一种银杏内酯冻干粉针剂及其制备方法 【技术领域】
本发明是关于银杏内酯的制剂及其制备方法，特别是关于银杏内酯的冻干粉针剂及其制备方法，该注射剂以中药银杏叶的提取物银杏内酯为有效成分制备而成，属药物领域。
背景技术
银杏叶主要成分为黄酮类化合物、萜类化合物。其中萜类化合物以银杏内酯为主。现代药理研究表明，银杏内酯为目前天然抗血小板激活因子(PAF)受体拮抗剂中最有临床应用前景的药物，其中银杏内酯B拮抗PAF受体的选择性和活性最强。银杏内酯可以抑制血小板聚集，降低血液粘度，改善缺血病人的微循环，减少血栓形成；同时稳定细胞膜，减少血管紧张素的渗透；具有抗过敏、抗炎、抗休克作用，对缺血损伤及器官移植的排斥反应亦有保护作用[2]。
国外银杏叶制剂的生产主要有德国的Ginaton(金纳多)和法国Tanakan(达那康)；国内生产的品种有舒血宁注射液，天保宁银杏片等，其主要成分为黄酮类化合物和萜内酯类化合物。现有技术中对银杏内酯及其制剂的研究已经有一些报道。如中国专利文献CN1390542公开了一种银杏内酯冻干粉针剂的制备方法，文献号为CN1424031A公开了一种银杏内酯注射剂及其制备工艺。赵彦忠、陈玉祥、刘霆、文继舫对注射用银杏内酯冻干粉的安全性和毒理学进行了实验和研究，结果研究表明冻干粉针作为注射剂是安全可靠的。本发明中银杏内酯注射剂以银杏叶为原料，经提取纯化制得的有效部位银杏内酯化合物，银杏内酯经加工制得注射用银杏内酯；并对注射用银杏内酯的制备工艺、质量标准和稳定性作了研究，从而更好地控制了银杏内酯冻干粉针的稳定性，提高了生物利用度。
【发明内容】
本发明的目的在于提供一种含有银杏内酯的制剂，特别是银杏内酯的冻干粉针剂，同时还提供了该注射剂的制备工艺。
本发明所述的注射剂主要以总银杏内酯组成，其中含银杏内酯A：46～56％，银杏内酯B：38～48％，银杏内酯C：3～13％。
同时该粉针剂还含有葡甲胺、甘露醇，各组分重量比为：银杏内酯∶葡甲胺∶甘露醇＝5∶(5～7)∶(30～40)。
上述组分的重量比可以为：银杏内酯∶葡甲胺∶甘露醇＝5∶6∶40。
上述组分的优先重量比为：银杏内酯∶葡甲胺∶甘露醇＝5∶6∶35。
其中还可加入适量地8％枸橼酸溶液。
本发明还提供了银杏内酯冻干粉针的制备方法，具体如下：
银杏内酯 5.0重量份
葡甲胺 5.0～7.0重量份
甘露醇 30.0g～40.0重量份
8％枸橼酸溶液
适量取葡甲胺加入1000ml的80℃注射用水中，搅拌使溶解，加入银杏内酯，搅拌使溶解，加入甘露醇，搅拌使溶解，冷却至室温后用8％的枸橼酸水溶液调pH至7.5～9.0，搅拌至溶解，加入活性炭，室温下搅拌吸附15～25min，过滤除炭，用0.22μm微孔滤膜无菌过滤，滤液装盘，冷冻干燥，冻干品粉碎，过筛，分装，压塞，轧盖，制成冻干粉针。
银杏内酯极微溶于水，若制备成注射剂则须添加适量的辅料，以增加其在水中的溶解性。药用辅料葡甲胺作为一种常用的增溶剂，已经应用在银杏内酯制剂方面，葡甲胺与银杏内酯中的内酯环部分成盐，从而增加银杏内酯的水溶性。银杏内酯各组分的结构中均有内酯环，内酯环在水中不稳定，受水中pH值或者外界温度等因素的影响而开环而改变组分的结构，使该组分失去特有的药理药效。本发明通过系统的药物稳定性考察方法，对银杏内酯冻干粉针剂与银杏内酯注射液的稳定性进行了比较，试验结果表明，液体制剂(注射液)在40℃加速试验下，放置2个月，取样测定含量，含量下降约20％；而固体制剂(粉针剂)在同样条件下放置6个月，其理化性质与含量几乎没有改变，可以预测该粉针剂的有效期为2年。故银杏内酯冻干粉针剂的稳定性比银杏内酯注射液的稳定性好。粉针剂中选用甘露醇作为骨架剂，可以使银杏内酯粉末分散于骨架剂中，加水充分摇动时则迅速溶解。
鉴别方面，采用的鉴别方法为TLC或者HPLC，研究结果表明，本品与对照品在以TLC或者HPLC的鉴别结果一致；检查方面，参照中国药典2000版一部附录IU注射剂项及附录IXS注射剂有关物质检查法进行质量控制，结合三批样品的检测结果，确定了各个项目的限度。含量测定方面，银杏内酯在紫外末端220nm波长处有最大吸收，我们选择了HPLC法，并作了方法学考察。结果表明，线性关系、精密度、稳定性、重现性与回收率均符合要求。
