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本发明涉及某些化合物抑制、调控和/或调节酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸激酶和激酶样蛋白如RAF激酶(一种在MAP激酶信号传导途径中起作用的丝氨酸/苏氨酸激酶)的发现，涉及包含这些化合物的组合物和用它们治疗酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸激酶和激酶样依赖性疾病如血管生成、癌症和心脏肥大的方法。

1.  用作药物的式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前体药物，

其中
A₁、A₂、A₃、A₄各自独立地选自N或C-R³，其中R³表示H或C的取代基部分，其中A₁、A₂和A₄中至少一个是N；
X是选自N-H、被取代的氨基、O或S的连接部分；
R¹是芳族环的取代基，n是0至4的整数；
Y和D独立地选自O、S、CH₂、NH、R⁶-取代的C或R⁶-取代的N，
R⁶是包含Y和D的环的取代基，r是0至该环可用化合价的最大数目的整数；
R²是被取代的或未被取代的选自烃基和杂环基的部分；
T选自H、卤素、O-R⁹、S-R⁸、SO-R⁸、SO₂-R⁸、SO₂-N(R⁸)₂、SO₂-NR¹⁰和SO₂-卤素，其中R⁸选自氢、被取代的或未被取代的烷基、环烷基、杂环基或芳基；R⁹是被取代的或未被取代的烷基、环烷基或芳基，NR¹⁰表示包含氮的杂环基的环；p是0至5的整数。

2.  式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前体药物，

其中
A₁、A₂、A₃、A₄各自独立地选自N或C-R³，其中R³表示H或C的取代基部分，其中A₁、A₂和A₄中至少一个是N；
X是选自N-H、被取代的氨基、O或S的连接部分；
R¹是芳族环的取代基，n是0至4的整数；
Y和D独立地选自O、S、CH₂、NH、R⁶-取代的C或R⁶-取代的N，
R⁶是包含Y和D的环的取代基，r是0至该环可用化合价的最大数目的整数；
R²是被取代的或未被取代的选自烃基和杂环基的部分；
T选自H、卤素、O-R⁹、S-R⁸、SO-R⁸、SO₂-R⁸、SO₂-N(R⁸)₂、SO₂-NR¹⁰和SO₂-卤素，其中R⁸选自氢、被取代的或未被取代的烷基、环烷基、杂环基或芳基；R⁹是被取代的或未被取代的烷基、环烷基或芳基，NR¹⁰表示包含氮的杂环基的环；p是0至5的整数，
并且其中该化合物不是：


3.  权利要求1或2的化合物，其中A₁和A₂是N，A₃和A₄是C-R³。

4.  权利要求1、2或3的化合物，其中A₃和A₄是C-H。

5.  权利要求1至4中任意一项的化合物，其中X是N-H。

6.  权利要求1至5中任意一项的化合物，其中R¹或者各R¹独立地选自OH、O-烷基、SH、S-烷基、卤素、被取代的或未被取代的胺、CF₃和C₁-C₄烷基。

7.  权利要求6所述的化合物，其中R¹是OH。

8.  前面任意一项权利要求的化合物，其中n是1。

9.  前面任意一项权利要求的化合物，其中Y是CH₂。

10.  前面任意一项权利要求的化合物，其中D是CH₂。

11.  前面任意一项权利要求的化合物，其中R²选自被取代的或未被取代的脂族、脂环族或芳族部分。

12.  前面任意一项权利要求的化合物，其中R²是芳族的。

13.  权利要求12所述的化合物，其中R²选自被取代的或未被取代的苯基、咪唑基、吡咯基、噁唑基和异噁唑基。

14.  权利要求12所述的化合物，其中R²是苯基。

15.  前面任意一项权利要求所述的化合物，其中p是1。

16.  权利要求14所述的化合物，其中p是1，T位于连接基团X的对位。

17.  前面任意一项权利要求所述的化合物，其中T选自卤素、O-烷基、O-烷基-卤素、SO₂-R⁸、SO₂-NHR⁸、SO₂-NR¹⁰和SO₂-卤素。

18.  权利要求17所述的化合物，其中卤素是氯。

19.  权利要求17所述的化合物，其中R⁸是被取代的或未被取代的烷基或者被取代的或未被取代的芳基。

20.  权利要求17所述的化合物，其中R⁸表示直链或支链的烷基、环烷基、直链或支链的卤代-烷基、烷氧基、羧基烷基或烷基氨基。

21.  权利要求17所述的化合物，其中T是选自式(i)至(x)的部分：

其中q是1至4的整数，s是0至4的整数。

22.  前面任意一项权利要求所述的化合物，其中r是0。

23.  权利要求1或2所述的化合物，其选自式(II)、(III)和(IV)的化合物：


24.  权利要求23所述的化合物，其中X是NH。

25.  权利要求23或24所述的化合物，其中R²是苯基。

26.  权利要求23、24或25所述的化合物，其中n是1。

27.  权利要求23、24、25或26所述的化合物，其中p是1。

28.  权利要求1或2所述的化合物，其是式(V)的化合物：


29.  权利要求28所述的化合物，其中A₁和A₂是N，A₃和A₄是C-R³。

30.  权利要求1或2所述的化合物，其选自式(VI)、(VII)和(VIII)的化合物：


31.  权利要求30所述的化合物，其中n是1。

32.  权利要求1或2所述的化合物，其是式(IX)的化合物：


33.  权利要求30、31或32所述的化合物，其中p是1。

34.  权利要求30、31、32或33所述的化合物，其中X是NH。

35.  权利要求1或2所述的化合物，其是式(X)的化合物：

其中G表示R⁸、NHR⁸或NR¹⁰。

36.  权利要求35所述的化合物，其中X是NH。

37.  权利要求1或2所述的化合物，其是式(XI)的化合物：


38.  权利要求1或2所述的化合物，其是式(XII)的化合物：


39.  权利要求38所述的化合物，其中T是O-R⁹。

40.  权利要求37、38或39所述的化合物，其中X是NH。

41.  前面任意一项权利要求所述的化合物，其用于治疗一种或多种酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸激酶和激酶样依赖性疾病。

