工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺.pdf

本发明提供了一种工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，包括步骤：将经过洗涤、干燥的桔核进行榨油处理后，用醇类有机溶剂提取，再过滤分离得到滤液；对滤液进行减压浓缩将醇类有机溶剂回收，再经氯代烃萃取，浓缩至浸膏；选择醚类溶剂对浸膏回流提取进行脱脂，过滤得到滤渣并洗涤至滤渣无脂肪酸；在滤渣中加入醇类溶剂进行重结晶得到含有多种柠檬苦素类化合物的粗晶体，通过工业色谱柱进行层析后，结晶并干燥得到柠檬苦素化合物晶体，本发明充分利用废弃桔核采用工业层析法提取高纯度柠檬苦素，提高了综合利用率，成本低、易于操作和控制，溶剂反复利用，减少了污染，适合工业化大生产。

1.  一种工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，包括步骤：
a.将经过洗涤、干燥的桔核进行榨油处理后，用醇类有机溶剂于30-90℃的温度下提取10-20小时，再过滤分离得到滤液；
b.对所述滤液进行减压浓缩将所述醇类有机溶剂回收，再经氯代烃萃取多次，合并氯代烃层，浓缩至浸膏；
c.选择醚类溶剂于30-50℃温度下对所述浸膏回流提取进行脱脂，过滤得到滤渣并洗涤至所述滤渣无脂肪酸；
d.在所述滤渣中加入醇类溶剂进行重结晶得到含有多种柠檬苦素类化合物的粗晶体，通过工业色谱柱进行层析后，结晶并干燥得到柠檬苦素化合物晶体。

2.  根据权利要求1所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，在所述步骤a中，所述榨油处理为机械榨油处理。

3.  根据权利要求1所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，在所述步骤a中，所述醇类有机溶剂是乙醇。

4.  根据权利要求1所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，在所述步骤b中，所述氯代烃是氯仿。

5.  根据权利要求1所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，在所述步骤c中，所述醚类溶剂是石油醚。

6.  根据权利要求1所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，在所述步骤d中，所述醇类溶剂是甲醇。

7.  根据权利要求1所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，在所述步骤d中，所述层析所用的洗脱体系为氯仿∶丙酮体系。

8.  根据权利要求7所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，所述氯仿∶丙酮体系中所述氯仿与所述丙酮的比例为10～15∶1。

9.  根据权利要求1所述的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特征在于，在所述步骤d中，所述结晶和所述干燥是通过采用ZF干燥器来完成的。

