一种桔梗含量的测定方法.pdf

本发明公开了一种桔梗含量的测定方法，该桔梗含量的测定方法包括：桔梗粉末过二号筛2g，加入50％甲醇50ml，超声处理30分钟，放冷补足，滤过，回收溶剂至干；残渣萃取，洗涤，有机层蒸干，用甲醇溶解，用硅胶柱分离，多次洗脱，分离，收集洗脱液，经过蒸干、定容、滤过，最后所得样品；高效液相色谱仪在色谱柱安捷伦TC-C18 5um，4.6×150mm、柱温30℃、流速1.0ml/L、乙腈-水25∶75的实验条件下，分离，计算，得桔梗含量。本发明经过多次试验，发现使用不同的硅胶对含量的影响非常大，通过使用青岛海洋产的硅胶从桔梗中提取出的含量非常高，普遍合格，有效地解决了目前桔梗含量不达标的问题，解决使用药典的药品企业的检验难题。

1.  一种桔梗含量的测定方法，其特征在于，该桔梗含量的测定方法包括：
步骤一，桔梗粉末过二号筛2g，加入50％甲醇50ml，超声处理30分钟，放冷补足，滤过，回收溶剂至干；
步骤二，残渣萃取，洗涤，有机层蒸干，用甲醇溶解，用硅胶柱分离，多次洗脱，分离，收集洗脱液，经过蒸干、定容、滤过，最后所得样品；
步骤三，高效液相色谱仪分析条件：色谱柱安捷伦TC-C18 5um，4.6×150mm、柱温30℃、流速1.0ml/L、流动相比例乙腈-水25∶75。

2.  如权利要求1所述的桔梗含量的测定方法，其特征在于，在步骤一中超声处理的功率250W，频率40kHz。

一种桔梗含量的测定方法
技术领域
本发明属于药材检测技术领域，尤其涉及一种桔梗含量的测定方法。
背景技术
按照药典的方法检测桔梗含量，含量经常不合格，中国药典2010版检测桔梗的方法，测定桔梗含量经常不合格，分析原因经过多次实验，柱层析的硅胶是影响桔梗含量的主要影响因素。
发明内容
本发明的目的在于提供一种桔梗含量的测定方法，旨在解决按照药典的方法检测桔梗含量，含量经常不合格的问题。
本发明是这样实现的，一种桔梗含量的测定方法，该桔梗含量的测定方法包括：
步骤一，桔梗粉末过二号筛2g，加入50％甲醇50ml，超声处理30分钟，放冷补足，滤过，回收溶剂至干；
步骤二，残渣萃取，洗涤，有机层蒸干，用甲醇溶解，用硅胶柱分离，多次洗脱，分离，收集洗脱液，经过蒸干、定容、滤过，最后所得样品；
步骤三，高效液相色谱仪在色谱柱安捷伦TC-C185um，4.6×150mm、柱温30℃、流速1.0ml/L、乙腈-水25∶75的实验条件下，分离，以外标两点法对数方程计算，得桔梗含量。
进一步，在步骤一中超声处理的功率250W，频率40kHz。
本发明提供的桔梗含量的测定方法，经过超声、滤过、萃取、蒸干、硅胶柱层析分离，接洗脱液、蒸干、定容、过滤等步骤，对桔梗药材进行纯化提取 有效成分桔梗皂苷D，经过多次试验，摸索条件，在上述步骤二中硅胶柱层析的作用是将桔梗药材中的有效成分桔梗皂苷D分离出来，经过实验发现使用不同的硅胶进行分离，分离效果差别很大，总结原因是硅胶对含量的影响非常大，通过使用青岛海洋产的硅胶60-80目从桔梗中提取出的含量非常高，普遍合格，有效地解决了目前桔梗含量不达标的问题，解决使用药典的药品企业的检验难题。
附图说明
图1是本发明提供的桔梗含量的测定方法流程图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
下面结合附图及具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。
如图1所示，本发明实施例的桔梗含量的测定方法包括以下步骤：
S101：桔梗粉末(过二号筛)约2g，加入50％甲醇50ml，超声处理(功率250W，频率40kHz)30分钟，放冷补足，滤过，回收溶剂至干；
S102：残渣萃取，洗涤，有机层蒸干，用甲醇溶解，用硅胶柱分离，多次洗脱，分离，收集洗脱液，经过蒸干、定容、滤过，最后所得样品；
S103：高效液相色谱仪在色谱柱安捷伦TC-C185um，4.6×150mm、柱温30℃、流速1.0ml/L、乙腈-水(25∶75)的实验条件下，分离，以外标两点法对数方程计算，得桔梗含量。
本发明的具体实施例：
实施例1：
含量测定，照高效液相色谱法测定：
色谱条件与系统适用性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(25∶75)为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按桔梗皂苷D峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备，取桔梗皂苷D对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备，取本品粉末(过二号筛)约2g，精密称定，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置水浴上蒸干，残渣加水20ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液50ml洗涤，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水50ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，加硅胶0.5g拌匀，置水浴上蒸干，加于硅胶柱[100～120目,10g，内径为2cm，用三氯甲烷-甲醇(9∶1)混合溶液湿法装柱]上，以三氯甲烷-甲醇(9∶1)混合溶液50ml洗脱，弃去洗脱液，再以三氯甲烷-甲醇-水(60∶20∶3)混合溶液100ml洗脱，弃去洗脱液，继用三氯甲烷-甲醇-水(60∶29∶6)混合溶液100ml洗脱，收集洗脱液直至没有溶剂流出为止，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。
测定法，分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液10～15μl，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。
按干燥品计算，含桔梗皂苷D(C₅₇H₉₂O₂₈)不得少于0.10％。
其中的硅胶：