鼻腔给药的粉剂组合物 【技术领域】
本发明涉及鼻腔给药的粉剂组合物，其中改善了药物通过鼻粘膜的吸收作用。更具体地来说，本发明提供一种鼻腔给药的粉剂组合物，它通过与特定种类的一对碱性材料化合和具有特定的组成来指定碱性材料中所存在药物的状态而可显示高的最大血药浓度。
背景技术
例如，在非肽/非蛋白质药物如抗炎甾体化合物中，需要开发鼻腔给药地药物制剂，这是由于下列事实：(1)局部的鼻粘膜可以是作用的目的部位，(2)在鼻腔给药的药物制剂中，可以预计具有快速的作用，(3)另一方面，在某些药物中，经口腔给药吸收作用是低的，等等。
而且，许多肽/蛋白质药物不易吸收进入体内，主要原因是口服给药时这些药物易于被胃肠道中的蛋白分解酶所分解。所以，为了用于治疗，经常不得不通过注射给予该药。不幸地是，对于病人来说，注射有不足之处，如疼痛、需要去医院等。因此，需要开发可代替注射的非侵害性给药如鼻腔给药的药物制剂。
鼻腔给药使药物通过鼻粘膜转运进入血循环，它与经皮给药、经眼给药、经直肠给药、经肺给药等一起作为非注射型给药方法正在进行有力地研究。在这些非注射型给药方法中，鼻腔给药是易于使用的一种给药方式。而且，鼻腔给药被认为是一种非注射型给药方法中药物吸收较好的，因为鼻粘膜膜中的血管系统比皮肤、眼粘膜膜、直肠粘膜膜等中的更发达。所以，鼻腔给药的药物制剂在某些药物中已经付诸实施。而且，鼻腔给药时药物向血液中的转运比口服快，可预计鼻腔给药具有与注射类似的即时作用。另一方面，药物经鼻腔吸收取决于物理特性如药物的亲脂性并且也取决于药物的分子量等。表明水溶性高的药物、高度亲脂性药物、大分子量的肽/蛋白质药物等经鼻腔的吸收作用常常是低的。在这种情况下，已提出一些改善这些药物经鼻腔吸收的发明。
例如，Suzuki等〔日本专利公开(已审查的)60(1985)-34925〕公开了长时间起作用的鼻腔药物制剂，它含有纤维素醚和药物。
该专利公开的长时间起作用的鼻腔药物制剂目的在于允许药物粘合在鼻粘膜上并在长时间内缓慢释放药物。已经取得了一些成果，即药物经鼻粘膜而吸收并以持续状态释放有效量的药物。然而，该专利的长时间作用的药物制剂的主要目的是缓慢释放药物并因此使药物吸收作用的增强似乎不总是充分。作为所述专利的优选实施例具体引用的药物包括抗炎甾体化合物、镇痛消炎剂、抗组胺剂、具有抗过敏作用的药物等，为此重要的是保持局部浓度而不是系统浓度。
在所述专利公开的长时间作用鼻腔药物制剂中，对于高水溶性药物、高亲脂性药物或大分子量的肽/蛋白质药物来说难以实现高的经鼻吸收的比例。在这种情况下，强烈需要开发将此药物给予鼻粘膜上的药物制剂，使用它可以产生有效的治疗作用和治疗效果。
Nolte等(Hormone Metabolic Research Vol.22,170-174,1991)和Bruice等(Diabetic Medicine Vol.8,366-370,1991)报告鼻腔药物制剂的胰岛素中含有作为吸收促进剂的甘醇酸酯钠或牛胆酸钠。但是，这些吸收促进剂对鼻粘膜有刺激，并且其制剂也没有实际运用。
另一方面，Suzuki，等[日本专利公开(已审查的)，62(1987)-42888]公开由多肽和水吸收和水不溶性的碱材料组成的经鼻粘膜吸收好的鼻腔给药的粉末制剂。报告在组合物中未使用吸收促进剂而实现了对多肽的鼻腔吸收。
然而，甚至在上述专利公开的组合物中，多肽的鼻腔吸收比例〔鼻腔给药后血药浓度与时间曲线(AUC)下的面积〕未超过注射AUC的10-20％。例如，在该专利公开的实施例4中，将10单位的胰岛素给予兔子时，胰岛素的最大血药浓度低于200μU/ml，相同量胰岛素获得大约注射时的20％的最大血药浓度。通过AUC测定，估计鼻腔吸收的比例低于注射吸收比例的10％。
该专利的公开文本中描述联合使用水吸收且水不溶的碱性材料和水吸收且水溶的材料，后者量基于水吸收且水不溶的碱性材料计算为0.1-60％重量比，特别优选1-50％重量比。
然而，关于组合使用的目的和效果，仅仅描述了与单独使用水吸收的而水不溶的碱性材料相比有缓慢释放的作用(缓慢释放性和持续性)。
而且，未描述使用非肽/非蛋白质药物来代替多肽。
更进一步说，尽管该专利公开文本引用许多水吸收而水不溶的碱性材料包括结晶纤维素和许多水吸收且水溶性材料包括羟丙基纤维素，但根本未提及在所有这些碱性材料中组合具有特定种类、特定组成和特定颗粒大小的碱性材料可产生鼻腔给药的粉剂组合物，它对于肽/蛋白质药物或非肽/非蛋白质药物来说显示极好的最大血药浓度。
总之，肽/蛋白质药物是昂贵的，而且吸收比例低时，其血药浓度变化很大并且在许多情况下不能稳定地获得预计的治疗作用。所以，需要提供一种能够获得较高吸收比例的鼻腔给药的肽/蛋白质药物的组合物。进一步说，强烈需要提供一种能够获得较高吸收比例的同时有安全性的鼻腔给药组合物。更进一步，需要提供一种能够获得较高最大血药浓度的鼻腔给药组合物。在非肽/非蛋白质药物中具有相同的情形。
本发明的一个目的是提供一种高的药物吸收的鼻腔给药的组合物。
本发明的另外一个目的是提供一种能够显示高的药物吸收作用，特别是高的最大血药浓度的鼻腔给药的药物组合物。
本发明的另一目的是提供一种甚至对于高水溶性的药物、高亲脂性药物或大分子量的肽/蛋白质药物来说能够显示高吸收作用，特别是高的最大血药浓度的鼻腔给药组合物。
本发明的再一目的是提供一种对于原本显示极好鼻腔吸收作用的药物即在水中溶解性不高的并且亲脂性也不高的药物，非肽/非蛋白质药物等来说也能够显示更好的吸收作用，特别是能够显示更高的最大血药浓度的鼻腔给药的组合物。
本发明的再一目的是提供一种具有上文所述目的的同时具有极好安全性的鼻腔给药的组合物。
本发明人为了完成上述任务而积极地进行研究并通过发现可提供一种新的鼻腔给药的粉剂组合物而成功地完成了本发明，所述组合物通过使用一对特定种类的碱性材料和具有特定的组分并且通过详细描述碱性材料中所存在的主要药物的状态而产生极好的鼻腔吸收作用，甚至对于具有低的鼻粘膜吸收作用的药物或非肽/非蛋白质药物来说也是如此。
附图简述
图1显示给予兔子本发明改善吸收作用的鼻腔给药粉剂组合物(实施例66:-○-)和对比实施例的鼻腔给药粉剂组合物(对比实施例58、59和60分别为：-□-、-△-和-×-)时的FITC-葡聚糖(FD4)浓度。
本发明描述
本发明是一种鼻腔给药的粉剂组合物，其特征在于：
(1)该组合物含有(ⅰ)药物，(ⅱ)水可吸收的且形成凝胶的一种或多种选自羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、甲基纤维素、羟基乙基纤维素和羧基甲基纤维素钠的碱性材料和(ⅲ)水可吸收的而水不溶的一种或多种选自结晶纤维素、α-纤维素、交联的羧基甲基纤维素钠、交联的淀粉、明胶、酪蛋白、黄蓍胶、聚乙烯吡咯烷酮、壳多糖和脱乙酰壳多糖的碱性材料，
(2)基于水可吸收的而水不溶的碱性材料和水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的总量计算，水可溶解的并形成凝胶的碱性材料的含量约为5-40％重量，和
(3)与在水可吸收的并形成凝胶的碱性材料中的分散相比，药物不均匀地更多地分散在水可吸收的而水不溶的碱性材料中。本发明实施的最佳方式
本发明药物的优选实例包括非肽/非蛋白质药物和肽/蛋白质药物。
各种非肽/非蛋白质药物作为本发明的非肽/非蛋白质药物是有用的。非肽/非蛋白质药物的具体实例包括抗炎甾体化合物或非甾体抗炎药物、镇痛消炎剂、镇静药、抑郁症治疗剂、镇咳祛痰药、抗组胺药、抗过敏药、止吐药、安眠药、维生素制剂、性甾体激素、抗肿瘤药物、抗心律失常剂、抗高血压药物、抗焦虑药物、影响精神的药物、抗溃疡药物、强心剂、镇痛剂、支气管扩张药、肥胖治疗剂、抗血栓形成药、抗糖尿病药、肌松药、抗风湿药等。一种或多种选自上述的药物可用作非肽/非蛋白质药物。其中，一种或多种选自止吐药、安眠药、维生素制剂、性甾体激素和镇痛剂的药物是优选的。
