解除支气管痉挛的新化合物及其制备方法.pdf

    本发明是关于具有治疗活性的新化合物、它们的制备方法、含有它们的药物制剂以及它们的医药应用。具体地讲，本发明的化合物具有解除支气管痉挛的作用，并且对治疗各种原因造成的可逆梗阻性肺疾病，特别是哮喘有作用。当该化合物具有适当的立体化学构型时，它在吸入后可延长它的治疗作用，并可减少付作用，特别是减少对心脏的刺激作用。

    人们需要发现比从市场购得的物质有更持久活性的支气管扩张剂。较持久的活性可使哮喘病人在夜间和早晨这段哮喘病通常最历害的时候有充分的防护作用。目前用于吸入治疗疾病的支气管扩张剂药物（如芬忒醇、舒喘灵、间羟叔丁肾上腺素和双甲苯喘定）通常的活性期仅为4-6小时，这样不可在夜间（以在床上时间计）有充分的防护作用。Kass，I.和Mingo，T.S.在Chest        1980，78：283“A        new        longacting        bronchodilator        with        reduced        chronotopic        effects”上叙述了双甲苯喘定。US.4，072，760上描述了与本发明化合物结构密切相关的化合物，但是仅有很短的作用。

    人们在努力得到文献上所报告的有效持久活性的消除支气管痉挛的活性化合物，如formoterol，salmeterol。但是，问题是应发现消除支气管痉挛的活性化合物，该化合物的细微颗粒的气雾剂吸入后，具有至少12小时的临床上有用的持久活性。还要求这些化合物能与肺组织牢固的粘结，这样仅有少量的活性化合物漏入到通常的有机或无机酸接触来制备。适当的有机酸的实例是乙酸、富马酸、柠檬酸、酒石酸、马来酸、琥珀酸和苯甲酸。适当的无机酸的实例是盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸。

    本发明化合物具有较低的不希望的心血管付作用。新化合物的药理学活性和活性的持续时间都大大地取决于在苯基乙醇胺链上苄基立体化碳原子和在氮上取代基的立体化碳原子立体化学构型。因此，最佳的药理学作用仅由在苄基位置上R-构型所得，最佳的活性持续是由氮上取代基S-构型所得。

    较好的本发明化合物是如下化合物：

    式（Ⅹ）中R₁和R₂形成-OCH₂-O-或-O-CF₂-O-;

    R₃是H或CH₃;

    R₅是H;以及

    R₆是OCH₃。

    特别好的本发明化合物是1-[（4-羟基）-3-（对甲氧基苄基氨基）-苯基]-2-[（1-甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基）乙基）氨基]乙醇的外消旋体（R，S+S.R异构体）和外消旋体（R，R+S，S异构体）。

    最好的本发明化合物是1-（R）-（4-羟基）-3-（对甲氧基苄基氨基）苯基-2-[（1-（S）-甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基）乙基）氨基]乙醇异构体。

    制备方法

    式（Ⅹ）化合物是如下制备的，即先使式（Ⅴ）的4-苄氧基-3-硝基-氧化苯乙烯与式（Ⅵ）化合物反应得到式（Ⅶ）化合物;

    

    式中：R₁、R₂和R₃如上所定义，R₄是H或下式基团，

    

    的体循环中。这样可大大地减少了全身付作用，如心悸和震颤。

    已发现新的式（Ⅹ）化合物及其可药用盐活性很高，并且有持久的消除支气管痉挛的活性，特别是肺部局部给药时如吸入化合物的气雾或喷雾制剂后更有效。

    

    式中：

    R₁和R₂可相同或不同，分别是H、OH、OCH₃、OC₂H₅、卤素或R₁和R₂一起形成-O-CH₂-O-或-O-CF₂-O-链;

    R₃是H或CH₃;

    R₅是H或-CO-R₇;

    R₆是H、OH、OCH₃、OC₂H₅或卤素;

    R₇是有1-16个碳原子的直链或支链烷基、芳基、-NH-CH₃或N（CH₃）₂。

    在上述化合物（Ⅹ）中，芳基是有3-8个碳原子，最好是6个碳原子的基团;卤素是氟、氯或溴。本发明的可药用的盐特别是指酸加成盐。它们通常是将可形成这种盐的化合物与适当的生理上可接受式中：R₁、R₂、R₃和R₄如上所定义;

