噻唑基 - 二氢 - 吲唑 本发明涉及新的通式 (1) 的噻唑基 - 二氢 - 吲唑 ：其中，R1 至 R3 基团具有权利要求及本说明书所赋予的含义 ；还涉及其异构体、 制备这些噻唑基 - 二氢 - 吲唑的方法及其作为药物的用途。
发明背景
已证明在各种适应症中，例如，癌症及炎性与自身免疫性疾病中，许多蛋白质 激酶为治疗干预的适合的标靶分子。 由于迄今已鉴别出的与癌症发展相关的基因中有较 高百分比的编码激酶，因此，这些酶为对于治疗癌症而言尤其有吸引力的标靶分子。
磷 脂 酰 肌 醇 -3- 激 酶 (PI3- 激 酶 ) 为 脂 质 激 酶 的 亚 家 族， 其 催 化 磷 酸 基 (phosphate group) 转移至磷酸肌醇的肌醇环的 3′ - 位。
它们在如细胞生长及分化过程的许多细胞过程、细胞支架变化的控制及胞内运 输过程的调控中起重要作用。 可根据 PI3- 激酶对于某些磷酸肌醇底物的体外特异性而将 其分成不同种类。
发明内容 现已惊人地发现，通式 (1) 化合物充当特定细胞周期激酶的抑制剂，其中 R1 至 R3 基团具有以下给出的含义。 因而，本发明的化合物可用于 ( 例如 ) 治疗与特定细胞周 期激酶的活性相关且以过度或异常细胞增殖为特征的疾病。
本发明涉及通式 (1) 化合物 ：
其中 ：
R1 选 自 -NHRc、 -NHC(O)Rc、 -NHC(O)ORc、 -NHC(O)NRcRc、 -NHC(O) N(Rg)ORc 和 -NHC(O)SRc ；及
R2 表示氢或选自以下的任选经一或多个相同或不同的 R4 取代的基团 ：C1-6 烷 基、 C3-8 环烷基、3-8 员杂环烷基、 C6-10 芳基、 C7-16 芳基烷基及 5-10 员杂芳基 ；及
R3 表示经一或多个相同或不同的 Ra 和 / 或 Rb 取代的 6 员杂芳基，或
R3 表示任选经一或多个相同或不同的 Re 和 / 或 Rf 取代的 8-10 员杂芳基 ；且 各 R4 表示选自 Ra、Rb 及经一或多个相同或不同的 Rb 和 / 或 Rc 取代的 Ra 中的基团 ；且 各 Ra 彼此独立地表示任选经一或多个相同或不同的 Rb 和 / 或 Rc 取代的选自以下 的基团 ：C1-6 烷基、2-6 员杂烷基、 C1-6 卤代烷基、 C3-10 环烷基、 C4-16 环烷基烷基、 C6-10 芳基、 C7-16 芳基烷基、5-12 员杂芳基、6-18 员杂芳基烷基、3-14 员杂环烷基和 4-14 员 杂环烷基烷基 ；
各 Rb 表 示 适 宜 的 基 团 且 彼 此 独 立 地 选 自 ＝ O、 -ORc、 C1-3 卤 代 烷 氧 基、 -OCF3、 ＝ S、 -SRc、 ＝ NRc、 ＝ NORc、 ＝ NNRcRc、 ＝ NN(Rg) C ( O ) NR c R c 、 - NR c R c 、 - ONR c R c 、 - N ( OR c ) R c 、 - N ( R g ) NR c R c 、 卤 素、 - CF 3 、 - CN 、 - NC 、 - OCN 、 - SCN 、 - NO 、 - NO 2、 ＝ N 2、 - N 3、 - S ( O ) R c、 - S ( O ) O R c、 - S ( O ) 2R c、 - S ( O ) 2O R c、 - S ( O ) N R cR c、 - S ( O ) 2N R cR c、 - O S ( O ) Rc、 -OS(O)2Rc、 -OS(O)2ORc、 -OS(O)NRcRc、 -OS(O)2NRcRc、 -C(O)Rc、 -C(O) OR c、 - C ( O ) SR c、 - C ( O ) NR cR c、 - C ( O ) N ( R g) NR cR c、 - C ( O ) N ( R g) OR c、 - C ( NR g) NR c R c 、 - C ( NOH ) R c 、 - C ( NOH ) NR c R c 、 - OC ( O ) R c 、 - OC ( O ) OR c 、 - OC ( O ) SR c 、 - OC ( O ) NR c R c 、 - OC ( NR g ) NR c R c 、 - SC ( O ) R c 、 - SC ( O ) OR c 、 - SC ( O )
NRcRc、 -SC(NRg)NRcRc、 -N(Rg)C(O)Rc、 -N[C(O)Rc]2、 -N(ORg)C(O)Rc、 -N(Rg) C(NRg)Rc、 -N(Rg)N(Rg)C(O)Rc、 -N[C(O)Rc]NRcRc、 -N(Rg)C(S)Rc、 -N(Rg)S(O) Rc、 -N(Rg)S(O)ORc、 -N(Rg)S(O)2Rc、 -N[S(O)2Rc]2、 -N(Rg)S(O)2ORc、 -N(Rg) S(O)2NRcRc、 -N(Rg)[S(O)2]2Rc、 -N(Rg)C(O)ORc、 -N(Rg)C(O)SRc、 -N(Rg)C(O) NRcRc、-N(Rg)C(O)NRgNRcRc、-N(Rg)N(Rg)C(O)NRcRc、-N(Rg)C(S)NRcRc、-[N(Rg) C(O)]2Rc、 -N(Rg)[C(O)]2Rc、 -N{[C(O)]2Rc}2、 -N(Rg)[C(O)]2ORc、 -N(Rg)[C(O)]2 NRcRc、 -N{[C(O)]2ORc}2、 -N{[C(O)]2NRcRc}2、 -[N(Rg)C(O)]2ORc、 -N(Rg)C(NRg) ORc、 -N(Rg)C(NOH)Rc、 -N(Rg)C(NRg)SRc、 -N(Rg)C(NRg)NRcRc、 -N ＝ RcRc 和 -N ＝ C(Rg)NRcRc ；且
各 Rc 彼此独立地表示氢或任选经一或多个相同或不同的 Rd 和 / 或 Re 取代的选自 以下的基团 ：C1-6 烷基、2-6 员杂烷基、 C1-6 卤代烷基、 C3-10 环烷基、 C4-16 环烷基烷基、 C6-10 芳基、C7-16 芳基烷基、5-12 员杂芳基、6-18 员杂芳基烷基、3-14 员杂环烷基和 4-14 员杂环烷基烷基 ；且
各 Rd 表 示 适 宜 的 基 团 且 彼 此 独 立 地 选 自 ＝ O、 -ORe、 C1-3 卤 代 烷 氧 基、 -OCF3、 ＝ S、 -SRe、 ＝ NRe、 ＝ NORe、 ＝ NNReRe、 ＝ NN(Rg)C(O) NReRe、 -NReRe、 -ONReRe、 -N(Rg)NReRe、卤素、 -CF3、 -CN、 -NC、 -OCN、 -SCN 、 -NO、 -NO2、 ＝ N2、 -N3、 -S(O)Re、 -S(O)ORe、 -S(O)2Re、 -S(O)2ORe、 -S(O) N R eR e、 - S ( O ) 2N R eR e、 - O S ( O ) R e、 - O S ( O ) 2R e、 - O S ( O ) 2O R e、 - O S ( O ) NReRe、-OS(O)2NReRe、-C(O)Re、-C(O)ORe、-C(O)SRe、-C(O)NReRe、-C(O)N(Rg) NReRe、 -C(O)N(Rg)ORe、 -C(NRg)NReRe、 -C(NOH)Re、 -C(NOH)NReRe、 -OC(O) Re、 -OC(O)ORe、 -OC(O)SRe、 -OC(O)NReRe、 -OC(NRg)NReRe、 -SC(O)Re、 -SC(O) OR e、 - SC ( O ) NR eR e、 - SC ( NR g) NR eR e、 - N ( R g) C ( O ) R e、 - N[C ( O ) R e] 2、 - N ( OR g) C(O)Re、 -N(Rg)C(NRg)Re、 -N(Rg)N(Rg)C(O)Re、 -N[C(O)Re]NReRe、 -N(Rg)C(S)R e、 - N ( R g) S ( O ) R e、 - N ( R g) S ( O ) OR e、 - N ( R g) S ( O ) 2R e、 - N[S ( O ) 2R e] 2、 - N ( R g) S(O)2ORe、 -N(Rg)S(O)2NReRe、 -N(Rg)[S(O)2]2Re、 -N(Rg)C(O)ORe、 -N(Rg)C(O) SRe、 -N(Rg)C(O)NReRe、 -N(Rg)C(O)NRgNReRe、 -N(Rg)N(Rg)C(O)NReRe、 -N(Rg) C ( S ) NR e R e 、 - [N ( R g ) C ( O ) ] 2 R e 、 - N ( R g ) [C ( O ) ] 2 R e 、 - N{[C ( O ) ] 2 R e } 2 、 - N ( R g ) [C(O)]2ORe、 -N(Rg)[C(O)]2NReRe、 -N{[C(O)]2ORe}2、 -N{[C(O)]2NReRe}2、 -[N(Rg) C ( O ) ] 2OR e、 - N ( R g) C ( NR g) OR e、 - N ( R g) C ( NOH ) R e、 - N ( R g) C ( NR g) SR e、 - N ( R g) C(NRg)NReRe、 -N ＝ ReRe 和 -N ＝ C(Rg)NReRe ；
各 Re 彼此独立地表示氢或任选经一或多个相同或不同的 Rf 和 / 或 Rg 取代的选自 以下的基团 ：C1-6 烷基、2-6 员杂烷基、 C1-6 卤代烷基、 C3-10 环烷基、 C4-16 环烷基烷基、 C6-10 芳基、C7-16 芳基烷基、5-12 员杂芳基、6-18 员杂芳基烷基、3-14 员杂环烷基和 4-14 员杂环烷基烷基 ；且
各 Rf 表示适宜的基团，且在各情况下彼此独立地选自＝ O、 -ORg、 C1-3 卤 代 烷 氧 基、 -OCF3、 ＝ S、 -SRg、 ＝ NRg、 ＝ NORg、 ＝ NNRgRg、 ＝ NN(Rh)C(O) NRgRg、 -NRgRg、 -ONRgRg、 -N(Rh)NRgRg、卤素、 -CF3、 -CN、 -NC、 -OCN、 -SCN 、 -NO、 -NO2、＝ N2、 -N3、 -S(O)Rg、 -S(O)ORg、 -S(O)2Rg、 -S(O)2ORg、 -S(O) N R gR g、 - S ( O ) 2N R gR g、 - O S ( O ) R g、 - O S ( O ) 2R g、 - O S ( O ) 2O R g、 - O S ( O ) NRgRg、 -OS(O)2NRgRg、 -C(O)Rg、 -C(O)ORg、 -C(O)SRg、 -C(O)NRgRg、 -C(O) N ( R h) N R gR g、 - C ( O ) N ( R h) O R g、 - C ( N R h) N R gR g、 - C ( N O H ) R g、 - C ( N O H ) NR g R g 、 - OC ( O ) R g 、 - OC ( O ) OR g 、 - OC ( O ) SR g 、 - OC ( O ) NR g R g 、 - OC ( NR h ) NR g R g 、 - SC ( O ) R g 、 - SC ( O ) OR g 、 - SC ( O ) NR g R g 、 - SC ( NR h ) NR g R g 、 - N ( R h ) C ( O ) R g、 - N[C ( O ) R g] 2、 - N ( OR h) C ( O ) R g、 - N ( R h) C ( NR h) R g、 - N ( R h) N ( R h) C ( O ) Rg、 -N[C(O)Rg]NRgRg、 -N(Rh)C(S)Rg、 -N(Rh)S(O)Rg、 -N(Rh)S(O)ORg、 -N(Rh) S ( O ) 2R g、 - N [ S ( O ) 2R g] 2、 - N ( R h) S ( O ) 2O R g、 - N ( R h) S ( O ) 2N R gR g、 - N ( R h) [S(O)2]2Rg、 -N(Rh)C(O)ORg、 -N(Rh)C(O)SRg、 -N(Rh)C(O)NRgRg、 -N(Rh)C(O) NRhNRgRg、 -N(Rh)N(Rh)C(O)NRgRg、 -N(Rh)C(S)NRgRg、 -[N(Rh)C(O)]2Rg、 -N(Rh) [C(O)]2Rg、 -N{[C(O)]2Rg}2、 -N(Rh)[C(O)]2ORg 、 -N(Rh)[C(O)]2NRgRg 、 -N{[C(O)]2 ORg}2、 -N{[C(O)]2NRgRg}2、 -[N(Rh)C(O)]2ORg、 -N(Rh)C(NRh)ORg、 -N(Rh)C(NOH) Rg、 -N(Rh)C(NRh)SRg、 -N(Rh)C(NRh)NRgRg、 -N ＝ RhRh 和 -N ＝ C(Rh)NRhRh ；及
各 Rg 彼此独立地表示氢或任选经一或多个相同或不同的 Rh 取代的选自以下的基 团 ：C1-6 烷基、2-6 员杂烷基、 C1-6 卤代烷基、 C3-10 环烷基、 C4-16 环烷基烷基、 C6-10 芳 基、 C7-16 芳基烷基、5-12 员杂芳基、6-18 员杂芳基烷基、3-14 员杂环烷基和 4-14 员杂 环烷基烷基 ；且
各 Rh 彼此独立地选自氢、 C1-6 烷基、2-6 员杂烷基、 C1-6 卤代烷基、 C3-10 环烷 基、C4-16 环烷基烷基、C6-10 芳基、C7-16 芳基烷基、5-12 员杂芳基、6-18 员杂芳基烷基、 3-14 员杂环烷基和 4-14 员杂环烷基烷基 ；
该化合物任选呈其前药、互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构 体、前药及其混合物的形式，以及任选其药理学上可接受的盐的形式。
本发明的一方面为通式 (1) 化合物，其中 R3 为选自任选经一或多个 R4 取代的吡 啶基、吡嗪基、嘧啶基和哒嗪基的基团。本发明的另一方面为通式 (1) 化合物，其中 R3 为吡啶基。
本发明的另一方面为通式 (1) 化合物，其中 R3 被选自以下的基团取代 ：卤 素、 -CN、 -ORc、 -NRcRc 及任选经 Rb 取代的 C1-6 烷基。
本发明的另一方面为通式 (1) 化合物，其中 R1 为 -NHC(O)Rc。
本发明的另一方面为通式 (1) 化合物，其中 R1 为 -NHC(O)CH3。
本发明的另一方面为通式 (1) 化合物或其药物活性盐，其用作药物。
本发明的另一方面为通式 (1) 化合物或其药理学上有效的盐，其用于制备具有 抗增殖活性的药物。
本发明的另一方面为含有一或多种通式 (1) 化合物或其生理学上可接受的盐的 活性物质，任选混有常规赋形剂和 / 或载体的药物制剂。
本发明的另一方面为通式 (1) 化合物在制备用于治疗和 / 或预防癌症、感染、炎 症及自身免疫性疾病的药物组合物中的用途。
本发明的另一方面为药物制剂，其包含通式 (1) 化合物及至少一种不同于式 (1) 的其他抑制细胞的或细胞毒性的活性物质 ；通式 (1) 化合物任选呈其互变异构体、外消 旋体、对映异构体、非对映异构体及其混合物的形式，以及任选其药理学上可接受的酸 加成盐的形式。 定义
如本文所使用，除非另外说明，否则适用以下定义。
烷基取代基在各情况下是指饱和的、不饱和的、直链的或支链的脂肪族烃基 ( 烷基 )，其包括饱和的烷基与不饱和的烯基和炔基。 烯基取代基在各情况下为直链或支 链的具有至少一个双键的不饱和的烷基。 炔基取代基在各情况下是指直链或支链的具有 至少一个叁键的不饱和的烷基。
术语杂烷基指衍生自如上文定义的最宽广意义上的烷基的基团，其中，烃链中 一或多个 -CH3 基团彼此独立地被 -OH、-SH 或 -NH2 基团替换、一或多个 -CH2- 基团彼
此独立地被 -O-、 -S- 或 -NH- 基团替换、一或多个基团
被基团替换、一或多个＝ CH- 基团被＝ N- 基团替换、一或多个＝ CH2 基团被＝ NH 基团替 换，或一或多个≡ CH 基团被≡ N 基团替换 ；同时，杂烷基中总共仅可存在最多三个杂原 子 ；在两个氧原子之间及两个硫原子之间或一个氧原子与一个硫原子之间，必须存在至 少一个碳原子 ；且该基团作为整体必须具有化学稳定性。由从烷基的间接定义 / 推导得出，杂烷基由具有杂原子的饱和烃链、杂烯基及 杂炔基的子群构成，同时其可进一步细分为直链 ( 未分支 ) 与支链的。 若假定杂烷基被 取代，则可在所有携带氢的氧、硫、氮和 / 或碳原子处彼此独立地进行取代，在各情况 下，进行单取代或多取代。 杂烷基本身可通过碳原子及通过杂原子而作为取代基连接至 分子。
举例而言，列出以下代表性化合物 ：
二甲基氨基甲基 ；二甲基氨基乙基 (1- 二甲基氨基乙基、2- 二甲基氨基乙基 ) ； 二甲基氨基丙基 (1- 二甲基氨基丙基、2- 二甲基氨基丙基、3- 二甲基氨基丙基 ) ；二乙
基氨基甲基 ；二乙基氨基乙基 (1- 二乙基氨基乙基、2- 二乙基氨基乙基 ) ；二乙基氨基 丙基 (1- 二乙基氨基丙基、2- 二乙基氨基丙基、3- 二乙基氨基丙基 ) ；二异丙基氨基乙 基 (1- 二异丙基氨基乙基、2- 二异丙基氨基乙基 ) ；双 -2- 甲氧基乙基氨基 ；[2-( 二甲 基氨基 - 乙基 )- 乙基 - 氨基 ]- 甲基 ；3-[2-( 二甲基氨基 - 乙基 )- 乙基 - 氨基 ]- 丙基 ； 羟甲基 ；2- 羟基 - 乙基 ；3- 羟基丙基 ；甲氧基 ；乙氧基 ；丙氧基 ；甲氧基甲基 ；2- 甲 氧基乙基等。
卤代烷基是指其中一或多个氢原子被卤素原子替换的烷基。 卤代烷基包括饱和 的烷基与不饱和的烯基和炔基，如 -CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CHFCF3、-CH2CF3 、-CF2CH3、-CHFCH3、-CF2CF2CF3、-CF2CH2CH3、-CF ＝ CF2、-CCl ＝ CH2、-CBr ＝ CH2、 -CI ＝ CH2、 -C ≡ C-CF3、 -CHFCH2CH3 和 -CHFCH2CF3。
卤素是指氟、氯、溴和 / 或碘原子。
环烷基是指单环或双环，所述的环系统可为饱和的环，或不饱和的非芳香环， 其亦任选含有双键，如环丙基、环丙烯基、环丁基、环丁烯基、环戊基、环戊烯基、环 己基、环己烯基、降冰片基及降冰片烯基。
环烷基烷基包括其中连接至碳原子 ( 通常连接至末端 C 原子 ) 的氢原子被环烷基 替换的非环状烷基。
芳基指具有 6-10 个碳原子的单环或双环状芳香环，如，苯基和萘基。
芳基烷基包括其中连接至碳原子 ( 通常连接至末端 C 原子 ) 的氢原子被芳基替换 的非环状烷基。
杂芳基是指单环或双环状芳香环，其含有一或多个相同或不同的杂原子 ( 如， 氮、硫或氧原子 ) 替代一或多个碳原子。 实例包括 ：呋喃基、噻吩基、吡咯基、 基、噻唑基、异 唑基、异噻唑基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、 唑基、苯并噻唑基、苯并异 唑 二唑基、 唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基及三嗪基。 双环杂芳基的实例为 ：吲哚 基、异吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并 基、喹唑啉基及苯并三嗪基、吲嗪基、 噻吩基、异苯并噻吩基、苯并 苯并异噻唑基、苯并咪唑基、吲唑基、异喹啉基、喹啉基、喹喔啉基、噌啉基、酞嗪 唑并吡啶基、咪唑并吡啶基、萘啶基、吲哚啉 基、异色满基、色满基、四氢异喹啉基、异吲哚啉基、异苯并四氢呋喃基、异苯并四氢 唑基、吡啶并吡啶基、苯并四氢呋喃基、苯并四氢噻 嗪基、吩噻嗪基、蝶啶基、苯并 嗪基、苯并异 嗪基、苯并 吩基、嘌呤基、苯并二氧杂环戊烯基、三嗪基、吩 噻唑基、咪唑并吡啶基、咪唑并噻唑基、二氢苯并异嗪基、二氢苯并异噻嗪基、苯并吡喃基、苯并噻喃基、香豆素基、异香豆素基、色烯酮 基 (chromonyl)、色满酮基 (chromanonyl)、吡啶基 -N- 氧化物、四氢喹啉基、二氢喹 啉基、二氢喹啉酮基 (dihydroquinolinonyl)、二氢异喹啉酮基、二氢香豆素基、二氢异 香豆素基、异吲哚啉酮基、苯并二 烷基、苯并 唑啉酮基、吡咯基 -N- 氧化物、嘧 啶基 -N- 氧化物、哒嗪基 -N- 氧化物、吡嗪基 -N- 氧化物、喹啉基 -N- 氧化物、吲哚 基 -N- 氧化物、吲哚啉基 -N- 氧化物、异喹啉基 -N- 氧化物、喹唑啉基 -N- 氧化物、喹 喔啉基 -N- 氧化物、酞嗪基 -N- 氧化物、咪唑基 -N- 氧化物、异 唑基 -N- 氧化物、苯并咪唑基 -N- 氧化物、吡咯基 -N- 氧化物、9唑基 -N- 氧化物、 二唑基 -N- 氧化物、唑基 -N- 氧化物、噻唑基 -N- 氧化物、吲嗪基 -N- 氧化物、吲唑基 -N- 氧化物、苯并噻CN 102015728 A CN 102015738 A说明书6/114 页噻二唑基 -N- 氧化物、三唑基 -N- 氧化物、四唑基 -N- 氧化物、苯并噻喃基 -S- 氧化物 及苯并噻喃基 -S， S- 二氧化物。
杂芳基烷基包括其中连接至碳原子 ( 通常连接至末端 C 原子 ) 的氢原子被杂芳基 替换的非环状烷基。
杂环烷基是指包含 3-12 个碳原子的饱和的或不饱和的、非芳香单环、双环或桥 接双环状环，其具有如氮、氧或硫的杂原子替代一或多个碳原子。 杂环烷基的实例为 四氢呋喃基、吡咯烷基、吡咯啉基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、哌啶 基、哌嗪基、吲哚啉基、异吲哚啉基、吗啉基、硫代吗啉基、高吗啉基、高哌啶基、高 哌嗪基、高硫代吗啉基、硫代吗啉基 -S- 氧化物、硫代吗啉基 -S， S- 二氧化物、四氢吡 喃基、四氢噻吩基、高硫代吗啉基 -S，S- 二氧化物、 唑烷酮基、二氢吡唑基、二氢吡 咯基、二氢吡嗪基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢呋喃基、二氢吡喃基、二氧杂硼杂 环戊烷基、四氢噻吩基 -S- 氧化物、四氢噻吩基 -S，S- 二氧化物、高硫代吗啉基 -S- 氧 化物、2- 氧杂 -5- 氮杂双环 [2.2.1] 庚烷、8- 氧杂 -3- 氮杂 - 双环 [3.2.1] 辛烷、3，8- 二氮 杂 - 双环 [3.2.1]- 辛烷、2，5- 二氮杂 - 双环 [2.2.1] 庚烷、3，8- 二氮杂 - 双环 [3.2.1]- 辛 烷、3，9- 二氮杂 - 双环 [4.2.1] 壬烷及 2，6- 二氮杂 - 双环 [3.2.2] 壬烷。
杂环烷基烷基指其中连接至碳原子 ( 通常，连接至末端 C 原子 ) 的氢原子被杂环 烷基替换的非环状烷基。
以下实施例用于示例性地说明本发明，而不是对其范围进行限制。
中间体 A ：
在较早的申请案中曾描述可作为本文的起始物的取代的 5，6- 二氢 -4H- 苯并噻 唑 -7- 酮的合成法 ( 参见 WO2006/040281、WO2007/113245，及 WO2007/113246)。 其 他起始物可根据其中描述的步骤制备。
通用步骤 A1 ：由酰氯形成二酮
在惰性氛围下，添加一元酮至无水 THF( 例如，10mmol 于 90mL 溶剂中 )，并 将悬浮液冷却至 -78℃。 缓慢添加 LiHMDS(3.4 当量 ) 至反应混合物，以保持反应温度 在 -60℃以下。 添加完毕之后，缓慢添加酰氯 (1.2 当量 ) 的无水 THF 溶液 ( 约 2-2.5M)。 搅拌反应混合物过夜使其回温至室温。为进行后处理，将混合物冷却至 -20℃，并以稀盐 酸及磷酸盐缓冲液 (22g NaH2PO4，87g Na2HPO4，530mL H2O) 中止反应，得到最终 pH 约 6。 添加乙酸乙酯，并分离有机层。 用乙酸乙酯萃取水相 3 次，用 MgSO4 干燥合并的有 机相、过滤，并在减压下除去溶剂。 以 TBME 处理剩余固体，滤出溶剂。 产物可不经进 一步纯化而使用。 通用步骤 A2 ：由酯形成二酮
