含有乳来源的磷脂的婴幼儿脑发育促进剂以及含有该促进剂的食品组合物 【技术领域】
本发明涉及以早产儿的脑的生长和发育、尤其是神经运动及学习功能的提高为目的的、含有特别是鞘磷脂丰富的乳来源的磷脂和二十二碳六烯酸(DHA)的婴幼儿脑发育促进剂。本发明还涉及含有该婴幼儿脑发育促进剂的食品组合物。
背景技术
ω-3系脂肪酸等必需脂肪酸对生物体的影响大，特别是对人来说，对其胎儿及新生儿的成长、发育具有很大贡献。已知通常在妊娠前期，母体几乎不向胎儿运送脂肪酸，在妊娠后期，通过胎盘向胎儿运送脂肪酸。人们认为在上述妊娠后期和产后早期，胎儿和新生儿的脑积极吸收脂肪酸，使认识力和视觉发育功能提高。但若是早产儿，由于上述来自母体的脂肪酸少，早产儿自身的脂肪酸合成能力又低，因此有可能出现特别是在脑和神经系统的发育中起重要作用的DHA的缺乏状态。
另外，还已知在妊娠后期，会发生胎儿的神经髓鞘形成(Myelination)。但若是早产儿，多数情况下髓鞘形成不充分，有时会与上述DHA的缺乏状态互起作用，在神经发育方面成为不利状况(非专利文献1)。
另一方面，目前已知磷脂对成熟中的婴幼儿的影响大。特别是乳来源的磷脂，据报道其具有提高体内DHA含量的作用(专利文献1)、通过使肠道神经丛发育来治疗肠道运动功能不全的疾病的效果(专利文献2)、促进消化道的成熟和发育的效果(专利文献3)等。另外，还已知有促进发育中的视神经的髓鞘形成的效果(非专利文献2)。
非专利文献1：田中恭子.乳幼児の精神心理行動発達と脂肪酸.医学のあゆみ，218：403-407，2006
非专利文献2：オシダ等，Effects of dietary sphingomyelin on controlnervous system myelination in developing rats.Pedatric Res，53：589-593，2003生
专利文献1：日本特开2001-128642号说明书
专利文献2：日本特开2003-252765号说明书
专利文献3：日本特开2000-250563号说明书
【发明内容】
磷脂中、特别是来自母乳和牛奶的磷脂(以下也称为乳磷脂)，具有不同于来自大豆和蛋黄的磷脂的特征。特别是具有如下不同点：含有大量称为鞘磷脂(以下有时简称为“SM”)的磷脂。该鞘磷脂存在于脑神经组织等的细胞膜中，特别是它是髓鞘的主要成分，认为其具有促进髓鞘形成的作用。
但是，对于上述早产儿、尤其是已知产后早期的营养对之后的发育具有重要影响的低出生体重儿，鞘磷脂的经口摄取对神经发育、特别是神经运动发育具有怎样的作用尚不清楚。
针对上述课题，本发明人进行了潜心研究，结果发现：对早产儿给予含有乳来源的磷脂和DHA的组合物后，与给予含有蛋黄卵磷脂和DHA的组合物相比，在Bayley婴幼儿发育检查(The Bayley Scales of InfantDevelopment)、Fagan试验(Fagan test of infant intelligence)、视觉诱发电位(VEP：visual evoked potential)检查中，可见发育指数提高，从而完成了本发明。在上述含有乳来源的磷脂和DHA的组合物中与含有蛋黄卵磷脂和DHA的组合物中，DHA量相同。
因此，本发明的目的可以通过含有特别是大量含有鞘磷脂的乳来源的磷脂的婴幼儿脑发育促进剂来达成。
本发明的一个方面涉及含有有效量的乳来源的磷脂的婴幼儿脑发育促进剂。本发明地婴幼儿脑发育促进剂还可以含有有效量的二十二碳六烯酸。
上述婴幼儿脑发育促进剂可以制成以原有状态摄取的直接摄取用制剂的形状，也可以制成在摄取时用水、热水、奶(牛奶、人母乳等)等适当调制后摄取的制剂(浓缩物、干燥物等)。为直接摄取用制剂时，优选含有至少0.027重量％的乳来源的磷脂，在配合DHA的情况下，优选含有至少0.008重量％的上述二十二碳六烯酸。另外，还优选含有至少0.005重量％的上述鞘磷脂，在配合DHA的情况下，优选含有至少0.008重量％的上述二十二碳六烯酸。
