑥提高免疫力的功能。
雪莲果1985年由日本琦玉县引种成功，近年来通过多种途径进入我国，目前已在云南、福建、海南、贵州、湖南、湖北、山东、河南、河北引种栽培成功。生产示范面积逾百万公顷，其产量供应过剩，又不易长时间保鲜和保存。故开发下游产品，提高果品副加值和产品功能，具有很好的市场前景。
但是，雪莲果的后续产品加工具有很大的技术障碍，其中最难突破的就是雪莲果被切开和去皮后，暴露在空气中就会变成褐色、黑色。变色的原因是由于果汁中所含的单宁和蒽醌类物质在酶的作用下，与空气中的氧作用，产生单宁和醌的多聚物，形成黑色素。这些物质的形成极大的降低了果品及其加工产品的外观色泽、口感风味和营养价值。
发明内容
本发明的目的在于克服现有雪莲果加工技术中存在的问题，提供一种雪莲果提取物及提取方法，以及提取物的应用。
本发明即是基于雪莲果产品加工的技术难题，通过物理、化学、生物学等多种方法，保证雪莲果后续加工中内含物的稳定，保持其果品原汁的风味和营养。通过本发明方法生产的雪莲果提取物及其加工产品应用于食品、保健品及制药上，具有极大的社会效益和经济收益前景。
本发明利用酶反应体系中pH值和离子浓度钝化酶生物活性的特点，结合阻断空气中氧气为主要来源的反应机理，对雪莲果加工工艺中单宁、蒽醌及SOD活化酶进行保护，防止果汁原液的变质变色，最大程度保持果品的原有风味和营养。本工艺加工制备的雪莲果提取物风味纯正、利于储存，可以单独或与其他物质组合应用于食品、保健食品和药物制备中，具有调节血脂、控制胆固醇；也可用于减肥和糖尿病人的膳食和营养助剂。
本发明的目的通过以下技术方案予以实现：
雪莲果提取物提取方法，包括以下步骤：
(1)取雪莲果，洗净(或去皮)，与保护剂按100∶1～100∶10混合，匀浆，过滤，滤渣用少量保护剂洗涤2～3次，合并滤液；
(2)滤液浓缩或干燥，滤渣干燥；
(3)取干燥的滤渣加入滤液浓缩液中或与滤液干燥物混合，得雪莲果提取物。
雪莲果提取物的应用：
取雪莲果提取物，加入食品或保健食品或药品中，或加入适当辅料助剂，制成食品、保健品或药品，制成现有的各种制剂，例如饮料(口服液、酊剂)、片剂、胶囊、冲剂(颗粒剂)或糕等。
本发明中的雪莲果提取物及其制剂可以用于具有肠道微生态调节剂；血脂、胆固醇控制剂；也可用于减肥和糖尿病人的膳食和营养助剂。
本发明中的保护剂为酸溶液或盐溶液或它们的混合液；本发明中的保护剂也可为惰性气体。酸溶液可为柠檬酸或苹果酸或山梨酸溶液或它们的混合溶液，浓度为0.1％～10％。盐溶液可为氯化钠(食盐)溶液，浓度为0.3％～10％。
本发明中的保护剂中也可加入一定比例的食品或药品中允许加入的抗氧化剂，例如维生素C、维生素E、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠等。
本发明中的最佳惰性气体保护剂为氮气；可以使其充满匀浆设备中，隔绝氧气与物料的接触。
本发明针对雪莲果产量大、不易贮藏，深加工过程中容易变质变色等缺陷，利用酶学反应机理，调节加工过程中物料的pH值和离子浓度，阻止副反应的发生；或者利用化学反应原理，阻断氧化剂(氧气)来源从而保护物料的质地和本来风味。该方法简便、经济，所得雪莲果提取物具有改善胃肠道功能，即润肠通便的保健作用。雪莲果提取物中的果寡糖很少为人体吸收，可调理血液，清除高血脂，有效地控制胆固醇和糖尿病。雪莲果提取物对肠道的蠕动具有一定的增强作用，食量减少可以避免摄人过多的脂肪，增加肠道蠕动，增加大便的排出，有助于驱除脂浊，可抑制脂肪的吸收、积聚，促进脂肪的排泄，从而延缓体重的增加。
雪莲果提取物应用于食品、保健食品和药品，具有良好的市场前景和社会效益。
雪莲果提取物功能活性试验如下：
一、促进胃肠道消化功能
1实验材料
雪莲果提取物、昆明种小鼠100只(雌雄各半，体重18-22g)、十万分之一精密天平、扭力天平、带隔层小鼠喂养笼具、复方地酚若脂片、印度墨汁。