确切地说，非肽/非蛋白质药物的实例包括抗炎甾体类化合物或非甾体类抗炎药物如氢化可的松、泼尼松龙、曲安西龙、地塞米松、倍他米松、倍氯米松、氟替卡松、莫米松、氟可丁、布地萘德、沙丁胺醇和沙美特罗；镇痛消炎剂如扑热息痛、非那西丁、阿司匹林、氨基比林、安乃近、保泰松、甲灭酸、氟灭酸、异丁苯乙酸、异丁苯丙酸、烯氯苯乙酸、二氯苯胺苯乙酸、吲哚美辛；镇静药如东莨菪碱；抑郁症治疗剂如丙咪嗪；镇咳祛痰药如色甘酸钠、磷酸可待因和盐酸异丙肾上腺素；抗组胺药如苯海拉明、苯丙烯啶、氮杂异丙嗪和扑尔敏；抗过敏药物如胺来占诺(amlexanox)、氨卓斯汀(azelastine)、奥扎格雷、曲尼司特和酮替芬；止吐药如ondansetron、granisetron、甲氧氯普胺、西沙必利和多潘立酮；安眠药如溴替唑仑和褪黑激素；维生素制剂如维生素B12和甲钴胺；性甾体激素如雌二醇、雌三醇、黄体酮和睾酮；抗肿瘤药物如他莫昔芬和替加氟；抗心律失常药物如普萘洛尔和阿替洛尔；抗高血压药物如尼卡地平；抗焦虑药地西泮；影响精神的药物如硝西泮；抗溃疡药物如西咪替丁和雷尼替丁；强心剂如多巴胺；止痛药如吗啡和丁丙诺啡；支气管扩张药如氧托胺(oxitropium)和奥扎格雷；肥胖治疗剂如马吲哚；抗血栓形成药如beraprost和carbacyclin；抗糖尿病药物如阿卡波糖和索比尼尔；肌松药如匹维胺(pinaverium)和inaperisone；抗风湿药物如actarit和platonin等。
而且，优选地，本发明的肽/蛋白质药物具有低于30000的分子量。下列例举具有低于30000分子量的肽/蛋白质药物：促黄体激素释放激素、生长激素释放因子、生长激素抑制素衍生物、后叶加压素、催产素、水蛭素衍生物、脑啡肽、促肾上腺皮质激素衍生物、舒缓激肽衍生物、降钙素、胰岛素、胰高血糖素衍生物、生长激素、生长激素释放激素、促黄体激素、类胰岛素生长因子、与降钙素基因有关的肽、前房促尿钠排泄多肽衍生物、干扰素、白细胞介素、促红细胞生成素、刺激粒细胞集落形成因子、刺激巨噬细胞形成因子、甲状旁腺素、甲状旁腺素释放激素、促乳泌素、促甲状腺激素释放激素和血管紧张素。作为本发明的肽/蛋白质药物，可使用一种或多种选自上文作为具体实例所使用的物质。
本发明的水可吸收的并形成凝胶的碱性材料为选自羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、甲基纤维素、羟基乙基纤维素和羧甲基纤维素钠的一种或多种碱性材料。
在这些碱性材料中，作为本发明水可吸收的并形成凝胶的碱性材料，优选使用一种或多种选自羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、甲基纤维素和羧甲基纤维素钠的材料，特别优选羟基丙基纤维素。
而且，作为羟基丙基纤维素，优选2％水溶液粘度在150-4000cps范围内的羟基丙基纤维素。粘度意指动力粘度并且可通过粘度计如Cannon-Fenske粘度计、Cannon-Fenske逆流型粘度计、Ubbellohde粘度计或Ostwald粘度计来测定。其中，优选使用Ubbellohde粘度计，因为用它测量可获得高的精度。本发明所述的粘度值是用Shibata KagakuKikai Kougaku公司生产的Ubbellohde粘度计在37℃下测定的。尽管具有较低粘度的羟基丙基纤维素是可以获得的，使用粘度低于150cps的羟基丙基纤维素时，对本发明最大血药浓度的增加作用不能总是以足够的方式获得。
本发明的水可吸收的而水不溶的碱性材料为一种或多种选自结晶纤维素、α-纤维素、交联的羧基甲基纤维素钠、交联的淀粉、明胶、酪蛋白、黄蓍胶、聚乙烯吡咯烷酮、壳多糖和脱乙酰壳多糖的碱性材料。
其中，作为本发明的水可吸收的而水不溶的碱性材料，优选一种或多种选自结晶纤维素、α-纤维素、交联的羧基甲基纤维素钠、交联的淀粉、明胶、酪蛋白、黄蓍胶、聚乙烯吡咯烷酮、壳多糖和脱乙酰壳多糖的碱性材料，并且结晶纤维素是最优选的。
水可吸收的并形成凝胶的碱性材料和水可吸收的而水不溶的碱性材料优选组合的实例包括上文作为优选实例描述的两种碱性材料的组合物。特别优选的是羟基丙基纤维素作为水可吸收的并形成凝胶的碱性材料和结晶纤维素作为水可吸收的而水不溶的碱性材料的组合物。
基于水可吸收的而水不溶的碱性材料和水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的总量计算，以大约5-40％重量的量使用水可吸收的并形成凝胶的碱性材料。
水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的量也取决于本发明药物的种类。药物为非肽/非蛋白质药物时，优选的量约为20-40％重量，因为在该范围中观察到显著增加最大血药浓度的作用。
本发明药物为肽/蛋白质药物时，水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的优选用量范围再通过药物的分子量进一步确定。肽/蛋白质药物的分子量不低于500但低于1500时，水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的用量在约5-30％重量时观察到显著增加最大血药浓度的作用，并且在20-30％重量时观察到特别显著的作用。而且，肽/蛋白质药物的分子量不低于1500且不高于30000时，水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的用量在约5-20％时观察到显著增加最大血药浓度的作用，并在10-20％重量范围时观察到特别显著的作用。
具有不低于500但低于1500分子量的肽/蛋白质药物的例子包括后叶加压素、促黄体激素释放激素、生长激素释放因子、生长激素抑制素衍生物、催产素、水蛭素衍生物、脑啡肽、促肾上腺皮质激素衍生物、舒缓激肽衍生物等。另外，分子量不低于1500且低于30000的肽/蛋白质药物的例子包括降钙素、胰岛素、胰高血糖素衍生物、生长激素、生长激素释放激素、促黄体激素、类胰岛素生长因子、与降钙素基因有关的肽、前房促尿钠排泄多肽衍生物、干扰素、促红细胞生成素、刺激粒细胞集落形成因子、刺激巨噬细胞形成因子、甲状旁腺素、甲状旁腺素释放激素、促乳泌素、促甲状腺激素释放激素和血管紧张素等。
本发明的鼻腔给药粉剂组合物的特征在于药物在水可吸收而水不溶的碱性材料比在水可吸收的并形成凝胶的碱性材料分散更不均匀。
药物在水可吸收而水不溶的碱性材料比在水可吸收的并形成凝胶的碱性材料分散更不均匀的状态包括药物以碱性材料的化合比例与碱性材料粘合的状态。优选70％重量或以上的药物以碱性材料的化合比例与两种碱性材料粘合的状态。特别优选80％重量或以上的药物以碱性材料的化合比例与两种碱性材料粘合的状态。例如，在70％重量或以上的药物以碱性材料的化合比例与两种碱性材料粘合的状态，并且水可吸收并形成凝胶的碱性材料的量为两种碱性材料总量的40％重量时，42％的药物与水可吸收的而水不溶的碱性材料粘合，28％的药物与水可吸收的并形成凝胶的碱性材料粘合，剩余30％均匀分散在组合物中。
而且，药物在水可吸收而水不溶的碱性材料比在水可吸收的并形成凝胶的碱性材料分散更不均匀的状态也包括药物与水可吸收而水不溶的碱性材料的粘合量大于与两种碱性材料以其化合比例粘合的量的状态。优选60％重量或以上的药物与水可吸收的而水不溶的碱性材料粘合的状态。其中70％重量或以上，特别是80％重量或以上的药物与水可吸收的而水不溶的碱性材料粘合的状态被特别优选。在这些状态下，剩余的低于30％重量或低于20％重量的药物以游离状态和/或与水可吸收的并形成凝胶的碱性材料粘合的状态均匀分散在组合物中。
在本发明中，药物与碱性材料的粘合表明一种状态，其中药物总是全部以粘合状态存在于碱性材料的表面，一部分药物存在于碱性材料中而另一部分存在于碱性材料表面，或药物总是全部存在于碱性材料中。
主药以特别不均匀的状态分散的本发明组合物可通过下列制备方法1、2或3来制备。
方法1：将药物与水可吸收的但水不溶的碱性材料进行机械混合，其中至少90％重量的颗粒的平均颗粒径在10-350μm。然后，将水可吸收并形成凝胶的碱性材料加到所得混合物中并进行机械混合，其中至少90％重量的水可吸收并形成凝胶的碱性材料的平均颗粒径在10-350μm的范围内。
方法2：通过冷冻干燥，使药物与水可吸收的但水不溶的碱性材料粘合而获得粘合药物的碱性材料。为了进行冷冻干燥，将药物和水可吸收的但水不溶的碱性材料溶于或分散于水溶液中并且可将所得溶液或分散液进行冷冻干燥过程。然后，将冷冻干燥的碱性材料粉碎并过筛以便获得至少90％重量的所得颗粒的平均颗粒径在10-350μm的范围内。将水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的粉末加到所得的粉末中并进行机械混合，其中至少90％重量的水可吸收并形成凝胶的碱性材料的平均颗粒径在10-350μm的范围内。
