贯叶金丝桃抗病毒中药制剂及其制备工艺 技术领域 本发明涉及一种药物配置品，特别是属于一种由中草药与药物辅料配制的复方中药制剂。
背景技术 传统中医理论十分重视气血的疏通，气助血行，气行则血行，气滞则血淤，血淤则导致气滞，形成正气亏损和阴阳失调。而肝属木、主藏血、主疏泄、性喜条达，如机体正气不足，湿热疠气乘虚而入，或饮食不洁，或七情内伤，至使脾胃失其纳运，肝胆失其疏泄而发病。因此，治疗乙型肝炎和乙肝病毒携带者多以“活血化瘀，疏肝理气，燥湿健脾和胃”为主。贯叶金丝桃的主要用途是治疗抑郁症，同时对治疗慢性病毒和常见皮肤病有一定帮助，其提取物可治疗丙型肝炎、慢性丙型肝炎及其相关的病毒性疾病，但未见用于治疗乙型肝炎和乙肝病毒携带者的文献记载。
发明内容 本发明提供一种贯叶金丝桃抗病毒中药制剂，是用于治疗乙型肝炎和乙肝病毒携带者的复方中药制剂，其中含有贯叶金丝桃5～35份、菊苣3～21份、牛蒡子3～21份、藁本2.5～18份、甘草2.5～18份。其中，贯叶金丝桃能清利肝经湿热，清除疫毒，又能散瘀，功效全面，为方中君药；菊苣能清利肝经湿热，为方中臣药；牛蒡子能清散湿热疫毒之郁结，清泄湿热疫毒，又能防止湿热疫毒的传变发展；藁本既能疏肝解郁，又能辟秽除湿，牛蒡子和藁本二味药均能配合君、臣药用于加强治疗作用，为方中佐药；甘草能调补脾胃，更能协调方中其它诸药的治疗作用，为方中使药。方中还含有成型剂乳糖33～67份、包合剂β-环糊精2.3～4.6份、矫味剂蛋白糖1～2份，其剂型为颗粒剂或散剂。其制备工艺是按以下步骤进行：①贯叶金丝桃粉碎成粗粒，加6～8倍量60～80％乙醇，回流2～3次，每次1～2小时，滤过，合并滤液，并减压浓缩得清膏-1，备用；②取藁本粗粉，加8～10倍量水浸泡4～8小时，蒸馏提取挥发油6～8小时，提取的挥发油用β-环糊精包合，冷藏，抽滤，40℃以下干燥4～6小时，研细，过120目筛备用，药渣再用8～10倍量水煮1小时，过滤，滤液与蒸馏后的水溶液合并备用。③贯叶金丝桃药渣与牛蒡子、菊苣、甘草三味混合，加10倍量水煎煮3次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与藁本煎液合并，减压浓缩至原药材量的2倍，冷却至室温，加乙醇使醇含量达50％，搅拌均匀，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，得清膏-2。④将清膏-1和清膏-2合并，混匀，加入β-环糊精包合物、乳糖和蛋白糖制粒。
本发明为棕黄色颗粒，气香，味微苦，具有清热解毒，化温辟秽，疏郁散瘀等功效，主治乙型肝炎，对2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg和HBV-DNA的复制有明显地抑制作用，并有保肝降酶与免疫调节的作用，每袋6.0g，成人每次1袋，每天3次，3～6个月为一疗程。
雏鸭乙肝模型的实验(见表1、表2)。
表1.复方贯叶金丝桃抗病毒颗粒在鸭乙肝病毒感染的鸭体内治
疗组与病毒感染对照组鸭血清DHBV-DNA OD值比较
实验 组别 剂量 鸭数 鸭血清DHBV-DNA OD490(X±SD)
批次 g/kg (只) T0 T5 T10 P3
bid×10
I 生理盐水 - 6 1.137±0.08 1.031±0.09 1.081±0.19 1.007±0.21
复方贯叶 0.75 6 0.981±0.03 0.849±0.07** 0.845±0.04** 0.846±0.08**
金丝桃 3.00 6 1.570±0.15 1.025±0.17** 1.069±0.21** 1.290±0.24**
9.00 6 0.965±0.08 0.839±0.07** 0.780±0.05** 0.908±0.05*
II 生理盐水 - 6 1.020±0.14 0.983±0.16 0.980±0.18 0.993±0.20
复方贯叶 0.75 6 1.196±0.17 0.942±0.15** 0.897±0.10** 1.095±0.07*
金丝桃 3.00 6 0.935±0.10 0.800±0.13* 0.810±0.08* 0.925±0.15
9.00 6 1.512±0.15 1.318±0.20** 1.294±0.20** 1.135±0.19**
III 生理盐水 - 6 0.960±0.19 0.985±0.10 0.920±0.07 0.967±0.08
复方贯叶 0.75 6 0.910±0.25 0.801±0.01** 0.793±0.08** 0.639±0.10**