工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺
技术领域
本发明涉及柠檬苦素制备技术领域，更具体地，涉及柠檬苦素单体制备技术领域，特别是指工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺。
背景技术
前期研究和文献表明，桔核中含有大量具有抗肿瘤活性的柠檬苦素类化合物，是一类抗癌变的天然活性物质。然而，至今尚未见从榨取果汁等生产后的废渣中的桔核为原料，利用工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺报道。国内外文献中，报道相关的研究都处于实验室阶段，采用了制备型高效液相色谱和闪蒸层析等复杂技术，成本高昂，不利于工业推广应用。中国专利CN1293055公开了一种“从柑桔类种子中提取药物活性物质的工艺”，其主要技术特征是采用提取、结晶等方式综合利用柑桔类种子，但存在问题是纯度较难符合国际标准。
发明内容
本发明的主要目的就是针对以上存在的问题与不足，提供一种工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，该工艺充分利用废弃桔核采用工业层析法提取高纯度柠檬苦素，提高了综合利用率，成本低、易于操作和控制，溶剂反复利用，减少了污染，适合工业化大生产。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺，其特点是，包括步骤：
a.将经过洗涤、干燥的桔核进行榨油处理后，用醇类有机溶剂于30-90℃的温度下提取10-20小时，再过滤分离得到滤液；
b.对所述滤液进行减压浓缩将所述醇类有机溶剂回收，再经氯代烃萃取多次，合并氯代烃层，浓缩至浸膏；
c.选择醚类溶剂于30-50℃温度下对所述浸膏回流提取进行脱脂，过滤得到滤渣并洗涤至所述滤渣无脂肪酸；
d.在所述滤渣中加入醇类溶剂进行重结晶得到含有多种柠檬苦素类化合物的粗晶体，通过工业色谱柱进行层析后，结晶并干燥得到柠檬苦素化合物晶体。
较佳地，在所述步骤a中，所述榨油处理为机械榨油处理。
较佳地，在所述步骤a中，所述醇类有机溶剂是乙醇。
较佳地，在所述步骤b中，所述氯代烃是氯仿。
较佳地，在所述步骤c中，所述醚类溶剂是石油醚。
较佳地，在所述步骤d中，所述醇类溶剂是甲醇。
较佳地，在所述步骤d中，所述层析所用的洗脱体系为氯仿∶丙酮体系。
更佳地，所述氯仿∶丙酮体系中所述氯仿与所述丙酮的比例为10～15∶1。
较佳地，在所述步骤d中，所述结晶和所述干燥是通过采用ZF干燥器来完成的。
在本发明中，首先通过榨油技术，除去桔核中的大部分脂肪酸类成分，接着使用醇类有机溶剂提取，滤液经过减压浓缩将醇类溶剂回收至无醇味后，得到含有脂肪酸和多种柠檬苦素类化合物的浓缩液；再通过氯代烃类溶剂萃取；通过醚类溶剂回流提取脱脂至无脂肪酸残留，得到含有多种柠檬苦素类化合物的提取物，再加入醇类溶剂进行结晶，得到含有主要为柠檬苦素的粗结晶体；粗晶通过工业层析柱，专利设备ZF干燥器(专利号：200620089220.7，专利名称：ZF型混合反应干燥机)可完成结晶、干燥、粉碎的过程，生产步骤简化，直接得到符合要求的高纯度柠檬苦素。
因此，本发明充分利用桔核中的各种有效成分，实现从榨取果汁等生产后的废渣中的桔核中大规模制备具有抗肿瘤活性的柠檬苦素高纯度单体的工艺，具有工艺规范，流程合理，步骤简单易于操作和控制，产品系列化的优势；通过工业层析柱技术，能够充分提取各种活性物质并且将其分离，可以得到柠檬苦素，其综合利用率高、产品纯度得到提高，产品的附加值高等特点；因为提高了综合利用率，相比其它工艺，综合成本下降，溶剂反复利用，减少了污染，适合工业化大生产。
附图说明
图1是本发明的一具体实施例的工艺流程图。
具体实施方式
为更好的理解本发明的内容，下面结合具体实施例作进一步说明。
实施例1
将经过洗涤、干燥的桔核通过冷榨技术，除去其中的脂肪酸类成分，置于多功能提取罐中并使用70％乙醇于60℃的温度下搅拌进行20小时提取操作，经过滤器分离得到滤液；上述滤液经过减压浓缩将乙醇回收至无醇味后，得到含有脂肪酸和多种柠檬苦素类化合物的浓缩液；再通过氯仿萃取提取浓缩液多次，合并氯仿层浓缩成浸膏。通过石油醚(生产厂家：四川鸿鹤精细化工有限责任公司，规格：60～90)，30℃回流提取3小时，脱脂至无脂肪酸残留，得到含有多种柠檬苦素类化合物的提取物；再加入甲醇加热溶解，静置1小时，过滤除去杂质后，得到含有主要为柠檬苦素的粗结晶体；粗晶通过工业层析柱(生产厂家：温州市金榜轻工机械有限公司，规格：φ300×1500mm、上下封头、耐20公斤压力)，以三氯甲烷∶丙酮＝10∶1为洗脱剂，分段收集洗脱液并分别减压浓缩后，成浸膏状，经ZF干燥器(生产厂家：上海鑫马生物科技有限公司，规格：20L)结晶、干燥、粉碎得到符合要求的高纯度柠檬苦素，其纯度为≥98％。
实施例2
