《一种提取花青素的方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种提取花青素的方法.pdf（14页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。
1、(10)申请公布号 CN 103145681 A (43)申请公布日 2013.06.12 CN 103145681 A *CN103145681A* (21)申请号 201310082784.2 (22)申请日 2013.03.15 C07D 311/62(2006.01) C09B 61/00(2006.01) (71)申请人 中国农业科学院农产品加工研究所 地址 100193 北京市海淀区圆明园西路 2 号 (72)发明人 木泰华 刘兴丽 孙红男 张苗 陈井旺 (74)专利代理机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 代理人 关畅 (54) 发明名称 一种提取花青素的方法 (57。
2、) 摘要 本发明公开了一种提取花青素的方法。该方 法包括 ： 1) 将含花青素的原料、 分相盐、 去离子水 和亲水性有机溶剂混匀避光进行双水相提取， 收 集上相提取液 ； 2) 将步骤 1) 所得上相提取液浓 缩， 得到花青素粗提液 ； 3) 将步骤 2) 所得花青素 的粗提液过大孔树脂柱进行吸附， 吸附饱和后用 水清洗所述大孔树脂， 除杂直至水洗液为无色， 再 用洗脱液进行洗脱， 收集洗脱液， 干燥， 得到所述 花青素。该方法所得紫甘薯花青素符合紫甘薯色 素标准， 食用安全可靠， 开发了一种新型、 温和、 易 于产业化的花青素提取方法， 并且增加了大孔树 脂循环使用次数， 提高了生产效率与紫。
3、甘薯花青 素的提取率， 降低了花青素的生产成本。 (51)Int.Cl. 权利要求书 2 页 说明书 7 页 附图 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书2页 说明书7页 附图4页 (10)申请公布号 CN 103145681 A CN 103145681 A *CN103145681A* 1/2 页 2 1. 一种提取花青素的方法， 包括如下步骤 ： 1) 将含花青素的原料、 分相盐、 去离子水和亲水性有机溶剂混匀避光进行双水相提取， 收集上相提取液 ； 2) 将步骤 1) 所得上相提取液浓缩， 得到花青素的粗提液 ； 3) 将步骤 2) 所得花青素的。
4、粗提液过大孔树脂柱进行吸附， 吸附饱和后用水清洗所述 大孔树脂， 除杂直至水洗液为无色， 再用洗脱液进行洗脱， 收集洗脱液， 干燥， 得到所述花青 素。 2. 根据权利要求 1 所述的方法， 其特征在于 ： 所述步骤 1) 中， 所述含花青素的原料选 自紫甘薯、 紫玉米、 紫马铃薯、 紫甘蓝、 蓝莓和葡萄中的至少一种 ； 或， 所述含花青素的原料的目数为 40-100 目 ； 或， 所述分相盐选自硫酸铵、 硫酸镁、 硫酸钾、 磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的至少一种 ； 或， 所述亲水性有机溶剂选自乙醇、 丙酮和甲醇中的至少一种。 3. 根据权利要求 1 或 2 所述的方法， 其特征在于 ： 所述步骤。
5、 1) 双水相中， 分相盐、 去离 子水和亲水性有机溶剂的质量比为 18-22 51-61 21-27， 具体为 20 55 25 ； 或， 所述含花青素的原料与双水相的用量比为 1g 10mL-100mL， 具体为 1g 40mL。 4. 根据权利要求 1-3 任一所述的方法， 其特征在于 ： 所述双水相提取步骤中， 离心转速 为 3000g/min-7000g/min， 具体为 5000g/min ； 或， 温度为 20-60， 具体为 25 ； 或， 时间为 20-100 分钟， 具体为 60 分钟 ； 或， pH 值为 1-5， 具体为 3。 5. 根据权利要求 1-4 任一所述的方法。