金丝桃 3.00 6 0.952±0.15 0.801±0.01* 0.721±0.13** 0.902±0.17*
9.00 6 0.980±0.11 0.806±0.03** 0.713±0.08* 0.728±0.12*
阳性对照药3TC 0.05 6 0.660±0.08 0.458±0.11* 0.342±0.14* 0.651±0.04*
统计处理：给药组不同时间(T5，T10，P3)鸭血清DHBV-DNA OD值与感染前(T0)OD值比较(配对t检验)，*p＜0.05，**p＜0.01。
表2.乙型肝炎鸭模型口服复方贯叶金丝桃抗病毒颗粒治疗组
与病毒感染对照组鸭血清DHBV-DNA水平抑制率的比较
实验 药物 剂量 鸭数 抑制率(％)
批次 g/kg bid×10 (只) T5 T10 P3
I 病毒对照 6 9.43 5.50 12.14
复方贯叶金丝桃 0.75 6 17.60* 17.21* 6.44
3.00 6 18.20* 23.77* 9.21
9.00 6 18.99* 28.71** 5.45
II 病毒对照 6 3.66 4.24 3.09
复方贯叶金丝桃 0.75 6 13.90** 14.65* 6.96
3.00 6 15.84** 19.75** 0.09
9.00 6 13.00* 14.83* 28.76**
III 病毒对照 6 5.77 0.97 4.78
复方贯叶金丝桃 0.75 6 12.43* 14.71** 24.52**
3.00 6 14.26* 16.03** 20.20*
9.00 6 18.71** 25.76** 26.98**
3TC 50mg/kg 6 16.13* 38.28*** 27.32***
统计处理：给药组不同时间(T5，T10，P3)鸭血清DHBV-DNA水平与感染前(T0)比较的抑制率与病毒对照组抑制率比较(成组t检验)。*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001。
在浓度为125μg/ml时，对2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg和HBV-DNA复制的抑制作用分别为29.8±2.3％、36.5±4.7％和30.3±8.8％，并有保肝降酶与免疫调节的作用。与模型组比较，AST、ALT明显降低，肝细胞损害明显减轻(表1，2，3)。
表1.复方贯叶金丝桃抗病毒颗粒剂对
四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用。X±SD n＝10。
组别 剂量(g/kg) Ccl4(ml/kg) ALT(u/L) AST(u/L)
生理盐水 - - 122.90±21.99 197.10±33.25
模型组 - 10.0 437.60±261.59+++ 597.60±394.42+++
速立特肝喜乐组 0.45 10.0 374.50±303.58* 427.40±292.34*
复方贯叶金丝桃 1.10 10.0 176.90±77.65*** 269.20±6.61***
抗病毒 3.30 10.0 154.60±149.3*** 253.30±118.41***
9.90 10.0 93.10±17.65*** 226.30±29.12***
+++P＜0.01与NS组比较，*p＞0.05，**p＜0.05，***p＜0.01与模型组比较。
表2.复方贯叶金丝桃抗病毒颗粒剂对D-氨基半乳糖胺
造成小鼠肝损伤的保护作用。X±SD n＝10。
组别 剂量 D-氨基半乳糖胺 ALT AST
(g/kg) (ml/kg) (u/L) (u/L)
生理盐水组 - 61.6±15.7 182.1±32.0
模型组 - 0.80 844.0±378.0+++ 1005.6±374.0+++
速立特肝喜乐组 0.45 0.80 318.7±304.1*** 389.4±320.0***
复方贯叶金丝桃 1.10 0.80 583.5±430.9* 672.3±368.6*
抗病毒颗粒 3.30 0.80 444.3±320.5** 563.9±367.6**
9.90 0.80 426.9±329.6** 457.8±201.4***
+++P＜0.01与NS组比较，*p＞0.05，**p＜0.05，***p＜0.01与模型组比较。
上述试验大鼠颗粒用量为0.75，3.00，9.00g/kg.d，小鼠用量为1.10，3.30，9.90g/kg.d，有明显保肝降酶和抗乙肝病毒作用。
表3.复方贯叶金丝桃抗病毒颗粒剂
