一种治心脑血管神经系统病及肿瘤的 全蝎制剂及其制备方法
本发明涉及一种作用于心脑血管、神经系统病及肿瘤的全蝎制剂及其制备方法，具体地说，是全蝎的口服固体制剂及其制方法。
全蝎为传统中药，具有息风镇痉、攻毒散结、通络止痛的功能《中华人民共和国药典(一部)118页1990年版》。对中风口、半身不遂、高血压、眩晕、头痛、小儿惊风抽搐痉挛、癫痫、风湿骨痛等有肯定的疗效。在临床应用中常配伍于复方中使用。中风是中医的病名，相当于现代医学的急性脑血管病，包括脑血拴、栓塞、脑溢血等。目前市场上用于治疗这类病的中成药如华陀再造丸、大活络丸、补阳还五口服液、脉络宁注射液等，均为复方制剂，其中华陀再造丸最为畅销。全蝎用于治疗肿瘤可见于民间方剂中配伍使用，迄今未见单味全蝎的抗癌制剂及其系统的药理研究。
本发明的目的在于提供一种携带、服用方便、疗效显著的治心脑血管、神经系统病及肿瘤的全蝎口服固体制剂。
本发明的目的尚在于提供一种原料单一、工艺简单的制备全蝎口服固体制剂的方法，且产品质量控制检测方法比复方制剂简单。
本发明的目的可以通过以下措施来达到：一种治心脑血管、神经系统病及肿瘤地全蝎制剂，其特征在于：基本上由单味全蝎作为活性成分，可以添加适量药学上可接受的辅料，制成口服固体制剂。
全蝎口服固体制剂可以是胶囊。
全蝎口服固体制剂可以是片剂。
全蝎口服固体制剂可以是冲剂。
全蝎口服固体制剂可以是丸剂。
全蝎口服固体制剂的制备方法，其特征在于主要由下述步骤组成：(1)制备全蝎的粉末或颗粒，A法，将新鲜活蝎于-25～-30℃冷冻后进行粉碎，然后于60℃真空干燥成蝎粉；或者将冷冻成块的全蝎打碎，于80～95℃用水提取，水提取液真空浓缩后，加适量辅料或前述蝎粉制颗粒，干燥得到的颗粒；B法，用中药饮片全蝎作原料，粉碎成蝎粉；或者采用常规水煎法制成浸膏，然后加适量辅料或蝎粉制粒，干燥得到的颗粒。(2)按常规制剂方法将粉末、浸膏或颗粒制成口服固体制剂。
所述口服固体制剂可以是胶囊、片剂、冲剂、丸剂。可以将粉末或颗粒直接装入胶囊；或者将粉末或颗粒加入适量辅料压成片剂；或者将浸膏加适量辅料或粉末制成冲剂或丸剂。
按上述制备方法制得各种制剂符合中国药典《附录》中制剂通则的有关规定。鉴别方法用薄层扫描整体指纹谱或用紫外最大吸收峰与标准品对照，含量测定方法以所含牛黄酸为定量指标用薄层扫描法或氨基酸自动分析仪测定。
全蝎口服固体制剂对心脑血管系统、神经系统疾病及肿瘤均有良好作用。全蝎口服固体制剂的主要药效学研究表明，其有抗血小板凝集、抗血栓、降低全血比粘度的作用，其还有抗癌作用，其尚有抗惊厥作用。毒理研究表明全蝎胶囊毒性很低。
全蝎口服固体制剂对心脑血管疾病有良好作用，它的抗血小板聚集作用、抗血栓及降低全血比粘度作用等均强于目前市场上畅销的“华陀再造丸”。
1.全蝎胶囊0.95-1.7g.kg-1明显增加颈内动脉血流量，1.7g.kg-1剂量组使颈内动脉血管阻力明显下降，与阳性对照药对比，达到相似药效的剂量较低，提示本品的药效较强。见表1。
2.全蝎胶囊0.3g.kg-1组降低脑缺血时的脑水肿(脑含水量)的药效与华佗再造丸1.0g.kg-1组相同，提示本品降低缺血所致的脑水肿药效，约为阳性对照组的3倍。见表2。
3.全蝎胶囊显示明显的对抗血小板的聚集作用，2.4g.kg-1组与阳性药4g.kg-1相似。提示本品抗血小板聚集作用强于华佗再造丸。见表3
4.全蝎胶囊对体内及体外的血栓形成，均有抗作用，呈剂量依从性。1.2g.kg-1的药效大致与阳性药4g.kg-1相仿。提示本品的抗凝作用亦强于华佗再造丸。见表4表5。
