灵芝提取物及其制药用途 技术领域 本发明涉及灵芝提取物及其制品用途。具体涉及一种灵芝孢子粉的脂溶性提取 物, 还涉及所述提取物的制备方法, 提取物的各种剂型的制备方法、 及其在制备老年痴呆、 帕金森、 亨廷顿舞蹈病、 脑瘫, 中风偏瘫后遗症、 或、 脑外伤后遗症的保健品、 药物上的应用。
背景技术 随着老年化时代的到来, 各种中枢神经退行性疾病的发病率逐渐增加, 西医认为 这些疾病包括 : 阿尔茨海默症和帕金森症、 学习记忆衰退以及脑衰老引起严重的老年性失 眠症等疾病, 临床表现是痴呆、 运动失调、 记忆减退、 肌肉震颤。 虽然, 西医采用他可林、 加兰 他敏、 依斯的明来治疗阿尔茨海默症等, 采用安坦、 左旋多巴等来治疗帕金森症 ; 用神经生 长因子来促进神经干细胞的增殖, 但是, 中枢神经变行性疾病病程呈进行性, 一般为 2-8 年, 长期西药具有一定的毒副作用。因 此, 对于治疗中枢神经变行性疾病的中药的开发成为了研究的热点, 人们希望开发出能降 低西药毒副作用且可长期服用的中药。
目前, 已经有文献报道, 灵芝提取物用于开发治疗中枢神经退行性疾病的药物。 但 是, 现有的灵芝孢子油的制备方法会导致灵芝孢子油受热氧化变质, 而且步骤冗长, 容易产 生溶剂残留, 成本高, 难以工业化推广应用, 因此, 这些制备方法限制了灵芝提取物的进一 步开发利用。
灵芝是中医药学宝库中的珍品, 灵芝子实体在我国作为药物应用已有悠久的历 史。灵芝孢子 (Spores of Ganoderma lucidum) 是灵芝发育后期弹射释放出来的种子, 生 物学上称作担孢子, 集中起来呈粉末状, 通称灵芝孢子粉。 灵芝孢子粉在自然环境下收集非 常困难, 大约 1000 公斤灵芝才能收集到 1 公斤孢子粉 , 因此十分珍贵。近年来, 随着灵芝 人工栽培技术的发展, 规模性收集灵芝孢子的难题已基本得以解决。
灵芝孢子粉内含有丰富的多糖、 多肽、 三萜类、 有机锗等成分。现代药理和临床证 明灵芝孢子粉具有降血糖、 抗肿瘤、 抗衰老、 调节机体免疫功能等多方面的作用 ; 对于治疗 慢性肝炎、 消除化学药物对肝脏的损害、 防止组织纤维化以及在糖尿病的治疗中均表现出 良好效果。
灵芝孢子一般呈淡褐色至黄褐色 , 卵形 , (8. 5~11. 2)μm×(5.2~6.9)μm, 内 含油滴。灵芝孢子油是从灵芝孢子中提取的脂质活性物 , 通常每 20 g 灵芝孢子粉才能萃 取出 1 g 灵芝孢子油。灵芝孢子油集中了灵芝孢子中的三萜类、 核苷类及部分多糖类化合 物 , 是灵芝孢子有效成分的集合体。
近年来 , 灵芝孢子油产品已成为高档保健品中的珍品, 具有十分重要的利用价值 和经济价值。灵芝孢子油对于提高机体免疫力、 耐缺氧能力、 降低胆固醇等方面有明显作 用。最新研究表明 , 灵芝孢子油中的脂质活性物质还具有显著的抑制肿瘤和抗艾滋病毒的 活性。
灵芝孢子粉脂溶性成分的定量分析结果表明 , 不饱和脂肪酸总量为 73. 6%, 其中 主体成分油酸 (C18 ∶ 1)、 亚油酸 (C18 ∶ 2) 和棕榈酸 (C16 ∶ 0) 的等含量分别为 57. 5%、 13. 4% 和 19. 6%; 不饱和脂肪酸十六碳烯酸 (C16 ∶ 1) 和亚麻酸 (C18 ∶ 3) 的含量分别为 2. 2% 和 0.5%。因此, 灵芝孢子粉脂溶性成分容易氧化变性, 也容易在提取过程中被破坏。