    然后，氢化式（Ⅶ）化合物直接得到式（Ⅸ）化合物或经由式（Ⅷ）化合物得到式（Ⅸ）化合物;

    

    接着，使式（Ⅸ）化合物与下式化合物以及PtO₂/C、或Pd/C和氢一起反应，

    

    其中：R₆如上所定义，式（Ⅹ）中R₅是H，R₁、R₂、R₃和R₆如上所定义;得到其中R₅为H而R₁、R₂、R₃及R₆如上所定义的式（Ⅹ）化合物，可以是纯异构体或是各种量的可能立体异构体的混合物，如下式所述;一般制备方法

    

    

    方法A

    该方法用于制备纯立体异构体和仅在苄基位置上构型不同的差向异构体。（R₁、R₂和R₆如上所定义）

    

    

    

    方法B

    该方法用于制备外消旋体和外消旋体的混合物。（R₁、R₂、R₃和R₆如上所定义）

    

    起始化合物的制备

    胺类Ⅵ

    方法C

    纯对映异构体的制备

    适当取代的1-苯基-2-丙酮与R-或S-甲基-苄基胺反应，然后用阮内镍还原亚胺，分别得到纯R，R-或S，S-胺。

    R₁和R₂如上所定义。

    

    方法D

    外消旋胺类Ⅵ的制备

    适当取代的苯甲醛与硝基烷反应，然后还原得到胺。

    R₁、R₂和R₃如上所定义。

    反应式

    

    

    环氧化物

    按照Kaiseo等人在J.Med.Chem.17，49（1974）中所述方法制备外消旋4-苄氧基-3-硝基氧化苯乙烯。

    实例1（根据方法A的制备）

    1-（R）-（4-羟基-3-（甲氧基苄基氨基）苯基）-2-（（1-（S）-甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基）乙基氨基-乙醇（Ⅹ）

    1-（4-苄氧基-3-硝基苯基）-2-（N-甲基苄基-1-甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基））乙基氨基-乙醇（Ⅶ）（R，S，S-和S，S，S-异构体）

    将23.9克（88毫摩尔）4-苄氧基-3-硝基-氧化苯乙烯（Ⅴ）和24.9克（88毫摩尔）（S，S）-N-1-苯乙基-1-（1，3-苯并二噁茂-5-基）-2-丙胺（Ⅵ）在150℃和氮气下搅拌15小时，粗产物溶解在乙酸乙酯中，加入浓盐酸，蒸发掉溶剂，得到固状盐酸盐粗品，用乙酸乙酯重结晶，得到17.3克S，S，S-和R，R，R异构体（85/15）。浓缩母液得到29克粗的R，S，S-和S，S，S-异构体（70/30）。将浓缩的母液闪式层析（石油醚/乙酸乙酯（2.5/1），硅胶）得到21.3克70/30的异构体混合物。用多次闪式层析或用MeCN/硅胶层析分别得到纯异构体R，S，S和S，S，S。

    NMR;（R，S，S异构体，CDCl₃）;

    7.85（d，1H），7.54-6.33（m，15H），5.87（m，2H），5.23（s，2H），4.58（dd，1H），4.08（q，1H），3.06-2.54（m，4H），2.09（dd，1H），1.50（d，3H），0.96（d，1H）.

    （S，S，S-异构体;

    7.79（d，1H），7.47-6.28（m，15H），5.89（dd，2H），5.23（s，2H），4.40（dd，1H），4.08（q，1H），3.18（m，1H，2.84-2.39（m，4H），1.44（d，3H），1.01（d，3H）.