42.  权利要求1至40中任意一项的化合物，其用于抑制温血动物的IKK、PDGF-R、Kdr、c-Src、Her-1、Her-2、c-Kit、c-Abl、Ins-r、Tek、Flt-1、Flt-3、Flt-4、c-Abi和FGFR-1、Eph受体(例如EphB4)、CDK1、CDK2和RET活性。

43.  权利要求42所述的化合物，其用于抑制温血动物的RAF激酶活性。

44.  权利要求41所述的化合物，其中所述疾病选自血管生成、癌症、肿瘤生长、动脉粥样硬化、与年龄有关的黄斑变性、糖尿病性视网膜病、炎性疾病、神经损伤性疾病、慢性神经变性、疼痛、偏头痛或心脏肥大中的一种或多种。

45.  前面任意一项权利要求的化合物，其用于治疗黑素瘤。

46.  前面任意一项权利要求的化合物，其用于治疗以活化的突变型B-RAF激酶为特征的疾病。

47.  权利要求1至40中任意一项的化合物在制备用于治疗酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸激酶和激酶样-依赖性疾病的药物中的用途。

48.  权利要求1至40中任意一项的化合物在制备用于治疗血管生成、癌症、肿瘤生长、动脉粥样硬化、与年龄有关的黄斑变性、糖尿病性视网膜病、炎性疾病、神经损伤性疾病、慢性神经变性、疼痛、偏头痛或心脏肥大的药物中的用途。

49.  权利要求1至40中任意一项的化合物在制备用于治疗黑素瘤的药物中的用途。

50.  权利要求1至40中任意一项的化合物在制备用于治疗以活化的突变型B-RAF激酶为特征的疾病的药物中的用途。

51.  权利要求47至50中任意一项所述的用途，其中所述化合物被单独施用。

52.  权利要求47至50中任意一项所述的用途，其中所述化合物与至少一种其它抗癌剂组合施用。

53.  权利要求52所述的用途，其中所述的至少一种其它抗癌剂选自蛋白酶抑制剂、表皮生长因子受体激酶抑制剂、血管内皮生长因子受体激酶抑制剂、细胞毒性药、抗有丝分裂剂、铂配位络合物、抗肿瘤抗生素、烷化剂、内分泌药、雄激素类、抗雄激素类、雌激素类、抗雌激素类、芳香酶抑制剂、促性腺素释放激素激动剂和促生长素抑制素类似物以及靶向于在肿瘤细胞中被过表达和/或被上调的特定代谢途径中涉及的酶或受体的化合物、蛋白激酶抑制剂、苏氨酸和酪氨酸激酶抑制剂、表皮生长因子受体激酶抑制剂、血管内皮生长因子受体激酶抑制剂、成纤维细胞生长因子抑制剂、胰岛素样生长因子受体抑制剂、血小板衍生生长因子受体激酶抑制剂、蛋氨酸氨基肽酶抑制剂、蛋白酶体抑制剂、环加氧酶抑制剂和组蛋白脱乙酰基酶抑制剂。

54.  包含权利要求1至40中任意一项的化合物的药物组合物。

55.  权利要求54所述的药物组合物，其包含约1％至约95％权利要求1至40中任意一项的化合物。

56.  权利要求54或55的药物组合物，其包含约20％至约90％权利要求1至40中任意一项的化合物。

57.  权利要求54、55或56的药物组合物，其包含约5％至约20％活性成分。

58.  权利要求54至57中任意一项的药物组合物，其用于注射施用。

59.  权利要求58的药物组合物，其包含权利要求1至40中任意一项的化合物的溶液、混悬液或分散体。

60.  权利要求58或59的药物组合物，其还包含载体。

61.  权利要求60的药物组合物，其中所述载体包含甘露醇。

62.  权利要求59、60或61的药物组合物，其包含在油中的混悬液。

63.  权利要求54至57中任意一项的药物组合物，其用于口服施用。

64.  权利要求63的药物组合物，其还包含固体载体。

65.  权利要求64的药物组合物，其还包含明胶和增塑剂。

66.  权利要求54至57中任意一项的药物组合物，其用于直肠施用。

67.  权利要求66的药物组合物，其还包含栓剂基质。

68.  包含权利要求1至40中任意一项的化合物和至少一种抗癌剂的药物组合物。

69.  权利要求1至40中任意一项的化合物与至少一种抗癌剂的组合。

70.  权利要求68所述的药物组合物或权利要求69所述的组合，其中所述的抗癌剂选自蛋白酶抑制剂、表皮生长因子受体激酶抑制剂、血管内皮生长因子受体激酶抑制剂、细胞毒性药、抗有丝分裂剂、铂配位络合物、抗肿瘤抗生素、烷化剂、内分泌药、雄激素类、抗雄激素类、雌激素类、抗雌激素类、芳香酶抑制剂、促性腺素释放激素激动剂和促生长素抑制素类似物以及靶向于在肿瘤细胞中被过表达和/或被上调的特定代谢途径中涉及的酶或受体的化合物、蛋白激酶抑制剂、苏氨酸和酪氨酸激酶抑制剂、表皮生长因子受体激酶抑制剂、血管内皮生长因子受体激酶抑制剂、成纤维细胞生长因子抑制剂、胰岛素样生长因子受体抑制剂、血小板衍生生长因子受体激酶抑制剂、蛋氨酸氨基肽酶抑制剂、蛋白酶体抑制剂、环加氧酶抑制剂和组蛋白脱乙酰基酶抑制剂。