另外，若是摄取时用水、热水、奶(牛奶、人母乳等)等适当调制后摄取的制剂(浓缩物、干燥物等)，则优选乳来源的磷脂的有效量至少为0.15重量％，在配合DHA的情况下，二十二碳六烯酸的有效量优选至少为0.05重量％。另外，作为鞘磷脂的含量，优选至少为0.03重量％，在配合DHA的情况下，优选含有至少0.05重量％的上述二十二碳六烯酸。其中，本发明中只要没有特殊说明，“重量％”是指“w/w％”。
关于本发明的婴幼儿，优选为早产儿、低出生体重儿、极低出生体重儿、以及超低出生体重儿中的任一者。
本发明的另一方面提供含有上述婴幼儿脑发育促进剂的用于提高婴幼儿神经运动和/或学习功能的食品组合物。此时，食品组合物优选为配方奶粉、饮料调制用浓缩物、以及饮料调制用干燥物中的任一种。
本发明具体地提供以下技术方案：
(1)一种婴幼儿脑发育促进剂，其在摄取时含有至少0.005重量％的鞘磷脂，并且是通过配合磷脂而制造的。
(2)上述(1)中所述的婴幼儿脑发育促进剂，其中，上述磷脂为乳来源的。
(3)如上述(1)或(2)中所述的婴幼儿脑发育促进剂，其中，上述鞘磷脂为乳来源的。
(4)如上述(1)至(3)中任一项所述的婴幼儿脑发育促进剂，其中，乳来源的磷脂在摄取时至少为0.027重量％。
(5)如上述(1)至(4)中任一项所述的婴幼儿发育促进剂，其中，产品中的鞘磷脂量至少为0.03重量％，并调制成摄取时鞘磷脂量为至少0.005重量％。
(6)上述(1)至(4)中任一项所述的婴幼儿发育促进剂，其中，产品中的乳来源的磷脂量至少为0.15重量％，并调制成摄取时乳来源的磷脂量为至少0.027重量％。
(7)如上述(1)至(6)中任一项所述的婴幼儿发育促进剂，其中，在摄取时含有至少0.008重量％的二十二碳六烯酸。
(8)如上述(5)至(7)中任一项所述的婴幼儿发育促进剂，其中，在产品中含有至少0.05重量％的二十二碳六烯酸。
(9)如上述(1)至(8)中任一项所述的婴幼儿脑发育促进剂，其特征在于，婴幼儿为早产儿、低出生体重儿、极低出生体重儿、以及超低出生体重儿中的任一者。
(10)一种用于提高婴幼儿神经运动和/或学习功能的食品组合物，其特征在于，含有权利要求(1)至(9)中任一项所述的婴幼儿脑发育促进剂。
(11)如上述(9)中所述的用于提高婴幼儿神经运动和/或学习功能的食品组合物，其特征在于，食品组合物为配方奶粉、饮料调制用浓缩物、以及饮料调制用干燥物中的任一种。
(12)一种含有鞘磷脂的婴幼儿脑发育促进剂，其用于添加到食品中、并调制成摄取时食品中的鞘磷脂为至少0.005重量％。
(13)如上述(11)中所述的婴幼儿脑发育促进剂，其特征在于，进一步含有二十二碳六烯酸，其添加到食品中，并调制成摄取时食品中的二十二碳六烯酸为至少0.008重量％。
(14)一种婴幼儿的脑发育促进方法，其特征在于，给予鞘磷脂或含有鞘磷脂的乳来源的磷脂。
(15)一种使婴幼儿的神经运动和/或学习功能提高的方法，其特征在于，给予鞘磷脂或含有鞘磷脂的乳来源的磷脂。
(16)如上述(14)或(15)中所述的方法，其中，婴幼儿是早产儿、低出生体重儿、极低出生体重儿、以及超低出生体重儿中的任一者。
(17)一种鞘磷脂或含有鞘磷脂的乳来源的磷脂在制造婴幼儿脑发育促进剂中的用途。
(18)一种鞘磷脂或含有鞘磷脂的乳来源的磷脂在制造用于提高婴幼儿神经运动和/或学习功能的食品组合物中的用途。
(19)如上述(17)或(18)中所述的用途，其中，婴幼儿是早产儿、低出生体重儿、极低出生体重儿、以及超低出生体重儿中的任一者。
