植物缘紫含笑的培育和繁殖方法 所属领域：
本发明涉及生物技术领域，具体地，涉及一种从灰岩含笑与紫花含笑的杂种F1代中培育出杂交种缘紫含笑的方法，以及缘紫含笑的组培繁殖方法。
背景技术：
含笑属(Michelia L.)为古老木兰科(Magnol iaceae)植物中地重要类群，为常绿乔木或灌木，多数种类枝叶繁茂、株型优美、花色妍丽、花朵芳香，是优良的园林观赏树种。
灰岩含笑(M.calcicola)主要特征：芽密被黄褐色长绒毛；花黄色，花被片9，长4.0-4.5cm，宽1.0-1.5cm；雄蕊群黄褐色，花丝黄绿色，花药黄褐色；雌蕊群绿色，柱头褐色。
紫花含笑(M.crassipes)主要特性：芽密被红褐色或黄褐色长绒毛；花紫红色或深紫色，花被片6，长0.18-0.20cm，宽0.6-0.8cm；雄蕊群深紫色，花丝深紫色，花药深紫色；雌蕊群绿色，柱头紫红色。
迄今为止，现有技术中未有选择紫花含笑(M.crassipes)(♀)为母本，灰岩含笑(M.calcicola)(♂)为父本进行杂交育种培育新品种缘紫含笑的报道。也没有缘紫含笑的组培繁殖方法的报道。
发明内容：
本发明旨在提供一种从灰岩含笑与紫花含笑的杂种F1代中培育出杂交种缘紫含笑的方法，以及缘紫含笑的组培繁殖方法。
本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
植物缘紫含笑的培育和繁殖方法，以紫花含笑为母本，灰岩含笑为父本，在父本盛花期取半开的花，去掉花被片和雌蕊群，待花药自然裂开散出花粉时收集花粉；选取母本将开未开的花，去除花被片及雄蕊，以父本新鲜花粉授粉，然后将其套袋，1星期后去袋；待蓇葖果裂开现出鲜红色种子时，采摘果实，去除种子假种皮，进行室温湿润沙藏过冬；在第二年3-4月份取出进行常规播种，播种后获得杂种F1代幼苗并栽培，在F1代植株中选出性状为芽、花梗、嫩枝和叶柄密被红褐色绒毛，托叶痕达叶柄的1/3-2/3；淡黄色花被片6-9，外表面基部-中下部-整个花被紫色晕染，花被片尖端和边缘紫色晕染；内表面基部紫色晕染；雄蕊群紫色，具1-3个紫色瓣化雄蕊；雌蕊群绿色，柱头紫红色植株，以组织培养方法进行繁殖。
缘紫含笑的组培繁殖方法，采集当年生顶芽和侧芽为外植体，置于H+6-BA0.25mg/L+NAA0.125mg/L+KT0.1mg/L+IAA0.05mg/L上培养，诱导出的芽在H+6-BA0.3mg/L+KT0.3mg/L培养基中增殖，经过壮苗后的芽条转移到H+NAA2.8mg/L的生根培养基中诱导生根，生根苗移栽至红土∶腐殖土∶珍珠岩＝1∶1∶1的混合基质中生长。
具体实施方式：
下面用本发明的具体实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明。
实施例1：
缘紫含笑的培育方法：
本发明以紫花含笑为母本，灰岩含笑为父本进行人工杂交，培育出一系列表型变异极为丰富的杂交新品种。缘紫含笑是从灰岩含笑与紫花含笑的杂交F1代中培育出来。
父本灰岩含笑(M.calcicola)：芽密被黄褐色长绒毛；花黄色，花被片9；雄蕊群黄褐色。
母本紫花含笑(M.crassipes)：芽密被红褐色或黄褐色长绒毛；花紫红色或深紫色，花被片6；雄蕊群深紫色。
与父母本相比，缘紫含笑的主要特征为：芽密被红褐色长绒毛；花淡黄色，花被片7-9，外表面尖端和边缘紫色晕染；内表面淡黄色，基部紫色晕染；雄蕊群紫色；具瓣化雄蕊。
品种培育过程和方法(包括系谱、培育过程和所使用过的亲本或者繁殖材料的说明)
缘紫含笑是从灰岩含笑与紫花含笑的杂交F1代中选育出来，母本紫花含笑于1988年引自江西省井冈山，父本灰岩含笑于1986年引自云南省西畴县。
在父本盛花期，取半开的花，去掉花被片和雌蕊群，待花药自然裂开散出花粉；选取母本将开未开的花，去除花被片及雄蕊，以父本新鲜花粉授粉，然后将其套袋，1星期后去袋；待蓇葖果裂开现出鲜红色种子时，采摘果实，去除种子假种皮，进行室温湿润沙藏过冬；在第二年3-4月份取出进行常规播种。播种后获得杂种F1代幼苗并进行露地栽培，植株在第5年2-3月份开始开花。根据7年的栽培观察，在F1代植株中选出性状具有特异性、一致性和稳定性的植株，即缘紫含笑：其芽、花梗、嫩枝和叶柄等密被红褐色绒毛，托叶痕达叶柄的1/3-2/3；淡黄色花被片6-9，外表面基部-中下部-整个花被紫色晕染，花被片尖端和边缘紫色晕染；内表面基部紫色晕染；雄蕊群紫色，具1-3个紫色瓣化雄蕊；雌蕊群绿色，柱头紫红色；植株以组织培养方法进行繁殖。