71.  治疗酪氨酸、丝氨酸/苏氨酸激酶或激酶样-依赖性疾病的方法，其包括给温血动物例如人施用治疗有效量的权利要求1至40中任意一项所述的化合物。

72.  权利要求71的方法，其进一步包括同时或在独立的时间施用一种或多种抗癌剂。

73.  治疗黑素瘤的方法，该方法包括
(a)对来自患者的黑素瘤组织进行检测以确定该黑素瘤组织是否表达突变型RAF激酶或过表达野生型RAF激酶，和
(b)如果发现该黑素瘤过表达野生型RAF激酶或表达活化性突变型B-RAF激酶，则用抑制RAF激酶有效量的权利要求1至40中任意一项所述的抑制RAF的化合物治疗该患者。

74.  治疗黑素瘤的方法，该方法包括
(a)对来自患者的黑素瘤组织进行检测并确定该黑素瘤组织是否过表达B-RAF激酶或C-RAF激酶活性，和
(b)如果发现该黑素瘤组织过表达B-RAF激酶或C-RAF激酶活性，则用抑制RAF激酶有效量的权利要求1至40中任意一项所述的抑制RAF的化合物治疗该患者。

75.  治疗黑素瘤的方法，该方法包括
(a)对来自患者的黑素瘤组织进行检测并确定该黑素瘤组织是否表达突变型B-RAF激酶或C-RAF激酶活性，和
(b)如果发现该黑素瘤组织表达突变型B-RAF激酶，则用抑制RAF激酶有效量的权利要求1至40中任意一项所述的抑制RAF的化合物治疗该患者。

76.  治疗以活化的突变型B-RAF激酶为特征的疾病的方法，该方法包括在来自患者的组织样品中检测B-RAF激酶基因或蛋白的突变和用抑制B-RAF激酶有效量的权利要求1至40中任意一项所述的化合物治疗该患者。

77.  治疗患有以通过MAP激酶信号传导途径进行的信号传导过度为特征的疾病的患者的方法，其包括给该患者施用抑制RAF激酶有效量的权利要求1至40中任意一项所述的化合物。

78.  制备下式的化合物的方法，

该方法包括下面的反应流程：

其中步骤2是任选的，在进行步骤2的情况下，T’是T的前体，R¹’是R¹的前体或者是R¹，X、R¹、R²、T和P如权利要求1中所定义。

79.  权利要求78所述的方法，其中X是NH。

80.  权利要求78或79所述的方法，其中R²是苯基。

81.  权利要求78、79或80所述的方法，其中p是1。

82.  权利要求78至81中任意一项所述的方法，其中R¹’是OH。

83.  权利要求78至82中任意一项所述的方法，其中T表示SO₂-G，其中G表示R⁸、NHR⁸或NR¹⁰，R⁸和R¹⁰如权利要求1中所定义。

84.  权利要求78至83中任意一项所述的方法，其中T表示O-R⁹，其中R⁹如权利要求1中所定义。

85.  权利要求84所述的方法，其中X-R²-(T)_p表示

用于治疗特别是黑素瘤的杂环有机化合物
概述
本发明涉及某些化合物抑制、调控和/或调节酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸激酶和激酶样蛋白如RAF激酶(一种在MAP激酶信号传导途径中起作用的丝氨酸/苏氨酸激酶)的发现，涉及包含这些化合物的组合物和用它们治疗酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸激酶和激酶样依赖性疾病如血管生成、癌症和心脏肥大的方法。
背景技术
细胞用各种信号转导途径将其细胞外环境的各个方面转达到核中。这些信号中的许多是由通过转移磷酸基而活化各种因子的蛋白激酶传递的。如已经用伊马替尼(一种bcr-abl激酶抑制剂，其以其甲磺酸盐的形式以GLEEVEC(在美国)或GLIVEC的商标进行销售)所证明的那样，通过抑制适宜激酶活性来破坏信号转导可能具有临床益处。
在本领域中已知MAP激酶信号传导途径是生长因子从细胞外环境向细胞核传送信号以进行增殖的途径之一。生长因子活化位于细胞表面上的跨膜受体，该跨膜受体进而启动一种RAS经由其被活化的级联和将RAF激酶募集到RAF激酶在其中被活化并且进而活化MEK激酶的膜中，然后MEK激酶活化ERK激酶。被活化的ERK激酶可以移动到核上，其在那里活化各种基因转录因子。该途径的异常可导致基因转录、细胞生长的改变并且通过负性调控细胞凋亡和传送增殖和血管生成信号而促发致肿瘤性(tumorogenicity)。已经表明RAF激酶抑制剂通过MAP激酶信号传导途径阻断信号传导。
已知RAF激酶家族具有三个成员，被称为C-RAF(也被称为RAF-1)、B-RAF和A-RAF。已有报道称B-RAF激酶在人类癌症(包括59％所试验的黑素瘤细胞系)中常常被一些体细胞点突变之一所活化。参见Davies，H.等人，Nature 417，949-954(2002)。本发明涉及一类可有效抑制一种或多种RAF激酶家族成员的化合物的发现。
所述化合物的RAF激酶抑制性质使得它们可用作治疗以MAP激酶信号传导途径异常为特征的增殖性疾病的治疗剂，所述疾病特别是以RAF激酶过表达或RAF激酶活化性突变为特征的许多癌症，如具有突变的B-RAF的黑素瘤，尤其是其中突变的B-RAF是V599E突变型的黑素瘤。本发明还提供了用所述化合物治疗以MAP激酶信号传导途径异常为特征、特别是其中B-RAF突变的其它病症例如具有突变的B-RAF的良性痣(Nevimoles)的方法。
描述
本发明的第一方面提供了用作药物的式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前体药物，