5.全蝎胶囊降低全血比粘度，呈剂量依从性，对高切变及低切变速率的比粘度均有降低作用，并且可降低血浆的比粘度，药效亦强于华佗再造丸，并可降低红细胞压积。见表6。目前市场上尚未有单用全蝎治疗肿瘤的药物，本发明全蝎胶囊经药效学试验对肉瘤S180癌细胞、肝癌细胞、艾氏腹水癌细胞有直接杀伤作用，体内试验对肉瘤S180也有明显抑制作用，且毒性很低，可作为抗肿瘤药或抗癌药物的辅助治疗长期使用。
1.动物：昆明小白鼠，体重20±2克，♂♀兼用，购自南京市药物研究所和中国药科大学动物室。
2.药品：①全蝎制剂由中国药科大学中药学院中药制剂研究室提
供。②环磷酰胺——上海第十二制药厂生产(批号810364-12)
1.体外试验：应用伊红染色法
①对S180癌细胞的作用：
取接种7-9天的S180腹水癌小白鼠，无菌条件下抽取腹水液，用生理盐水稀释成1∶3的溶液，与不同浓度的药物等量混合，使均匀，在37℃培养箱中培养，于1小时、3小时观察其赤染率(0.5％伊红染色)，实验结果见表7。②对肝癌腹水癌细胞的作用：
取接种7-9天的肝癌腹水癌小白鼠，无菌条件下抽取腹水液，用生理盐水稀释成1∶3的溶液，与不同浓度的药物等量混合，使均匀，在37℃培养箱中培养，于1小时、3小时观察其赤染率(0.5％伊红染色)，实验结果见表8。③对艾氏腹水癌细胞的作用：
取接种7-9天的艾氏腹水癌小白鼠，无菌条件下抽取腹水液，用生理盐水稀释成1∶3的溶液，与不同浓度的药物等量混合，使均匀，在37℃培养箱中培养，于1小时、3小时观察其赤染率(0.5％伊红染色)，实验结果见表9。从表7、8、9可知，全蝎对S180、肝癌腹水癌以及艾氏腹水癌细胞有直接杀伤作用，而且其作用强度随药物浓度增高及作用时间的延长而增强。
2.体内抗肿瘤实验：
①对S180实体瘤作用：
取接种7-9天生长良好的S180瘤液用生理盐水稀释成1∶3浓度的癌细胞液，于无菌条件下，在每只小白鼠的右前肢腋部皮下接种0.2ml的癌细胞液，24h后随机分组，连续ig给药9天，停药后，次日称体重，解剖小白鼠，所得瘤块称重，比较给药组与对照组瘤块差异，并计算抑瘤率。公式如下：实验结果见表10。
全蝎口服液固体制剂对神经系统疾病亦有良好疗效，抗惊厥试验表明，全蝎胶囊中有明显抗电惊厥作用及抗可拉明的致惊作用。
抗惊厥试验：
1.抗电惊厥：以35V交流电致惊，选取小鼠40只，随机分为两组，每组20只，对照组给蒸馏水灌胃，给药组取全蝎胶囊内容物配成1g/ml(折干品计算)的溶液灌胃，连续给药7天，于末次给药后50分钟，以电刺激致惊，统计惊厥和不惊厥鼠数，结果服药组小鼠明显降低致惊厥数，参见表11。
2.抗可拉明的惊厥：
取昆明种小白鼠40只，随机分为两组，给药方法与剂量与上述抗电惊厥相同，于第三于给药后50分钟，腹部皮下注射1.25％可拉明溶液0.2ml/10g，致惊，结果全蝎胶囊使小鼠具有抗可拉明的致惊作用，见表12。全蝎胶囊毒理研究表明其毒性很低。
1.急性毒性试验：
按简化机率法，小鼠LD50＞20g/kg
按总给药推算超过临床用药量的300倍。
2.慢性毒性试验：
用大鼠90天喂养试验，结果血液学检查和生化检验各项指标均在正常值范围内。病理组织学检验也未发现病理改变，说明其无明显毒性反应。
下面对本发明作进一步详细说明
A法：
1.取新鲜活蝎1000，浸入水中，待吐尽泥土杂质，洗清，捞出沥干，放入冷冻室内于-30℃冻死，结成冰块，立即打碎成粒状，60℃真空干燥，再粉碎成细粉，过筛得粒径为0.15～0.17毫米的蝎粉250g。
