蓝莓嫩茎段组培快繁工艺.pdf

摘要
申请专利号：	CN201210340299.6	申请日：	2012.09.14
公开号：	CN102812905A	公开日：	2012.12.12
当前法律状态：	驳回	有效性：	无权
法律详情：	发明专利申请公布后的驳回 IPC(主分类):A01H 4/00申请公布日:20121212\|\|\|实质审查的生效IPC(主分类):A01H 4/00申请日:20120914\|\|\|公开
IPC分类号：	A01H4/00	主分类号：	A01H4/00
申请人：	四川立益生态农业开发有限公司
发明人：	陈川菊
地址：	610502 四川省成都市新都区清流镇九龙村村委会一楼
优先权：
专利代理机构：	成都金英专利代理事务所(普通合伙) 51218	代理人：	袁英
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内容摘要

本发明公开了蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，它包括以下步骤：S1、从田间选取未木质化的嫩茎，洗净消毒，切成带芽茎段；S2、诱导培养，采用的诱导培养基为MS+ZT3.0mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6.5g/L；S3、继代培养，采用的继代增殖培养基为MS+ZT0.5～1.5mg/L+IBA0.05～0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L；在蓝莓出瓶移栽之前采用MS+ZT0.3～0.7mg/L培养基进行苗木复壮。本发明的有益效果是：繁殖率高、繁殖速度快，生产组培苗成本低廉；生产的苗木质量好，均匀一致，容易脱去病毒，根系发达，为后期树体生长结果奠定良好的基础。

权利要求书

1.蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，其特征在于：它包括以下步骤：S1、从田间选取未木质化的嫩茎，清水冲洗50～60min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗20～30min，然后用75%酒精消毒20～30s，无菌水冲洗3～5次，之后在超净工作台上，放入0.1%氯化汞消毒液中8～10min，用无菌水冲洗2～3次；然后在超净工作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶；S2、诱导培养：在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3.0mg/L+IBA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6.5g/L，调节其pH为5.2～5.8；S3、继代培养：待嫩茎上长出1cm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代增殖培养基上进行丛生芽诱导并继代增殖，每40～50天为一个继代培养周期，继代增殖培养基是指MS+ZT 0.5～1.5mg/L+IBA0.05～0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，调节其pH为5.2～5.8；在蓝莓出瓶移栽之前2～3个继代培养周期中，采用MS+ZT 0.3～0.7mg/L培养基进行苗木复壮。

说明书

蓝莓嫩茎段组培快繁工艺

技术领域

本发明涉及蓝莓组织培养技术领域，特别是一种蓝莓嫩茎段组培快繁工艺。

背景技术

蓝莓属于杜鹊花科越橘属灌木，为一种小浆果果树，其果实具有很高的营养价值和经济价值。目前市场对蓝莓的需求量不断增长，但是我国蓝莓的种植业刚刚起步，各地在建立种植园时急需大量优良品种苗木。采用常规的硬枝、绿枝扦插成活率低，周期长，速度慢，且易带病毒，无法满足市场对蓝莓苗木数量日益增长的需要。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种繁殖率高、繁殖速度快的蓝莓嫩茎段组培快繁工艺。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，它包括以下步骤：

S1、从田间选取未木质化的嫩茎，清水冲洗50～60min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗20～30min，然后用75%酒精消毒20～30s，无菌水冲洗3～5次，之后在超净工作台上，放入0.1%氯化汞消毒液中8～10min，用无菌水冲洗2～3次；然后在超净工作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶；

S2、诱导培养：在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3.0mg/L+IBA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6.5g/L，调节其pH为5.2～5.8；

S3、继代培养：待嫩茎上长出1cm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代增殖培养基上进行丛生芽诱导并继代增殖，每40～50天为一个继代培养周期，继代增殖培养基是指MS+ZT 0.5～1.5mg/L+IBA0.05～0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，调节其pH为5.2～5.8；在蓝莓出瓶移栽之前2～3个继代培养周期中，采用MS+ZT 0.3～0.7mg/L培养基进行苗木复壮。

本发明具有以下优点：

1、本发明繁殖率高、繁殖速度快，生产组培苗成本低廉，得到的组培苗遗传状一致，克服了常规繁殖系数低的缺点。

2、组培微繁生产的苗木质量好，均匀一致，容易脱去病毒，根系发达，为后期树体生长结果奠定良好的基础。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步的描述，但本发明不限于如下所述。

实施例1：

蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，它包括以下步骤：

S1、从田间选取未木质化的嫩茎，清水冲洗50min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗20min，然后用75%酒精消毒30s，无菌水冲洗5次，之后在超净工作台上，放入0.1%氯化汞消毒液中8min，用无菌水冲洗3次；然后在超净工作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶；