其中
A₁、A₂、A₃、A₄各自独立地选自N或C-R³，其中R³表示H或C的取代基部分，其中A₁、A₂和A₄中至少一个是N；
X是选自N-H、被取代的氨基、O或S的连接部分；
R¹是芳族环的取代基，n是0至4的整数；
Y和D独立地选自O、S、CH₂、NH、R⁶-取代的C或R⁶-取代的N，
R⁶是包含Y和D的环的取代基，r是0至该环可用化合价的最大数目的整数；
R²是被取代的或未被取代的选自烃基和杂环基的部分；
T选自H、卤素、O-R⁹、S-R⁸、SO-R⁸、SO₂-R⁸、SO₂-N(R⁸)₂、SO₂-N^aR¹⁰和SO₂-卤素，其中R⁸选自氢、被取代的或未被取代的脂族基团、环脂族基团、杂环基或芳基；R⁹是被取代的或未被取代的脂族基团、环脂族基团或芳基，N^a和R¹⁰一起表示包含氮N^a的4、5、6、7或8-元杂环基的环；p是0至5的整数。
本发明的第二方面提供了式(I)化合物或其可药用的盐、酯或前体药物，

其中
A₁、A₂、A₃、A₄各自独立地选自N或C-R³，其中R³表示H或C的取代基部分，其中A₁、A₂和A₄中至少一个是N；
X是选自N-H、被取代的氨基、O或S的连接部分；
R¹是芳族环的取代基，n是0至4的整数；
Y和D独立地选自O、S、CH₂、NH、R⁶-取代的C或R⁶-取代的N，
R⁶是包含Y和D的环的取代基，r是0至该环可用化合价的最大数目的整数；
R²是被取代的或未被取代的选自烃基和杂环基的部分；
T选自H、卤素、O-R⁹、S-R⁸、SO-R⁸、SO₂-R⁸、SO₂-N(R⁸)₂、SO₂-NR¹⁰和SO₂-卤素，其中R⁸选自氢、被取代的或未被取代的脂族基团、环脂族基团、杂环基或芳基；R⁹是被取代的或未被取代的脂族基团、环脂族基团或芳基，NR¹⁰表示包含氮的杂环基的环；p是0至5的整数，
并且其中该化合物不是：

优选地，R¹存在(n不是0)并且独立地选自卤素、低级烷基、卤代-低级烷基、羧基、酯化的羧基、羟基、醚化或酯化的羟基、低级烷氧基、苯基、被取代的苯基、低级烷酰基、被取代的或未被取代的胺、氨基、单-或二-取代的氨基、脒基、脲基、巯基、N-羟基-脒基、胍基、脒基-低级烷基、磺基(sulfo)、氨磺酰基、氨基甲酰基、氰基、氰基-低级烷基、偶氮(N＝N＝N)和硝基。
R¹或者各R¹独立地优选地选自OH、O-烷基、SH、S-烷基、卤素、被取代的或未被取代的胺、CF₃和C₁-C₄烷基。最优选地n是1。
R²优选地选自被取代的或未被取代的脂族、脂环族或芳族部分如环烷基、杂环基烷基、苯基、吡咯、咪唑、吡唑、异噁唑、噁唑、噻唑、哒嗪、嘧啶、吡嗪、吡啶基、吲哚、异吲哚、吲唑、嘌呤、吲哚联啶(indolizidine)、喹啉、异喹啉、喹唑啉、蝶啶、喹啉联啶(quinolizidine)。优选地R²是芳族的。特别是R²选自被取代的或未被取代的苯基、咪唑基、吡咯基、噁唑基和异噁唑基，R²尤其是苯基或被取代的苯基，其中其取代基包括低级烷基(C₁-C₆)、卤素、OH、低级烷氧基、NH₂、SH、S-烷基、SO-烷基、SO₂-烷基、NH-烷基、N-二烷基、羧基或CF₃。
因此，优选地X-R2-(T)_p表示

T可优选地选自卤素、O-烷基、O-烷基-卤素、SO₂-R⁸、SO₂-NHR⁸、SO₂-NR¹⁰和SO₂-卤素，其中卤素优选地是氯。
R⁸和R⁹可优选地独立地选自低级烷基，尤其是C₁、C₂、C₃或C₄烷基、环烷基、杂环烷基、低级链烯基、低级炔基、低级烷氧基，尤其是甲氧基或乙氧基、低级-烷酰基、羧基、氨基、单-或二-取代的氨基、环状基团，例如苯基、吡咯、咪唑、吡唑、异噁唑、噁唑、噻唑、哒嗪、嘧啶、吡嗪、吡啶基、吲哚、异吲哚、吲唑、嘌呤、吲哚联啶、喹啉、异喹啉、喹唑啉、哌啶基、蝶啶、喹啉联啶、哌嗪基、吡咯烷、吗啉基和硫吗啉基。
优选地，R8和R9是被取代的或未被取代的烷基或者被取代的或未被取代的芳基。特别是R8可以表示直链或支链烷基、环烷基、直链或支链卤代-烷基、烷氧基、羧基烷基或烷基氨基。
最优选地，R2是苯基，T位于连接基团X的对位。
在T是O-R9和R2是苯基的情况下，优选地T位于连接基团X的间位。
优选地p是1。
特别优选地T是选自式(i)至(x)的部分：

