本发明申请是申请日为1991年5月1日，申请号07/694，193申请的接续申请。 为了保护所需植物以及它们的产品免遭真菌及细菌病原体的感染，一直需要预防性施用杀真菌剂或杀细菌剂。杀真菌及杀细菌化合物长期以来一直用来增加农作物产量，以及把农业生产能力扩展到新的领域。这些化合物还一直是改善由于气候变化引起的病虫害造成的农作物产量及质量季节性差别的非常重要的工具。
杀真菌剂及杀细菌剂在农业方面的未来的作用逐渐受到一些因素的威胁，包括虫害抗药性增长，对食品安全性越来越多的关注，以及有毒化合物的环境累积效应。由于制定规章的改变，过时的杀真菌剂及杀细菌剂已不在市场销售，新的杀真菌剂及杀细菌剂的注册登记费用越来越贵，因此一直需要找到比较明智地使用余留地非常安全的杀真菌的方法。这对于需担负新化合物登记费用的并不占有广大市场的许多作物/病虫害联合体来说尤为如此。谨慎地使用杀真菌剂和杀细菌剂将包括减少施用率（致使可能的残余物），找到把注册登记的化合物扩展到新作物中去的方法，确定新的杀真菌剂和杀细菌剂组合物以及抵制害虫的抗药性增加的治疗方法。
化学杀真菌剂和杀细菌剂提供了控制虫害的有效方法。但是，公众非常关心食品、地下水及环境中残余化学物质的量。对化学物质使用的严格限制以及市场上不许销售一些有效的杀虫剂则会限制对控制真菌和细菌的经济而有效的选择手段。
本领域技术人员都知道，杀微生物细菌的（杀真菌的和杀细菌的）预防活性及治疗活性之间有明显的区别。能有效地阻止微生物生长的组合物及方法对既成感染极少或没有效果。当然，另人满意的是彻底地阻止感染。但这不总是可能的，因而非常需要有独特效力的抵制既成感染蔓延的组合物。这对于控制收获后农作物的既成感染也一样。
杀真菌的治疗活性是在使用一些生物制剂控制病害（例如枯草杆菌株）时发现的，这种活性通常归因于生物控制有机体产生的抗菌化合物。由于要得到这样一种抗菌化合物需要昂贵的毒理筛选及残余物/代谢产物的检验，所以这些非化学制剂的正常注册登记费用优势减少了。不产生抗菌化合物成份的生物控制剂比较易于登记注册，但它们仅有助于预防控制作用。
病害的生物控制剂的商业化还一直受到作用领域不一致的阻碍。在实验室及温室实验中具有生物控制潜力的有机体运用在室外时，经常竞争不过存在的微生物群落，因此不能显示出它们的微生物控制潜力，更不用说作用方式了。特别需要一种病害控制方法它能把经济而有效地控制病害，高度的食品安全性以及最小的环境污染兼容在一起。
需要控制农作物收获后受损害的例子之一是有关由指状青霉及意大利青霉造成柑桔类水果感染的绿色及兰色霉菌。这些霉菌在贮存及装运期间造成严重损害。要求目前鲜货市场行业完全依靠结合各种化学处理，在相当长的时间内把新鲜水果运到远方市场而不受到这些霉菌的过多破坏。不幸的是，人们对现行用来控制这些真菌病原体的化学物质的安全性越来越关注。而且，随着真菌菌株对最有效化合物的抵抗性，新的问题不断出现。
在另一个例子中，由葡萄白粉病引起的葡萄粉霉即使在干燥地区，如加利福尼亚也能造成严重破坏。这种病害一般通过使用硫元素进行控制，但这需要频繁大量使用刺激性物质。加入抵制麦角甾醇生物合成的杀真菌剂（主要是三唑）大大简化了控制过程，并对耐受菌株也适用。这些化合物的一部分能产生潜在的畸形影响和具有长久的土壤残留量。在这些及其它例子中，需要大量可供选择的控制方法，特别是比较安全或对环境有利的方法。
脂肪酸是一类大量存在于自然界中的，令人感兴趣的和具有有价值生物活性的天然化合物。脂肪酸对许多医学上重要的真菌及细菌的体外抵抗活性是众所周知的。但是，它们的体内抗菌活性经常是非常有限的，在体外实验基础上预测是困难的。关于脂肪酸及其衍生物对农作物病原体的活性的文献很少。Ahmed等人（Ahmed，S.M.，F.Ahmad，S.M.Osman[1985]JAOC62：1578-1580）报导了用植物病原体代表在体外抑制几种真菌属的放射状生长。近来农业上不断增加使用某种脂肪酸的盐之“杀虫皂”。这导致了对真菌病害影响的几点发现。例如，Chas等人（Chase，A.R.，L.S.Osborne[1983]Plant Disease 67：1021-1023）发现，使用18∶1脂肪酸盐“杀虫皂”对两种簇叶植物病害能起到适度的预防控制以及实际上使其它两种病害加剧。