将一元酮 (1.0 当量 ) 溶解于 DMSO 中 (1M 溶液 )，并缓慢添加 NaOtBu 或叔戊 醇钠 (sodium tert.-pentoxide)(3.0 当量 )。 在室温搅拌反应混合物 30 分钟，接着缓慢添加 酯 (1.1 当量 )。 添加完毕后，在室温搅拌混合物 4 小时，倾于冰上，并以饱和氯化铵溶 液中和。 滤出沉淀物，用水洗涤，在真空下于 40℃干燥过夜。 或者，反应完毕之后蒸发 溶剂，且粗产物可不经进一步纯化而用于下一步骤。
通用步骤 A3 ：由活化酯形成二酮
a) 形成活化酯
将羧酸 (1.0 当量 ) 溶解于 CH2Cl2 中，添加 CDI(1.0 当量 )，并在室温搅拌反应 混合物过夜。 在真空中除去溶剂，且粗产物不经进一步纯化而使用。
b) 形成二酮
在惰性氛围下，以 THF 稀释 LiHMDS(3 当量 ) 的 THF 的 1M 溶液，并将所得溶 液冷却至 -10℃。 分小份添加一元酮 (1.0 当量 ) 以保持反应温度在 -10℃以下。 在 -10℃ 下再搅拌 1 小时之后，缓慢添加活化酯 (2.0 当量 ) 于 THF 中的溶液。 搅拌反应混合物 过夜使其回温至室温。 以 NH4Cl 饱和水溶液中止反应，并用 CH2Cl2 萃取水相两次。 用 MgSO4 干燥合并的有机层、过滤，并在减压下除去溶剂。 以 RP- 色谱法纯化产物。
通用步骤 A4 ：邻 - 氟吡啶的亲核性芳香取代
将邻 - 氟吡啶与过量的胺溶解于 EtOH 或 iPrOH/THF(0.1-0.2M) 中，并在微波中 于 100℃加热混合物 30-60 分钟，或使其处于室温下而不加热 ( 通常通过 LC-MS 监测反 应直至所有起始物料均已反应 )。 反应完毕之后，在真空中除去溶剂，且通过色谱法 ( 以 MeOH/DCM 的 NP 或以 ACN/H2O 的 RP) 纯化产物或不经进一步纯化而使用。
A-01)N-[6-(6- 氟 - 吡啶 -3- 羰基 )-7- 羟基 -4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 乙 酰胺
由 21.0g(100mmol) 的 N-(7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 乙酰 胺及 20.2g(120mmol，95％纯 )6- 氟烟酰氯 (nicotinic acid chloride) 起始，根据通用步骤 A1 合成标题化合物。 产量 ：27.0g。
A-02)N-[6-(6- 二 甲 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 乙酰胺
由 500mg(1.5mmol) 的 A-01 及 5.0mL 的 2M 二甲胺溶液 THF(10mmol) 获得标 题化合物。 在 EtOH 中根据通用步骤 A4 进行该反应。 通过 NP- 色谱法纯化产物。 产 量 ：205mg。
A-03)N-[6-(6- 叔 丁 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 乙酰胺
由 160mg(0.39mmol，～ 81％纯度 ) 的 A-01 与 410μL(3.90mmol) 叔丁胺获得标题化合物。 在 EtOH 中根据通用步骤 A4 进行该反应。 粗产物未经进一步纯化而使用。 产量 ：157mg。
A-04)N-[6-(6- 环 丙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 乙酰胺
由 160mg(0.39mmol，约 81 ％纯度 ) 的 A-01 与 270μL(3.90mmol) 环丙基胺获 得标题化合物。 在 EtOH 中根据通用步骤 A4 进行该反应。 粗产物未经进一步纯化而使 用。 产量 ：168mg。
A-05)N-[6-(6- 烯 丙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 乙酰胺
由 160mg(0.39mmol，约 81％纯度 ) 的 A-01 及 290μL(3.87mmol) 烯丙胺根据通 用步骤 A4 获得标题化合物。 在 EtOH 中进行该反应。 粗产物未经进一步纯化而使用。 产量 ：177mg。
A-06)N-[7- 羟 基 -6-(6- 异 丙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 乙酰胺
由 160mg(0.39mmol，约 81％纯度 ) 的 A-01 及 335μL(3.89mmol) 异丙胺获得标 题化合物。 在 EtOH 中根据通用步骤 A4 进行该反应。 粗产物未经进一步纯化而使用。 产量 ：179mg。 A-07)N-[7- 羟 基 -6-(6- 甲 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 乙酰胺
由 27.0g(72.90mmol，约 90％纯度 ) 的 A-01 与 27mL(319.7mmol) 甲胺水溶液获 得标题化合物。 在 THF 与 iPrOH 的 1 ∶ 1 混合物中根据通用步骤 A4 进行该反应。 为进行处理，在减压下除去大部分溶剂，滤出所形成的沉淀物并以少量 iPrOH 以及水洗涤。 产量 ：17.8g。
A-08)N-{6-[6-(2- 二甲基氨基 - 乙基氨基 )- 吡啶 -3- 羰基 ]-7- 羟基 -4，5- 二 氢 - 苯并噻唑 -2- 基 }- 乙酰胺 (A-08)
由 1.0g(3.00mmol) 的 A-01 及 1.56mL(14.1mmol) 的 N， N- 二甲基乙二胺获得 标题化合物。 在 THF 与 iPrOH 的 1 ∶ 1 混合物中根据通用步骤 A4 进行该反应。 为进行 处理，在减压下除去溶剂，以水溶解残余物，用 CH2Cl2 萃取，用 MgSO4 干燥有机相，过 滤并在真空中除去溶剂。 产量 ：1.49g。
A-09)N-{7- 羟基 -6-[6-(2- 甲氧基 - 乙基氨基 )- 吡啶 -3- 羰基 ]-4，5- 二氢 - 苯 并噻唑 -2- 基 }- 乙酰胺
由 1.0g(3.0mmol) 的 A-01 及 1.22mL(14.1mmol) 的 2- 甲氧基乙胺获得标题化合 物。 在 THF 与 iPrOH 的 1 ∶ 1 混合物中根据通用步骤 A4 进行该反应。 为进行处理，在 减压下除去溶剂，以水处理残余物。 滤出沉淀物，用水洗涤两次并干燥。 产量 ：1.03g。
A-10)N-[6-(6- 乙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 乙酰胺
由 25.0g(67.50mmol，约 90％纯度 ) 的 A-01 及 25mL(314mmol) 乙胺水溶液获得 标题化合物。 在 THF 与 iPrOH 的 1 ∶ 1 混合物中根据通用步骤 A4 进行该反应。 为进行 处理，在减压下除去大部分溶剂，添加水并滤出所形成的沉淀物。 以 iPrOH 及水二者洗 涤产物两次。 产量 ：20.2g。
A-11)N-[6-(6- 乙基氨基 -5- 甲基 - 吡啶 -3- 羰基 )-7- 羟基 -4，5- 二氢 - 苯并 噻唑 -2- 基 ]- 乙酰胺
由 3.46g(9.96mmol) 的 N-[6-(6- 氟 -5- 甲基 - 吡啶 -3- 羰基 )-7- 羟基 -4，5- 二 氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 乙酰胺 ( 类似于 A-01 而制得 ) 与 3.46mL(43.5mmol) 乙胺水溶液 获得标题化合物。 在 THF 与 iPrOH 的 1 ∶ 1 混合物中根据通用步骤 A4 进行该反应。 粗 产物未经进一步纯化而使用。 产量 ：2.1g。
A-12)N-[6-(6- 氯 - 吡啶 -3- 羰基 )-7- 羟基 -4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 乙 酰胺
通过使 3.34g(15.9mmol) 的 N-(7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 乙 酰胺与 6.60g(31.8mmol) 的 (6- 氯 - 吡啶 -3- 基 )- 咪唑 -1- 基 - 甲酮根据通用步骤 A3 反 应获得标题化合物。 通过 RP-HPLC( 梯度 5-70％ ACN，25 分钟，60mL/ 分钟 ) 纯化产 物。 产量 ：570mg。
A-13)N-[6-(5- 氟 - 吡啶 -3- 羰基 )-7- 羟基 -4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 乙 酰胺
通 过 使 500mg(2.38mmol) 的 N-(7- 氧 代 -4，5，6，7- 四 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 )- 乙酰胺与 909mg(4.76mmol) 的 (5- 氟 - 吡啶 -3- 基 )- 咪唑 -1- 基 - 甲酮根 烷溶液中止反应，接着添加磷据通用步骤 A3 反应获得标题化合物。 以于 4N HCl 的二酸盐缓冲液 (pH 6-7)。 萃取之后获得的粗产物未经进一步纯化而使用。 产量 ：800mg。
A-14)N-[7- 羟基 -6-(5- 甲基 - 吡啶 -3- 羰基 )-4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 乙 酰胺
通 过 使 786mg(3.74mmol) 的 N-(7- 氧 代 -4，5，6，7- 四 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 )- 乙酰胺与 1.40g(7.48mmol) 的 (5- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )- 咪唑 -1- 基 - 甲酮根 据通用步骤 A3(-60℃ ) 反应获得标题化合物。 以 HCl 的乙醚溶液 (pH 3) 中止反应，接 着添加 CH2Cl2 及磷酸盐缓冲液 (28.1g NaH2PO4×2H2O，106.8g NaHPO4×2H2O，500mL H2O)。 通过 RP-HPLC( 梯度 5-80％ ACN，40min) 纯化产物。 产量 ：439mg。A-15)N-[6-(6- 乙基 - 吡啶 -3- 羰基 )-7- 羟基 -4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 乙酰胺
通过使 21.0g(210mmol) 的 N-(7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 乙 酰胺与 19.0g(115mmol) 的 6- 乙基 - 烟酸乙酯根据通用步骤 A2 反应获得标题化合物。 产 量 ：26.4g。
A-16)N-[7- 羟 基 -6-(6- 异 丙 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 乙酰胺
通过使 1.67g(7.92mmol) 的 N-(7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 乙 酰胺与 2.13g(11.9mmol) 的 6- 异丙基 - 烟酸乙酯根据通用步骤 A2 反应获得标题化合物。 产量 ：3.82g。
A-17)N-[7- 羟 基 -6-(6- 甲 氧 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 乙酰胺
通过使 3.36g(16.0mmol) 的 N-(7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 乙 酰胺与 6.50g(32.0mmol) 的 (6- 甲氧基 - 吡啶 -3- 基 )- 咪唑 -1- 基 - 甲酮根据通用步骤 A3 反应获得标题化合物。 以饱和 NH4Cl 溶液中止反应，接着萃取。 通过 RP- 色谱法 ( 梯 度 ：5-70％ ACN，25 分钟，60mL/ 分钟 ) 纯化产物。 产量 ：860mg。
A-18)N-[6-(5，6- 二 甲 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 乙酰胺
通过使 5.00g(23.8mmol) 的 N-(7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 乙 酰胺与 4.71g(28.5mmol) 的 5，6- 二甲基烟酸甲酯根据通用步骤 A2 反应获得标题化合 物。 通过 NP-HPLC( 梯度 DCM/MeOH 99 ∶ 1-80 ∶ 20，20 分钟，60mL/ 分钟 ) 纯化产 物。 产量 ：917mg。
A-19)N-[7- 羟基 -6-( 喹啉 -3- 羰基 )-4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 乙酰胺通过使 1.67g(7.95mmol) 的 N-(7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 乙 酰胺与 2.66g(23.9mmol) 咪唑 -1- 基 - 喹啉 -3- 基 - 甲酮根据通用步骤 A3 反应获得标题化 合物。 反应期间形成沉淀物，在不中止反应的情况下滤出沉淀物，以 THF 洗涤，溶解于 饱和 NaHCO3 溶液与 CH2Cl2 的混合物中。 用 CH2Cl2 萃取水相，用 MgSO4 干燥合并的有 机相，过滤，并在减压下除去溶剂。 用乙醚处理剩余固体，滤出并干燥。 产量 ：1.12g。
A-20)N-[6-(6- 氰基 - 吡啶 -3- 羰基 )-7- 羟基 -4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 乙 酰胺
通过使 1.91g(9.08mmol) 的 N-(7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 乙 酰胺与 2.70g(13.6mmol) 的 (6- 氰基 - 吡啶 -3- 基 )- 咪唑 -1- 基 - 甲酮根据通用步骤 A3 反应获得标题化合物。 添加饱和 NaHCO3 溶液以中止反应。 用 CH2Cl2 萃取水相，用 MgSO4 干燥合并的有机相，过滤，并在减压下除去溶剂。 通过 RP-HPLC( 梯度 5-80％ ACN，30 分钟，60mL/ 分钟 ) 纯化产物。 产量 ：149mg。
A-23)N-[7- 羟基 -6-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 羰基 )-4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 乙 酰胺
通过使 3.82g(18.2mmol) 的 N-(7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 乙 酰胺与 6.80g(36.3mmol) 的 (6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )- 咪唑 -1- 基 - 甲酮根据通用步骤 A3 反应获得标题化合物。 通过添加饱和 NH4Cl 溶液中止反应。 用 CH2Cl2 萃取水相，用 MgSO4 干燥合并的有机相，过滤，并在减压下除去溶剂。 通过 RP-HPLC( 梯度 5-70％ ACN，25 分钟，60mL/ 分钟 ) 纯化产物。 产量 ：4.68g。
A-24)[7- 羟基 -6-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 羰基 )-4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨 基甲酸甲酯
通过使 12.7g(56.3mmol) 的 (7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 氨 基甲酸甲酯与 13.7g(73.2mmol) 的 (6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )- 咪唑 -1- 基 - 甲酮根据通用 步骤 A3 反应获得标题化合物。 滤出反应期间的沉淀产物，并分配于饱和 NaHCO3 溶液 与乙酸乙酯之间。 用 MgSO4 干燥有机相，过滤，并在减压下除去溶剂。 用乙醚处理粗 产物，过滤并干燥。 产量 ：13.3g。
A-25)N-[7- 羟基 -6-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 羰基 )-4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 丙 酰胺
通过使 4.10g(18.3mmol) 的 N-(7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 丙 酰胺与 6.79g(36.0mmol) 的 (6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )- 咪唑 -1- 基 - 甲酮根据通用步骤 A3 反应获得标题化合物。 添加完毕之后，已形成暗色粘稠胶状物。 倾出 THF 并将胶状物溶 解于 NaHCO3 饱和水溶液中。 用 CH2Cl2 萃取混合物，以水及盐水洗涤有机相，用 MgSO4 干燥，并在真空中浓缩。 用乙醚及 ACN 研磨残余物。 产量 ：1.50g。
A-26)(2- 氯 -7- 羟基 -4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -6- 基 )-(6- 氟 - 吡啶 -3- 基 )- 甲 酮
由 2.l0g(11.2mmol) 的 2- 氯 -5，6- 二氢 -4H- 苯并噻唑 -7- 酮与 1.83g(11.4mmol) 的 6- 氟烟酰氯根据通用步骤 A1 获得标题化合物。 将粗产物溶解于 DMSO 中，添加水及 ACN。 形成沉淀物、滤出并用水洗涤。 产量 ：1.20g。
A-27)(2- 氨 基 -7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -6- 基 )-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )- 甲酮
添加 4M HCl 的二烷溶液 15mL 至 2.50g A-23 于 20mL 二烷中的溶液中。 在80℃搅拌混合物 2.5 小时。 在减压下除去溶剂，粗产物未经进一步纯化而使用。
A-28)[7- 羟 基 -6-(6- 甲 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸甲酯
由 2.70g(7.73mmol) 的 [7- 羟基 -6-(6- 氟 - 吡啶 -3- 羰基 )-4，5- 二氢 - 苯并噻 唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸甲酯 ( 其类似于 A-01 而制得 ) 及 2.7mL(32.0mmol) 甲胺水溶液获得 标题化合物。 在 THF 与 iPrOH 的 1 ∶ 1 混合物中根据通用步骤 A4 进行该反应。 为进行 处理，在减压下除去溶剂，过滤沉淀物并以 iPrOH 洗涤。 产量 ：2.31g。
A-29)(2- 环丙基氨基 -7- 羟基 -4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -6- 基 )-(6- 甲基氨基 - 吡 啶 -3- 基 )- 甲酮
将 200mg(0.64mmol) 的 A-26 于 THF 中的溶液冷却至 0 ℃。 添加甲胺的 THF 溶 液 (1.6mL，2M)， 并 在 0 ℃ 搅 拌 混 合 物 2 小 时， 在 室 温 搅 拌 2 小 时。 接 着， 添 加 50μL(0.72mmol) 环丙胺，且在室温搅拌混合物 18 小时。 在减压下除去溶剂。 粗产物 未经进一步纯化而用于下一步骤。
A-30)(7- 羟基 -2- 甲基氨基 -4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -6- 基 )-(6- 甲基氨基 - 吡 啶 -3- 基 )- 甲酮
由 100 mg (0 . 32 mmol ) 的 A -26 、 160 μ L 2 M 甲 胺 的 THF 溶 液 及 800μL(1.60mmol) 乙 胺 于 THF 中 的 2M 溶 液 以 A-29 的 方 法 获 得 标 题 化 合 物。 通 过 RP-HPLC 纯化产物。 产量 ：33mg。
A-31) 氮杂环丁烷 -1- 羧酸 [7- 羟基 -6-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 羰基 )-4，5- 二氢 - 苯 并噻唑 -2- 基 ]- 酰胺
添 加 DIPEA(2.74mL，16.0mmol) 及 氮 杂 环 丁 烷 (540μL，8.0mmol) 至 2.0g(5.33mmol) 的 (7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 硫代氨基甲酸 S- 乙 酯 (thiocarbamic acid S-ethyl ester)( 其类似于 A-32 而制得 ) 于 20mL iPrOH 中的悬浮液。 在微波中于 90℃加热混合物 30 分钟，并在 110℃加热 30 分钟。 在真空中除去溶剂之后， 通过 RP-HPLC 纯化产物。 产量 ：831mg。A-32)[6-(6- 氟 - 吡啶 -3- 羰基 )-7- 羟基 -4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 硫代 氨基甲酸 S- 乙酯
由 12.0g(46.8mmol) 的 (7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 硫代氨 基甲酸 S- 乙酯及 8.22g(51.1mmol) 的 6- 氟 - 烟酰氯根据通用步骤 A1 获得标题化合物。 以 25mL 2M 盐酸及 100mL 磷酸盐缓冲液 (pH 6) 中止反应。 以 TBME 处理萃取之后所获 得的粗产物。 产量 ：18.5g。
A-33)[7- 羟 基 -6-(6- 甲 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 硫代氨基甲酸 S- 乙酯
由 1.50g(3.95mmol) 的 A-32 及 1.50mL(19.8mmol) 甲胺水溶液根据通用步骤 A4 获得标题化合物。 在 THF/iPrOH 中进行该反应。 在真空中除去溶剂之后，以 TBME 处 理剩余固体。 产量 ：1.47g。
A-34)[7- 羟 基 -6-(6- 乙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 硫代氨基甲酸 S- 乙酯
由 18.5g(48.8mmol) 的 A-32 及 20.0mL(247mmol) 乙胺水溶液根据通用步骤 A4 获得标题化合物。 在室温下于 THF/iPrOH 中进行该反应。 产量 ：19.8g。
A-35)[7- 羟基 -6-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 羰基 )-4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨 基甲酸乙酯