对免疫性肝损伤的保护作用。X±SD n＝10。
组别 剂量 BCG LPS ALT AST
(g/kg) (mg/只) (μg/只) (u/L) (u/L)
生理盐水组 - 71.8±7.28 182.1±32.0
模型组 - 2 0.75 117.4±48.43+++ 322.8±155.58+++
速立特肝喜乐组 0.45 2 0.75 68.2±22.07*** 216.6±67.73*
复方贯叶金丝桃 1.10 2 0.75 81.6±26.94* 238.0±44.72*
抗病毒颗粒 3.30 2 0.75 78.5±13.41** 232.4±43.58*
9.90 2 0.75 72.4±13.70** 201.7±25.41**
+++P＜0.01与NS组比较，*p＞0.05，**p＜0.05，***p＜0.01与模型组比较。
具体实施方式 本发明所用中草药原料种类：贯叶金丝桃为藤黄科植物贯叶金丝桃的干燥全草，牛蒡子为菊科植物的干燥果实，菊苣为菊科植物毛菊苣及菊苣的地上部分，甘草为豆科植物乌拉尔甘草、胀果甘草或光果甘草的干燥根及根茎，藁本为伞形科植物藁本或辽藁本地干燥根茎及根。
实施例一 先按处方比例称取贯叶金丝桃12份、菊苣8份、牛蒡子8份、藁本6份、甘草6份、β-环糊精3份。并按以下步骤进行配制：①贯叶金丝桃粉碎成粗粒，加6倍量70％乙醇，回流3次，每次1小时，滤过，合并滤液，并减压浓缩得清膏-1，备用；②取藁本粗粉，加8倍量水浸泡4小时，蒸馏提取挥发油6小时，提取的挥发油用β-环糊精包合，冷藏，抽滤，40℃以下干燥4小时，研细，过120目筛备用，药渣再用10倍量水煮1小时，过滤，滤液与蒸馏后的水溶液合并备用；③贯叶金丝桃药渣与牛蒡子、菊苣、甘草三味混合，加10倍量水煎煮3次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与藁本煎液合并，减压浓缩至原药材量的2倍，冷却至室温，加乙醇使醇含量达50％，搅拌均匀，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，得清膏-2；④将清膏-1和清膏-2合并，混匀，加入β-环糊精包合物制成散剂。
实施例二 先按处方比例称取贯叶金丝桃12份、菊苣8份、牛蒡子8份、藁本6份、甘草6份、乳糖55份、β-环糊精2.3份。并按以下步骤进行配制：①、②、③同实施例一；④将清膏-1和清膏-2合并，混匀，加入β-环糊精包合物、乳糖制粒。
实施例三 先按处方比例称取贯叶金丝桃5份、菊苣3份、牛蒡子3份、藁本2.5份、甘草2.5份、乳糖33份、β-环糊精4份、蛋白糖1份。并按以下步骤进行配制：①贯叶金丝桃粉碎成粗粒，加8倍量60％乙醇，回流2次，每次2小时，滤过，合并滤液，并减压浓缩得清膏-1，备用；②取藁本粗粉，加10倍量水浸泡8小时，蒸馏提取挥发油8小时，提取的挥发油用β-环糊精包合，冷藏，抽滤，40℃以下干燥6小时，研细，过120目筛备用，药渣再用8倍量水煮1小时，过滤，滤液与蒸馏后的水溶液合并备用；③贯叶金丝桃药渣与牛蒡子、菊苣、甘草三味混合，加10倍量水煎煮3次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与藁本煎液合并，减压浓缩至原药材量的2倍，冷却至室温，加乙醇使醇含量达50％，搅拌均匀，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，得清膏-2；④将清膏-1和清膏-2合并，混匀，加入β-环糊精包合物、乳糖和蛋白糖制粒。
实施例四 先按处方比例称取贯叶金丝桃35份、菊苣21份、牛蒡子21份、藁本18份、甘草18份、乳糖67份、β-环糊精4.6份、蛋白糖2份。并按以下步骤进行配制：①贯叶金丝桃粉碎成粗粒，加6倍量80％乙醇，回流3次，每次1小时，滤过，合并滤液，并减压浓缩得清膏-1，备用；②取藁本粗粉，加10倍量水浸泡6小时，蒸馏提取挥发油6小时，提取的挥发油用β-环糊精包合，冷藏，抽滤，40℃以下干燥4小时，研细，过120目筛备用，药渣再用10倍量水煮1小时，过滤，滤液与蒸馏后的水溶液合并备用；③贯叶金丝桃药渣与牛蒡子、菊苣、甘草三味混合，加10倍量水煎煮3次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与藁本煎液合并，减压浓缩至原药材量的2倍，冷却至室温，加乙醇使醇含量达50％，搅拌均匀，静置24小时，滤过，减压回收乙醇，得清膏-2；④将清膏-1和清膏-2合并，混匀，加入β-环糊精包合物、乳糖和蛋白糖制粒。