具有降血糖作用的绿茶提取物及其制备方法 【技术领域】
本发明涉及一种中草药的提取物，特别是涉及具有降血糖作用的绿茶提取物及其制备方法。
背景技术
茶多糖，也叫茶叶多糖，外文名称为Tea polysaccharides，缩写TPS或者TP，系由天然植物茶树的叶、枝、根等部位提取分离出来的复合多糖，它是茶叶中的主要有效成分之一，茶多糖平均相对分子质量均在104～105数量级。
茶多糖具有降血糖、降血脂、抗凝血、抗血栓、降血压、耐缺氧、增加冠状动脉血流量、防辐射、增强机体免疫力、抗炎、抗癌等多种功效，尤其是显著的降血糖效果和免疫活性，可望成为预防治疗糖尿病及心血管疾病，增加免疫功能的天然药物。茶多糖的提取是其分离纯化的第一步，直接影响得率和生物活性。而国内的研究目前集中在提取后续的分离纯化方面。
【发明内容】
为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种具有降血糖作用的绿茶提取物及其制备方法，以确定茶多糖提取的最佳条件。
本发明是通过以下技术方案来实现的：一种具有降血糖作用地绿茶提取物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：将茶叶粉碎，按茶∶水比＝1∶10-1∶40的比例将茶叶与水混合，在30-70℃温度下浸提1.5-2.5小时，过滤，调节pH至中性，45℃下减压浓缩，3倍乙醇沉淀，离心，沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚交替洗涤2次，冷冻干燥，即可获得TPS。
前述一种具有降血糖作用的绿茶提取物的制备方法，其特征在于所述茶水比优选1∶10-1∶20。
前述一种具有降血糖作用的绿茶提取物的制备方法，其特征在于所述提取温度优选30-55℃。
前述一种具有降血糖作用的绿茶提取物的制备方法，其特征在于所述用于沉淀的乙醇浓度为95％。
本发明的有益效果是：本发明提取了高纯度的绿茶多糖，并有效避免其成分的破坏，具有很好的抗血糖作用。
【具体实施方式】
下面将结合附图，详细说明本发明的具体实施方式：
1、材料
绿茶(由湖北宣恩县香树林有机茶厂提供)
实施例1TPS提取与分离
茶叶→粉碎(茶∶水＝1/20)→55℃浸提2.0小时→过滤→调pH值6.5→45℃下减压浓缩→3倍95％乙醇沉淀→离心→沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚交替洗涤2次→冷冻干燥(不脱蛋白即为粗多糖，脱蛋白即为纯化多糖)。
实施例2提取物的分析
1、糖含量：蒽酮比色法，实施例1所得茶多糖的含量经检测为21.47％。
2、蛋白质含量：考马斯亮蓝G-250比色法检测实施例1的所得提取物的蛋白含量为9.45％(n＝3)。
3、TPS活性：采用D-脱氧核糖-铁体系法；将提取的TPS配制成5mg/ml溶液，采用黄嘌呤氧化酶法测定3次以类SOD活力NU/ml表示对-OH自由基清除率的大小，结果见表1。
实施例3
糖尿病DM小鼠模型的建立：选择健康雄性昆明小鼠体重18只22g分笼标记称重禁食24-28h后按200mg/(kg bw)剂量腹腔注射四氧嘧啶，72h后选择尿糖出现“+++”以上且连续出现多食、多饮、多尿症状者为DM小鼠模型。
降血糖试验将实验型DM小鼠随机分成4组，即阳性对照组(DM)、试验组，同时设正常对照组(control)。模型对照组灌胃生理盐水，试验组灌胃TPS，设100mg·kg-1·d-1、300mg·kg-1·d-1、600mg·kg-1·d-1三个剂量，阳性对照组(XKW)灌胃消渴丸0.84g·kg-1·d-1剂量换算期间自由饮水和摄食试验期限1周。
血糖测定试验终期眼眶采血以葡萄糖氧化酶法测血糖(BG)，可知DM小鼠经不同剂量TPS灌胃1w后血糖含量均极显著降低，在各实验组以高剂量组效果最显著，降血糖效果明显优于消渴丸(主要是由黄芪、生地黄、天花粉、葛根、五味子、山药和优降糖)，见表2。
表2
100mg·kg-1·d-1， 300mg·kg-1·d-1 600mg·kg-1·d-1 正常对照组 6.97±0.43 6.97±0.43 6.97±0.43 阳性对照组 20.73±2.89 20.73±2.89 20.73±2.89 绿茶组 12.11±2.60 10.69±3.96 10.08±3.21
以上已以较佳实施例公开了本发明，然其并非用以限制本发明，凡采用等同替换或者等效变换方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。