现有的灵芝孢子油的制备方法的缺点 灵芝子实体成熟时释放出来的灵芝孢子 , 其有效成分的含量高出灵芝 75 倍 , 而一般 所能采集到的数量仅为灵芝实体的 1%。 由于它具有一层坚硬的几丁质外壳 , 其中的有效成 分难以被人体吸收利用。试验证明服用未破壁的孢子 , 只有 12% 左右的有效成分能被人体 吸收 , 而破壁灵芝孢子的有效成分吸收率在 95% 以上。
目前灵芝孢子破壁的技术有挤压法、 高压均质法、 超声波, 微波加热法等, 这些破 壁方法会造成散热困难, 导致灵芝孢子油受热氧化变质, 从而降低了灵芝孢子油及其制剂 的生理活性, 不利于灵芝孢子油的开发利用。
发明内容 本发明提供灵芝孢子粉的脂溶性提取物、 制备方法、 提取物的各种剂型的制备方 法, 灵芝孢子粉的脂溶性提取物在制备老年痴呆、 帕金森、 亨廷顿舞蹈病、 脑瘫, 中风偏瘫后 遗症, 或脑外伤后遗症的保健品、 药物上的应用。
本发明的创造性的特点是 : 本发明不以市场销售的灵芝孢子破壁粉为原料, 而是以灵芝孢子粉为原料, 在破壁的 过程中, 在酶溶液中添加表面活性剂, 提高了破壁效率。
本发明在提取过程中, 在醇-水的混合溶液中添加表面活性剂, 提高了提取效率, 而且避免了加热对灵芝孢子粉脂溶性成分的氧化破坏。
本发明采用如上步骤, 以保证原料中脂溶性成分的含量处于较高的水平。
本发明的表面活性剂毒性低, 广泛用于食品、 医药行业。表面活性剂的亲水亲油 平衡值在 11 - 22, 容易溶解在水中, 不容易溶解在油中, 因此, 本发明先回收乙醇等有机溶 剂, 再通过油水分离的方式, 使得表面活性剂富集溶解在水中, 表面活性剂不会残留到脂溶 性成分中 , 不会影响到本发明灵芝孢子脂溶性成分的安全性。
本发明采用搅拌、 渗漉等方式, 使得灵芝孢子破壁粉充分接触混合溶剂, 并且控制 较低的温度, 不会使得灵芝孢子脂溶性成分受热氧化破坏。
本发明采用搅拌、 渗漉等方式提取灵芝孢子脂溶性成分, 在搅拌釜、 或、 渗漉桶中 进行, 能用于工业化生产, 而且有机溶剂回收, 不会造成环境污染和浪费。
本发明将灵芝孢子脂溶性成分制成软胶囊, 服用方便, 易于保藏, 不易变质。
本发明的技术方案是 : 灵芝提取物, 由下述方法制备获得 : 以灵芝孢子粉为原料, 采用非离子型表面活性剂、 活性酶的方法进行破壁, 冻干, 取灵 芝孢子破壁粉, 在醇 - 水的混合溶剂中, 加入亲水亲油平衡值在 11 - 22 的表面活性剂 , 充 分接触, 离心, 过滤, 得到灵芝孢子脂溶性成分。
灵芝孢子粉的破壁的制备方法 在破壁时, 非离子型表面活性剂、 活性酶都溶在醇 - 水的混合溶剂中。
在破壁时, 活性酶是果胶酶和纤维素酶 在破壁时, 采用的非离子型表面活性剂是吐温 -80, 浓度是 0.1 - 10%, 优选是 1%。吐 温 -80 : 具有低毒的特点, 广泛用于医药工业、 食品工业以及生化实验, 不会造成残留物对 人体的毒性。吐温 -80 是非离子表面活性剂, 本身不带电荷 , 不与酶蛋白结合 , 也不会使 酶失活。
在破壁时, 醇 - 水的混合溶剂中的醇是 : 乙醇、 丙二醇。醇的浓度是 1 - 20%, 优选 是 10%。
在破壁时, 活性酶是果胶酶、 纤维素酶, 果胶酶用量是 1000-20000IU/g 灵芝孢子, 优选是 8000 IU/g 灵芝孢子 纤维素酶用量是 1000-20000IU/g 灵芝孢子, 优选是 5000 IU/g 灵芝孢子 在破壁时, 酶解温度 25-50℃、 优选是 35℃、 在破壁时, 酶解 pH 值 6.0-8.0, 优选是 7.5, 在破壁时, 酶解时间 1.0-5 小时, 优选是 3 小时。
