用于皮肤和毛发的淀粉-金属配合物 【发明背景】
迄今，尽管已研制出多种药物疗法，但复原损伤和受伤皮肤的功能仍然是主要的健康问题。目前已研制出的多种皮肤愈合方法，如具有创伤愈合特性的生长因子蛋白质产物和药物，以及伤口闭合药膏，都超出了许多病人的经济承受能力。在不发达国家，尤其是热带地区国家，诸多不完善的保健条件，普遍的皮肤真菌病，以及使用易燃物如煤油煮饭等情况以及类似情况很容易引起严重的皮肤伤害，因此存在着对改进的且成本低的护肤品和药物的较大需要。对于这些国家，迫切需要能利用易得原料以低成本生产有效药物。即使在较发达国家，对于医学管理中的成本规模，也存在着不断需要开发低成本的护肤产品和伤口愈合药物的需要。传统的做法如人院治疗糖尿病性皮肤溃疡日益被限制。因此将来需要改进的和成本经济的伤口愈合治疗方法。
人和其它动物伤口地延迟愈合或不完全愈合能引起患者的更多疼痛和痛苦。并且能显著增大伤口并发症及医学成本。通常，伤口仍需要广泛关注和医护，以控制感染和组织坏死的慢性疮存在。即使当伤口最终愈合，伤口区仍常常缺乏应答触感刺激的能力，并且通常充满了过度沉积的能产生永久性伤痕的不成熟胶原。因此迫切需要改进的伤口愈合组合物扩展用于外科手术中产生的伤口。成功的外科手术过程，尤其是对病情十严重或年迈病人，一般是考虑外科术后愈合程度和速度。能损伤正常愈合响应的另一方面是存在损伤或伤口皮肤的过度炎症。尽管发炎过程和其伴随产生的白细胞汇集痛苦区内过程为自然愈合过程的组成部分，但在某些情况下，发炎过程变得过度并延迟愈合。创伤组织在愈合过程的早期被闭塞，而不能进行完全。在这种情况下，可使用具有消炎活性的化合物，以便使愈合过程正常进行。一种有希望用于治疗与炎症和损伤伤口愈合有关病症的方法使用了与有机分子或氨基酸，氨基酸衍生物和肽配合的金属离子。这些配合物中的一些具有消炎活性，而其它既具有消炎活性又具有愈合作用。此外据报道还有一些其它配合物除消炎和/或愈合活性之外，还具有刺激毛发生长的作用，这些如见申请人的U.S.P.5,382,431中所述，此文献在此全部并入本文用作参考。
在治疗患有急性或慢性关节炎的患者的过程中，使用铜盐或其配合物作为治愈胃溃疡的消炎药可以追溯到本世纪的四十和五十年代(参见，例如，Sorenson的综述，Inflammation，3：317-331(1976)；Agents and Actions 8：305-331(1981)，以及Comprehensive Therapy 11：49-64(1985)。铜盐及其配合物，如铜-水杨酸配合物的使用似乎已被放弃，显然这是由于初阶段希望使用类固醇类消炎药，如氢化可的松的结果。其它铜与氨基酸(色氨酸，赖氨酸)，与非甾类消炎药(消炎痛，苯酮苯丙酸，乙酰水杨酸)或与脂肪酸(油酸，月桂酸和辛酸)形成的配合物已被研究，尽管它们很有希望，但其研究很难超出临床前期，显然，这是由于刺激，毒性及不适当的功效等问题造成。
尽管已报道了许多铜-配合物具有消炎性质，但其中仅有很有限部分被报道也具有愈合功能。Heintze(U.S.P.4,123,511)报道了油酸铜配合物具有消炎和皮肤愈合活性。Sorenson(U.S.P4,440,754)描述了使用铜(II)盐与氨基酸(色氨酸或赖氨酸)，或与有机分子如3，5-二异丙基水杨酸，乙酰水杨酸或水杨酸形成的配合物预防及治愈胃肠溃疡。利用创伤愈口模型，Townsend和Sorenson(Sorenson等人Agents and Actions 8：305-325(1981)发现，水杨酸-铜能加速外科手术诱发的大鼠溃疡的愈合速度并能改善愈合质量。同样，Sorenson记录了(ibid and Inflammation3：317-331(1976))Townsend证实的在外科手术诱发的溃疡模型中，铜(II)-(色氨酸)2能增大溃疡愈合速度的结果。愈合增快大体上应归因于伤口上表皮再愈合的较快速度和胶原的数量和质量的增加。在受治疗动物体中培养出自然定向的细胶原纤维，与未治疗动物相反，其中新胶原十分浓稠并由粗的，波状非定向束，类似瘢痕的组织组成。
