本发明涉及具有中枢作用性肌肉松弛作用的旋光3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑及其制备方法。 至今，有关具有中枢作用性肌肉松弛作用的化合物的旋光拆分方法，使用旋光拆解试剂的技术是已知的。例如，已公开的日本专利申请NO.40779/1978公开了一种技术，它包括用旋光乙酰基苯基甘氨酸作为拆解试剂将dl-甲苯哌丙酮转化为两种非对映体盐，利用其溶解度不同将这两种非对映体盐相互分开，然后转化为旋光甲苯哌丙酮。此外，已公开的日本专利申请NO.225367/1988和131171/1989公开了一种技术，它包括用旋光乙酰基苯基甘氨酸或旋光苹果酸作拆解试剂分离dl-2-甲基-1-（4-三氟甲基苯基）-3-吡咯烷基-1-丙烷，然后离析旋光2-甲基-1-（4-三氟甲基苯基）-3-吡咯烷基-1-丙烷。
本发明人现今发现3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑具有中枢作用性肌肉松弛作用，且先前递交了涉及此事实的专利申请（已公开的日本专利申请NO.157375/1990）。此后继续进一步研究，作为结果，已发现（+）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑与外消旋体相比具有更值得注意的中枢肌肉松弛作用。然而，已有技术不能有效地旋光拆分3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）-丁酰〕异噁唑。
本发明的目的是通过有效旋光拆分的方法提供（+）3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑。本发明的另一目的是提供优良的中枢肌肉松弛剂。
为解决上述问题，本发明人发现旋光磺酸，特别是旋光10-樟脑磺酸作为拆解试剂是特别有效的，本发明在此认识的基础上完成。
本发明提供了式（1）表示的
（+）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑，制备旋光3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑及其盐的方法，它包括下述步骤：在溶剂中使3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑与旋光磺酸，特别是旋光10-樟脑磺酸反应;从溶剂中主要结晶出所得两种非对映体盐中的一种盐以达到拆分;然后对此相应的非对映体盐进行除盐以分离出旋光3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑。
本发明的制备方法例如可用下面的方法来完成。那就是，将3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑在合适地溶剂中与旋光10-樟脑磺酸反应，制得两种非对映体盐，然后将溶剂浓缩或冷却，或加入另一种能降低溶解度的溶剂，结晶出微溶的非对映体盐，从而分离这种固体。对于所得的旋光3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑和旋光10-樟脑磺酸形成的盐，用合适的碱除盐，以分离出旋光3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑。
对本发明使用的溶剂没有特别的限制，只要此溶剂能溶解3-苯基-5-〔2-（吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑和旋光10-樟脑磺酸并且能形成非对应体盐，在室温至它的沸点间它能溶解易溶的和微溶的非对映体盐，且通过浓缩、冷却或添加另一种溶剂使微溶非对映体盐结晶。这些溶剂较优选的例子包括酮如丙酮、甲基乙基酮、甲基异丁基酮以及醇如甲醇、乙醇、丙醇和异丙醇。这些溶剂特别优选的实例包括乙酸烷基酯如乙酸甲酯，乙酸乙酯和乙酸丁酯。上述所有这些，从拆分收率出发乙酸乙酯是最优选的。
在此情况下，溶剂的量是在3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑量的1.0至50倍（V/W）宽范围内，优选的是在约1至约30倍（V/W）范围内。