S2、诱导培养：在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3.0mg/L+IBA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6.5g/L，调节其pH为5.4；

S3、继代培养：待嫩茎上长出1cm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代增殖培养基上进行丛生芽诱导并继代增殖，每40天为一个继代培养周期，继代增殖培养基是指MS+ZT1.5mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，调节其pH为5.4；在蓝莓出瓶移栽之前2个继代培养周期中，采用MS+ZT 0.7mg/L，pH为5.4的培养基进行苗木复壮。

实施例2：

蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，它包括以下步骤：

S1、从田间选取未木质化的嫩茎，清水冲洗60min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗30min，然后用75%酒精消毒20s，无菌水冲洗3次，之后在超净工作台上，放入0.1%氯化汞消毒液中10min，用无菌水冲洗2次；然后在超净工作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶；

S2、诱导培养：在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3.0mg/L+IBA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6.5g/L，调节其pH为5.2；

S3、继代培养：待嫩茎上长出1cm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代增殖培养基上进行丛生芽诱导并继代增殖，每50天为一个继代培养周期，继代增殖培养基是指MS+ZT 0.5mg/L+IBA0.05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，调节其pH为5.2；在蓝莓出瓶移栽之前3个继代培养周期中，采用MS+ZT 0.3mg/L，pH为5.2的培养基进行苗木复壮。

实施例3：

蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，它包括以下步骤：

S1、从田间选取未木质化的嫩茎，清水冲洗55min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗25min，然后用75%酒精消毒25s，无菌水冲洗4次，之后在超净工作台上，放入0.1%氯化汞消毒液中9min，用无菌水冲洗3次；然后在超净工作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶；

S2、诱导培养：在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3.0mg/L+IBA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6.5g/L，调节其pH为5.8；

S3、继代培养：待嫩茎上长出1cm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代增殖培养基上进行丛生芽诱导并继代增殖，每45天为一个继代培养周期，继代增殖培养基是指MS+ZT 0.5～1.5mg/L+IBA0.08mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，调节其pH为5.8；在蓝莓出瓶移栽之前2～3个继代培养周期中，采用MS+ZT 0.3～0.7mg/L，pH为5.8的培养基进行苗木复壮。

资源描述

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1、(10)申请公布号 CN 102812905 A (43)申请公布日 2012.12.12 C N 1 0 2 8 1 2 9 0 5 A *CN102812905A* (21)申请号 201210340299.6 (22)申请日 2012.09.14 A01H 4/00(2006.01) (71)申请人四川立益生态农业开发有限公司地址 610502 四川省成都市新都区清流镇九龙村村委会一楼 (72)发明人陈川菊 (74)专利代理机构成都金英专利代理事务所 (普通合伙) 51218 代理人袁英 (54) 发明名称蓝莓嫩茎段组培快繁工艺 (57) 摘要本发明公开了蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，。

2、它包括以下步骤：S1、从田间选取未木质化的嫩茎，洗净消毒，切成带芽茎段；S2、诱导培养，采用的诱导培养基为MS+ZT3.0mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖 30g/L+琼脂粉6.5g/L；S3、继代培养，采用的继代增殖培养基为MS+ZT0.51.5mg/L+IBA0.05 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L；在蓝莓出瓶移栽之前采用MS+ZT0.30.7mg/L培养基进行苗木复壮。本发明的有益效果是：繁殖率高、繁殖速度快，生产组培苗成本低廉；生产的苗木质量好，均匀一致，容易脱去病毒，根系发达，为后期树体生长结果奠定良好的基础。 (51)Int.Cl. 权利要求。

3、书1页说明书2页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请权利要求书 1 页说明书 2 页 1/1页 2 1.蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，其特征在于：它包括以下步骤： S1、从田间选取未木质化的嫩茎，清水冲洗5060min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗2030min，然后用75%酒精消毒2030s，无菌水冲洗35次，之后在超净工作台上，放入0.1%氯化汞消毒液中810min，用无菌水冲洗23次；然后在超净工作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶； S2、诱导培养：在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3.。

4、0mg/L+IBA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6.5g/L，调节其pH 为5.25.8； S3、继代培养：待嫩茎上长出1cm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代增殖培养基上进行丛生芽诱导并继代增殖，每4050天为一个继代培养周期，继代增殖培养基是指 MS+ZT 0.51.5mg/L+IBA0.050.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，调节其pH为5.2 5.8；在蓝莓出瓶移栽之前23个继代培养周期中，采用MS+ZT 0.30.7mg/L培养基进行苗木复壮。权利要求书CN 102812905 A 1/2页 3 蓝莓嫩茎段组培快繁工艺技术领域 0001 本发明。