2实验方法
2.1动物分组60只小鼠随机分成阳性对照组、阴性对照组、雪莲果提取物低、中、高剂量组，每组20只，每10只分笼喂养。高、中、低剂量组：其对动物试验用量为人体推荐用量的10、5、2.5倍。阳性对照组：给服阳性对照材料为复方地酚若脂片。阴性对照组：给服阴性材料即蒸馏水。
2.2将上述3个试验剂量组的实验动物按量经口灌胃，每日给予受试动物一次，连续进行15天。试验至第16天时，先用预先分开的一半(10只)小白鼠，进行小肠推进试验。试验至第17天时，用剩余的另一半(10只)小白鼠进行排便试验。阳性与阴性对照组动物实验方法与实验组相同。
2.3小鼠小肠推进试验方法
按上述试验方法，试验进行至第15天时，对实验小鼠隔夜进食12h。至次日早晨时，对5组动物均分别按量给予不同的受试物一次。20min后以复方地酮若脂片50mg/kg·bw的剂量按小鼠(只)0.1mL/10g体重容量灌胃至4个动物组(阴性对照组除外)上述试验间隔10min后，再以墨汁按小鼠(只)0.1mL/10g·bw对5组动物全部经口灌胃一次。墨汁灌胃20min后，依次处死试验动物并剖腹，取出小鼠的胃及回盲部位的整段小肠将小肠平铺在玻璃板上(预先已在其上滴加生理盐水)。测量自幽门至墨汁推进前沿的距离视作墨汁推进距离，并记录计算各组动物墨汁推进率。
2.4小鼠排便实验方法
试验进行至16天，将墨汁推进试验外特意留用的另一半试验小鼠隔夜禁食12h。第二天早晨，对3个试验组及2个对照组分别按要求给试物一次。20min后以复方地酚若脂片50mg/kg·bw按试验小鼠0.1mL/10g体重容量给4组实验动物(不包括阴性对照组)灌胃一次。灌胃处理后，将每只试验小动物单独放入带隔层的小鼠笼(笼底应铺上吸水纸)内，分别观察统计每只小鼠第一次排出带墨汁粪便(黑便)的时间，并称量记录这些试验小鼠在24h时的总排便量。
3结果
3.1小鼠小肠墨汁推进的试验
雪莲果提取物各剂量组的小鼠小肠墨汁推进率均明显高于复方地酚若脂的阳性对照组和阴性对照(蒸馏水)组，其差异均有高度的显著性(P＜0.01)。

3.2小鼠排便试验
雪莲果提取物各剂量组首次排便时间均较阳性对照组短，其中高剂量组与阳性对照组间的差异有高度的显著性；中、低剂量组与阳性对照组间的差异有显著性；而阴性对照组与阳性对照组之间的差异与高剂量组一样，具有高度的显著性。

表中雪莲果提取物高、中剂量组小鼠24h排便总量均大于阳性对照组，其差异均有显著性。雪莲果提取物低剂量组24h排便总量与阳性对照组间差异无显著性。阴性对照组小鼠
24h排便总量与阳性对照组间差异具有高度显著性。

4.讨论
由试验结果而知，雪莲果提取物能明显的促进小鼠小肠墨汁推进率，并能明显地提高致便秘小鼠的首次排便时间与24h排便总量，雪莲果提取物可初步判断具有改善胃肠道功能，即润肠通便的保健作用。
二、对血脂、胆固醇和血糖的调节作用
1.实验材料
正常SD大鼠50只，雌雄不限，体量160～210g。STZ，雪莲果提取物，甲糖宁。TG L15型低温冷冻离心机、HHS11-2B型恒温水浴锅、70A0型全自动生化分析仪、One Touch II型血糖仪。
2.实验方法
2.12型DM大鼠模型的制备
将大鼠随机分正常对照组、DM模型组、雪莲果提取物对照组、雪莲果提取物治疗组及药物治疗组。每组10只；正常对照组和雪莲果提取物对照组喂以基础饲料(总热量15kJ/g)；其余各组大鼠给予高糖、高脂、高能量饮食(总热量约20kJ/g)，配比：基础饲料+蔗糖+炼猪油+奶粉＝6.5+0.5+2.5+0.5，喂养4周后，禁食20h腹腔一次性注射STZ 30mg/kg。于注射STZ 1周后，每组禁食20h断尾取血进行葡萄糖耐量实验(OGTT)，并测空腹血糖(FBG)和空腹血浆胰岛素(FINS)。要求将FBG≥7.8mmol/L或糖耐量异常(2h血糖≥11∶1mmol/L)以及胰岛素敏感指数(ISI＝n(FINSFBG)-1)下降者认为是2型DIM模型，以确定除正常组外的各组造模成功。