在U.S.Patent No.3，983，214中，Misato等人要求保护含有蔗糖脂肪酸酯的杀真菌组合物。Misato等人强调了此组合物的预防活性。类似地，在U.S.Patent No.4，771，571中，Obrero等人描述了一种用表面活性剂处理未采摘的菠萝从而防止菠萝受感染的方法。在U.S.Patent No.4，002，775中，Kabara等人要求保护由1或2-单月桂精多羟基酯组成的杀细菌的食品添加剂。Kabara的研究工作在下列杂志中也有描述，包括：植物类脂类的生态学和代谢作用第14章，美国化学会志（1987）（American Chemical Society（1987））;抗微生物制剂和化学治疗术中的“作物抗微生物制剂的脂肪酸及其衍生物”，美国微生物学会志（1972）第23-28页（American Society for Microbiology（1972）pp.23-28）;“脂肪酸衍生物的抗微生物制剂”，（1984）美国有机化学会志61（2）：397-403（（1984）JAOCS61（2）：397-403）;以及“抗微生物类脂类：天然和合成脂肪酸以及单甘油脂类”，类脂12（9）：753-759（Lipids12（9）：753-759）。另外，还有使用脂肪酸酯及脂肪酸醇控制苹果蓓蕾上的粉霉（Frick，E.L.R.T.Burchill[1972]Plant Disease Reporter 56：770-772），但这项研究工作不涉及脂肪酸本身或它们的盐。大多数抗微生物制剂活性的体外实施包括调节处于化学制剂中的液态或固态的病原体繁殖体的产生和生长。这些检定和在农业环境中运用的预防措施非常相似，这些措施在病原体引起感染之前就采用了。在工业环境中筛选合成化学物质的主要方法几乎都是基于体外及预防性的体内实验。因此，（原文不清楚）
本发明涉及发现了脂肪酸，它们的盐及其衍生物，在适宜浓度范围和时间使用时，对在植物组织之中或之上的既成真菌及细菌感染之根除非常有效。因此，本发明提供了为控制植物病害允许有效施用这些制剂的参照量。
特别地，通过由一种或多种取代的（或未取代的）饱和（或不饱和）脂肪酸（或它们的盐或其衍生物）组成的组合物，既成的真菌及细菌感染能得到有效控制。本发明的脂肪酸可以是大约C7到大约C20的脂肪酸，并且也可以是，例如，环氧化物，内酯，环丙烷，甲基化的，或羟基化的形式。
在这里特别示例的是分别有C9和C18的饱和及单不饱和脂肪酸。使用在此描述的组合物，对既成的真菌感染产生了意想不到的控制效果，其组合物比例及施用率在下文充分给出。这些组合物缺乏预防活性使这一发现出人意料。本发明表明对病害控制缺乏预防活性的同样的脂肪酸显现出优良的治疗控制活性。这一活性在无效力的低剂量和对寄主植物有毒的高剂量之间的浓度范围是有利的。这一关键范围随着酸的形式（游离酸，盐，调配制剂）以及所考虑的寄主/病原体体系的不同而不同，但本领域技术人员可以根据本发明的讲述来确定这一用量。
脂肪酸的抗真菌及抗细菌活性的敏感剂量及计时分布是非常有用的发现。本发明的脂肪酸，它们的盐及其衍生物对根除已感染它们寄主植物的病原体有意想不到的效用。本发明的方法产生了在植物病害控制中非常有价值的治疗活性。
脂肪酸治疗活性的发现还有更重大的意义。因为其效用和化合物的性质一起使得该化合物和其它病害控制剂相结合变得极为有用。因此，脂肪酸和其它病害控制化学物质结合起来是有利的。这样，除了使用脂肪酸（或它们的盐或其衍生物）作为控制既成的细菌感染的单一产品外，本发明的第二个主要的实施例就是脂肪酸（或它们的盐或其衍生物）和生物控制制剂结合的联合治疗处理。目前，活性生物控制制剂存在两种主要限制。第一种限制是在安全性及注册费用低方面令人满意的生物体缺少经常需要获得充分控制的治疗活性。这种仅有治疗作用的脂肪酸和仅有预防作用的生物组份的新型结合是本发明的一个重要实施例。
第二种限制是活性生物控制制剂没有能力和存在的微生物群落竞争。这个问题可以通过本发明的讲述来克服。在植物表面使用脂肪酸可大量破坏存在的微生物体的平衡。这提供了适当选择固定于植物表面的活性生物控制制剂的机会。当这些“被破坏的微生物小生境”重新群集时，在此破坏事件中特别适于生存的微生物在随后的群集过程中更易于建立。
