作为抗炎和抗癌药剂的糖皮质激素的脂肪酸脂.pdf

本发明涉及具有治疗活性的糖皮质激素的某些不饱和脂肪酸衍生物作为抗炎和抗癌药剂以及包含其的药物制剂。

1.  通式(I)的化合物

其中：
X₁和X₂独立地表示H或F；
R₁表示OH，OCH₂CH₃，OCH₂Cl，SCH₂F，CH₂OCOCH(CH₃)₂，CH₂-O-R₄或O-R₄；
R₂表示OCOEt，OCOCHCl₂，OCO₂CH₂CH₃或O-R₄；
R₃表示H，CH₃或OH；或
R₂和R₃，与其所连接的碳原子一起，形成2-R₅，R₆-1，3-二氧杂环戊烷环，其中R₅和R₆独立地表示H，C₁-C₆烷基或C₃-C₆环烷基；
R₄表示H或以下通式的C₈-C₂₄酰基
CH₃-(CH₂)_k-(CH＝CH-CH₂)_l-(CH＝CH)_m-(CH₂)_n-CO    (II)
其中k是0到10的整数，l是0到6的整数，m是0到1的整数，和n是2到7的整数；
条件是
-当X₁为F时，X₂不是H，和
-至少一个通式(II)的酰基存在于化合物中；和
-式(I)的化合物不是以下化合物之一：油酸布地奈德、棕榈酸布地奈德、亚油酸布地奈德、棕榈油酸布地奈德和花生四烯酸布地奈德；
或其药学可接受的盐。

2.  权利要求1的式(I)的化合物，
其中
X₁和X₂都表示F；
R₁表示SCH₂F；
R₂表示OCOEt或O-R₄；
R₃表示CH₃；
R₄表示H或以下通式的C₈-C₂₄酰基
CH₃-(CH₂)_k-(CH＝CH-CH₂)_l-(CH＝CH)_m-(CH₂)_n-CO    (II)
其中k是0到10的整数，l是0到6的整数，m是0到1的整数，和n是2到7的整数；
或其药学可接受的盐。

3.  权利要求1的式(I)的化合物，
其中
X₁和X₂都表示H；
R₁表示CH₂-O-R₄；
R₂和R₃，与其所连接的碳原子一起，形成2-R₅，R₆-1，3-二氧杂环戊烷环，其中R₅和R₆表示H，C₁-C₆-烷基或C₃-C₆-环烷基；
R₄表示H或以下通式的C₈-C₂₄酰基
CH₃-(CH₂)_k-(CH＝CH-CH₂)_l-(CH＝CH)_m-(CH₂)_n-CO    (II)
其中k是0到10的整数，l是0到6的整数，m是0到1的整数，和n是2到7的整数；
或其药学可接受的盐。

4.  权利要求1的式(I)的化合物，
其中
X₁和X₂都表示F；
R₁表示O-R₄；
R₂表示O-R₄；
R₃表示CH₃；
R₄表示H或以下通式的C₈-C₂₄酰基
CH₃-(CH₂)_k-(CH＝CH-CH₂)_l-(CH＝CH)_m-(CH₂)_n-CO    (II)
其中k是0到10的整数，l是0到6的整数，m是0到1的整数，和n是2到7的整数；
或其药学可接受的盐。

5.  权利要求1的式(I)的化合物，
其中
X₁和X₂都表示H；
R₁表示OCH₂Cl或O-R₄；
R₂表示OCO₂CH₂CH₃或O-R₄；
R₃表示H；
R₄表示H或以下通式的C₈-C₂₄酰基
CH₃-(CH₂)_k-(CH＝CH-CH₂)_l-(CH＝CH)_m-(CH₂)_n-CO    (II)
其中k是0到10的整数，l是0到6的整数，m是0到1的整数，和n是2到7的整数；
条件是至少一个式(II)的酰基存在于化合物中，
或其药学可接受的盐。

