一种由次黄嘌呤核苷酸制备三磷酸腺苷的方法 本发明涉及生物化学领域，特别是一种三磷酸腺苷的制备方法。
三磷酸腺苷(以下简称ATP)是一种核苷酸药物，它含有高能磷酸键，是能量转换器、贮存器，在人体能量代谢中起着重要的作用。临床上常用它做急救用药，也是重要的辅助用药。近年来开发了它的肠溶片剂，用做胃下垂的主治药物。ATP在食品中还可做熬合剂用。
ATP的制备方法最早采用的是从兔肌中提取，或用菠菜的光合作用合成ATP。目前常用的生产方法是用一磷酸腺苷(AMP)和腺嘌呤核苷(AR)作原料，用酵母发酵法生产ATP，这种方法存在着成本高的问题。
本发明的目的是提供一种利用次黄嘌呤核苷酸(IMP)作原料制备三磷酸腺苷的方法。
本发明的方法为在葡萄糖、酵母、铵离子和镁离子存在下使次黄嘌呤核苷酸转化成一磷酸腺苷，然后使一磷酸腺苷通过酵母发酵转化成三磷酸腺苷。
所述方法中的铵离子作为氨基的供体，特别优选使用氯化铵或氢氧化铵。所述镁离子起催化作用，可用氯化镁。其中IMP转化成AMP的反应温度优选为28～32℃，反应时间优选10～24小时，反应体系重量份数配方优选：IMP0.1～0.2份，NH4OH(NH4Cl)0.02～0.1份，MgCl20.05～0.3份，葡萄糖0.6～1.5份，酵母3～4份。
本发明方法的一磷酸腺苷转化成三磷酸腺苷的反应体系中，特别是含有葡萄糖、酵母、磷酸二氢钾和氯化镁，还可用氢氧化钠调PH，如调至PH7，该反应温度优选28～32℃，反应时间优选6～8小时，所述反应体系的重量份数配比优选为：磷酸二氢钾0.5～1份，氯化镁0.05～0.1份，葡萄糖1～2份，酵母4～6份，AMP的量以0.1～0.2份IMP所转化成的量计。
本发明的关键是IMP转化成AMP的步骤。在现有技术中，IMP转化生成AMP和GMP(鸟嘌呤核苷酸)，IMP转化成AMP的转化率只有50％左右。而在本发明的方法中IMP基本上只生成AMP，几乎没有GMP生成。这样使得低成本、高转化率地由IMP生产ATP成为可能，开辟了ATP生产的新的，可行途径。
所以本方法使IMP生成AMP地转化率提高了近一倍，大大降低了ATP的生产成本。另外，本方法反应条件简单，反应速度较快。
下面通过实施例进一步说明本发明。
取IMP0.15克、NH4OH60μM、MgCl20.15克、酵母3.5克，混合后在30℃左右反应15小时，经后处理后然后加入0.75克磷酸二氢钾、0.08克氯化镁、1.5克葡萄糖，用氢氧化钠调PH为7，在水溶液中总体积10毫升，在30℃左右反应7小时。
反应结束后通蒸汽加热(100℃)5～10分钟，离心(3000～5000转/分)5～10分钟，取上清液，用无离子水稀释3倍，上离子交换树脂柱进行分离。为得到适合针剂药检标准的ATP，用阴离子交换树脂(聚苯乙烯-二乙烯苯季胺型，交联度1×8，粒度100～200目)柱分离后，还需用硅藻土去热源。为得到适合片剂药检标准的ATP，用阴离子交换树脂柱分离后，再用阴柱(或好的活性炭柱)浓缩，洗脱下来即可用做压片。
后处理法可采用现有技术的任何适用的方法，可参考“核苷酸类物质的生产和应用”资料汇编，科学出版社，1971。