一种可改善猪肉品质、风味的饲用乳酸菌制剂的制备及应用方法.pdf

本发明公开了一种可改善猪肉品质、风味的饲用乳酸杆菌制剂的制备方法及其应用方法，通过使用一种或多种乳杆菌，包括植物乳杆菌、发酵乳杆菌，通过复合静态发酵，或者分别独立发酵，然后制成的菌水和干粉菌，菌水通过万分之五到百分之二在猪饮水中添加，干粉菌通过万分之五到百分之二在饲料中添加两种方式，使两种活菌进入猪的肠道，影响猪的消化代谢。该项技术措施在猪出栏前至少要连续使用45天以上，从50kg或以前开始使用。提高猪的免疫力，大幅减少或避免使用抗生素，从而实现猪肉产品无药残；同时使猪肉味道出现明显的鲜甜味，明显区别于目前市场普通猪肉的味道。

1.  一种可改善猪肉品质、风味的饲用乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于，它包括如下方法步骤：
a、活化菌种，取一种或多种乳酸杆菌菌种，采用活化用培养基，在培养温度为28～40℃环境下，斜面活化培养24～48小时；
b、放大培养，将活化的菌种放入装有液体培养基的三角瓶中液体发酵，放大培养时间为24～48小时，培养温度28～40℃；
c、生产培养发酵，将放大培养液100ml，接种到25升培养液中，培养温度28～40℃，24～48小时静态培养，直至PH值降到3.5以下；
d、制备活菌制剂，包括制成液体和干粉两种形态，在方法步骤c过程的生产液体发酵后，单一菌时取培养液上清液部分即为菌水产品；多种菌时，取培养液上清液部分等量混合即为菌水产品；
e、将所述菌水产品，以10～40升，加到100公斤有机固体载体中，搅拌均匀，然后在45℃以下干燥至水分含量10％以下，粉碎，包装即成所需要的菌粉产品。

2.  根据权利要求1所述的一种可改善猪肉品质、风味的饲用乳酸杆菌制剂的制备方法，其特征在于：所述乳杆菌包括一植物乳杆菌，Lactobacillus plantarum CGMCC 1.0557，一发酵乳杆菌Lactobacillusfermentumd CGMCC 1.1880，植物乳杆菌活化温度30±2℃，培养48小时；发酵乳杆菌活化温度38±2℃，培养48小时。

3.  根据权利要求1所述的一种可改善猪肉品质、风味的饲用乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于：所述活化用培养基采用0006液体培养基，该培养基按以下制得：在1L蒸馏水中加入酪蛋白胨9～11g，牛肉膏9～11g，酵母提取物4～6g，葡萄糖4～6g，乙酸纳4～6g，柠檬酸二胺2～3g，吐温800.5～1.5g，K₂HPO₄1～2g，MgSO₄.7H₂O 0.1～0.3g，MnSO₄.H₂O 0.04～0.06g，CaCO₃19～21g，琼脂10～13g；混合溶解，调PH值至6.5～6.9。

4.  根据权利要求1所述的一种可改善猪肉品质、风味的饲用乳酸杆菌制剂的制备方法，其特征在于：在所述方法步骤b的活化菌种在三角瓶放大培养过程中，采用的液体培养基按以下制得：在25L的蒸馏水中加入酪蛋白胨9～11g，牛肉膏9～11g，酵母提取物4～6g，葡萄糖4～6g，乙酸纳4～6g，柠檬酸二胺2～3g，吐温80 0.5～1.5g，K₂HPO₄ 1～2g，MgSO₄.7H₂O0.1～0.3g，MnSO₄.H₂O 0.04～0.06g，CaCO₃ 19～21g，混合，调PH值至6.5～6.9。

5.  根据权利要求1所述的一种可改善猪肉品质、风味的饲用乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于：在所述方法步骤c的生产培养发酵过程，培养液按以下制得：在25L的纯净水中加入脱脂大豆粉78～82g，蔗糖19～22g，柠檬酸二胺1～3g，K₂HPO₄ 1～3g，MgSO₄.7H₂O 0.1～0.3g，MnSO₄.H₂O 0.04～0.06g，CaCO₃ 18～22g，调PH值至6.5～6.9。

6.  根据权利要求1所述的一种可改善猪肉品质、风味的饲用乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于：在所述方法步骤d的制备活菌制剂过程中，有机固体载体采用饲料原材料或是沸石、麦饭石、碳酸钙粉末，该有机固体载体在接种前经灭菌处理，水分含量10％以下。