在氩气氛下于 -15℃，以小份添加 3.90g(16.2mmol) 的 (7- 氧代 -4，5，6，7- 四 氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 氨基甲酸乙酯至 LiHMDS(1M 于 THF 中，48mL) 于 75mL 无水 THF 中的混合物中。 搅拌混合物 0.5 小时，接着滴加咪唑 -1- 基 -(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )- 甲 酮的预制溶液。 添加完毕之后，已形成暗色粘稠胶状物。 倾出 THF，并将胶状物溶解于 NaHCO3 饱和水溶液中。 用 CH2Cl2 萃取混合物，以水及盐水洗涤有机相、用 MgSO4 干 燥，并在真空中浓缩。 以 ACN 研磨残余物并在真空中于 40℃干燥。 产量 ：4.45g。
A-36) 乙 基 -{5-[7- 羟 基 -2-(3- 甲 氧 基 - 丙 酰 基 氨 基 )-4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -6- 羰基 ]- 吡啶 -2- 基 }- 氨基甲酸叔丁酯
A-36a)6-( 叔丁氧羰基 - 乙基 - 氨基 )- 烟酸将 6- 氯 - 烟酸甲酯 (60g，0.35mol) 溶解于 500mL 2M 乙胺的 THF 溶液，并在 100℃下于密封管内搅拌 16 小时。 将反应混合物冷却至室温，并在减压下除去溶剂。 将 残余物倾于冰上并搅拌 15 分钟。 滤出沉淀物，用水洗涤，并在真空中干燥。 将干燥的 6- 乙基氨基 - 烟酸甲酯 (30g，0.17mol) 溶解于 150mLDCM 及三乙胺 (29mL，0.20mol) 中，在 0℃下依次添加 DMAP(4.0g，33mmol) 及 BOC 酐 (100mL，0.42mol)。 使反应混 合物温至室温并搅拌 16 小时。 添加 100mL 10％柠檬酸水溶液至反应混合物，并搅拌反 应混合物 10 分钟。 分离有机相，用 Na2SO4 干燥，并在减压下浓缩。 产量 ：60g。
将粗 6-( 叔丁氧羰基 - 乙基 - 氨基 )- 烟酸甲酯溶解于 100mL 二烷中，并添加氢氧化锂单水合物 (13.5g，0.32mol) 于 100mL 水中的溶液，并在室温搅拌反应混合物 4 小 时。 在减压下自反应混合物除去二 烷，添加水，并以 10％柠檬酸水溶液将反应混合物 酸化至 pH 6。滤出所形成的沉淀物并在真空中干燥。产量 ：36g。1H NMR(DMSO-d6) ： δ13.2(s，1H)，8.8(s，1H)，8.2(d，1H)，7.8(d，1H)，4.0( 四 重 峰，2H)，1.5(s， 9H)，1.2(t，3H)。
A-36b)(5- 氯羰基 - 吡啶 -2- 基 )- 乙基 - 氨基甲酸叔丁酯
将 A-36a(6.40g，24.0mmol) 溶解于 150mL DCE 中，添加 1 氯 -N，N-2- 三甲基 丙烯基 - 胺 (6.42mL，48.1mmol)，并在室温搅拌反应混合物过夜。 在减压下浓缩反应混 合物，且粗产物未经纯化而用于下一步骤。
A-36c)3- 甲氧基 -N-(7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 丙酰胺
将 1- 咪唑 -1- 基 -3- 甲氧基 - 丙 -1- 酮 (6.9g，45mmol) 于乙腈中的溶液添加至 2- 氨基 -5，6- 二氢 -4H- 苯并噻唑 -7- 酮 (3.0g，18mmol) 与 DBU(5.3mL，36mmol) 于 100mL 乙腈中的混合物中。 在室温搅拌反应混合物 15 分钟，接着在减压下浓缩。 将残 余物倾入水中，以 6M HCl 水溶液酸化至 pH 5，且用乙酸乙酯萃取产物。 用 MgSO4 干燥 合并的有机相，并在减压下浓缩。 产量 ：3.8g。 该产物未经纯化而用于下一步骤。
由 3.8g(15mmol) 的 A-36c 及 6.8g(24mmol) 的 A-36b 起始，根据通用步骤 A1 合 成 A-36。 产量 ：1.23g。
A-37)4- 二甲基氨基 -N-[6-(6- 乙基氨基 - 吡啶 -3- 羰基 )-7- 羟基 -4，5- 二 氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 丁酰胺
A-37a)(2- 氨 基 -7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -6- 基 )-(6- 乙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 基 )- 甲酮
添加 8.8mL 浓 HCl 至 4.0g(11mmol) 的 A-10 于 12mL 二烷中的混合物中，并在 95℃搅拌反应混合物 2 小时。 在减压下浓缩反应混合物，并以甲醇研磨残余物且在真 空中于 40℃干燥。 产量 ：3.7g。
添加 3.5mL(23mmol)DBU 至 3.7g(11mmol) 的 A-37a 于 45mL 乙腈中的混合物 中，并在室温搅拌反应混合物 10 分钟。 接着添加 5.3g(29mmol) 的 4- 二甲基氨基 -1- 咪 唑 -1- 基 - 丁 -1- 酮于乙腈中的溶液，且在 100℃搅拌反应混合物 2 小时，并在 60℃搅拌 过夜。 在减压下浓缩反应混合物，并通过 HPLC(C-18，2-70％乙腈于水中 ) 纯化产物。 产量 ：2.9g。
A-38)N- 叔丁氧羰基 -[5-(2- 乙酰基氨基 -7- 羟基 -4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -6- 羰 基 )- 吡啶 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯
A-38a)6-[N， N- 二 -( 叔丁氧羰基 )- 氨基 ]- 烟酸
将 6- 氨 基 - 烟 酸 甲 酯 (13.7g，90.0mmol)、 三 乙 胺 (12.5mL，90.0mmol) 及DMAP(3.30g，27.0mmol) 溶解于 200mL DCM 中，并滴加焦碳酸二 - 叔丁酯 (di-tert-butyl dicarbonate)(41.3g，189mmol) 于 40mL DCM 中的溶液。 在室温搅拌反应混合物过夜。 添加 5％ KHSO4 水溶液，并以 DCM 萃取反应混合物。 以 50％饱和 KHCO3 水溶液洗涤 合并的有机相，用 MgSO4 干燥，并在减压下浓缩。 产量 ：34.9g。
将此残余物中的 17.3g 溶解于 150mL MeOH 与 300mL 水的混合物中，添加氢 氧化锂 (2.33g，97.3mmol)，并在室温搅拌反应混合物 3 小时。 以乙酸将反应混合物 酸化至 pH 4，并滤出所形成的沉淀物，用水洗涤并在真空中干燥。 产量 ：11.8g。 1H NMR(DMSO-d6) ：δ9.0(s，1H)，8.2(d，1H)，7.2(d，2H)，1.4(s，18H)。
A-38b)N- 叔丁氧羰基 -(5- 氯羰基 - 吡啶 -2- 基 ) 氨基甲酸叔丁酯
通过与甲苯共沸蒸馏来干燥 A-38a(5.00g，14.8mmol)，且接着将其溶解于 20mL 无水 THF 中并冷却至 0℃。 滴加 1- 氯 -N，N-2- 三甲基丙烯基 - 胺 (3.95g，30.0mmol)， 并在室温搅拌反应混合物 3 小时。 在减压下浓缩反应混合物，且粗产物未经纯化而用于 下一步骤。
由 8.0g(38mmol) 的 N-(7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 乙酰胺 及 21.7g(61mmol) 的 A-38b 起始，根据通用步骤 A1 合成 A-38。 产量 ：10.9g。
A-39)N-[6-(6- 乙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]-3-(1- 甲基 -1H- 咪唑 -2- 基 )- 丙酰胺
由 0.30g(0.95mmol) 的 A-37a、0.21mL(1.4mmol)DBU 及 0.48g(2.4mmol) 的 1- 咪 唑 -1- 基 -3-(1- 甲基 -1H- 咪唑 -2- 基 )- 丙 -1- 酮起始，类似于实施例 A-37 制备实施 例 A-39。 产量 ：66mg。
A-40){[6-(6- 乙基氨基 - 吡啶 -3- 羰基 )-7- 羟基 -4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 氨基甲酰基 ]- 甲基 }- 甲基氨基甲酸叔丁酯
由 0.30g(0.95mmol) 的 A-37a、0.21mL(1.4mmol)DBU 及 0.57g(2.4mmol) 的 (2- 咪唑 -1- 基 -2- 氧代 - 乙基 )- 甲基 - 氨基甲酸叔丁酯起始，类似于实施例 A-37 制备 实施例 A-40。 产量 ：0.16g。
A-41){[6-(6- 乙基氨基 - 吡啶 -3- 羰基 )-7- 羟基 -4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 氨基甲酰基 ]- 甲基 }- 氨基甲酸叔丁酯
由 0.30g(0.95mmol) 的 A-37a、0.21mL(1.4mmol)DBU 及 0.53g(2.4mmol) 的 (2- 咪唑 -1- 基 -2- 氧代 - 乙基 )- 氨基甲酸叔丁酯起始，类似于实施例 A-37 制备实施例 A-41。 产量 ：0.19g。
A-42)2- 二甲基氨基 -N-[6-(6- 乙基氨基 - 吡啶 -3- 羰基 )-7- 羟基 -4，5- 二 氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 乙酰胺
由 0.30g(0.95mmol) 的 A-37a、0.21mL(1.4mmol)DBU 及 0.36g(2.4mmol) 的 2- 二 甲基氨基 -1- 咪唑 -1- 基 - 乙酮起始，类似于实施例 A-37 制备实施例 A-42。 产量 ： 0.20g。
A-43)[7- 羟基 -6-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 羰基 )-4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨 基甲酸 3- 甲氧基 - 丙酯
在 100 ℃， 搅 拌 0 . 30 g (1 . 0 mmol ) 的 A -27 、 0 . 42 g (2 . 6 mmol ) CDI 及 0.31mL(2.1mmol)DBU 的混合物 8 小时。 接着添加 0.50mL(5.2mmol)3- 甲氧基 -1- 丙醇， 并在 100℃搅拌反应混合物过夜。 在减压下浓缩反应混合物，并通过 HPLC(C-18，于水 中的 5-80％乙腈 ) 纯化产物。 产量 ：87mg。
A-44)[7- 羟基 -6-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 羰基 )-4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨 基甲酸四氢 - 呋喃 -2- 基甲酯
由 0.30g(1.0mmol) 的 A-27、0.42g(2.6mmol)CDI、0.31mL(2.1mmol)DBU 及 0.50mL(5.2mmol) 四氢糠醇起始，类似于实施例 A-43 制备实施例 A-44。 产量 ：0.14g。
A-45)[7- 羟基 -6-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 羰基 )-4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨 基甲酸四氢 - 呋喃 -3- 基甲酯
由 0.30g(1.0mmol) 的 A-27、0.42g(2.6mmol)CDI、0.31mL(2.1mmol)DBU 及 0.50mL(5.2mmol)( 四 氢 - 呋 喃 -3- 基 )- 甲 醇 起 始， 类 似 于 实 施 例 A-43 制 备 实 施 例 A-45。 产量 ：83mg。
A-46)N- 叔丁氧羰基 -{5-[2-(3，3- 二甲基 - 脲基 )-7- 羟基 -4，5- 二氢 - 苯并 噻唑 -6- 羰基 ]- 吡啶 -2- 基 }- 氨基甲酸叔丁酯
A-46a)1，1- 二甲基 -3-(7- 氧代 -4，5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 脲在 100 ℃， 搅 拌 2- 氨 基 -5，6- 二 氢 -4H- 苯 并 噻 唑 -7- 酮 (10g，59mmol)、 DBU(18mL，0.12mol) 及 CDI(24g，0.15mol) 于 400mL 乙腈中的混合物 5 小时。 接着添 加二甲胺 (150mL，2M 于 THF 中 )，在 100℃搅拌反应混合物过夜。 在减压下浓缩反应 混合物，并将残余物倾入水中。 以于水中的 6M HCl 将混合物酸化至 pH 5，并用乙酸乙 酯萃取。 用 MgSO4 干燥合并的有机相，并在减压下浓缩。 用乙醚研磨残余物。 产量 ：
9.1g。 由 0.20g(2.5g，10mmol) 的 A-46a 及 6.0g(17mmol) 的 A-38b 起始，根据通用步 骤 A1 合成实施例 A-46。 产量 ：2.5g。
A-47)N-[6-(6- 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]-4- 二甲基氨基 - 丁酰胺
A-47a)(2- 氨 基 -7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -6- 基 )-(6- 氨 基 - 吡 啶 -3- 基 )- 甲酮
由 4.0g(7.6mmol)A-38 起始，类似于实施例 A-37a 制备 A-47a。 产量 ：2.7g。
由 2.0g(6.9mmol) 的 A-47a、2.1mL(14mmol)DBU 及 3.1g(17mmol) 的 4- 二甲基 氨基 -1- 咪唑 -1- 基 - 丁 -1- 酮起始，类似于实施例 A-37 制备 A-47。 产量 ：1.9g。
A-48)1-[6-(6- 乙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]-3- 甲基 - 脲
将 5.00g(12.4mmol) 的 A-34 于 2M 甲胺的甲醇溶液 (30mL) 中的溶液在 100℃加 热 20 分钟。 在减压下除去溶剂，且粗产物未经进一步纯化而用于下一步骤。
A-49)1-[6-(6- 乙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 脲
将 0.90g(2.2mmol) 的 A-34 在 2M 氨的甲醇溶液 (5.5mL) 中的溶液在 100℃加热 30 分钟。 在减压下除去溶剂且粗产物未经进一步纯化而用于下一步骤。
A-50)1-[6-(6- 乙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]-3- 乙基 - 脲
将 450mg(1.1mmol) 的 A-34 在 2M 乙胺的 THF 溶液 (2.8mL) 中的溶液在 120℃ 加热 20 分钟。 在减压下除去溶剂且粗反应产物未经进一步纯化而用于下一步骤。
A-51)1-(2- 二 甲 基 氨 基 - 乙 基 )-3-[6-(6- 乙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 脲
将 400mg(0.99mmol) 的 A-34 及 545μL(4.94mmol) 的 N，N- 二甲基 - 乙二胺于 2mL THF 中的溶液在 120℃加热 20 分钟。 在减压下除去溶剂，且粗产物未经进一步纯化 而用于下一步骤。
A-52)1-[6-(6- 乙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻
唑 -2- 基 ]-3-(2- 甲氧基 - 乙基 )- 脲
将 300mg(0.74mmol) 的 A-34 及 322μl(3.71mmol) 的 2- 甲氧基 - 乙胺于 3mL THF 中的溶液在 120℃加热 20 分钟。 在减压下除去溶剂，且粗产物未经进一步纯化而用 于下一步骤。
A-53)1-(3- 二 甲 基 氨 基 - 丙 基 )-3-[6-(6- 乙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 脲
将 300mg(0.74mmol) 的 A-34 和 467μL(3.71mmol) 的 N，N- 二甲基 -1，3- 丙 二胺于 3mL THF 中的溶液在 120℃加热 20 分钟。 在减压下除去溶剂，且粗产物未经进一 步纯化而用于下一步骤。
A-54)1-[6-(6- 乙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 羰 基 )-7- 羟 基 -4，5- 二 氢 - 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]-3-(3- 甲氧基 - 丙基 )- 脲
将 300mg(0.74mmol) 的 A-34 及 378μL(3.71mmol) 的 3- 甲氧基 - 丙胺于 3mL THF 中的溶液在 120℃加热 20 分钟。 在减压下除去溶剂，且粗产物未经进一步纯化而用 于下一步骤。
A-55)1-(3- 二甲基氨基 - 丙基 )-3-[7- 羟基 -6-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 羰基 )-4， 5- 二氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 脲
添 加 1.0mL(6.52mmol)DBU 至 2.0g(6.96mmol) 的 A-27 及 2.26g(13.9mmol) CDI 于 7mL 乙 腈 中 的 悬 浮 液 中。 在 微 波 中 于 90 ℃ 加 热 反 应 混 合 物 10 分 钟。 添 加
1.56g(15.3mmol)N，N- 二甲基 -1，3- 丙二胺，且在微波中于 120℃加热反应混合物 10 分 钟。 添加 DCM 及水，且以浓 HCl 溶液将混合物调节至 pH 1。 相分离之后，以 DCM 洗 涤水相 5 次。 蒸发水相，并将残余物溶解于 DMSO 中。 经由制备 RP-HPLC 进行纯化。 除去溶剂之后，获得 350mg(0.84mmol) 所需化合物。
中间体 B( 肼 )
B-01)3- 氯 -4- 肼基 -N， N- 二甲基 - 苯甲酰胺盐酸盐
B-01a)3- 氯 -4- 氟 -N， N- 二甲基 - 苯甲酰胺
添加羰基二咪唑 (20.0g，126mmol) 至 3- 氯 -4- 氟苯甲酸 (20.0g，115mmol) 于 100mL THF 中的混合物中，并在室温搅拌反应混合物 0.5 小时。 接着添加二甲胺 (1M 于 THF 中，171mL)，并将反应混合物再搅拌 1 小时。 将反应混合物在真空中浓缩、再溶解 于 DCM 中、以饱和碳酸钠水溶液及盐水洗涤，并在真空中浓缩。 产量 ：20.0g。 添加水合肼 (150mL，4.96mol) 至 B-01a(20.0g，99.3mmol) 于 100mL 二 烷中
的混合物中，并在回流温度搅拌反应混合物 16 小时。 将反应混合物在真空中浓缩，添加 DCM，并以水及盐水洗涤反应混合物、经硫酸钠干燥，并在真空中浓缩。 将残余物溶解 于二 烷中，冷却至 0℃，并添加盐酸 (4M 于二 烷中，25mL)。 搅拌反应混合物 1 小 时，且接着在真空中浓缩。 用乙醚研磨残余物。 产量 ：21g。
B-02)4- 肼基 -N， N- 二甲基 - 苯甲酰胺
B-02a)4- 硝基 -N， N- 二甲基 - 苯甲酰胺在 0 ℃， 添 加 三 乙 胺 (14.0mL，99.6mmol) 至 4- 硝 基 苯 甲 酰 氯 (7.20g， 38.8mmol) 与二甲胺盐酸盐 (3.20g，39.2mmol) 于 100mL DCM 中的混合物中。 除去冷 却浴，并在室温搅拌反应混合物过夜。 接着添加 300mL DCM 并以 50％饱和氯化铵水溶 液、水、50％饱和碳酸氢钠水溶液及 0.1M NaOH 水溶液洗涤反应混合物。 用 MgSO4 干 燥有机相，并在真空中浓缩。 产量 ：5.37g。
B-02b)4- 氨基 -N， N- 二甲基 - 苯甲酰胺
将 B-02a(2.0g，10.3mmol) 溶 解 于 120mL MeOH 中， 并 添 加 10 ％ 钯 / 炭 (palladium on coal)(200mg)。 在 4 巴氢气的氛围搅拌反应混合物 2 小时。 过滤反应混合 物，并在真空中浓缩。 产量 ：1.69g。
在 -10 ℃， 添 加 亚 硝 酸 钠 (755mg，10.9mmol) 于 7mL 水 中 的 溶 液 至 B-02b(1.68g，10.2mmol) 于 30mL 浓盐酸中的混合物中。 在 0℃搅拌反应混合物 1 小时， 且接着在 -5℃添加二水合氯化锡 (II)(4.81g，21.4mmol) 于 10mL 浓 HCl 中的溶液。 除 去冷却浴，并在室温搅拌反应混合物 1 小时。 以 8M 氢氧化钠水溶液碱化反应混合物， 并用乙酸乙酯萃取。 用 MgSO4 干燥合并的有机相，并在真空中浓缩。 将残余物溶解于 乙醚中，并添加于乙醚中的 2M HCl 直至不再有沉淀物形成。 滤出沉淀物并在真空中于 40℃干燥。 产量 ：213mg。
B-03)[3- 氟 -4-(2- 吗啉 -4- 基 - 乙氧基 )- 苯基 ]- 肼盐酸盐
B-03a)4-[2-(4- 溴 -2- 氟 - 苯氧基 )- 乙基 ]- 吗啉将 4- 溴 -2- 氟 苯 酚 (16.7g，87.4mmol) 溶 解 于 100mL DMF 中。 添 加 N-(2- 氯 - 乙基 ) 吗啉盐酸盐 (18.5g，99.4mmol)、碳酸钾 (28.0g，203mmol) 及碘化钾 (100mg，0.602mmol)，并在 65℃搅拌反应混合物 3 小时。 将反应混合物倾入水中，并 用乙酸乙酯萃取。 以水及盐水洗涤合并的有机相，用硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。 产 量 ：27.7g。
B-03b)N- 二苯亚甲基 -N′ -[3- 氟 -4-(2- 吗啉 -4- 基 - 乙氧基 )- 苯基 ]- 肼
将 B-03a(27.7g，91.1mmol) 溶解于 300mL 甲苯中，脱气且在氩气氛下滴加至二 苯 甲 酮 腙 (18.8g，95.8mmol)、 叔 丁 醇 钠 (13.1g，136mmol)、 BINAP(2.0g，3.21mmol) 及乙酸钯 (II)(400mg，1.78mmol) 的混合物中。 将反应混合物温至 100℃，并搅拌 2 小 时。 添加活性炭，并经硅藻土过滤反应混合物。 在真空中浓缩滤液，并以快速色谱法 ( 硅胶，于 DCM 中的 0-10％ MeOH) 纯化残余物，继而以 MeOH 研磨。 产量 ：27.6g。
将 B-03b(27.6g，65.7mmol) 溶解于 50mL 正丙醇中，并添加 50mL 浓盐酸。 在 120℃搅拌反应混合物 3 小时，且接着在真空中浓缩。 将残余物溶解于新鲜正丙醇中，再 次在真空中浓缩，以 DCM 研磨并在真空中干燥。 产量 ：17.3g。
B-04)[1-(4- 肼基 - 苯基 )- 环丙基 ]- 二甲基 - 胺
根据 WO 2007/113246 制备该化合物。 B-05)2- 氟 -4- 肼基 -N， N- 二甲基 - 苯甲酰胺
B-05a)2- 氟 -4- 硝基 - 苯甲酰氯添加亚硫酰氯 (12.1mL，162mmol) 至 2- 氟 -4- 硝基苯甲酸 (5.0g，27.0mmol) 于 70mL DCM 中的溶液中。 在 50℃搅拌反应混合物 1.5 小时，并在室温搅拌过夜。 在 真空中浓缩反应混合物，将残余物溶解于新鲜 DCM 中，并再次在真空中浓缩。 产量 ： 5.12g。