利用上述本发明的构成的婴幼儿脑发育促进剂以及用于提高婴幼儿神经运动和/或学习功能的食品组合物，能够达到以前未知的效果即提高早产儿、特别是低出生体重儿的脑的发育和学习功能。通过摄取上述药剂或食品组合物这样的简便的方法，即可达到目的，并且其效果是预想不到的。
另外，作为原料的乳来源的磷脂、DHA比较容易获得，因此能够简便且廉价地制造具有上述特性的本发明的药剂或食品组合物等。
【附图说明】
图1是在VEP检查中测定16Hz的图形刺激(图表左端)～阴性波的峰为止的时间(潜伏期)得到的视觉诱发电位图。横轴表示时间。
图2是红细胞膜脂肪酸的组成分析结果，是表示花生四烯酸的含量的图。表示刚出生后(试验前)、出生后4周(4周)、出生后8周(8周)的值。
图3是红细胞膜脂肪酸的组成分析结果，是表示DHA的含量的图。表示刚出生后(试验前)、出生后4周(4周)、出生后8周(8周)的值。
图4是血浆磷脂的组成分析结果，是表示血浆鞘磷脂浓度的图。表示刚出生后(试验前)、出生后2周(2周)、出生后4周(4周)、出生后6周(6周)、出生后8周(8周)的值。
图5是表示矫正月龄6个月的Bayley婴幼儿发育检查的MDI、PDI以及BRS指数得分的图。
图6是表示Fagan试验的矫正月龄3个月和6个月的Fagan得分的图。
图7是表示矫正月龄3个月和6个月的VEP检查的潜伏期(msec)的图。
【具体实施方式】
以下详细地说明本发明，但本发明不限于以下所述的各方式。
本发明中的“磷脂”，可以是单独的磷脂成分，也可以是由多种磷脂成分形成的混合物。作为本发明中的“磷脂”，优选的例子为含有鞘磷脂的磷脂，更优选为“乳来源的磷脂”。本发明中所谓的“乳来源的磷脂”是指，由动物奶调制的磷脂混合物。通常，乳来源的磷脂除了含有磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)外，特别是它与大豆或蛋黄来源的磷脂不同，具有含有大量鞘磷脂这一特征(松本義信、武政睦子、守田哲朗、川崎医療福祉学会誌Vol.15 Nol 2005209-216)。该鞘磷脂存在于脑神经组织等的细胞膜中，特别是它是髓鞘的主要成分，被认为其具有促进髓鞘形成的作用。
关于本发明中使用的乳来源的磷脂，作为原料奶，除了可以使用牛、山羊、羊、马、水牛等各种家畜的奶以外，还可以使用母乳。
本发明中使用的乳来源的磷脂可以从原料奶(例如牛奶)中提取来制造。特别是牛奶，可以制造磷脂组成与人母乳(以下有时简称为“母乳”)近似的磷脂。
另外，作为乳来源的磷脂，还可以使用市售品。作为市售品，可以使用新西兰Dairy Ingredients公司产品(例如磷脂含量为40.6％或85.3％的牛奶复合脂质产品等)、或新西兰Bay Milk Products公司产品(商品名ALPHALIPID，鞘磷脂含量为20重量％)等。
此外，在本发明中，作为乳来源的磷脂，可以以含有它的组合物的形式使用。作为该组合物，可以列举从乳成分中提取、但未精制到上述产品等的程度的磷脂组分。具体而言，可以例举从牛奶或酪乳、奶油乳清中分离制得的复合脂质组分、或其浓缩物等。
本发明中使用的二十二碳六烯酸(DHA)是碳原子数为22、具有6个碳-碳不饱和键的n-3系多不饱和脂肪酸，也表述为“22：6，n＝3”。也称为顺式-4，7，10，13，16，19-二十二碳六烯酸。分子量为328，Cas.No.为6217-54-5，已知其具有抗血栓作用、降血脂作用等。在体内，多分布于脑皮质突触膜、眼的光感受器，在中枢神经、髓鞘的发育阶段，其含量增加(大木道則ら編集、化学大事典、東京化学同人発行、pp.95(1994))。已知DHA在鱼油中大量含有，近年来，海洋微生物Labyrinthuleas类(Labyrinthuliidae科、破囊壶菌科(Thraustochtriidae))、单细胞等微生物也作为DHA的供给源而为人所知。在本发明中，DHA可以直接采用含有在微生物等中的状态的DHA，或者也可以采用精制DHA。另外，还可以采用通过化学合成、微生物合成得到的DHA，但不限于这些例子。