6、， 其特征在于 ： 所述步骤 2) 中， 花青素的粗提液 的固含量为 1 -20， 具体为 20 ； 或， 所述浓缩步骤中， 温度为 40 -60， 具体为 45。 6. 根据权利要求 1-5 任一所述的方法， 其特征在于 ： 所述步骤 3) 中， 所述大孔树脂的 型号为 AB-8、 NKA-2、 NKA-9、 X-5、 X-8 或 D101。 7. 根据权利要求 1-6 任一所述的方法， 其特征在于 ： 所述步骤 3) 中， 大孔树脂柱的高 度为 20cm-100cm， 具体为 30cm ； 或， 直径为 1cm-4cm， 具体为 3cm。 8. 根据权利要求 1-7 任一所述的方法， 其特。
7、征在于 ： 所述步骤 3) 吸附步骤中， 吸附温 度为 4 -25 ； 或， 花青素的粗提液的流速为 0.5mL/min-3.0mL/min， 具体为 1.0mL/min ； 或， 所述大孔树脂柱中填充的大孔树脂与花青素的粗提液的用量比为 0.01g-1.0g 1mL， 具体为 0.05g 1mL ； 或， 花青素的粗提液的 pH 值为 1-4， 具体为 3。 9. 根据权利要求 1-8 任一所述的方法， 其特征在于 ： 所述步骤 3) 洗脱步骤中， 洗脱液 为质量百分浓度为 50-90的乙醇水溶液， 具体为 70的乙醇水溶液 ； 或， 洗脱温度为 4 -25， 具体为 4 ； 或， 洗脱液的。
8、流速为 0.5mL/min-3.0mL/min， 具体为 1.0mL/min ； 或， 洗脱液的 pH 值为 1-4， 具体为 3 ； 或， 权 利 要 求 书 CN 103145681 A 2 2/2 页 3 所 述 大 孔 树 脂 柱 中 填 充 的 大 孔 树 脂 的 质 量 与 所 述 洗 脱 液 的 用 量 比 为 100g 200-800mL， 具体为 100g 400mL。 10. 根据权利要求 1-9 任一所述的方法， 其特征在于 ： 所述步骤 3) 干燥步骤中， 干燥方 法为喷雾干燥、 真空干燥或冷冻干燥。 权 利 要 求 书 CN 103145681 A 3 1/7 页 4。
9、 一种提取花青素的方法 技术领域 0001 本发明涉及一种提取花青素的方法。 背景技术 0002 近年来， 由于合成色素的致突变、 致畸和致癌等危害性， 天然色素作为安全的食用 色素日益受到人们的青睐。花青素 (anthocyanins) 是一类广泛存在于植物中的水溶性天 然色素， 属类黄酮化合物， 因其具有较高的安全性， 大多数国家 ( 如中国、 日本、 美国、 欧共 体 ) 都允许将其作为食品着色剂， 美国 FDA 还将其列入无须食品添加剂许可证的着色剂。 0003 20 世纪 80 年代我国开始引进紫甘薯品种， 之后培育出适合我国栽培的新品种， 如 紫薯 135、 烟紫 337， 烟紫 。
10、176、 徐薯 4 号、 京薯 16 号、 渝紫 1 号、 群紫 1 号等。目前我国东北、 河北、 山东、 江苏、 广西、 广东等省都有大面积种植。紫甘薯中含有大量的花青素， 其主要成 分为多种单酰化和双酰化的矢车菊色素和芍药色素。 紫甘薯花青素具有较好的光热稳定性 及抗氧化活性， 并具有提高免疫力、 视力和保护肝功能等生理功能， 在食品、 化工、 化妆品及 医药行业均具有较高的应用价值。 发明内容 0004 本发明的目的是提供一种提取花青素的方法。 0005 本发明提供的提取花青素的方法， 包括如下步骤 ： 0006 1) 将含花青素的原料、 分相盐、 去离子水和亲水性有机溶剂混匀避光进行双。
11、水相 提取， 收集上相提取液 ； 0007 2) 将步骤 1) 所得上相提取液浓缩， 得到花青素的粗提液 ； 0008 3) 将步骤 2) 所得花青素的粗提液过大孔树脂柱进行吸附， 吸附饱和后用水清洗 所述大孔树脂， 除杂直至水洗液为无色， 再用洗脱液进行洗脱， 收集洗脱液， 干燥， 得到所述 花青素。 0009 上述方法的步骤 1) 中， 所述含花青素的原料选自紫甘薯、 紫玉米、 紫马铃薯、 紫甘 蓝、 蓝莓和葡萄中的至少一种， 具体可为紫甘薯粉 ； 该紫甘薯粉可按照如下步骤制备而得 ： 将紫甘薯清洗、 切片、 干燥、 粉碎而得 ； 0010 所述含花青素的原料的目数为 40-100 目 ；。