    按此方法制备R，R，R-和S，R，R-异构体。

    1-（4-苄氧基-3-氨基苯基）-2-（N-甲基苄基-1-甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基））乙基氨基-乙醇（Ⅷ）（R，S，S-和S，S，S-异构体）

    将10.8克（20毫摩尔）相应地硝基化合物（R，S，S，/S，S，S比例为70/30）溶解在250毫升甲醇中，加入23克（100毫摩尔）SnCl·2H₂O，该溶液加热至60℃。用50分钟时间分批加入400毫克NaBH₄。在60℃下再搅拌40分钟，将溶液浓缩至150毫升，然后加入350毫升0.5NNaOH水溶液，再加入200毫升乙醚，用更多的乙醚提取水相，干燥并蒸发，得到7.9克油状产物，层析（MeCN/硅胶）得到4.5克纯R，S，S异构体和1.5克S，S，S异构体

    NMR（R，S，S异构体，CDCl₃）;

    7.46-6.33（m，16H），5.87（d，2H），5.09（s，2H），4.54（dd，1H），4.08（q，1H），3.05-2.02（m，5H），1.50（d，3H），0.97（d，3H）.

    （S，S，S-异构体）;

    7.43-6.25（m，16H），5.85（d，2H），5.05（s，2H），

    4.38（dd，1H），4.08（q，1H），3.11（m，1H），2.81-2.36（m，4H），1.41（d，3H），0.95（d，3H）.

    R，S，S-异构体的一盐酸盐的制备是将0.58毫升乙酰氯与甲醇（180毫升）反应，再加入碱（4.5克），蒸发。用乙醚洗涤后，得到4.3克一盐酸盐。这样可制得S，R，R-异构体和R，R，R-异构体。（R）-1-（3-氨基-4-羟基苯基）-2-[（S）-1-甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基）乙基氨基]乙醇（Ⅸ）。

    将4.3克（8毫摩尔）前述的盐酸盐化合物（R，S，S-异构体）溶解在75毫升甲醇中。加入0.3克10%Pd/C，混合物在40PSi下氢化5小时，过滤甲醇溶液，将该溶液用于下步反应中。用类似的方法制备（Ⅸ）的S，S，S-，R，R，R-和S，R，R-异构体。

    1-（R）-（4-羟基-3-（对甲氧基苄基氨基）苯基）-2-[（1（S）-甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基）乙基）氨基]乙醇（Ⅹ）

    将2毫升（16毫摩尔）茴香醛加入到前面制得的（Ⅸ）的R，S，S-异构体的甲醇溶液中，回流30分钟后，加入30毫克PtO₂，混合物在50PSi下氢化1.5小时。得到2.3克粗产物（纯度为90%）。层析CHCl₃/硅胶）该碱，加入H₂SO₄/EtOH得到1.2克纯（Ⅵ），为它的硫酸盐。

    NMR（R，S-异构体，DMSO）;

    7.3-6.40（m.10H），5.99（s，2H），4.52（d，1H），4.23（s，2H），3.71（s，3H），3.08（bs，1H），2.89-2.44（m        and        DMSO），0.99（d，3H）.

    类似地可制备（Ⅹ）的S，S-，S，R-的R，R-异构体。

    NMR（S，S-异构体）;

    7.31-6.42（m，10H），5.98（s，2H），4.53（m，1H），4.26（s，2H），3.74（s，3H），3.1（m，1H），2.90-2.45（m        and        DMSO），1.02（d，3H）.

    实例2（按照方法B的制备）

    1-（4-羟基-3-（对甲氧基苄基氨基）苯基-2-[（1-甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基）乙基）氨基]乙醇的外消旋体（R，S+S，R异构体）的制备方法。

    1-（4-苄氧基-3-（硝基氨基）-2-（（1-甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基））乙基）氨基-乙醇（Ⅶ）（R，R-，R，S-S，S-和S，R-异构体的各种混合物）

    1.4克（5毫摩尔）（R/S）-4-苄氧基-3-硝基氧化苯乙烯和1.1克（6毫摩尔）（R/S）-1-（3，4-亚甲二氧基苯基）-2-氨基-丙烷（Ⅵ）在10毫升甲醇中回流20小时，蒸发掉甲醇后，粗的异构体混合物溶解在乙醚中，结晶R，S-和S，R-异构体，得到0.4克外消旋体。（除去R，R-和S，S-异构体）

    NMR（CDCl₃）;

    7.8（d，1H），7.5-6.5（m，10H），5.9（s，2H），5.2（s，2H），4.6（dd，1H），3.0-2.5（m，5H），1.2（d，3H）.