对3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑对旋光10-樟脑磺酸的比率没有特别的限制，只要比率是每当量前者对1或大于一当量后者，然而优选的比率是每当量前者1.5至3当量，更优选2当量后者。在此情况下，当使用D-10-樟脑磺酸时，（-）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑作为一种微溶非对映体盐结晶，而当使用L-10-樟脑磺酸时，（+）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑作为一种微溶非对映体盐结晶。
对生成非对映体盐的温度没有特别的限制，但优选室温至50℃。结晶时间从约1至50小时，优选约2至30小时。
此外，结晶温度应低于溶剂的沸点或更低，特别优选在-10至40℃范围内。
上述降低溶解度的其它溶剂的例子包括己烷和醚。
所得非对映体盐除盐优选在0至30℃，在碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸钠、碳酸钾、稀氢氧化钠、稀氢氧化钾、氨或其类似物存在下在水中进行。所使用的碱量应是每当量非对映体盐2当量或更多。
从拆解溶液中分离旋光3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰]异噁唑通过用憎水溶剂萃取它而完成，这些溶剂如醚，乙酸烷基酯，氯仿，二氯甲烷或己烷，然后馏出溶剂。
将旋光3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑转化为酸加成盐可以通过下述方法达到：将旋光3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑溶于醚，乙酸烷基酯，氯仿，二氯甲烷，己烷或类似物;加入1当量或更多，优选1至10当量无机酸如盐酸、硝酸、硫酸，或有机酸如乙酸、草酸、苯磺酸或甲基磺酸，然后馏出溶剂和过量的酸或用过滤的方法收集结晶的旋光3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑盐。另外，上述的转化为酸加成盐还可以通过下述方法达到：用上述无机酸或有机酸萃取旋光3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑的上述有机溶剂溶液，用有机溶剂如氯仿（酸加成盐能溶于其中）再次萃取所得水溶液;从溶液中蒸出溶剂，或者加入有机溶剂如醚，乙酸烷基酯或己烷（旋光3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑的酸加成盐几乎不溶于其中），结晶此酸加成盐，然后过滤收集晶体。
用上述方法可得到的旋光化合物如下：
（+）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑及其盐。
（-）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑及其盐。
对需要药物治疗的每个成年病人，根据所治疗的症状及用药方法，本发明旋光氨基酮衍生物的日剂量通常是由5至1000mg，优选10至300mg。药剂可采用任何形式，胶囊、片剂、粒剂、糖浆和粉剂可口服给药，针剂和栓剂可口服和肠胃外给药。药物添加剂的实例包括赋形剂（乳糖、玉米淀粉、蔗糖、山梨醇、磷酸钙及类似物），粘结剂（糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基纤维素及类似物），上光剂（硬脂酸镁、滑石、聚乙二醇、硅石及类似物），崩解剂（土豆淀粉，羟甲基纤维素及类似物），润滑剂（十二烷基硫酸钠及类似物）。根据药物的剂形可相应地用这些添加剂。
现在，本发明化合物将更详细地在有关的参考例和实施例中叙述。
参考例 1
〔3-苯基-5-丁酰基异噁唑〕
将10g（0.082mol）苯甲醛肟和9g（0.092mol）1-己炔-3-醇溶于50ml二氯甲烷中。将所得反应溶液用冰冷却，向此溶液中滴加58g（0.1mol）12%次氯酸钠水溶液，同时使溶液温度保持在15-25℃。加入完毕后，保持溶液温度在15-25℃，将其搅拌3小时。
将49g（0.079mol）12%次氯酸钠水溶液滴加到反应溶液中。将反应液温度冷至10℃，在20分钟内滴加入吡啶盐酸化物水溶液（由2.8ml 6N盐酸和1.3ml吡啶制得）。将反应液搅拌70分钟，然后向其中滴加49g（0.079mol）12%次氯酸钠水溶液。
将溶液温度冷至10℃，并于10分钟内滴加入吡啶盐酸化物水溶液（由1.4ml 6N盐酸和0.67ml吡啶制得），接着搅拌70分钟。然后向此溶液中滴加49g（0.079mol）12%次氯酸钠水溶液。再将溶液温度降至10℃，类似地加入吡啶盐酸化物水溶液和12%次氯酸钠水溶液。