Federici和Bertolotto(EP45,398,和IT9,019,948)报道了硫酸软骨素-铜(II)配合物具有消炎活性。欧州专利EP66,283公开了“海面升降”(“ eustatic”)组合物，它包含无毒金属离子(包括铜)和透明质酸的葡糖氨基-聚糖或硫酸软骨素，该组合物用作结瘢剂(通过闭合愈合伤口)。
英国专利申请GB2,044,265描述了三磷酸腺苷的金属配合物(包括铜)用作骨折以及骨质疏松和骨囊肿情况下骨组织恢复的助剂。
Konishi(U.S.P.4,461,724)报道了四肽Gly-Ser-His-Lys和有关结构的肽当与金属如离子铜和锌配合时，具有消炎和愈合作用。
Yu(U.S.P4,053,630)公开了使用与金属离子如三价铁，二价铜，锌或铝螯合的磺基丙氨酸及其衍生物半胱亚磺酸或高半胱氨酸形成组合物，用以缓和由角质化缺损表征的疾病症状，并达到缓解鳞癣，皮脂溢性皮炎和痤疮之作用。Bertelli(U.S.P.4,156,737)提出，对氨基甲基-苯-磺酰胺的铜配合物对皮肤烧伤具有愈合和保护作用。Van Scott(U.S.P.4,283,386)报道了磺基丙氨酸，半胱亚磺酸和高半胱氨酸的金属(铜，锌，或铝)盐形式具有治疗作用，用于缓解干性和破损皮肤，角化病，疣和掌及足角化过度症。
Niwa(Dermatologica 179 S1：101-106(1989)和Bergren等人(Am.Surg.，54：333-336(1988))发现，消炎蛋白Cu，Zn-超氧化歧化酶也起着增快愈合过程的作用。
Pickart(参见，如PCT公开WO91/14437，WO91/12267，WO91/05797，WO91/03488，WO89/12441，WO88/26448，WO88/18851，EP专利EP190,736，EP189,182；以及U.S.P.4,767,753)描述了可用作消炎和愈合剂的Gly-L-His-L-Lys的金属配合物的合成应用。
大量金属配合物已用于促进头发生长。Yamashiki(日本专利70018997)使用铜-泛酸配合物声称能促进毛根生长并助长皮肤功能。Morelle(英国专利GB2097256，DE专利32212448)公开了与铜和其它金属配合的氨基酸衍生物N-丁酰基氨基酸)可用于化妆和治疗目的，包括用作毛发和皮肤刺激剂。Banfi等人(U.S.P.4,503,047)公开了一种组合物，它主要含有一种或多种含硫氨基酸和铜(II)离子以及少量异硫氰酸烯丙酯和硫氰酸烯丙酯，用于产生毛发生长刺激作用。Pickart(如WO91/07431，88/08695和EP288，278)发现，大量Gly-L-His-L-Lys衍生物的金属配合物能增大毛囊体积和毛发生长速度。
尽管上述金属配合物存在治疗希望，但许多金属配合物存在毒性和组织刺激作用(参见，如Johnson等人，Inorg.Chem.Acta，67：159-165(1982)；Pickart等人，Biochem.PHarm.，32：3868-3871(1983)；和Pickart等人，Lymphokines.8：425-446(1983))。例如，虽然铜-水杨酸配合物和众多铜-水杨酸类似物具有消炎活性，但其它水杨酸类似物如水杨醛苯甲酰基腙对组织却具有高毒性。类似地，铜(II)-Gly-L-His-L-Lys能维持细胞生机并具有消炎和愈合功能，但其铜结合部位的最终合成物芳酰基腙类似物却对细胞和组织具有极大毒性。