(其中q是1至4的整数，s是0至4的整数)。
优选地，A₁和A₂是N，A₃和A₄是C-R³。尤其优选的是A₃和A₄是C-H。
优选地X是N-H。
优选地R¹是OH。
优选地Y是CH₂。优选地D是CH₂。
优选地，各R³和R⁶(在存在的情况下)分别独立地选自氢、卤素、低级脂族基团(尤其是低级烷基)、卤代-低级烷基、羧基、低级烷氧基羰基、羟基、醚化或酯化的羟基、低级烷氧基、任选被取代的脂环族基团或任选被取代的芳族基团、低级烷酰氧基、低级烷酰基、氨基、单-或二-取代的氨基、脒基、脲基、巯基、N-羟基-脒基、胍基、脒基-低级烷基、磺基、氨磺酰基、氨基甲酰基、氰基、氰基-低级烷基、偶氮(N＝N＝N)和硝基。最优选地r是0。但是，在r不是0的情况下，优选地R⁶或各R⁶独立地优选地选自OH、O-烷基、SH、S-烷基、卤素、CF₃和C₁-C₄烷基。
在本发明一些优选的实施方案中，式(I).II的部分

是四氢喹啉部分，其中优选地r＝0。优选地n＝1。优选地R¹是OH，从而使得该部分是羟基四氢喹啉，最尤其是1，2，3，4-四氢喹啉-5-醇(式(I.III)：

优选的化合物包括式(II)、(III)和(IV)的化合物：

优选地其中X是NH，R²是苯基，n是1和/或p是1。
其它优选的化合物具有式(V)：

优选地其中A₁和A₂是N，A₃和A₄是C-R³。
进一步优选的化合物具有式(VI)、(VII)和(VIII)：

优选地其中n是1。
还进一步优选的化合物具有式(IX)

对于式(VI)至(IX)的化合物而言，优选地，p是1，X是NH。
其它优选的化合物包括：
式(X)

其中G表示R⁸、NHR⁸或NR¹⁰，优选地其中X是NH；
式(XI)

和式(XII)

优选地，在式(XII)的化合物中，T是O-R⁹。
优选地，在化合物(XI)和(XII)中，X是NH。
本发明的第三方面提供了制备下式的化合物的方法，

该方法包括下面的反应流程：

其中步骤2是任选的，在进行步骤2的情况下，T’是T的前体，R¹’是R¹的前体或者是R¹，X、R¹、R²、T和p如权利要求1中所定义。
优选地X是NH。
优选地R²是苯基。
优选地p是1。
优选地R¹’是OH。
在一个优选的实施方案中，T表示SO₂-G，其中G表示R⁸、NHR⁸或NR¹⁰，R⁸和R¹⁰如本发明的第一方面中所定义。
在另一个优选的实施方案中，T表示O-R⁹，其中R⁹如本发明的第一方面中所定义。
优选地，在后一个实施方案中，X-R²-(T)_p表示