以细菌病害事件为例，许多细菌病害都有一个附生植物的聚集期，脂肪酸可用来减少病原体群体，同时疏通以后群集的道路。令人满意的微生物群集可以通过使用脂肪酸，一种富集剂（例如，一种特别的营养物质如淀粉，纤维素或其它大分子食品基质）以及一种在阴性和阳性选择制剂的特殊方式中尤其适于生存及生长的生物体来提高。另外，脂肪酸本身或它的分解产物可以提供利于某种生物群集的食品基质。食品基质还可由在制剂中添加另外的试剂组成。
因此，本发明第三个主要的实施例是使用脂肪酸，它们的盐，或其衍生物作为“小生境清洁”剂。
根据本申请要求保护的于用治疗控制既成的感染的脂肪酸化合物由下述分子式表示：
其中
Z＝氧，氮，或硫
R1＝C5至C19饱和或不饱和碳氢化合物，或环氧化物，或环丙烷
Y1＝氢，C1-C5的碳氢化合物，或是连在R1任意位置上的羟基
Y2＝氢，C1-C5碳氢化合物，或是连在R1任意位置上的羟基
R2＝C1-C10饱和或不饱和，支链的或非支链的，在R2任意位置上至少有一个羟基的碳氢化合物;盐;或氢。
根据本发明要求保护的与活生物制剂结合使用或作为“小生境清洁”剂的脂肪酸化合物也可由分子式Ⅰ表示，其中：
Z＝氧，氮，或硫
R1＝C5至C19饱和或不饱和碳氢化合物，或环氧化物，或环丙烷
Y1＝氢，C1-C5的碳氢化合物，或是连在R1任意位置上的羟基
Y2＝氢，C1-C5碳氢化合物，或是连在R1任意位置上的羟基
R2＝C1-C10饱和或不饱和，支链的或非支链的，在R2任意位置上至少有一个羟基的碳氢化合物;碳水化合物;盐;或氢。
在本发明的优选实施例中，R2选自形成阳离子脂肪族铵化合物的脂肪族胺;K+;Na+;和H+组成的一组基团。根据本发明，油酸，亚油酸，亚麻酸，和壬酸以及它们的盐和酯是非常有用的。根据本发明，我们发现脂肪酸的单乙二醇非常有用。
根据本发明，特别示例的化合物是C9（壬酸）和C18（油酸）脂肪酸和它们的盐。具有治疗活性的这些化合物可以和其它具有预防活性，治疗活性，或两者兼而有之的控制制剂结合，这些其它的控制剂可以是合成的、无机的或生物的制剂。特别有利的是，这些其它的控制制剂有预防性的杀真菌活性。熟练地运用这些组份的具体结合可对特定的用途提供最佳的组合物。本领域技术人员可利用本申请所讲述的方法制备用于具体应用中的适宜组合物。
本发明的脂肪酸和它们的衍生物作为杀虫剂有非常大的优越性，因为它们广泛存在于自然界中，几乎对哺乳动物没有毒性，和其它生物控制手段能相容并且很容易分解成无毒成分。因此，本发明的优点及实施例如下：
在一组合物中，脂肪酸作为活性组份用来根除存在的植物病原菌，例如真菌感染或细菌群集;
脂肪酸用来改进或增进其它杀真菌剂和杀细菌剂化学物质的活性;
治疗性的脂肪酸和预防性的生物控制制剂组合，增加了保护范围;
治疗性脂肪酸的使用起到控制作用，并且还扰乱了植物表面的微生物群落，通过共存的生物控制制剂增强了该表面随后的群集;
脂肪酸，富集剂和生物控制制剂联合使用，该控制剂能耐受脂肪酸并对富集剂起促进作用;以及
带有或没有富集剂的脂肪酸的结合使用破坏了微生物群集，并且通过生物控制剂提高了随后的群集。
本发明是关于使用脂肪酸和它们的盐或其衍生物来控制真菌及细菌植物病害。这种作用方式和其它化学与生物控制方法相一致，并且和社会上需要的选择性虫害控制战略相吻合。根据本发明所用的脂肪酸可以是未取代的，或取代的，饱和的，或不饱和的大约C7至大约C20的脂肪酸（或它们的盐或其衍生物）。特别示例的是C9和C18脂肪酸，但不仅限于油酸，壬酸，以及这些酸的各种盐或酯之类。本发明的脂肪酸组份可以是单一的脂肪酸或盐，或者是两种或多种脂肪酸的混合物或是两种或多种脂肪酸及其盐的混合物。根据本发明能用的盐包括脂肪酸钠，脂肪酸钾，以及脂肪酸的异丙胺盐。根据本发明，脂肪酸的单乙二醇酯也特别有用。
另外，范围很广的脂肪酸的抗微生物活性对把脂肪酸和各种生物制剂结合起来控制虫害的战略特别有利。常见的生物控制手段的局限是一直不能将所需活控制制剂群集在被处理的表面。其表面存在的微生物群落如果生长良好，就可以阻止施用的生物体的固定。本发明的脂肪酸在施用的同时或施用后不久，它们对破坏现存微生物群落（病原体和腐生菌）很有用，并且使生物控制有机体很有可能成功地群集在表面。这对脂肪酸来说是非常可能的，因为在有效浓度范围里，脂肪酸不会残留在植物上。这一概念的进一步延伸包括加入营养或其它富集制剂于脂肪酸中及其生物战略。本领域技术人员可以根据本发明的描述设计含有脂肪酸、生物制剂以及富集制剂的适宜组合物。