在灵芝孢子粉的破壁之后, 提取脂溶性成分的方法是 在破壁之后, 提取灵芝孢子脂溶性成分, 在破壁之后, 提取时, 在醇 - 水的混合溶剂中, 醇是乙醇, 乙醇 -- 水的体积比例是 : (1-10) (1-10) : : 乙醇 -- 水的体积比例优选是 : 4: 6 在乙醇 - 水的混合溶剂中, 优选的可以加入石油醚 - 乙酸乙酯, 形成石油醚 - 乙酸乙 酯 - 乙醇 - 水的混合溶剂, 石油醚 - 乙酸乙酯 - 乙醇 - 水的体积比例是 : (1-10) (1-10) : (7-70) : (1-90) : 石油醚 - 乙酸乙酯 - 乙醇 - 水的优选体积比例是 : 5: 15 : 25 : 55 提取时, 亲水亲油平衡值在 11 - 22 的表面活性剂是, 十二烷基磺酸钠、 吐温 -20、 吐 温 -40、 吐温 60、 或、 吐温 -80, 卖泽 35, 卖泽 49, 卖泽 52, 优选是吐温 -80 亲水亲油平衡值在 11 - 22 的表面活性剂的用量是混合溶剂的 0.1 - 5%, 优选是 1%。
充分接触时间是 1 - 6 小时, 优选是 2 小时 灵芝孢子破壁粉充分接触混合溶剂的方式是 : 搅拌、 回流、 渗漉、 超声、 微波、 或、 柱层 析。 优选的是搅拌、 渗漉。 温度是 15-40℃、 优选是 30℃、 时间是 6-24 小时, 优选是 12 小时。
滤液回收有机溶剂后, 从水中析出灵芝孢子脂溶性成分, 表面活性剂溶解在水中, 用水洗除去掉灵芝孢子脂溶性成分中残存的表面活性剂,得到灵芝孢子脂溶性成分。
因此, 综合以上灵芝孢子粉的破壁的方法和提取脂溶性成分的方法, 本发明的灵 芝孢子粉脂溶性成分的提取方法具体是如下两种, 在果胶酶和纤维素酶的乙醇-水的混合溶液中, 溶解吐温 -80, 以该混合溶液处理灵 芝孢子粉, 使得灵芝孢子粉破壁, 冻干, 取灵芝孢子破壁粉, 在乙醇 - 水的混合溶剂中, 加 入吐温 -80, 充分接触, 离心, 过滤, 滤液回收乙醇后, 从水中析出灵芝孢子脂溶性成分, 吐 温 -80 溶解在水中, 用水洗除灵芝孢子脂溶性成分中残存的吐温 -80, 得到灵芝孢子脂溶 性成分。
吐温 - 80 溶解于果胶酶和纤维素酶的混合溶液中, 以该混合溶液处理灵芝孢子粉, 使得灵芝孢子粉破壁, 冻干, 取灵芝孢子破壁粉, 在石油醚 - 乙酸乙酯 - 乙醇 - 水的混合 溶剂中, 加入吐温 -80, 充分接触, 离心, 过滤, 滤液回收石油醚 - 乙酸乙酯 - 乙醇后, 从水中 析出灵芝孢子脂溶性成分, 吐温 -80 溶解在水中, 用水洗除灵芝孢子脂溶性成分中残存的 吐温 -80, 得到灵芝孢子脂溶性成分。
本发明对灵芝孢子粉脂溶性成分, 采用软胶囊、 冻干粉等两种剂型, 它们的制剂方 法分别是 : 灵芝提取物的软胶囊的制备方法是 在高压均质设备中, 30 ~ 35℃, 对 5 重量份灵芝孢子脂溶性成分进行均质, 得芯液 ; 取明胶 100 重量份和水 100 重量份放入容器中, 加热至 80 ~ 90℃, 不断搅拌使之溶解, 然后加入甘油 40 重量份、 聚乙二醇 10 重量份继续搅拌, 完全溶解, 停止加热, 自然冷却至室 温, 得到软胶囊材 ; 在软胶囊压制机上压制将芯液和软胶囊材, 清洗, 干燥, 得软胶囊, Co60 辐照灭菌处 理, 成产品。
灵芝提取物的冻干粉的制备方法是 : 灵芝孢子脂溶性成分先在 -45℃预冻 2 - 4 小时, 然后在 -45℃~ 10℃条件下减压真空干燥 24 - 28 小时, 最后在 30℃干燥 6 - 8 小 时。 灵芝孢子脂溶性成分可制备成各种形式的组合物, 具体剂型可选自注射剂、 口服 液、 片剂、 胶囊剂、 颗粒剂、 气雾剂、 粉雾剂、 喷雾剂、 贴剂, 缓释制剂、 固体分散体等剂型达到 长效或速效, 并提高吸收的效果。
