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1、10申请公布号CN104170735A43申请公布日20141203CN104170735A21申请号201410445595122申请日20140904A01H4/0020060171申请人南京标科生物科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边东108号1幢701室72发明人张金芳杨存54发明名称一种南方迷荚的快速繁殖方法57摘要本发明涉及一种南方迷荚的快速繁殖方法,包括外植体的消毒、诱导培养、增殖培养、生根培养和炼苗移栽。本发明的南方迷荚组培方法操作简便,生长周期短,成活率高,可以短期内获得大量的制药原料。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识产。
2、权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104170735ACN104170735A1/1页21一种南方迷荚的快速繁殖方法,包括无菌外植体的获得、芽的诱导、芽的增殖、生根诱导、野外炼苗移栽,其主要步骤如下(1)取南方迷荚的侧芽,按照常规的消毒方法对其进行消毒处理;(2)将步骤(1)消毒处理过的南方迷荚侧芽接入培养基配方为LSIAA02MG/L6BA05MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂65G/L,PH58,光照2000LX;(3)取步骤(2)诱导出来的芽放入增殖培养基LS2,4D0102MG/LKT0103MG/L1G/L活性炭,附加蔗糖30G/。
3、L,琼脂65G/L,PH58,光照2000LX;(4)取步骤(3)增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/43/4LSNAA01MG/LIBA02MG/L;(5)取步骤(4)生根后的南方迷荚试管苗先移栽到温室,然后移栽到大田进行炼苗培养。2按照权利要求1所述的一种南方迷荚的快速繁殖方法,其特征在于步骤(1)中所述南方迷荚无菌芽的获得为,天气晴朗的上午910点取南方迷荚的侧芽,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗1H,超净工作台上75酒精处理30S,次氯酸钠处理9MIN,无菌水冲洗5遍。3按照权利要求1所述的一种南方迷荚的快速繁殖方法,其特征在于步骤(3)增殖培养基LS2,4D01。
4、02MG/LKT0103MG/L中附加了1G/L活性炭,能克服苗在增殖培养过程中褐化现象的出现。4按照权利要求1所述的一种南方迷荚的快速繁殖方法,其特征在于步骤(4)中的生根培养条件为蔗糖20G/L,琼脂65G/L,PH59,光照4000LX,湿度6070。5按照权利要求1所述的一种南方迷荚的快速繁殖方法,其特征在于步骤(5)中南方迷荚的炼苗培养方法为将生根的试管苗置于培养室自然光下打开瓶口练苗7D,在百菌清溶液中浸泡5D,然后小心取出试管苗,洗净根部培养基,栽植于含水量为60的珍珠岩的育苗容器中。权利要求书CN104170735A1/2页3一种南方迷荚的快速繁殖方法技术领域0001本发明涉及。
5、南方荚迷组织培养的快繁方法,属于植物技术领域。背景技术0002南方迷荚,灌木或小乔木,荚蒾科,别名,火柴树、火斋、满山红、苍伴木,分布于我国江苏省,安徽省,浙江省,江西省,福建省,湖北省,湖南省,广东省,广西自治区,四川省,贵州省,云南省,祛风清热,散瘀活血。主治感冒,发热,月经不调,肥大性脊椎炎,风湿痹痛,跌打骨折,湿疹。目前,迷荚药材的使用还只局限在野外采集上,资源有限,开发使用率低,使用组培快繁的方法对迷荚进行快速繁殖,可以提高南方迷荚的使用率。发明内容0003本发明所要解决的技术问题是提供一种南方迷荚的快速繁殖方法,由该方法所制备得到的南方迷荚增殖系数高,成活率高,可以提高南方迷荚的利。
6、用率。0004本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的取南方迷荚的侧芽,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗1H,超净工作台上75酒精处理30S,次氯酸钠处理9MIN,无菌水冲洗5遍,接入LSIAA02MG/L6BA05MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂65G/L,PH58,光照2000LX,诱导培养25天,接入培养基LS2,4D015MG/LKT02MG/L1G/L活性炭中进行增殖培养,附加蔗糖30G/L,琼脂65G/L,PH58,光照2000LX,继代培养23代,接入培养基1/2LSNAA01MG/LIBA02MG/L中进行生根诱导,培养条件。