本发明的婴幼儿脑发育促进剂中的乳来源的磷脂含量适当即可，通常的情况下，在直接摄取用的产品中，对于摄取时的乳来源的磷脂，可以含有0.027重量％以上，优选含有0.027～0.95重量％；对于SM，可以含有0.005重量％以上，优选含有0.006～0.95重量％。另外，在配合DHA的情况下，关于DHA含量，使其在产品中为0.008重量％以上，优选为0.009重量％以上。
另外，本发明的婴幼儿脑发育促进剂还可以制成在摄取时用水、热水、奶(牛奶、人母乳等)等适当调制后摄取的产品(浓缩物、干燥物等)的形态。此时，产品中的鞘磷脂量至少为0.03重量％，可以调制成摄取时鞘磷脂量至少为0.005重量％。另外，产品中的乳来源的磷脂量至少为0.15重量％，可以调制成摄取时乳来源的磷脂量至少为0.027重量％。另外，在配合DHA的情况下，关于DHA含量，优选在产品中为0.05重量％以上。
另外，在含有本发明的婴幼儿脑发育促进剂的婴幼儿用的配方奶粉等用于提高婴幼儿神经运动和/或学习功能的食品组合物中，产品中，对于乳来源的磷脂，可以含有0.150重量％以上，优选含有0.170～0.95重量％；另外，对于SM，可以含有0.030重量％以上，优选含有0.035～0.95重量％。另外，在配合DHA的情况下，关于DHA含量，优选在产品中为0.055重量％以上，更优选为0.060重量％以上。
在含有本发明的婴幼儿脑发育促进剂的幼儿～学龄儿童用的配方奶粉、饮料调制用浓缩物、饮料调制用干燥物等用于提高婴幼儿神经运动和/或学习功能的食品组合物中，产品中，对于乳来源的磷脂，可以含有0.300重量％以上，优选含有0.320～0.95重量％；另外，对于SM，可以含有0.060重量％以上，优选含有0.065～0.95重量％。另外，在配合DHA的情况下，关于DHA含量，优选在产品中为0.050重量％以上，更优选为0.060重量％以上。
作为本发明的婴幼儿脑发育促进剂的优选的具体例子，可以列举强化了鞘磷脂的婴幼儿用配方奶粉。婴幼儿用的普通配方奶粉以牛奶为主要原料，但为了使成分组成与人母乳接近，努力按照使蛋白质组成与作为原料的牛奶不同的方式来制造。例如酪蛋白与乳清蛋白的比，牛奶中为约6∶4，而配方奶粉中为约2∶8。另外，对乳清蛋白的组成也进行了改变，使其与牛奶不同。牛奶中含有的β-乳球蛋白易成为过敏原。因此，市售的配方奶粉有使α-乳白蛋白量增加而β-乳球蛋白的比率相对下降的配方奶粉、将乳清蛋白整体的一部分或全部水解得到的配方奶粉、配合了特定的精制蛋白质的配方奶粉、或者仅选择性地将β-乳球蛋白分解而得到的配方奶粉等。
在制造这种配方奶粉的过程中，多数情况下牛奶本身含有的鞘磷脂会损失。因此，为了期待作为本发明的婴幼儿脑发育促进剂的效果，需要在普通的配方奶粉中强化鞘磷脂。
本发明的婴幼儿脑发育促进剂的每日摄取量根据摄取者的月龄、症状、发育程度、体重等的不同而不同，因此没有特别限定，可以摄取0.1～10000mg/kg体重，优选摄取0.1～1000mg/kg体重，更优选摄取1～300mg/kg体重。特别是当摄取者为婴幼儿时，优选摄取35mg/kg体重以上的乳来源的磷脂、或者7mg/kg体重以上的SM。作为DHA，优选摄取10mg/kg体重以上。当摄取者为儿童～小学生时，对于乳来源的磷脂，优选每人摄取70mg以上；对于SM，优选每人摄取14mg以上。另外，对于DHA，优选每人摄取10mg以上。