    氢化（Pd/C在EtOH中）外消旋体得到相应氨基酚（Ⅸ）。然后按照前述方法与茴香醛反应，得到前述化合物（Ⅹ）的外消旋（R，S-+S，R-异构体），从前述的除去异构体的（Ⅶ）混合物中制备R，R-+S，S-异构体混合物。

    式（Ⅹ）化合物的一般制备方法

    将相应的硝基化合物（Ⅶ）的盐酸盐溶解在乙醇中，加入10%Pd/C，在室温和50PSi下氢化4-20小时，过滤掉催化剂，加入苯甲醛或对甲氧基苯甲醛，回流1小时后，加入PtO₂在1个大气压下氢化5-24小时或在50PSi下氢化45分钟，粗盐酸盐用醚洗涤，将碱溶解于乙酸乙酯中，以氯仿/甲醇（10/2）为洗脱剂进行硅胶柱层析纯化。然后，将纯碱转化成盐酸盐或硫酸盐。

    实例3

    1-（4-羟基-3-苄基氨基-苯基-2-（1-甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基）-乙基氨基）-乙醇（Ⅹ）

    （R，S+S，R+R，R+S，S混合物）

    用2.4克硝基化合物Ⅶ，0.7克Pd/C，1.1克苯甲醛和40毫克PtO₂制得1.2克盐酸盐。

    NMR：（DMSO-D₆为溶剂和标准样品）d;7.4-6.4（m，11H），6.01（s，2H），5.90（d，1H），5.35（bs，1H），4.72（m，1H），4.35（s，2H），3.37（s，3H），3.1-2.9（m，4H），1.10（d，3H）.

    实例4

    1-（4-羟基-3-对甲氧基苄基氨基-苯基）-2-（1-甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基）-乙基氨基）-乙醇（Ⅹ）（R，S+S，S混合物）

    用5.2克硝基化合物Ⅶ，0.5克Pd/C，3.0克对甲氧基苯甲醛和50毫克PtO₂制得1.0克盐酸盐。

    NMR：（同上）d;7.28（d，2H，7.0-6.5（m，8H），4.6（m，1H），4.22（2H），3.74（9H），3.7-2.8（m），1.2（d，3H）.

    实例5

    1-（4-羟基-3-对甲氧基苄基氨基-苯基）-2-（1，1-二甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基）-乙基氨基）-乙醇（Ⅹ）（R/S外消旋体）

    用5.0克硝基化合物Ⅶ，0.3克Pd/C，4.9克对甲氧基苯甲醛和30毫克PtO₂制得3.1克盐酸盐。

    NMR：（同上）d;7.3（d，2H），6.9-6.4（m，8H），6.0（s，2H），5.93（m，1H），5.24（bs，1H），4.73（bd，1H），4.25（s，2H），3.70（s，3H），3.37（s，2H），2.89（bm和s，5H），1.19（s，3H）.

    实例6

    1-（4-羟基-3-对甲氧基苄基氨基-苯基）-2-（1-甲基-2-（对甲氧基苯基）-乙基氨基）-乙醇（Ⅹ）

    （R，S+S，S混合物）

    用7.7克硝基化合物Ⅶ，0.3克Pd/C，6.5克对甲氧基苯甲醛和30毫克PtO₂制得0.6克硫酸盐。

    NMR：（同上）d;7.28（d，2H），7.14-6.36（m，11H），5.12（bs，1H），4.52（m，1H），4.22（s，2H），3.72（2d，6H），3.4-2.5（m，incl.DMSO），1.0（d，3H）.

    实例7

    1-（4-羟基-3-对甲氧基苄基氨基-苯基）-2-（1-甲基-2-苯基乙基氨基）-乙醇（Ⅹ）

    用2.5克硝基化合物Ⅶ，制得260毫克硫酸盐。

    NMR：（同上）d;7.4-6.4（m，12H），5.15（s，1H），4.59（bs，1H），4.22（s，2H），3.70（s，3H），3.2-2.5（m，incl        DMSO），1.0（dd，3H）.