治疗使用的铜配合物的另一问题是铜离子与配合分子的结合亲合力。虽然能合成定义明确的铜配合物，但其治疗使用时是将配合物置于组织的生理环境中，该环境中实际上有多于数百个化合物进行与铜离子结合竞争，铜离子可以与多达六个单独分子形成静电键。如果铜从配合物中释出而变成松散结合，则会产生组织损伤(参见Raju等人，J.Natl..Cancer Inst.，69：1183-1188(1982))。
当这类金属配合物被制剂成载体膏或软膏时可产生其它并发症。向制剂中加入各种化学药品以增大与皮肤和创伤表面的粘附力以及增强配合物渗透时靶组织的能力。然而，由于许多这些物质也可以与金属结合，所期望的治疗优点可能会变成泡影或者被显著减少。同样，使用洗涤剂如十二烷基硫酸钠有助于掺合乳剂的油和水相并稳定制剂。然而，这类洗涤剂本身也是能延迟愈合的组织损伤剂。打算治疗使用的金属配合物中的许多还存在另一问题，即它们不能被热灭菌，因此，为满足安全要求，在制备过程中必须加入高浓度抗微生物化学药品，以抑制微生物生长及病毒的传递。这些抗微生物剂还可以抑制皮肤和其它组织的保持和修复过程中所涉及的宿主细胞如巨噬细胞和成纤维细胞的生存力和机能，因此这些药剂可以阻滞愈合响应。
本领域需要在组织保护，组织愈合，和/或刺激毛发生长方面有用的组合物，这种组合物应当很容易并且能以低成本生产。作为优选，这种组合物应可被灭菌，而不降低生物活性，并可被制剂成适合局部施用形式且不使用洗涤剂或其它可能具有损伤作用的化合物。理想的组合物还应当与皮肤和其它材料如伤口敷料(例如，粘连绷带)牢固粘连。为缩减管理批准所需的时间和费用，组合物最好采用管理部门一般认作安全的材料制备，因此可以在最低安全关注和管理障碍下使用。非常令人惊奇的是本发明满足了这些和其它有关要求。
发明概述
本发明提供了促进温血动物局部伤口和皮肤损伤愈合，保护皮肤免受氧化伤害作用，以及增大毛囊体积和毛发生长速率的组合物和方法，在这些方法中使用的组合物，包括药物组合物，由被离子金属配合的浆糊制备。
因此，本发明一方面提供了制备在促进温血动物的局部伤口愈合或增大毛囊体积和毛发生长方面有用的药物组合物的方法。淀粉与有效量离子金属盐的水溶液化合，然后调节至适合皮肤产品使用的有效酸性范围。典型地，淀粉可以很方便地由植物产物如小表，玉米或马铃薯制得，淀粉然后与金属离子，如铜(II)，锡(II)或Zn(II)配合。
所形成的水溶液混合物由淀粉和金属离子的配合物组成。混合物可以用如水或其它物质调节，以形成粘糊状混合物。混合物可以直接使用，或者与可药用载体结合形成乳油或洗剂形式使用，其中淀粉-离子金属配合物的浓度为约10％至50％或者更高。如果需要，该制品可被灭菌或施行巴氏消毒，而不会破坏淀粉-离子金属配合物的的愈合或头发生长刺激活性。
在另一方案中，本发明提供了促进温血动物皮肤伤口复原的方法，这些伤口如外科手术切伤，烧伤，发炎或氧化伤害造成的不严重损伤等。此方法包括对皮肤伤口或损伤部位施用治疗有效量或者，在某些情况下为预防有效量的包含淀粉-离子金属配合物的组合物。由于本发明组合物的糊状粘连性，与其它局部修补剂和制剂相比，对皮肤的再涂用次数降到最低。
而其它实施方案则涉及用于增大温血动物，如人的毛囊体积和毛发生长速度的组合物和方法，该方法包括对希望毛发生长区的皮肤施用中以增大所述动物的毛囊体积及毛发生长量的淀粉-离子金属配合物。典型地，组合物一般以乳油形式施用，并且在每日施用的基础上涂敷至观察到毛发生长为止，随后继续施用一段时间，该段时间应足以维持有所要数量的毛发生长。
具体实施方案的描述