根据本发明，可以和脂肪酸结合的化学控制制剂包括，但不仅限于苯菌灵，焦硼酸钠，敌菌丹，克菌丹，百菌清，各种含有铜的制剂;各种麦角甾醇生物合成抑制杀菌剂。包括，但不仅限于异嘧菌醇、烯菌灵、myclobutanil、propiconazole、丙氯灵、terbutrazole、fiusilazole、唑菌酮以及tebuconazole;灭菌丹，异丙定，代森锰锌，代森锰，氨丙氯、氧化萎锈灵，土霉素，五氯硝基苯，五氯苯酚，灭螨猛，亚坤酸钠，二硝甲酚钠，次氯酸钠，联苯酚钠，链霉素，硫，涕必灵，甲基托布津，嗪氨灵，烯菌酮，代森锌，福美锌，三环唑，cymoxanil，灭瘟素，Validimycin。脂肪酸还可以和各种杀虫油结合。
根据本发明可以使用的生物控制剂包括但不限于芽孢杆菌，假单孢菌，木霉，欧氏植病杆菌，毕赤氏酵母，假丝酵母，隐球菌，Talaromyces sp.，黑毛菌，胶枝菌，Aureobasidium SP.，Dabaryomyces sp.，Exophilia sp.以及Mariannaea sp.属内的菌种。本发明的一个实施例是选择与脂肪酸、它们的盐或其衍生物的结合使用容和并且非常适宜的生物制剂。本发明的一个实施例由施用一种脂肪酸组成。进一步的实施例是脂肪酸和由合成的化学物质或生物控制剂或生物控制剂和富集剂组成的抗真菌或抗细菌剂一起使用。结合的制剂可以接续施用或按罐混合物施用。
脂肪酸的罐混合物可以根据本领域技术人员熟知的方法来制备。例如，用一种溶剂溶液或脂肪酸的乳浊液，一种表面活性剂，以及用充足的水把此混合物稀释到所需浓度来制备一种脂肪酸杀虫油。脂肪酸的盐容易分散或溶解于水中。
用于乳化水制剂中脂肪酸的表面活性剂可以是任何无植物毒性的表面活性剂，这些表面活性剂通常用来制备用于农作物上的制剂。本发明的组合物还可以和在U.S.Patent No.4，560，677描述的杀虫油结合使用。
根据本发明可以使用的脂肪酸容易得到并且以各种商品名销售，包括M-PEDETM，SHARPSHOOTERTM，DeMossTM，以及SAFERTMInsecticide Concentrate（SIC）。在这里所使用的“SHARPSHOOTER”是指由80%壬酸，2%乳化剂（例如Dowfax 32B）和18%表面活性剂（例如Stepac 8170）组成的含80%SHARPSHOOTER的制剂。另外，脂肪酸作为天然产物中成份很容易得到。例如，柑桔核提取物和椰子油之类易得组份可用来提供本发明所用脂肪酸成份。本发明用作阴性选择制剂的杀虫油（也就是农业用杀虫油）包括，但不限于石蜡油，如Sun OilCO.of Philadelphia，PA销售的6N、7N、9N和11N。其它阴性选择制剂包括，但不限于碳酸盐、醇、无机盐以及各种这些制剂的混合物。本发明的阳性选择制剂包括，但不限于酵母，空胞，细菌空胞，藻类空胞，复合碳水化合物、简单碳水化合物、有机氮，或这些制剂的混合物。
本发明所描述的组合物及方法可用来控制大范围的真菌及细菌目标。这些目标包括，但不限于青霉素属种（例如，expansum;指状青霉，意大利青霉）、葡萄孢属，Monilinia sp.，支链孢属，曲霉属，根霉属种类，Erisyphales的成员（粉霉-球壳徽属，Erisyphe sp.，Uncinula sp.，Podosphaera sp.），霜霉目的成员（霜霉，Phytopihora sp.Pythium sp.，霜霉属内的种），半担子菌亚纲锈病和黑粉病），杀黑星菌属，尾孢徽属，Pseulocercosporella sp.，属孢徽属，Cercosporidlum sp.，镰刀属，Ophiostomu sp.和其它污染木材的真菌及色二孢属内的种。其它目标包括欧氏植病杆菌，Pseudmonas sp.和Xanthomonas sp.属内的种。这些目标可在植物的种籽，球茎，鳞茎，花，梗，叶，暴露的根，以及果实中控制，包括但不限于葡萄、梨、苹果、挑子、油桃、葡萄柚、柠檬、桔子、芒果、香蕉、柑橘、土豆、西红柿、黄瓜、莴苣、稻子、麦子、黑麦以及其它谷物、开花植物和杏仁。在这里所说的术语“产品”包括，但不限于上面列举任意植物的表面。另外，在这里所说的柑桔是指象桔子、柠檬、酸橙、葡萄柚及类似的水果。组合物还可施用到新切割开的木材表面，用以控制真菌或细菌目标。