方法3：将水可吸收的但水不溶的碱性材料(其中至少90％重量的颗粒的平均颗粒径在10-350μm)、水可吸收并形成凝胶的碱性材料(其中至少90％重量的颗粒的平均颗粒径在10-350μm的范围内)与药物一次进行机械混合。
在这些制备方法中，第一和第二种制备方法是理想的，它们易于获得具有药物在水可吸收的但水不溶的碱性材料中比水可吸收的并形成凝胶的碱性材料中更易分布状态的组合物。例如，在第一种制备方法中，药物可与水可吸收的但水不溶的碱性材料剧烈混合，然后将所得粉状体与水可吸收的并形成凝胶的碱性材料轻轻混合。在第二种制备方法中，所得粉状体与水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的机械混合可剧烈地进行或轻轻地进行。
在第一种制备方法中，所得组合物中60％重量或以上的药物以粘合到水可吸收的但水不溶的碱性材料上的状态分散。在第二种制备方法中，80％重量或以上的药物以粘合到水可吸收的但水不溶的碱性材料上的状态分散。水可吸收的并形成凝胶的碱性材料均匀分散在整个组合物中。第三种制备方法是理想的，它易于产生药物以化合比例均匀分散在水可吸收的但水不溶的碱性材料和水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的两种材料中。在该方法中，药物和两种碱性材料一次剧烈混合。例如，80％或以上的药物以两种碱性材料的化合比例分散。这里，水可吸收的但水不溶的碱性材料为两种碱性材料总量的60％重量时，48％重量或以上的药物以粘合水可吸收的但水不溶的碱性材料的状态分散，不与碱性材料粘合的药物均匀分散。在这种情况下，本发明的作用有时或多或少地降低，因为粘合在水可吸收的并形成凝胶的碱性材料上的量略大于药物更多分散在水可吸收的但水不溶的碱性材料中的情况下所形成的量。
作为制备本发明组合物的另一方法，其中药物不均匀地更多地分散在水可吸收的但水不溶的碱性材料中，可使用下列方法。即，药物为亲脂性时，将药物和水可吸收的但水不溶的碱性材料溶解或分散在有机溶剂如乙醇中，然后将所得溶液或分散液蒸发。从所得粉末中分出具有10-350μm平均粒径的并将水可吸收的并形成凝胶的碱性材料加到所得粉末中，剧烈或轻轻地机械混合。
为了进行第三种制备方法，可将药物、水可吸收的但水不溶的碱性材料和水可吸收的并形成凝胶的碱性材料溶解或分散在水溶液中，冷冻干燥所得溶液或分散液，并粉碎冷冻干燥的固体。使用所得粉末可产生所需组合物。
另外，在第一种和第三种制备方法中，优选地预先调节药物的颗粒径使其至少90％重量的颗粒的直径为10-350μm。
在本发明中，药物不均匀存在的状态可通过下列方法来确定。
即，将药物、水可吸收的但水不溶的碱性材料和水可吸收的并形成凝胶的碱性材料分别用食物添加剂或荧光物质如荧光素的色素染成不同的颜色。
例如，药物是白色粉末，用色素如Blue No.1将水可吸收的但水不溶的碱性材料染色，同时使用与染水可吸收的但水不溶的碱性材料不同的色素将水可吸收的并形成凝胶的碱性材料染成不同的颜色。即，水可吸收的但水不溶的碱性材料用Blue No.1染色时，水可吸收的并形成凝胶的碱性材料用Red No.3或Yellow No.4染色并且这些颜色能够通过肉眼观察来将主药和碱性材料彼此区分开来。可以使用下列方法染色。将水可吸收的但水不溶的碱性材料浸没在色素的水溶液中，搅拌混合物并放置，然后将所得混合物过滤或将混合物的溶剂蒸发至干直到获得有颜色的碱性材料。至于水可吸收的并形成凝胶的碱性材料来说，将色素溶于有机溶剂如乙醇中，碱性材料加到所得溶液中并将溶剂蒸发至干直到获得有颜色的碱性材料。将所得的膜状的碱性材料粉碎成大小符合要求的颗粒。
具体来说，水可吸收的但水不溶的碱性材料用Blue No.1染色，并且水可吸收的并形成凝胶的碱性材料用Red No.3染色。使用白色粉末主药和有色碱性材料，按上文所述制备方法制备本发明的组合物。将少量所得的组合物放置在载玻片上并在具有100-1000放大倍数(如500倍)透镜的显微镜下观察样本。由此，确定几乎全部白色主药都被粘合在蓝色的水可吸收的但水不溶的碱性材料上，而几乎没有粘合到红色的水可吸收的并形成凝胶的碱性材料上，即主药是不均匀粘合的，并以粘合水可吸收的但水不溶的碱性材料为主。
而且，通过第二种和第三种制备方法中的冷冻干燥，可获得药物被包括在碱性材料中的组合物。
本发明的组合物通过非冷冻干燥药物与碱性材料的方法来制备时，优选的是预先处理药物以便使至少90％重量颗粒的颗粒径在10-350μm的范围内。
这里，制备本发明组合物中的机械混合可以通过如容器旋转型混合器(如双壳混合器、交叉旋转混合器或双谷(corn)混合器)、容器固定型混合器(如通用混合器、螺条混合器、自动研钵或球磨)或另一类型的混合器(如高速混合器或高效自动混合器)来进行。本发明的机械混合也包括使用研钵的手工压缩混合。
在上述混合中，剧烈混合表示使用研钵的手工混合、使用容器固定型混合器(如通用混合器、螺条混合器、自动研钵或球磨)的机械混合或使用高速混合器或高效自动混合器等的机械混合。通过这些类型的混合，药物主要粘合在碱性材料上并且以粘合状态均匀混合。另一方面，轻轻混合表示使用容器旋转型混合器(如双壳混合器、交叉旋转混合器、双谷(corn)混合器或无球的球磨)的混合，并且在轻轻混合中，药物的主要部分均匀分散和混合而没有与碱性材料粘合。
另外，除上述第一和第三种制备方法外，本发明的鼻腔给药粉末组合物可以通过规定碱性材料的粒径来制备。例如，通过下列步骤来制备：(ⅰ)调节粒径，使至少90％重量的水可吸收的但水不溶的碱性材料的粒径为10-350μm，(ⅱ)调节水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的粒径，使其至少90％重量颗粒的颗粒径为10-105μm，和(ⅲ)使水可吸收的但水不溶的碱性材料的平均粒径大于水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的平均粒径。
特别是，至少90％重量的水可吸收的但水不溶的碱性材料的平均颗粒径为10-250μm并且至少90％重量的水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的平均颗粒径为10-105μm的状态是优选的，因为这种状态的组合物能够增加最大血药浓度。至少90％重量的水可吸收的但水不溶的碱性材料的平均颗粒径为10-250μm并且至少90％重量的水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的平均颗粒径为10-65μm的状态是特别优选的，因为这种状态的组合物能够进一步增加最大血药浓度。在这两种情况下，水可吸收的但水不溶的碱性材料的平均粒径均大于水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的平均粒径。
这里，可以通过使用试验筛并用手和机械振动来将颗粒分类而确定至少90％重量的碱性材料的颗粒的平均粒径为10-250μm的状态。即，至少90％的颗粒通过具有250μm孔的筛并且保留在具有10μm孔的筛上。同时振动筛时，以合适的间隔测量各个筛上的粉末的重量，当粉末重量在0.1％或更小的范围内变化时，完成了颗粒的筛分。
另外，水可吸收的但水不溶的碱性材料的平均粒径大于水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的平均颗粒径的状态是两种碱性材料的平均粒径均在上述范围之内并且同时水可吸收的但水不溶的碱性材料的平均粒径大于水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的平均粒径的状态。
水可吸收的但水不溶的碱性材料的平均粒径大于水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的平均粒径的本发明鼻腔给药粉剂组合物可通过本领域粉剂的常规制备方法来制备，如将主药、水可吸收的但水不溶的碱性材料和水可吸收的并形成凝胶的碱性材料进行机械混合。
然而，通过上述第一到第三种制备方法来制备本发明的粉剂组合物是优选的，因为通过它们生产的粉剂组合物可达到极高的效果。