本发明提供了用于保护伤害皮肤并由此使之进行自然愈合过程，促进温血动物皮肤中组织再生过程，以及刺激温血动物毛发生长的治疗用组合物及方法。所述配合物通过将取自各种来源(如小麦，玉米，马铃薯)的淀粉与离子金属，如铜，锌，铟或锌配合而形成。
本发明的淀粉-离子金属配合物可由从任何种类资源所得到淀粉制备。最合适的淀粉为那些相对价廉且能广泛得到的淀粉，如小麦，玉米，马铃薯，燕麦，豌豆，大豆，稻谷，黄豆，以及大麦淀粉。这些淀粉能够从商业来源广泛得到。术语“淀粉”一般是指大分子量碳水聚合物，通常为直链淀粉或支链淀粉形式，且此聚合物的分子量一般大于100,000道尔顿。
为生产本发明中有用的淀粉-离子金属配合物，将淀粉与一种或多种离子金属，如铜，铟，锡，锌或其盐配合，所述盐如硫酸盐，乙酸盐，磷酸盐，氯化物，柠檬酸盐，琥珀酸盐，草酸盐，肉桂酸盐，酒石酸盐，富马酸盐，马来酸盐，戊二酸盐等。术语“配合”是指淀粉与金属离子形成静电键，不过此机理仅仅是通过说明性方式而非限定性方式提出。在制备淀粉-离子金属配合物的一个方法中，是将淀粉与足量水(在约室温下，22-25℃)混合形成稠糊物。为得到该糊物，将小麦淀粉(1g)与约10ml水混合，而玉米淀粉(1g)和马铃薯淀粉(1g)则需要约3ml水。然后将糊状物与金属盐(氯化铜(II)或氯化锡(II)，氯化锡(IV)，氯化铟(III)，或氯化锌(II))的水溶液在盐浓度为约10至50％(W/V)，较优选给20％(W/V)下混合。所加入的金属盐溶液的体积为得到糊状物中最终金属浓度为0.3至1.2％(重量比)所需要的量。不过此浓度可以变化很大。金属的加入可能会降低糊状物的pH至约3.0，因此可通过小心加入(例如)1N氢氧化钠或类似物使糊状物的pH值升至6.5。该pH值适用于皮肤制品，但其它接近中性的pH水平或稍微酸性范围内的pH也是有效的。
稠糊物可直接涂敷到皮肤上，或者配制成浓度通常为5至20％(W/V)的乳膏和洗液，不过更高浓度也有效。所述稠糊物也可用水稀释成能很容易涂敷于皮肤上而又不会流失的适合糊状物。
本发明的淀粉-离子金属配合物适用于人的各种治疗，预防或化妆应用或适用于其它温血动物的各种兽医应用。各种兽类动物中，本发明组合物特别适于治疗的种类有马，牛，猪，绵羊，公山羊，犬，鸟，猫等。
对于预防和/或治疗或化妆处理，本发明组合物和其药用制品可设计成局部，表面，口服或非肠道(如皮下注射)给药形式。优选的是，本发明药物组合物以糊状物，乳膏或油膏形式局部如表面给用。
当对温血动物施用时，本发明的淀粉-离子金属配合物一般灭菌并混合到药物或兽用制剂中。包含淀粉-离子金属配合物的组合物可以通过常规周知的灭菌技术灭菌，或者通过煮沸或巴氏灭菌法灭菌，这些灭菌方法基本上不会对淀粉-离子金属配合物的生物活性产生不利影响。本发明组合物可以含有近似于生理条件所需要的并且根据需要制成适合方便给药的组合物形式的药学上可接受的辅助物质，如pH调节和缓冲剂，以及传送载体。对于本领域技术人员而言，制备药学上可给用的化合物的有效方法是已知的或是显而易见的，有关它们的详细描述见例如Remington’s Pharmaceutical Science Mack Publishing Co，Easton，PA(1985)，该文献在此并入本文作为参考。
依据预定的给药方式以及预定用途，本发明组合物转化成固体，半固体，或液体剂型，如粉剂，粒剂，晶体，液体，悬浮液，脂质体，糊，乳状悬浮液，油膏，等，并可以为适合相对准确剂量给用的单位剂量形式。组合物可包含常规药物载体或赋形剂，另外，还可包含其它药剂，生长因子，创伤粘封带，载体等，见下文进一步描述。