特别地，现已发现壬酸在浓度大约0.25-0.5%重量/体积（W/V）范围时，对由指状青霉（实施例2和3）引起的柠檬既成感染有优良的治疗活性。如果柠檬受到损伤并且受到病原体的感染，那么在它受到治疗18-24小时以后，病害不再发展。如果脂肪酸施用于真菌移植的同时或移植之前，病害控制就不会观察到。类似地，施用2%M-PEDETM（主要是十八碳脂肪酸盐）或0.5%壬酸用于已严重感染粉霉病原体（例5）的植物上，可大幅度减少孢子的进一步形成。再有，在感染前（预防性）施用同样的脂脂酸于植物上没有效果。
因此，我们发现的脂肪酸出人意料的抗真菌及抗细菌活性与它们根除已存感染的能力特别相符。如实施例2所示，脂肪酸能阻止由青霉素菌种移植引起的柠檬中病害的发展。这是一种受伤病原体，在柑桔类水果到达包装房时，收获时损伤所致感染就会形成（12-24小时），因此需要采取治疗行动。
在治疗控制中利用脂肪酸及其衍生物在实施例6中有进一步的描述，其中壬酸对由灰葡萄孢霉引起的梨感染和Monilinia fructicola引起的油桃感染有治疗活性。
在这些脂肪酸用于根除水果上存在的感染的例子中，为了保护水果不再受到连续的感染，可以用浸渍或喷雾方式同时或相继施用杀真菌剂、杀细菌剂或生物控制有机体来达到。这种施用还可以和通常处理水果时使用的各种蜡或抛光剂结合一起进行。此类应用制剂还可以包括对生物控制有机体的建立有利的营养物质。
脂肪酸对象粉霉这样的专性寄生菌亦具活性。近来，试图以抑制麦角甾醇生物合成的含硫产品或合成杀真菌剂为基础的严格的预防控制技术方案来控制这些病害。如果霉感染得太快，那么使用上面所述相同的产品阻止它的进一步传播非常困难。如实施例5所示，缺乏阻止霉感染能力的脂肪酸和脂肪酸盐能够杀死严重的，既成的感染。若是这样，脂肪酸和脂肪盐在严重的霉感染情况下作为“解救处理”是非常有利的。
本发明涉及的一个要点是脂肪酸有效使用的范围。浓度很低就没有活性，在居中的范围里有令人满意的活性。而在比较高的浓度时，寄主植物会受到破坏，并且这实际上能扩大感染（例如，实施例3中，用0.5%或更高浓度的壬酸比用水对照中受到的感染更严重）。在用壬酸控制粉霉的实施例中（实施例5），由于这种脂肪酸在商业上用作除草剂，因此1%和1%以上的浓度就会产生很大的植物毒性。根据脂肪酸的组成可以扩大抗微生物活性和致植物毒性之间的安全范围。更具体地说，某些盐比原始脂肪酸的植物毒性小许多但杀真菌性仅小一点（实施例4）。本领域技术人员根据本发明的讲述很容易确定适当的制剂和浓度。
如前所述，本发明的脂肪酸没有显示出预防活性;这种强有力的，具治疗性处理与化学杀真菌剂、杀细菌剂的预防作用或生物控制制剂的专一的和/或竞争的能力结合是可行的。因此，本发明的另一方面涉及脂肪酸组合物和其它杀真菌剂组合物的结合。这些结合物的好处分两个主要方面：杀真菌剂及杀细菌施用率的减少，以及提高了预防病原体影响的活性。
本发明强有力的，具治疗活性的组合物和其它杀真菌剂或杀细菌剂结合使用可达到与使用比较小剂量的不含脂肪酸的杀真菌剂或杀细菌剂组分的混合物相同的控制水平。本发明的组合物可由一种组份混合物组成，其中所说的混合物有足够的活性以至此组合物的使用可使每个活性组分的量减少，而同时还提供了有效的活性。这是非常有意义的，因为较低的使用量可使农作物上或环境中的残留量变得较低，使使用费较低，扩大了作物安全性与可能引起植物毒害的杀真菌剂功效之间的范围（因此扩大杀真菌剂的安全性，或扩大了其作用的作物品种或使用时间），减缓了“市场蓝子”对多用途杀真菌剂或杀细菌剂的总需求。
另外，由于这些物质的特殊作用方式，含有脂肪酸的其它杀真菌或杀细菌剂的混合物提供了另外的优点。一个优点是减轻了选择抵抗形式的难度。因为具有不同的作用方式并且还有治疗活性的物质是很少的，所以要给系统的/治疗性的杀真菌剂找到合适的混合抵抗伙伴通常是困难的。在抗病害处理中，治疗性的和无治疗性的杀真菌剂的混合物并不令人满意。杀真菌剂的用量还可在它们目前提供部分控制耐受病原体菌株的高用量情况下有所降低。