7、为蔗糖20G/L,琼脂65G/L,PH59,光照4000LX,湿度6070,待试管苗长至5CM时,将生根的试管苗置于培养室自然光下打开瓶口练苗7D,在百菌清溶液中浸泡5D,然后小心取出试管苗,洗净根部培养基,栽植于含水量为60的珍珠岩的育苗容器中。0005采用本发明制备的南方迷荚成活率为94,周期短,产量大,能耗少,利于大规模种植。0006下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。0007实施例1取南方迷荚的侧芽,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗1H,超净工作台上75酒精处理30S,次氯酸钠处理9MIN,无菌水冲洗5遍,接入L。
8、SIAA02MG/L6BA05MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂65G/L,PH58,光照2000LX,诱导培养25天,接入培养基LS2,4D01MG/LKT01MG/L1G/L活性炭中进行增殖培养,附加蔗糖30G/L,琼脂65G/L,PH58,光照2000LX,继代培养23代,接入培养基1/4LSNAA01MG/LIBA02MG/L中进行生根诱导,培养条件为蔗糖20G/L,琼脂65G/L,PH59,光照4000LX,湿度6070,待试管苗长至5CM时进行移栽炼苗培养,南方迷荚成活率为90。说明书CN104170735A2/2页40008实施例2取南方迷荚的侧芽,先在。
9、漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗1H,超净工作台上75酒精处理30S,次氯酸钠处理9MIN,无菌水冲洗5遍,接入LSIAA02MG/L6BA05MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂65G/L,PH58,光照2000LX,诱导培养25天,接入培养基LS2,4D02MG/LKT03MG/L1G/L活性炭中进行增殖培养,附加蔗糖30G/L,琼脂65G/L,PH58,光照2000LX,继代培养23代,接入培养基3/4LSNAA01MG/LIBA02MG/L中进行生根诱导,培养条件为蔗糖20G/L,琼脂65G/L,PH59,光照4000LX,湿度6070,待试管苗。
10、长至5CM时进行移栽炼苗培养,南方迷荚成活率为91。0009实施例3取南方迷荚的侧芽,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗1H,超净工作台上75酒精处理30S,次氯酸钠处理9MIN,无菌水冲洗5遍,接入LSIAA02MG/L6BA05MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂65G/L,PH58,光照2000LX,诱导培养25天,接入培养基LS2,4D015MG/LKT03MG/L1G/L活性炭中进行增殖培养,附加蔗糖30G/L,琼脂65G/L,PH58,光照2000LX,继代培养23代,接入培养基1/2LSNAA01MG/LIBA02MG/L中进行生根诱导,。
11、培养条件为蔗糖20G/L,琼脂65G/L,PH59,光照4000LX,湿度6070,待试管苗长至5CM时进行移栽炼苗培养,南方迷荚成活率为92。0010实施例4取南方迷荚的侧芽,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗1H,超净工作台上75酒精处理30S,次氯酸钠处理9MIN,无菌水冲洗5遍,接入LSIAA02MG/L6BA05MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂65G/L,PH58,光照2000LX,诱导培养25天,接入培养基LS2,4D02MG/LKT02MG/L1G/L活性炭中进行增殖培养,附加蔗糖30G/L,琼脂65G/L,PH58,光照2000LX,继代培养23代,接入培养基1/2LSNAA01MG/LIBA02MG/L中进行生根诱导,培养条件为蔗糖20G/L,琼脂65G/L,PH59,光照4000LX,湿度6070,待试管苗长至5CM时进行移栽炼苗培养,南方迷荚成活率为93。说明书CN104170735A。