一种地西他滨冻干制剂及其制备方法 【技术领域】
本发明属于医药技术领域， 具体涉及一种地西他滨冻干制剂及其制备方法。背景技术 地西他滨 (Decitabine) 是荷兰 Pharmachemie B.V. 公司生产的抗肿瘤药物， 化学 名为 4- 氨基 -1-(2- 脱氧 -β-D- 赤型 - 呋喃核糖 )-1， 3， 5- 三嗪 -2(1H)- 酮。2006 年美国 FDA 批准其用于治疗原发性和继发性骨髓增生异常综合症， 商品名达珂 (Dacogen)， 2008 年 9 月获准在中国进口上市。达珂为冻干粉针剂， 规格 50mg， 处方组成为地西他滨、 磷酸二氢 钾、 氢氧化钠。
地西他滨略溶于水， 常温时在水中溶解度约 8-12mg/ml， 在乙醇 / 水 (50/50)、 甲醇 / 水 (50/50) 及甲醇中微溶， 在二甲亚砜 (DMSO) 中溶解。地西他滨主要杂质为 α 构型地西 他滨， 在合成过程中产生， 并且由于地西他滨在水溶液中极不稳定， 水溶液环境中的水分对 其 5- 杂氮胞嘧啶环进行亲核攻击， 使得 5- 杂氮胞嘧啶环发生断裂， 降解为 α 构型的无活 性同分异构体。地西他滨水溶液 2-8℃放置 2 小时， 水解产物增加约 2％， 室温条件下放置 2 小时， 水解产物增加近 10％， 化学稳定性较差。因此， 在含地西他滨的制剂制备过程中， 提 高地西他滨在低温水中溶解速度和保护地西他滨的稳定性尤为重要。 地西他滨制成制剂的 关键点是解决地西他滨在水中的溶解速度并缩短与水的接触时间， 提高地西他滨稳定性。
US2006128653 公开了将地西他滨和环糊精结合成包合物， 环糊精把药物包在里面 从而避免地西他滨与水接触发生降解。大量的研究证明环糊精有一定的肾毒性， 制剂中应 尽量避免使用。
CN101361718A 公开了将地西他滨均匀分散于有机溶剂中后， 再与含水溶液混 溶， 过滤， 冻干除去有机溶剂制备冻干制剂的方法。其制备工艺有机溶剂占混合总体积的 5-80％， 大量使用有机溶剂， 然后再冻干成气体排出， 对环境和冻干设备造成很大污染 ； 并 且冻干过程药物随有机溶剂飞散， 所得产品的外观呈冰晶形状或难以完全冻干， 不符合冻 干粉针剂的要求。CN101584670A 和 CN102106831A 也采用了有机溶剂用量在 5％以上来制 备地西他滨冻干粉针剂的方法， 同样存在以上不足。
CN101637458A 公开了加入冻干支撑剂并控制溶液 pH 值和温度然后冻干的方法来 制备地西他滨冻干粉针剂， 此方法未采用有机溶剂增溶， 由于地西他滨在水中的溶解度很 小， 经试验证实此方法并不能使地西他滨在冻干前完全溶解得到 25mg/ml 的溶液， 且此方 法较进口产品达珂多添加了冻干支撑剂乳糖、 甘露醇等， 增加了临床使用的安全风险。
发明内容
针对现有技术的不足， 本发明提供一种性质稳定、 工艺简单、 适合规模化生产的地 西他滨冻干剂及其制备方法。
本发明的技术方案如下 ：
一种地西他滨冻干制剂， 活性成分为治疗有效量的地西他滨 ； 冻干前溶液还含有有机溶剂、 pH 调节剂、 注射用水 ； 其特征在于， 所述的有机溶剂的用量为冻干前溶液总体积 的 0.3 ～ 4.0％， 冻干前溶液 pH 值为 6.5-7.5。
优选的， 本发明的地西他滨冻干制剂， 所述的有机溶剂选自叔丁醇、 乙醇、 甲醇、 二 甲亚砜中的一种或多种 ； 优选为乙醇。
优选的， 本发明的地西他滨冻干制剂， 所述的有机溶剂的用量为冻干前溶液总体 积的 0.3 ～ 2.0％ ； 进一步优选为 0.5 ～ 1.0％。
优选的， 本发明的地西他滨冻干制剂， 所述的 pH 调节剂选自磷酸二氢钾、 氢氧化 钠、 磷酸二氢钠、 磷酸氢二钾、 磷酸氢二钠、 磷酸、 醋酸、 盐酸、 乙酸钠、 碳酸氢钠、 碳酸氢钾中 的一种或多种。
优选的， 本发明的地西他滨冻干制剂， 冻干前溶液的 pH 值为 6.7-7.3， 进一步优选 pH 值为 7.0。
根据本发明， 上述地西他滨冻干制剂的制备方法， 包括如下步骤 ：
将地西他滨均匀分散于或溶于有机溶剂中 ； 将所得分散液或溶液转移至 0-10℃ 的溶解有 pH 调节剂的注射用水溶液中， 使地西他滨溶解完全 ； 使所述有机溶剂占混合溶液 总体积的 0.3 ～ 4.0％， 地西他滨浓度为 5-10mg/ml ； 过滤除菌， 分装于玻璃瓶冷冻干燥去除 有机溶剂及注射用水， 真空压塞或充氮气保护压塞轧铝盖密封。 以上方法制得可临床使用的、 稳定的地西他滨冻干制剂。
根据上述地西他滨冻干制剂的制备方法， 优选的， 所述的有机溶剂选自叔丁醇、 乙 醇、 甲醇、 二甲亚砜中的一种或多种 ； 优选为乙醇。
根据上述地西他滨冻干制剂的制备方法， 优选的， 所述的有机溶剂占混合溶液总 体积的 0.3 ～ 2.0％， 进一步优选所述的有机溶剂占混合溶液总体积的 0.5 ～ 1.0％。
根据上述地西他滨冻干制剂的制备方法， 所述 pH 调节剂的用量是 ： 使冻干前溶液 pH 值为 6.5-7.5 ； 优选的冻干前溶液 pH 值为 6.7-7.3， 进一步优选冻干前溶液 pH 值为 7.0。
根据本发明所述方法制备得到的地西他滨冻干制剂， 有机溶剂的残留量不超过冻 干后所得产品质量的 0.8％。
根据上述地西他滨冻干制剂的制备方法， 所述过滤除菌是用 0.45 微米和 0.22 微 米滤膜分别除菌过滤， 或者直接用 0.22 微米滤膜除菌过滤。
本发明所述的地西他滨冻干制剂， 使用时加入溶媒后配成合适浓度的注射液使 用， 在化疗治疗方案中使用安全、 方便、 便捷。
本发明人令人惊喜的发现 ： 如果将地西他滨先分散在溶液总体积 0.3 ～ 4.0％的 有机溶剂中， 再加入经过预冷的含有 pH 调节剂的水溶液中， 可加快地西他滨的溶解速度， 避免了搅拌溶解或高剪切溶解等相对溶解缓慢的溶解工艺， 避免使用冻干支撑剂， 并大大 减少了有机溶剂的使用量， 最后冷冻干燥制备成稳定的地西他滨冻干剂。
本发明提供的地西他滨冻干制剂的制备方法工艺简单、 有机溶剂的用量少， 冻干 过程中不会污染冻干设备和环境 ； 且不含有冻干支撑剂， 避免了注射用制剂的安全隐患， 保 证了产品质量。本发明的地西他滨冻干制剂物理稳定性和化学稳定性都非常好， 产品外观 为白色疏松块状物或粉末， 符合冻干剂外观的要求， 综合性能优异。 更为详细的优良效果将 在实施例中加以说明。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步详细说明， 但不限于此。