6.  权利要求1的式(I)的化合物，
其中
X₁和X₂都表示H；
R₁表示OCH₂CH₃或O-R₄；
R₂表示OCOCHCl₂或O-R₄；
R₃表示H；
R₄表示H或以下通式的C₈-C₂₄酰基
CH₃-(CH₂)_k-(CH＝CH-CH₂)_l-(CH＝CH)_m-(CH₂)_n-CO    (II)
其中k是0到10的整数，l是0到6的整数，m是0到1的整数，和n是2到7的整数；
条件是至少一个式(II)的酰基存在于化合物中，
或其药学可接受的盐。

7.  权利要求1-4中任一项的式(I)的化合物，其中式(II)的酰基是反油酸残基。

8.  权利要求1、2、3、4、5或6的化合物，其为：




9.  式(I)的化合物

其中：
X₁和X₂独立地表示H或F；
R₁表示OH，OCH₂CH₃，OCH₂Cl，SCH₂F，CH₂OCOCH(CH₃)₂，CH₂-O-R₄或O-R₄；
R₂表示OCOEt，OCOCHCl₂，OCO₂CH₂CH₃或O-R₄；
R₃表示H，CH₃或OH；或
R₂和R₃，与其所连接的碳原子一起，形成2-R₅，R₆-1，3-二氧杂环戊烷环，其中R₅和R₆独立地表示H，C₁-C₆烷基或C₃-C₆环烷基；
R₄表示H或以下通式的C₈-C₂₄酰基
CH₃-(CH₂)_k-(CH＝CH-CH₂)_l-(CH＝CH)_m-(CH₂)_n-CO    (II)
其中k是0到10的整数，l是0到6的整数，m是0到1的整数，和n是2到7的整数；
条件是
-当X₁为F时，X₂不是H；和
-至少一个通式(II)的酰基存在于化合物中；
或其药学可接受的盐，用于治疗癌。

10.  权利要求9的式(I)的化合物或其药学可接受的盐，其用于治疗血液癌。

11.  权利要求9的式(I)的化合物或其药学可接受的盐，其用于治疗甾族化合物耐药性癌。

12.  权利要求9的式(I)的化合物或其药学可接受的盐，其用于辅助性治疗和/或姑息性治疗。

13.  式(I)的化合物

其中：
X₁和X₂独立地表示H或F；
R₁表示OH，OCH₂CH₃，OCH₂Cl，SCH₂F，CH₂OCOCH(CH₃)₂，CH₂-O-R₄或O-R₄；
R₂表示OCOEt，OCOCHCl₂，OCO₂CH₂CH₃或O-R₄；
R₃表示H，CH₃或OH；或
R₂和R₃，与其所连接的碳原子一起，形成2-R₅，R₆-1，3-二氧杂环戊烷环，其中R₅和R₆独立地表示H、C₁-C₆烷基或C₃-C₆环烷基；
R₄表示H或以下通式的C₈-C₂₄酰基
CH₃-(CH₂)_k-(CH＝CH-CH₂)_l-(CH＝CH)_m-(CH₂)_n-CO    (II)
其中k是0到10的整数，l是0到6的整数，m是0到1的整数，和n是2到7的整数；
条件是
-至少一个通式(II)的酰基存在于化合物中；
或其药学可接受的盐用于制备用于治疗癌的药物组合物的应用。