本发明的另一方面是式(I)化合物，
其中
A₁、A₂、A₃和A₄是N或CR₃，其中A₁、A₂和A₄中至少一个是N；
X是N-R₅、O或S；
R¹是OH、-O-烷基、-SH、-S-烷基、卤素、被取代的或未被取代的胺、-CF₃或-C₁-C₄-烷基；
Y是O、S、CR₅或NR⁵；
D是O、S、CR₅或NR⁵；
R²是烷基、脂环族环、杂环、脂芳族(aliaromatic)基团、杂芳族基团，所有这些基团均可以是被取代的或未被取代的；
T是H、-SO₂-NH-R⁴或-SO₂-R⁴；
R⁴是H、烷基或芳基，其可以是被取代的或未被取代的；
R⁵是H或烷基或C(O)-O-C-Ph；
n是0-4；
或其互变异构体、或其盐。
尤其优选的是式(I)化合物，
其中
A₁和A₂是N；
A₃和A₄是CH；
Y是CH₂或NR⁵，如-NH-C(O)-O-C-Ph；
X是NH；
D是CH₂；
R¹是OH、Cl、Me或F；
R²是苯基、咪唑基、吡咯基、噁唑基或异噁唑，其中苯基可以是未被取代的或者被1、2或3个以下基团取代：-OMe基团、Cl、CF₃、-SMe、OH、-O-[CH₂]₂-吡啶、-O-[CH₂]₃-Cl或-O-[CH₂]₃-吗啉代；且
R⁴是H、C₂NMe、C₂OH、-N哌啶基、Me、Me(叔-丁基)、C₂COOH或乙基(异丙基)；
R⁵是H；
n是0或1；
或其互变异构体、或其盐。
更一般而言，在本公开物的上下文中，本文中用于描述式(I至XII)的化合物的一般术语具有下面的含义，另有说明的除外。
烃基可以被定义为优选地具有至多20个碳原子、尤其是至多12个碳原子。烃基可以是直链或支链的脂族基团，例如烷基、链烯基或炔基；它们可以是脂环族的(即脂族环状的)，例如环烷基；它们可以是芳族的，例如苯基。烃基可以包含两个或多个选自脂族、脂环族和芳族部分的部分的组合，例如至少一个烷基和芳族基团的组合。在一些情况中，烃基可以任选夹杂有一个或多个链内杂原子，例如-O-，从而形成例如醚键。
单-或二-取代的氨基部分可以被定义为其中氨基任选被烃基部分取代，所述烃基部分例如选自低级烷基(尤其是C₁、C₂、C₃或C₄烷基)、环烷基(尤其是环己基)、烷基-羧基、羧基、低级烷酰基(尤其是乙酰基)、碳环基团(例如环己基或苯基)、杂环基团；其中烃基部分是未被取代的或者被例如低级(C₁、C₂、C₃、C₄、C₅、C₆或C₇)烷基、卤素、OH、低级烷氧基、NH₂、SH、S-烷基、SO-烷基、SO₂-烷基、NH-烷基、N-二烷基、羧基、CF₃取代，其中烷基可以是任选被取代的夹杂有0-3个O、S、N的支链的、无支链的或环状的C_1-6烷基。
本文所用的术语巯基定义了一般结构-S-R_e的部分，其中R_e选自H、烷基、本文所定义的碳环基团和杂环基团。
本文所用的术语胍基定义了一般结构-NHR-C(NH)NH₂的部分及其衍生物，特别是其中氢被烷基例如甲基或乙基所代替的衍生物。
本文所用的术语脒基定义了一般结构-C(NH)NH₂的部分及其衍生物，特别是其中氢被烷基例如甲基或乙基所代替的衍生物。
烷基优选地具有至多20个、更优选至多12个碳原子，是直链的或分支一次或多次；优选的是低级烷基，尤其优选的是C₁-C₄-烷基，特别是甲基、乙基或异-丙基或叔-丁基。其中烷基可以被一个或多个取代基取代。未被取代的烷基、优选低级烷基是尤其优选的。
烷基可任选在链中夹杂有一个或多个杂原子，例如-O-，从而形成例如醚键。
被取代的烷基是上面所定义的烷基，尤其是低级烷基，优选甲基；其中可存在一个或多个、尤其是至多三个取代基，所述取代基主要是选自卤素(尤其是氟)、氨基、N-低级烷基氨基、N，N-二-低级烷基氨基、N-低级烷酰基氨基、羟基、氰基、羧基、低级烷氧基羰基和苯基-低级烷氧基羰基的基团。尤其优选的是三氟甲基。一类化合物包括被取代的烷基，其中该烷基被杂环基的环例如吡嗪环取代，从而形成亚烷基-het基团，即-CH₂-Het，该烷基可有效地作为杂环和第二个部分之间的连接基团。
当涉及取代基如烷基、烷氧基、烷基胺、烷硫基等时，术语“低级”表示具有至多7个且包括最大值7个、尤其是1个至4个并包括最大值4个碳原子的基团，所讨论的基团是无支链的或分支一次或多次。
低级烷基、低级烷氧基、单-或二-低级烷基氨基、低级烷硫基和具有烷基部分的其它取代基的烷基部分尤其是C₁-C₄烷基，例如正-丁基、仲-丁基、叔-丁基、正-丙基、异丙基、甲基或乙基。除非另有说明，否则该类烷基取代基是未被取代的或者被卤素、羟基、硝基、氰基、低级烷氧基、C₃，C₄，C₅，C₆或C₇环烷基、氨基或单-或二-低级烷基氨基取代。
卤代-低级烷基、卤代-低级烷氧基、卤代-低级烷硫基等是指具有烷基部分的取代基，其中所述烷基部分被卤素单取代至全取代。卤代-低级烷基、卤代-低级烷氧基、卤代-低级烷硫基等被包括在被取代的低级烷基、被取代的低级烷氧基、被取代的低级烷硫基等内。
在对应于被取代的烷基的部分中，尤其优选的是羟基-低级烷基(尤其优选2-羟基乙基)和/或卤代-低级烷基(尤其是三氟甲基或2，2，2-三氟乙基)。
脂环族基团是碳环基团，其尤其是包含3、4、5、6或7个环碳原子并且是非芳族的，但是其可以是饱和的或不饱和的。优选的脂环族基团包括环烷基，其优选地是C₃-C₁₀环烷基，尤其是环丙基、二甲基环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基，环烷基是未被取代的或者被一个或多个、尤其是1、2或3个取代基取代。
芳族基团是杂环基或碳环基，通过位于该基团芳族环碳原子上的价键进行键合(或者任选通过连接基团如-O-或-CH₂-进行键合)。优选地，芳族基团是碳环基，具有不超过16个碳原子的环系，优选是单-、二-或三-环的，可以被完全或部分取代，例如被至少两个取代基取代。优选地，芳族基团选自苯基、萘基、茚基、薁基和蒽基，并且优选地在各种情况下是未被取代的或被低级烷基(尤其是甲基、乙基或正-丙基)、卤素(尤其是氟、氯、溴或碘)、卤代-低级烷基(尤其是三氟甲基)、羟基、低级烷氧基(尤其是甲氧基)、卤代-低级烷氧基(尤其是2，2，2-三氟乙氧基)、氨基-低级烷氧基(尤其是2-氨基-乙氧基)、低级烷基(尤其是甲基或乙基)、氨基甲酰基、N-(羟基-低级烷基)-氨基甲酰基(尤其是N-(2-羟基乙基)-氨基甲酰基)和/或氨磺酰基-取代的芳基取代，尤其是相应的被取代的或未被取代的苯基。