本发明的灵芝孢子粉脂溶性成分, 用于制备治疗老年痴呆、 帕金森、 亨廷顿舞蹈 病、 脑瘫, 中风偏瘫后遗症、 或、 脑外伤后遗症的药物上的应用。
本发明的技术方案包括但是不限制于以上技术, 当然包括了本领域常规的提取方 法、 制剂方法、 辅料的选择。
具体实施例
实施例 1 灵芝孢子破壁粉的制备 : 取 100g 灵芝孢子粉, 在 10% 乙醇 - 水的混合溶剂 1000ml 中, 充分搅拌, 浸泡 3 小时, 使 孢子吸水膨胀, 外部组织软化, 加入 8000 IU/g 果胶酶、 5000 IU/g 纤维素酶, 1% 吐温 -80, 酶解温度 35℃, pH7.5, 酶解时间 3 小时, 离心, 过滤, 冻干, 得到灵芝孢子破壁粉。
冻干好的孢子粉成团粒状、 棕色, 备用。
实施例 2 灵芝孢子破壁粉的检测 : 在面积为 lmm2, 深度为 1.10mm 的计数盘。 中央 1 个大方格用双线划分为 25 个中方格 , 每个中方格又划分为 16 个小方格 , 供计数之用。
计数方法 用电光分析天平 ( 精度 0.0lmg) 称取 1mg 灵芝破壁孢子粉放入 5mL 试管中, 在试管中加入 1mL 的蒸馏水 , 摇荡 10min 左右 , 使灵芝破壁孢子粉在水中溶解均匀 , 得到灵芝孢子 的悬浊液。
用微量注射器 (5μL) 吸取悬浊液 2μL, 将悬浊液滴入计数盘内, 盖上玻片, 静置 5min, 待悬浊液在计数盘内分布均匀后, 计数。
在光学显微镜下, 鉴别孢子的破壁与否 , 未破壁的孢子壁光滑完整、 丰满 , 双壁结 构清晰 , 个体形态一致 ; 破壁后 , 孢子壁不完整、 内容物呈不规则块状。
灵芝孢子破壁率的计算 灵芝孢子破壁率的计算公式 : 破壁率 =[(X-Y)/ X]×100% X 为破壁前完整孢子数 ,Y 为破壁后完整孢子数。
在具体实施例 1 中, 利用吐温 -80, 联合果胶酶和纤维素酶组成的复合酶处理灵芝 孢子 , 经镜检并计算其破壁率。
结果表明, 单独采用果胶酶、 纤维素酶对孢子粉进行破壁处理 , 破壁率分别为 82%和 87%, 两者联合之后, 并增加吐温 -80 处理, 孢子粉外壁变软凹陷 , 萌发沟破裂 , 内 容物呈团状释放出来 , 花粉的破壁效果明显 , 破壁率达 94%。
实施例 3 灵芝孢子的脂溶性成分的提取方法, 采用乙醇 - 水为提取溶剂 : 取 100g 灵芝破壁孢子粉, 在体积比 4 : 6 的乙醇 - 水的混合溶剂 1000ml 中, 加入 0.5% 吐 温 -80, 充分搅拌 2 小时, 离心, 过滤, 滤液回收乙醇后, 从水中析出灵芝孢子脂溶性成分, 吐温 -80 大部分溶解在水中, 只有非常少的吐温 -80 溶解灵芝孢子脂溶性成分中, 在用水洗 除灵芝孢子脂溶性成分中残存的吐温 -80,得到灵芝孢子脂溶性成分。
实施例 4 灵芝孢子的脂溶性成分的提取方法, 采用石油醚 - 乙酸乙酯 - 乙醇 - 水为提取溶剂 : 取 100g 灵芝破壁孢子粉, 在体积比 5 : 15 : 25 : 55 的石油醚 - 乙酸乙酯 - 乙醇 - 水的混 合溶剂 1000ml 中, 加入 0.5% 吐温 -80, 充分搅拌 2 小时, 离心, 过滤, 滤液回收石油醚 - 乙 酸乙酯 - 乙醇后, 从水中析出灵芝孢子脂溶性成分, 吐温 -80 大部分溶解在水中, 只有非 常少的吐温 -80 溶解灵芝孢子脂溶性成分中, 在用水洗除灵芝孢子脂溶性成分中残存的吐 温 -80,得到灵芝孢子脂溶性成分。