将100ml5%亚硫酸氢钠水溶液加入经分离反应溶液而得的二氯甲烷层中，接着搅拌30分钟。用100ml水和100ml 1N盐酸水溶液依次洗涤经分离反应溶液而得的二氯甲烷层。加热洗过的二氯甲烷层并浓缩，得到残留物，将此残留物从40ml乙醇中重结晶，从而得到10.6g（产率59.6%）所需的化合物。熔点89-90℃。
参考例 2
〔3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑盐酸化物
将20g（93mmol）3-苯基-5-丁酰基异噁唑和7.93g（111mmol）吡咯烷加入62g甲醇中。向此溶液中滴加9.04（111mmol）37%甲醛水溶液，同时将溶液温度保持在20至30℃。加入结束后，将溶液搅拌1小时，将溶液温度保持在20-30℃。
将178g乙酸乙酯加入所得反应溶液中。再将150g水加入其中，然后进行分离和萃取，得到有机层。将所得有机层用冰冷却，加入178g 2N盐酸水溶液，接着分离和萃取。用180g氯仿萃取所得水层。用120g氯仿再萃取水层，合并所得氯仿层并在无水硫酸钠上干燥。过滤除去硫酸钠，得氯仿液，搅拌下将294g乙酸乙酯滴加入氯仿液中。冰冷却此溶液以沉淀出结晶，然后过滤收集此晶体，用乙酸乙酯洗涤，然后减压干燥，得到20.8g（产率67%）所需无色化合物。
熔点151-153℃。
参考例 3
〔3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑〕
将125g（0.37mol）3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑盐酸化物加入400ml水和300ml乙酸乙酯的混合物中。冰冷却下进一步向此溶液中滴加620ml 6%碳酸氢钠水溶液，以沉淀晶体。
将100ml乙酸乙酯加入此溶液以溶解沉淀出的晶体，接着分离，从而得到乙酸乙酯层。再用500ml乙酸乙酯萃取水层，得到乙酸乙酯层。合并有机层，然后用250ml水和250ml饱和氯化钠溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥乙酸乙酯液，过滤除去硫酸钠。减压浓缩所需滤液至干，从而得到110g（产率98.9%）所得化合物。
熔点68-69℃。
实施例 1
〔（+）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑盐酸化物〕
（1）（+）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑L-10-樟脑磺酸盐
将10g（0.03mol）3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑盐酸化物溶于60ml水和70ml乙酸乙酯的混合物中。向此溶液中滴加72ml6%碳酸氢钠水溶液。将反应液搅拌10分钟，接着分离得到有机层。再用60ml乙酸乙酯萃取水层，将所得有机层与先前得到的有机层合并，然后在无水硫酸钠上干燥此溶液。然后过滤除去硫酸钠，将14.2g（0.06mol）L-10-樟脑磺酸｛〔α〕20D＝21°（C＝2，水）｝加入所得滤液，将其搅拌30分钟以溶解它。冰冷却下将反应液搅拌6小时以沉淀出晶体，过滤收集晶体，用乙酸乙酯洗涤，然后减压干燥，从而得到所需的（+）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑L-樟脑磺酸盐。
产量（重量）9.5g
产率（比率）42%
熔点115.8-116.3℃
〔α〕20D＝-14.4°（C＝0.5，乙醇）
光学纯度98.7%ee
（2）（+）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑盐酸化物
将9.4g（12.3mol）（+）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑L-10-樟脑磺酸盐溶液54ml水和54ml乙酸乙酯的混合物中。向此溶于中滴加30ml10%碳酸钠水溶液。将此反应液搅拌10分钟，接着分离得到有机层。用15ml10%碳酸钠水溶液和15ml水洗涤所得有机层。将28ml 2N盐酸水溶液加入此有机层，接着分离并萃取以得到水层。用15ml 2N盐酸水溶液再萃取有机层，得到水层，将此水层与先前得到的水层合并。将17.6ml氯仿加入合并的水溶液中，接着萃取，得到氯仿层。再用17.6ml氯仿萃取水层，将所得氯仿层与先前得到的氯仿层合并。然后在无水硫酸钠上干燥这样得到的氯仿溶液。然后过滤除去硫酸钠，将106ml乙酸乙酯加到氯仿溶液中。冰冷却下将此溶液搅拌3小时。过滤收集沉淀出的晶体，然后用乙酸乙酯洗涤，从而得到所需的（+）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑盐酸化物。