对于半固体组合物，如与适于局部给药的糊状物和乳油相应的组合，淀粉-离子金属配合物可独立提供，或者可与常规无毒载体化合，这些载体如芦荟胶，角鲨烷，甘油硬脂酸酯，聚乙二醇，鲸蜡醇，硬脂酸，以及丙二醇等等。这类组合物可含有约5-100％活性成分，较优选为20-40％。按照所选定的给药特定方式，这些制剂中淀粉-离子金属配合物的浓度可以在较宽范围内变化，并且主要依据预定用途，粘度等选择。制备这类剂型的有效方法对本领域技术人员而言是已知的，或者为显而易见的；例如，参见前述的Remington的Pharmaceutical Science。在任何情形下，所给用的组合物或制剂含有中以使受治疗者获得所希望的治疗或预防效果的量的淀粉-离子金属配合物。
对早已患有如上所述的创伤，氧化皮肤伤害，炎症性皮肤损伤的温血动物，如人，施用本发明的组织愈合组合物，其用量应足以使愈合过程与未处理的宿主相比，进行的更快速。对于患于毛囊体积缩小和毛发生长损伤的动物，本发明的组合物以足以增大毛囊体积和毛发生长速度的量给用。满足获达这些效果的量被定义为“治疗有效量”。对这种应用有效的量在创伤愈合情况下取决于伤口，疮等的严重程度，在头发生长损伤情况下取决于毛囊体积减小的程度，以及受治疗患者的一般健康情况，但其用量范围一般为每天每平方厘米伤口部位约1mg至约25mg淀粉-金属配合物，通常更多使用每天每平方厘米创伤部位约5mg至约10mg的剂量。长期维持剂量可根据需要调整。对于兽用，根据需要可给用较高剂量。治疗特定伤口或上述病症所必需的淀粉-离子金属配合物的有效量的确定可通过本领域公知的标准实验方法进行。
在预防施用时，对易受到，或者换言之，有皮肤损伤或类似伤害危险的宿主给用含有淀粉-离子金属配合物的组合物，用于增强宿主自身伤口愈合或抗氧化能力。这样一种量定义为“预防有效量”。对于这种应用，确切的用量仍依赖于宿主病症和一般健康状况，但一般为每天每平方厘米皮肤约0.1mg至10mg，通常更多为约1mg至3mg/cm2皮肤/天。本发明组合物可以以单剂量或多剂量形式给用。
尽管不加限制使用可能会导致皮肤变色，但本发明的淀粉-离子金属配合物仍可以相对较大的量给用而无严重的副作用。当给用组合物用以抑制皮肤的氧化或生化伤害或者当对仅患有轻度或刺激性或炎症皮肤的患者给用组合物时，其剂量于是调整至较低维持水平。
本发明组合物，包括药物组合物，可以单独给用或作为治疗或预防的辅助药物给用。淀粉-离子金属组合物可以与其它组合物结合使用，这些其它组合物通常见申请人所拥有且未审的5,382,4321和专利申请USSN08/218,392和08/219/047中所述，它们中的每一件均在此完全并人本文用作参考，或者与改善愈合的其它方面所已知的其它生长因子结合使用。在这种情况下，可以会产生协同效应，从而产生比单独使用任何单一因子要高得多的临床效果。另外，尽管此处所述的组合物能促进各种愈合过程，但临床上伤口的性质及愈合方式可能会大大不同，从而使得人们使用本文所述的组合物与其它因子的结合物。例如，许多烧伤中的神经再生是不完全的，因此人们可加入特异神经生长因子以补充组合物促进神经在烧伤区再生能力。其它所报道的与愈合特性有关的因子的实例有表皮生长因子，成纤维细胞生长因子，生长因子，转化生长因子，血管生长因子，肝素，纤连蛋白，血纤蛋白，血小板衍生生长因子，酶超氧化歧化酶，血液提取物或来自血液的因子，以及其它类似因子。
下述实施例为说明性的而非限制性的。
实施例I
活性淀粉-金属配合物的制备
本实施例描述了在下面进一步说明的具有生物活性的淀粉-金属配合物的制备中所使用的方法。
小麦淀粉，玉米淀粉，以及马铃薯淀粉如氯化铜-水合物(no C 6641)一样购自Sigma Chemical Conpany，St Louis，MO.氯化锡(II)99％纯度，购自AldrichChemical Company，Milwaukee，WI.