实施例 1 ：
取 9.925ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌溶解完全， 冷却至 0-10℃ ； 作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.075ml 无水乙醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸 二氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液中， 搅拌溶解完全， 调溶液 pH 为 7.0。然后用 0.45 微米和 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除乙醇和水， 充氮气保护加塞轧盖保 存。所得地西他滨冻干制剂的乙醇残留为 0.03％， 有关物质 0.35％。
实施例 2 ：
取 9.95ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌溶解完全， 冷 却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.05ml 无水乙醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸 二氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 6.9。然后用 0.22 微米 滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除乙醇和水， 充氮气保护加塞轧盖保存。所得 地西他滨制品的乙醇残留为 0.03％， 有关物质 0.35％。
实施例 3 ：
取 9.8ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌溶解完全， 冷 却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.2ml 无水乙醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸二 氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 7.2。然后用 0.45 微米和 / 或 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除乙醇和水， 真空保 护加塞轧盖保存。所得地西他滨制品的乙醇残留为 0.02％， 有关物质 0.21％。
实施例 4 ：
取 9.85ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌溶解完全， 冷 却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。 取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.15ml 无水乙醇， 搅拌 分散均匀， 转移至含磷酸二氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调 节溶液 pH 为 6.7。然后用 0.45 微米和 / 或 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷 冻干燥去除乙醇和水， 真空或充氮气保护加塞轧盖保存。所得地西他滨制品的乙醇残留为 0.05％， 有关物质 0.32％。
实施例 5 ： 取 9.75ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌溶 解完全， 冷却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.25ml 无水乙醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸 二氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 7.0。然后用 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除乙醇和水， 充氮气保护加塞轧盖保 存。所得地西他滨制品的乙醇残留为 0.03％， 有关物质 0.35％。
实施例 6 ： 取 9.7ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌溶 解完全， 冷却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.3ml 无水乙醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸二氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 6.9。然后用 0.45 微米和 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除乙醇和水， 充氮气保 护加塞轧盖保存。所得地西他滨制品的乙醇残留为 0.03％， 有关物质 0.35％。
实施例 7 ： 取 9.65ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌溶 解完全， 冷却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.35ml 无水乙醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸 二氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 7.2。然后用 0.45 微米和 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除乙醇和水， 真空保护 加塞轧盖保存。所得地西他滨制品的乙醇残留为 0.02％， 有关物质 0.21％。