被取代的芳族基团一般是被1-5个、优选1或2个取代基取代的芳族基团。适宜的取代基包括但不限于氨基、单-或二-低级烷基取代的氨基(其中所述低级烷基取代基可以是未被取代的或者进一步被上面针对烷基所列出的那些取代基取代)、卤素、低级烷基、被取代的低级烷基、羟基、低级烷氧基、被取代的低级烷氧基、硝基、氰基、巯基、低级烷硫基、卤代-低级烷硫基、杂环基、杂芳基、杂环基烷基、杂芳基烷基、低级烷酰基、氨基甲酰基和N-单-或N，N-二-低级烷基取代的氨基甲酰基(其中所述低级烷基取代基可以是未被取代的或者进一步被取代)。
杂环是具有16个或更少成员的芳族环或环系，优选5至7元环。杂环还包括3至10元的非芳族环或环系，优选5-或6-元的非芳族环，其可以是完全饱和的或部分饱和的。在各种情况下，所述环可具有1、2或3个选自氮、氧和硫的杂原子。所述杂环是未被取代的或者被一个或多个、尤其是1至3个、例如1个相同或不同的取代基取代。杂环上的重要取代基是选自以下的那些：卤素，例如氟或氯；单-或二-低级烷基-取代的氨基，其中所述烷基是未被取代的或者被卤素、羟基、硝基、氰基、低级烷氧基、C₃-C₇环烷基、杂环基或杂芳基取代；低级烷基，如甲基或乙基；卤代-低级烷基，如三氟甲基；低级烷氧基，如甲氧基或乙氧基；卤代-低级烷氧基，例如三氟甲氧基；低级烷硫基，如甲硫基；卤代-低级烷硫基，如三氟甲硫基；杂芳基；杂芳基-低级-亚烷基；杂环基；或杂环基-低级-亚烷基。
杂环尤其是选自以下的基团：环氧乙烷基、氮杂环丙烯基(azirinyl)、1，2-氧杂硫杂环戊烷基、咪唑基、噻吩基、呋喃基、四氢呋喃基、吡喃基、噻喃基、噻蒽基、异苯并呋喃基、苯并呋喃基、色烯基、2H-吡咯基、吡咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑烷基、苯并咪唑基、吡唑基、吡嗪基、吡唑烷基、pyranyol、噻唑基、异噻唑基、二噻唑基、噁唑基、异噁唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哌啶基(尤其是哌啶-1-基)、哌嗪基(尤其是哌嗪-1-基)、哒嗪基、吗啉基(尤其是吗啉代)、硫吗啉基(尤其是硫吗啉代)、吲嗪基、异吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、苯并咪唑基、cumaryl、吲唑基、三唑基、四唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、异喹啉基、喹啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、八氢异喹啉基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、苯并噻吩基、二苯并噻吩基、酞嗪基、萘啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、咔唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、啶基、菲咯啉基、呋咱基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、色烯基、异色满基和色满基，这些基团各自是未被取代的或者被1至2个选自低级烷基(尤其是甲基或叔-丁基)、低级烷氧基(尤其是甲氧基)和卤素(尤其是溴或氯)的基团取代。优选的是未被取代的杂环基，尤其是哌啶基、哌嗪基、硫吗啉代或吗啉代。
卤素尤其是氟、氯、溴或碘，更尤其是氟、氯或溴，特别是氟。
环烷基优选地是C₃-C₁₀-环烷基，尤其是环丙基、二甲基环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基、环烷基是未被取代的或者被一个或多个、尤其是1至3个取代基取代。
杂环基烷基是在环中包含一个或多个杂原子的环烷基，例如哌啶基、哌嗪基、吡咯烷、吗啉基。
酯化的羧基尤其是低级烷氧基羰基如叔-丁氧基羰基、异丙氧基羰基、甲氧基羰基或乙氧基羰基、苯基-低级烷氧基羰基或苯氧基羰基。
烷酰基主要是烷基羰基，尤其是低级烷酰基，例如乙酰基。特别是烷酰基可以被取代基取代，例如CO-R。
在任何时候涉及复数形式的化合物、盐等时，总是应理解为也包括单数形式的化合物、盐等。
在本说明书的描述和权利要求书中，措辞“含有”、“包含”、“包括”和该措辞的变型是指“包括但不限于”，且并非旨在(并且不是)排除其它的部分、添加物、组分、整数或步骤。
任何不对称碳原子均可以以(R)-、(S)-或(R，S)-构型存在，优选地以(R)-或(S)-构型存在。具有任何不饱和度的基团均可以以顺式-、反式-或(顺，反)形式存在。因此，所述化合物可以以异构体混合物的形式或以纯异构体的形式存在，优选地以对映体-纯非对映异构体的形式存在。
本发明还涉及所公开化合物的可能的互变异构体。
可以用适宜的分离方法以本身已知的方式将立体异构体混合物例如非对映异构体混合物分离成其相应的异构体。例如可以通过分级结晶、色谱法、溶剂分布和类似操作将非对映异构体混合物分离成其各非对映异构体。这种分离可以在起始化合物水平进行或者可以分别在式I或式II至XII化合物的水平进行。可以通过形成非对映异构体盐、例如通过与对映异构体-纯手性酸形成盐或者利用使用具有手性配体的色谱底物的色谱法例如HPLC来分离对映异构体。
