聚乙二醇化干扰素α-CCR5拮抗剂联合HIV疗法 【发明背景】
本发明涉及聚乙二醇化(pegylated)干扰素-α和CCR5拮抗剂在制备用于治疗患者中的HIV-1感染以及HIV-1与HCV的合并感染的药物中的应用。所述治疗包括施用足以减少HIV-1-RNA的治疗有效量的聚乙二醇化干扰素-α联合治疗有效量的CCR5拮抗剂。
人免疫缺陷病毒-1(“HIV-1”)引起的全球性健康危机，获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的致病原因已经毋庸置疑，而药物疗法中的最新进展业已能够成功地减慢AIDS的发展，但仍然需要发现更加安全、更加有效和低成本的途径来控制这种病毒。
据报导，CCR5基因在HIV感染的抗性中发挥作用。HIV感染始于该病毒通过细胞受体CD4和次级趋化因子(chemokine)共同受体分子的相互作用附着于靶向细胞膜，通过复制继续进行并且经血液和其他组织传播感染细胞。趋化因子受体有多种，但对于亲巨噬细胞(macrophage-tropic)的HIV，人们确信在感染早期阶段体内复制的是关键的致病菌株，HIV进入细胞所必需的重要趋化因子受体是CCR5。所以，干扰病毒受体CCR5和HIV之间的相互作用就可以阻断HIV进入细胞内。本发明涉及小分子CCR5拮抗剂与聚乙二醇化干扰素-α在治疗被HIV-1感染的患者中的应用。
A-M.Vandamme等在Antiviral Chemistry&Chemotherapy，9：187-203(1998)中公开了人体HIV-1感染的现有临床疗法，包括至少三重药物联合(triple drug combinations)或所谓的高活性抗反转录病毒疗法(“HAART”)；HAART包括核苷反转录酶抑制剂(“NRTI”)、非核苷反转录酶抑制剂(“NNRTI”)和HIV蛋白酶抑制剂(“PI”)的多种联合形式。在首次使用药物的患者中，HAART可以有效降低致死率和HIV-1向AIDS的进程。然而，这些多药物疗法无法根除HIV-1，而且长期的治疗一般会导致多药耐药性。仍然优选开发新的药物疗法来提供更加良好地HIV-1治疗。
发明概述
本发明提供了聚乙二醇化干扰素-α和CCR5拮抗剂在用于制备治疗患者中HIV-1感染的药物中的应用。
本发明还提供了聚乙二醇化干扰素-α和CCR5拮抗剂在制备用于治疗患者中HIV-1感染的药物中的应用，其中所述的CCR5拮抗剂由结构式I或II或III或IV或者式I或II或III或IV的药学可接受盐表示：其中在结构式I表示的CCR5拮抗剂化合物中：X是-C(R13)2-，-C(R13)(R19)-，-C(O)-，-O-，-NH-，-N((C1-C6)烷基)-，R是R6-苯基、R6-吡啶基、R6-噻吩基(thiophenyl)或R6-萘基；R1是氢、C1-C6烷基或C2-C6链烯基；R2是R7、R8、R9-苯基；R7，R8，R9-取代的6元杂芳基；R7，R8，R9-取代的6元杂芳基N-氧化物；R10，R11-取代的5元杂芳基；萘基；芴基；二苯基甲基R3是R6-苯基、R6-杂芳基或R6-萘基；
R4是氢、C1-C6烷基、氟-C1-C6烷基、环丙基甲基、-CH2CH2OH、-CH2CH2-O-(C1-C6)烷基、-CH2C(O)-O-(C1-C6)烷基、-CH2C(O)NH2、-CH2C(O)-NH(C1-C6)烷基或-CH2C(O)-N((C1-C6)烷基)2；
R5和R11独立地选自氢和(C1-C6)-烷基；
R6是1-3个取代基，所述取代基独立地选自选自氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CF3、CF3O-、CH3C(O)-、-CN、CH3SO2-、CF3SO2-、R14-苯基、R14-苄基、CH3C(＝NOCH3)-、CH3C(＝NOCH2CH3)-、-NH2、-NHCOCF3、-NHCONH(C1-C6烷基)、-NNHCO(C1-C6烷基)、-NHSO2(C1-C6烷基)，5元杂芳基和，其中X是-O-、-NH-或-N(CH3)-；
R7和R8独立地选自(C1-C6)烷基、卤素、-NR20R21、-OH、-CF3、-OCH3、-O-酰基和-OCF3；