    表1        本发明化合物（Ⅹ）的总汇

    

    

    

    下面给出了制备列于表2化合物的具体实例：

    化合物S8

    N-1-（S）-苯乙基-1-苯基-2-（S）-丙胺

    13.4克（0.1摩尔）苯基丙酮和10.9克（S）-苯乙胺在200毫升苯中用迪安-斯达克装置进行回流3小时。蒸发掉溶剂后，将残余物溶解在乙醇中。加入阮内镍，在50PSi下氢化过夜。产物用丙酮或乙醇重结晶盐酸盐而纯化，产率为8.1克（碱形式）。

    NMR：（CDCl₃，TMS为标准样品）d;7.33-7.06（m，10H），3，92（1，1H），2.87（dd，1H），2.75（六重峰.1H），2.48（dd，1H），1.29（d，3H），0.90（d，3H）.

    化合物S3

    N-1-（S）-苯乙基-1-（4-甲氧基苯基）-2-（S）-丙胺

    制备方法如上。用16.4克酮和10.9克（S）-1-苯乙胺制得12.5克产物（用硅胶柱层析CHCl₃/甲醇，10/2））。

    化合物S1

    N-1（S）-苯乙基-1-（1，3-苯并二噁茂-4-基）-2（S）-丙胺

    按类似方法用（1，3-亚甲二氧基）-苯基丙酮制备相应的R，R-异构体。

    化合物S5

    1-（3，4-亚甲二氧基苯基）-2-甲基-2-（R/S）-氨基丙烷

    将360克（2.4摩尔）胡椒醛在684克（7.7摩尔）2-硝基丙烷中的溶液在15℃下加到2.4摩尔新制得的甲醇钠的甲醇（360毫升）溶液中，在室温下搅拌过夜，然后加入480毫升5N硫酸。反应混合物倒入水中，有机相用亚硫酸钠处理，用甲苯/己烷重结晶。产量为247克。

    向247克产物的苯溶液中加入141克亚硫酰二氯的苯（250毫升）溶液。回流4小时后，将溶剂和过量的亚硫酰二氯蒸发掉，得到油状的残余物，用异丙醇重结晶。产量为140克。

    将26克（0.1摩尔）该化合物溶于200毫升二噁烷中。加入0.3克Pd/BaSO₄然后在1个大气压和室温下氢化，过滤并蒸发，得到油状残余物，将该残余物溶于乙醇（150毫升）中，加入1克10%Pd/C。在50PSi下氢化过夜，过滤和蒸发后得到产物。重结晶后得到11.5克产物。

    NMR：（盐酸盐在）CDCl₃，标准样品为TMS）d;8.45（-NH₃），6.8-6.6（芳族），5.9（OCH₂O），2.9（-CH₂-），1.4（-CH₃）.

    化合物S6

    1-（3，4-二甲氧基苯基）-2-（R/S）-氨基丙烷

    20克（0.12摩尔）3，4-二甲氧基苯甲醛溶于100毫升硝基甲烷中，加入3毫升丁胺。在迪安-斯达克装置中回流2小时，然后蒸发得到褐色油状物。用异丙醇重结晶得到16.6克产物。

    16.4克（0.07摩尔）硝基苯乙烯滴加到8克氢化铝锂的无水乙醚（1升）溶液中，继续搅拌过夜。后处理后得到黄色油状物，由乙醚/乙醇溶液制得硫酸盐，产量为10.4克（硫酸盐）。

    化合物S4

    1-（3，4-亚甲二氧基苯基）-2-（R/S）-氨基丙烷

    按照Beng        T        Wo等人在J.Med.Chem.，13，26（1970）所述方法制备。

    化合物S7

    类似地制得1-苯基-2-（R/S）-氨基丙烷

    表3        式（Ⅶ）的中间体

    

    下面给出制备列于表3化合物方法的具体实例：

    式（Ⅶ）化合物（其中R₄为H）的一般制备方法

    将4-苄氧基-3-硝基氧化苯乙烯与适当的胺在甲醇中回流过夜或更长时间，用氯仿为洗脱剂在硅胶柱上层析纯化产物。

    1-（4-苄氧基-3-硝基苯基）-2-（1-甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基）-乙基氨基）-乙醇（R，S+S，R外消旋体和R，R+S，S外消旋体）