2.取新鲜活蝎1000，浸入水中，待吐尽泥土杂质，洗清，捞出沥干，放入冷冻室内于-30℃冻死，结成冰块，立即打碎成粒状，然后加6升水，于90℃加热提取1小时反复提取2次，合并提取液于70℃进行减压浓缩，直至得到浸膏40g，浸膏比重为1.25/80℃热测，再将此浸膏加上述制得的干燥蝎粉(按1∶1.2的比例W/W)，混合制粒，干燥，过筛得颗粒135g(粒径为0.18～0.35毫米)
B法：
1.取市售中药饮片全蝎1000g，经挑拣除去杂质异物，于80℃干燥，然后粉碎成细粉，过筛得粒径为0.15～0.17毫米的蝎粉850g。
2.取市售中药饮片全蝎1000g，经挑拣除去杂质异物，再适度粉碎成绿豆大小，然后加9升水浸泡1小时，再加热至95℃提取1小时，并反复提取两次，合并提取液，按上述A法同样处理，浓缩后得浸膏185g，比重1.25/80℃热测。再将此浸膏按上述A法同样处理加市售中药全蝎制得的蝎粉，混合制粒，干燥，过筛得颗粒225g(粒径0.18～0.35毫米)
1.胶囊剂
(1)取前述A法新鲜活蝎制成的蝎粉直接装入0号胶囊，每粒装量0.30g。临床应用服法：每次5粒，每日3次。
(2)取前述A法(或B法)制得的颗粒装入0号胶囊，每粒装量0.35g。临床用法：每次服2粒，每日3次。
2.片剂
取前述制得的蝎粉145g和浸膏120g拌拌混和，干燥，粉啐，过6号筛用中蜜30毫升为粘合剂制软材，挤压过2号筛，然后干燥，再加3％(W/W)滑石粉抖匀，压片，每片重0.5g。临床用法：每次服2片，每日3次。
3.冲剂
取前述制得的浸膏100g，蔗糖粉300g，可溶性淀粉150g，均匀混合，制成软材，压过1号筛，制成颗粒，于80℃烘干，过筛整粒，包装于密封袋中，每袋6g。临床用法：每次服1袋，每日2次。
4.丸剂
取前述制得的浸膏100g和蝎粉120g，按常规蜜丸法，混合制成软硬适宜的丸块，然后挤条，制丸，将湿颗粒干、过筛、上光、包衣得浓缩蜜丸750粒，粒重150g。临床用法：每次服8粒，每日2次。
表1.全蝎胶囊和华佗再造丸对犬ICBF，ICVR，MAP，SAP，DAP及HR的影响
药物 ICBF ICVR MAP SAP DAP HR
(g.kg-1) (ml.min-1) (KPa.ml-1.min-1) (KPa) (KPa) (KPa) (bpm) 0.5％CMC B 9.0±1.8 2.0±0.4 17.7±0.9 22.8±1.1 11.7±1.5 168±50
A 9.5±3.0 2.1±0.6 18.5±1.7 23.0±1.7 16.5±2.3 165±55 华佗再造丸 A 8.0±1.6 2.6±0.6 19.0±3.5 23.6±4.0 16.5±3.3 170±46
2.6 B 12.4±2.6** 1.7±0.4* 19.5±2.4 24.3±2.8 16.7±1.9 173±34
全蝎
0.81 A 7.2±1.6 2.4±0.4 16.1±2.4 20.5±2.0 13.9±2.5 180±42
B 7.2±1.3 2.3±0.5 16.1±2.8 20.1±2.1 14.1±3.2 194±44
0.95 A 8.8±1.6 2.1±0.4 18.5±3.1 22.4±4.1 16.4±3.0 205±19
B 11.2±2.6 1.8±0.3 19.6±2.4 23.3±2.8 17.4±2.3 204±32
1.7 A 8.0±2.1 2.3±0.3 18.2±3.0 22.9±2.9 16.3±2.6 204±22