缘紫含笑组织培养繁殖是采集当年生顶芽和侧芽为外植体，置于H+6-BA0.25mg/L(单位下同)+NAA0.125+KT0.1+IAA0.05上培养，诱导出的芽在H+6-BA0.3+KT0.3培养基中增殖倍数可达到4.5倍，且生长健壮。经过壮苗后的芽条转移到H+NAA2.8mg/L的生根培养基中诱导生根，生根率可达100％。生根苗移栽至红土∶腐殖土∶珍珠岩＝1∶1∶1的混合基质中生长，其成活率可达90％。
更具体地组培方法为：
采集缘紫含笑当年新生的顶芽或带腋芽的茎段为外植体，切成约2cm长茎段，用水冲洗2-3h后，先用75％酒精浸泡30s，再用％升汞灭菌2-5min，无菌水冲洗5-6次，然后在无菌操作台上，去除芽的外层苞片并接种到培养基H+6-BA0.25mg/L+NAA0.125mg/L+KT0.1mg/L+IAA0.05mg/L上进行诱导培养，诱导出的芽在H+6-BA0.3mg/L+KT0.3mg/L培养基中增殖壮苗，经过壮苗后的芽条转移到H+NAA2.8mg/L的生根培养基中诱导生根，根长出2cm左右，株高约3cm时，生根苗连瓶置于阴凉处适应1d，然后取出小苗用水洗净基部的培养基后，移栽至红土∶腐殖土∶珍珠岩＝1∶1∶1的混合基质中，浇透水后覆膜保温并遮光约50％，14d左右新叶开始萌发生长，此时移去塑料薄膜和遮光材料后，幼苗即逐渐生长。移载60d时的计移栽成活率达90％。株高达30cm左右时即可盆载。上述方法中所涉及到的培养基均用0.7％琼脂固化，pH5.8，以蔗糖为碳源，含糖量为2％；培养条件为：温度(25±2)℃，光照12h·d-1，光强30-40μmol·m2·s-1。
品种特异性、一致性、稳定性的详细说明：
杂交新品种“缘紫含笑”与父母本灰岩含笑和紫花含笑的性状相比，其株型、叶、毛和花等均具有明显的特异性状，其与父母本的特异性见表1。
表1“缘紫含笑”与父母本灰岩含笑和紫花含笑的性状比较
经过7年的种植、栽培和观察，“缘紫含笑”性状一致而稳定。
适宜种植的区域、环境以及栽培技术
适宜于亚热带大部分地区及温带部分地区栽培；适宜生长于酸性土壤；适宜在全光照环境下生长；耐荫，耐干旱，耐贫瘠，抗寒能力较弱；抗虫抗病性强。
采用组织培养繁殖技术，以当年新生的顶芽或带腋芽的茎段为外植体，在H培养基上诱导出不定芽，经增殖壮苗后，在适宜培养基上生根率可达100％，。组培苗移栽至红土∶腐殖土∶珍珠岩＝1∶1∶1的混合基质中，成活率可达90％。
栽培技术要点：
1、该品种采用组织培养进行繁殖，增殖培养中应注意褐化问题
2、试管苗进行移栽时特别要注意保温和保湿。
缘紫含笑属含笑属(Michelia)，是从父本灰岩含笑与母本紫花含笑的杂种F1代中选育出来。主要性状特征为：
常绿灌木，芽、花梗、叶柄及嫩枝密被红褐色长绒毛；叶片墨绿色，厚革质，托叶痕达叶柄的1/3-2/3；花期3-4月；单花期4-5d；花腋生，淡香，盛开呈杯状；花被片6-9，长2.6-3.6cm，宽0.9-2.0cm；外表面淡黄色，基部-中下部-整个花被紫色晕染，花被片尖端和边缘紫色晕染；内表面淡黄色，基部紫色晕染；雄蕊群紫色，花丝及花药紫色；具1-3个紫色瓣化雄蕊；雌蕊群绿色，柱头紫红色；心皮41-50。
缘紫含笑适宜种植区域：
适宜于亚热带大部分地区及温带部分地区栽培；适宜生长于酸性土壤；适宜在全光照环境下生长；耐荫，耐干旱，耐贫瘠，抗寒能力较弱；抗虫抗病性强。
新品种缘紫含笑主要特性：芽密被红褐色长绒毛；花被片6-9，长2.6-3.6cm，宽0.9-2.0cm；外表面淡黄色，基部-中下部-整个花被紫色晕染，花被片尖端和边缘紫色晕染；内表面淡黄色，基部紫色晕染；雄蕊群紫色，花丝及花药紫色；具1-3个紫色瓣化雄蕊；雌蕊群绿色，柱头紫红色；
父本灰岩含笑主要特性：芽密被黄褐色长绒毛；花被片黄色，9，长4.0-4.5cm，宽1.0-1.5cm；雄蕊群黄褐色，花丝黄绿色，花药黄褐色；雌蕊群绿色，柱头褐色。
母本紫花含笑主要特性：芽密被红褐色或黄褐色长绒毛；花被片紫红色或深紫色，6，长0.18-0.20cm，宽0.6-0.8cm；雄蕊群深紫色，花丝深紫色，花药深紫色；雌蕊群绿色，柱头紫红色。
新品种缘紫含笑与父母本主要区别在于：
花被片6-9，外表面淡黄色，尖端和边缘紫色晕染，偶紫色晕染由边缘和基部-中下部-整个花被；内表面淡黄色，基部紫色晕染；具瓣化雄蕊。