B-05b)2- 氟 -N， N- 二甲基 -4- 硝基 - 苯甲酰胺
将 B-05a(5.12g，25.2mmol) 溶 解 于 60mL THF 中 并 冷 却 至 0 ℃。 添 加 DIPEA(5.17ml，30.2mmol)，接着添加甲胺于 THF 中的 2M 溶液 (12.6mL，25.2mmol)， 并在室温搅拌反应混合物过夜。 接着，添加 2o mL 饱和碳酸氢钠水溶液，并用乙酸乙酯 萃取反应混合物。 以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤合并的有机相，用硫酸镁干燥，并在真空 中浓缩。 产量 ：1.94g。
B-05c)4- 氨基 -2- 氟 -N， N- 二甲基 - 苯甲酰胺
在 室 温 下， 在 5 巴 氢 气 的 氛 围 下 将 B-05b(1.94g，9.13mmol) 与 10 ％ 钯 / 炭 (194mg) 于 50mL MeOH 中的混合物搅拌过夜。 过滤反应混合物，并在真空中浓缩。 产 量 ：1.40g。
将 B-05c(1.40g，7.68mmol) 溶解于 20mL 浓 HCl 中，并冷却至 -10℃。 缓慢添 加亚硝酸钠 (1.36g，11.5mmol) 于 10mL 水中的溶液，并搅拌反应混合物 4 小时。 添加二 水合氯化锡 (II)(6.94g，30.7mmol) 于 10mL 浓 HCl 中的溶液，并在室温搅拌反应混合物 过夜。 冷却反应混合物至 0℃，以 10M NaOH 水溶液碱化，并以氯仿萃取。 用水洗涤合
并的有机相，用 MgSO4 干燥，并在真空中浓缩。 产量 ：1.0g。
B-06)(2- 甲基 -2，3- 二氢 -1H- 异吲哚 -5- 基 )- 肼盐酸盐
B-06a)5- 溴 -2- 甲基 - 异吲哚 -1，3- 二酮将 3- 溴 邻 苯 二 甲 酰 亚 胺 (bromophthalimide)(10.0g，44.2mmol)、 碳 酸 钾 (12.2g，88.5mmol) 及碘化钾 (50mg，0.30mmol) 的混合物于 80mL DMF 中搅拌 15 分钟。 将反应混合物冷却至 0℃，添加碘甲烷 (3.04mL，48.7mmol)，并在室温搅拌反应混合物 过夜。 过滤反应混合物，以 DMF 洗涤固体，并将滤液倾入水中。 用乙酸乙酯萃取混合 物，并用水洗涤合并的有机相若干次，用 MgSO4 干燥，并在真空中浓缩。 产量 ：7.10g。
B-06b)5- 溴 -2- 甲基 -2，3- 二氢 -1H- 异吲哚
将 B-06a(5.8g，24.2mmol) 溶解于 60mL THF 中，并冷却至 0 ℃。 添加硼烷二 甲基硫醚络合物 (borane dimethylsulfide complex)(9.18mL，121mmol)，并将反应混合物 温至室温。 在回流温度搅拌反应混合物过夜。 再添加硼烷二甲基硫醚络合物 (9.18mL， 121mmol)，并在回流温度下再搅拌反应混合物 20 小时。 将反应混合物冷却至室温，添加 40mL MeOH 及 12mL 浓 HCl，并在 80℃搅拌反应混合物过夜。 在真空中浓缩反应混合 物，将残余物溶解于乙酸乙酯中，并以饱和碳酸氢钠溶液洗涤。 用乙酸乙酯萃取水相， 用 Na2SO4 干燥合并的有机相，并在真空中浓缩。 产量 ：4.56g。
B-06c)N- 二苯亚甲基 -N′ -(2- 甲基 -2，3- 二氢 -1H- 异吲哚 -5- 基 )- 肼
由 B-06b(3.5g，16.5mmol)、 二 苯 甲 酮 腙 (3.24g，16.5mmol)、 叔 丁 醇 钠(2.38g，24.8mmol)、 (2- 联 苯 基 )- 二 - 叔 丁 基 膦 (246mg，0.825mmol) 及 乙 酸 钯 (II) (111mg，0.495mmol) 起始，类似于 B-03b 制备 B-06c。 产量 ：1.25g。
由 B-06c(1.55g，4.73mmol) 起始，类似于 B-03 制备 B-06。 产量 ：620mg。
B-07)(4- 肼基 - 苯甲基 )- 二甲基 - 胺盐酸盐
B-07a)(4- 溴 - 苯甲基 )- 二甲基 - 胺在 5℃下，添加于 100mL DMF 中的 4- 溴苯甲基溴 (100g，402mmol) 至二甲胺 (40％于水中，150mL，1.33mol) 的混合物中。 在室温搅拌 0.5 小时之后，添加 6M HCl 水溶液，并用乙醚萃取反应混合物。 以盐水洗涤合并的有机相，用 Na2SO4 干燥，并在真 空中浓缩。 通过真空蒸馏纯化残余物 ( 在 2mbar 下沸点为 58℃ )。 产量 ：77.6g。
B-07b)[4-(N′ - 二苯亚甲基 - 肼基 )- 苯甲基 ]- 二甲基 - 胺
由 B-07a(77.6g，362mmol)、 二 苯 甲 酮 腙 (71.0g，362mmol)、 叔 戊 醇 钠 (59.8g，543mmol)、BINAP(5.12mg，8.20mmol) 及乙酸钯 (II)(1.38g，6.16mmol) 起始， 类似于 B-03b 制备 B-07b。 产量 ：122g。 以于正丙醇中的活性炭处理而纯化产物。
由 B-07b(122g，362mmol) 起始，类似于 B-03 制备 B-07。 产量 ：57.6g。
B-08)2-(4- 肼基 - 苯基 )- 乙醇
由 4- 氨基苯乙基醇 (7.3g，53.2mmol)、亚硝酸钠 (3.7g，53.6mmol) 及二水合氯 化锡 (II)(50.0g，222mmol) 起始，类似于 B-05 制备 B-08。 产量 ：3.70g。
B-09)(4- 氟 -3- 吗啉 -4- 基甲基 - 苯基 )- 肼盐酸盐
B-09a)4-(5- 溴 -2- 氟 - 苯甲基 )- 吗啉将 5- 溴 -2- 氟苯甲醛 (2.5g，12.3mmol) 及吗啉 (1.62g，18.5mmol) 溶解于 50mL DCE 中，并搅拌 0.5 小时。 添加乙酸 (0.42mL，7.4mmol) 及三乙酰氧基硼氢化钠 (3.92g， 18.5mmol)，并搅拌反应混合物 2 小时。 接着添加 50mL 饱和碳酸氢钠水溶液，并再搅拌 反应混合物 0.5 小时。 以 DCM 萃取反应混合物且用 MgSO4 干燥合并的有机相，并在真 空中浓缩。 产量 ：3.02g。
B-09b)N- 二苯亚甲基 -N′ -(4- 氟 -3- 吗啉 -4- 基甲基 - 苯基 )- 肼
由 B-09a(3.0g，10.9mmol)、 二 苯 甲 酮 腙 (2.15g，10.9mmol)、 叔 丁 醇 钠 (1.58g，16.4mmol)、 (2- 联 苯 基 )- 二 - 叔 丁 基 膦 (135mg，0.438mmol) 及 乙 酸 钯 (II) (49mg，0.22mmol) 起始，类似于 B-03b 制备 B-09b。 产量 ：2.40g。
由 B-09b(2.40g，6.16mmol) 起始，类似于 B-03 制备 B-09。 产量 ：1.64g。
B-10)[4-(1- 甲基 - 吡咯烷 -2- 基 )- 苯基 ]- 肼盐酸盐
B-10a)5-(4- 溴 - 苯基 )-3，4- 二氢 -2H- 吡咯在 55 ℃，搅拌 4 ′ - 溴 -4- 氯丙基苯基酮 (4 ′ -bromo-4-chlorobutyrophenone) (20.0g，76.5mmol)、叠氮化钠 (7.46g，115mmol) 及碘化钠 (344mg，2.29mmol) 的混合 物过夜。 将反应混合物倾于水上，并以 DCM 萃取。 用 MgSO4 干燥有机相，并在真空 中浓缩。 将残余物溶解于 150mL 环己烷中，添加三苯基膦 (20.1g，76.5mmol)，并在室 温搅拌反应混合物过夜。 过滤反应混合物，并以冷乙醚洗涤固体。 在真空中浓缩滤液， 添加水并以 DCM 萃取混合物。 以水及盐水洗涤合并的有机相，用 MgSO4 干燥，并在真 空中浓缩。 用乙醚 / 环己烷混合物 (1/1，v/v) 处理残余物，过滤并在真空中浓缩滤液。 产量 ：15.6g。
B-10b)2-(4- 溴 - 苯基 )- 吡咯烷
在 0℃下，添加硼氢化钠 (1.93g，36.8mmol) 至 B-10a(5.50g，24.5mmol) 在 20％ 于 MeOH 中的乙酸中的混合物中。 在 0℃搅拌反应混合物 1 小时，且接着在室温搅拌 4 小时。 接着，添加 20mL 1M HCl，并用乙醚萃取反应混合物。 以 10M NaOH 水溶液碱 化水相，并以 DCM 萃取。 以盐水洗涤合并的有机萃取物，用 MgSO4 干燥，并在真空中
浓缩。 产量 ：3.92g。
B-10c)2-(4- 溴 - 苯基 )-1- 甲基 - 吡咯烷
在 0℃下，添加碘甲烷 (0.76mL，12mmol) 至 B-10b(2.5g，11.1mmol) 及碳酸钾 (3.06g，22.1mmol) 于 ACN 中的混合物中。 在室温搅拌反应混合物 0.5 小时且接着过滤。
以 ACN 洗涤固体并在真空中浓缩滤液。 将残余物溶解于乙酸乙酯中，以 0.01M NaOH 水 溶液及盐水洗涤，用 MgSO4 干燥，并在真空中浓缩。 通过快速色谱法 ( 硅胶，于 DCM 中含有 0.5％氨的 0-10％ MeOH) 纯化残余物。 产量 ：1.35g。
B-10d)N- 二苯亚甲基 -N′ -[4-(1- 甲基 - 吡咯烷 -2- 基 )- 苯基 ]- 肼
由 B-10c(1.35g，5.62mmol)、二苯甲酮腙 (1.10g，5.62g)、叔丁醇钠 (0.81g， 8.4mmol)、 (2- 联 苯 基 ) 二 - 叔 丁 基 膦 (84mg，0.28mmol) 及 乙 酸 钯 (II)(38mg， 0.17mmol) 起始，类似于 B-03b 制备 B-10d。 产量 ：1.20g。
由 B-10d(1.20g，3.38mmol) 起始，类似于 B-03 制备 B-10。 产量 ：0.42g。
B-11)(4- 肼基 - 苯基 )- 甲醇可自市面购得。
B-12)(3- 甲磺酰基 - 苯基 )- 肼由 3- 甲基磺酰基苯胺盐酸盐 (2.50g，11.4mmol)、亚硝酸钠 (1.18g，17.1mmol) 及二水合氯化锡 (II)(14.9g，66.0mmol) 起始，类似于 B-05 制备 B-012。 通过自乙酸乙 酯与环己烷沉淀来纯化产物。 产量 ：1.08g。
B-13)N-(3- 氯 -4- 肼基 - 苯基 )-N- 甲基 - 乙酰胺
B-13a)N-(4- 溴 -3- 氯 - 苯基 )-N- 甲基 - 乙酰胺添 加 60 ％ 于 矿 物 油 中 的 氢 化 钠 (2.40g，60.0mmol) 至 4- 溴 -3- 氯 乙 酰 苯 胺 (4-bromo-3-chloroacetanilide)(10.0g，40.2mmol) 于 50mL THF 中的溶液中，并在室温搅 拌反应混合物 1 小时。 将反应混合物冷却至 0℃，添加碘甲烷 (2.49mL，40.0mmol)。 2 小时之后，再添加碘甲烷 (0.25mL，4.0mmol)，并在室温搅拌反应混合物 10 分钟。 以饱 和氯化铵水溶液中止反应，过滤，并用乙醚萃取。 以盐水洗涤有机相，用 Na2SO4 干燥并 蒸干。 产量 ：10.3g。
B-13b)N-[4-( 乙酰基 - 甲基 - 氨基 )-2- 氯 - 苯基 ]- 肼二甲酸二 - 叔丁酯
添加氯化异丙基镁于乙醚中的 2M 溶液 (11.0mL，22.0mmol) 至于 20mLTHF 中 的氯化锂 (906mg，21.0mmol) 中，并在室温搅拌反应混合物 0.5 小时。 将反应混合物冷 却至 -78℃，并添加 B-13a(5.0g，19.0mmol) 于 10mL THF 中的溶液。 将反应混合物温 至 -15℃，并在 2 小时之后添加偶氮二甲酸二 - 叔丁酯 (4.39g，19.0mmol)。 20min 之后， 添加饱和氯化铵水溶液，并用乙醚萃取反应混合物。 以水及盐水洗涤有机相，用 Na2SO4 干燥，并在真空中浓缩。 通过色谱法 ( 硅胶，50％至 70％于环己烷中的乙酸乙酯 ) 纯化 残余物。 产量 ：3.91g。
将 B-13b(1.96g，4.74mmol) 溶解于 20mL DCM 中，冷却至 0℃并添加 20mL 三 氟乙酸。 将反应混合物温至室温并搅拌 2 小时。 在真空中浓缩反应混合物，以 5M NaOH 水溶液中和，并以 DCM 萃取。 以水及盐水洗涤有机相，用 Na2SO4 干燥，并在真空中浓 缩。 产量 ：960mg。
B-14)(4- 肼基 - 苯基 )- 乙酮 O- 甲基 - 肟盐酸盐
B-14a)N-(4- 乙酰基 - 苯基 )- 肼二甲酸二 - 叔丁酯将 4- 甲氧羰基苯基硼酸 (2.0g，12.2mmol)、偶氮 - 二甲酸二 - 叔丁酯 (2.88g， 12.5mmol) 及乙酸铜 (II)(220mg，1.21mmol) 于 35mL MeOH 中的混合物在 45℃搅拌 4 小 时。 在真空中浓缩反应混合物，添加 DCM 并用水洗涤混合物。 以盐水洗涤有机相，用 MgSO4 干燥，并在真空中浓缩。 以热正己烷研磨残余物。 产量 ：2.46g。
B-14b)N-(4-{1-[(E)- 甲氧基亚氨基 ]- 乙基 }- 苯基 )- 肼二甲酸二 - 叔丁酯
将 B-14a(2.10g，5.99mmol) 及 O- 甲基羟胺盐酸盐 (500mg，5.99mmol) 于 MeOH 中搅拌 4 小时。 以 DCM 稀释反应混合物，并以水及盐水洗涤。 以饱和碳酸氢钠水溶液 中和水相，并以 DCM 萃取。 用 MgSO4 干燥合并的有机相，并在真空中浓缩。 产量 ： 1.92g。
将 B-14b(1.92g，5.09mmol) 溶解于 20mL 二烷中并添加 12.8mL 于二烷中的4M HCl。 在 50℃搅拌反应混合物 2 小时，并在室温搅拌过夜。 过滤反应混合物，并在 真空中干燥固体。 产量 ：1.10g。
B-15)4- 肼基 - 苯甲醛 O-(2- 甲氧基 - 乙基 )- 肟盐酸盐
B-15a)2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )- 异吲哚 -1，3- 二酮将 N- 羟基邻苯二甲酰亚胺 (30.0g，184mmol) 及碳酸钾 (25.4g，138mmol) 于 300mL NMP 中的混合物加热至 50℃。 添加碘化钾 (0.15g，0.90mmol) 及 2- 溴乙基甲基 醚 (19.0ml，202mmol)，并在 80℃搅拌反应混合物 2 小时。 将反应混合物倾于 1M HCl 水溶液上并用乙酸乙酯萃取。 用 MgSO4 干燥合并的有机相，并在真空中浓缩。 以水研 磨残余物且接着自 EtOH 结晶。 产量 ：17.1g。
B-15b)O-(2- 甲氧基 - 乙基 )- 羟胺盐酸盐
将 B-15a(17.1g，77.3mmol) 溶 解 于 乙 酸 乙 酯 中， 并 添 加 乙 醇 胺 (5.13mL， 85.0mmol) 且在 80℃搅拌反应混合物 2 小时。 在真空中浓缩反应混合物，用乙醚研磨并 过滤。 添加于乙醚中的 1M HCl(77.3mL，77.3mmol) 至滤液，并滤出所形成的沉淀物且 在真空中干燥。 产量 ：4.76g。 B-15c)N-(4- 甲酰基 - 苯基 )- 肼二甲酸二 - 叔丁酯
由 4- 甲 酰 基 苯 基 硼 酸 (3.52g，23.5mmol)、 偶 氮 二 甲 酸 二 - 叔 丁 酯 (5.95g， 25.8mmol) 及乙酸铜 (II)(230mg，1.27mmol) 起始，类似于 B-14a 制备 B-15c。 通过快 速色谱法 ( 硅胶，于环己烷中的 0-60％乙酸乙酯 ) 纯化产物。 产量 ：7.50g。
B-15d)N-{4-[(2- 甲氧基 - 乙氧基亚氨基 )- 甲基 ]- 苯基 }- 肼二甲酸二 - 叔丁酯
由 B-15c(3.96g，11.8mmol) 及 B-15b(1.50g，11.8mmol) 起始，类似于 B-14b 制 备 B-15d。 通过制备 RP-HPLC( 于水中的 5-98％ ACN) 纯化产物。 产量 ：4.25g。 由 B-15d(4.25g，10.4mmol) 及 于 二 烷 中 的 4M HCl(25.9mL，104mmol) 起始，类似于 B-14 制备 B-15。 产量 ：2.90g。
B-16)4- 肼基 - 苯甲醛 O-(2- 吗啉 -4- 基 - 乙基 )- 肟盐酸盐
B-16a)2-(2- 吗啉 -4- 基 - 乙氧基 )- 异吲哚 -1，3- 二酮盐酸盐由 N- 羟基邻苯二甲酰亚胺 (5.0g，30.7mmol)、碳酸钾 (4.24g，30.7mmol) 及 N-(2- 氯乙基 ) 吗啉盐酸盐 (6.27g，33.7mmol) 起始，类似于 B-15a 制备 B-16a。 分离呈 盐酸盐形式的产物。 产量 ：4.22g。
B-16b)O-(2- 吗啉 -4- 基 - 乙基 )- 羟胺盐酸盐
由 B-16a(4.22g，15.3mmol) 及乙醇胺 (1.01mL，16.8mmol) 起始，类似于 B-15b 制备 B-16b。 产量 ：1.31g。
B-16c)N-{4-[(2- 吗啉 -4- 基 - 乙氧基亚氨基 )- 甲基 ]- 苯基 }- 肼二甲酸二 - 叔 丁酯
由 B-16b(1.31g，7.17mmol) 及 B-15c(2.41g，7.17mmol) 起始，类似于 B-14a 制 备 B-16c。 通过制备 RP-HPLC( 于水中的 5-98％ ACN) 纯化产物。 产量 ：1.48g。
将 B-16c 溶解于 5mL 二烷中并添加 8.0mL HCl 于二烷中的 4M 溶液。 在室温搅拌反应混合物过夜并接着在真空中浓缩。 于 DCM 中研磨残余物。 产量 ：0.52g。
B-17)2，6- 二氟 -4- 肼基 - 苯甲醛 O-(2- 甲氧基 - 乙基 )- 肟盐酸盐
B-17a)N， N-(3，5- 二氟 -4- 甲酰基 - 苯基 )- 肼二甲酸二 - 叔丁酯由 3，5- 二氟 -4- 甲酰基硼酸 (5.0g，26.9mmol)、偶氮甲酸二 - 叔丁酯 (6.81g， 29.6mmol) 及乙酸铜 (II)(488mg，2.69mmol) 起始，类似于 B-14a 制备 B-17a。 产量 ： 9.93g。
B-17b)N， N-{3，5- 二 氟 -4-[(2- 甲 氧 基 - 乙 氧 基 亚 氨 基 )- 甲 基 ]- 苯 基 }- 肼 - 二甲酸二 - 叔丁酯
由 B-17a(1.46g，3.92mmol) 及 B-15b(500mg，3.92mmol) 起始，类似于 B-14b 制备 B-17b。 通过制备 RP-HPLC( 于水中的 5-98％ ACN) 纯化产物。 产量 ：700mg。 由 B-17b(700mg，1.57mmol) 及于二 烷中的 4M HCl(3.93mL，15.7mmol) 起始，类似于 B-14 制备 B-17。 产量 ：263mg。
B-18)2，3- 二氟 -4- 肼基 - 苯甲醛 O-(2- 甲氧基 - 乙基 )- 肟盐酸盐
B-18a)N， N-(2，3- 二氟 -4- 甲酰基 - 苯基 )- 肼二甲酸二 - 叔丁酯由 2，3- 二 氟 -4- 甲 酰 基 硼 酸 (5.0g，26.9mmol)、 偶 氮 二 甲 酸 二 - 叔 丁 酯 (6.81g，29.6mmol) 及乙酸铜 (II)(488mg，2.69mmol) 起始，类似于 B-14a 制备 B-18a。 产量 ：9.70g。
B-18b)N， N-{2，3- 二 氟 -4-[(2- 甲 氧 基 - 乙 氧 基 亚 氨 基 )- 甲 基 ]- 苯 基 }- 肼 - 二甲酸二 - 叔丁酯
由 B-18a(1.46g，3.92mmol) 及 B-15b(500mg，3.92mmol) 起始，类似于 B-14b 制备 B-18b。 通过制备 RP-HPLC( 于水中的 5-98％ ACN) 纯化产物。 产量 ：840mg。 由 B-18b(840mg，1.89mmol) 及 于 二 B-19) 环丙基甲基 - 肼盐酸盐 烷 中 的 4M HCl(4.72ml，18.9mmol) 起始，类似于 B-14 制备 B-18。 产量 ：276mg。
B-19a)N′ -[1- 环丙基 - 亚甲基 ]- 肼甲酸叔丁酯将环丙基甲醛 (4.07mL，14.3mmol) 溶解于 3mL MeOH 中并添加肼基甲酸叔丁酯 (tert-butylcarbazate)(1.89g，14.3mmol)。 将反应混合物在室温搅拌过夜，且接着在真空 中浓缩。 产量 ：2.57g。
B-19b)N′ - 环丙基甲基 - 肼甲酸叔丁酯
添 加 氰 基 硼 氢 化 钠 (877mg，13.9mmol) 至 B-19a(2.57g，13.9mmol) 于 13mL 50 ％乙酸水溶液中的混合物中，并在室温搅拌反应混合物过夜。 以 10M NaOH 水溶液 碱化反应混合物，并以 DCM 萃取。 以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤合并的有机萃取物，用 MgSO4 干燥，并在真空中浓缩。 产量 ：2.05g。
将 B-19b(2.05g，11.0mmol) 溶 解 于 3mL 二烷中并添加于二烷 中 的 4MHCl(13.8mL，55.0mmol)。 在室温搅拌反应混合物，且接着在真空中浓缩。 产量 ： 1.30g。
B-20)(1- 乙基 - 丙基 )- 肼盐酸盐
B-20a)N′ -(1- 乙基 - 亚丙基 )- 肼甲酸叔丁酯由 3- 戊酮 (1.23mL，11.6mmol) 及肼基甲酸叔丁酯 (1.53g，11.6mmol) 起始，类 似于 B-19a 制备 B-20a。 产量 ：2.26g。
B-20b)N′ -(1- 乙基 - 丙基 )- 肼甲酸叔丁酯
由 B-20a(2.26g，11.3mmol) 及氰基硼氢化钠 (709mg，11.3mmol) 起始，类似于 B-19b 制备 B-20b。 产量 ：1.68g。
由 B-20b(1.68g，8.31mmol) 及 于 二烷 中 的 4M 盐 酸 (10.4ml，41.5mmol) 起始，类似于 B-19 制备 B-20。 产量 ：1.20g。
B-21) 异丁基 - 肼盐酸肼
B-21a)N′ -[2- 甲基 - 亚丙基 ]- 肼甲酸叔丁酯由异丁醛 (1.26mL，13.9mmol) 及肼基甲酸叔丁酯 (1.83g，13.9mmol) 起始，类 似于 B-19a 制备 B-21a。 产量 ：2.56g。
B-21b)N′ - 异丁基 - 肼甲酸叔丁酯
由 B-21a(2.56g，13.7mmol) 及氰基硼氢化钠 (864mg，13.7mmol) 起始，类似于 B-19b 制备 B-21b。 产量 ：1.97g。
由 B-21b(1.97g，10.5mmol) 及 于 二烷 中 的 4M HCl(13.1mL，52.3mmol) 起始，类似于 B-19 制备 B-21。 产量 ：1.30g。
B-22)( 四氢 - 吡喃 -4- 基 )- 肼
B-22a)N′ -( 四氢 - 吡喃 -4- 亚基 )- 肼甲酸叔丁酯由 四 氢 -4H- 吡 喃 -4- 酮 (923μL，9.99mmol) 及 肼 基 甲 酸 叔 丁 酯 (1.32g， 9.99mmol) 起始，类似于 B-19a 制备 B-22a。 产量 ：2.15g。
B-22b)N′ -( 四氢 - 吡喃 -4- 基 )- 肼甲酸叔丁酯
由 B-22a(2.15g，10.0mmol) 及氰基硼氢化钠 (631mg，10.0mmol) 起始，类似于 B-19b 制备 B-22b。 产量 ：1.57g。
由 B-22b(1.57g，7.26mmol) 及 于 二烷 中 的 4M HCl(9.07ml，36.3mmol) 起始，类似于 B-19 制备 B-22。 产量 ：1.10g。
B-23)(2- 甲基 - 烯丙基 )- 肼盐酸盐
B-23a)N′ -[2- 甲基 - 丙 -2- 烯 -(E)- 亚基 ]- 肼甲酸叔丁酯由异丁烯醛 (1.18ml，14.3mmol) 及肼基甲酸叔丁酯 (1.89g，14.3mmol) 起始，类 似于 B-19a 制备 B-23a。 产量 ：2.61g。