2.2动物分组及处理方法
造模后，各组大鼠均予相应药液1mL灌胃，每天1次。正常对照组与DM模型组每天1次给予蒸馏水灌胃；雪莲果提取物治疗组予雪莲果提取物溶于蒸馏水制成的80g/L溶液，雪莲果提取物对照组给予雪莲果提取物80g/L水溶液灌胃，甲糖宁治疗组予甲糖宁50mg。
2.3观察项目
于STZ注射后第1，3，5，7，9，11周末，大鼠尾静脉取血，经离心取血清，采用全自动生化分析仪测定血糖、血清胆固醇、血清三酰甘油(TG)的含量。
3.结果
3.1注射STZ 1周后糖代谢变化
注射STZ 1周后糖尿病模型组、雪莲果提取物治疗组及药物治疗组比雪莲果提取物对照组和正常空白组出现体质量超常(P均＜0.05)，血清胰岛素升高(P均＜0.01)，胰岛素敏感指数下降(P均＜0.01)，具有2型DM多饮、多尿、多食的症状，表明模型建立成功。
3.2对DM大鼠血糖的影响
DM模型建立后，各造模组血糖显著高于正常对照组(P均＜0.01)，雪莲果提取物治疗组治疗后，血糖较DM模型组明显降(P＜0.05)，随着时间的延迟降低更显著(P＜0.01)，而雪莲果提取物治疗组与甲糖宁组比较无明显差异，降糖作用效果接近(P＞0.05)，雪莲果提取物对照组对正常大鼠作用不明显。
3.3雪莲果提取物对DIM大鼠血清胆固醇的影响
STZ造模后各空白组无显著性差异(P＞0.05)；雪莲果提取物治疗组治疗后血清胆造模组血清胆固醇显著高于正常对照组及雪莲果提取物对照组(P＜0.05或0.01)。而雪莲果提取物对照组血清胆固醇在实验期内与正常固醇含量明显低于模型组(P＜0.01)，与甲糖宁组比较无显著性差异，降血清胆固醇作用效果接近(P＞0.05)。
3.4雪莲果提取物对DM大鼠血清TG含量的影响
造模后各造模组血清TG显著高于正常对照组及雪莲果提取物对照组(P＜0.05或0.01).而雪莲果提取物对照组血清TG在观察期内与正常空白组无差异(P＞0.05)；雪莲果提取物治疗组治疗后血清TG含量明显低于模型组(P＜0.01)，与甲糖宁组比较无明显差异，降血清TG作用效果接近(P＞0.05)。
4.讨论
雪莲果提取物中的果寡糖很少为人体吸收，可调理血液，清除高血脂，有效地控制胆固醇和糖尿病。
三、减肥作用
1.实验材料
昆明种小鼠，雌雄各半，体重18-22g；胆固醇试剂盒和甘油三酯试剂盒；ACS-6EAS型电子称；电热恒温水浴箱；HIMAC低温超速离心机；721分光光度仪。
2.实验方法
2.1动物分组60只小鼠随机分成正常对照、模型对照、阳性对照、雪莲果提取物低、中、高剂量组，每组10只。
2.2模型制作与给药模型组：小鼠喂高脂饲料。配方：10％猪油，10％蛋黄粉，80％普通饲料混匀。第1、2周每只小鼠13舀/天，以后每周增加2g；空白对照组：蒸馏水灌胃，2ml/天；阳性对照组：奥利司他灌胃，60mg/(kg·d)；雪莲果提取物低、中、高剂量组：分别以100mg/(kg·d)、200mg/(kg·d)、400mg/(kg·d)减肥方浓缩液灌胃，连续40天。
2.3观察指标及方法：①一般情况观察：活动程度，体毛色泽、体形、饮食、饮水及粪便状况；②生长指标检测：包括体重、肥胖指数(Lee’S指数)[Lee’S指数＝体重(g)1/3×103/体长(c1n)]；③脂肪指标检测：体脂重量(剖取小鼠生殖器周围全部脂肪，称其重量)；脂肪系数(即脂/体比，体脂重量/体重)；血脂测定(总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白)，方法及步骤按照试剂盒要求操作；④脂肪组织观察：脂肪组织石蜡切片HE染色，每张切片中任选10个脂肪细胞，在400倍显微镜下用目镜测微器测每个脂肪细胞的大小，取平均值；⑤统计学方法：数据用(X±S)表示，两组样本比较用t检验，多组间比较采用方差分析。