12、 0011 所述分相盐选自硫酸铵、 硫酸镁、 硫酸钾、 磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的至少一种 ； 0012 所述亲水性有机溶剂选自乙醇、 丙酮和甲醇中的至少一种。 0013 双 水 相 中 分 相 盐、去 离 子 水 和 亲 水 性 有 机 溶 剂 的 质 量 比 为 18-22 51-61 21-27， 具体为 20 55 25 ； 0014 所 述 含 花 青 素 的 原 料 与 双 水 相 体 系 的 比 例 为 1g 10mL-100mL， 具 体 为 1g 40mL ； 0015 所述双水相提取步骤中， 离心转速为 3000g/min-7000g/min， 具体为 5000g/min ；。
13、 温度为 20-60， 具体为 25， 时间为 20-100 分钟， 具体为 60 分钟 ； pH 值为 1-5， 具体为 3。 说 明 书 CN 103145681 A 4 2/7 页 5 0016 所述步骤 2) 中， 花青素的粗提液的固含量 ( 也即固形物的质量百分含量 ) 为 1-20， 具体为 20 ； 0017 所述浓缩步骤中， 温度为 40-60， 具体为 45。所用方法可为旋转蒸发 ； 0018 所述步骤 3) 中， 所述大孔树脂的型号为 AB-8、 NKA-2、 NKA-9、 X-5、 X-8 或 D101 ； 0019 吸附步骤中， 大孔树脂柱的高度为 20cm-100cm。
14、， 具体为 30cm ； 0020 直径为 1cm-4cm， 具体为 3cm ； 0021 吸附温度为 4 -25， 具体为 4 ； 0022 花青素的粗提液的流速为 0.5mL/min-3.0mL/min， 具体为 1.0mL/min ； 0023 所 述 大 孔 树 脂 柱 中 填 充 的 大 孔 树 脂 与 花 青 素 的 粗 提 液 的 比 例 为 0.01g-1.0g 1mL， 具体为 0.05g 1mL ； 0024 花青素的粗提液的 pH 值为 1-4， 具体为 3。 0025 洗脱步骤中， 洗脱液为质量百分浓度为 50-90的乙醇水溶液， 具体为 70的乙 醇水溶液 ； 002。
15、6 洗脱温度为 4 -25， 具体为 4 ； 0027 洗脱液的流速为 0.5mL/min-3.0mL/min， 具体为 1.0mL/min ； 0028 洗脱液的 pH 值为 1-4， 具体为 3 ； 0029 所 述 大 孔 树 脂 柱 中 填 充 的 大 孔 树 脂 的 质 量 与 所 述 洗 脱 液 的 比 例 为 100g 200-800mL， 具体为 100g 400mL。 0030 干燥步骤中， 干燥方法为喷雾干燥、 真空干燥或冷冻干燥， 应使其水分含量控制在 10以下。 0031 本发明克服了现有方法存在的有机溶剂用量大、 提取温度高、 时间长、 花青素纯度 低等缺陷， 提供一。
16、种提取花青素的新方法。该方法以紫甘薯为原料， 经干燥粉碎得紫甘薯 粉， 然后利用双水相提取紫甘薯花青素， 具有以下优点 ： 0032 1、 本方法与传统溶剂提取法的提取率相似， 但所需有机溶剂较少， 分离较快， 在室 温下即可进行提取， 提取条件温和、 时间短、 能耗较低、 纯度高和杂质少 ； 0033 2、 紫甘薯花青素中蛋白质和总糖含量降低了 30以上， 有利于进一步分离纯化、 生产高品质花青素 ； 0034 3、 双水相提取属于液 - 液提取的一种， 只需要液 - 液提取法所涉及的混合、 搅拌、 分离等装置， 无需增加新设备， 易于产业化。 附图说明 0035 图 1 为紫甘薯花青素双水。