作为本发明的水可吸收的但水不溶的碱性材料和水可吸收的并形成凝胶的碱性材料，只要与本发明的目的不矛盾，可使用具有上述特性的和含有一种特定的碱性材料(已知作为鼻腔给药粉剂组合物有用的碱性材料，如淀粉或结晶纤维素)的微球。这里，优选使用具有上述大小范围粒径的微球。
本发明使用的药物的量(治疗有效量)取决于各个药物的种类、疾病的种类和严重性、病人的年龄和体重等。总而言之，其范围是从药物的注射剂量到药物注射剂量的20倍，优选从注射剂量到注射剂量的10倍。
另外，药物与碱性材料(水可吸收的但不溶的碱性材料和水可吸收的并形成凝胶的碱性材料的总量)的比不能作不加区别地规定，因为可用于鼻腔的量是有限的并且药物的量取决于治疗剂量。然而，基于1重量份的药物计算，碱性材料的量优选1重量份或以上，特别优选5重量份或以上并且更优选10重量份或以上。
为了改善本发明组合物的特性、外观或气味，可根据需要含有本身已知的润滑剂、粘合剂、稀释剂、着色剂、防腐剂、抗菌剂、矫味剂等。下面列举这些添加剂的例子：滑石、硬脂酸、硬脂酸盐、蜡等作为润滑剂；淀粉、糊精等作为粘合剂；淀粉、乳糖等作为稀释剂；Red No.2等作为着色剂；抗坏血酸等作为防腐剂；对羟基苯甲酸酯等作为抗菌剂和甲醇等作为矫味剂。
为了给予本发明的组合物，将其配制成符合要求的给药剂型。作为给药剂型，为含有给药剂量的组合物的胶囊。胶囊中的组合物通过合适的装置而被喷入鼻腔中。而且，本发明的组合物以单剂量或多剂量置于合适的容器中，并且一次剂量的组合物可以通过一次或分次给药。工业应用领域：
因此，本发明提供一种与常规的鼻腔给药组合物相比在鼻腔吸收作用上显著的并且能够显示极大地增加最大血药浓度的鼻腔给药粉剂组合物，甚至对于高水溶性的药物、高亲脂性药物或大分子量的肽/蛋白质药物也是如此。
不仅对于昂贵的肽/蛋白质药物而且对于非肽/非蛋白质药物也是如此，与相同剂量的常规组合物相比，本发明的鼻腔给药的粉剂组合物产生极高的最大血药浓度，因此使用的药物可相对减少。该组合物也可减少血药浓度的波动并稳定地获得所需的药物效果。
另外，本发明的鼻腔给药粉剂组合物在吸收作用上和血药浓度的持久性上都是极好的，类似于常规的鼻腔给药的粉剂组合物。然而，与常规组合物不同的是，本发明组合物不需要具有刺激作用的吸收刺激剂，是安全的并预计能稳定地实现所需的治疗作用。
所以，本发明对于通过给予非注射型药物的药物治疗来说具有极其深远的意义。
实施例
下列实施例和对比实施例用来更具体地说明本发明。然而，不应当将这些实施例理解为用来限定本发明的范围。
在下列实施例中，结晶纤维素有时用微晶纤维素来表示，并缩写为CC，羟基丙基纤维素缩写为HPC。〔实施例1-4和对比实施例1-5〕
将150mg具有表1所示组成的碱性材料成分(CC+HPC)加到在研钵中的10mg倍氯米松二丙酸盐(由SICOR公司生产，一种抗炎甾体化合物)之中并混合，然后将0.16mg的硬脂酸镁作为润滑剂加到混合物中来制备粉剂组合物(实施例1-4和对比实施例1-5)。
本文所使用的微晶纤维素(Asahi Kasei公司生产的Avicel PH101)至少90％重量的平均粒径为100-250μm。本文所使用的羟丙基纤维素(Nippon Soda公司生产的HPC-H)至少90％重量的平均粒径为10-100μm。
用粉末喷雾器(Teijin公司生产的Puvlizer)，将以上制备的各组合物给到雄性日本种白兔(体重2.5-3.0kg)的鼻腔中，组合物剂量为2mg/kg。给药后，定时从耳静脉采取血样，通过RIA测定血中倍氯米松二丙酸盐的浓度水平，结果显示于表1中。
当羟丙基纤维素与碱性材料总量的比在5-40％重量范围内时，与不合羟丙基纤维素(对比实施例1)相比，组合物显示较高的最大血药浓度，并且当该比例在30-40％重量范围内时，组合物(实施例3或4)显示特别高的血药浓度。这些结果表明，本发明组合物显示吸收作用有极大的改善并且最大血药浓度有明显的增加。表1给予各组合物后血中倍氯米松二丙酸盐浓度随时间的变化过程 (pg/ml)CC*HPC*15分钟30分钟45分钟60分钟90分钟实施例1 95 5 100 140 120 90 40实施例2 80 20 100 160 140 100 50实施例3 70 30 105 160 180 120 60实施例4 60 40 105 160 200 140 80对比实施例1 100 0 95 130 100 60 20对比实施例2 50 50 80 100 120 80 40对比实施例3 40 60 70 90 90 70 40对比实施例4 20 80 35 40 30 15 10对比实施例5 0 100 20 25 25 20 15*：CC和HPC栏中的数表示重量比。(只要没有特别的说明，在下列表格中使用相同的表达方式)
在实施例1-4得到的组合物中，药物按照碱性材料的比例不均匀地分散在CC中。〔实施例5-8和对比实施例6-10〕
将200mg具有表2所示的各个碱性材料成分(CC+HPC)加到在球磨中的100mg甲氧氯普胺(由SIGMA公司生产，一种止吐药)之中并混合，然后将0.30mg的硬脂酸镁作为润滑剂加到混合物中来制备粉剂组合物(实施例5-8和对比实施例6-10)。本文所使用的微晶纤维素(Asahi Kasei公司生产的Avicel PH101)至少90％重量的平均粒径为50-350μm。本文所使用的羟丙基纤维素(Nippon Soda公司生产的HPC-H)至少90％重量的平均粒径为10-100μm。
用粉末喷雾器(Teijin公司生产的Puvlizer)，将以上制备的各组合物给到雄性日本种白兔(体重2.5-3.0kg)的鼻腔中，组合物剂量为3mg/kg。给药后，定时从耳静脉采取血样，通过HPLC测定血中甲氧氯普胺的浓度(ng/ml)，结果显示于表2中。当羟丙基纤维素与碱性材料总量的比在5-40％重量范围内时，与不含羟丙基纤维素(对比实施例6)相比，本发明组合物显示较高的最大血药浓度，并且当该比例在30-40％重量范围内时，组合物(实施例7或8)显示特别高的血药浓度。这些结果表明，本发明组合物显示吸收作用有极大的改善并且最大血药浓度有显著的增加。表2给予各组合物后血中甲氧氯普胺浓度随时间的变化过程 (ng/ml) CC HPC 30分钟60分钟90分钟120分钟240分钟实施例5 95 5 15 35 40 30 20实施例6 80 20 20 40 50 35 25实施例7 70 30 30 60 80 70 50实施例8 60 40 30 60 75 60 45对比实施例6 100 0 15 30 35 20 10对比实施例7 50 50 10 20 20 15 5对比实施例8 40 60 10 15 15 15 5对比实施例9 20 80 5 10 15 10 10对比实施例10 0 100 5 5 10 5 0
在实施例5-8的组合物中，药物按照碱性材料的比例不均匀地分散在CC中。〔实施例9-11和对比实施例11-15〕
将200mg表3所示的各种碱性材料成分(CC+HPC)加到10mgleuprolide乙酸盐(由Bachem公司生产，一种促黄体激素)之中并混合，然后将0.21mg的硬脂酸镁作为润滑剂加到混合物中来制备粉剂组合物(实施例9-11和对比实施例11-15)。通过在研钵中粉碎冷冻干燥的产物来制备leuprolide乙酸盐，使得至少90％重量的颗粒径在10-150μm的范围内。本文所使用的微晶纤维素(Asahi Kasei公司生产的Avicel PH101)至少90％重量的平均颗粒径为50-350μm。本文所使用的羟丙基纤维素(Nippon Soda公司生产的HPC-H)至少90％重量的平均颗粒径为10-100μm。
用粉末喷雾器(Teijin公司生产的Puvlizer)，将以上制备的各组合物给到雄性日本种白兔(体重2.5-3.0kg)的鼻腔中，组合物剂量为2.5mg/kg。给药后，定时从耳静脉采取血样，通过RIA测定血中leuprolide乙酸盐的浓度(ng/ml)。同时作为参考实施例1，给予leuprolide乙酸盐的水溶液。结果显示于表3中。