还有，对于多种作用结合物的功效提高了。许多杀真菌剂或杀细菌剂有优良的预防功效，但对根除存在的感染无效。这些化合物单独使用时必须持续重新施用到作物组织上以便保持一种稳固的保护层。这种物质和有治疗性的脂肪酸产品的结合提高了病害处理战略的整体功效，使保护剂的应用不太频繁，并且把使用所讨论的杀真菌剂或杀虫剂的控制计划延伸到新的作物或地区去。
下面是说明本发明的实施例，包括实施发明的最好方式。本发明的实施不限于这些实施例。除非另有说明，所有百分率是重量基准以及所有溶剂的混合比是体积基准。
实施例1-选择的抗植物病原体的脂肪酸的活性
把不同浓度的两种形式之一的壬酸加到熔融的马铃薯葡萄糖琼脂中，并且倒进任意使用的小型陪替式培养皿中。酸以乳化的游离酸（80%的SHARPSHOOTERTM制剂），或以纯酸的钾盐形式加入。对照皿是通过在SHARPSHOOTERTM的组合物中加入类似浓度的表面活性剂或水做成的。往这些培养皿中加入指状青霉或灰葡萄孢霉的孢子的悬浮液。3天后观察养皿中真菌的产生和生长，结果列于表1。
表1处理％a.i.指状青霉灰葡萄孢霉SHARPSHOOTERTM80%制剂(乳化的酸）2.00.50.1250.03--------SHARPSHOOTERTM80％制剂的表面活性剂空白（相同的稀释液）2.00.50.1250.3++++++++SHARPSHOOTERTM钾 盐2.00.50.1250.03---+----培养基对照样-++
+代表产生 -代表没有产生
实施例2-壬酸控制柠檬绿霉感染的预防活性和治疗活性的比较
收获在生长过程中没有施用合成化学物质的柠檬，并把柠檬和指状青霉的孢子（107分生孢子/毫升）通过用浸在孢子悬浮液中的18号计量针将柠檬刺2mm深培植在5个标记的地方。培植后，在22℃把柠檬置于关闭的塑料盒中的湿纸巾之上。培植之后于0、5、16或24小时，柠檬要么不浸在，要么浸在1%a.i.的SHARPSHOOTERTM（80%的制剂）中。培植4天后根据受感染的伤口数目对感染作出评定（表2）。
表2处理施用时间（培植后的时间）培植4天后感染百分率没有841%a.i.SHARPSHOOTERTM0516241005824
实施例3-控制柠檬绿霉的壬酸的剂量敏感特性
收获在生长过程中没有施用合成化学物质的柠檬，其表面用1∶10稀释的家用漂白粉消毒。通过用浸在孢子悬浮液中的18号计量针将柠檬刺2mm深，使柠檬和指状青霉的孢子（105分生孢子/毫升）培植在5个标记的地方。在22℃把培养皿置于封闭塑料盒内的位于托盘上的湿纸巾上面培植18小时。到时间后，把培养皿移走并浸渍在SHARPSHOOTERTM稀释液（乳化的壬酸悬浮液）或水中15秒钟。将柠檬排出，然后再放回盒子中在22℃培植13天。13天后根据受感染伤口区域的百分率评定病害（表3）。
表3处理％a.i.感染13天后105分生孢子／毫升％SHARPSHOOTERTM80％制剂（乳化的壬酸的悬浮液）1.00.50.250.1250.0638050000水对照样-30
实施例4-控制柠檬绿霉的不同形式的壬酸的功效
收获在生长过程中没有施用合成化学物质的柠檬，其表面用1∶10稀释的家用漂白粉清毒。通过用浸在孢子悬浮液中的18号计量针将柠檬刺2mm深，使柠檬和指状青霉的孢子（106分生孢子/毫升）培植在5个标记的坊。在22℃把培养皿置于封闭塑料盒内的位于托盘上的湿纸巾上面培植18小时，到时间后，把培养皿移走并浸渍在SHARPSHOOTERTM稀释液（乳化的壬酸悬浮液）中浸渍在SHARPSHOOTERTM的表面活性剂空白中（不含脂肪酸的SHARPSHOOTERTM中的使用相同浓度的同种表面活性剂），或浸渍在用10N KOH滴定到PH7，转化为钾盐的SHARPSHOOTERTM中保持15秒钟。将柠檬排出，然后再放回盒子中在22℃培植。象其它实施例一样，所用的孢子浓度和培植温度组成3对提供控制病害的制剂的能力的严格测试。病害发生时控制的贻误，或意识到的大量病害的产生构成了在实际贮存条件下有效控制病害的标志。5天后根据受感染的伤口区域的百分率评定病害（表4）。
表4处理％a.i.培植5天后％感染SHARPSHOOTERTM2.00.50.12581210SHARPSHOOTERTM转化为钾盐2.00.50.1250818表面活性剂空白2.00.50.125706490