17、相体系在试管中的状态。 0036 图 2 为苯酚 - 硫酸法测定上相、 下相总糖含量时葡萄糖的标准曲线。 0037 图 3 为提取过程中硫酸铵质量分数对紫甘薯花青素提取率和回收率的影响。 0038 图 4 为提取过程中硫酸铵质量分数对花青素、 蛋白质和总糖分配系数的影响。 0039 图 5 为大孔树脂对花青素的动态解析曲线。 0040 图 6 为冷冻干燥所得紫甘薯花青素。 0041 图 7 为实施例 5 所得产物的全光谱扫描谱图。 说 明 书 CN 103145681 A 5 3/7 页 6 具体实施方式 0042 下面通过具体实施例对本发明的方法进行说明， 但本发明并不局限于此。 0043 。
18、下述实施例中所述实验方法， 如无特殊说明， 均为常规方法 ； 所述试剂和材料， 如 无特殊说明， 均可从商业途径获得。 0044 下述实施例中所用的紫甘薯品种为 “烟176” ， 购自河北省农林科学院。 所用大孔树 脂柱均购自 SOLARBIO 公司， 型号为 AB-8 型号， 平均孔径为 0.3-1.25mm， 比表面积为 480m2/ g， 比照吸附量为 55mg/g 酚占干基。该大孔树脂柱的高度为 30cm， 直径为 3cm。 0045 实施例 1、 双水相提取步骤中硫酸铵用量 0046 分别取 1.8、 1.9、 2.0、 2.1、 2.2g 无水硫酸铵加入一定质量 pH 值 3.0 。
19、的去离子水配 成质量为 7.5g 的硫酸铵溶液， 此硫酸铵溶液与 2.5g 无水乙醇混合 ( 硫酸铵的质量分数分 别为18、 19、 20、 21和22)， 加入0.5g100目的紫甘薯粉， 充分搅拌均匀， 形成双水 相体系， 室温下避光提取 1h 后， 按照如下公式计算紫甘薯花青素的提取率、 回收率、 分配系 数和蛋白质、 总糖的分配系数。 0047 花青素提取率 (Y) Ct1Vt/M总 0048 回收率 (R) Ct1Vt/(Ct1Vt+Cb1Vb) 0049 花青素分配系数 (K1) Ct1/Cb1 0050 蛋白质分配系数 (K2) Ct2/Cb2 0051 总糖分配系数的测定方法为。
20、苯酚 - 硫酸法， 总糖以葡萄糖为标准计， 所用标准曲 线如图 2 所示， 计算公式如下 ： 0052 总糖分配系数 (K3) Ct3/Cb3 0053 上述公式中， t1， Cb1为上相和下相花青素的浓度 (mg/ml) ； 0054 Ct2， Cb2为上相和下相蛋白质的浓度 (mg/ml) ； 0055 Ct3， Cb3为上相和下相总糖的浓度 (mg/ml) ； 0056 Vt， Vb为上相和下相的体积 ； 0057 M 总为总的花青素的含量 ； 0058 所得结果分别如图 3 和图 4 所示。对于同一质量分数的乙醇， 花青素提取率 (Y) 和回收率 (R) 均随着硫酸铵质量分数的增大而增。
21、大 ； 但是， 当硫酸铵质量分数大于为 21 时， 花青素提取率(Y)、 回收率(R)和分配系数(K)变化不明显， 并且花青素分配系数(K)可 达到12， 提取率(Y)可达到70以上， 这是因为乙醇的质量分数相同时， 硫酸铵的质量分数 增大， 分相能力也增大， 上相中乙醇的质量分数也就随之增加， 而花青素在乙醇中的溶解度 比水大， 故花青素提取率 (Y)、 回收率 (R) 和分配系数 (K) 也随之增加。从图 4 中可以看出 60的总糖和 40的蛋白质分配在下相， 减少了上相即花青素中的蛋白质和总糖的含量。 因而， 双水相提取步骤中硫酸铵的质量百分含量选 20为宜。 0059 实施例 2、 p。
22、H 值对大孔树脂静态吸附率的影响 0060 1) 取 2.0g 硫酸铵加入 5.5g pH 值为 3.0 的去离子水配成硫酸铵溶液后， 与 2.5g 无水乙醇混合， 加入到0.5g100目的紫甘薯粉(其中花青素的质量百分含量为0.31)中， 充分搅拌均匀， 形成双水相体系， 室温下避光进行双水相提取 1h， 在转速为 5000g/min 的条 件下离心 20min 后， 分液漏斗分相， 收集上相提取液， 如图 1 所示 ； 0061 由图可知， 上相和下相分界清晰， 上相颜色较深， 而下相颜色较浅， 说明花青素较 说 明 书 CN 103145681 A 6 4/7 页 7 好的分配在上相。 。