当羟丙基纤维素与碱性材料总量的比在5-30％重量范围内时，与不含羟丙基纤维素(对比实施例11)相比，组合物显示较高的最大血药浓度，并且当该比例在20-30％重量范围内时，组合物(实施例10或11)显示特别高的血药浓度。这些结果表明，本发明组合物显示吸收作用有极大的改善并且最大血药浓度有明显的增加。表3给予各组合物后血中leuprolide乙酸盐浓度随时间的变化过程 (ng/ml)CC HPC15分钟30分钟45分钟60分钟90分钟120分钟180分钟实施例9 95 5 70 100 110 95 70 60 45实施例10 80 20 80 130 140 120 85 70 60实施例11 70 30 85 135 145 130 105 95 80对比实施例11 100 0 35 40 50 40 40 20 10对比实施例12 60 40 40 50 50 45 40 30 25对比实施例13 50 50 40 45 50 50 45 40 30对比实施例14 25 75 35 45 45 50 45 40 30对比实施例15 0 100 15 20 20 20 20 15 10参考实施例1 - - 0 5 10 5 0 0 0
另外，以相应于上述实施例9-11的组合物的量，将药物和各个微晶纤维素成分(CC)加到100ml纯水中并分散或溶解，将所得分散液或溶液冷冻干燥。所得固体在研钵中粉碎并将颗粒分类以便使至少90％重量的平均颗粒径在50-350μm的范围内。然后，向分类后的颗粒中加入羟丙基纤维素，通过高速混合器混合混合物并加入润滑剂来制备粉剂组合物。
在获得的实施例9-11的组合物中，药物以不均匀分散到水可吸收的但水不溶的碱性材料中的状态存在。
实施例9-11的各个粉剂组合物在给予后45分钟时获得100ng/ml或以上的极高最大血药浓度。〔实施例12-14和对比实施例16-21〕
将150mg表4所示的各种碱性材料成分(CC+HPC)加到在研钵中的0.10mg鲑精组蛋白降钙素(由Bachem公司生产，一种降钙素)之中并混合，然后将0.16mg的硬脂酸镁作为润滑剂加到混合物中来制备粉剂组合物(实施例12-14和对比实施例16-21)。通过在研钵中粉碎冷冻干燥的产物来制备鲑精组蛋白降钙素，使得至少90％重量的粒径在10-150μm的范围内。本文所使用的微晶纤维素(Asahi Kasei公司生产的Avicel PH101)至少90％重量的平均粒径为50-350μm。本文所使用的羟丙基纤维素(Nippon Soda公司生产的HPC-H)至少90％重量的平均粒径为10-100μm。
用粉末喷雾器(Teijin公司生产的Puvlizer)，将以上制备的各组合物给到雄性日本种白兔(体重2.5-3.0kg)的鼻腔中，组合物剂量为0.6mg/kg。给药后，定时从耳静脉采取血样，通过RIA测定血中鲑精组蛋白降钙素的浓度(pg/ml)。同时作为参考实施例2，给予鲑精组蛋白降钙素的水溶液。结果显示于表4中。
当羟丙基纤维素与碱性材料总量的比在5-20％重量范围内时，与不含羟丙基纤维素(对比实施例16)相比，本发明组合物显示较高的最大血药浓度，并且当该比例在10-20％重量范围内时，组合物(实施例13或14)显示特别高的血药浓度。这些结果表明，本发明组合物显示吸收作用有极大的改善并且最大血药浓度有明显的增加。表4给予各组合物后血中鲑精组蛋白降钙素浓度随时间的变化过程 (pg/ml) CC HPC15分钟30分钟45分钟60分钟90分钟120分钟180分钟实施例12 95 5 25 50 45 35 25 15 5实施例13 90 10 30 80 70 50 40 20 10实施例14 80 20 30 70 75 65 55 35 20对比实施例16 100 0 5 25 40 20 10 0 0对比实施例17 70 30 5 20 15 15 5 5 0对比实施例18 60 40 5 15 15 15 10 5 5对比实施例19 50 50 0 5 10 10 5 5 5对比实施例20 25 75 0 5 5 5 0 0 0对比实施例21 0 100 0 5 5 5 0 0 0参考实施例2 - - 0 5 5 0 0 0 0
另外，以相应于上述实施例12-14的组合物的量，将药物和各个微晶纤维素成分(CC)加到100ml纯水中并分散或溶解，将所得分散液或溶液冷冻干燥。所得固体在研钵中粉碎并将颗粒分类以便使至少90％重量的平均颗粒径在50-350μm的范围内。然后，向分类后的颗粒中加入羟丙基纤维素，并通过双壳混合器混合混合物并加入润滑剂来制备粉剂组合物。
在获得的实施例12-14的组合物中，药物以不均匀分散到水可吸收的但水不溶的碱性材料中的状态存在。
实施例12-14的各个粉剂组合物在给予后30-45分钟时获得50pg/ml或以上的极高最大血药浓度。〔实施例15-17和对比实施例22-27〕
将240mg表5所示的各种碱性材料成分(CC+HPC)加到在研钵中的10mg人生长激素(由Bachem公司生产，一种生长激素)之中并混合，然后将0.25mg的硬脂酸镁作为润滑剂加到混合物中来制备粉剂组合物(实施例15-17和对比实施例22-27)。通过在研钵中粉碎冷冻干燥的产物来制备人生长激素，使得至少90％重量的颗粒径在10-150μm的范围内。本文所使用的微晶纤维素(Asahi Kasei公司生产的Avicel PH101)至少90％重量的平均颗粒径为50-350μm。本文所使用的羟丙基纤维素(Nippon Soda公司生产的HPC-H)至少90％重量的平均颗粒径为10-100μm。
用粉末喷雾器(Teijin公司生产的Puvlizer)，将以上制备的各组合物给到雄性日本种白兔(体重2.5-3.0kg)的鼻腔中，组合物剂量为2.5mg/kg。给药后，定时从耳静脉采取血样，通过RIA测定血中人生长激素的浓度。同时，作为参考实施例3，给予人生长激素的水溶液。结果显示于表5中。当羟丙基纤维素与碱性材料总量的比在5-20％重量范围内时，与不含羟丙基纤维素(对比实施例24)相比，本发明组合物显示较高的最大血药浓度，并且当该比例在10-20％重量范围内时，组合物(实施例16或17)显示特别高的血药浓度。这些结果清楚表明，本实施例的组合物显示吸收作用有极大的改善并且最大血药浓度有明显的增加。表5给予各组合物后血中人生长激素浓度随时间的变化过程 (ng/ml)CCHPC15分钟中30分钟45分钟60分钟90分钟120分钟180分钟实施例15 95 5 15 35 25 20 15 10 5实施例16 90 10 25 70 55 35 25 10 5实施例17 80 20 25 60 75 55 35 25 15对比实施例22 100 0 10 20 15 10 5 0 0对比实施例23 70 30 5 15 15 10 5 5 0对比实施例24 60 40 5 10 15 15 10 5 5对比实施例25 50 50 0 5 10 10 5 5 0对比实施例26 25 75 0 5 5 10 5 0 0对比实施例27 0 100 0 5 5 0 0 0 0参考实施例3 - - 0 5 0 0 0 0 0〔实施例18-26和对比实施例28-36〕
使用表6所示的两种碱性材料制备组合物(实施例18-26)，它们均含有leuprolide乙酸盐(由Bachem公司生产)作为主药并且两种碱性材料之间的重量比(即水可吸收的但水不溶的碱性材料与水吸收的并形成凝胶的碱性材料的比)为80∶20。在与实施例9-11相同的条件下，将组合物给予兔子。另外，通过使用表中所示的碱性材料制备对比实施例28-36的组合物并给予兔子。本文所使用的水可吸收的但水不溶的碱性材料至少90％重量的平均颗粒径为50-350μm并且所使用的水可吸收的并形成凝胶的碱性材料至少90％重量的平均颗粒径为10-100μm。
其样品所获得的最大血药浓度和时间显示在表6中。显然实施例18-26获得极高的最大血药浓度而对比实施例28-36与本发明组合物相比在吸收作用上是好的但在最大血药浓度上是低的。表6给予各组合物后leuprolide乙酸盐的最大血药浓度和时间 水可吸收的 但水不溶的 碱性材料水可吸收的并形成凝胶的碱性材料最大血药浓度(pg/ml)最大血药浓度的时间(分钟)实施例18 α-纤维素 HPC 120 45实施例19 交联的 CMCNa 同上 125 45实施例20 交联的淀粉 同上 100 30实施例21 明胶 同上 120 45实施例22 酪蛋白 同上 110 40实施例23 黄蓍胶 同上 105 30实施例24 聚乙烯吡咯 烷酮 同上 90 30实施例25 壳多糖 同上 115 45实施例26 脱乙酰壳多 糖 同上 125 45对比实施例28 羟基丙基淀 粉 同上 65 30对比实施例29 羧基甲基淀 粉 同上 50 30对比实施例30 直链淀粉 同上 60 30对比实施例31 支链淀粉 同上 55 30对比实施例32 果胶 同上 75 30对比实施例33酪蛋白钠 同上 70 30对比实施例34阿拉伯胶 同上 60 30对比实施例35葡甘露聚糖 同上 55 30对比实施例36交联聚丙烯酸钠 同上 60 30〔实施例27-30和对比实施例37-42〕