关于灵芝孢子的脂溶性成分的提取方法的优点的说明 对于灵芝孢子粉脂溶性成分, 可以按照一般性的挥发油的提取方法, 采用水蒸汽蒸馏 法 , 但耗时长 , 提取效率低, 易造成灵芝孢子粉中的不饱和脂肪酸受热发生氧化变质, 降低 了灵芝孢子粉脂溶性物质的药理活性。
对于灵芝孢子粉脂溶性成分, 可以采用超临界流体萃取, 虽然能节约时间、 提取充 分。但是成本高, 难以工业化生产。
对于灵芝孢子粉脂溶性成分, 还可用乙醚, 乙酸乙酯, 氯仿等有机溶剂提取, 但是 成本高, 工艺过程复杂, 容易造成溶剂残留, 毒性高。
表面活性剂的双亲结构 , 能降低表面张力 , 增强溶剂对物料的润湿性和渗透性 , 且对天然产物的有效成分具有增溶作用 , 从而增加浸出效能和萃取率。目前 , 尚无使用表面活性剂辅助提取灵芝孢子粉脂溶性成分的相关报道, 本发明 用表面活性剂提取灵芝孢子粉脂溶性成分, 提高了灵芝孢子粉脂溶性成分的提取率 , 对 于该类产品的深加工和环境保护具有重要意义, 而且成本低,容易工业化生产推广。
在灵芝孢子破壁粉的提取过程中加入表面活性剂, 使灵芝孢子粉充分润湿, 并且 使药材和萃取剂之间的液膜厚度足够的薄, 减小有效成分从药材表面扩散到萃取剂的过程 中的阻力, 从而加快了提取的速率。
实施例 5 灵芝孢子脂溶性成分的软胶囊的制备 : 在高压均质设备中, 30 ~ 35 ℃, 对 5 重量份灵芝孢子脂溶性成分进行均质, 得芯液 ; 取明胶 100 重量份和水 100 重量份放入容器中, 加热至 80 ~ 90℃, 不断搅拌使之溶解, 然后 加入甘油 40 重量份、 聚乙二醇 10 重量份继续搅拌, 完全溶解, 停止加热, 自然冷却至室温, 得到软胶囊材 ; 在软胶囊压制机上压制将芯液和软胶囊材, 清洗, 干燥, 得软胶囊, Co60 辐 照灭菌处理, 成产品。
实施例 6 灵芝孢子脂溶性成分的冻干粉的制备 : 灵芝孢子脂溶性成分先在 -45℃预冻 2 - 4 小时, 然后在 -45℃~ 10℃条件下减压真空 干燥 24 - 28 小时, 最后在 30℃干燥 6 - 8 小时。
实施例 7 灵芝孢子脂溶性成分对小鼠神经系统的作用 : 经动物药效学证实, 本发明的具体实施例 3、 4 的灵芝孢子脂溶性成分对老龄小鼠老年 性中枢神经功能变行性疾病有显著作用。它提高脑部雌性激素 β 受体, 使雌性激素受体神 经元的数量显著性增加 ; 粒细胞集落刺激因子、 血管内皮生长因子等受体显著性增加。 灵芝 孢子脂溶性成分可作为治疗老年痴呆、 帕金森、 亨廷顿舞蹈病、 脑瘫, 中风偏瘫后遗症、 或、 脑外伤后遗症的保健品或者药物。
试验方法 : 试验对象分为 4 组 : 具体实施例 3 组、 具体实施例 4 组、 老龄鼠空白组、 幼鼠空白对照组 , 每组 10 只小鼠。
具体实施例 3、 4 组, 灵芝孢子脂溶性成分与普通饲料混匀, 每日量为 50mg / kg, 持 续时间 2 个月。
具体实施例 3、 4 组与老龄空白对照组比较, 具体实施例 3、 4 组的下丘脑雌性激素 受体阳性神经元的数目增加, 具有显著差异性。
具体实施例 3、 4 组与老龄空白对照组比较, 观察脑内的粒细胞集落刺激因子阳性 星形胶质细胞的染色强度, 发现具体实施例 3、 4 组粒细胞集落刺激因子阳性星形胶质细胞 的染色强度减弱, 说明药物具有抑制神经细胞凋亡的作用。 与老龄空白对照组比较, 具体实 施例 3、 4 组出现差异性显著。与老年空白对照组比较, 具体实施例 3、 4 组小鼠的阳性血管 的面积和染色强度有显著性差异。