B 11.8±1.8** 1.5±0.2** 17.2±2.6 21.2±2.9 15.2±2.3 207±33X±s，n＝5，P＜0.01与给药前比较，A：给药前，B：给药后。
表2.全蝎胶囊对脑含水量及脑指数的影响
组别(g.100g-1) 脑含水量(％) 脑指数假手术组 77.3±0.6 0.84±0.04未治疗组 79.1±1.2### 1.16±0.12###华佗再造丸 1.0 77.6±1.1* 0.90±0.072***全蝎 0.15 78.2±1.0 0.96±0.05***
0.3 78.1±1.1 0.94±0.03***
0.6 76.7±0.9*** 0.92±0.04***X≠s，n＝8，*P＜0.05 **P＜0.01***P＜0.001与未治疗组比较。
###P＜0.001与假手术组比较。
表3.全蝎胶囊抗血小板聚集作用
组别 最大聚集(％) 第一分钟聚集(％) 第五分钟聚集(％)(g.kg-1) 空白对照 给药组 空白对照 给药组 空白对照 给药组 全蝎 0.6 41.4 24.4 38.2 22.4 30.4 18.0
±14.7 ±9.1* ±12.7 ±9.6* ±19.5 ±7.8* 1.2 44.1 21.5 38.1 18.9 35.4 17.8
±20.1 ±9.5** ±18.6 ±9.5* ±25.5 ±l8.9*** 2.1 44.3 11.8 42.5 9.9 31.3 4.4
±7.5 ±3.6*** ±6.9 ±4.4*** ±7.4 ±2.5***阿斯匹林 0.005 65.2 39.6 51.3 35.3 56.3 35.4
±15.5 ±18.9** ±19.6 ±18.8** 24.2 ±20.0**华化再造丸 4 42.6 11.0 40.9 9.2 38.7 5.1
±7.4 ±2.3*** ±6.9 ±2.2*** ±7.3 ±2.8***X±s，n＝6，*P＜0.05，**P＜0.0***P＜0.001与对照组比较。
表4.全蝎胶囊对体内血栓形成的影响
组别 血 栓 湿 重 血 栓 干 重 (g.kg-1) 空白对照 给药组 空白对照 给药组
全蝎
0.6 330±81 186±133* 83±29 47±36
1.2 302±39 119±56** 94±21 36±18**
2.4 274±75 61±23*** 112±29 25±9*** 阿斯匹林 0.005 349±79 154±97*** 106±46 50±29***华佗再造丸
4 245±35 85±37*** 108±11 38±19***X±s，n＝6，*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001，与照组比较。
表5.全蝎胶囊对体外血栓的影响
组别 血栓长度(cm) 血栓湿重(mg) 血栓干重(mg) (g.kg-1) 空白对照 给药组 空白对照 给药组 空白对照 给药组
全蝎
0.6 7.5±1.6 3.4±2.1** 117±48 82±55** 30±12 19±5
1.2 7.0±0.7 3.7±1.5** 49±1.0 77±8** 71±5 6±7***
2.4 6.6±0.9 0.8±0.3*** 58±6 16±7*** 27±2 7±3** 阿断匹林
0.005 8.0±1.6 3.5±2.1*** 126±21 56±30** 45±22 17±8* 华佗再造丸