下面实验例用于进一步说明本发明。
实验例1：助溶剂最佳用量的选择
分别称取银杏内酯0.25g，以不同比例的葡甲胺加入60ml注射用水中，水浴加热至80℃，加入银杏内酯，搅拌至尽量溶解，比较各试验的外观性状。结果见表1。
表1 不同原辅料比例的实验结果 银杏内酯(g) 葡甲胺(g) 外观性状 0.25 0.15 加热时间长，不能全溶，溶液颜色变黄 0.25 0.20 溶解，但加热时间长，溶液颜色变黄 0.25 0.25 溶解，加热时间稍长，溶液颜色淡黄 0.25 0.30 溶解 0.25 0.35 溶解 0.25 0.40 溶解
试验结果表明，银杏内酯与葡甲胺用量比为1∶1～1.4时，有较好的助溶效果，从中药注射剂的稳定性方面考虑，药液加热时间不宜过长；故取银杏总内酯与葡甲胺的用量比为1∶1.2较合适。
实验例2：pH值的调整
注射剂的pH值要求与人体血液相等或接近，以免对机体产生副作用，一般应控制pH为4～9。本品在配制时，其pH值为10左右，需调整药液pH值至合适的要求。取药液适量，以8％枸橼酸溶液为pH值调节剂，放置24小时，以考查不同pH值时药液的外观性状。试验结果见表2。
表2 银杏内酯注射液的pH值比较结果
pH值 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5 9.0
外观性状 有微晶 有微晶 有微晶 澄清 澄清 澄清 澄清
试验结果表明，样品的pH值在7.5～9.0时澄清度最好，此时样品最稳定。因药液调节pH值制成粉针后，其pH值略升高，故药液应调节pH值至7.5～8.0。
实验例3：活性炭用量的选择
取药液100ml，分别加入不同量的活性炭(针用)，在室温下搅拌吸附20分钟。结果见表3。
表3 活性炭用量比较结果
活性炭用量(g/ml) 0(空白) 0.06 0.10 0.15 0.20
外观性状 澄明 澄明 澄明 澄明 澄明
热原 阴性 阴性 阴性 阴性 阴性
含量(mg/ml) 4.95 4.93 4.89 4.83 4.71
活性炭对药液有较好的吸附除热原、脱色、除杂质的作用。考虑到活性炭对银杏内酯的吸附作用，故对其用量进行筛选。结果表明，以活性炭用量在0.06％～0.15％较好，考虑到生产中的影响因素，故本工艺选择活性炭用量为0.10％。
实验例4：甘露醇(填充剂)用量的优化
取药液(未加甘露醇)适量，分成四份，分别加入甘露醇，制成含甘露醇4％、6％、8％、10％的溶液，装于冻干盘中，冻干，观察其冻干品的外观性状。结果见表4。
表4 甘露醇用量的优化结果 甘露醇(g/ml)4％6％8％10％ 冻干品外观块状，较疏松块状，饱满，面光滑块状，饱满，面光滑块状，饱满，面光滑
结果表明，甘露醇用量在6％～8％为宜，即配制1000ml的药液时，甘露醇的用量为60～80克。因主药的剂量较小，应适度增加填充剂，以利于冻干后药粉的分装，故选择甘露醇用量为7％。甘露醇无引湿性，制得的冻干品不易吸潮且易溶于水。
实施例1：
银杏内酯 10.0g
葡甲胺 12.0g
甘露醇 70.0g
8％枸橼酸溶液
取葡甲胺加入1000ml的80℃注射用水中，搅拌使溶解，加入银杏内酯，搅拌使溶解，加入甘露醇，搅拌使溶解，冷却至室温后用8％的枸橼酸水溶液调pH至7.5～8.0，搅拌至溶解，加入活性炭，室温下搅拌吸附20min，过滤除炭，用0.22μm微孔滤膜无菌过滤，滤液装盘，冷冻干燥，冻干品粉碎，过30～40目筛，分装，压塞，轧盖，制成200支。
实施例2：
银杏内酯 10.0g
葡甲胺 12.0g
甘露醇 80.0g
8％枸橼酸溶液
取葡甲胺加入1000ml的80℃注射用水中，搅拌使溶解，加入银杏内酯，搅拌使溶解，加入甘露醇，搅拌使溶解，冷却至室温后用8％的枸橼酸水溶液调pH至7.5～8.0，搅拌至溶解，加入活性炭，室温下搅拌吸附25min，过滤除炭，用0.22μm微孔滤膜无菌过滤，滤液装盘，冷冻干燥，冻干品粉碎，过30～40目筛，分装，压塞，轧盖，制成200支。