所述盐尤其是式(I)化合物可药用的酸加成盐。该类盐例如可以通过将具有碱性氮原子的式(I)化合物形成酸加成盐来形成，优选地用有机酸或无机酸来形成盐，尤其是可药用的盐。适宜的无机酸有例如氢卤酸如盐酸；硫酸；或磷酸。适宜的有机酸有例如羧酸、膦酸、磺酸或氨基磺酸，例如乙酸、丙酸、辛酸、癸酸、十二烷酸、羟乙酸、乳酸、2-羟基丁酸、葡糖酸、葡萄糖单羧酸、富马酸、琥珀酸、己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、葡糖二酸、半乳糖二酸、氨基酸如谷氨酸、天冬氨酸、N-甲基甘氨酸、乙酰基氨基乙酸、N-乙酰基天冬酰胺、N-乙酰基半胱氨酸、丙酮酸、乙酰乙酸、磷酸丝氨酸、2-或3-甘油磷酸、马来酸、羟基马来酸、甲基马来酸、环己烷甲酸、苯甲酸、水杨酸、1-或3-羟基萘基-2-甲酸、3，4，5-三甲氧基苯甲酸、2-苯氧基苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、4-氨基水杨酸、邻苯二甲酸、苯基乙酸、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、甲磺酸或乙磺酸、2-羟基乙磺酸、乙烷-1，2-二磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、1，5-萘二磺酸、N-环己基氨基磺酸、N-甲基-、N-乙基-或N-丙基-氨基磺酸或其它有机质子酸如抗坏血酸。
对于分离或纯化而言，也可以使用不可药用的盐，例如苦味酸盐或高氯酸盐。在治疗上仅使用可药用的盐或游离化合物(任选为药物组合物的形式)，因此优选这些化合物。
鉴于所述新化合物的游离形式和其盐形式(也包括可用作中间体例如在所述新化合物的纯化中用作中间体或用于其鉴定的那些盐)之间的密切关系，在适宜和有利的情况下，在上下文中任何时候涉及游离化合物时均应理解为也包括相应的盐。
发现本发明的化合物抑制、调控和/或调节参与信号转导的酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸激酶和激酶样蛋白，包含所述化合物的组合物可用于治疗哺乳动物的酪氨酸和丝氨酸/苏氨酸激酶和激酶样-依赖性疾病，如血管生成、癌症、肿瘤生长、动脉粥样硬化、与年龄有关的黄斑变性、糖尿病性视网膜病、炎性疾病、神经损伤性疾病、慢性神经变性、疼痛、偏头痛或心脏肥大等。
具体而言，本发明的化合物在10微摩尔下以＞70％的抑制作用抑制IKK、PDGF-R、Kdr、c-Src、Her-1、Her-2、c-Kit、c-Abl、Ins-r、Tek、Flt-1、Flt-3、Flt-4、c-Abi和FGFR-1、Eph受体(例如EphB4)、CDK1、CDK2和RET。更具体而言，所述化合物以1-1000nM的IC50值抑制包括突变型在内的RAF家族激酶。
通常，患者是患有以通过MAP激酶途径进行的信号传导过度为特征的疾病的哺乳动物，一般是人。这可以用诸如蛋白印迹分析或免疫组织化学等方法通过途径成员的活化状态特异性抗体来测量。该类方法是本领域技术人员已知的。
一般而言，以通过MAP激酶信号途径进行的信号传导过度为特征的疾病是增殖性疾病，特别是以RAF激酶活性增加为特征的癌症，例如过表达野生型B-或C-RAF激酶的癌症或者表达活化性突变型RAF激酶例如突变型B-RAF激酶的癌症。其中已经探测到突变的RAF激酶的癌症包括黑素瘤、结肠直肠癌、卵巢癌、神经胶质瘤、腺癌、肉瘤、乳腺癌和肝癌。突变的B-RAF激酶尤其是在许多黑素瘤中普遍存在。
根据本发明，可以由患者获取患病组织样品，例如通过活组织检查或切除术来取样，并测定该组织是否产生突变型RAF激酶如突变型B-RAF激酶或过表达野生型RAF激酶如野生型B-或C-RAF激酶。如果试验表明在患病组织中产生突变型RAF激酶或者过度产生RAF激酶，则通过施用抑制RAF有效量的本文所述的RAF抑制剂化合物来治疗该患者。
但是，如果级联中另一种激酶是该途径中信号传导过度的原因，则也可以用抑制RAF激酶的化合物来下调MAP激酶信号传导途径。因此，本发明进一步涉及以MAP激酶信号传导途径信号传导过度为特征的疾病的治疗，所述信号传导过度是由于RAF激酶活化性突变或过表达以外的原因造成的。
用本领域中广泛已知的方法对组织样品进行检测。例如，用等位基因特异性PCR、DHPLC、质谱法来检测B-RAF突变，用免疫组织化学、免疫荧光(immunofluorescense)或蛋白印迹分析来检测野生型B-或C-RAF的过表达。一种探测B-RAF突变的特别有用的方法是以聚合酶链反应为基础的方法。用类似的方法来测定级联中的其它激酶是否突变或过表达。
本发明的一个特别重要的方面涉及治疗黑素瘤的方法，其包括(a)对来自患者的黑素瘤组织进行检测以确定黑素瘤组织是否表达突变型RAF激酶或过表达野生型RAF激酶，和(b)如果发现该黑素瘤组织过表达野生型RAF激酶或者表达活化性突变型B-RFA激酶，则用抑制RAF激酶有效量的本文所述的抑制RAF的化合物治疗该患者。
该实施方案的一个重要的方面涉及治疗黑素瘤的方法，其包括(a)对来自患者的黑素瘤组织进行检测以确定该黑素瘤组织是否过表达B-RAF激酶或C-RAF激酶活性，和(b)如果发现该黑素瘤组织过表达B-RAF激酶或C-RAF激酶活性，则用抑制RAF激酶有效量的本文所述的抑制RAF的化合物治疗该患者。
该实施方案的另一个重要的方面涉及治疗黑素瘤的方法，其包括(a)对来自患者的黑素瘤组织进行检测以确定该黑素瘤组织是否表达突变型B-RAF激酶，和(b)如果发现该黑素瘤组织表达突变型B-RAF激酶，则用抑制RAF激酶有效量的本文所述的抑制RAF的化合物治疗该患者。
一般而言，B-RAF激酶突变是所引用的Davies等人的文章中所述的那些突变之一。在表1中总结了这些突变。
因此，本发明特别是涉及治疗以活化的突变型B-RAF激酶为特征的疾病的方法，其包括在来自患者的组织样品中检测B-RAF激酶基因或蛋白的突变和用可有效抑制B-RAF激酶的化合物、尤其是本文所述的化合物治疗该患者。
因此，本发明还涉及用于治疗黑素瘤的化合物(例如式I至XII的化合物)。本发明更特定地涉及用于治疗以活化的突变型B-RAF激酶为特征的疾病的化合物。
表1