    上面实例2已述。

    化合物I9

    1-（4-苄氧基-3-硝基苯基）-2-（1-甲基-2-（3，4-二甲氧基苯基）-乙基氨基-乙醇（R，R-，R，S-，S，S-和S，R-异构体的混合物）

    用4.3克胺和5.4克环氧化物制得5.2克油状产物。

    式（Ⅶ）化合物（其中R₄为CH（CH₃）Ph）的一般制备方法

    在干燥氮气下，将胺Ⅵ与4-苄氧基-3-硝基氧化苯乙烯在150℃下加热过夜，粗产物用氯仿为洗脱剂在硅胶柱上层析纯化。

    化合物I5

    1-（4-苄氧基-3-硝基苯基）-2-（N-甲基苄基-N-（1-甲氧基苯基）-2-丙基-氨基）-乙醇（R，S，S-+S，S，S-异构体混合物）

    用5.1克式（Ⅵ）的胺和5.4克环氧化物制得7.7克油状物

    NMR：（CDCl₃和TMS 为标准样品）d;7.86-6.71（m，12H），5.25（s，1H），5.23（s，1H），4.58（m，1/2H），4.37（m，1/2H），4.10（m，2H），3.77（s，1.5H），3.75（s，1.5H），3.78（m，1/2H），3.25-2.40（m，），2.15（m），16（dd，3H），1.0（dd，3H）.

    化合物I6

    1-（4-苄氧基-3-硝基苯基）-2-（N-甲基苄基-N-1-苯基-2-丙基-氨基）-乙醇

    用4.8克式（Ⅵ）的胺和5.4克环氧化物制得2.5克油状物。

    化合物I10

    1-（4-苄氧基-3-硝基苯基）-2-（1，1-二甲基-1-（3，4-亚甲二氧基苯基）-乙基氨基）-乙醇（外消旋体）

    用4.8克式（Ⅵ）的胺和5.4克环氧化物制得7.4克产物。

    NMR：（CDCl₃和TMS为标准样品）d;7.85（d，1H），7.52-6.52（m，H），5.91（s，2H），5.22（s，2H），4.56（dd，1H），2.91（dd，1H），2.58（s，2H），2.56（m，1H），1.04（2s，6H）.

    化合物I1，I2，I3，和I4

    1-（4-苄氧基-3-硝基苯基）-2-（1-甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基）-乙基氨基）-乙醇

    用上述实例1所述方法制备R，R，R-，R，S，S-，S，S，S-和S，R，R-异构体。

    也可按照上述实例1所述的方法制备下面表4的化合物

    表4        式（Ⅷ）中间体

    