使用表7所示的两种碱性材料制备类似于实施例27-30的组合物，它们均含有leuprolide乙酸盐(由Bachem公司生产)作为主药并且两种碱性材料之间的重量比(即水可吸收的但水不溶的碱性材料与水吸收的并形成凝胶的碱性材料的比)为80∶20。在与实施例9-11相同的条件下，将组合物给予兔子。另外，通过使用表中所示的碱性材料以实施例27-30相同的方式制备对比实施例37-42的组合物并给予兔子。表7所示的水可吸收的但水不溶的碱性材料至少90％重量的平均颗粒径为50-350μm，并且水可吸收的并形成凝胶的碱性材料至少90％重量的平均颗粒径为10-100μm。
样品所获得的最大血药浓度和时间显示在表7中。显然实施例27-30获得极高的最大血药浓度，而对比实施例37-42与本发明组合物相比在吸收作用上是好的，但在最大血药浓度上是低的。表7给予各组合物后leuprolide乙酸盐的最大血药浓度和时间水可吸收的但水不溶的碱性材料水可吸收的并形成凝胶的碱性材料最大血药浓度(pg/ml)最大血药浓度的时间(分钟)实施例27微晶纤维素羟基丙基甲基纤维素 120 45实施例28同上甲基纤维素 115 45实施例29同上羟基乙基纤维素 95 30实施例30同上羧基甲基纤维素钠 125 45对比实施例37 同上聚丙烯酸钠 70 30对比实施例38同上聚丙烯酸钾 65 30对比实施例39同上聚乙二醇 50 30对比实施例40同上聚乙烯吡咯烷酮 55 30对比实施例41同上直链淀粉 55 30对比实施例42同上支链淀粉 60 30〔实施例31-57〕
对于表8中所示的每个药物来说，都使用碱性材料制备粉剂组合物，其中羟基丙基纤维素与羟基丙基纤维素和微晶纤维素总量的比为5％、10％、20％、30％、40％或50％重量比，并将组合物给予兔子。使用与上文实施例相同的方法，通过放射活性确定药物的血液浓度。而且，对于表中所示的各个药物来说，也仅仅使用微晶纤维素作为碱性材料制备粉剂组合物，并将组合物给予兔子。本文所使用的微晶纤维素至少90％重量的平均颗粒径为50-350μm，并且本文所使用的羟丙基纤维素至少90％重量的平均颗粒径为10-100μm。
表8中显示了使用含有羟基丙基纤维素和微晶纤维素的碱性材料成分制备的组合物的最大血药浓度与使用仅仅含有微晶纤维素的碱性材料成分制备的组合物的最大血药浓度(=1.0)的相对值。由这些结果清楚可见，在非肽/非蛋白质药物情况下，羟基丙基纤维素与碱性材料总量的比为5-40％重量时，组合物在最大血药浓度上有极大的增加，当比例为30-40％重量时，最大血药浓度得到尤其大的增加。在具有不低于500但低于1500分子量的肽/蛋白质药物情况下，羟基丙基纤维素的比例为5-30％重量时，组合物在最大血药浓度上有极大的增加，当比例为20-30％重量时，最大血药浓度得到尤其大的增加。在具有不低于1500且不高于3000分子量的肽/蛋白质药物情况下，羟基丙基纤维素的比例为5-20％重量时，组合物在最大血药浓度上有极大的增加，和当比例为10-20％重量时，最大血药浓度得到尤其大的增加。表8给予含各药物的组合物后最大血药浓度的相对值 药物种类最大血药浓度的相对值5* 10 20 30 40 50实施例 31 4-14C-睾丸素2.3 2.5 2.7 3.5 3.1 1.8实施例 32 N-甲基-3H-他莫昔芬2.0 2.2 2.6 3.2 3.0 1.6实施例 33 N-甲基-3H-东莨菪碱22 2.6 3.0 3.2 3.1 1.4实施例 34 4-3H-普萘洛尔HCl2.0 2.4 2.6 3.6 3.0 1.5实施例 35 1,2,6,7-3H-黄体酮2.0 2.4 2.8 3.8 3.2 1.8实施例 36 6,7-3H-雌二醇2.4 2.8 3.1 4.0 3.5 1.3实施例 37 O-甲基-3H-褪黑激素2.0 2.2 2.2 2.8 3.0 1.2实施例 38 3H-丙咪嗪2.6 2.6 2.9 3.2 2.8 0.9实施例 39 7,8-3H-多巴胺2.1 2.5 2.7 3.0 3.0 1.8实施例 40 2-14C-地西泮2.2 2.4 2.8 3.5 3.0 1.5实施例 41 1,2,4-3H-地塞米松2.5 3.0 3.2 5.0 4.2 0.6实施例 42 N-甲基-3H-西咪替丁2.2 2.4 2.8 3.0 3.0 1.8实施例 43 3,5-3H-脑啡肽(MW=556)2.0 2.1 2.2 2.5 1.4 0.4实施例 44 3-125I-ACTH3-9(MW= 1068)2.0 2.2 2.4 2.6 1.8 1.1实施例 45 2,8-125I-加压素(MW= 1208)2.2 2.6 3.0 2.5 1.6 0.8实施例 46 125I-水蛭素55-65(MW =1412)2.1 2.2 2.5 2.5 1.2 0.4实施例 47 1251I-sandostatin(MW= 900)2.4 2.4 2.8 2.6 1.3 0.4实施例 48 2-125I-催产素(MW= 1131)2.22.2 2.6 3.0 1.8 1.0实施例 49 8-125I-舒缓激肽(MW= 1200)2.0 2.1 2.8 2.8 2.2 1.2实施例 50 125I-胰岛素(MW=6000)1.8 2.0 1.4 1.2 1.1 0.6实施例 51 125I-胰高血糖素(MW= 3606)2.6 2.8 2.1 1.4 1.2 0.2实施例 52 125I-人生长激素(MW= 21500)2.8 2.2 1.8 1.2 1.0 0.1实施例 53 125I-人生长激素释放因子 (MW=5040)2.22.6 2.0 1.2 1.0 0.4实施例 54 125I-人前房促尿钠排泄肽4- 28(MW=2724)3.6 4.0 2.4 1.8 1.2 0.8实施例 55 1-125I-人甲状旁腺素1- 34(MW=4194)4.0 2.8 2.0 1.4 1.2 0.6实施例 56 125I-重组人白细胞介素- 2(MW=15000)3.0 2.2 2.0 1.4 1.2 0.1实施例 57 125I-重组人γ干扰素 (MW=17200)2.8 2.0 1.8 1.2 1.0 0.2 *HPC比(％)〔实施例58-60和对比实施例43-48〕
将分别为140mg和60mg，粒径已预先调到表9所显示大小的微晶纤维素(Asahi Kasei公司生产的Avicel PH101)和羟丙基纤维素(NipponSoda公司生产的HPC-H)加到10mg雌二醇二丙酸酯(由Wako Junyaku公司生产，一种性激素)之中并混合，然后将0.21mg的硬脂酸镁作为润滑剂加到混合物中来制备粉剂组合物(实施例58-60和对比实施例43-48)。
用粉末喷雾器(Teijin公司生产的Puvlizer)，将以上制备的各组合物给到雄性日本种白兔(体重2.5-3.0kg)的鼻腔中，组合物剂量为2mg/kg。给药后，定时从耳静脉采取血样，通过RIA测定血中雌二醇二丙酸酯的浓度。结果显示于表9中。当微晶纤维素(水可吸收但水不溶的碱性材料)90％重量的颗粒径为50-350μm并且羟丙基纤维素(水可吸收且可形成凝胶的碱性材料)90％重量的颗粒径为10-100μm时，与对比实施例组合物(对比实施例43-48)相比，组合物(实施例58)显示较高的最大血药浓度。此外，当微晶纤维素(水可吸收但水不溶的碱性材料)90％重量的颗粒径为50-350μm并且羟丙基纤维素(水可吸收且可形成凝胶的碱性材料)90％重量的颗粒径为20-50μm(实施例59)和当微晶纤维素(水可吸收但水不溶的碱性材料)90％wt的颗粒径为100-250μm并且羟丙基纤维素(水可吸收且可形成凝胶的碱性材料)90％重量的颗粒径为20-50μm(实施例60)时，两实施例的组合物显示更高的最大血药浓度。这些结果清楚表明，本实施例的组合物显示吸收作用有极大的改善并且最大血药浓度有明显的增加。表9给予各组合物后血中雌二醇二丙酸酯浓度随时间的变化过程 (ng/ml)CC HPC 15分钟30分钟45分钟60分钟90分钟120分钟180分钟实施例58 50- 350 10- 100 15 55 65 50 35 20 15实施例59 50- 350 20- 50 15 65 75 60 45 20 15实施例60 100- 250 20- 50 25 60 75 55 40 25 15对比实施例43 20- 150 20- 150 5 25 30 30 25 10 5对比实施例44 100- 350 20- 150 10 20 30 30 25 15 5对比实施例45 20- 50 100- 250 0 10 10 5 5 0 0对比实施例46 10- 50 100- 250 5 15 25 15 10 5 0对比实施例47 150- 250 100- 250 5 15 10 5 5 0 0对比实施例48 20- 150 100- 250 5 25 35 20 15 5 0〔实施例61-63和对比实施例49-54〕