23、0062 2) 将步骤 1) 所得上相提取液用旋转蒸发的方式， 温度为 45， 转速为 55r/min 浓 缩至固含量为 20， 得到花青素的粗提液 ； 0063 3) 将步骤 2) 所得花青素的粗提液 1500mL 过 AB-8 型大孔树脂柱 ( 含大孔树脂 75g)于4进行吸附， 粗提液的进样流速为1.0mL/min， pH值分别调节为1.0、 2.0、 3.0、 4.0， 吸附饱和， 期间每隔20min取样， 测定花青素溶液的吸光度A， 计算吸附率， 结果如表1所示。 0064 吸附率 (A0-A终)/A0 0065 式中 A0： 花青素溶液在吸附前的吸光度 ； 0066 A终： 吸附完。
24、全后的吸光度。 0067 表 1、 紫甘薯花青素在不同 pH 值的吸附率 0068 0069 由表 1 可知， 花青素的粗提液的 pH 值在 1-3 范围内时， 树脂的吸附率随酸度变化 差异不显著 (p 0.05)， 与 pH 值为 4 时存在显著性差异， 因此， 实验中花青素的粗提液的 pH 值调节为 3。 0070 实施例 3、 AB-8 型大孔树脂循环使用次数对花青素的回收率的影响 0071 将实施例 2 步骤 2) 所得花青素的粗提液 1500mL 过 AB-8 型大孔树脂柱 ( 含大孔 树脂 75g) 于 4进行吸附， 粗提液的进样流速为 1.0mL/min， pH 值为 3.0， 。
25、吸附饱和后用水 清洗所述大孔树脂， 除杂直至水洗液为无色， 再用pH值为3.0、 质量百分浓度为70的乙醇 水溶液作为洗脱液进行洗脱， 洗脱液流速为 1.0mL/min 收集洗脱液。此为循环 1 次 ； 对大孔 树脂进行水洗， 直至无乙醇流出。 0072 然后重复以上步骤， 按照如下公式计算回收率 ： 0073 花青素的回收率洗脱液中矢车菊素 -3- 葡萄糖苷含量 / 粗提液矢车菊素 -3- 葡 萄糖苷含量 100， 0074 所得结果见表 2。 0075 表 2、 AB-8 大孔树脂循环使用次数对花青素的回收率的影响 0076 0077 由表 2 可知， 循环使用次数在 7 次以内对花青素的。
26、回收率影响不大。 0078 实施例 4、 紫甘薯花青素溶液的动态解吸 0079 将实施例 2 步骤 2) 所得花青素的粗提液 1500mL 过 AB-8 型大孔树脂柱 ( 含大孔 树脂 75g) 于 4进行吸附， 粗提液的进样流速为 1.0mL/min， pH 值为 3.0， 吸附饱和后用水 清洗所述大孔树脂， 除杂直至水洗液为无色， 再用pH值为3.0、 质量百分浓度为70的乙醇 水溶液作为洗脱液进行洗脱， 洗脱液流速为1.0mL/min收集洗脱液， 动态解吸曲线如图5所 示。 0080 由图可知， 在解吸过程中当解吸液体积到达 70mL 时解吸液的吸光度最高， 达到 说 明 书 CN 10。
27、3145681 A 7 5/7 页 8 150mL 时大部分花青素被解吸下来。 0081 实施例 5、 紫甘薯花青素矢车菊素 -3- 葡萄糖苷的提取 0082 1) 取 2.0g 硫酸铵加入 5.5g pH 值为 3.0 的去离子水配成硫酸铵溶液后， 与 2.5g 无水乙醇混合， 加入到0.5g100目的紫甘薯粉(其中花青素的质量百分含量为0.31)中， 充分搅拌均匀， 形成双水相体系， 室温下避光进行双水相提取 1h， 在转速为 5000g/min 的条 件下离心 20min 后， 分液漏斗分相， 收集上相提取液。 0083 2) 将步骤 1) 所得上相提取液用旋转蒸发的方式， 温度为 45。
28、， 转速为 55r/min 浓 缩至固含量为 20， 得到花青素的粗提液 ； 0084 3) 将步骤 2) 所得花青素的粗提液 1500mL 过 AB-8 型大孔树脂柱 ( 含大孔树脂 75g) 于 4进行吸附， 粗提液的进样流速为 1.0mL/min， pH 值为 3.0， 吸附饱和后用水清洗 大孔树脂， 除杂直至水洗液为无色， 再用pH值为3.0、 质量百分浓度为70的乙醇水溶液作 为洗脱液进行洗脱， 洗脱液流速为 1.0mL/min 收集洗脱液， 将洗脱液旋转蒸发除去乙醇 ； 用 冷冻干燥的方法， 温度为 -45， 真空度为 10Pa， 时间为 24h 进行干燥， 得到最终产物， 实物 。