本发明的婴幼儿脑发育促进剂可以用于婴幼儿、儿童、小学生等，实现神经运动和学习功能提高。其中，优选用于婴幼儿，更优选用于婴幼儿中的早产儿以及低出生体重儿、极低出生体重儿、超低出生体重儿。本发明所谓的早产儿是指因胎龄不足而导致出生体重低的新生儿，低出生体重儿是指出生体重不足2500g的新生儿。低出生体重儿中，特别地极低出生体重儿指出生体重不足1500g的新生儿，超低出生体重儿是指出生体重不足1000g的新生儿。另外，孕产妇和高龄者也可以作为摄取对象。
另外，本发明中，作为婴幼儿脑发育促进剂的另一形态，提供“用于添加到食品中、并调制成摄取时食品中的鞘磷脂为至少0.005重量％的、含有鞘磷脂的婴幼儿脑发育促进剂”(以下称为“本发明的含鞘磷脂婴幼儿脑发育促进剂”)。本发明的含鞘磷脂婴幼儿脑发育促进剂是用于添加到婴幼儿的普通饮食品中以强化鞘磷脂的组合物。例如，通过在普通的配方奶粉中添加本发明的含鞘磷脂婴幼儿脑发育促进剂，可以在摄取时强化普通配方奶粉的鞘磷脂量。另外，还可以含有二十二碳六烯酸，添加到食品中，并调制成摄取时食品中的二十二碳六烯酸为至少0.008重量％。
将本发明的婴幼儿脑发育促进剂作为药品、或将本发明的食品组合物作为婴儿～小学生用营养增补剂或糖片(tablet confectionary)使用时，可以以各种形态来给予。作为其形态，例如可以列举片剂、包衣片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、溶液、糖浆剂、乳液等经口给予。上述各种制剂，可以采用常用方法，在作为主药的本发明的构成成分中使用赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、着色剂、矫味矫臭剂、助溶剂、悬浮剂、包衣剂等医药制剂技术领域中通常使用的已知辅助剂来制成制剂。另外，根据期望，还可以添加后述的附加成分(维生素、矿物质、有机酸、糖类、氨基酸、肽类等)。另外，作为其摄取方法，可以是经口摄取、经管摄取、静脉给予、经肠营养法、中心静脉营养法等任一方法。
本发明的食品组合物是含有本发明的婴幼儿脑发育促进剂的食品或饮料类组合物。本发明的食品组合物可以适当按照常用方法来制造并使用。作为其形态，可以是固态(粉末、颗粒状等)、糊状、液态或悬浮液状中的任一种，若使用甜味料、酸味料、维生素剂、营养成分等各种成分来制成奶粉或乳制品，则适合于婴幼儿、特别是早产儿、低出生体重儿、极低出生体重(VLBW)儿、超低出生体重(ELBW)儿等特别需要促进脑功能发育的对象。另外，也可以作为儿童～小学生用的配方奶粉、饮料调制浓缩物、饮料调制用干燥物来使用。另外，还可以制成用于添加到普通奶粉、乳制品、饮料、食品、流体食物等中来强化乳来源的磷脂或鞘磷脂以及DHA的添加剂或浓缩液。或者，还可以制成含有乳来源的磷脂或鞘磷脂以及DHA的营养增补剂、糖片、糖稀、糖浆、饮料、浓缩液、饮品、流体食物等来直接摄取。另外，作为其摄取方法，可以是经口摄取、经管摄取等任一方法。
在含有本发明的婴幼儿脑发育促进剂的食品组合物中，可以含有在普通的食品组合物中使用的一般成分。例如，虽然不限于这些，但本发明可以将水、蛋白质、糖类、维生素类、矿物质类、有机酸、有机碱、果汁、香料类等作为其他成分来使用。作为蛋白质，例如可以列举全脂奶粉、脱脂奶粉、部分脱脂奶粉、酪蛋白、乳清粉、乳清蛋白、乳清蛋白浓缩物、乳清蛋白分离物、α-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白、β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、乳铁蛋白、大豆蛋白、鸡蛋蛋白、肉蛋白等动植物性蛋白质、它们的水解产物；黄油、乳清矿物质、奶油、乳清、非蛋白态氮、唾液酸、乳糖等各种乳来源的成分等。作为糖，可以列举糖类、加工淀粉(除环糊精以外，还有可溶性淀粉、British starch、氧化淀粉、淀粉酯、淀粉醚等)、食物纤维等。