B-23b)N′ -(2- 甲基 - 烯丙基 )- 肼甲酸叔丁酯
由 B-23a(2.61g，14.2mmol) 及氰基硼氢化钠 (890mg，14.2mmol) 起始，类似于 B-19b 制备 B-23b。 产量 ：1.88g。
由 B-23b(1.88g，10.1mmol) 及 于 二烷 中 的 4M HCl(12.6mL，50.5mmol) 起始，类似于 B-19 制备 B-23。 产量 ：1.14g。
B-24)(2- 甲氧基 - 乙基 )- 肼盐酸盐
B-24a)N′ - 亚异丙基 - 肼甲酸叔丁酯添加 10g MgSO4 及 5mL 乙酸至肼基甲酸叔丁酯 (50.0g，378mmol) 于 40mL 丙 酮中的溶液中，并在回流温度搅拌反应混合物 1 小时。 过滤反应混合物，并在真空中浓 缩。 残余物自乙醚 / 环己烷结晶。 产量 ：49.4g。
B-24b)N′ - 亚异丙基 -N-(2- 甲氧基 - 乙基 )- 肼甲酸叔丁酯
将 B-24a(5.0g，29.0mmol) 溶 解 于 70mL 甲 苯 中， 并 添 加 氢 氧 化 钾 (2.12g， 37.7mmol) 及四丁基硫酸氢铵 (986mg，2.90mmol)。 将反应混合物加热至 50℃，并添加 2- 溴乙基甲基醚 (3.23mL，34.8mmol)。 接下来，加热反应混合物至 80℃，并搅拌 2 小 时。 用水洗涤反应混合物，用 MgSO4 干燥有机相，并在真空中浓缩。 产量 ：4.35g。
添加 2M HCl 水溶液 (18.9mL，37.8mmol) 至 B-24b(4.25g，18.9mmol) 于 80mL THF 中的溶液中，并在回流温度搅拌反应混合物 3 小时。 在真空中浓缩反应混合物，并 与甲苯共蒸发若干次。 产量 ：2.93g。
B-25) 丙 -2- 炔基 - 肼盐酸盐
B-25a)N′ - 亚异丙基 -N- 丙 -2- 炔基 - 肼甲酸叔丁酯盐酸盐由 B-24a(2.34g，13.6mmol)、 氢 氧 化 钾 (991mg，17.7mmol)、 四 丁 基 硫 酸 氢 铵 (461mg，1.36mmol) 及炔丙基氯 (70 ％于甲苯中，1.8mL，16.3mmol) 起始，类似于 B-24b 制备 B-25a。 产量 ：1.99g。
由 B-25a(1.99g，9.64mmol) 及 2M HCl 水溶液 (9.46mL，18.9mmol) 起始，类似 于 B-24 制备 B-25。 产量 ：1.03g。
B-26) 哌啶 -4- 基 - 肼可自市面购得。
B-27)[1-(2- 甲氧基 - 乙基 )- 哌啶 -4- 基 ]- 肼盐酸盐
B-27a)N′ - 哌啶 -4- 亚基 - 肼甲酸叔丁酯盐酸盐在 室 温 搅 拌 单 水 合 4- 哌 啶 酮 盐 酸 盐 (31.2g，203mmol) 及 肼 基 甲 酸 叔 丁 酯 (26.8g，203mmol) 于 100mL MeOH 中的混合物整个周末，且接着在真空中浓缩。 残余物 自乙酸乙酯结晶。 产量 ：47.5g。
B-27b)N′ - 哌啶 -4- 基 - 肼甲酸叔丁酯
将 B-27a(40.2g，161mmol) 溶解于 50％乙酸水溶液 (240mL) 中并在以冰浴冷却 下添加氰基硼氢化钠 (12.1g，193mmol) 且搅拌反应混合物 1 小时。 碱化反应混合物，并 以 DCM 萃取。 以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤有机相，经硫酸钠干燥，并在真空中浓缩。 产量 ：21.1g。
B-27c)N′ -[1-(2- 甲氧基 - 乙基 )- 哌啶 -4- 基 ]- 肼甲酸叔丁酯
添加 2- 溴乙基甲基醚 (1.23mL，12.8mmol) 至 B-27b(2.50g，11.6mmol)、碳酸 钾 (2.76g，20.0mmol) 及碘化钾 (50mg，0.30mmol) 于 25mL DMF 中的混合物中，并在室 温搅拌反应混合物过夜。 将反应混合物倾于水上，并用乙酸乙酯萃取。 以水及盐水洗涤 合并的有机萃取物，用 MgSO4 干燥，并在真空中浓缩。 产量 ：2.65g。
将 B-27c 溶解于二烷中，以于二烷中的 4M 盐酸 (10.0mL，40.0mmol) 处理，并在室温搅拌过夜。 滤出所形成的沉淀物，并在真空中干燥。 产量 ：1.2g。
B-28)(1- 丙 -2- 炔基 - 哌啶 -4- 基 )- 肼盐酸盐
B-28a)N′ -(1- 丙 -2- 炔基 - 哌啶 -4- 基 )- 肼甲酸叔丁酯
由 B-27b(10.0g，46.4mmol)、碳酸钾 (4.0g，29.0mmol) 及炔丙基溴 (80 ％于甲 苯中，5.26mL，48.8mmol) 起始，类似于 B-27c 制备 B-28a。 产量 ：12.4g。 由 B-28a(12.4g，约 46.4mmol) 及于二 烷中的 4M 盐酸 (61.3ml，245mmol) 起始，类似于 B27 制备 B-28。 产量 ：9.30g。
B-29)(1- 环丙基 - 哌啶 -4- 基 )- 肼盐酸盐
B-29a)N′ -(1- 环丙基 - 哌啶 -4- 亚基 )- 肼甲酸叔丁酯在室温搅拌 1- 环丙基 -4- 哌啶酮 (piperidon)(10.0g，71.8mmol) 及肼基甲酸叔丁 酯 (9.50g，71.8mmol) 于 25mL THF 中的混合物 3 小时，且接着在真空中浓缩。 产量 ： 19.2g。
B-29b)N′ -(1- 环丙基 - 哌啶 -4- 基 )- 肼甲酸叔丁酯
由 B-29a(18.0g，71.1mmol) 及氰基硼氢化钠 (4.47g，71.1mmol) 起始，类似于 B-27b 制备 B-29b。 产量 ：17.2g。
在以冰浴冷却下添加乙酰氯 (14.3mL，201mmol) 至 40mL EtOH。 接着添加 B-29b(17.2g，67.3mmol)，并在室温搅拌反应混合物 1 小时。 过滤反应混合物且在真空 中于 40℃干燥固体。 产量 ：12.3g。
B-30)(1- 甲基 - 哌啶 -4- 基 )- 肼可自市面购得。
B-31)4- 肼基 - 苯甲醛 O- 甲基 - 肟盐酸盐将 B-15c(7.50g，22.3mmol) 及 甲 氧 基 胺 盐 酸 盐 (1.95g，23.4mmol) 于 50mL MeOH 中的混合物在回流下于 75℃搅拌 2 小时。 接着添加 1mL 浓盐酸，并在 75℃下再 搅拌反应混合物 1 小时，且接着在真空中浓缩。 残余物在真空中于 40℃干燥过夜，并以 DCM 研磨。 产量 ：3.2g。
B-32)[1-(3- 氟 -4- 肼基 - 苯基 )- 环丙基 ]- 二甲基 - 胺盐酸盐
B-32a)[1-(4- 溴 -3- 氟 - 苯基 )- 环丙基 ]- 氨基甲酸叔丁酯将 1-(4- 溴 -3- 氟 苯 基 ) 环 丙 烷 甲 酸 (7.4g，28.6mmol， 由 1- 溴 -4- 溴 甲 基 -2- 氟苯，根据 Peretto 等人 .J Med.Chem.2005，48，5705-20 制得 )、DIPEA(6.36mL， 37.1mmol)、叔丁醇 (67.0mL，714mmol)、二苯基磷酰基叠氮化物 (7.37mL，34.3mmol)
及分子筛于 100mL 甲苯中的混合物在回流搅拌过夜。 过滤反应混合物，并在真空中浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯并以 5％柠檬酸水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液及盐水洗 涤。 用 MgSO4 干燥有机相，并在真空中浓缩。 产量 ：9.37g。
B-32b)[1-(4- 溴 -3- 氟 - 苯基 )- 环丙基 ]- 甲基 - 氨基甲酸叔丁酯
添加氢化钠 (60％于矿物油中，1.7g，42.6mmol) 至 B-32a(9.37g，28.4mmol) 于 120mL DMF 中的溶液，并在室温搅拌反应混合物 0.5 小时。 将反应混合物温至 40℃，并 添加碘甲烷 (3.89mL，62.4mmol)。 1 小时之后将反应混合物倾于冰水上，并用乙酸乙酯 萃取。以水及盐水洗涤合并的有机相，用 MgSO4 干燥，并在真空中浓缩。产量 ：8.54g。
B-32c)[1-(4- 溴 -3- 氟 - 苯基 )- 环丙基 ]- 甲基 - 胺盐酸盐
在 室 温 搅 拌 B-32b(8.54g，24.8mmol) 在 于 二烷 中 的 4M 盐 酸 (31.0mL，124mmol) 中的混合物 1 小时，且接着在真空中浓缩。 产量 ：7.28g。
B-32d)[1-(4- 溴 -3- 氟 - 苯基 )- 环丙基 ]- 二甲基 - 胺
在室温下剧烈地搅拌 B-32c(7.28g，25.9mmol) 及甲醛 (30％于水中，3.90mL， 38.9mmol) 于 150mL 1，2- 二氯乙烷中的混合物 0.5 小时。 在以冰水冷却下添加乙酸 (2.23mL，38.9mmol) 及三乙酰氧基硼氢化钠 (8.25g，38.9mmol)，并在室温搅拌反应混 合物 2 小时。 添加饱和碳酸氢钠水溶液，并以 DCM 萃取反应混合物。 用 MgSO4 干燥合 并的有机相，并在真空中浓缩。 产量 ：7.07g。
B-32e){1-[4-(N′ - 二苯亚甲基 - 肼基 )-3- 氟 - 苯基 ]- 环丙基 }- 二甲基 - 胺
将 B-32d(7.07g， 约 25.9mmol)、 二 苯 甲 酮 腙 (5.38g，27.4mmol)、 叔 丁 醇 钠(3.95g，41.1mmol) 及 (2- 联苯基 )- 二 - 叔丁基膦 (422mg，1.37mmol) 于 200mL 二烷中的混合物脱气，并置于氩气氛下。 添加乙酸钯 (II)(122mg，548μmol)，并在 80℃搅 拌反应混合物 2 小时。 过滤反应混合物，并在真空中浓缩。 通过快速色谱法 ( 硅胶，于 DCM 中的 1-5％ MeOH) 纯化残余物。 产量 ：4.84g。
将 B-32e(4.8g，12.9mmol) 溶解于 10mL 正丙醇中，并添加 10mL 浓 HCl。 在 100℃搅拌反应混合物 1 小时，且接着在真空中浓缩。 将残余物溶解于新鲜正丙醇中，再 次在真空中浓缩，以 DCM 研磨，并在真空中于 40℃干燥。 产量 ：1.93g。
B-33)4- 肼基 -3- 甲氧基 - 苯甲酸甲酯，根据 WO2007113245 制备。
B-34)3- 乙氧基 -4- 肼基 - 苯甲酸甲酯
B-34a)3- 乙氧基 -4- 硝基 - 苯甲酸甲酯
将 3- 羟基 -4- 硝基苯甲酸甲酯 (25.1g，125mmol) 及溴乙烷 (20mL，263mmol) 于 200mL ACN 中的混合物冷却至 15℃。 添加碳酸钾 (54.4g，390mmol)，并在 60℃搅拌 反应混合物过夜。 再添加溴乙烷 (10mL，131mmol)，并在 95℃搅拌反应混合物过夜。 过 滤反应混合物，并在真空中浓缩滤液。 以 ACN 研磨残余物，并在真空中干燥。 产量 ： 26.5g。 B-34b)4- 氨基 -3- 乙氧基 - 苯甲酸甲酯
在 室 温 下 于 10 巴 H2 氛 围 搅 拌 B-34a(26.5g，118mmol) 及 Raney- 镍 (1.5g， 5.43mmol) 于 150mL THF 中的混合物 5 天。 过滤反应混合物，并在真空中浓缩滤液。 残
余物自二
烷冻干。 产量 ：21.7g。 由 B-34b(21.5g，108mmol)、亚硝酸钠 (7.75g，110mmol) 及二水合氯化锡 (II) 烷冻干。 产量 ：19.3g。 B-35)3- 肼基 -N， N- 二甲基 - 苯磺酰胺盐酸盐(104g，453mmol) 起始，类似于 B-05 制备 B-34。 产物自二
B-35a)N-(3- 二甲基氨磺酰基 - 苯基 )- 肼二甲酸二 - 叔丁酯由 3-(N，N- 二甲基磺酰胺基 )- 苯硼酸 (1.0g，4.37mmol)、偶氮二甲酸二 - 叔丁 酯 (1.11g，4.83mmol) 及乙酸铜 (II)(79mg，0.44mmol) 起始，类似于 B-14a 制备 B-35a。 通过制备 RP-HPLC( 于水中的 5-98％ ACN) 纯化产物。 产量 ：1.15g。
由 B-35a(1.15g，2.77mmol) 及于二烷中的 4M HCl(6.92ml，27.8mmol) 起始，类似于 B-14 制备 B-35。 产量 ：527mg。
B-36)(3- 三氟甲氧基 - 苯基 )- 肼盐酸盐
B-36a)N-(3- 三氟甲氧基 - 苯基 )- 肼二甲酸二 - 叔丁酯由 3-( 三氟甲氧基 ) 苯硼酸 (1.0g，4.86mmol)、偶氮二甲酸二 - 叔丁酯 (1.23g， 5.34mmol) 及乙酸铜 (II)(88mg，0.49mmol) 起始，类似于 B-14a 制备 B-36a。 通过制备 RP-HPLC( 于水中的 5-98％ ACN) 纯化产物。 产量 ：1.26g。
51由 B-36a(1.26g，3.21mmol) 及于二烷中的 4M HCl(8.03ml，32.1mmol) 起始，类似于 B-14 制备 B-36。 产量 ：557mg。 B-37)(3- 吡唑 -1- 基 - 苯基 )- 肼盐酸盐CN 102015728 A CN 102015738 A说明书48/114 页
B-37a)N-(3- 吡唑 -1- 基 - 苯基 )- 肼二甲酸二 - 叔丁酯
由 3-(1H- 吡唑 -1- 基 ) 苯基硼酸 (800mg，4.26mmol)、偶氮二甲酸二 - 叔丁酯 (1.08g，4.68mmol) 及乙酸铜 (II)(77mg，0.43mmol) 起始，类似于 B-14a 制备 B-37a。 产量 ：1.17g。 由 B-37a(1.17g，3.13mmol) 及 于 二 烷 中 的 4M HCl(7.81mL，31.3mmol) 起
始，类似于 B-14 制备 B-37。 产量 ：518mg。
实施例 C
可根据以下通用步骤之一来合成实施例 C-01 至 C-118。 合成所需的适宜的肼及 二酮可自实施例的表判断。
通用步骤 C1 ：
将适宜的二酮 (1 当量 ) 及适宜的肼或肼盐酸盐 (1 当量 ) 添加乙酸中，并在室 温搅拌 24 小时。 在减压下除去乙酸，将所得粗物料溶解于 NMP 中，并使用 RP-LC/ MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯化。 收集所得产物级分，并经由冷冻干燥除去溶剂， 获得所需产物。
通用步骤 C2 ：
将适宜的二酮 (1 当量 ) 及适宜的肼或肼盐酸盐 (5-10 当量 ) 添加至乙酸中，并 在微波中加热至 85℃ -160℃，持续 1-6 小时。 在减压下除去乙酸，将所得粗物料溶解于 NMP 中，并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O-TFA pH 1) 纯化。 收集所得产物级分，并经由冷 冻干燥除去溶剂，获得所需产物。
通用步骤 C3 ： 将适宜的二酮 (1 当量 ) 及适宜的肼盐酸盐 (1 当量 ) 添加至 EtOH 中，并在微波 中加热至 100℃ -140℃，持续 15-60 分钟。 在减压下除去 EtOH，将所得粗物料溶解于 NMP 中，并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O-TFA pH 1) 纯化。 收集所得产物级分，并经由冷 冻干燥除去溶剂，获得所需产物。
通用步骤 C4 ：
将适宜的二酮 (1 当量 ) 及适宜的肼或肼盐酸盐 (1.3 当量 ) 添加至乙酸中，并 在 70 ℃搅拌 2 天。 在减压下除去乙酸，将所得粗物料溶解于 DMSO/TFA 中，并使用 RP-LC/MS 纯化。 收集所得产物级分，并经由冷冻干燥除去溶剂，获得所需产物。
表 1 ：实施例 C-01-C-117
实施例 DD-01)N-[1-(4- 氨 基 -2- 氯 - 苯 基 )-3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺D-01a)N-[1-(2- 氯 -4- 硝 基 - 苯 基 )-3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
在 60℃，搅拌 5.0g(15.2mmol) 的 N-[6-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 羰基 )-7- 氧代 -4， 5，6，7- 四氢 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 乙酰胺 (A-23) 及 3.74g(16.7mmol) 的 (2- 氯 -4- 硝 基 - 苯基 )- 肼盐酸盐于 100mL 冰醋酸中的悬浮液。 在 60℃搅拌 24 小时之后，蒸发溶 剂，将残余物溶解于 200mL ACN 中，并搅拌 20 分钟。 滤出固体，并在 40℃干燥，从而 获得 5.33g 所需产物。在室温下，以 3 巴的氢压力将 5.30g(11.0mmol) 的 D-01a、596mg(2.20mmol) 乙 酰丙酮钒 (vanadyl acetylacetonate) 及 530mg Pt/C(5％ ) 于 180mLDMF 及 270mL THF 中 的反应混合物氢化过夜。 经硅藻土过滤反应混合物，并在减压下蒸发溶剂。 将残余物溶 解于 ACN 中。 滤出固体物料并在 60℃干燥，从而获得 3.94g D-01。
D-02)N-[1-(4- 氨 基 -2- 氟 - 苯 基 )-3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
D-02a)N-[1-(2- 氟 -4- 硝 基 - 苯 基 )-3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
在 40 ℃， 搅 拌 2.30g(6.98mmol) 的 A-23 及 1.45g(6.98mmol) 的 (2- 氟 -4- 硝 基 - 苯基 )- 肼盐酸盐于 40mL 冰醋酸中的悬浮液过夜。 蒸发溶剂，添加水并搅拌混合物 30 分钟。 滤出所形成的沉淀物，并在真空干燥室中于 40℃干燥，从而获得 2.70g D-02a。
在室温下以 4 巴的氢压力将 6.3g(13.6mmol) 的 D-02a、734mg(2.71mmol) 氧钒 基乙酰丙酮酸酯及 700mg Pt/C(5％ ) 于 100mL DMF 及 150mLTHF 中的反应混合物氢化过 夜。 经二氧化硅过滤反应混合物，并在减压下蒸发溶剂。 将残余物溶解于 ACN 中，并 滤出固体物料且在 60℃干燥，从而获得 5.34g D-02。
D-03)N-[1-(4- 溴 - 苯基 )-3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
添加 7.46g(33.4mmol) 的 (4- 溴 - 苯基 )- 肼盐酸盐至 10.0g(30.4mmol) 的 A-23 于 40mL 冰醋酸中的悬浮液中。 在室温搅拌过夜之后，滤出沉淀物并以 EtOH 洗涤 3 次。 干燥固体并获得 11g D-03。
D-04)N-{3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-1-[4-(4，4，5，5- 四甲基 -1，3，2- 二氧 杂硼杂环戊烷 -2- 基 )- 苯基 ]-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 }- 乙酰 胺
在氩气氛下于 105℃加热 5.50g(11.4mmol) 的 D-03、3.20g(12.6mmol) 双 ( 频哪 醇 ) 二硼 (bis(pinacolato)diboron)、3.38g(34.4mmol) 乙酸钾和 468mg(0.572mmol) 的 1， 1 ′ - 双 ( 二苯基 - 膦基 ) 二茂铁二氯化钯 DCM 络合物于 40mL 无水 DMF 中的溶液过 夜。 将悬浮液体积减半并滤出沉淀物，以 5mL 水及 5mLEtOH 洗涤两次并在减压干燥， 从而获得 5.6g D-04。 产物未经进一步纯化而用于下一步骤。
D-05)N-[1-(4- 溴 - 苯基 )-3-(6- 乙基氨基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡 唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
添加 3.11g(13.9mmol) 的 (4- 溴 - 苯基 )- 肼盐酸盐至 4.12g(11.5mmol) 的 A-10 于 30mL 冰醋酸中的悬浮液中。 在室温搅拌过夜，并在 50℃搅拌 1 小时之后蒸发溶剂， 将残余物悬浮于 25mL MeOH 中，并超声处理 25 分钟。 滤出固体物料并干燥，从而获得 1.66g D-05。
D-06)N-[1-(4- 溴 - 苯基 )-3-(6- 甲基氨基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡
唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
添加 3.11g(13.9mmol) 的 (4- 溴 - 苯基 )- 肼盐酸盐至 4.0g(11.6mmol) 的 A-07 于 30mL 冰醋酸中的悬浮液中。 在室温搅拌过夜，并在 50℃搅拌 1 小时之后蒸发溶剂， 将残余物悬浮于 20mL MeOH 中，并超声处理 25 分钟。 滤出固体物料并干燥，从而获得 2.66g D-06，其未经进一步纯化而使用。
D-07)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]- 顺式 - 环己烷甲酸
D-07a)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4， 3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]- 顺式 - 环己烷甲酸乙酯在 65℃，搅拌 1.30g(3.95mmol) 的 A-23 及 1.01g(4.74mmol) 的 4- 肼基 - 环己烷 甲酸乙酯盐酸盐于 30mL 冰醋酸中的溶液 50 小时。 蒸发溶剂，并将残余物溶解于 DMF 中。 经由 RP- 制备 HPLC 色谱法 ( 梯度 2-60％ ACN) 进行纯化。 冷冻干燥之后，获得 510mg D-07a。
添 加 294mg(12.3mmol) 的 LiOH 于 14mL 水 中 的 溶 液 至 737mg(1.54mmol) 的 D-07a 于 35mL THF 中的溶液中。 在 30℃搅拌反应混合物 3 天。 添加冰醋酸直至 pH 达
到 4-5，并在减压下蒸发溶剂。 将残余物溶解于 DCM 中，并添加水。 滤出所形成的沉 淀。 再添加水至滤液以促使沉淀完毕。 干燥合并的固体部份，从而获得 372mg D-07。
D-08)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]- 顺式 - 环己烷甲酸
D-08a)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4， 3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]- 反式 - 环己烷甲酸乙酯在 60℃，搅拌 1.30g(3.95mmol) 的 A-23 及 0.967g(4.34mmol) 的 4- 肼基 - 环己 烷甲酸乙酯盐酸盐于 30mL 冰醋酸中的溶液 50 小时。 蒸发溶剂，并将残余物溶解于 DMF 中。 经由 RP- 制备 HPLC 色谱法 ( 梯度 2％ -60％ ACN) 进行纯化。 冷冻干燥之后，获 得 298mg D-08a。