29、照片如图 6 所示。由图可知， 所得花青素为紫红色， 色泽均一。 0085 称取上述所得花青素 1g， 溶于 100mL 去离子水中， 进行全光谱扫描， 全光谱扫描， 所得结果如图 7 所示。 0086 由上可知， 该产物在300nm和520nm有两个吸收峰， 520nm是花青素的特征吸收峰， 300nm有吸收峰说明该花青素结构是被酰基化的。 由此可知， 该产物结构正确， 为花青素， 矢 车菊素 -3- 葡萄糖苷的含量为 2.97。 0087 紫甘薯花青素的提取率为 91.02， 分配系数为 19.62 ； 0088 步骤 2) 花青素的粗提液中， 紫甘薯花青素的色价为 8.07 ； 0089。
30、 步骤 3) 紫甘薯花青素纯品的色价为 25.4。 0090 按照下述方法对所得花青素中的矢车菊素 -3- 葡萄糖苷、 色价、 pH 值、 铅、 砷的含 量进行测定 ： 0091 1、 矢车菊素 -3- 葡萄糖苷含量测定 ： 准确称取一定量的固体样品， 用去离子水溶 解后， 稀释定容至 50mL， 此为待测样品的储备液。吸取两份等量的储备液， 分别用 pH1.0 的 缓冲溶液和 pH4.5 的缓冲溶液稀释定容至 50mL， 此为试样液。储备液的最大取样量应不超 过10mL， 以保证不超出缓冲溶液的缓冲能力。 用pH1.0的缓冲溶液对储备液进行适当稀释， 直到 520nm 下的吸光度值在分光光度。
31、计的线性范围内。采用这个稀释倍数， 制备两份试样 液， 一个用 pH1.0 的缓冲溶液稀释， 另一个用 pH4.5 的缓冲溶液稀释。在 520nm 和 700nm 波 长下测定吸光光度值， 以水做空白。样品制备完毕后要求在 20min 50min 的时间以内测 定吸光光度值。 0092 注 ： 在 700nm 波长下测定吸光光度值是为了校正混浊对测定结果的干扰。如果稀 释后的样品过于混浊， 测定前采用离心或过滤的方法进行澄清处理。采用的过滤器不能吸 收花青素。 0093 结果计算 ： 0094 矢车菊 -3- 葡萄糖苷含量 ( ) ADF/(L)103MWV10-3/m， 0095 式中， A。
32、 (A520nm-A700nm)pH1.0-(A520nm-A700nm)pH4.5； 0096 MW( 分子量 )- 矢车菊 -3- 葡萄糖苷的分子量， 449.2g/mol ； 说 明 书 CN 103145681 A 8 6/7 页 9 0097 DF- 样品储备液的稀释倍数 ； 0098 L- 光路长， cm ； 0099 - 矢车菊 -3- 葡萄糖苷的摩尔消光系数， 269000Lmol-1cm-1； 0100 103- 由 g 换算成 mg 的转换系数 ； 0101 V- 储备液的体积， mL ； 0102 m- 样品的重量， mg。 0103 2、 色价的测定 ： 精确称取样品 。
33、0.1g 0.2g， 用 pH3.0 柠檬酸 - 磷酸氢二钠缓冲溶 液定容至100mL(吸光光度值应控制在0.30.7之间)， 用1cm比色皿以缓冲溶液作空白， 在 530nm5nm 下测定吸光光度值。 0104 E11cm(5305)nm A/m 0105 式中 ： A- 吸光光度值 ； 0106 m- 样品的质量， g ； 0107 E11cm- 色价， 即浓度为 1的被测样品溶液在 1cm 比色皿内在 530nm5nm 范围内 的最大吸收峰的吸光光度值。 0108 3、 pH 值的测定 ： 称取 1g 样品， 用 100mL 容量瓶以去离子水定容至刻度， 摇匀， 用精 度为 0.01pH。