实施例5-控制柠檬绿霉的各种壬酸的盐和酯的活性
柠檬的表面用10%的漂白粉消毒，然后擦干。用浸在含有106孢子/毫升的指状青霉的孢子悬浮液中，长3mm的18号计量针针刺培植柠檬。在每个水果上做5个斜线标记的伤害。在高湿度条件下于22℃培植18小时。然后用壬酸的各种盐或酯处理水果。
为了合成乙烯乙二醇单壬酸酯，将51.5克壬酸和51克乙烯乙二醇溶解在200毫升的二氯甲烷中，然后往混和物中加20滴硫酸。此混合物在室温下存放6天。6天后，往经过剧烈摇动的反应混合物中加入150毫升0.1N的氢氧化钠。收集二氯甲烷层（下层），并用饱和氢氧化钠水溶液洗涤。
用硫酸钠干燥后，蒸发除去三氯甲烷层。将剩下的油（38克）用真空蒸馏生产34。8克（产率53.8%）的乙烯乙二醇单壬酸酯（b.p.135-137℃（7mmHg））。
制备随时可用的壬酸（nonanoic）的异丙胺盐（非离子型）的水溶液制剂。所使用的壬酸是Quantum Chemical Corporation，Cincinnati，Ohio生产的“EMERY1202”，并且是链长为8、9、10的标准脂肪酸混合物，其中C9是主要的。各种不同的水溶液制剂是由直到20%作为活性组份的脂肪酸和直到6%的异丙胺，余量是水制备的。将所需量的壬酸分散于相应的混合容器中并开始混合。将所需量的水加到酸中，并通过混合将酸分散在水中，由此形成一种混浊的，不稳定的分散液。将异丙胺（ALDRICH Chemical Company，Milwaukee，WI）缓慢加到分散相中，并不断混合，直到制剂的PH值达到大约7.4-7.8为止。在这大约的PH范围内，由于脂肪酸的异丙胺盐成为水溶性的，混浊的分散液就成为半透明的。
用棉签将2%的处理液施用于果实上，通过把果实浸在试验溶液中，从而实现低浓度处理液的施用。在相同条件下将果实继续培植72小时，之后根据显现出的特有的软化和孢子形成损害数目对感染进行评定。通过把受感染的程度和未经处理的检验样相比较计算病害控制的百分率（受感染的损害处为83%）
表5处理施用的浓度病害控制百分率钾 盐2.00.50.125839086异丙胺盐2.00.50.125719581单乙烯乙二醇酯2.00.50.125567654乙酯2.00.50.12516160壬酸乳浊液2.069铵盐2.098
实施例6-控制肯塔基蓝绿茎牧草上粉霉的各种脂肪酸敏感剂量的效果。
肯塔基蓝绿茎牧草植物在6孔Jiffy板条内生长四个星期，然后切成5cm长并把它们一孔一孔地移植到4英寸大小的装有Promixputting培养基的塑料盆内。一半盆可自然地受粉霉（麦类白粉菌）的感染以至叶子面积的85-100%被真菌形成的孢子菌落所覆盖。另一半盆不暴露在粉霉中生长。对两种类型的植物都用水（做对照物），用“M-PEDE”的稀释液（主要是C18∶0脂肪酸的钾盐），或用SHARPSHOOTERTM的稀释液（乳化的壬酸）进行处理。已经感染的植物因此接受“治疗性的”处理。处理1天后，通过使劲摇动盆上受感染的植物，培植还未受感染的植物（“预防处理”）。然后把所有植物在温室里培植并在不同时间间隔评价粉霉覆盖在叶子表面的百分率，对治疗处理来说，这些结果表示为相对于水检验样，对于治疗性处理的百分控制率，以及对预防处理的百分感染率（表6）。
表6处理％a.i.控制15天治疗％M.PEDETM（主要是C18脂肪酸的钾盐）1.00.50.250.12590805720SHARPSHOOTERTM（80％a.i 壬酸乳化）0.80.40.20.197827343水对照样-0
实施例7-控制梨的灰葡萄孢霉感染及油桃Monilinia fruction感染的壬酸及其盐的功效
通过把18号计量针浸在孢子悬浮液中，并用它在4个果实的每一个上刺5个2mm深的伤口，用葡萄孢霉（106分生孢子/毫升）针刺培植未受损害的苹果。类似地，用Monilinia fruction（106cfu/ml）培植油桃。然后把果实置于封闭塑料盒内的位于托盘上的湿纸巾上面。在22℃培植18小时后，将果实移去并浸在水中15秒钟，SHARPSHOOTERTM的稀释液中15秒钟（壬酸的乳化悬浊液）或浸在用10N氢氧化钾滴定到PH7，转化为钾盐的SHARPSHOOTERTM中15秒钟。然后这些果实再回到盒子中并在22℃培植7或14天。在这两个时间，根据被讨论的典型病害感染的伤口数目评定感染的百分率（表7）。