    实例        P4        糖浆

    实例1化合物        0.060克

    葡萄糖液体        30.0克

    蔗糖        50.0克

    抗坏血酸        0.1克

    焦亚硫酸钠        0.01克

    乙二胺四乙酸二钠        0.01克

    桔子香精        0.025克

    合法食用色料        0.015克

    纯水        加至100.0毫升

    实例        P5        吸入液

    实例1化合物        0.75克

    焦亚硫酸钠        0.10克

    乙二胺四乙酸二钠        0.10克

    氯化钠        0.85克

    纯水        加至100.0毫升

    实例        P6        用于直肠给药的溶液

    （直肠小瓶）

    实例1化合物        6.0毫克

    焦亚硫酸钠        1.5毫克

    乙二胺四乙酸二钠        0.3毫克

    消毒水        加至3.0毫升

    实例        P7        舌下片剂

    实例1化合物        3.0毫克

    化合物        Ⅷ

    R₁R₂R₃R₄立体化学

    M1 -OCH₂O- H CH（CH₃）Ph R，R，R

    M2 -OCH₂O- H -″- S，R，R

    M3 -OCH₂O- H -″- R，S，S

    M4 -OCH₂O- H -″- S，S，S

    下列实例说明如何将本发明化合物掺入到药物组合物中。

    实例        P1        用于吸入法的气雾剂

    实例        1或2的化合物        0.75克

    脱水山梨糖醇三油酸酯        0.20克

    Frigen^R11/12/114 加至100.0克

    实例        P2        片剂

    每片含有：

    实例1化合物        6.0毫克

    玉米淀粉        78.0毫克

    乳糖        125.0毫克

    Povidone        7.0毫克

    微晶纤维素        13.0毫克

    硬脂酸镁        1.6毫克

    实例P3栓剂

    每栓含有：

    实例1化合物        6.0毫克

    抗坏血酸棕榈酸酯        1.0毫克

    栓剂基物（Imhausen        H）        加至2，000，0毫克

    乳糖        83.0毫克

    蔗糖        87.0毫克

    Acicia        10.0毫克

    滑石        5.0毫克

    硬脂酸镁        1.0毫克

    实例        P8        滴剂

    实例1化合物        0.60克

    抗坏血酸        1.00克

    焦亚硫酸钠        0.10克

    乙二胺四乙酸二钠        0.10克

    葡萄糖液体        50.00克

    无水乙醇        10.00克

    纯水        加至100.0毫升

    实例P9

    将立体化学结构为R，S的实例1化合物微粒化至适于吸入法的粒度。将该物装入到粉末吸入器（牌号为Turbuhaler）中。

    活性物质的常用日剂量可在很大范围内变化，并取决于多种因素，如每个患者的个人需要、给药途径和疾病种类。一般来讲，口服和胃肠外给药剂量为每日0.5-15毫克活性物质。活性物质也可制成含有活性化合物和溴化异丙托品或丁地去炎松结合物的药物制剂。

    药理学评价

    1、用活豚鼠研究解除支气管痉挛的活性持续时间

    A：方法

    处死豚鼠用于研究。将实例1和2的化合物、salmeterol和叔丁喘宁用吸入法或气管滴注法给药，然后将动物在不同的时间间隔后用组胺合剂激发。

    a、吸入法

    将豚鼠放在塑料盒中，将测试化合物在15分钟中连续流动雾化而给药。

    b、气管滴注法

    使动物吸入Efrane而轻微麻醉。将测试化合物用细套管插入到气管叉滴注给药。对照组动物给予盐水。

    c、激发过程

    按照一种上述途径给药后，将动物放在透明的塑料笼中，并用气雾化的组胺激发。在喷雾器中从在3%甘油中含0.5-1.0×10^-3mol/l组胺的溶液产生合剂。该浓度可造成一定的呼吸困难，可在2-3分钟内出现在对照组动物中。这种现象通常用观察来表明，有时也用“失明试验（blinded trial）”来表明或用应变传感器来记录（参见，O.A.T Olsson，Acta Allergologica 26，438，1971）。随着解痉药量的增加，产生了依赖于剂量的动物对组胺引起痉挛的抵抗作用的延长。一旦豚鼠产生了呼吸困难，则将它们从组胺环境中移出，因为，同样的动物不仅要在给药30分钟后而且要在3、6和9小时时暴露于组胺进行试验。

    在一些试验中，动物用乙酰甲胆碱来代替组胺激发，以排除试验化合物抗组胺作用的偶然性。

    B、结果

    β-受体激动剂Salmeterol和叔丁喘宁均用于吸入法中，因此选作本研究的对照化合物，来评价本发明新型β-受体激动剂的解除支管痉挛活性作用的持续时间。

    一般讲，实例1和2的新化合物的初期效力与叔丁喘宁相同，但是大约低于Salmeterol10倍。但是，从等效标准计算，与叔丁喘宁相比，本发明新化合物和Salmeterol的活性持续的时间要长。与Salmeterol相比，新化合物的作用持续时间也似乎要长一些。

    表5所列的化合物是以外消旋混合物形式或一种异构体形式存在的1-（4-羟基）-3-（对甲氧基苄基-氨基）苯基-2-（1-甲基-2-（3，4-亚甲二氧基苯基）乙基）氨基）乙醇。