在制备淀粉-离子金属配合物的一个方法中，将淀粉与足量水(在约23℃)混合形成稠糊状。为得到此糊状物，将小麦淀粉(1g)与10ml水混合，而玉米淀粉(1g)和马铃薯淀粉则仅需3ml水。糊状物然后与氯化铜(II)或氯化锡的水溶液，(其中盐浓度为20％(W/V)混合。其中所加入的金属盐溶液的体积为得到糊状物中最终金属浓度为0.3至1.2％(重量/重量)所需要的量。金属盐的加入使得糊状物的pH值降至约3.0。然后小心加入1N氢氧化钠使糊状物的pH值升至6，5。此pH值适用于皮肤制品，但其它靠近中性的pH水平或稍微酸性范围内的pH水平也是有效的。
淀粉-铜配合物可用作对伤害或损伤皮肤起皮肤屏障作用下的皮肤保护剂。胶状糊粘附于皮肤上并形成保护屏障。在用这种组合物处理之后，伤害或损伤的皮肤能够惊人地快速愈合。
如下进一步所述，淀粉-铜和淀粉-锡配合物可用于促进毛发生长和毛囊扩充。对于小鼠毛发生长模型，这些配合物涂敷于皮肤上8至12天之后，能产生显著的毛发生长刺激作用。
其它种类淀粉-金属配合物，其中淀粉来自其它植物，且盐为金属的其它盐，如硫酸盐，乙酸盐，磷酸盐等等，预期得到类似效果。
实施例II
用淀粉-铜配合物愈合外科创伤
本实施例说明了使用由淀粉-铜配合物制备的糊状物促进动物外科手术切伤的愈合。
在已麻醉的，重35g Swiss-Webeter小鼠的背部切外科切口(1.25cm)。在外科手术后立即以及24小时后将伤口用含有上述实施例I的活性淀粉-铜配合物的薄膜包裹，对照组伤口未处理或仅用无配合金属的淀粉处理。如表1所示，用活性淀粉-铜配合物处理的伤口比对照组伤口愈合的要快。由于快速愈合伤口往往导致收缩并且变得更加圆拱，故愈合活性与9天后伤口的长度有关。每组包括8只小鼠。
表1：淀粉配合物对切口长度的作用
测试组 9天伤口长度(cm)
对照组 0.91±0.12
无铜小麦淀粉 0.88±0.19
小麦淀粉-1.0％铜配合物 0.25±0.09
小麦淀粉-0.3％铜配合物 0.37±0.09
无铜玉米淀粉 0.98±0.23
玉米淀粉-1.0％铜配合物 0.31±0.14
玉米淀粉-0.3％铜配合物 0.40±0.06
无铜马铃薯淀粉 0.92±0.19
马铃薯淀粉-1.0％铜配合物 0.41±0.15
马铃薯淀粉-0.3％铜配合物 0.47±0.14
实施例III
用淀粉-铜配合物治愈烧伤
本实施例表明，利用表面涂敷淀粉-铜配合物可以增快烧伤的愈合。
通过放置圆形(直径：1.25cm，伤口面积＝1.22cm2)黄铜棒(温度100℃)与皮肤接触7秒钟，在麻醉小鼠的剃毛背部引起二度烧伤，紧接着烧伤后及24和48小时之后，伤口用含有上述实施例1的活性淀粉-铜配合物的糊状物薄膜覆盖。对照组烧伤不加处理。对麻醉小鼠的伤口进行追踪，利用计算机扫描床数字化，并根据计算机图像计算伤口面积。与未处理对照组烧伤相比，用活性淀粉-铜配合物处理的烧伤显示出较低的烧伤后炎症并且愈合也大大加快。每组包括8只小鼠。
表2淀粉-铜配合物对烧伤的作用
测试组 15天后烧伤面积(cm2)
对照组 0.90±0.17
小麦淀粉-0.3％铜配合物 0.34±0.13