14.  权利要求13的应用，用于制备用于治疗血液癌的药物组合物。

15.  权利要求13的应用，用于制备用于治疗甾族化合物耐药性癌的药物组合物。

16.  权利要求13的应用，用于制备用于辅助性治疗和/或姑息性治疗的药物组合物。

17.  权利要求1的式(I)的化合物或其药学可接受的盐，其用于治疗炎症。

18.  权利要求1的式(I)的化合物或其药学可接受的盐，其用于治疗甾族化合物耐药性炎症。

19.  权利要求1的式(I)的化合物用于制备用于治疗炎症的药物组合物的应用。

20.  权利要求19的应用，用于制备用于治疗甾族化合物耐药性炎症的药物组合物。

21.  权利要求1的式(I)的化合物或其药学可接受的盐用于制备用于治疗慢性阻塞性肺病COPD的药物组合物的应用。

22.  在需要治疗的受试者中治疗癌的方法，包括对所述受试者中给予治疗有效量的权利要求1的式(I)的化合物或其药学可接受的盐。

23.  权利要求22的方法，其中待治疗的病况是血液癌。

24.  权利要求22的方法，其中待治疗的病况是甾族化合物耐药性癌。

25.  在需要治疗的受试者中治疗炎症的方法，包括对所述受试者中给予治疗有效量的权利要求1的式(I)的化合物或其药学可接受的盐。

26.  权利要求25的方法，其中待治疗的病况是甾族化合物耐药性炎症。

27.  药物组合物，其包含权利要求1的式(I)的化合物和药学可接受的赋形剂、载体和/或稀释剂。

作为抗炎和抗癌药剂的糖皮质激素的脂肪酸脂
技术领域
本发明涉及具有治疗活性的糖皮质激素的某些不饱和脂肪酸衍生物以及包含其的药物制剂。所述衍生物在本说明书和权利要求书中被称为“式(I)的化合物”。式(I)的化合物可用于癌性疾病和炎性疾病的治疗。包括血液癌和实体癌以及甾族化合物耐药性癌、哮喘以及甾族化合物耐药性炎症和COPD的治疗在内。
背景技术
糖皮质激素被广泛用于治疗炎性疾病诸如哮喘、类风湿性关节炎、炎性肠病和自身免疫疾病。糖皮质激素在童年急性淋巴母细胞白血病(ALL)的治疗中也是关键药物(1)。尽管糖皮质激素在慢性炎性疾病和癌的治疗中是常用的，但是最佳效力受到固有的或获得的对该药物的耐药性的限制。甾族化合物耐药性在罹患炎性肠病的患者的处置中也是主要问题(2)。少数哮喘患者对皮质类固醇治疗不充分应答或根本不应答(3)。尽管糖皮质激素耐药性问题在例如类风湿性关节炎中可能不如在血液癌中被充分探讨，但是后两者具有共同的耐药性机制，因此在疾病治疗之后克服耐药性的策略将具有共同利益(7)。
糖皮质激素的有益效果被认为由炎性基因表达受抑所介导。它们通过与集中在细胞溶质内的单一抗体(糖皮质激素受体，GR)结合起作用。当活化时，GR移位到细胞核中，在那里GR开启(反式活化)抗炎基因或关闭(反式抑制)炎性基因(4)。基因诱导要求GR二聚和DNA结合于位于应答基因的启动子区内的特异性GR应答元件(GRE)。糖皮质激素可增加编码抗炎蛋白质如脂皮质蛋白-1和白细胞介素-10的基因的转录。糖皮质激素的最惊人的效果是抑制多种炎性基因(细胞因子、酶、受体和粘着分子)的表达。促炎细胞因子粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)是一个实例。糖皮质激素通过在活化GR和活化转录因子(诸如核因子-κB(NFκB)和活化蛋白-1(AP-1))之间的调节炎性基因表达的相互作用来介导这一抑制效果。GM-CSF在炎性疾病和自身免疫性疾病中起关键作用，并且GM-CSF贫化被确定为是单独的用于抑制疾病症状的药物靶标(8)。
由于糖皮质激素的内分泌作用和代谢作用，糖皮质激素的使用受到严重的副作用的限制(5)，大概是通过直接GR调节的靶基因的诱导型转录调节被介导。据报道的可能的副作用包括，在全身使用后骨质疏松症和下丘脑垂体-肾上腺皮质轴受抑，在吸入皮质类固醇后，在儿童中生长速度减慢，骨矿物质丧失，眼部症状和皮肤变化(6)。以组织和途径特异性方式进行的反式活化和反式抑制的调节，由于对副作用具有重要性的GR调节基因的转录调节降低，可提供治疗指数的改善并展现了具有更高的对抗炎症或癌的治疗效果和更低副作用的高选择性的新皮质类固醇(6)。
另外，糖皮质激素的抗癌效果的机制基础也确实牵涉GR与其控制细胞死亡/细胞程序死亡蛋白质的表达的靶基因的相互作用。
细胞系U937和THP1是人单核细胞/巨噬细胞并代表了用于试验产品的抗炎活性和抗癌活性的细胞系模型系统，所述细胞系也与糖皮质激素耐药性有关联，因为它们耐受由地塞米松和氢化泼尼松引起的生长抑制(7)。
共同转让的公报WO98/32718描述了可用亲脂性基团进行衍生化的肾上腺类固醇。在提到的化合物中有倍他米松、地塞米松和倍氯米松。这些被衍生化的化合物用于治疗炎症。
已描述了布地奈德的脂肪酸结合物，更具体为油酸布地奈德、棕榈酸布地奈德、亚油酸布地奈德、棕榈油酸布地奈德和花生四烯酸布地奈德。这些结合物在炎症、更具体是哮喘的治疗期间被形成，但是提到的甾族化合物的脂肪酸结合物据说是无药理学活性的类脂结合物(12)。
发明内容
本发明令人惊讶地表明糖皮质激素的某些不饱和脂肪酸衍生物显示新的和令人惊讶的治疗活性。大量的所述衍生物构成了先前未被描述的新的化合物。本发明的衍生物与先前所述的糖皮质激素衍生物相比显示增加的活性和较少的副作用，并且它们在甾族化合物耐药性系统中显示活性。
众所周知，糖皮质激素在癌性疾病和炎症的治疗中具有一席之位。固有的或获得的对糖皮质激素治疗的耐药性是公知的。已据报道，人U937和THP1单核细胞/巨噬细胞代表以对糖皮质激素地塞米松和氢化泼尼松具有固有耐药性为特征的细胞系模型系统(7)。本发明人已证实这些发现并且另外表明细胞对高效力甾族化合物丙酸氟替卡松具有交叉耐药性，直到100μM未发现活性。
正如实施例所说明的，本发明人令人惊讶地发现糖皮质激素脂肪酸衍生物在这些耐药性细胞系中具有高的抗增殖活性。这一发现使得能够实现对使用已知糖皮质激素的治疗具有耐药性的疾病的治疗。
本发明人令人惊讶地发现，使用糖皮质激素脂肪酸衍生物时，抗炎活性增加并结合与副作用有关的基因的显著活化降低。在活化肺细胞中，观察到反油酸氟替卡松衍生物对细胞因子GM-CSF释放的抑制效力比丙酸氟替卡松强22倍。同时，发现副作用降低7倍。副作用通过GRE元件的活化被表现。在这一其中活化作为副作用的量度的系统中，甾族化合物衍生物的基因活化减少85％。这些结果使相对治疗指数增加154倍。
本发明涉及式(I)的化合物