添加 148mg(6.19mmol) 的 LiOH 于 7.0mL 水中的溶液至 371mg(0.774mmol) 的 D-08a 于 17mL THF 中的溶液中。 在室温搅拌反应混合物 24 小时。 添加冰醋酸直至 pH 达到 4-5，并在减压下蒸发溶剂。 将残余物溶解于 DCM 中，并添加水。 滤出所形成的 沉淀物。 再添加水以促使沉淀完毕。 在 40℃干燥合并的固体部份过夜，从而获得 284mg D-08。
D-09)N-[1-(4- 氰 基 -2- 甲 基 - 苯 基 )-3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺在 45℃，搅拌 2.50g(8mmol) 的 A-23 及 1.68g(11mmol) 的 4- 肼基 -3- 甲基 - 苯 甲腈于 10mL 冰醋酸中的溶液过夜。 蒸发溶剂，并将残余物溶解于 10mLEtOH 中。 搅拌 过夜后，滤出所形成的沉淀物，并干燥，从而获得 1.4g D-09。
D-10)N-[1-(4- 甲酰基 -2- 甲基 - 苯基 )-3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
添 加 1.0g(21.7mmol) 甲 酸 及 300mg Raney- 镍 至 600mg(1.36mmol) 的 D-09 于 2.0mL 冰醋酸、2.0mL 吡啶及 2.0mL 水中的反应混合物中，并在 90℃搅拌 30 分钟。 在不 冷却的情况下过滤反应混合物，并以 5mL 冰醋酸洗涤。在减压下蒸发滤液，并添加 10mL 水至残余物。 滤出所形成的沉淀物，用水洗涤并在真空中干燥，从而获得 450mg D-10， 其未经进一步纯化而用于下一步骤。
D-11)N-[1-(2- 溴 -4- 氰 基 - 苯 基 )-3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
在 60℃，搅拌 5.0g(15.2mmol) 的 A-23) 及 5.20g(22.1mmol) 的 3- 溴 -4- 肼基 - 苯 甲腈于 20ml 冰醋酸中的溶液 3 小时。 蒸发溶剂，并将残余物溶解于 10mL EtOH 中。 搅 拌过夜之后，滤出所形成的沉淀物，并干燥，从而获得 4.30g 所需产物 D-11。
D-12)N-[1-(2- 溴 -4- 甲 酰 基 - 苯 基 )-3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
添 加 1.0g(21.7mmol) 甲 酸 及 300mg Raney- 镍 至 600mg(1.19mmol) 的 D-11 于 2mL 冰醋酸、2mL 吡啶及 2mL 水中的反应混合物中，并在 90℃搅拌 30 分钟。 在不冷却 的情况下过滤反应混合物，并以 20mL MeOH/DCM 洗涤两次。 在减压下蒸发滤液，并添 加 10mL 水至残余物。 滤出所形成的沉淀物，以 3mL 水洗涤两次，并在真空中干燥，从 而获得 588mg D-12，其未经进一步纯化而用于下一步骤。
D-13)N-[1-[2- 溴 -4-( 甲 氧 基 亚 氨 基 - 甲 基 )- 苯 基 ]-3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
在 40℃，搅拌 170mg(0.301mmol) 的 D-12 及 50.3mg(0.602mmol) 的 O- 甲基 - 羟 胺盐酸盐于 2mL MeOH 中的反应混合物过夜。 在减压下蒸发反应混合物，并将残余物溶 解于含 5％三乙胺的 2mL MeOH/DCM 中。 经由制备 HPLC 进行纯化，从而获得 150mg D-13。
D-14)N-[3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-1- 哌啶 -4- 基 -4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4， 3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
在 80℃，搅拌 5.20g(15.8mmol) 的 A-23 及 3.6g(19.1mmol) 的 B-26 于 200mL 冰 醋酸中的混合物 72 小时。 蒸发溶剂，并将残余物溶解于水及 5％碳酸钾水溶液中。 滤出 所形成的沉淀物，并用水洗涤。 经由 MPLC(DCM/MeOH 93 ∶ 7 作为洗脱液 ) 纯化粗产 物，从而获得 4.0g D-14。
D-15)[1-[4-( 甲氧基亚氨基 - 甲基 )- 苯基 ]-3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 硫代氨基甲酸 S- 乙酯
添加 153μL(0.895mmol) 二异丙基乙胺及 122mg(0.981mmol) 氯 - 硫代甲酸乙酯 至 150mg(0.306mmol) 的 D-16 于 2mL NMP 中的溶液中。 在室温搅拌反应混合物过夜。 添加水至反应，并以 15mL DCM 萃取所得混合物两次。 用 Na2SO4 干燥合并的有机层， 并在减压下蒸发，从而获得 150mg D-15，其未经进一步纯化而用于下一步骤。
D-16)4-[7- 氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并 噻唑 -1- 基 ]- 苯甲醛 O- 甲基 - 肟
添加 5mL 4M HCl 二烷溶液至 500mg(1.09mmol) 的 D-29 于 10mLMeOH 及3mL DCM 中的溶液中。 在 60℃搅拌反应混合物 6 小时。 在减压下蒸发溶剂，并将残余物 溶解于水及 DCM 中。 添加碳酸钾直至水相呈碱性。 相分离之后，以 50mL DCM 萃取水 相两次。 以 1M HCl 水溶液洗涤合并的有机层。 添加少许 MeOH 至有机层，用 Na2SO4 干 燥，并在减压下蒸发溶剂，从而获得 113mg D-16，其未经进一步纯化而用于下一步骤。
D-17)1- 异丙基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯 并噻唑 -7- 基胺
滴加 2.14mL 浓 HCl 水溶液至 4.7g(13mmol) 的 C-73 于 5mL 二烷中的悬浮液中。 添加完毕之后，在 95℃加热反应混合物 2 小时。 添加饱和 NaHCO3 溶液至冷却的 反应混合物直至 pH 达到 8。 滤出所形成的沉淀物，以 5mL 水洗涤两次，并在真空中干 燥，从而获得 3.70g D-17，其未经进一步纯化而用于下一步骤。
D-18)[1-(4- 溴 - 苯基 )-3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4， 3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 氨基甲酸甲酯
在 50℃搅拌 400mg(1.27mmol) 的 A-24 及 284mg(1.27mmol) 的 (4- 溴 - 苯基 )- 肼 盐酸盐于 10mL 冰醋酸中的混合物 48 小时。 蒸发溶剂，将残余物溶解于 MeOH 中，并超 声处理 15 分钟。 滤出固体物料，并干燥，从而获得 780mgD-18。
D-19)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 氯 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]-3- 氯 -N， N- 二甲基 - 苯甲酰胺
在 40℃搅拌 1.50g(4.29mmol) 的 A-12 及 1.39g(5.58mmol) 的 B-01 于 35mL 冰醋 酸中的混合物过夜。 蒸发溶剂，将残余物溶解于 DCM 及饱和 Na2CO3 溶液中。 以 DCM 萃取水层两次，用 MgSO4 干燥合并的有机层，并在减压下蒸发，从而获得 1.05g D-19。
D-20)[3-(6- 乙基氨基 - 吡啶 -3- 基 )-1- 邻甲苯基 -4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4， 3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 硫代氨基甲酸 S- 乙酯
在 80℃，搅拌 2.50g(4.94mmol) 的 A-34 及 0.941g(1.11mmol) 的 2- 甲基 - 苯基 肼盐酸盐于 10mL 冰醋酸中的溶液过夜。 在减压下蒸发溶剂，并将残余物溶解于 DMSO/ MeOH 中。 滤出固体物料，并经由制备 HPLC 纯化滤液，从而获得 0.680g D-20，其未经 进一步纯化而用于下一步骤。
D-21)[1-(2- 氯 - 苯基 )-3-(6- 甲基氨基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑 并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 硫代氨基甲酸 S- 乙酯
添加 275mg(1.54mmol) 的 2- 氯苯基肼盐酸盐至 200mg(0.512mmol) 的 A-33 于 15mL 异丙醇中的悬浮液中。 在 80℃搅拌过夜之后，在减压下蒸发溶剂，从而获得 150mg D-21，其未经进一步纯化而用于下一步骤。
D-22)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]-3- 甲氧基 - 苯甲酸甲酯
在 60℃搅拌 3g(8.93mmol) 的 A-23 及 2.5g(13mmol) 的 B-33 于 20mL 冰醋酸中 的反应混合物过夜。 蒸发溶剂，并将残余物溶解于 10mL EtOH 中。 滤出沉淀物，以 4mL EtOH 洗涤两次并干燥，从而获得 3.30g D-22。
D-23)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]-3- 甲氧基 - 苯甲酸
类似于 D-25 制得 D-23。
D-24)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]-3- 乙氧基 - 苯甲酸甲酯
在室温搅拌 6.72g(22mmol) 的 A-23 和 4.29g(20mmol) 的 B-34 于 50mL 冰醋酸 烷中。 冷冻干燥之后，使残余中的反应混合物过夜。 蒸发溶剂，并将残余物溶解于二物悬浮于 40mL EtOH 中，并超声处理几分钟。 滤出固体物料并干燥，从而获得 4.80g 所 需产物 D-24。
D-25)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]-3- 乙氧基 - 苯甲酸
在室温搅拌 4.80g(9.44mmol) 的 D-24 及 1.61g(37.8mmol) 的 LiOH 于 60mL 二烷及 12mL 水中的溶液 2 小时。 添加 100mL 水及 1M HCl 水溶液至反应直至 pH 达到 4。 再添加水 (150mL)，并滤出所形成的沉淀物，以 20mL 水洗涤 5 次，悬浮于水中，并在冷 冻干燥机中干燥，从而获得 4.30g D-25。
D-26)N-[1-(3- 氰基 - 苯基 )-3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑 并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
在室温搅拌 5.04g(15mmol) 的 A-23 及 2.40g(16.2mmol) 的 3- 肼基 - 苯甲腈于 50mL 冰醋酸中的反应混合物过夜。 滤出所形成的沉淀物，以 75mL 冰醋酸洗涤两次，并 干燥，从而获得 4.04g D-26。
D-27)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]-3- 氯 - 苯甲酸甲酯
在室温搅拌 4.16g(12mmol) 的 A-23 及 2.79g(13.2mmol) 的 3- 氯 -4- 肼基 - 苯甲 烷/水酸甲酯于 30mL 冰醋酸中的反应混合物过夜。 蒸发溶剂，并将残余物溶解于二中。 冷冻干燥之后，使残余物悬浮于 50mL EtOH 中，并超声处理几分钟。 滤出固体物 料，以 50mL EtOH 洗涤，并干燥，从而获得 2.61gD-27。
D-28)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]-3- 氯 - 苯甲酸
在室温搅拌 2.60g(5.16mmol) 的 D-27 及 879mg(20.6mmol) 的 LiOH 于 30mL 二烷及 8mL 水中的溶液 2 小时。 添加 150mL 水及 1M HCl 水溶液至反应直至 pH 达到 4。 再添加水 (150mL)，并滤出所形成的沉淀物，以 20mL 水洗涤 5 次，悬浮于水中，并在冷 冻干燥机中干燥，从而获得 1.72g D-28。
D-29)N-[1-[4-( 甲氧基亚氨基 - 甲基 )- 苯基 ]-3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4， 5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
在 室 温 搅 拌 2.00g(6.07mmol) 的 A-23 及 1.74g(7.29mmol) 的 B-31 于 20mL 冰 醋酸中的反应混合物过夜。 在减压下蒸发溶剂。 添加水至残余物，并以 DCM 萃取其 7 次。 以饱和 NaCl 溶液洗涤合并的有机层，用 Na2SO4 干燥，并在减压下蒸发溶剂，从而 获得 2.68g D-29。
D-30)N-[3-(6- 乙基 - 吡啶 -3- 基 )-1- 哌啶 -4- 基 -4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，
3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
可类似于 D-14 合成 D-30。
实施例 E
E-01)N-[1-(2- 氯 -4-{[1- 环丁基 -1- 吡咯烷 -1- 基 - 甲 -(E)- 亚基 ]- 氨基 }- 苯 基 )-3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰 胺
添加 330μL(3.9mmol) 草酰氯于 1mL CH2Cl2 中的溶液至 597mg(3mmol) 环丁 基 - 吡咯烷 -1- 基 - 甲酮于 2mL 无水 CH2Cl2 中的溶液中，并在室温搅拌反应混合物 1 小 时。 一次性添加 1-( 氯 - 环丁基 - 亚甲基 )- 吡咯烷鎓氯化物于 3mL CH2Cl2 中的新制溶 液至 100mg(0.23mmol) 的 D01 于 1mL NMP 中的溶液中。 在室温搅拌反应混合物 10 分 钟。 蒸发 CH2Cl2 并通过 RP-HPLC 及 NP-HPLC 自 NMP 溶液分离产物。 产量 ：81mg。
以类似于实施例 E-01 的程序制备 E-02 至 E-04。
E-05)N-[1-[4-(6- 氯 - 吡啶 -3- 基 )- 苯基 ]-3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
将 中 间 体 D-04(70mg)、2- 氯 -5- 溴 吡 啶 (38mg) 及 碳 酸 钾 (73mg) 添 加 至 DMF(1mL)。 以氩气脱气反应烧瓶，并添加四 -( 三苯基膦 ) 合钯 (0)(8mg)。 反应加热 至 110℃，保持 24 小时。 将混合物冷却至室温，过滤，并以 MeOH(300μL) 洗涤。 使 用 RP-LC/MS(ACN:H2O-TFA pH 1) 纯化所得滤液。 产量 ：3mg。
E-06)N-[3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-1-(4- 噻 吩 -3- 基 - 苯 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [3′，4′ ：3，4] 苯并 [1，2-d] 噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
将 中 间 体 D-04(70mg)、3- 溴 噻 吩 (33mg) 及 碳 酸 钾 (73mg) 添 加 至 DMF(1mL)。 以氩气脱气反应烧瓶，并添加四 -( 三苯基膦 ) 合钯 (0)(8mg)。 反应加热 至 110℃，保持 24 小时。 将混合物冷却至室温，过滤，并以 MeOH(300μL) 洗涤。 使 用 RP-LC/MS(ACN:H2O-TFA pH 1) 纯化所得滤液。 产量 ：2mg。
E-07)N-[1-(2 ′ - 甲氧基 - 联苯 -4- 基 )-3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [3′，4′ ：3，4] 苯并 [1，2-d] 噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
将 中 间 体 D-04(70mg)、2- 溴 苯 甲 醚 (37mg) 及 碳 酸 钾 (73mg) 添 加 至 DMF(1mL)。 以氩气脱气反应烧瓶，并添加四 -( 三苯基膦 ) 合钯 (0)(8mg)。 反应加热 至 110℃，保持 24 小时。 将混合物冷却至室温，过滤，并以 MeOH(300μL) 洗涤。 使 用 RP-LC/MS(ACN:H2O-TFA pH 1) 纯化所得滤液。 产量 ：20mg，30。
E-08)N-{3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-1-[4-(4- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )- 苯基 ]-4， 5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 }- 乙酰胺
将中间体 D-04(150mg)、3- 溴 -4- 甲基吡啶 (50μL) 及碳酸钾 (390mg) 添加至
DMF(5mL)。 以氩气脱气反应烧瓶，并添加四 -( 三苯基膦 ) 合钯 (0)(8mg)。 反应加热 至 100℃，保持 3.5 小时。 将混合物冷却至室温，并添加至 DCM(15mL)。 过滤所得混 合物，并以 DCM(15mL) 洗涤。 在减压下除去 DCM 并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O-TFA pH 1) 纯化所得 DMF 溶液。 产量 ：16mg。
E-09)N-[3-(6- 乙基氨基 - 吡啶 -3- 基 )-1-(4- 吡啶 -3- 基 - 苯基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
将 中 间 体 D-05(156mg)、 吡 啶 -3- 硼 酸 (80mg) 及 碳 酸 钾 (275mg) 添 加 至 DMF(4mL)。 以氩气脱气反应烧瓶，并添加四 -( 三苯基膦 ) 合钯 (0)(35mg)。 反应加 热至 100℃，保持 24 小时。 将混合物冷却至室温，并添加至 DCM(15mL)。 过滤所得混 合物，并以 DCM(15mL) 洗涤。 在减压下除去 DCM 并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O-TFA pH 1) 纯化所得 DMF 溶液。 产量 ：49mg。
E-10)N-{3-(6- 乙基氨基 - 吡啶 -3- 基 )-1-[4-(2- 甲基 - 吡啶 -4- 基 )- 苯基 ]-4， 5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 }- 乙酰胺
将 中 间 体 D-05(515mg)、4- 甲 基 吡 啶 -4- 硼 酸 频 哪 醇 酯 (480mg) 及 碳 酸 钾 (990mg) 添加至 DMF(15mL)。 以氩气脱气反应烧瓶，并添加四 -( 三苯基膦 ) 合钯 (0)(120mg)。 反应加热至 100 ℃，保持 24 小时。 将混合物冷却至室温，并添加至 DCM(15mL)。 过滤所得混合物，并以 DCM(15mL) 洗涤。 在减压下除去 DCM 并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O-TFA pH 1) 纯化所得 DMF 溶液。 产量 ：120mg。
E-11)N-{3-(6- 甲基氨基 - 吡啶 -3- 基 )-1-[4-(2- 甲基 - 吡啶 -4- 基 )- 苯基 ]-4， 5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 }- 乙酰胺
将 中 间 体 D-06(500mg)、2- 甲 基 吡 啶 -4- 硼 酸 频 哪 醇 酯 (480mg) 及 碳 酸 钾 (990mg) 添加至 DMF(15mL)。 以氩气脱气反应烧瓶，并添加四 ( 三苯基膦 ) 合钯 (0) (120mg)。 反应在微波中加热至 110℃，保持 2 小时。 将混合物冷却至室温，并添加至 DCM(15mL)。 过滤所得混合物，并以 DCM(15mL) 洗涤。 在减压下除去 DCM 并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O-TFA pH 1) 纯化所得 DMF 溶液。 产量 ：226mg。
E-12)44(S)-7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4， 3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]- 环己烷羧酸甲基 -(1- 甲基 - 哌啶 -4- 基 )- 酰胺
添 加 45μL(0.27mmol)DIPEA、40mg(0.11mmol)HATU 至 40mg(0.09mmol)D07 于 DMF 中的悬浮液中。 在室温搅拌混合物 15 分钟，接着添加 14μL(0.10mmol) 的 1- 甲 基 -4-( 甲基氨基 ) 哌啶。 搅拌混合物过夜。 收集沉淀的产物并以 NaHCO3 与水的饱和 溶液洗涤。 最后在真空中干燥产物。 产量 ：30mg。
以类似于实施例 E-12 的程序制备 E-13 及 E-14。 若化合物不以足够的纯度沉 淀，则通过制备 HPLC-MS 将其纯化。
E-15)N-[1-[4-( 甲 氧 基 亚 氨 基 - 甲 基 )-2- 甲 基 - 苯 基 ]-3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
将 中 间 体 D-10(3.3g) 及 甲 氧 基 胺 盐 酸 盐 (1.3g) 添 加 至 MeOH(20mL)， 并 在 40 ℃ 搅 拌 30 分 钟。 接 着， 在 减 压 下 除 去 溶 剂， 添 加 5mL NMP 并 使 用 RP-LC/ MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯化所得溶液。 产量 ：1.78g。
E-16)N-[1-[4-( 异 丙 氧 基 亚 氨 基 - 甲 基 )-2- 甲 基 - 苯 基 ]-3-(6- 甲 基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