7.  根据权利要求1所述的一种可改善猪肉品质、风味的饲用乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于：在所述方法步骤d的制备活菌制剂过程中，得到菌水活菌数CFU为5×10⁸/ml，PH为2.5-4.5之间；菌粉为100％过60目的粉末，活菌数CFU＞10⁸/g。

8.  一种权利要求1～6所述的一种可改善猪肉品质、风味的饲用乳酸菌制剂的应用方法，其特征在于，它是在猪出栏前不低于45天内，每次在猪的饲料中以万分之五到百分之二的比例添加菌粉，在猪的饮用水中以万分之五到百分之二的比例添加菌水，供猪采食和饮水。

一种可改善猪肉品质、风味的饲用乳酸菌制剂的制备及应用方法
技术领域
本发明涉及生物制品技术领域，更具体的是涉及微生物技术在动物养殖业中的应用。
背景技术
现代畜牧业发展通过遗传育种、疾病控制、营养饲养三方面技术进步使养猪业的生长效率大大提高，从传统的一年生长期，到现在的150天达100公斤以上，饲料系数从5∶1发展到今天的2.8∶1左右。在多数国家消除了猪肉稀缺供应的状态，解决了一个供给数量的问题。但产量高了、生长周期短了，味道差了，用药多了、药物残留多了，吃猪肉不安全了，质量下降了。这个问题在中国尤为突出。
为解决药物残留问题，各国政府、机构出台了大量的法规，限制和禁止抗生素在养猪、饲料中的滥用。中国严禁人畜抗生素共用；规范了饲料药物添加剂的使用目录；规定处方兽药不得在商品饲料中添加，只能现场用药；所有兽药生产企业必须通过GMP验收；从2006年1月1日开始，欧盟全面禁止在饲料中添加抗生素。
为解决猪肉味道衰减问题，时尚起吃土猪肉、不喂饲料的猪等。
在技术研究领域就改善现代猪肉风味有以下措施：
1、延长饲养期：目前通常的养殖技术的一个目的就是提早出栏，提高生长速度，研究证明，随增长速度的提高、养殖期的缩短而味道衰退；但延长饲养期措施却减低了养殖场的生产效率、经营效益。
2、采用放养养殖方式：该方式虽然一定程度改善了味道，但其生产效率低下，与环保、现代养殖业发展方向背道而驰。
3、通过育种措施，增加土猪的遗传因素：该措施还没有肯定的改善风味的效果，没有得到育种界的研究确认。
4、补充鲜绿饲料、减少配合干粉饲料使用：该方法改善风味效果肯定，但对于大规模工厂化养殖场而言，没有可行性，不利于机械化自动化操作，青绿饲料也不利保存、运输，养殖饲料成本、猪场劳务成本也大幅提高。
5、添加专门改善风味的中草药饲料添加剂等。近年来在这方面的研究工作很多，很多有效果的研究结果。但中草药的添加量大，价格高、有效成分不明确，是这个发展方向的严重障碍。
使用微生物技术养猪，是一项有几十年历史的技术措施，早期的发酵饲料和目前的益生菌产品研究和应用都是这方面的具体发展。啤酒酵母、枯草芽孢杆菌、乳酸菌在养猪上都有使用。但什么样的乳酸菌在猪肉味道改善方面？有什么效果？如何才能产业化生产？在研究和发明的报道中还很少。
发明内容
本发明的目的就是为了解决现有技术之不足而提供的一种能保留现代畜牧业的高效率、高产量的同时，通过现代微生态生物技术能解决猪肉风味缺失、药物残留的问题的饲用乳酸菌制剂的制备方法。
本发明的另一目的是提供该饲用乳酸菌制剂在养殖场的应用方法。
本发明是采用如下技术解决方案来实现上述目的：一种可改善猪肉品质、风味的饲用乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于，它包括如下方法步骤：
a、活化菌种，取一种或多种乳酸杆菌作为母菌，采用活化用培养基，在培养温度为28～40℃环境下，斜面活化培养24～48小时；
b、放大培养，将活化的菌种放入装有液体培养基的三角瓶中液体发酵，放大培养时间为24～48小时，培养温度28～40℃；
c、生产培养发酵，将放大培养液各100ml，接种到25升培养液中，培养温度28～40℃，48小时静态培养，直至PH值降到3.5以下；
d、制备活菌制剂，包括制成液体和干粉两种形态，在方法步骤c过程的生产液体发酵后，单一菌时取培养液上清液部分即为菌水产品；多种菌时，取培养液上清液部分等量混合即为菌水产品；