其中：
X₁和X₂独立地表示H或F；
R₁表示OH，OCH₂CH₃，OCH₂Cl，SCH₂F，CH₂OCOCH(CH₃)₂，CH₂-O-R₄或O-R₄；
R₂表示OCOEt，OCOCHCl₂，OCO₂CH₂CH₃或O-R₄；
R₃表示H，CH₃或OH；或
R₂和R₃，与其所连接的碳原子一起，形成2-R₅，R₆-1，3-二氧杂环戊烷环，其中R₅和R₆独立地表示H，C₁-C₆烷基或C₃-C₆环烷基；
R₄表示H或以下通式的C₈-C₂₄酰基
CH₃-(CH₂)_k-(CH＝CH-CH₂)_l-(CH＝CH)_m-(CH₂)_n-CO       (II)
其中k是0到10的整数，l是0到6的整数，m是0到1的整数，和n是2到7的整数；
条件是：
-当X₁为F时，X₂不是H；
-至少一个通式(II)的酰基存在于化合物中；和
-式(I)的化合物不是以下化合物之一：油酸布地奈德、棕榈酸布地奈德、亚油酸布地奈德、棕榈油酸布地奈德和花生四烯酸布地奈德；
或其药学可接受的盐。
在本发明的优选的实施方案中，式(I)化合物是以下的化合物，其中
X₁和X₂都表示F；
R₁表示SCH₂F；
R₂表示OCOEt或O-R₄；
R₃表示CH₃；
R₄表示H或以下通式的C₈-C₂₄酰基
CH₃-(CH₂)_k-(CH＝CH-CH₂)_l-(CH＝CH)_m-(CH₂)_n-CO      (II)
其中k是0到10的整数，l是0到6的整数，m是0到1的整数，和n是2到7的整数；
条件是至少一个式(II)的酰基存在于化合物中，
或其药学可接受的盐。
本发明的另一个实施方案是以下的式(I)的化合物，其中
X₁和X₂都表示H；
R₁表示CH₂-O-R₄；
R₂和R₃，与其所连接的碳原子一起，形成2-R₅，R₆-1，3-二氧杂环戊烷环，其中R₅和R₆表示H，C₁-C₆-烷基或C₃-C₆-环烷基；
R₄表示H或以下通式的C₈-C₂₄酰基
CH₃-(CH₂)_k-(CH＝CH-CH₂)_l-(CH＝CH)_m-(CH₂)_n-CO       (II)
其中k是0到10的整数，l是0到6的整数，m是0到1的整数，和n是2到7的整数；
条件是至少一个式(II)的酰基存在于化合物中，
或其药学可接受的盐。
本发明的另一个实施方案是以下的式(I)的化合物，其中
X₁和X₂都表示F；
R₁表示O-R₄；
R₂表示O-R₄；
R₃表示CH₃；
R₄表示H或以下通式的C₈-C₂₄酰基
CH₃-(CH₂)_k-(CH＝CH-CH₂)_l-(CH＝CH)_m-(CH₂)_n-CO       (II)
其中k是0到10的整数，l是0到6的整数，m是0到1的整数，和n是2到7的整数；
条件是至少一个式(II)的酰基存在于化合物中，
或其药学可接受的盐。
本发明的优选化合物为例如但不限于以下的化合物：