将中间体 D-10(70mg) 及异丙氧基胺盐酸盐 (42mg) 添加至 MeOH(2mL)，并 在 40 ℃搅拌过夜。 接着在减压下除去溶剂，溶解于 MeOH/DCM 的混合物中，并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯化。 产量 ：48mg。
E-17)N-[1-[2- 乙 炔 基 -4-( 甲 氧 基 亚 氨 基 - 甲 基 )- 苯 基 ]-3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1l 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
将 中 间 体 D-13(70mg)、 三 甲 基 甲 硅 烷 基 乙 炔 (15mg)、 碘 化 铜 (I)(1mg)、 氯 化 双 -( 三 苯 基 膦 ) 合 钯 (II)(5mg)、 三 苯 基 膦 (7mg) 及 二 乙 胺 (500μL) 添 加 至 DMSO(500μL)。 接着，在微波中将反应加热至 115℃，保持 100 秒。 过滤反应混合物， 并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯化。 接着，将物料溶解于 THF(1mL) 中并添加 TBAF(100μL 于 THF 中的 1M 溶液 )。 在 40℃加热反应混合物 1 小时。 过滤 反应混合物，并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯化。 产量 ：7mg。
E-18)N-[1-[4-( 甲氧基亚氨基 - 甲基 )-2- 丙 -1- 炔基 - 苯基 ]-3-(6- 甲基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
将中间体 D-13(140mg)、氯化锂 (33mg)、氯化双 -( 三苯基膦 ) 合钯 (II)(18mg) 及三苯基膦 (27mg) 添加至 DMSO 并在室温搅拌 5 分钟。 接着逐份添加三丁基 (1- 丙 炔基 )- 锡 (171mg) 且接着在 105℃加热反应混合物 25 分钟。 过滤反应混合物，并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯化。 产量 ：35mg。
E-19)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]- 哌啶 -1- 羧酸二甲基酰胺
在 0 ℃ 下， 添 加 二 甲 基 氨 甲 酰 氯 (33.7μL，367μmol) 至 D-14(15mg， 367μmol) 及三乙胺 (76.3μL，551μmol) 于 2mL THF 中的混合物中。 在室温搅拌反应 混合物过夜。 过滤反应混合物，并在真空中于 40℃干燥固体。 产量 ：15mg。
以类似于实施例 E-19 的程序制备 E-20 至 E-26。
E-27)N-{3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-1-[1-(3- 吡 啶 -3- 基 - 丙 -2- 炔 基 )- 哌 啶 -4- 基 ]-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 }- 乙酰胺
在 氩 气 氛 下 于 80 ℃， 搅 拌 D-14(10mg，245μmol)、 甲 醛 (37 ％ 于 水 中， 92μL，1.22mmol)、 溴 化 铜 (I)(70.2mg，490μmol)、3- 乙 炔 基 吡 啶 (50.5mg， 490μmol) 及分子筛 于 5mL 无水二 烷中的混合物 1 小时。 过滤反应混合物，添 加 DCM，并以水及盐水洗涤反应混合物。 用 MgSO4 干燥有机相，并在真空中浓缩。 通 过制备 RP-HPLC( 于水中的 5-98％ ACN) 纯化残余物。 产量 ：8.2mg。
类似于实施例 E-27 制备实施例 E-28。
E-30)N-[3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-1-(1- 吡啶 -2- 基甲基 - 哌啶 -4- 基 )-4， 5- 二氢 -1l 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
在室温搅拌 D-14(8.00g，19.6mmol)、2- 吡啶甲醛 (3.15g，29.4mmol) 及乙酸 (3.7mL，43.1mmol) 于 60mL MeOH/DCM(1/1， v/v) 中的混合物 2 小时。 接着，添加 三乙酰氧基硼氢化钠 (12.5g，58.5mmol)，且在室温搅拌反应混合物过夜，并接着在 40℃ 搅拌 2 小时。 将反应混合物倾于饱和碳酸氢钠水溶液上，并以含 10％ MeOH 的 DCM 萃 取。 用 Na2SO4 干燥合并的有机相，并在真空中浓缩。 通过以乙酸乙酯研磨、快速色谱法 ( 硅胶，于 DCM 中含 0.5％氨的 0-10％ MeOH) 且最后以 EtOH 及二烷研磨来纯化残余物。 产量 ：3.61g。
以类似于实施例 E-30 的程序制备 E-29 及 E-31。
E-32)[1-[4-( 甲氧基亚氨基 - 甲基 )- 苯基 ]-3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 脲
在 90 ℃ 搅 拌 50mg(010mmol)D-15 及 氨 于 1mL NMP 中 的 溶 液 过 夜。 使 用 RP-LC/MS(ACN:H2O-TFA pH 1-2) 纯化反应混合物。 产量 ：1.13mg。
E-33)N-[1-[4-( 甲氧基亚氨基 - 甲基 )- 苯基 ]-3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4， 5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 丙酰胺
添 加 60μL(0.351mmol) 二 异 丙 基 乙 胺 及 32μL(0.367mmol) 丙 酰 氯 至 50mg(0.12mmol)D-16 于 1mL NMP 中 的 溶 液 中 并 在 室 温 搅 拌 6 小 时。 使 用 RP-LC/ MS(ACN:H2O- 甲酸 pH 2-3) 纯化反应混合物。 产量 ：20mg。
E-34)2- 甲 氧 基 -N-[1-[4-( 甲 氧 基 亚 氨 基 - 甲 基 )- 苯 基 ]-3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
添加 102μL(0.597mmol) 二异丙基乙胺及 60μL(0.658mmol) 甲氧基 - 乙酰氯 至 100mg(0.204mmol)D-16 于 1mL NMP 中的溶液中并在室温搅拌过夜。 使用 RP-LC/ MS(ACN:H2O- 甲酸 pH 2-3) 纯化反应混合物。 产量 ：46.9mg。 E-35)2- 羟 基 -N-[1-[4-( 甲 氧 基 亚 氨 基 - 甲 基 )- 苯 基 ]-3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
添加 165μL(0.964mmol) 二异丙基乙胺及 226μL(1.99mmol) 乙酰氧基 - 乙酰氯 至 453mg(0.331mmol)D-16 于 1mL NMP 中的溶液中，并在室温搅拌 30 分钟。 添加 20mL 水至反应，并以 25mL DCM 萃取所得混合物 3 次。 用 Na2SO4 干燥合并的有机层，并在 减压下蒸发溶剂。 将分离的粗产物溶解于 5mL MeOH 中并添加 2mL(33.1mmol，32％ ) 氨溶液。 在室温搅拌 2 小时之后，在减压下蒸发溶剂，并将残余物溶解于 NMP 中。 使 用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 甲酸 pH 2-3) 纯化反应混合物。 产量 ：22.7mg。
E-36) 环丁烷羧酸 [1- 异丙基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑 并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 酰胺
将中间体 D-17(150mg) 及二异丙基乙胺 (0.18g) 溶解于 NMP(1mL) 中。 接着 添加环丁烷甲酰氯 (0.16g)，并在室温搅拌反应混合物 2 小时。 添加 MeOH(1mL) 及 1 滴 HCL( 浓 )，并在室温搅拌 10 分钟。 过滤反应混合物，并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 碳
酸氢铵 pH 9.3) 纯化。 产量 ：52mg。
E-37)N-[1- 异丙基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 异丁酰胺
将 中 间 体 D-17(150mg) 及 二 异 丙 基 乙 胺 (0.18g) 溶 解 于 NMP(1mL) 中。 接 着，添加异丁酰氯 (0.15g)，并在室温搅拌反应混合物 2 小时。 接着，添加 MeOH(1mL) 及 1 滴 HCL( 浓 )，并在室温搅拌混合物 10 分钟。 过滤反应混合物，并使用 RP-LC/ MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯化。 产量 ：57mg。
E-38) 环丙烷羧酸 [1- 异丙基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑 并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 酰胺将 环 丙 基 甲 酸 (0.12g)、 二 异 丙 基 乙 胺 (0.12g) 及 TBTU(0.44g) 溶 解 于 DCM(1mL) 中， 并 使 其 在 30 ℃ 反 应 30 分 钟。 接 着， 滴 加 中 间 体 D-17(150mg) 于 NMP(1mL) 中 的 溶 液 至 反 应 混 合 物， 接 着 在 90 ℃ 将 其 加 热 4 小 时。 接 着 添 加 MeOH(1mL) 及 1 滴 HCL( 浓 )，并在室温搅拌混合物 10 分钟。 过滤反应混合物，并使 用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯化。 产量 ：70mg。
E-39)N-[1- 异丙基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 甲酰胺
一起添加甲酸 (0.53mL) 及乙酸酐 (0.65mL)，并在 30℃搅拌 30 分钟。 将溶液冷 却至 0℃，并添加中间体 D-17(150mg)。 使该反应在 30℃反应过夜。 接着，将反应混合 物添加至异丙醇 (10mL)，并经由过滤移出所得固体，且在真空中干燥。 产量 ：119mg。
E-40)[1-[4-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 苯基 ]-3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 氨基甲酸甲酯
在氮气下，添加 105mg(0.936mmol) 的 2- 甲基 - 丙 -2- 醇钾、70mg(0.103mmol) PEPPSI 及 70μL(0.630mmol)1- 甲基 - 哌嗪至 200mg(0.302mmol)D-18 于 2mL DMSO 中的 溶液中。 在微波照射下于 130℃加热反应混合物 45 分钟。 使用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 碳 酸氢铵 pH 9.3) 纯化反应混合物。 产量 ：10.9mg。
E-41)[1-{4-[4-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 哌啶 -1- 基 ]- 苯基 }-3-(6- 甲基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 氨基甲酸甲酯
在氮气下，添加 105mg(0.936mmol) 的 2- 甲基 - 丙 -2- 醇钾、70mg(0.103mmol) PEPPSI 及 110mg(0.600mmol) 的 1- 甲基 -4- 哌啶 -4- 基 - 哌嗪至 200mg(0.302mmol)D-18 于 2mL DMSO 中的溶液中。 在微波照射 (Biotage) 下于 130℃加热反应混合物 45 分钟。 使用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯化反应混合物。 产量 ：4.6mg。
E-42)4-{7- 乙酰基氨基 -3-[6-(3- 二甲基氨基 - 丙 -1- 炔基 )- 吡啶 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 }-3- 氯 -N， N- 二甲基 - 苯甲酰胺
在氩气下，将 70mg(0.133mmol) 的 D-19、13.2g(0.159mmol) 二甲基 - 丙 -2- 炔 基 - 胺、2.52mg(0.013mmol) 的 CuI、9.32mg(0.013mmol) 双 -( 三苯基膦 (phosphane)) 合 钯 (II) 二氯化物及 6.96mg(0.027mmol) 三苯基膦 (phosphane) 于 500μL 二乙胺及 500μL DMSO 中 的 反 应 混 合 物 在 微 波 照 射 (Biotage) 下 于 90 ℃ 加 热 90 分 钟。 使 用 RP-LC/ MS(ACN:H2O- 甲酸 pH 2-3) 纯化反应混合物。 产量 ：20mg。
E-43)4-{7- 乙酰基氨基 -3-[6-(3- 甲氧基 - 丙 -1- 炔基 )- 吡啶 -3- 基 ]-4，5- 二 氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 }-3- 氯 -N， N- 二甲基 - 苯甲酰胺
在氩气下，将 100mg(0.190mmol) 的 D-19、29μL(0.341mmol) 的 3- 甲氧基 - 丙 炔、3.6mg(0.019mmol) 的 CuI、26.6mg(0.038mmol) 二氯化双 -( 三苯基膦 ) 合钯 (II) 及 9.94mg(0.038mmol) 三苯基膦于 500μL 二乙胺及 500μLDMSO 中的反应混合物在微波照 射 (Biotage) 下于 100℃加热 120 分钟。 使用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯 化反应混合物。 产量 ：30mg。
E-44)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 环丙基乙炔基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑 并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]-3- 氯 -N， N- 二甲基 - 苯甲酰胺
在 氩 气 下， 将 70mg(0.133mmol) 的 D-19、15.8mg(0.239mmol) 乙 炔 基 - 环 丙烷、2.52mg(0.013mmol) 的 CuI、9.32mg(0.013mmol) 二氯化双 -( 三苯基膦 ) 合钯 (II) 及 6.96mg(0.027mmol) 三苯膦于 500μL 二乙胺及 500μLDMSO 中的反应混合物在微波照射 下于 100℃加热 150 分钟。 使用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯化反应混合 物。 产量 ：26mg。
E-45)4-{7- 乙酰基氨基 -3-[6-(3- 羟基 - 丙 -1- 炔基 )- 吡啶 -3- 基 ]-4，5- 二 氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 }-3- 氯 -N， N- 二甲基 - 苯甲酰胺
在氩气下，将 70mg(0.133mmol) 的 D-19、8.93mg(0.159mmol) 丙 -2- 炔 -1- 醇、 2.52mg(0.013mmol) 的 CuI、9.32mg(0.013mmol) 二 氯 化 双 -( 三 苯 基 膦 ) 合 钯 (II) 及 6.96mg(0.027mmol) 三苯膦于 500μL 二乙胺及 500μL DMSO 中的反应混合物在微波照 射下于 100℃加热 30 分钟。 使用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯化反应混合 物。 产量 ：23mg。
E-46)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 苯基乙炔基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]-3- 氯 -N， N- 二甲基 - 苯甲酰胺
在 氩 气 下， 将 150mg(0.284mmol) 的 D-19、34.9mg(0.341mmol) 乙 炔 基 苯、 5.4mg(0.028mmol) 的 CuI、20.0mg(0.028mmol) 二 氯 化 双 -( 三 苯 基 膦 ) 合 钯 (II) 及 14.9mg(0.057mmol) 三苯膦于 500μL 二乙胺及 500μL DMSO 中的反应混合物在微波照 射 (Biotage) 下于 100℃加热 60 分钟。 使用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯 化反应混合物。 产量 ：8mg。
E-47)3-[3-(6- 乙基氨基 - 吡啶 -3- 基 )-1- 邻甲苯基 -4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]-1，1- 二甲基 - 脲
添加 170mg(0.346mmol) 的 D-20 至 700μL 二甲胺于 THF 中的 1M 溶液中。 在 85℃加热反应混合物 2 小时，添加 TFA 至反应混合物，并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O-TFA pH 1-2) 进行纯化。 产量 ：109mg。
E-48)1- 乙 基 -3-[3-(6- 乙 基 氨 基 - 吡 啶 -3- 基 )-1- 邻 甲 苯 基 -4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]-1- 甲基 - 脲
在 85 ℃ 加 热 170mg(0.346mmol) 的 D-20 及 60μL(0.698mmol) 乙 基 甲 胺 于 200μL THF 中的溶液 2 小时。 滤出固体物料并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O-TFA pH 1-2) 纯化滤液。 产量 ：54.3mg。
E-49) 氮杂环丁烷 -1- 羧酸 [1-(2- 氯 - 苯基 )-3-(6- 甲基氨基 - 吡啶 -3- 基 )-4， 5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 酰胺
在微波照射下于 100℃加热 200mg(0.42mmol) 的 D-2]、240μL(4.2mmol) 氮杂环 丁烷及 271μL(2.1mmol) 二异丙基乙胺于 10mL 异丙醇中的溶液 40 分钟。 在减压下蒸发 溶剂，将残余物溶解于 NMP 中，并添加 3 滴 TFA。 使用 RP-LC/MS(ACN:H2O-TFA pH 1-2) 纯化溶液。 产量 ：65mg。
E-50)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]-3， N- 二甲氧基 -N- 甲基 - 苯甲酰胺
将 中 间 体 D-23(50O mg)、 二 异 丙 基 乙 胺 (0.5g) 及 HATU(0.6g) 溶 解 于 DCM(10mL) 中。 在 室 温 搅 拌 反 应 混 合 物 10 分 钟， 接 着 添 加 1，2- 二 甲 基 羟 胺 (0.12g)，并在室温搅拌 1 小时。 接着在减压下除去溶剂并添加异丙醇 (5mL)，之后添加水 (5mL)。 经由过滤收集所得沉淀物，以水 (5mL) 洗涤并在减压干燥固体。 产量 ： 460mg。
E-51)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]-3- 乙氧基 -N， N- 二甲基 - 苯甲酰胺
添加中间体 D-25(500mg)、1，1′ - 羰基二咪唑 (96mg) 至乙酸乙酯 (2.4mL) 及 NMP(0.6mL)。 接着在室温搅拌反应混合物 30 分钟。 接着添加二甲胺 (250μL，于 THF 中的 2M 溶液 )，并在室温下反应过夜。 接着，在减压下除去溶剂，溶解于 NMP 中，过 滤并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯化。 产量 ：124mg。
E-52)N-[1-[3-( 甲氧基亚氨基 - 甲基 )- 苯基 ]-3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4， 5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
将 中 间 体 D-26(106mg) 及 甲 氧 基 胺 盐 酸 盐 (128mg) 溶 解 于 DCM/ MeOH(50 ∶ 50，20mL) 中。 接着，在室温下添加 Raney- 镍 (220mg) 及次磷酸钠水合 物 (220mg)，并搅拌反应混合物 2 小时。 过滤所得混合物，并在减压下减少滤液。 过滤 所得油状物并将滤液溶解于 NMP 中，且使用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 甲酸 pH 2-3) 纯化。 产量 ：10mg。
E-53)4-[7- 乙酰基氨基 -3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 - 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -1- 基 ]-3- 氯 - 苯甲酸乙酯
将中间体 D-28(73mg) 及 HATU(0.67g) 溶解于 NMP(1mL) 中并在室温搅拌 20 分钟。 接着添加二异丙基乙胺 (30μL) 及 EtOH(63μL)，并在室温搅拌 4 小时。 接着过 滤反应混合物，并使用 RP-LC/MS(ACN:H2O- 碳酸氢铵 pH 9.3) 纯化。 产量 ：34mg。
E-54)N-[1-[2- 氯 -4-(4- 氟 - 哌 啶 -1- 羰 基 )- 苯 基 ]-3-(6- 甲 基 - 吡 啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
将 中 间 体 D-28(100mg)、 TBTU(100mg)、 二 异 丙 基 乙 胺 (106μl) 溶 解 于 DMF(1mL) 中 并 在 35 ℃ 搅 拌 过 夜。 接 着 过 滤 反 应 混 合 物， 并 使 用 RP-LC/ MS(ACN:H2O-TFA pH 1) 纯化。 产量 ：15mg。