e、将上述菌水产品，以10～40升，加到100公斤有机固体载体中，搅拌均匀，然后在45℃以下干燥至水分含量10％以下，粉碎，包装即成所需要的菌粉产品。
作为上述方案的进一步说明，所述乳酸杆菌包括一株植物乳杆菌，Lactobacillus plantarum CGMCC 1.0557，一株发酵乳杆菌Lactobacillusfermentumd CGMCC 1.1880，植物乳杆菌活化温度30±2℃，培养48小时；发酵乳杆菌活化温度38±2℃，培养48小时。
所述活化用培养基采用0006液体培养基，该培养基按以下制得：在1L蒸馏水中加入酪蛋白胨9～11g，牛肉膏9～11g，酵母提取物4～6g，葡萄糖4～6g，乙酸纳4～6g，柠檬酸二胺2～3g，吐温80 0.5～1.5g，K₂HPO₄ 1～2g，MgSO₄.7H₂O 0.1～0.3g，MnSO₄.H₂O 0.04～0.06g，CaCO₃ 19～21g，琼脂10～13g；PH值至6.5～6.9。
在所述方法步骤b的活化菌种在三角瓶放大培养过程中，采用的液体培养基按以下制得：在25L的蒸馏水中加入酪蛋白胨9～11g，牛肉膏9～11g，酵母提取物4～6g，葡萄糖4～6g，乙酸纳4～6g，柠檬酸二胺2～3g，吐温80 0.5～1.5g，K₂HPO₄ 1～2g，MgSO₄.7H₂O 0.1～0.3g，MnSO₄.H₂O 0.04～0.06g，CaCO₃ 19～21g，混合，调PH值至6.5～6.9。
在所述方法步骤c的生产培养发酵过程，培养液按以下制得：在25L的纯净水中加入脱脂大豆粉78～82g，蔗糖19～22g，柠檬酸二胺1～3g，K₂HPO₄ 1～3g，MgSO₄.7H₂O 0.1～0.3g，MnSO₄.H₂O 0.04～0.06g，CaCO₃18～22g，调PH值至6.5～6.9。
在所述方法步骤e的制备活菌制剂过程中，有机固体载体采用饲料原材料、或是沸石、麦饭石、碳酸钙粉末，该固体载体在接种前经灭菌处理，水分含量10％以下。
在所述方法步骤d的制备活菌制剂过程中，得到菌水活菌数CFU为5×10⁸/ml，PH为2.5-4.5之间；菌粉为100％过60目的粉末，活菌数CFU＞10⁸/g，粉末粒度为100％过60目。
本发明的饲用乳酸菌制剂的应用方法，其特征在于，它是在猪出栏前使用时间不低于45天内，在猪的饲料中以万分之五到百分之二的比例添加菌粉，在猪的饮用水中以万分之五到百分之二的比例添加菌水，供猪采食和饮水。
采用本专利技术解决方案所能达到的有益效果是：
1、本发明采用乳杆菌中的植物乳杆菌、发酵乳杆菌，或两者配合同时使用，通过饲料和饮水，用到动物体内；它能排斥、抑制肠道有害菌的生长、尤其是肠道后端的腐败杆菌的生长，从而减少肠道中由于微生物发酵产生的有害化学物质，乳杆菌的代谢产物，为低分子有机酸、游离的氨基酸等，进入血液和机体，改善猪肉的风味。
2、成本低、使用方便，本发明的产品按目前市场原料价格，每头猪从50公斤开始使用，每头猪的成本不高于8元人民币，但可节省抗生素使用成本20元左右，节省饲料费用10.5元。
3、生产效益高，使用本发明的产品饲养的猪，猪肉价格由于味道明显优于一般猪肉，在广州、香港的售价是一般猪肉的两倍，每头猪按当前的市价，多盈利1000元以上。
4、猪肉食物安全，猪发病率降低，猪很少、甚至不要使用抗生素，所以猪肉中没有抗生素残留，大大提高了猪肉及其加工产品的安全性。
具体实施方式
本发明一种可改善猪肉品质、风味的饲用乳酸菌制剂的制备及应用方法，具体表现为：
实施例1
(1)活化菌种；
使用两株乳杆菌：一株植物乳杆菌，Lactobacillus plantarum CGMCC1.0557，一株发酵乳杆菌Lactobacillus fermentumd CGMCC 1.1880。
将冻干菌种，以斜面培养活化，植物乳杆菌活化温度30±2℃，培养48小时；发酵乳杆菌活化温度38±2℃，培养48小时；活化用培养基为：


(2)采用液体培养基，在三角瓶中，两菌种分别放大培养，培养48小时；植物乳杆菌发酵温度30±2℃；发酵乳杆菌发酵培养温度38±2℃；所用培养基配方如下：