式(I)的化合物可用于治疗疾病。更具体地说，式(I)的化合物可用于治疗癌。在这一点，癌包括血液癌，实体癌和甾族化合物耐药性癌。所述化合物还可用于治疗炎症。更具体地说，所述化合物非常适合治疗甾族化合物耐药性炎症。式(I)的化合物还可用于治疗COPD(慢性阻塞性肺病)。
本发明的化合物比基础甾族化合物引起更低的副作用并具有更特异性的抗炎活性。
本发明的化合物在被给予到患者之前通常然而并不一定被配制成药物组合物。因此，在本发明的另一个方面，涉及包含本发明的化合物和一种或多种药学可接受的赋形剂的药物组合物。
根据所需的药物形式和所需的给药方式来选择所述的赋形剂。所述赋形剂与本发明的式(I)的化合物一起典型地被配制在适合通过预定给药途径被给予到患者的剂型中。因此，剂型包括适合以下途径的形式：(a)吸入给药，诸如气雾剂、溶液剂和干粉剂；(b)局部给药，诸如霜剂、洗剂、糊剂、膏剂、溶液剂、喷雾剂和凝胶剂；(c)静脉内给药，诸如无菌溶液剂、悬浮剂和重构用粉剂；(d)口服给药，诸如片剂、胶囊、丸剂、粉剂、糖浆剂、酏剂、悬浮剂、溶液剂、乳剂和囊剂。式(I)的化合物还可作为滴眼剂进行给药。
适合的药学可接受的赋形剂可根据特定剂型的不同而不同。药学可接受的赋形剂尤其包括以下：稀释剂，润滑剂，填充剂，崩解剂，溶剂，润湿剂，助悬剂，乳化剂，造粒剂，包衣剂，粘合剂，增香剂，掩味剂，甜味剂，增塑剂，增粘剂，抗氧化剂，稳定剂，表面活性剂和缓冲剂。某些赋形剂可发挥超过一种的功能。
适合的稀释剂和填充剂包括乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、马铃薯淀粉、玉米淀粉、预胶凝淀粉、纤维素及其衍生物。适合的粘合剂包括淀粉、胶质、阿拉伯胶树、藻酸钠、藻酸、黄蓍胶、胍尔豆胶、聚维酮和纤维素及其衍生物。适合的崩解剂包括淀粉羟基乙酸钠、藻酸、交聚维酮和羧甲基纤维素钠。
式(I)的化合物还可与用于药物受控释放的可生物降解的聚合物结合。
本发明的药物组合物可采用本领域技术人员已知的方法和技术被制备。
因此，本发明的一个方面是根据权利要求9-12所述的用于治疗癌的式(I)的化合物。
本发明的另一个方面是根据权利要求14-21所述的式(I)的化合物用于制备治疗所述疾病的药物组合物的应用。
式(I)的化合物的制备如下举例说明。
丙酸氟替卡松的11β-反油酸酯