4 7.4±0.7 2.6±1.1*** 61±3 25±12*** 28±2 10±5***X±s，n＝6，*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001
表6.全蝎胶囊对有兔全血比粘度的影响组别 切 变 速 率(I/s) 红细胞(g.kg-1) 20 30 40 60 80 压积(％)全蝎0.6 空白对照 4.9±1.2 4.6±0.9 4.3±0.8 4.1±0.7 4.0±0.8 35.9±3.4
给药组 4.3±0.6 4.1±0.7* 3.8±0.5* 3.7±0.5* 3.5±0.5* 34.0±3.1**1.2 空白对照 5.9±1.0 5.3±0.5 5.0±0.6 4.7±0.4 4.6±0.4 39.0±3.4
给药组 4.9±0.5* 4.6±0.3** 4.4±0.3* 4.3±0.2* 4.0±0.2** 37.3±2.72.4 空白对照 6.1±0.6 5.6±0.5 5.2±0.4 4.9±0.4 4.6±0.4 39.8±5.6
给药组 4.8±0.2** 4.4±0.5** 4.1±0.4** 3.8±0.4** 3.6±0.4** 33.2±2.2**华佗再造丸4 空白对照 6.0±1.6 5.2±1.2 4.8±1.0 4.5±0.6 4.3±0.5 38.7±4.5
给药组 5.1±1.4* 4.3±1.2 3.8±0.8** 3.7±0.7** 3.4±0.5** 35.5±5.9阿斯匹林0.005 空白对照 6.0±1.9 5.4±1.5 4.9±1.1 4.7士0.9 4.5±0.8 37.7±5.5
给药组 4.2±1.3* 4.0±1.0* 3.7±0.8** 3.5±0.7** 3.4±0.6** 36.0±5.3 X±s，D＝6，*P＜0.05 **P＜0.01，与对照组比较。
表7.体外试验：全蝎对S180癌细胞的作用药物 浓度mg/ml 次数 赤染率％
mg/ml (1小时) (3小时)生理盐水 2 7 10 全蝎 10 2 50 99
2 2 12 50
0.4 2 10 15
0.04 2 8 11
表8.体外试验：全蝎对肝癌腹水癌细胞的作用药物 浓度mg/ml 次数 赤染率％
mg/ml (1小时) (3小时)生理盐水 2 4 8全蝎 25 2 98 99
5 2 16 80
0.5 2 9 25
0.05 2 5 11
表9.体外试验：全蝎对艾氏腹水癌细胞的作用药物 浓度mg/ml 次数 赤染率％
mg/ml 1小时 3小时生理盐水 2 3 4全蝎 25 2 96 99
5 2 56 91
0.50 2 15 42
0.50 2 9 30
表10.小鼠体内试验：全蝎对S180实体瘤细胞细胞作用药物 剂量(mg/kg) 小鼠数 平均体重(g) 平均瘤重(g) 抑瘤率(％)生理盐水 34/36 19.9/27 2.87±1.23 —环磷酰胺 20×9 15/15 19.8/22 0.8±0.11*** 72全蝎 7840×9 13/15 19.7/29 1.5±0.8*** 17.7
3920×9 14/15 19.7/28 1.82±1.27** 37
1960×9 15/15 19.8/27 1.85±0.6** 35.5*P＜0.05***P＜0.01VS生理盐水
表11.全蝎抗电刺激惊厥作用
鼠数(只) 致惊厥数(只) 不致惊厥数(只)对照组 20 20 0给药组 20 11 9
表12.可拉明致小鼠惊厥潜伏期
鼠数(只) 潜伏期长短(X±SD秒)对照组 20 115.5±60.7给药组 20 226.3±172.9