表7处理％a.i.芽孢杆菌对梨的感染％7天Monilinia对油桃的感染％7天Monilinia对油桃的感染％7天SHARPSHOOTERTM（乳化的酸）1.00.020.06335357000453333100SHARPSHOOTERTM（转化为钾盐）1.00.250.063152030025702580100水对照样-555085
实施例8-使用含有脂肪酸的各种制剂破坏花生叶表面微生物群落花生果植物在温室里生长三个星期，之后用从当地观赏植物得到的叶子清洗悬浮液喷洒花生果植物。这就提供了大量潜在的群落在叶子表面的微生物。然后每天将这些植物夜晚放在22℃的带露水的房间里及白天放在室外充足的阳光下。这就给正常的叶子表面微生物群落提供了实际的选择压力。这种方式循环3天后，每天用具有对微生物的群体施加选择性压力的潜力及因此能富集对所施用的制剂耐受或有利的有机体之各种不同制剂处理植物。制剂由各种不同的碳酸钾（0.05%）、壬酸的钾盐（0.05%）及酵母空胞（108细胞/毫升，通过煮沸及离心清洗杀死的Baker酵母）的混合物组成。碳酸钾和壬酸是“阴性”选择剂而酵母空胞是“阳性”选择剂。3天都施用这些制剂，在此期间，植物连续不断地在带露水的房间和阳光照射下循环。该处理阶段结束后，收获每片叶子并洗涤来回收群落在表面的有机体。把这些洗涤的产物稀释固定在培养皿中的营养琼脂及马铃薯葡萄糖琼脂上，回收的平均数量列于表8。
表8 用各种制剂富集的每片花生叶子上的平均菌落形成单位（cuf)施用的选择处理在营养琼脂上的cfu／叶在马铃薯葡萄糖琼脂上的cfu／叶1、水1.9×1054.4×1052、酵母空地1.9×1068.3×1053、0.5%壬酸的钾盐加0.05%的碳酸钾 2.9×1041.1×1044、上述2和3处理组份的结合3.2×1043.3×104
除了对回收的全部表面群体的影响，这些处理液对微生物群落的组成（基于菌落大小，形态，颜色及在不同基质上的生长）还有明显的影响，在富集步骤之后，每个单独的菌落可以被分离开来。由此分离的微生物体能用作异源基因的寄主，该基因可转化到所说的寄主上。有利的是，这些异源的基因可以给对寄主植物有毒的蛋白质编码。这些公知的毒素是给这些毒素编码的基因。例如，大家知道许多苏芸全杆菌表现为对植物害虫有毒的蛋白质。根据本发明，苏芸全杆菌（B.t.s）和脂肪酸处理结合施用于植物上，要么，为毒素编码的苏芸全杆菌基因（B.t.）可插入到其它的寄主，该寄主尤其是在脂肪酸存在下，特别适于生长和存留在植物上。把这些基团插入到合适的寄主中的方法是众所周知的。例如，参见European Patent Application O 200334。转化的微生物体可施用于需要防止虫害的适宜植物上。首先，如果需要，植物需经脂肪酸组合物处理来清除有竞争力的微生物来控制细菌和真菌的感染。一旦转化的微生物施用于植物上，可以连续施用脂肪酸来除去有竞争力的和不需要的微生物。脂肪酸的施用可以伴有富集剂来帮助所需微生物的群落。另外，可用使这些微生物特别适合于选择富集的附加基因将所需微生物进一步转化。
实施例9-在田间施用破坏微生物群落制剂的富集实验方案
在1个星期的四天里施用具有破坏叶子和花上面的微生物群落潜力的制剂于商品田里的西红柿植株上。这期间以后，将15-20个单个的叶片或花朵经平板稀释法培植来进行处理。菌落的数目（酵母和细菌）列于表9。
表9 在田间选择方案后每片叶子或花上回收的平均菌落形成单位选择处理在营养琼脂上回收在马铃薯葡萄糖琼上回收花叶花叶1、水16，2505，2001，1751，4882、酵母空胞48，30012，94051，70010，7403、壬酸的钾盐8，2756，1411，2257414、2和37，3252，5202，1601，158
如实施例8所述，这些制剂能改变叶子和花上的微生物群落的密度和组成。如实例8中所描述的，选择性处理后所分离的微生物在产生毒素的重组了微生物的施用方面可用来作为极好的植物菌落。
应该知道，本发明所述的实施例及实施方案仅仅是为了说明目的，本领域技术人员可以根据它们作各种改进和变换，这些都不超出本申请的精神和范围以及所要保护的权利要求的范围。