向丙酸氟替卡松(1.02g，2.04mmol)在二氯甲烷(35ml)的溶液中加入反油酸(576mg，2.04mmol)，然后加入4-(二甲基氨基)吡啶(249mg，2.04mmol)和1，3-二环己基碳二亚胺(421mg，2.04mmol)。将得到的溶液搅拌24小时，此时TLC显示有大量的起始材料未反应。将混合物真空浓缩(～10ml溶液)并搅拌另外的140小时。将混合物进一步真空浓缩并在硅胶上用己烷/EtOAc(3∶1)洗脱进行急骤色谱纯化，得到1.23g(79％)的所需化合物，为无色油状物。
6α，9α-二氟-11β，17α-二羟基-16α-甲基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-甲酸

向二氟美松(1.19g，2.9mmol)在四氢呋喃(11ml)中的悬浮液加入高碘酸(2.25g，9.9mmol)在水(5.3ml)中的溶液。将得到的溶液在室温搅拌1小时。真空除去四氢呋喃留下含水悬浮液，将其过滤，固体用水洗涤并干燥，得到1.17g(100％)的标题化合物，为无色的固体。
6α，9α-二氟-16α-反油酰基氧基-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-甲酸

向6α，9α-二氟-11β，17α-二羟基-16α-甲基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-甲酸(1.22g，3.1mmol)和三乙胺(0.72g，7.1mmol)在丙酮(25ml)中的溶液中加入在二氯甲烷(10ml)中的反油酰氯。反油酰氯从反油酸(2.0g，7.1mmol)、草酰氯(2.6ml，30mmol)和DMF(催化量)在甲苯(45ml)中在周围温度下搅拌17小时、然后蒸干被制得。将得到的混合物在室温搅拌2小时，用二乙胺(0.97ml，9.2mmol)处理，将得到的溶液在室温搅拌另外的1.5小时。然后加入1M HCl，将混合物用二氯甲烷(3×50ml)提取。将合并的有机提取物干燥(Na₂SO₄)、过滤并真空蒸发。将粗产物溶于EtOAc，加入己烷并放入冰箱过夜。通过过滤收集获得的灰白色固体(2.07g，含一些N，N-二乙基酰胺)，干燥并直接用于下一步。将一些标题化合物(170mg)在硅胶上用己烷/EtOAc(4∶1)洗脱、然后用己烷/EtOAc/AcOH(100∶100∶1)洗脱进行急骤色谱纯化，得到123mg(72％)，为白色固体。
6α，9α-二氟-17β-(N，N-二甲基氨甲酰基硫代)羧基-16α-反油酰基氧基-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代雄甾-1，4-二烯

将在室温下的6α，9α-二氟-16α-反油酰基氧基-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-甲酸(1.9g，2.9mmol)和N，N-二甲基硫代氨基甲酰氯(0.71g，5.8mmol)在丙酮(40ml)中的溶液按序用三乙胺(0.58g，5.8mmol)、无水碘化钠(0.43g，2.9mmol)和水(0.19ml，10％w/w的甾族化合物)处理。将溶液搅拌18小时，加入水(100ml)和EtOAc(100ml)，分离各相。将有机相用1M HCl、5％的碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并真空蒸发。在硅胶上用己烷/EtOAc(3∶2)洗脱进行急骤色谱分离，得到1.55g(～70％，两步)的标题化合物，为黄色固体。
6α，9α-二氟-16α-反油酰基氧基-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羟酸(carbothioic acid)