将经过洗涤、干燥的桔核通过冷榨技术，除去其中的脂肪酸类成分，置于多功能提取罐中并使用90％乙醇于30℃的温度下搅拌进行15小时提取操作，经过滤器分离得到滤液；上述滤液经过减压浓缩将乙醇回收至无醇味后，得到含有脂肪酸和多种柠檬苦素类化合物的浓缩液；再通过氯仿萃取提取浓缩液多次，合并氯仿层浓缩成浸膏。通过石油醚(生产厂家：四川鸿鹤精细化工有限责任公司，规格：60～90)，40℃回流提取3小时，脱脂至无脂肪酸残留，得到含有多种柠檬苦素类化合物的提取物；再加入甲醇加热溶解，静置1小时，过滤除去杂质后，得到含有主要为柠檬苦素的粗结晶体；粗晶通过工业层析柱(生产厂家：温州市金榜轻工机械有限公司，规格：φ300×1500mm、上下封头、耐20公斤压力)，以三氯甲烷∶丙酮＝15∶1为洗脱剂，分段收集洗脱液并分别减压浓缩后，成浸膏状，经ZF干燥器(生产厂家：上海鑫马生物科技有限公司，规格：20L)结晶、干燥、粉碎得到符合要求的高纯度柠檬苦素，其纯度为≥98％。
实施例3
将经过洗涤、干燥的桔核通过机械榨油技术，除去其中的脂肪酸类成分，置于多功能提取罐中并使用80％乙醇于50℃的温度下搅拌进行10小时提取操作，经过滤器分离得到滤液；上述滤液经过减压浓缩将乙醇回收至无醇味后，得到含有脂肪酸和多种柠檬苦素类化合物的浓缩液；再通过氯仿萃取提取浓缩液多次，合并氯仿层浓缩成浸膏。通过石油醚(生产厂家：四川鸿鹤精细化工有限责任公司，规格：60～90)，35℃回流提取3小时，脱脂至无脂肪酸残留，得到含有多种柠檬苦素类化合物的提取物；再加入甲醇加热溶解，静置1小时，过滤除去杂质后，得到含有主要为柠檬苦素的粗结晶体；粗晶通过工业层析柱(生产厂家：温州市金榜轻工机械有限公司，规格：φ300×1500mm、上下封头、耐20公斤压力)，以三氯甲烷∶丙酮＝12∶1为洗脱剂，分段收集洗脱液并分别减压浓缩后，成浸膏状，经ZF干燥器(生产厂家：上海鑫马生物科技有限公司，规格：20L)结晶、干燥、粉碎得到符合要求的高纯度柠檬苦素，其纯度为≥98％。
实施例4
将经过洗涤、干燥的桔核通过热榨技术，除去其中的脂肪酸类成分，置于多功能提取罐中并使用80％甲醇90℃回流提取三次，第一次7倍量提取4小时，第二次6倍量提取3小时，第三次5倍量提取3小时，经过滤器分离得到滤液；上述滤液经过减压浓缩将甲醇回收至无醇味后，浸膏通过石油醚(生产厂家：四川鸿鹤精细化工有限责任公司，规格：60～90)，35℃回流提取3小时，脱脂至无脂肪酸残留，得到含有多种糖苷类和多种柠檬苦素类化合物的提取物；再加纯水通过二氯甲烷萃取多次，合并二氯甲烷层浓缩成浸膏；浸膏通过70℃无水甲醇至完全溶解，将甲醇溶液置于5℃的冰箱内至大量晶体析出，收集晶体，干燥得到90％左右的柠檬苦素粗晶；粗晶通过工业层析柱(生产厂家：温州市金榜轻工机械有限公司，规格：φ300×1500mm、上下封头、耐20公斤压力)，以三氯甲烷∶丙酮＝15∶1为洗脱剂，分段收集洗脱液并分别减压浓缩后，成浸膏状，经ZF干燥器(生产厂家：上海鑫马生物科技有限公司，规格：20L)结晶、干燥、粉碎得到符合要求的高纯度柠檬苦素，其纯度为≥99％。
实施例5
将经过洗涤、干燥的桔核通过热榨技术，除去其中的脂肪酸类成分，置于多功能提取罐中并使用80％甲醇50℃回流提取三次，第一次7倍量提取5小时，第二次6倍量提取4小时，第三次4倍量提取1小时，经过滤器分离得到滤液；上述滤液经过减压浓缩将乙醇回收至无醇味后，得到含有脂肪酸和多种柠檬苦素类化合物的浓缩液；再通过氯仿萃取提取浓缩液多次，合并氯仿层浓缩成浸膏；通过98％正己烷40℃回流提取3小时，脱脂至无脂肪酸残留，得到含有多种柠檬苦素类化合物的提取物；再加入甲醇加热溶解，静置1小时，过滤除去杂质后，得到含有主要为柠檬苦素的粗结晶体；粗晶通过工业层析柱(生产厂家：温州市金榜轻工机械有限公司，规格：φ300×1500mm、上下封头、耐20公斤压力)，以三氯甲烷∶丙酮＝15∶1为洗脱剂，分段收集洗脱液并分别减压浓缩后，成浸膏状，经ZF干燥器(生产厂家：上海鑫马生物科技有限公司，规格：20L)结晶、干燥、粉碎得到符合要求的高纯度柠檬苦素，其纯度为≥98％。
实施例6
将经过洗涤、干燥的桔核通过热榨技术，除去其中的脂肪酸类成分，置于多功能提取罐中并使用80％甲醇50℃下搅拌进行20小时提取，经过滤器分离得到滤液；上述滤液经过减压浓缩将乙醇回收至无醇味后，得到含有脂肪酸和多种柠檬苦素类化合物的浓缩液；再通过氯仿萃取提取浓缩液多次，合并氯仿层浓缩成浸膏；上述浸膏通过石油醚(生产厂家：四川鸿鹤精细化工有限责任公司，规格：60～90)，50℃回流提取3小时，脱脂至无脂肪酸残留，得到含有多种柠檬苦素类化合物的提取物；上述提取物通过70℃无水甲醇至完全溶解，将甲醇溶液置于5℃的冰箱内至大量晶体析出，收集晶体，干燥得到90％左右的柠檬苦素粗晶；粗晶通过工业层析柱(生产厂家：温州市金榜轻工机械有限公司，规格：φ300×1500mm、上下封头、耐20公斤压力)，以三氯甲烷∶丙酮＝10∶1为洗脱剂，分段收集洗脱液并分别减压浓缩后，成浸膏状，经ZF干燥器(生产厂家：上海鑫马生物科技有限公司，规格：20L)结晶、干燥、粉碎得到符合要求的高纯度柠檬苦素，其纯度为≥99％。
综上所述，本发明的工业层析法制备柠檬苦素单体的工艺充分利用废弃桔核采用工业层析法提取高纯度柠檬苦素，提高了综合利用率，成本低、易于操作和控制，溶剂反复利用，减少了污染，适合工业化大生产。
需要说明的是，在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，以上所述的是本发明的具体实施例及所运用的技术原理，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改而不背离本发明的精神与范围，这些等价形式同样落在本发明的范围内。