R9是R7、氢、苯基、-NO2、-CN、-CH2F、-CHF2、-CHO、-CH＝NOR20、吡啶基、吡啶基N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、-N(R20)CONR21R22、-NHCONH(氯-(C1-C6)烷基)、-NHCONH((C3-C10)-环烷基(C1-C6)烷基)、-NHCO(C1-C6)烷基、-NHCOCF3、-NHSO2N((C1-C6)烷基)2、-NHSO2(C1-C6)烷基、-N(SO2CF3)2、-NHCO2(C1-C6)烷基、C3-C10环烷基、-SR23、-SOR23、-SO2R23、-SO2NH(C1-C6烷基)、-OSO2(C1-C6)烷基、-OSO2CF3、羟基(C1-C6)烷基、-CONR20R21、-CON(CH2CH2-O-CH3)2、-OCONH(C1-C6)烷基、-CO2R20、-Si(CH3)3或-B(OC(CH3)2)2；
R10是(C1-C6)烷基、-NH2或R12-苯基；
R12是1-3个取代基，所述取代基独立地选自氢、(C1-C6)烷基、-CF3、-CO2R20、-CN、(C1-C6)烷氧基和卤素；
R13、R14、R15和R16独立地选自氢和(C1-C6)烷基；
R17和R18独立地选自氢和C1-C6烷基，或R17和R18共同为C2-C5亚烷基并且与其所连的碳原子构成3-6个碳原子的螺环；
R19是R6-苯基、R6-杂芳基、R6-萘基、C3-C10环烷基、(C3-C10)环烷基(C1-C6)烷基或(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基；
R20、R21和R22独立地选自H和C1-C6烷基；和
R23是C1-C6烷基或苯基；
并且其中在由结构式II表示的CCR5拮抗剂化合物或其药学可接受盐中：其中(1)Xa是-C(R13)2-、-C(R13)(R19)-、-C(O)-、-O-、-NH-、-N((C1-C6)烷基)-，Ra是R6a-苯基、R6a-吡啶基、R6a-噻吩基或R6-萘基；R1是氢、C1-C6烷基或C2-C6链烯基；R2是R7、R8、R9-苯基；R7、R8、R9-取代的6元杂芳基；R7、R8、R9-取代的6元杂芳基N-氧化物；R10、R11-取代的5元杂芳基；萘基；芴基；二苯基甲基
R3是R10-苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或噻唑基；
R4是氢、C1-C6烷基、氟-C1-C6烷基、环丙基甲基、-CH2CH2OH、-CH2CH2-O-(C1-C6)烷基、-CH2C(O)-O-(C1-C6)烷基、-CH2C(O)NH2-、-CH2C(O)-NH(C1-C6)烷基或-CH2C(O)-N((C1-C6)烷基)2；
R5和R11独立地选自氢和(C1-C6)-烷基；
R6a是1-3个取代基，所述取代基独立地选自氢、卤素、-CF3、CF3O-、-CN、-CF3SO2-、R12-苯基、-NHCOCF3、5-元杂芳基和，其中X是-O-、-NH-或-N(CH3)-；
R6独立地选自R6a和CH3SO2-；
R7和R8独立地选自(C1-C6)烷基、卤素、-NR20R21、-OH、-CF3、-OCH3、-O-酰基和-OCF3；
R9是R7、氢、苯基、-NO2、-CN、-CH2F、-CHF2、-CHO、-CH＝NOR20、吡啶基、吡啶基N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、-N(R20)CONR21R22、-NHCONH(氯-(C1-C6)烷基)、-NHCONH((C3-C10)-环烷基(C1-C6)烷基)、-NHCO(C1-C6)烷基、-NHCOCF3、-NHSO2N((C1-C6)烷基)2、-NHSO2(C1-C6)烷基、-N(SO2CF3)2、-NHCO2(C1-C6)烷基、C3-C10环烷基、-SR23、-SOR23、-SO2R23、-SO2NH(C1-C6烷基)、-OSO2(C1-C6)烷基、-OSO2CF3、羟基(C1-C6)烷基、-CONR20R21、-CON(CH2CH2-O-CH3)2、-OCONH(C1-C6)烷基、-CO2R20、-Si(CH3)3或-B(OC(CH3)2)2；
R10是(C1-C6)烷基、-NH2或R12-苯基；
