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一种甘露糖醛酸与古罗糖醛酸镶嵌片断寡糖及其制备方法
    【技术领域】

    本发明涉及一种非还原端带有双键的甘露糖醛酸与古罗糖醛酸镶嵌片断寡糖及其制备方法。

    背景技术

    褐藻胶是一种以β-甘露糖醛酸和α-古罗糖醛酸为单体通过1-4糖苷键连接而成的直链多糖。从整个分子来看褐藻胶可分为三种片段：聚甘露糖醛酸片断(M block)、聚古罗糖醛酸片断(G block)和甘露糖醛酸与古罗糖醛酸镶嵌片段(MG block)。在褐藻胶中甘露糖醛酸与古罗糖醛酸的比值根据藻类不同、地域不同、季节不同及在藻类中分布部位不同而呈现差异，大致为2∶1至1∶2。近年来褐藻胶寡糖及其衍生物的生物活性不断被发现，从抗凝、抗菌、抗炎、抗病毒、提高免疫力抗肿瘤到双歧因子、促植物生长剂，褐藻胶寡糖及其衍生物表现出了广泛的生物活性。目前对甘露糖醛酸片断(M block)寡糖和古罗糖醛酸片断(G block)寡糖的结构和生物活性有了广泛深入的研究。甘露糖醛酸与古罗糖醛酸镶嵌片段(MG block)寡糖有其独特的结构，可能会产生更广泛和突出的生物活性。但因甘露糖醛酸与古罗糖醛酸之间糖苷键较弱，所以较难得到这种物质，自然也影响到对它作进一步的研究。

    【发明内容】

    本发明的目的是提供一种甘露糖醛酸与古罗糖醛酸镶嵌片断寡糖及其制备方法，它能满足现有技术的上述需求。

    一种甘露糖醛酸与古罗糖醛酸镶嵌片断寡糖，其特征是它的非还原端有双键，结构如下：

    或

    式中n＝1-19，m＝1-19，n+m＜20；R均为H或SO3Na或CH3或PO3Na2

    一种甘露糖醛酸与古罗糖醛酸镶嵌片段寡糖的制备方法，其特征是将褐藻胶配成水溶液，加入褐藻胶裂合酶进行反应，用沸水浴加热使酶失活，离心后除去沉淀杂质，将所得上清夜用凝胶渗透层析和强阴离子交换层析分离纯化，并进行衍生化。

    本发明提供了一系列新的化合物甘露糖醛酸与古罗糖醛酸镶嵌片段寡糖及其衍生物，并为其生物活性的应用和开发打下了基础。

    【具体实施方式】

    将褐藻胶配成5％(重量百分浓度，下同)的水溶液，加入褐藻胶裂合酶(Vibro Sp.510)进行反应，用沸水浴加热使酶失活，离心后除去沉淀杂质，将所得上清夜用凝胶渗透层析，填料为生物胶(Bio-Gel)P6和强阴离子交换层析填料为Spherisorb SAX进行分离纯化，得到非还原端带有一个双键的甘露糖醛酸与古罗糖醛酸镶嵌片段寡糖；并且在糖环的2位和3位引入SO3Na或CH3或PO3Na2。其结构式为：

    或

    式中n＝1-19，m＝1-19，n+m＜20；R均为H或SO3Na或CH3或PO3Na2

    本发明中褐藻胶水溶液浓度可以是1-10％。所用地褐藻胶裂合酶是专一性褐藻胶裂合酶。所述凝胶渗透层析的填料除上述Bio-Gel P6，还可以应用生物胶P4(Bio-Gel P4)、生物胶P10(Bio-Gel P10)以及葡聚糖-琼脂糖铰链填料(Superdex-30)均能达到相同的分离效果。所述强阴离子交换层析的填料除上述Spherisorb SAX，还可以应用SB Nucleosil同样能达到良好的分离效果。所述的甘露糖醛酸古罗糖醛酸镶嵌片断及其衍生物为多聚或寡聚甘露糖醛酸古罗糖醛酸、多聚或寡聚甘露糖醛酸古罗糖醛酸硫酸酯、磷酸酯和甲基化衍生物。