作为其他的脂类，例如可以列举猪油、鱼油等、它们的分馏油、氢化油、酯交换油等动物性油脂；棕榈油、红花油、玉米油、菜籽油、椰子油、它们的分馏油、氢化油、酯交换油等植物性油脂等。作为维生素类，例如可以列举维生素A、胡萝卜素类、维生素B族、维生素C、维生素D族、维生素E、维生素K族、维生素P、维生素Q、烟碱酸、烟酸、泛酸、维生素H、肌醇、胆碱、叶酸等，作为矿物质类，例如可以列举钙、钾、镁、钠、铜、铁、锰、锌、硒等。作为有机酸，例如可以列举苹果酸、柠檬酸、乳酸、酒石酸等。这些成分可以组合2种以上使用，也可以使用合成品和/或大量含有这些成分的食品。
通过后述实施例中的极低出生体重儿对象的Bayley婴幼儿发育检查、Fagan试验、视觉诱发电位检查，显示本发明的婴幼儿脑发育促进剂具有全面改善神经、运动、智力等各种发育指数以及神经的髓鞘形成的效果。由此可以说本发明的婴幼儿脑发育促进剂对婴幼儿的神经运动和学习功能提高有用。
需要说明的是，本说明书中引用的所有现有文献均作为参考引入到本说明书中。
实施例
以下，基于实施例来具体地说明本发明，但本发明不限于这些具体例。
<试验安排>
将18例极低出生体重儿(平均胎龄为30.3周、平均出生体重为1107g)分成9例试验组(鞘磷脂强化奶哺乳组)和9例对照组(对照奶哺乳组)，让各组摄取含有表1所示成分的试验用奶(对照奶、鞘磷脂(SM)强化奶)。
表1
每100g 对照组 (对照奶哺乳组) 试验组 (SM强化奶哺乳组)蛋白质(g)脂质(g)能量(kcal) 13.4 17.3 467 13.4 17.3 467总磷脂(mg)强化用磷脂胆固醇(mg)β-胡萝卜素(μg)DHA(mg)EPA(mg)花生四烯酸(mg) 200 蛋黄卵磷脂 80 70 100 30 50 200 乳磷脂 80 70 100 30 50核苷酸(mg)硒(μg) 14 7 14 7
表1中，总磷脂表示各试验用奶整体中含有的磷脂的含量。总磷脂中约65％来自乳清等原料。另外，总磷脂中约35％来自表1所示的强化用磷脂(蛋黄卵磷脂或乳磷脂)。
试验组的试验用奶的强化磷脂源是含有大量SM的乳磷脂，对照组的试验用奶的强化磷脂源采用几乎不含SM的蛋黄卵磷脂。表2所示为各试验用奶中含有的总磷脂的组成。表1、表2表明：本发明的SM强化奶(婴幼儿脑发育促进剂)的特点在于磷脂中的SM的比例高。
表2
试验用奶中含有的总磷脂 中的各成分浓度 单位 对照组 (对照奶哺乳组) 试验组 (SM强化奶哺乳组) PE(磷脂酰乙醇胺) w/w％ 20 18 PC(磷脂酰胆碱) w/w％ 29 22 SM(鞘磷脂) w/w％ 13 20 PS(磷脂酰丝氨酸) w/w％ 20 16 PI(磷脂酰肌醇) w/w％ 11 12 Others(其他) w/w％ 7 12
哺乳时，表1的组成的SM强化奶和对照奶采用添加水调制成奶浓度为15w/v％的奶。哺乳优先母乳，不足的部分则随机用SM强化奶(总磷脂中SM为20w/w％)或对照奶(总磷脂中SM为13w/w％)补充。具体而言，从产后24小时以内开始哺乳，通过经鼻胃管注入0.5～1.0ml/次，1日8次，只要胃残留量不高于注入量，则按4～8ml/日依次进行增量。在刚出生后、出生后2、4、6、8周进行采血，分析血浆磷脂(鞘磷脂)和红细胞膜脂肪酸(花生四烯酸、DHA)的组成。在矫正月龄3个月以及6个月实施Fagan试验和VEP检查，然后在矫正月龄6个月进行Bayley婴幼儿发育检查(矫正月龄是指受孕后的月龄，即表示受孕月龄)。另外，在试验期间，观察有无并发症、体重增加率、母乳哺乳率。这里，“母乳哺乳率”是指，整个试验期间VLBW儿摄取的总奶量(母乳或对照奶或SM强化奶)中母乳所占的比例。
<评价方法>
(1)Bayley婴幼儿发育检查(The Bayley Scales ofInfant Development)