将6α，9α-二氟-17β-(N，N-二甲基氨甲酰基硫代)羧基-16α-反油酰基氧基-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代雄甾-1，4-二烯(1.55g，2.1mmol)在二乙胺(16ml)中的溶液回流3小时。将溶液冷却到周围温度，倾入到冷的3M HCl(150ml)中并用EtOAc(2×150ml)提取。将合并的有机提取物用水和盐水洗涤，然后干燥(Na₂SO₄)、过滤并真空蒸发。粗产物(1.35g，灰白色固体)直接用于下一步。
6α，9α-二氟-16α-反油酰基氧基-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羟酸S-氯甲基酯

向6α，9α-二氟-16α-反油酰基氧基-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羟酸(1.35g，2mmol)在二氯甲烷(40ml)中的搅拌的溶液中加入三乙胺(0.28ml，2mmol)，然后加入氯碘甲烷(0.56ml，8mmol)。将得到的溶液在周围温度搅拌70小时，加入氯化铵的饱和水溶液并分离各相。水相用二氯甲烷(2次)提取，将合并的有机相干燥(Na₂SO₄)、过滤并真空蒸发。在硅胶上用己烷/EtOAc(3∶1)洗脱进行急骤色谱分离，得到1.04g(72％)的标题化合物，为无色固体。
6α，9α-二氟-16α-反油酰基氧基-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羟酸S-碘甲基酯

向6α，9α-二氟-16α-反油酰基氧基-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羟酸S-氯甲基酯(1.04g，1.4mmol)在丙酮(100ml)中的溶液中加入碘化钠(0.86g，5.7mmol)并回流22小时。将溶剂真空蒸发并将残余物溶于EtOAc中，用水、碳酸氢钠的10％水溶液、水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并真空蒸发。粗产物(1.1g)直接用于下一步。
6α，9α-二氟-16α-反油酰基氧基-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羟酸S-氟甲基酯

向6α，9α-二氟-16α-反油酰基氧基-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羟酸S-碘甲基酯(1.1g，1.35mmol)在乙腈(65ml)中的溶液中加入氟化银(1.7g，13.5mmol)并在室温下在黑暗中搅拌40小时。将混合物用EtOAc稀释并过滤通过硅藻土短筛和硅胶。滤液用水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并真空蒸发。粗产物的¹HNMR显示存在一些未反应的氯化物，重复最后两步以将氯化物完全转化为氟化物。然后将产物在硅胶上用己烷/EtOAc(3∶1)洗脱进行急骤色谱纯化，得到0.65g(46％，两步)的标题化合物，为无色固体。
实施例
以下实施例说明本发明。然而，这些实施例不被认为限制本发明的范围。
实施例1：
将U937和THP-1细胞系以每孔20000个细胞接种在96孔板中。将50μl的细胞培养基加入到每个孔中。同时，加入在5个不同浓度下的供试化合物并培养48小时。使用非放射性细胞增殖试验(Promega)研究供试化合物在这些细胞中的细胞毒性。该试验是用于确定在增殖或化学敏感性试验中的活细胞数目的比色法。其由新型的四唑化合物(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑鎓，内盐；MTS)和电子结合试剂(甲硫酸吩嗪；PMS)的溶液组成。MTS通过细胞被生物还原成可溶于组织培养基的甲产物。可以无需另外处理而从96孔试验板直接测量甲产物在490纳米的吸光度。通过在490nm的吸光度进行测量的甲臢产物的量与培养物中活细胞的数目(IC₅₀值)成正比。供试化合物是丙酸氟替卡松和反油酸氟替卡松衍生物。在该糖皮质激素耐药性细胞系中，反油酸氟替卡松具有高效力，IC₅₀值在微摩尔范围内，U937细胞最敏感。
表1