    表5

    化合物（气管内给药mol/Kg）        在给药后0.5和6小时时药物延迟组

    胺激发的呼吸困难的能力（分钟）

    0.5h        6h

    （R，S+S，R）：1×10^-87 6

    （R，S+S，S）：1×10^-86 5

    （R，R+S，R）：1×10^-77 3

    （R，R）：5×10^-87 3

    （R，S）：5×10^-96 5

    Terbutaline（参比）1×10^-77 2

    盐水（对照）        ≤2        ≤2

    将测试化合物给药后30分钟时滴注量的药物对组胺的激发产生了大约等效的保护作用（6-7分钟）。将试验化合物滴注后6小时时的保护作用的程度表明解除支气管痉挛活性的持续时间。

    Ⅱ        用麻醉的豚鼠研究解除支气管痉挛和对心脏的刺激作用

    本研究的目的是在对麻醉的豚鼠静脉注射或吸入给药后，比较本发明β-受体激动剂与Salmeterol和叔丁喘宁对呼吸痉挛的抑制能力。此外，还评价试验化合物对心率的影响。

    方法

    a、静脉内给药

    将雄性和雌性豚鼠用来研究：麻醉的方法是静脉内给戊巴比妥，做气管插管，用一定容积的呼吸器对动物进行人工换气。用压力传感器来测定气管内压力（ITP）。高于基本压力的表明呼吸痉挛的ITP升高是用每分钟7分钟向颈静脉注入20秒组胺而产生，注入的量能在4-6Kpa下产生ITP峰值。为了测定用药产生的心血管作用，可通过压力传感器来记录颈动脉的血压。表明心率的脉冲波触动了记录心速的血流速度记录仪。

    在组胺注入之前3分钟，注入测试化合物，用气管内压力（ITP）降低的百分数来度量解除支气管痉挛的活性。在累积注射后评价对心率的影响，当上一次注射后心率稳定时再进行下一次注射。

    b、吸入法给药

    将测试化合物喷雾，并将产生的雾气通过呼吸器和气管插管引入动物体内。对每种浓度的测试化合物连续吸入15分钟。用ITP降低的百分数来计算支气管痉挛对心率的影响。在喷雾溶液的浓度累积增加后，测定对心率的影响。在稳定状态测定影响情况，使用三种不同浓度。

    B、结果

    a、呼吸的影响

    使用的三种β-受体激动剂，即本发明实例2化合物、Salmeterol和叔丁喘宁，在注射及吸入后都显示出依赖于剂量的对组胺产生的支气管痉挛的抑制作用。Salmeterol是最有效的，当注射后它的效用至少比其它二种药物高10倍;当吸入后，它的效用约比其它二种药物高5倍。注射5×10^-10mol/Kg Salmeterol、5×10^-9mol/Kgg实例2化合物或1×10^-8mol/Kg叔丁喘宁都可得到约50%ITP的下降。

    b、对心率的影响

    对心率的影响依赖于剂量，主要取决于试验化合物的直接作用，而不是血压变化的结果。不仅可以在静脉内注射后而且可在吸入后说明剂量对心率影响。当注射后，Salmeterol和叔丁喘宁使心率的增加比本发明化合物大，剂量为1×10^-7mol/Kg的Salmeterol和叔丁喘宁使心率提高约30次/分钟。要达到同样的心率提高，本发明化合物的用量至少10倍于这个剂量。吸入5×10^-4mol/lSalmeterol使心率提高15次/分钟。同样的心率提高，需本发明化合物的剂量为5×10^-3mol/l，而叔丁喘宁的作用位于两者之间。

    当药物是注射给药时，本发明实例2化合物和Salmeterol对呼吸系统和心率的作用之间的关系是相同的。但是，用吸入法这个关系就不相同了。在这种情况下，实例2化合物对心率的影响比Salmeterol更小。

    结论

    本发明化合物的作用持续时间长于如叔丁喘宁。此外，它们对心脏的影响要小于Salmeterol。

    目前所知，进行本发明最好的方式是使用化合物1-（R）-（4-羟基）-3-（对甲氧基苄基氨基）苯基-2-[（1-甲基-1（S）-3，4-（亚甲二氧基苯基）乙基）氨基]乙醇。