34、 的酸度计测定样液 pH 值。 0109 4、 灰分测定 ： 灰分测定参照 GB5009.4-2010 的方法。具体步骤为 ： 取大小适宜的 瓷坩埚置马弗炉中， 在55025下灼烧0.5h， 冷却至200左右， 取出， 放入干燥器中冷 却 30min， 准确称量。重复灼烧至前后两次称量相差不超过 0.5mg 为恒重。然后， 取 3g 10g( 精确至 0.0001g) 样品置于瓷坩埚中， 先在电热板上以小火加热使样品充分炭化至无 烟， 然后置于马弗炉中， 在 550 25灼烧 4h。冷却至 200左右， 取出， 放入干燥器中冷 却 30min， 称量前如发现灼烧残渣有炭粒时， 应向试样中滴入少。
35、许水湿润， 使结块松散， 蒸干 水分再次灼烧至无炭粒即表示灰化完全， 方可称量。重复灼烧至前后两次称量相差不超过 0.5mg 为恒重。按下式计算。 0110 X1 100(m1-m2)/(m3-m2) 0111 X1- 试样中灰分含量， g/100g ； 0112 m1- 坩埚和灰分的质量， g ； 0113 m2- 坩埚的质量， g ； 0114 m3- 坩埚和试样的质量， g。 0115 注 ： 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 5。 0116 5、 铅的测定 ： 参照GB5009.12-2010中第一法石墨炉原子吸收光谱法测定。 将各仪 器性能调至最佳状。
36、态。参考条件为波长 283.3nm， 狭缝 0.2nm 1.0nm， 灯电流 5mA 7mA， 干燥温度120， 持续20s ； 灰化温度450， 持续15s20s， 原子化温度 ： 17002300， 持续 4s 5s， 背景校正为氘灯或塞曼效应。绘制标准曲线， 吸取上面配制的铅标准使用液 10.0ng/mL( 或 g/L)， 20.0ng/mL( 或 g/L)， 40.0ng/mL( 或 g/L)， 60.0ng/mL( 或 g/ L)， 80.0ng/mL(或g/L)各10L， 注入石墨炉， 测得其吸光值并求得吸光值与浓度关系的 一元线性回归方程为 y 0.0001x-0.0098(R2。
37、 0.9981)。分别吸取样液和试剂空白液各 10L， 注入石墨炉， 测得其吸光值， 代入标准系列的一元线性回归方程中求得样液中铅含 说 明 书 CN 103145681 A 9 7/7 页 10 量。试样中铅含量按下式进行计算。 0117 X (c1-c0)V1000/(m10001000) 0118 式中 ： 0119 X- 试样中铅含量， mg/kg 或 mg/L ； 0120 c1- 测定样液中铅含量， ng/mL ； 0121 c0- 空白液中铅含量， ng/mL ； 0122 V- 试样消化液定量总体积， mL ； 0123 m- 试样质量或体积， g。 0124 6、 砷的测定 。
38、( 砷斑法 ) ： 称取 1g0.01g 实验室样品， 加盐酸试剂 5mL， 再加水 至 30mL 溶解后， 按 GB/T5009.76 第二法砷斑法测定。量取 3mL0.05mL 砷标准溶液 ( 含 0.003mg 砷 )， 制备砷限量标准液。供试品溶液与砷标准溶液 3mL( 含砷 0.003mg) 制成的对 照液比较， 不得更深。 0125 所得结果见表 3。 0126 表 3、 紫甘薯花青素成分表 0127 0128 紫甘薯色素作为着色剂的标准如下 ： 矢车菊素 -3- 葡萄糖苷 (w/ ) 1， pH 为 2.0-5.0， 色价 5.0， 灰分 4， 铅 (Pb)(mg/kg) 3.0， 砷 ( 以 As 计 )(mg/kg) 2.0， 由 表 3 可知， 紫甘薯花青素符合上述标准， 可以作为着色剂使用。 说 明 书 CN 103145681 A 10 1/4 页 11 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 103145681 A 11 2/4 页 12 图 3 图 4 说 明 书 附 图 CN 103145681 A 12 3/4 页 13 图 5 图 6 说 明 书 附 图 CN 103145681 A 13 4/4 页 14 图 7 说 明 书 附 图 CN 103145681 A 14 。