将分别为120mg和30mg，粒径已预先调到表10所显示大小的微晶纤维素(Asahi Kasei公司生产的Avicel PH101)和羟丙基纤维素(Nippon Soda公司生产的HPC-H)加到10mg鲑精组蛋白降钙素(由Bachem公司生产，一种降钙素)之中并混合。然后将0.16mg的硬脂酸镁作为润滑剂加到混合物中来制备粉剂组合物(实施例61-63和对比实施例49-54)。
用粉末喷雾器(Teijin公司生产的Puvlizer)，将以上制备的各组合物给到雄性日本种白兔(体重2.5-3.0kg)的鼻腔中，组合物剂量为0.6mg/kg。给药后，定时从耳静脉采取血样，通过RIA测定血中鲑精组蛋白降钙素的浓度。结果显示于表10中。当微晶纤维素至少90％重量的颗粒径为50-350μm，并且羟丙基纤维素至少90％重量的颗粒径为10-100μm(实施例61)时，与对比实施例组合物(对比实施例49-54)相比，组合物显示较高的最大血药浓度。此外，当微晶纤维素至少90％重量的颗粒径为100-250μm，并且羟丙基纤维素90％重量的颗粒径为10-100μm(实施例62)和当微晶纤维素至少90％重量的颗粒径为100-250μm，并且羟丙基纤维素至少90％重量的颗粒径为20-50μm(实施例63)时，两实施例的组合物显示极高的最大血药浓度。这些结果清楚表明，本实施例的组合物显示吸收作用有极大的改善并且最大血药浓度有明显的增加。另一方面，当微晶纤维素和羟丙基纤维素至少90％重量的平均颗粒径为20-150μm(对比实施例49)时，与仅仅含有微晶纤维素的组合物(对比实施例54)相比，组合物显示稍长的持久性但在最大血药浓度上不显示任何区别。当微晶纤维素至少90％重量的平均颗粒径为20-50μm并且羟丙基纤维素至少90％重量的平均颗粒径为100-250μm(对比实施例51)时，该组合物的最大血药浓度比仅仅含有微晶纤维素的组合物(对比实施例54)低的多。表10给予各组合物后血中鲑精组蛋白降钙素浓度随时间的变化过程 (pg/ml)CC HPC 15分钟30分钟45分钟60分钟90分钟120分钟180分钟实施例61 50- 350 10- 100 30 70 75 65 55 35 20实施例62 100- 250 10- 100 30 75 85 75 65 35 20实施例63 100- 250 20-50 25 75 90 85 65 40 25对比实施 例49 20- 150 20- 150 5 25 40 30 25 10 5对比实施 例50 100- 350 20- 150 10 25 35 35 25 15 5对比实施 例51 20- 50 100- 250 0 5 10 5 0 0 0对比实施 例52 10- 50 100- 250 5 15 10 5 5 0 0对比实施 例53 150- 250 100- 250 5 25 30 25 10 5 0对比实施 例54 20- 150 - 5 25 40 20 10 0 0〔实施例64和65和对比实施例55-57〕
将160mg微晶纤维素(由Asahi Kasei公司生产的Avicel PH101，调整到至少90％重量比颗粒的平均颗粒径为50-350μm)和40mg的羟基丙基纤维素(由Nippon Soda公司生产的HPC-H，调整到至少90％重量比颗粒的平均颗粒径为10-100μm)加到10mg leuprolide(Bachem公司生产)中并混合。然后，将0.21mg的硬脂酸镁作为润滑剂加到混合物中来制备粉剂组合物(实施例64和65和对比实施例55-57)。这里所使用的羟基丙基纤维素在2％水溶液中的粘度为2.0-2.9cps(对比实施例55)，3.0-5.9cps(对比实施例56)，6.0-10.0(对比实施例57)，150-400cps(实施例64)和1000-4000cps(实施例65)。
用粉末喷雾器(Teijin公司生产的Puvlizer)，将各组合物(实施例64和65和对比实施例55-57)给到雄性日本种白兔(体重2.5-3.0kg)的鼻腔中，组合物剂量为2.5mg/kg。给药后，定时从耳静脉采取血样，通过RIA测定血中leuprolide的浓度。结果显示于表11中。显然，当羟基丙基纤维素的粘度为150cps或以上时，药物的吸收作用有极大的改善并且最大血药浓度有较高的增加。表11给予各组合物后leuprolide的血液浓度随时间的变化过程 (ng/ml) HPC粘度(cps)* 15分钟30分钟45分钟60分钟90分钟120分钟180分钟实施例64 150-400 70 100 130 95 70 50 20实施例65 1000-4000 60 120 130 100 65 45 15对比实施例55 2.0-2.9 35 60 50 40 40 20 10对比实施例56 3.0-5.9 40 65 50 45 30 25 20对比实施例57 6.0-10.0 35 35 50 40 40 35 25*：为2％水溶液的粘度〔实施例66和对比实施例58-60〕
将羟基丙基纤维素(由Nippon Soda公司生产的HPC)和微晶纤维素(由Asahi Kasei公司生产的Avicel PH101)分别以19mg和171mg的量(两种碱性材料至少90％重量颗粒的平均颗粒径均如表12所示)加到10mg的亲水性多糖FITC-葡聚糖(由Sigma公司生产，平均分子量为4400，是一种肽/蛋白质药物的模拟化合物)中，并混合来制备粉剂组合物(实施例66和对比实施例58和59)，或仅仅加入190mg的微晶纤维素(由Asahi Kasei公司生产的Avicel PH101)并混合(对比实施例60)。
用粉末喷雾器(Teijin公司生产的Puvlizer)，将以上各组合物给到雄性日本种白兔(体重3.0kg)的鼻腔中，组合物剂量为4mg/kg。给药后，定时从耳静脉采取血样，通过HPLC测定血中FITC-葡聚糖(FD4)的浓度(ng/ml)。结果显示于图1中。
由该图清楚可见微晶纤维素(水可吸收的但水不溶的碱性材料)与11％重量比(基于微晶纤维素计算)羟基丙基纤维素(水可吸收的并形成凝胶的碱性材料)组合比单独使用微晶纤维素作为碱性材料成分在最大血药浓度上有所改善并且羟基丙基纤维素的平均颗粒径为38-50μm的本发明的组合物在最大血药浓度上有进一步的明显的增加。表12各个碱性材料90％重量或以上的颗粒的颗粒径范围(μm) CC HPC实施例66 38-150 38-50对比实施例58 38-150 38-150对比实施例59 38-150 150-350对比实施例60 38-150 -〔实施例67和68和对比实施例61-63〕
将羟基丙基纤维素(由Nippon Soda公司生产的HPC)和微晶纤维素(由Asahi Kasei公司生产的Avicel PH101)分别以100mg和400mg的量(两种碱性材料至少90％重量颗粒的平均颗粒径均如表13所示)加到5mg的5-羧基-荧光素(由Sigma公司生产，分子量为376.3，是一种低分子量药物的模拟化合物)中来制备粉剂组合物(实施例67和68和对比实施例61-63)。
用粉末喷雾器(Teijin公司生产的Puvlizer)，将以上各组合物给到雄性日本种白兔(体重2.5kg)的鼻腔中，组合物剂量为2.5mg/kg。给药后，定时从耳静脉采取血样，通过HPLC测定血中5-羧基-荧光素的浓度。结果显示于表13中。