玉米淀粉-0.3％铜配合物 0.33±0.09
马铃薯淀粉-0.3％铜配合物 0.42±0.12
实施例IV
减轻皮肤烧伤后的炎症
本实施例说明了淀粉-铜配合物减轻与轻度皮肤烧伤有关炎症的能力。
通过放置圆形(直径1.25cm，损伤面积＝1.22cm2)黄铜棒(60℃)与皮肤接触5秒钟，在麻醉小鼠(每组8只小鼠)的剃毛背部引起极轻度烧伤，该过程产生具有发红和肿胀，便很少损失皮肤组织的特征的轻度皮肤损伤。在紧接着热损伤引起之后，损伤区用含有下述任一种实施例I的活性配合物的糊状物的薄膜覆盖：具有0.3％铜离子的小麦淀粉，具有0.3％铜离子的玉米淀粉，或具有0，3％铜离子的马铃薯淀粉。对照组不加处理或用不含金属配合物的淀粉处理。每天观察伤口一次。在第3天，对照组的热伤害仍然发红并肿胀，而用三种淀粉-铜配合物的任一种处理过的皮肤则最低程度的发红和肿胀。
实施例V
活性淀粉-铜配合物的巴氏消毒法
巴氏消毒法包括加热溶液至160F维持30分钟，这种消毒方法可杀死大多数最具抗性的微生物。对于此试验，可按照上面实施例I所述的方法，将各种淀粉与氯化铜配合。将所形成的糊状物充分混合，pH值升至pH6.5，然后加热至160F，维持30分钟。冷却至室温后，按实施例II所述的，对小鼠的外科手术切口伤口施用糊状物。愈合活性类似于施用未经巴氏消毒的活性组合物时所观察到的活性，结果见表3中所示。每组包括6只小鼠。
表3：巴氏消毒法对活性配合物的作用
测试组 9天后伤口长度(cm)
对照组 0.89±0.15
小麦淀粉-1.0％铜配合物 0.29±0.13
玉米淀粉-1.0％铜配合物 0.35±0.16
马铃薯淀粉-1.0％铜配合物 0.47±0.21
实施例VI
利用煮沸对活组化合物灭菌
本实施例表明，淀粉-铜配合物可通过煮沸灭菌，而仍能保持基本上所有未灭菌制剂的活性。这样通过避免在组合物中包括致敏抗菌剂的需要，该方式能提供很多优点。
煮沸灭菌实质上能杀死所有微生物。对于此试验，按上面实施例I中所述的方法，将10g大豆淀粉与氯化铜配合。向大豆淀粉溶液内加入氯化铜溶液之后，将所形成的溶液充分混合，pH值升至pH6.5，然后在沸水浴中加热10分钟。冷却至室温后，按上面实施例I所述制备活性组合物，然后按实施例II中所述的方式，涂敷到小鼠的外科手术伤口。施用灭菌淀粉-铜配合物所观察到的愈合活性类似于施用未灭菌的活性组合物所得到的结果。每组包括6只小鼠。
表4：灭菌对活性淀粉-金属配合物作用
测试组 9天后伤口长度(cm)
对照组 0.89±0.15
小麦淀粉-1.0％铜配合物 0.31±0.16
玉米淀粉-1.0％铜配合物 0.39±0.19
马铃薯淀粉-1.0％铜配合物 0.42±0.18
实施例VII
淀粉-铜配合物对皮肤的粘连性
本实施例说明，使用淀粉-铜活性配合物能改善伤口敷料对皮肤表面的粘连性。因此，使用淀粉-铜配合物和敷料能更有效地覆盖和密封伤口。并且，用于固定医学传感器到皮肤上的多种胶带或静脉中的导管能引起皮肤损伤。向这类胶带上所用的胶粘剂中掺入淀粉-铜配合物将会减轻这种皮肤损伤和伤害。对于测试，将粘性绷带(商标：Band AidTM)的伤口覆盖部分切去粘性部分。将对皮肤无粘附性能的胶带伤口覆盖部分涂布配合有0.3％铜离子的小麦淀粉。将涂布有糊状物的胶带施加到人的上臂上并在办公室正常工作状态期间使之留在所敷部分。在随后的8小时试验期间，胶带与皮肤能很好粘连。这说明，这类伤口愈合糊状物对人皮肤具有显著的粘连特性。