3.实验结果
3.1一般情况
六组小鼠的体毛色泽均无变化。模型对照组食欲增强，体形变圆，活动较正常对照组迟钝，大便略有增加；阳性对照组和减肥方高、中、低剂量组小鼠与模型对照组比较，进食量较少，活动较灵活，大便量明显增多；阳性对照组小鼠大便偏稀，雪莲果提取物高、中、低剂量组小鼠无腹泻现象。
3.2体重变化实验
各组初始体重差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗结束时，模型对照组与正常对照组比较，体重显著升高；阳性对照组、雪莲果提取物高、中、低剂量组与模型对照组比较，体重显著降低。
3.3Lee’S指数变化模型
对照组与正常对照组比较，Lee’S指数显著升高；阳性对照组、雪莲果提取物高、中、低剂量与模型对照组比较，Lee’S指数显著降低。
3.4体脂重量和体脂系数变化
模型对照组与正常对照组比较，体脂重量和体脂系数显著升高；阳性对照组、雪莲果提取物高、中、低剂量组与模型对照组比较，Lee’S指数显著降低。
3.5血脂含量变化模型
对照组与正常对照组比较，胆固醇、甘油三酯含量显著增高；阳性对照组、雪莲果提取物高、中、低剂量组与模型对照组比较，胆固醇、甘油三酯含量显著降低。
3.6脂肪细胞大小变化
模型对照组与正常对照组比较，脂肪细胞显著增大；阳性对照组与雪莲果提取物高、中、低剂量组比较，脂肪细胞显著缩小。
4.讨论
雪莲果提取物对肠道的蠕动具有一定的增强作用，食量减少可以避免摄人过多的脂肪，增加肠道蠕动，增加大便的排出，有助于驱除脂浊。生长指标结果提示减肥方具有抑制小鼠体重增加作用，脂肪指标结果提示雪莲果提取物可抑制脂肪的吸收、积聚，促进脂肪的排泄，从而延缓体重的增加。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明作进一步的详细说明，但不是对本发明的限定。
实施例1：
取雪莲果10公斤，洗净，加入5％柠檬酸溶液1公斤，粉碎匀浆，过滤，滤渣用0.5公斤柠檬酸液洗涤2次，合并滤液；滤渣于80℃烘干，滤液冷冻干燥，合并滤渣干粉与滤液提取物干粉，粉碎，过40目筛，得雪莲果提取物粉；取该粉300g，加入淀粉粉800g、乳糖粉300g、山梨醇100g，混匀，制粒，干燥，整粒，与20g硬脂酸镁混匀，压片，制成3000片。
实施例2：
取雪莲果10公斤，洗净，加入10％食盐溶液0.4公斤，粉碎匀浆，过滤；滤液于50℃减压浓缩至3公斤，加入1公斤蜂蜜，50g苹果酸，30g维生素C，山梨酸30g，混匀，灌封，每支10ml，共制成口服液420支。
实施例3：
取雪莲果10公斤，洗净，加入0.3％食盐溶液0.3公斤、0.1％柠檬酸溶液0.5公斤，30g维生素C，粉碎匀浆；匀浆物于80℃干燥，粉碎，过40目筛，得雪莲果提取物粉；取该粉200g，填装胶囊，制成400粒。
实施例4：
取留有三个孔径适中的物料桶1只，一个孔中插入氮气管至桶底，一个孔接连接匀浆机匀浆液出口，通入氮气，把空气从桶顶端孔排出(生产中控制氮气流量，勿使空气倒流入桶)；取洗净的雪莲果10公斤，匀浆粉碎；匀浆物冷冻干燥，粉碎，过40目筛，得雪莲果提取物粉；取该粉300g，加入蔗糖粉530g、乳糖粉100g、山梨醇50g，混匀，制粒，干燥，整粒，与20g硬脂酸镁混匀，压片，制成2000片口含片。
实施例5：
取洗净的雪莲果10公斤，加入2.4％亚硫酸钠溶液0.1公斤匀浆粉碎；匀浆物冷冻干燥，粉碎，过40目筛，得雪莲果提取物粉；取该粉300g，加入蔗糖粉530g、乳糖粉100g、山梨醇50g，混匀，制粒，干燥，整粒，与20g硬脂酸镁混匀，压片，制成2000片口含片。