表13表明本发明组合物在化合物的血药浓度上有显著的改善。表13给予各个组合物后5-羧基-荧光素的血液浓度随时间的变化过程 (ng/ml)CC HPC5分钟15分钟30分钟45分钟60分钟90分钟实施例67 38-150 38-63 8.6 13.8 12.1 9.4 6.6 4.3实施例68 38-150 63-105 10.7 14.7 15.7 10.0 8.3 6.3对比实施例61 38-150 38-150 11.3 9.7 8.1 6.0 4.4 4.0对比实施例62 38-150 105- 150 6.6 6.5 6.5 5.5 4.4 2.7对比实施例63 38-150 150- 250 3.1 5.7 6.0 3.7 2.6〔实施例69-71和对比实施例64和65〕
使用鲑精组蛋白降钙素(由Bachem公司生产，一种降钙素)、微晶纤维素(Asahi Kasei公司生产的Avicel PH101，其至少90％重量比颗粒的平均颗粒径已调到10-350μm)和羟丙基纤维素(Nippon Soda公司生产的HPC，其至少90％重量比颗粒的平均颗粒径已调到10-350μm)通过下列方法来制备组合物(实施例69-71和对比实施例64和65)。
在研钵中，先将0.10mg的鲑精组蛋白降钙素和120mg的微晶纤维素混合，并将30mg羟基丙基纤维素加到所得混合物中，然后通过球磨混合(实施例69)。0.10mg的鲑精组蛋白降钙素和120mg的微晶纤维素加到100ml水中进行分散，将所得分散液冷冻干燥。在研钵中将所得固体粉碎，并将粉碎的物质过筛使至少90％重量颗粒的平均颗粒径为10-350μm，将30mg羟基丙基纤维素加到研钵中的所得颗粒中，并进行混合(实施例70)。在球磨中，一次混合0.10mg的鲑精组蛋白降钙素、120mg的微晶纤维素和30mg羟基丙基纤维素(实施例71)。在研钵中，混合0.10mg的鲑精组蛋白降钙素和30mg羟基丙基纤维素，然后将120mg的微晶纤维素加到所得混合物中，通过球磨混合(对比实施例64)。将0.10mg的鲑精组蛋白降钙素和30mg羟基丙基纤维素溶于100ml水中并将所得溶液冷冻干燥。在研钵中将所得固体粉碎并将粉碎的物质过筛，使至少90％重量颗粒的平均颗粒径为10-350μm，然后将120mg微细纤维素加到所得颗粒中并在球磨中混合(对比实施例65)。
用粉末喷雾器(Teijin Co.生产的Puvlizer)，将通过这些方法制备的各组合物(实施例69-71和对比实施例64和65)给到雄性日本种白兔(体重2.5-3.0kg)的鼻腔中，组合物剂量为0.6mg/kg。给药后，定时从耳静脉采取血样，通过RIA测定血中鲑精组蛋白降钙素的浓度。结果显示于表14中。由表14清楚可见当给予本发明的组合物(实施例69-71)时，最大血药浓度有极大的增加，但给予对比实施例64和65的组合物时，未观察到这种极大的增加。表14给予各个组合物后鲑精组蛋白降钙素血液浓度随时间的变化过程 (pg/ml)15分钟30分钟45分钟60分钟90分钟120分钟180分钟实施例69 30 70 75 65 55 35 20实施例70 30 75 85 75 65 55 40实施例71 25 55 60 45 35 25 15对比实施例64 5 25 40 30 25 10 5对比实施例65 5 15 20 10 5 0 0〔实施例72-74和对比实施例66和67〕
使用5-羧基-荧光素(由Sigma公司生产)作为一种低分子量药物的模拟化合物、微晶纤维素(Asahi Kasei公司生产的Avicel PH101，其至少90％重量比颗粒的平均颗粒径已调到10-150μm)和羟丙基纤维素(Nippon Soda公司生产的HPC-H，其至少90％重量比颗粒的平均颗粒径已调到10-350μm)通过下列方法来制备粉剂组合物(实施例72-74和对比实施例66和67)。
称重5mg的5-羧基-荧光素、350mg的微晶纤维素和150mg的羟基丙基纤维素并通过高速混合器一次混合(实施例72)。称重5mg的5-羧基-荧光素和350mg的微晶纤维素并置于研钵中，然后，将150mg的羟基丙基纤维素加到所得混合物中，并通过交叉旋转的混合器进行混合(实施例73)。将5mg的5-羧基-荧光素和350mg的微晶纤维素溶解或分散在10ml纯水中，将所得溶液或分散液冷冻干燥。将所得固体粉碎，并将所得粉末过筛使至少90％重量颗粒的平均颗粒径为10-350μm。从所得颗粒中称取280mg，并将120mg羟基丙基纤维素加到其中并用无球的球磨进行混合(实施例74)。
分别称取5mg的5-羧基-荧光素、350mg的微晶纤维素和150mg的羟基丙基纤维素并通过无球的球磨一次混合(对比实施例66)。将5mg的5-羧基-荧光素和150mg的羟基丙基纤维素溶解或分散在10ml纯水中，并将所得溶液或分散液冷冻干燥。将所得固体粉碎，并将粉碎的物质过筛使至少90％重量颗粒的平均颗粒径为10-350μm。从所得颗粒中称取90mg，并加入210mg微晶纤维素，通过无球的球磨进行混合(对比实施例67)。
用粉末喷雾器(Teijin公司生产的Puvlizer)，将通过这些方法制备的各组合物给到雄性日本种白兔(体重2.5kg)的鼻腔中，组合物剂量为7.5mg/kg。给药后，定时从耳静脉采取血样，通过HPLC测定血中5-羧基-荧光素的浓度。结果显示于表15中。由表15清楚可见当给予本发明的组合物(实施例72-74)时，观察到最大血药浓度有极大的增加，但给予对比实施例的组合物时，未观察到这种极大的增加。表15给予各个组合物后5-羧基-荧光素血液浓度随时间的变化过程 (ng/ml)15分钟30分钟45分钟60分钟90分钟实施例72 12.9 8.5 6.1 4.1 2.2实施例73 10.3 9.8 9.0 8.2 5.6实施例74 10.7 8.3 6.2 4.6 2.7对比实施 例66 5.1 4.8 3.8 3.0 2.1对比实施例67 3.5 4.0 4.2 3.5 2.2〔实施例75-77和对比实施例68和69〕
使用荧光素(由Wako Junyaku公司生产，即一种亲水低分子量药物的模拟化合物)、微晶纤维素(Asahi Kasei公司生产的Avicel PH101，其至少90％重量比颗粒的平均颗粒径已调到10-350μm)和羟丙基纤维素(Nippon Soda公司生产的HPC-H，其至少90％重量比颗粒的平均颗粒径已调到10-350μm)通过下列方法来制备粉剂组合物(实施例75-77和对比实施例68和69)。
称重5mg的荧光素、400mg的微晶纤维素和100mg的羟基丙基纤维素，并通过高效自动混合器一次混合(实施例75)。在研钵中，混合5mg的荧光素和400mg的微晶纤维素，然后，将100mg的羟基丙基纤维素加到所得混合物中，并通过无球的球磨混合器进行混合(实施例76)。将5mg的荧光素和400mg的微晶纤维素溶解或分散在10ml乙醇中，并将溶剂蒸发至干。将所得固体粉末再粉碎并将所得颗粒过筛使颗粒的平均颗粒径为10-350μm。从所得颗粒中称取320mg，然后将80mg羟基丙基纤维素加到其中，并用无球的球磨进行混合(实施例77)。
分别称取5mg的荧光素、400mg的微晶纤维素和100mg的羟基丙基纤维素，并通过无球的球磨一次混合(对比实施例68)。将5mg的荧光素和100mg的羟基丙基纤维素溶解或分散在10ml乙醇中，并将溶剂蒸发至干。将所得膜状物粉碎并将粉末过筛使颗粒的平均颗粒径为10-350μm。从所得颗粒中称取80mg，然后，加入320mg微晶纤维素，通过无球的球磨进行混合(对比实施例69)。
用粉末喷雾器(Teijin公司生产的Puvlizer)，将通过这些方法制备的各组合物给到雄性日本种白兔(体重2.5kg)的鼻腔中，组合物剂量为7.5mg/kg。给药后，定时从耳静脉采取血样，通过HPLC测定血中荧光素的浓度。结果显示于表16中。由表16清楚可见，当给予本发明的组合物(实施例75-77)时，观察到最大血药浓度有极大的增加，但给予对比实施例的组合物时，未观察到这种极大的增加。表16给予各个组合物后荧光素血液浓度随时间的变化过程 (ng/ml)15分钟30分钟45分钟60分钟90分钟实施例75 11.2 8.5 7.1 4.8 3.2实施例76 12.3 9.8 9.0 8.2 5.6实施例77 15.7 18.3 13.2 8.6 5.7对比实施 例68 7.1 5.8 4.3 3.5 2.8对比实施 例69 2.8 3.6 3.6 3.0 1.8