E-55)N-[1-(4- 乙酰基 -2- 甲氧基 - 苯基 )-3-(6- 甲基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二 氢 -1H- 吡唑并 [4，3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺
将 E-50(250mg) 溶解于 THF(15mL) 中并置于氩气氛下。 接着，经 1 分钟添加 甲基锂溶液 (1.5M，2.6mL)，并在室温下再搅拌反应混合物 1 小时。 添加饱和氯化铵溶 液 (1mL)，并在减压下除去 THF。 将所得物料溶解于 DMSO(1.8mL) 及水 (0.2mL) 中并 使用 RP-LC/MS(ACN:H2O-TFA pH 1) 纯化。 产量 ：12mg。
表 2 ：实施例 E-01-E-55
实施例 F 可根据以下通用步骤之一来合成实施例 F-01 至 F-20。 合成所需的适宜的酸或 烷中搅拌过夜以 HCl(5-10 当量 ) 除去酰氯可由实施例的表判断。 通过在 40℃下于二Boc- 基团。
通用步骤 F1 ：
将实施例 D-17(1 当量 ) 溶解于 NMP 中，并超声处理直至所有物料溶解。 添加 DMAP(0.1 当量 )、DIPEA(5 当量 ) 及酰氯 (5 当量 )，并在室温搅拌反应混合物 1 小时。 将反应混合物倾入水中，并以 DCM 萃取。 在减压下浓缩有机相，并通过快速柱色谱法 ( 硅胶，于 DCM 中的 0-20％ MeOH) 纯化产物。 通用步骤 F2 ：
将酸 (1 当量 ) 溶解于 DCE 中，添加 CDI(1 当量 )，并在室温搅拌反应混合物 2 小时。 接着添加 50％饱和盐水，并剧烈搅拌反应混合物 1 分钟。 分离有机相，在减压下 浓缩，溶解于乙腈中，并添加至实施例 D-17(0.25 当量 ) 与 DBU(0.5 当量 ) 的混合物。 接着在 100℃搅拌所得反应混合物 2 小时。 在减压下浓缩反应混合物，倾入水中，通过 添加饱和氯化铵水溶液使 pH 达到 8，并以含 5％ MeOH 的乙酸乙酯萃取。 以 1％柠檬酸 水溶液及盐水洗涤合并的有机相，用硫酸镁干燥，并在减压下浓缩。 通过快速柱色谱法 ( 硅胶，于 DCM 中的 0-20％ MeOH) 纯化产物。
通用步骤 F3 ：
将酸 (2 当量 ) 及 2，4，6- 三氯 -1，3，5- 三嗪 (1 当量 ) 溶解于 NMP 中，并在 室温搅拌 15 分钟。 将实施例 D-17(1 当量 )、DBU(4 当量 ) 及 DMAP(0.1 当量 ) 溶解于 NMP 中并在室温搅拌 10 分钟。 合并两份反应混合物，并在 70℃搅拌过夜。 将反应混合 物倾入水中，并以 DCM 萃取。 在减压下浓缩有机相，并使用快速柱色谱法 ( 硅胶，于 DCM 中的 0-20％ MeOH) 纯化产物。
表 3 ：实施例 F-01-F-20
实施例 G
可根据以下通用步骤来合成实施例 G-01 至 G-05。 合成所需的适宜的胺可由实 施例的表判断。
通用步骤 G ：
将实施例 F-20(1 当量 ) 溶解于 NMP 中，添加 DIPEA(2 当量 ) 及胺 (3 当量 )， 并在室温搅拌反应混合物过夜。 将反应混合物倾入水中，以 DCM 萃取，并将有机相装载 于 SCX 柱上。 以 DCM 及甲醇洗涤柱，并以 DCM 及甲醇中的 7N 氨的混合物洗脱产物。 通过快速柱色谱法 ( 硅胶，于 DCM 中的 0-20％甲醇 ) 进一步纯化产物。
表 4 ：实施例 G-01-G-05
实施例 H
可根据以下通用步骤来合成实施例 H-01 至 H-14。 合成所需的适宜的胺或醇可 由实施例的表判断。
通用步骤 H ：
将实施例 D-17(1 当量 )、DBU(2 当量 ) 及 CDI(2.5 当量 ) 溶解于乙腈中，并在 100℃搅拌过夜。 添加胺或醇 (5 当量 )，并再在 100℃搅拌反应混合物过夜。 在减压下 浓缩反应混合物，并通过 HPLC(C-18，于水中的 2-98％乙腈 ) 纯化产物。
表 5 ：实施例 H-01-H-14
实施例 J 可根据以下通用步骤来合成实施例 J-01 至 J-02。 适宜的实施例 C 可由实施例的表判断。 通用步骤 J ：
添加 10mL DME、2mL 乙醇及 1.37mL 2M Cs2CO3 水溶液至 400mg(0.92mmol) 的 N-[1-(2- 氯 - 吡啶 -3- 基 )-3-(6- 甲基氨基 - 吡啶 -3- 基 )-4，5- 二氢 -1H- 吡唑并 [4， 3-g] 苯并噻唑 -7- 基 ]- 乙酰胺、2.5mL(18.3mmol) 三甲基硼氧化物 (trimethylboroxide) 及 16mg(0.022mmol) 双 ( 三苯基膦 ) 合钯 (II) 二氯化物的混合物中。 在微波中于 130℃加 热反应混合物 2 小时。 添加 DCM(25mL) 及水 (25mL)，并分离各相。 以 DCM(2 次， 每次 25mL) 洗涤水相两次。 经硫酸钠干燥合并的有机层，并在减压下除去溶剂。 将粗 物料溶解于 DMSO/TFA 中，并使用 RP-LC/MS 纯化。 收集所得产物级分，并经由冷冻 干燥除去溶剂以获得所需产物。
表 6 ：实施例 J-01-J-02
分析方法 HPLC ： Agilent 1100 Series MS ： Agilent LC/MSD SL 柱 ： Phenomenex， Mercury Gemini C18，3μm，2.0×20mm， 件号 ：00M-4439-B0-CE 溶剂 A ：5mM NH4HCO3/20mM NH3 B ：乙腈 HPLC 级 检测 ： MS ：正及负 质量范围 ：120-700m/z 碎裂器电压 (fragmentor) ：70 增益 EMV ：1 阈值 ：150 步长 ：0.25 UV ：315nm 带宽 ：170nm 参考 ：关 范围 ： 210-400nm 步距 (range step) ：2.00nm 峰宽 ：＜ 0.01min 缝隙 ：2nm 注射 ： 5μL 流量 ： 1.00mL/ 分钟 柱温度 ：40℃ 梯度 ： 0.00 分钟 5％ B 0.00-2.50 分钟 5％ - ＞ 95％ B 2.50-2.80 分钟 95％ B 2.81-3.10 分钟 95％ - ＞ 5％ B 仪器 ： Agilent 1100-SL ：incl.DAD/MSD 色谱法 ： 柱： Waters X-BridgeTM C18，50×2.1mm，3.5μ 方法″酸″ 洗脱液 A ： 0.1％甲酸的乙腈溶液 洗脱液 B ： 0.1％甲酸的水溶液 线性梯度程序 ：t0 ＝ 2％ A， t4 min ＝ 98％ A， t6min ＝ 98％ A 流量 ： 0.8mL/ 分钟 柱加热炉温 ： 35℃ 方法″碱″ 洗脱液 A ： 10mM 氨的乙腈溶液 洗脱液 B ： 10mM 氨的水溶液线性梯度程序 ：t0 ＝ 2％ A， t4min ＝ 98％ A， t6min ＝ 98％ A 流量 ： 0.8mL/ 分钟 柱加热炉温 ： 25℃ 二极管阵列检测器 (DAD) ： 仪器 ： Agilent G1316A 样本波长 ： 220-320nm 参考波长 ： 关 质谱分析 (MSD) ： 仪器 ： Agilent LC/MSD-SL 电离 ： ESI( 正 & 负 ) 质量范围 ： 100-800 所使用的缩写
以下的实施例描述本发明的化合物的生物学活性，但本发明并不局限于这些实施例。 PC3 增殖测试
本测试基于通过荧光染料结合来测量细胞 DNA 含量而进行的。 由于细胞 DNA 含量被高度调控，因此其近似地与细胞数成比例。 通过比较使用药物处理的样本与未经 处理的对照的细胞数，从而确定增殖的程度。
将 PC3( 人前列腺癌细胞系 ) 细胞接种于微量滴定板中，并于 37℃及 5％ CO2 下
于培养基中培养过夜。 逐步稀释测试物质，并添加至细胞，以使总体积为 200μL/ 孔。 添加稀释剂而非物质的细胞充当对照。 培养 3 天后，以 100μL/ 孔的染料结合溶液替换 培养基，并在 37℃于暗处再培养细胞 60 分钟。 为了测量荧光，在 485nm 的波长下进行 激发，并在 530nm 测量发射。
使用 GraphPad Prism 程序计算 EC50 值。
所列举的大部分实施例化合物具有小于 0.5μM 的 EC50( 增殖 PC3)。
PC3 细胞中的 P-AKT 测量
PC3 细胞中 P-AKT 水平通过基于细胞的 ELISA 检测。 细胞在 96 孔板中培养， 并使用系列稀释的试验物质处理 2 小时。 以添加稀释剂而非物质的细胞充当对照。 随 后，快速将细胞固定以保存蛋白质修饰。 接着，各孔使用对 Ser473- 磷酸化 AKT 特异的 一抗培养。 随后用 HRP 接合的二抗培养，且显影液 (developing solution) 在 450nm 下提 供比色读数。 使用 GraphPadPrism 程序计算 EC50 值。
所列举实施例的大部分化合物具有小于 0.5μM 的 EC50(P-AKT PC3)。
本发明的物质为 PI3 激酶抑制剂。 通式 (1) 的新化合物及其异构体及其生理学 上耐受的盐基于其生物学性质而适用于治疗以过度或异常细胞增殖为特征的疾病。
举例而言，这些疾病包括 ：病毒感染 ( 例如， HIV 及卡波西肉瘤 ) ；炎症及自 身免疫性疾病 ( 例如，结肠炎、关节炎、阿尔兹海默氏病、肾小球肾炎及创伤愈合 ) ；细 菌、真菌和 / 或寄生虫感染 ；白血病、淋巴瘤及实体瘤 ；皮肤病 ( 例如，牛皮癣 ) ；骨 病 ；心血管疾病 ( 例如，再狭窄及肥大 )。 此外，该化合物适用于保护增殖细胞 ( 例如， 毛发细胞、肠细胞、血细胞及祖细胞 ) 以免于因辐射、 UV 处理和 / 或抑制细胞处理所致 的 DNA 损伤 (Davis 等人，2001)。
例如，可使用本发明化合物治疗以下癌症 ( 但不限于此 ) ：
脑 瘤， 如 听 神 经 鞘 瘤、 星 形 细 胞 瘤 ( 如 纤 维 性、 原 浆 性、 饲 肥 星 型 细 胞 性 (gemistocytary)、间变性 (anaplastic)、毛细胞性星形细胞瘤、胶质母细胞瘤、胶质肉 瘤、多形性黄色星形细胞瘤、室管膜下大细胞巨细胞星形细胞瘤及婴幼儿促结缔组织 增生性星形细胞瘤 ) ；脑淋巴瘤 ；脑转移 ；垂体肿瘤，如泌乳素瘤、垂体偶发瘤、产 生 HGH( 人生长激素 ) 的腺瘤及促肾上腺皮质腺瘤、颅咽管瘤、成神经管细胞瘤、脑 膜瘤及少突神经胶质瘤 ；神经肿瘤，例如，如成神经细胞瘤、神经节细胞瘤、副神经节 瘤 ( 嗜铬细胞瘤 (pheochromocytoma， chromaffinoma)) 及颈动脉球瘤的植物性神经系统 肿瘤、如截肢性神经瘤、神经纤维瘤、神经细胞瘤 ( 神经鞘瘤 (neurilemmoma)，神经鞘 瘤 (Schwannoma)) 及恶性神经鞘瘤 (Schwannoma) 的周围神经统肿瘤，以及如脑瘤及骨 髓瘤的中枢神经系统肿瘤 ；肠癌，如直肠癌、结肠癌、肛门癌及十二指肠癌 ；眼睑肿瘤 ( 眼睑器官的基底细胞癌或腺癌 ) ；成视网膜细胞瘤 ；胰腺癌 ；膀胱癌 ；肺肿瘤 ( 支气管 癌、小细胞肺癌 (SCLC)、如梭形细胞板上皮癌、腺癌 ( 腺泡、乳头状、细支气管肺泡 ) 及大细胞支气管癌 ( 巨细胞癌、透明细胞癌 ) 的非小细胞肺癌 (NSCLC)) ；乳癌，如导 管、小叶、粘液或管状癌，Paget 氏癌 ；非霍奇金 (Hodgkin) 淋巴瘤 (B- 淋巴性或 T- 淋巴 性 NHL)，如毛细胞白血病、伯基特 (Burkitt) 淋巴瘤或蕈样真菌病 (mucosis fungoides) ； 霍奇金病 ；子宫癌 ( 子宫体癌或子宫内膜癌 ) ；CUP 综合征 ( 原发不明的癌症 ) ；卵巢 癌 ( 卵巢癌 - 粘液性或浆液性囊瘤、子宫内膜瘤 (endometriodal tumour)、透明细胞瘤、布伦纳氏 (Brenner) 瘤 ) ；胆囊癌 ；胆管癌，如 Klatskin 瘤 ；睾丸癌 ( 胚生殖细胞瘤或非 胚生殖细胞瘤 ) ；喉癌，如声带的声门上肿瘤、声门肿瘤及声门下肿瘤 ；骨癌，如骨软 骨瘤、软骨瘤、成软骨细胞瘤、软骨粘液样纤维瘤、软骨肉瘤、骨瘤、骨样骨瘤、成骨 细胞瘤、骨肉瘤、非骨化性骨纤维瘤、骨化纤维瘤、促结缔组织增生性骨纤维瘤、骨纤 维肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、破骨细胞瘤或巨细胞肿瘤、尤因 (Ewing) 肉瘤及浆细胞 瘤 ；头颈部肿瘤 (HNO 肿瘤 )，如唇及口腔肿瘤 ( 唇癌、舌癌、口腔癌 )、鼻咽癌 ( 鼻肿 瘤、淋巴上皮癌 )、咽癌、口咽癌、扁桃体癌 ( 扁桃体黑色素瘤 (malignoma)) 及舌 ( 根 ) 癌、下咽癌、喉癌 ( 喉头癌 )、鼻旁窦及鼻腔肿瘤、唾液腺及耳肿瘤 ；肝细胞癌 (liver cell carcinoma，hepatocellular carcinoma(HCC)) ；白血病，如急性白血病，如急性淋巴性 / 成 淋巴细胞性白血病 (ALL)、急性脊髓性白血病 (AML) ；慢性淋巴性白血病 (CLL)、慢性 脊髓性白血病 (CML) ；胃癌 ( 乳头状、管状或粘液腺癌、腺鳞状、鳞状或未分化癌 ) ； 恶性黑素瘤，如表浅散播型黑素瘤 (SSM)、结节型黑素瘤 (NMM)、恶性雀斑样黑素瘤 (LMM)、肢端雀斑样痣性黑素瘤 (ALM) 或无黑色素性黑素瘤 (AMM) ；肾癌，如肾细胞 癌 ( 肾上腺样瘤或 Grawitz 氏瘤 ) ；食管癌 ；阴茎癌 ；前列腺癌 ；阴道癌 (vaginal cancer 或 vaginal carcinoma) ；甲状腺癌，如乳头状、滤泡性、髓样或间变性甲状腺癌 ；胸腺癌 ( 胸腺瘤 ) ；尿道癌 ( 尿道癌、尿道上皮癌 ) 及外阴癌。
可使用新化合物来预防或者短期或长期治疗上述疾病，包括适宜时组合其他当 前技术 (state-of-the-art) 化合物，如其他抗肿瘤物质、细胞毒性物质、细胞增殖抑制剂、 抗血管新生物质、类固醇或抗体。
通式 (1) 化合物可单独使用或与本发明的其他活性化合物组合使用，以及适 宜时组合其他药理学活性化合物。 可与本发明的化合物组合给药的化学治疗剂包括 但不限于以下化合物 ：激素、激素类似物及抗激素 ( 例如，他莫昔芬 (tamoxifen)、 托 瑞 米 芬 (toremifene)、 雷 洛 昔 芬 (raloxifene)、 氟 维 斯 群 (fulvestrant)、 醋 酸 甲 地 孕 酮 (megestrol acetate)、 氟 他 胺 (flutamide)、 尼 鲁 米 特 (nilutamide)、 比 卡 鲁 胺 (bicalutamide)、胺鲁米特 (aminoglutethimide)、醋酸环丙孕酮 (cyproterone acetate)、非那 雄胺 (finasteride)、醋酸布舍瑞林 (buserelinacetate)、氟氢可的松 (fludrocortisone)、氟甲 睾酮 (fluoxymesterone)、甲羟孕酮 (medroxyprogesterone) 及奥曲肽 (octreotide)) ；芳香 酶抑制剂 ( 例如，阿那曲唑 (anastrozole)、来曲唑 (letrozole)、利阿唑 (liarozole)、伏氯 唑 (vorozole)、依西美坦 (exemestane) 及阿他美坦 (atamestane)) ；LHRH 激动剂及拮抗 剂 ( 例如，醋酸戈舍瑞林 (goserelin acetate) 及柳培林 (luprolide)) ；生长因子抑制剂 ( 如 血小板衍生的生长因子及肝细胞生长因子的生长因子，抑制剂的实例为生长因子抗体、 生长因子受体抗体及酪胺酸激酶抑制剂，如吉非替尼 (gefitinib)、伊玛替尼 (imatinib)、 拉帕 替 尼 (lapatinib)、 及曲妥 单抗 (trastuzumab)) ；抗代谢物 ( 例如， 如甲 氨蝶呤 (methotrexate) 及雷替曲塞 (raltitrexed) 的抗叶酸物、如 5- 氟尿嘧啶、卡培他滨 (capecitabine) 及吉西他滨 (gemcitabine) 的嘧啶类似物、如巯嘌呤 (mercaptopurine)、硫 鸟嘌呤 (thioguanine)、克拉屈滨 (cladribine) 及喷司他汀 (pentostatin) 的嘌呤及腺苷类似 物、阿糖胞苷 (cytarabine) 及氟达拉宾 (fludarabine)) ；抗肿瘤抗生素 ( 例如，如多柔比星 (doxorubicin)、道柔红菌素 (daunorubicin)、表柔比星 (epirubicin) 及伊达比星 (idarubicin) 的蒽环类抗生素 (anthracycline)、丝裂霉素 C(mitomycin C)、博莱霉素 (bleomycin)、放 线 菌 素 D(dactinomycin)、 普 卡 霉 素 (plicamycin) 及 链 佐 星 (streptozocin)) ；铂 衍 生 物 ( 例如，顺铂 (cisplatin)、奥沙利铂 (oxaliplatin) 及卡铂 (carboplatin)) ；烷化剂 ( 例 如，雌莫司汀 (estramustine)、美洛斯安 (meclorethamine)、美法仑 (melphalan)、苯丁 酸 氮 芥 (chlorambucil)、 白 消 安 (busulphan)、 达 卡 巴 嗪 (dacarbazine)、 环 磷 酰 胺、 异 环 磷 酰 胺 (ifosfamide) 及 替 莫 唑 胺 (temozolomide)、 如 卡 莫 司 汀 (carmustine) 及 洛 莫 司 汀 (lomustine) 的 亚 硝 基 脲 及 塞 替 派 (thiotepa)) ；抗 有 丝 分 裂 剂 ( 例 如， 如 长 春 碱 (vinblastine)、长春地辛 (vindesine)、长春瑞滨 (vinorelbine) 及长春新碱 (vincristine) 的 长春花生物碱 (vinca alkaloids) ；及如紫杉醇 (paclitaxel) 及多西紫杉醇 (docetaxel) 的紫杉 烷类 (taxanes) ；拓扑异构酶抑制剂 ( 例如，如依托泊苷 (etoposide) 及凡毕复 (etopophos) 的鬼臼乙叉甙 (epipodophyllotoxin)、替尼泊苷 (teniposide)、安吖啶 (amsacrine)、拓泊 替康 (topotecan)、伊立替康 (irinotecan) 及米托蒽醌 (mitoxantrone)) ；及各种化学治疗 剂，如氨磷汀 (amifostin)、阿那格雷 (anagrelide)、氯屈膦酸盐 (clodronate)、非尔司亭 (filgrastin)、干扰素 α、甲酰四氢叶酸 (leucovorin)、利妥昔单抗 (rituximab)、丙卡巴肼 (procarbazine)、左旋咪唑 (levamisole)、美司钠 (mesna)、米托坦 (mitotan)、帕米膦酸盐 (pamidronate) 及卟吩姆 (porfimer)。
适用的形式的实例为片剂、胶囊、栓剂、溶液，尤其用于注射的溶液 ( 皮下 (s.c.)，静脉内 (i.v.)，肌内 (i.m.)) 及输液剂、糖浆、乳液或可分散性粉末。 就此而 言，药物活性化合物的比例在各情况下应处于全部组合物 0.1-90 重量％的范围内，优选 0.5-50 重量％，其为足以达到以下规定的剂量范围的量。 必要时，一天可若干次给予所 提及的剂量。
例如，可通过混合活性化合物与已知助剂物质来获得适宜的片剂，该已知助剂 物质例如为 ：如碳酸钙、磷酸钙或乳糖的惰性稀释剂 ；如玉米淀粉或藻酸的崩解剂 ；如 淀粉或明胶的粘合剂 ；如硬脂酸镁或滑石的润滑剂 ；和 / 或用于达到积存效应的试剂， 如羧甲基纤维素、邻苯二甲酸醋酸纤维素或聚乙酸乙烯酯。 片剂也可包含若干层。
相应地，可通过以通常用于糖衣中的试剂 ( 例如，可力酮 (collidone) 或虫胶、 阿拉伯胶、滑石、二氧化钛或糖 ) 涂布已以类似于片剂的方式制得的核，而制得糖衣片 剂。 该核也可包含若干层以达到积存效应或避免不相容性。
同样地，糖衣也可包含若干层以达到积存效应，在片剂的情况下有可能使用以 上提及的助剂物质。
本发明的活性化合物或活性化合物组合的糖浆也可包含 ：甜味剂，如糖精、环 已烷氨基磺酸盐 (cyclamate)、甘油或糖 ；以及口味改良剂，例如，如香草醛 (vanillin) 或 橙提取物的调味剂。 其也可包含 ：助悬浮剂或增稠剂，如羧甲基纤维素钠 ；润湿剂，例 如脂肪醇与氧化乙烯的缩合产物 ；或保护剂，如对羟基苯甲酸酯。
以惯常的方式制得注射及输注溶液，例如在添加等渗剂、防腐剂 ( 如对羟基苯 甲酸酯 ) 或稳定剂 ( 如，乙二胺四乙酸的碱金属盐 ) 的同时，适宜时使用乳化剂和 / 或分 散剂，当使用水作为稀释剂时适宜时有可能使用有机溶剂作为增溶剂或助溶剂，且等分 试样至注射瓶或安瓿或输液瓶中。
例如，可通过混合活性化合物与如乳糖或山梨糖醇的惰性载体并将该混合物封 装入明胶胶囊中而制得包含一或多种活性化合物或活性化合物组合的胶囊。 例如，可通过与为此目的而设计的赋形剂 ( 如中性脂肪或聚乙二醇或其衍生物 ) 混合而制得适合的栓 剂。
举例而言，可提及的助剂物质为 ：水 ；药物可接受的有机溶剂，如石蜡 ( 例如 石油馏分 )、来源于植物的油 ( 例如，花生油或芝麻油 )、单官能或多官能醇 ( 例如， EtOH 或甘油 ) ；载体物质，如天然矿物粉 ( 例如，高岭土、粘土、滑石及白垩 )、合成 矿物粉 ( 例如，高度分散的硅酸及硅酸盐 )、糖 ( 例如，蔗糖、乳糖及葡萄糖 ) ；乳化剂 ( 例如，木质素、亚硫酸盐废液、甲基纤维素、淀粉及聚乙烯吡咯烷酮 ) ；及助流剂 ( 例 如，硬脂酸镁、滑石、硬脂酸及月桂基硫酸钠 )。
以惯常方式进行给药，优选口服或经皮，尤其且优选地口服。 在口服使用的情 况下，除上述载体物质之外，片剂自然也可包含如柠檬酸钠、碳酸钙及磷酸二钙的添加 剂以及各种其他物质，如淀粉 ( 优选马铃薯淀粉 )、明胶及类似物。 此外，也有可能使用 助流剂来压片，如硬脂酸镁、月桂基硫酸钠及滑石。 在水性悬浮液的情况下，除上述助 剂物质之外，也可添加各种口味改良剂或染料至活性化合物。
对于肠胃外给药，有可能采用活性化合物的溶液，同时使用适合的液体载体材 料。 用于静脉内给药的剂量为 1-1000 毫克 / 小时，优选在 5 毫克 / 小时与 500 毫克 / 小 时之间。
除此之外，视体重或给药途径的性质、个体对药物的反应、其制剂的性质及达 成给药的时间或间隔而定，在适宜时可能有必要偏离上述量。 因而，在某些情况下，小 于先前提及的最低量可能为足够的 ；而在其他情况下，不得不超过上述上限。 当给药相 对较大的量时，可合理地将这些药物分成根据日程而给予的若干单一剂量。
以下制剂实施例用于示例性说明本发明，对其范围并不构成限制。
药物制剂实施例
A) 片剂 每片
式 (I) 的活性化合物 100mg
乳糖 140mg
玉米淀粉 240mg
聚乙烯吡咯烷酮 15mg
硬脂酸镁 5mg
500mg
将精细粉碎的活性化合物、乳糖及一部分玉米淀粉彼此混合。 将混合物过筛， 其后以聚乙烯吡咯烷酮于水中的溶液湿润、捏合、湿式制粒，并干燥。 将粒状材料、其 余玉米淀粉及硬脂酸镁过筛并彼此混合。 将混合物压成适宜形状及大小的片剂。
B) 片剂 每片
式 (I) 的活性化合物 80mg
乳糖 55mg
玉米淀粉 190mg
微晶纤维素 35mg
聚乙烯吡咯烷酮 15mg
羧甲基淀粉钠 23mg2mg
400mg
将精细粉碎的活性化合物、一部分玉米淀粉、乳糖、微晶纤维素及聚乙烯吡咯 烷酮彼此混合，其后将混合物过筛，并连同其余玉米淀粉及水加工成粒状材料，将粒状 材料干燥，并过筛。 接着，添加羧甲基淀粉钠及硬脂酸镁至粒状材料并与其混合，将混 合物压成适宜大小的片剂。
C) 安瓿溶液
式 (I) 的活性化合物 50mg
氯化钠 50mg
注射用水 5ml
在其固有 pH 下或适宜时在 pH 5.5-6.5 下，将活性化合物溶解于水中，其后添加 氯化钠作为等渗剂。 通过过滤使所得溶液成为无热原的，并在无菌条件下将滤液等分于 安瓿中，接着将安瓿杀菌并熔融密封。 安瓿含有 5mg、25mg 及 50mg 的活性化合物。 硬脂酸镁118