实施例 8 ： 取 9.6ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌溶 解完全， 冷却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.4ml 无水乙醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸二 氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 6.7。然后用 0.45 微米和 / 或 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除乙醇和水， 真空或 充氮气保护加塞轧盖保存。所得地西他滨制品的乙醇残留为 0.05％， 有关物质 0.32％。 实施例 9 ： 取 4.95ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌溶 解完全， 冷却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.05ml 无水乙醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸 二氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 7.3。然后用 0.45 微米和 / 或 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除乙醇和水， 真空加 塞轧盖保存。所得地西他滨制品的乙醇残留为 0.03％， 有关物质 0.38％。
实施例 10 ： 取 4.97ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌 溶解完全， 冷却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.03ml 无水乙醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸 二氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 6.8。然后用 0.45 微米和 / 或 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除乙醇和水， 真空或 充氮气保护加塞轧盖保存。所得地西他滨制品的乙醇残留为 0.01％， 有关物质 0.42％。
实施例 11 ： 取 4.9625ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅 拌溶解完全， 冷却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.0375ml 叔丁醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸 二氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 7.0。然后 用 0.45 微米和 / 或 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除叔丁醇和水， 真空或充氮气保护加塞轧盖保存。所得地西他滨制品的叔丁醇残留为 0.04 ％， 有关物质 0.34％。
实施例 12 ： 取 9.95ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌 溶解完全， 冷却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.05ml 叔丁醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸 二氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 7.1。然后 用 0.45 微米和 / 或 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除叔丁醇和水，
真空或充氮气保护加塞轧盖保存。所得地西他滨制品的叔丁醇残留为 0.02％， 有关物质 0.40％。
实施例 13 ： 取 4.90ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌 溶解完全， 冷却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.10ml 叔丁醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸二 氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 7.0。然后用 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除叔丁醇和水， 真空或充氮气保护加 塞轧盖保存。所得地西他滨制品的有机残留为 0.03％， 有关物质 0.43％。
实施例 14 ： 取 9.9ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌溶 解完全， 冷却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.1ml 甲醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸二氢钾 和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 6.9。然后用 0.45 微米和 / 或 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除甲醇和水， 真空或充氮 气保护加塞轧盖保存。所得地西他滨制品的甲醇残留为 0.04％， 有关物质 0.49％。