R12是1-3个取代基，所述取代基独立地选自氢、(C1-C6)烷基、-CF3、-CO2R20、-CN、(C1-C6)烷氧基和卤素；
R13、R14、R15和R16独立地选自氢和(C1-C6)烷基；
R17和R18独立地选自氢和C1-C6烷基，或R17和R18同时为C2-C5亚烷基并且与其所连的碳原子构成3-6个碳原子的螺环；
R19是R6-苯基、R6-杂芳基、R6-萘基、C3-C10环烷基、(C3-C10)环烷基(C1-C6)烷基或(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基；
R20、R21和R22独立地选自H和C1-C6烷基；和
R23是C1-C6烷基或苯基；或(2)
Xa是-C(R13)(R19)-、-C(O)-、-O-、-NH-、-N((C1-C6)烷基)-
Ra是R6b-苯基、R6b-吡啶基或R6b-噻吩基；
R4a是氟-C1-C6烷基、环丙基甲基、-CH2CH2OH、-CH2CH2-O-(C1-C6)烷基，-CH2C(O)-O-(C1-C6)烷基、-CH2C(O)NH2、-CH2C(O)-NH-(C1-C6)烷基或-CH2C(O)-N((C1-C6)烷基)2；
R6b是CH3SO2-；和
R1、R2、R3、R5、R14、R15、R16和R19如式II(1)中定义；
并且其中在结构式III表示的CCR5拮抗剂化合物中：
R是R8-苯基、R8-吡啶基、R8-噻吩基或R8-萘基；
R1是氢或C1-C6烷基；
R2是R9、R10、R11-苯基；R9、R10、R11-取代的6元杂芳基；R9、R10、R11-取代的6元杂芳基N-氧化物；
R12、R13-取代的5元杂芳基；萘基；芴基；二苯基甲基
R3是氢、C1-C6烷基、(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基(C1-C6)烷基、R8-苯基、R8-苯基(C1-C6)烷基、R8-萘基、R8-萘基C1-C6)烷基、R8-杂芳基或R8-杂芳基(C1-C6)烷基；
R4、R5、R7和R13独立地选自氢和(C1-C6)烷基；
R6是氢、C1-C6烷基或C2-C6链烯基；
R8是1-3个取代基，所述取代基独立地选自氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CF3、CF3O-、CH3C(O)-、-CN、CH3SO2-、CF3SO2-、R14-苯基、R14-苄基、CH3C(＝NOCH3)、CH3C(＝NOCH2CH3)、-NH2、-NHCOCF3、-NHCONH(C1-C6烷基)、-NHCO(C1-C6烷基)、-NHSO2(C1-C6烷基)，5元杂芳基和，其中X是-O-、-NH-或-N(CH3)-；
R9和R10独立地选自(C1-C6)烷基、卤素、-NR17R18、-OH、-CF3、-OCH3、-O-酰基、-OCF3和-Si(CH3)3；
R11是R9、氢、苯基、-NO2、-CN、-CH2F、-CHF2、-CHO、-CH＝NOR17、吡啶基、吡啶基N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、-N(R17)CONR18R19、-NHCONH(氯-(C1-C6)烷基)、-NHCONH((C3-C10)-环烷基(C1-C6)烷基)、-NHCO(C1-C6)烷基、-NHCOCF3、-NHSO2N((C1-C6)烷基)2、-NHSO2(C1-C6)烷基、-N(SO2CF3)2、-NHCO2(C1-C6)烷基、C3-C10环烷基、-SR20、-SOR20、-SO2R20、-SO2NH(C1-C6烷基)、-OSO2(C1-C6)烷基、-OSO2CF3、羟基(C1-C6)烷基、-CONR17R18、-CON(CH2CH2-O-CH3)2、-OCONH(C1-C6)烷基、-CO2R17、-Si(CH3)3或-B(OC(CH3)2)2；
R12是(C1-C6)烷基、-NH2或R14-苯基；
R14是1-3个取代基，所述取代基独立地选自氢、(C1-C6)烷基、-CF3、-CO2R17、-CN、(C1-C6)烷氧基和卤素；
R15和R16独立地选自氢和C1-C6烷基，或R15和R16同时为C2-C5亚烷基并且与其所连的碳原子构成3-6个碳原子的螺环；
R17、R18和R19独立地选自H和C1-C6烷基；和