该检查是以0岁到3岁左右为对象的综合发育诊断法，由智力发育指数(MDI)、心理运动发育指数(PDI)、行为评定量表(BRS)这3个领域构成。MDI有178项课题，PDI有111项课题，对儿童实际地实施这些课题，并给出得分。另外，BRS是根据检查中的儿童的行动表现来评价集中力和协调性等30个项目。
MDI中，对婴幼儿的感性-知性的敏锐性和辨别性、反应性的程度、对象的恒久性的获得、记忆学习以及问题解决能力的情况、语言和交流的情况、综合和分类的能力、抽象思维进行评定。心理尺度以智力发育指数(MDI)的方式表示。
PDI中，对身体控制、肌肉运动调节、手指的微细操作、运动能力进行评定。采用该尺度，可知道与中枢神经的发育相应的身体移动以及身体控制的基本发育。
MDI和PDI是以100为平均值、以15为标准偏差的标准得分。BRS的最高得分为100，26-100为正常区，11-25为边界区，10以下判定为不佳(参照小林登 監修.乳幼児発育評価マニユアル，文光堂，121-135，2000)。
在婴幼儿行为记录中，检查时把握孩子特有的行为特征来进行评定。对人际关系、情绪方面、动机、特有的感觉、关心等所有行为进行评定。
发明人根据Bayley等的方法(Bayley N.Manual for the Bayley Scales ofInfant Development.The Psychological Corporation，New York，1969)，进行上述检查。实际中，采用从The Psychological Corporation Harcourt Brace andCompany(UK)购入的Bayley Scale for Infant Development Second edition，使对象儿坐在母亲的膝上并且与检查实施者面对面，用约30～40分钟进行检查。在规定的记录用纸中记录结果，根据手册(上文提到的マニユアル)中记载的换算表，算出指数得分(MDI，PDI，BRS)(O’Connor，et al.Growthand development in preterm infants fed long-chain polyunsaturated fatty acids：a prospective，randomized controlled trial.Pediatrics，108：359-371，2001)。
(2)Fagan试验(Fagan test of infant intelligence)
该检查是通过使儿童注视颜面照片一定时间来引起习惯化现象(familiarization phenomenon)，然后，将不同的颜面照片同时地成对出示，测定儿童会注视哪张照片(新奇偏好率(ratio of preference forunprecedentedness))。习惯化现象是指将看到新事物向脑中编码，从而认识并记忆的过程。新奇偏好是指将更新奇的事物编码的过程。已证明由习惯化现象的速度和新奇偏好率能预见其智力发育(田中恭子.乳幼児の精神心理行動発達と脂肪酸.医学のあゆみ，218：403-407，2006)。
发明人根据Fagan等的方法(Fagan JF et al.The Fagan Test of InfantIntelligence.Infant Test Corporation，Cleveland，1986)，施行该检查。实际中，采用从Infantest公司(USA)购入的Fagan Test Kit，使对象儿坐在母亲的膝上并且与检查者面对面，用约20分钟进行检查。检查由10个课题构成，其中一个课题由习惯化试验和新奇试验构成。出示的刺激全部为颜面照片(婴儿、成年女性、成年男性)，检查者从出示照片的载物台的针孔进行观察，将儿童的视线的移动记录到电脑中。