实施例VIII
刺激毛发生长
本实施例描述了使用含有淀粉-金属配合物刺激温血动物的毛囊生长情况。
本试验中使用的模型为小鼠模型，已发现此模型能成功预测对人的治疗响应(参见，如U.S.P.5,118,665，该文献在此并入本用作参考)。毛发生长通过活性生长期(毛发生长初期)，继之通过休眠期(毛发生长终期)进行。测试方法一般包括对毛发生长终期的小鼠皮肤涂擦毛发生长刺激剂。雌性，Swiss-Webster鼠在约45天龄时开始毛发生长终期，该期持续至约90天龄。在涂敷活性物质之后，在10至14天内能观察到毛发生长增强。对于此试验，使用50天龄小鼠。含有铜(II)和锡(II)的淀粉组合物被测试。为进行试验，将淀粉-金属糊状物与盐水混合(按重量计：25％淀粉组合物和75％生理盐水)。鼠被剃毛，然后通过注射。0.05ml混合物立即渗透到皮肤下面。对照组鼠注射等体积盐水或不含金属的淀粉。每组包括10只小鼠。12天后，比较各组。测定注射部位有毛发生长的小鼠百分数，并测定毛发生长响应的相对强度(以1至5的标度表示，其中1表示几乎看不到毛发生长，而5则表示有极浓密的毛发生长)。
结果见表7中所示。该结果表明，所有组合物均为活性毛发生长刺激剂，且淀粉-锡(II)配合物是最有效的药剂。
表5：淀粉-金属配合物对毛发的刺激作用
注射部位有毛发生长的百分率 毛发生长的平均强度
对照组小鼠 0 0小麦淀粉-无铜(II) 0 0小麦淀粉-1％铜(II) 90 2.5小麦淀粉-1％锡(II) 100 4.0
实施例IX
局部施用刺激毛发生长
本实施例中使用的模型与实施例VlII中所述的模型一样，只是活性淀粉-金属糊状物表面涂敷到皮肤上。将动物剃毛，然后连续四天尽可能光滑地将0.1g糊状物涂敷到剃毛区。对照动物用盐水或未与金属配合的淀粉拭抹。每组包含10只小鼠。14天后，比较各鼠组。测定剃毛区中心部分有毛发生长的小鼠的百分率并测定毛发生长响应的相对强度(以1至5标度表示，其中1表示几乎看不到有毛发生长，5表示有极浓密毛发生长)。所有组合物均其有活性，且含锡(II)组合物为最有效的药剂。
表面涂敷淀粉-金属配合物刺激毛发生长的作用
注射部位有毛发生长的百分率 毛发生长的平均强度
对照组小鼠 10 0.2
小麦淀粉 10 0.0
小麦淀粉-1％铜(II) 90 2.0
小麦淀粉-1％锡(II) 100 4.0
根据上述结果，显然，本发明提供了用于表面皮肤，伤口和外科治疗以保护伤害皮肤并促进自然愈合过程，增强组织在表皮中的再生过程，以及刺激温血动物毛发生长的淀粉-金属配合物。本发明还提供了制备和配制局部给药用的组合物的经济方法。
尽管为了清楚理解本发明，上面已通过说明和实施例的方式进行了更详细的描述，但显然，在附属的权利要求范围之内，可以进行某些变化和改进。