具体实施例 3、 4 组后与老龄空白对照组比较, 血管内皮生长因子阳性神经元的数目显著增加 ; 血管内皮生长因子阳性血管的相对面积及染色强度均有显著增加。
具体实施例 3、 4 组与老龄空白对照组比较, 动物分组、 造模、 给药同前, 给药结束 后, 断头处死, 取出大脑, 制成脑组织匀浆, 按照说明书规定的步骤操作测定小鼠单胺氧化 酶活性、 超氧化物歧化酶活性、 过氧化氢酶活性。结果如下 :老龄鼠空白组单胺氧化酶活性明显高于幼鼠空白对照组, 具体实施例 3、 4 组单胺氧化酶活性明显低于老龄鼠空白组。
老龄鼠空白组超氧化物歧化酶、 过氧化氢酶活性明显低于幼鼠空白对照组, 具体实施例 3、 4 组超氧化物歧化酶、 过氧化氢酶活性明显高于老龄鼠空白组。
这表明具体实施例 3、 4 能在缓解脑组织中神经细胞的衰老, 增强神经细胞的活 力。
实施例 8 灵芝孢子脂溶性成分对小鼠学习记忆功能的改善 药理试验表明, 灵芝孢子脂溶性成分能改善衰老小鼠的学习记忆功能 ; 毒理试验表明, 本发明的灵芝孢子脂溶性成分安全有效。
采用小鼠 D- 半乳糖 (D-galactose, D-gal) 人工衰老模型和自然衰老模型 (17 月 龄 ), 以小鼠协调运动和学习记忆作为指标, 观察具体实施例 3、 4 的作用。
人工衰老模型 : 设同龄 (6 月龄 ) 正常对照组 (普通饲料) 、 D-gal 模型组、 阳性对照 / 组 (左旋多巴) 、 具体实施例 3 (40mg/kg d)、 具体实施例 4 (40mg/kg/d)5 组 ; 具体实施例 3、 4 与普通饲料混合之后, 给药 3 月后检测下述各种指标。
转棒试验 : 转棒长 80cm, 离地高 40cm, 转速 15 转 / 分, 时间为 2min。记录每组掉 下的小鼠数, 计算跌落率。 跳台试验 : 选取昆明种小白鼠 50 只, 随机分成 5 组, 每组 10 只, ♀♂各半。将小鼠 放入反应箱 (用黑色塑料板隔成 5 间, 每间右后方放 4.5×4.5cm 橡皮垫作为安全区, 箱底铺 设间隔 0.5cm 铜栅 ) 内, 适应 5min 后, 放于平台上, 四肢接触铜栅时,36V 电刺激, 记录 5 分 钟内跳至铜栅的动物数, 双前肢同时接触铜栅的错次数及从安全区到接触铜栅的时间 ( 潜 伏期 )。24h 后重测一次, 记录小鼠跳下的潜伏期和 5min 内跳台错误次数, 评价学习记忆成 绩。
结果表明, 与同龄正常对照组相比, 人工衰老小鼠跌落率显著升高, 潜伏期明显缩 短, 错误次数明显升高。具体实施例 3、 4 可改善显著人工衰老小鼠降低跌落率, 延长衰老小 鼠的潜伏期和降低错误次数, 提高人工衰老小鼠的运动和记忆能力。
结果表明, 与同龄正常对照组相比, 人工衰老小鼠逃避潜伏期延长, 跨越平台次数 减少。具体实施例 3、 4 可显著缩短逃避潜伏期, 明显增加跨越平台次数, 可明显提高 D-gal 衰老小鼠的学习记忆功能。
结果具体实施例 3、 4 (40mg/ kg) 组对人工衰老小鼠的学习记忆获得性障碍有明 显改善作用, 具体实施例 4 表现尤其明显 : 具体实施例 4 组动物从安全区到触电区的潜伏期 (172.7±38.97 秒 ) 比人工衰老小鼠 组 (134.5±37.2 秒 ) 延长 22.1%, 具体实施例 4 组 的错误次数 (0.192±0.237) 比人工衰老小鼠组 (1.374±1.256) 减少 86.0%, 具体实施例 4 组误入触电区的错误率 (20.1% ) 比人工衰老小鼠组 (60.2% ) 减少 66.6%。10