结果采用对新奇刺激的注视时间的比例即新奇偏好率(％looking time to novel target)(O’Connor，et al.Growth and development in preterm infants fed long-chainpolyunsaturated fatty acids：a prospective，randomized controlled trial.Pediatrics，108：359-371，2001)。
(3)VEP(视觉诱发电位图：Visual evoked potentials)检查
该检查是一种神经生理学检查，测定通过视神经的神经传递速度。测定16Hz的图形刺激所致的潜伏期(msec)，评价髓鞘形成的程度(田中恭子.乳幼児の精神心理行動発達と脂肪酸.医学のあゆみ，218：403-407，2006)。
实际中，使对象坐在母亲的膝上并注视1m前方的监视器，根据安于头部的3根电极来记录电位变化。监视器显示棋盘形图案的动画，在从后头部结节的上方3cm向左右3cm侧方安装导出电极，在距离鼻根部6cm上方安装基准电极，进行记录。如图1所示，测定16Hz的图形刺激(图左端)～阴性波的峰为止的时间(潜伏期)，进行比较研究(Kos-Pietro S，et al.Maturation of human visual evoked potential：27weeks conceptional age to 2years.Neuropediatrics：318-323，1997)
<结果>
在两组间未见在并发症有无、体重增加率、母乳哺乳率方面存在有显著性差异(表3)。
[表3]
对照组 (9例) 试验组(SM强化奶哺乳组) (9例) 出生后4周的母乳哺乳率 出生后8周的母乳哺乳率 出生后8周的体重增加率 慢性肺病 动脉导管未闭 早产儿视网膜病变 颅内出血 坏死性肠炎 72.4％ 57.9％ 222.5％ 3 4 1 0 0 78.8％ 62.4％ 184.3％ 0 2 2 0 0
另外，在以花生四烯酸(AA)、二十二碳六烯酸(DHA)为代表的脂肪酸组成分析的结果等中，也未见显著性差异(图2和图3)。另一方面，在血浆磷脂的组成分析中，在SM强化奶组中，出生后4周和6周的血浆SM浓度与对照组相比，显示出有显著意义的(p＜0.01：un-paired Student’stest)高值(4周27.6％vs16.3％、6周23.1％vs16.0％)(图4)。另外，在矫正月龄6个月时的Bayley检查的BRS得分以及Fagan试验中，SM强化奶组与对照组相比显示出有显著意义的(p＜0.05：un-paired Student’s test)高值(Bayley85.1vs55.1、Fagan53.4vs48.2)(图5和图6)。此外，在VEP检查中，仅在SM强化奶组中，矫正月龄6个月与3个月相比，潜伏期有显著意义地(p＜0.05：paired Student’s test)缩短(3个月：110.5msec、6个月：104.2msec)(图7)。
从这些结果可知，通过给予本发明的婴幼儿脑发育促进剂，尽管体内的DHA浓度相等，但因为磷脂的不同，从而在神经、运动、智力等各种发育指数以及神经的髓鞘形成上可观察到差异。即，在乳来源的磷脂和DHA组合中首次发现了高的协同效果。
本发明的婴幼儿脑发育促进剂以及用于提高婴幼儿神经运动和/或学习功能的食品组合物，能达到以前未知的效果，即能够提高早产儿、特别是低出生体重儿的脑的发育和学习功能。通过摄取本发明的药剂或组合物这样的非常简便的方法即可达到目的，并且其效果是预想不到的。此外，作为原料的乳来源的磷脂、DHA比较容易获得，因此能够简便且廉价地制造具有上述特性的药剂或食品组合物等。