实施例 15 ： 取 4.975ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌 溶解完全， 冷却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。 取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.025ml 二氯甲烷， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸 二氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 6.8。然后 用 0.45 微米和 / 或 0.42 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除二氯甲烷和 水， 真空或充氮气保护加塞轧盖保存。所得地西他滨制品的有机残留为 0.02％， 有关物质 0.30％。
实施例 16 ： 取 9.925ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钠和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌 溶解完全， 冷却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.075ml 无水乙醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸 二氢钠和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 7.0。然后用 0.45 微米和 / 或 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除乙醇和水， 充氮气 保护加塞轧盖保存。所得地西他滨制品的乙醇残留为 0.03％， 有关物质 0.42％。
实施例 17 ： 取 9.8ml 注射用水， 加入 110mg 醋酸钠。用醋酸调节至 pH6.5-7.5， 搅 拌溶解完全， 冷却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.2ml 无水乙醇， 搅拌分散均匀， 转移至含醋酸 钠缓冲液的预冷水溶液于中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 7.4。然后用 0.45 微米 / 和或 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除乙醇和水， 充氮气保护加塞轧盖保 存。所得地西他滨制品的乙醇残留为 0.05％， 有关物质 0.40％。
实施例 18 ： 取 9.7ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌溶 解完全， 冷却至 0-5℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.3ml 无水乙醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸 二氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-5℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 6.6。然后用 0.45 微米和 / 或 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除乙醇和水， 充氮气 保护加塞轧盖保存。所得地西他滨制品的乙醇残留为 0.07％， 有关物质 0.38％。
实施例 19 ： 取 9.97ml 注射用水， 加入 68mg 碳酸氢钠和适量氢氧化钠溶液， 搅拌溶 解完全， 使溶液 pH 在 6.5-7.5 冷却至 0-5℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.03ml 无水乙醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸 二氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-5℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 6.5。然后用 0.45 微米和 / 或 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除乙醇和水， 充氮气 保护加塞轧盖保存。所得地西他滨制品的乙醇残留为 0.02％， 有关物质 0.39％。
实施例 20 ： 取 4.8ml 注射用水， 加入 68mg 磷酸二氢钾和 11.6mg 氢氧化钠， 搅拌溶 解完全， 冷却至 0-10℃作为预冷水溶液备用。
取 50mg 地西他滨于烧杯中， 加入 0.2ml 无水乙醇， 搅拌分散均匀， 转移至含磷酸二 氢钾和氢氧化钠的预冷水溶液 (0-10℃ ) 中， 搅拌溶解完全， 调节溶液 pH 为 7.0。然后用 0.45 微米和 / 或 0.22 微米滤膜除菌过滤、 分装于玻璃瓶中， 冷冻干燥去除乙醇和水， 真空或 充氮气保护加塞轧盖保存。所得地西他滨制品的乙醇残留为 0.05％， 有关物质 0.32％。
表 1 不同方法制备地西他滨冻干制剂过程对比试验
表 2 按照实施例 1 制备地西他滨料液稳定性试验 ( 地西他滨浓度 5mg/ml)
表 3 按照实施例 1 制备出的地西他滨冻干制剂的影响因素试验
从以上表中可以看出， 本发明地西他滨冻干制剂质量稳定、 工艺简单、 冻干产品外 观符合制剂要求。10