产量（重量）3.4g
产率（比率）82%
熔点158-159.5℃
〔α〕20D＝+29°（C＝0.5，水）
光学纯度：99.9%ee或更高
NMR（CDCl3，δPPM）;0.99（3H，t，J＝7.3Hz），1.77-1.83（1H，m），1.88-1.97（1H，m），1.98-2.11（2H，m），2.11-2.23（2H，m），2.70-2.78（1H，m），2.79-2.95（1H，m），3.33（1H，m），3.47-3.64（1H，m），3.68-3.71（1H，m），3.83-3.87（1H，m），4.33-4.38（1H，m），7.48-7.50（3H，m），7.76（1H，s），7.87-7.90（2H，m）
元素分析（C18H22N2O2·Hcl）
计算值 C：64.57，H：6.92，N：8.37，Cl：10.59
实测值 C：64.51，H：6.96，N：8.20，Cl：10.42
实施例 2
〔（-）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑盐酸化物〕
（1）（-）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑D-10-樟脑磺酸盐
将10g（33.3mmol）3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑溶于200ml乙酸乙酯中。将11.5g（67mmol）D-10-樟脑磺酸｛〔α〕20D＝+19.9°（C＝2，水）｝加入所得溶液中，接着搅拌30分钟以溶解它。冰冷却下将此溶液搅拌2小时，沉淀出结晶，过滤收集晶体，用乙酸乙酯洗涤，然后减压干燥，从而得到所需的（-）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷甲基）丁酰〕异噁唑D-樟脑磺酸盐。
产量（重量）11.8g
产率（比率）46%
熔点120-121℃
〔α〕20D＝+17°（C＝0.5，乙醇）
光学纯度96%ee
（2）（-）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑盐酸化物
将7.0g（9.2mmol）（-）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑D-10-樟脑磺酸盐溶于40ml水和40ml乙酸乙酯的混合物中。向其中加入22ml 10%碳酸钠水溶液，接着搅拌10分钟。分离反应液，得到有机层。用11ml10%碳酸钠水溶液洗涤得到的有机层。用17ml 2N盐酸水溶液两次萃取有机层，然后合并所得的水层。用12ml氯仿两次萃取水溶液，合并氯仿层。在无水硫酸钠上干燥所得氯仿溶液。过滤除去硫酸钠，向氯仿溶液中滴加72ml乙酸乙酯。然后于室温下将此溶液搅拌1小时，于冰冷却下再搅拌1小时。过滤收集沉淀出的晶体，从而得到需要的（-）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑盐酸化物。
产量（重量）2.5g
产率（比率）81%
熔点145-146℃
〔α〕20D＝-27°（C＝0.5，水）
光学纯度99.85%或更高
NMR（CDCl3，δPPM）;0.99（3H，t，J＝7.3Hz），1.77-1.82（1H，m），1.88-1.98（1H，m），2.06-2.14（2H，m），2.14-2.24（2H，m），2.71-2.73（1H，m），2.81-2.88（1H，m），3.32（1H，bd），3.47（1H，bs），3.61-3.64（1H，m），3.66-3.69（1H，m），4.34-4.40（1H，m），7.48-7.52（3H，m），7.75（1H，s），7.89-7.91（2H，m）
元素分析（C18H22N2O2·HCl）
计算值 C：64.57，H：6.92，N：8.37，Cl：10.59
实测值 C：64.65，H：6.79，N：8.03，Cl：10.81
实施例 3
〔（+）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑盐酸化物〕