5、涉及蓝莓组织培养技术领域，特别是一种蓝莓嫩茎段组培快繁工艺。背景技术 0002 蓝莓属于杜鹊花科越橘属灌木，为一种小浆果果树，其果实具有很高的营养价值和经济价值。目前市场对蓝莓的需求量不断增长，但是我国蓝莓的种植业刚刚起步，各地在建立种植园时急需大量优良品种苗木。采用常规的硬枝、绿枝扦插成活率低，周期长，速度慢，且易带病毒，无法满足市场对蓝莓苗木数量日益增长的需要。发明内容 0003 本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种繁殖率高、繁殖速度快的蓝莓嫩茎段组培快繁工艺。 0004 本发明的目的通过以下技术方案来实现：蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，它包括以下步骤： S1、从田间选取未。

6、木质化的嫩茎，清水冲洗5060min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗2030min，然后用75%酒精消毒2030s，无菌水冲洗35次，之后在超净工作台上，放入0.1%氯化汞消毒液中810min，用无菌水冲洗23次；然后在超净工作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶； S2、诱导培养：在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3.0mg/L+IBA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6.5g/L，调节其pH 为5.25.8； S3、继代培养：待嫩茎上长出1cm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代增殖培养基上进行丛生芽诱导并继代增。

7、殖，每4050天为一个继代培养周期，继代增殖培养基是指 MS+ZT 0.51.5mg/L+IBA0.050.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，调节其pH为5.2 5.8；在蓝莓出瓶移栽之前23个继代培养周期中，采用MS+ZT 0.30.7mg/L培养基进行苗木复壮。 0005 本发明具有以下优点： 1、本发明繁殖率高、繁殖速度快，生产组培苗成本低廉，得到的组培苗遗传状一致，克服了常规繁殖系数低的缺点。 0006 2、组培微繁生产的苗木质量好，均匀一致，容易脱去病毒，根系发达，为后期树体生长结果奠定良好的基础。具体实施方式 0007 下面结合实施例对本发明做进一步的描述，但本。

8、发明不限于如下所述。 0008 实施例1：蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，它包括以下步骤：说明书CN 102812905 A 2/2页 4 S1、从田间选取未木质化的嫩茎，清水冲洗50min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗20min，然后用75%酒精消毒30s，无菌水冲洗5次，之后在超净工作台上，放入 0.1%氯化汞消毒液中8min，用无菌水冲洗3次；然后在超净工作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶； S2、诱导培养：在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3.0mg/L+IBA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6.5g/。

9、L，调节其pH 为5.4； S3、继代培养：待嫩茎上长出1cm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代增殖培养基上进行丛生芽诱导并继代增殖，每40天为一个继代培养周期，继代增殖培养基是指 MS+ZT1.5mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，调节其pH为5.4；在蓝莓出瓶移栽之前2个继代培养周期中，采用MS+ZT 0.7mg/L，pH为5.4的培养基进行苗木复壮。 0009 实施例2：蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，它包括以下步骤： S1、从田间选取未木质化的嫩茎，清水冲洗60min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗30min，然后用75%酒精消毒20s，无菌水冲洗。

10、3次，之后在超净工作台上，放入 0.1%氯化汞消毒液中10min，用无菌水冲洗2次；然后在超净工作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶； S2、诱导培养：在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3.0mg/L+IBA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6.5g/L，调节其pH 为5.2； S3、继代培养：待嫩茎上长出1cm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代增殖培养基上进行丛生芽诱导并继代增殖，每50天为一个继代培养周期，继代增殖培养基是指MS+ZT 0.5mg/L+IBA0.05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，调节其pH为。

11、5.2；在蓝莓出瓶移栽之前3 个继代培养周期中，采用MS+ZT 0.3mg/L，pH为5.2的培养基进行苗木复壮。 0010 实施例3：蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，它包括以下步骤： S1、从田间选取未木质化的嫩茎，清水冲洗55min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗25min，然后用75%酒精消毒25s，无菌水冲洗4次，之后在超净工作台上，放入 0.1%氯化汞消毒液中9min，用无菌水冲洗3次；然后在超净工作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶； S2、诱导培养：在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3.0mg/L+IBA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6.5g/L，调节其pH 为5.8； S3、继代培养：待嫩茎上长出1cm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代增殖培养基上进行丛生芽诱导并继代增殖，每45天为一个继代培养周期，继代增殖培养基是指MS+ZT 0.51.5mg/L+IBA0.08mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，调节其pH为5.8；在蓝莓出瓶移栽之前23个继代培养周期中，采用MS+ZT 0.30.7mg/L，pH为5.8的培养基进行苗木复壮。说明书CN 102812905 A 。

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