在实施例2（1）中过滤收集（-）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑D-10-樟脑磺酸盐时得到滤液，向其中加入54ml水和滴加45ml10%碳酸钠水溶液。搅拌10分钟后，分离反应液得有机层。用20ml10%碳酸钠水溶液洗涤得到的有机层，用20ml水进一步洗涤。将40ml 2N盐酸水溶液加入有机层，接着分离和萃取以得到水层。用30ml2N盐酸水溶液再次萃取有机层得到水层，然后将此水层与先前所得水层合并。将40ml氯仿加入此水溶液中，接着萃取以得到氯仿层。将40ml氯仿加入上述水层，然后萃取此溶液以得到氯仿层，将它与先前得到的氯仿层合并。将这样得到的氯仿液在无水硫酸钠上干燥。过滤除去硫酸钠，然后将240ml乙酸乙酯滴加入此氯仿液。将此溶液于冰冷却下搅拌3小时。过滤收集沉淀出的晶体，然后用乙酸乙酯洗涤，得4.5g（光学纯87%ee）所需（+）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑盐酸化物。将4.5g此盐酸化物溶于40ml氯仿中。将120ml乙酸乙酯滴加入此溶液，接着于冰冷却下搅拌3小时。过滤收集沉淀出的晶体，从而得到所需的（+）-3-苯基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基〕丁酰〕异噁唑盐酸化物。
产量（重量）3.6g
产率（比率）59%
熔点158-159℃
〔α〕20D＝+28°（C＝0.5，水）
光学纯度99.5%ee
评估例
用下面的动物试验证实本发明旋光氨基酮衍生物的中枢作用性肌肉松弛作用，骨胳肌输入放电作用，急性毒性。
1.去大脑强直松弛作用
使用Ono等〔H.Ono等，Gen、Pharmacol.，18，57（1987）〕提出的方法，已经研究了本发明旋光氨基酮衍生物对大鼠大脑射频损伤引起的大脑强直的强直松弛作用。
用乙醚麻醉每只Wistar雄性鼠（体重：300-400g），然后固定在体视频闪观测器上。按照佩菜格利尼体视频闪观测器脑图谱，将损伤脉冲发生器的电极（Radionics Company制造）加强至AP：O，L：±1.5，V：-3。当电极保持触点温度80℃时，施加约25mA的高频电流180秒钟，以使相应于在上丘和下丘之间割切的脑干的左右两部分均遭损伤。将强直的鼠的腹部位置固定，记录后肢伸肌的每次延伸反射的张力。假设用药前的张力为100%，强直抑制率以百分率表示：
（100- (用药后张力)/(用药前张力) ×100）
静脉内施用试验化合物3至6mg/kg。结果列于下表1内。
表1
试验化合物 剂 量 强直抑制
（mg/kg,i.v.) (%)
1.(+)形式 3 59
6 78
2.(-)形式 3 33
6 53
3.外消旋 3 56
6 65
2.对骨胳肌输入的放电作用
在氨基甲酸乙酯和α-氯醛糖混合麻醉下，从每只Wastar鼠（9至10周令，日本鼠）分离出小腿三头肌。除控制小腿三头肌的神经支外，切除所有坐骨神经支。将脊髓进行椎板切除术，切除L6根或更少。接着切除同侧的L4和L5后根并从中枢端分离，切除L4和L5前根以消除高位中枢的影响。从小腿三头肌来的神经纤维仅从L5后根分离。将20克张力加到小腿三头肌末稍端，记录神经的每次发放频率。假设用药前的发放频率是100%，神经的发放频率用百分数表示：
（100- (最大抑制的发放频率)/(用药前的发放频率) ×100）
静脉内施用试验化合物6至12mg/kg。结果列于表2内。
表2
试验化合物 剂 量 发放频率
（mg/kg,i.v.) (%)
1.(+)形式 6 28 12 14
2.(-)形式 6 83
3.外消旋形式 6 46
12 27
3.急性毒性
使用ddy雄性小鼠（体重：25-30g）。每种试验化合物腹膜内给药，72小时后，观检小鼠是活着或死亡。
计算50%死亡剂量LD50（mg/kg）。结果列于下表3。
表3
试验化合物 LD50(mg/kg)
1.(+)形式 386
2.(-)形式 760
3.外消旋形式 445
按照由去大脑强直松弛作用表示的中枢作用性肌肉松弛作用（表1），显然，与外消旋形式和（-）形式相比，（+）形式优良得多。此外，抑制骨胳肌输入放电作用对松弛肌棱的异常张力是很有效的。与外消旋形式和（-）形式相比，（+）形式在抑制骨胳肌输入放电功能方面（表2）更为优秀。涉及急性毒性，（+）形式基本与外消形式相等。因此，很清楚（+）-3-基基-5-〔2-（1-吡咯烷基甲基）丁酰〕异噁唑是很优良的中枢作用性肌肉松弛剂。