R20是C1-C6烷基或苯基；
并且其中在由结构式IV表示的CCR5拮抗剂化合物或其药学可接受盐中：其中(1)Ra是R8a-苯基、R8b-吡啶基、R8b-噻吩基或R8-萘基；
R1是氢或C1-C6烷基；
R2是R9、R10、R11-苯基；R9、R10、R11-取代的6元杂芳基；R9、R10、R11-取代的6元杂芳基N-氧化物；R12、R13-取代的5元杂芳基；萘基；芴基；二苯基甲基
R3是氢、C1-C6烷基、(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基(C1-C6)烷基、R8-苯基、R8-苯基(C1-C6)烷基、R8-萘基、R8-萘基C1-C6)烷基、R8-杂芳基或R8-杂芳基(C1-C6)烷基；
R4、R5、R7和R13独立地选自氢和(C1-C6)-烷基；
R6是氢、C1-C6烷基或C2-C6链烯基；
R8是1-3个取代基，所述取代基独立地选自氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CF3、CF3O-、CH3C(O)-、-CN、CH3SO2-、CF3SO2-、R14-苯基、R14-苄基、CH3C(＝NOCH3)、CH3C(＝NOCH2CH3)、-NH2、-NHCOCF3、-NHCONH(C1-C6烷基)、-NHCO(C1-C6烷基)、-NHSO2(C1-C6烷基)，5元杂芳基和，其中X是-O-、-NH-或-N(CH3)-；
R8a是1-3个取代基，所述取代基独立地选自氢、卤素、-CF3、CF3O-、-CN、CF3SO2-、R14-苯基、-NHCOCF3、5元杂芳基和，其中X定义如上；
R8b是1-3个取代基，所述取代基独立地选自氢、卤素、-CF3、CF3O-、CH3C(O)-、-CN、CF3SO2-、R14-苄基、CH3C(＝NOCH3)、CH3C(＝NOCH2CH3)、-NHCOCF3、5元杂芳基和，其中X定义如上；
R9和R10独立地选自(C1-C6)烷基、卤素、-NR17R18、-OH、-CF3、-OCH3、-O-酰基、-OCF3和-Si(CH3)3；
R11是R9、氢、苯基、-NO2、-CN、-CH2F、-CHF2、-CHO、-CH＝NOR17、吡啶基、吡啶基N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、-N(R17)CONR18R19、-NHCONH(氯-(C1-C6)烷基)、-NHCONH((C3-C10)-环烷基(C1-C6)烷基)、-NHCO(C1-C6)烷基、-NHCOCF3、-NHSO2N((C1-C6)烷基)2、-NHSO2(C1-C6)烷基、-N(SO2CF3)2、-NHCO2(C1-C6)烷基、C3-C10环烷基、-SR20、-SOR20、-SO2R20、-SO2NH(C1-C6烷基)、-OSO2(C1-C6)烷基、-OSO2CF3、羟基(C1-C6)烷基、-CONR17R18、-CON(CH2CH2-O-CH3)2、-OCONH(C1-C6)烷基、-CO2R17、-Si(CH3)3或-B(OC(CH3)2)2；
R12是(C1-C6)烷基、-NH2或R14-苯基；
R14是1-3个取代基，所述取代基独立地选自氢、(C1-C6)烷基、-CF3、-CO2R17、-CN、(C1-C6)烷氧基和卤素；
R15和R16独立地选自氢和C1-C6烷基，或R15和R16同时为C2-C5亚烷基并且与其所连的碳原子构成3-6个碳原子的螺环；
R17、R18和R19独立地选自H和C1-C6烷基；和
R20是C1-C6烷基或苯基；或(2)Ra是R8-苯基、R8-吡啶基或R8-噻吩基；R2是芴基、二苯基甲基、
和R1、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19和R20如IV(1)中定义。
优选其中R是R6-苯基的式I化合物，尤其是其中R6是一个取代基，并且尤其是其中取代基R6位于4位。另外优选其中R13、R14、R15和R16分别是氢或甲基、尤其是氢的式I化合物。还优选其中X是-CHOR3、-C(R13)(R19)-或-C(＝NOR4)-的式I化合物；R3的优选定义为吡啶基，尤其是2-吡啶基，对于R4的优选定义为(C1-C6)烷基，尤其是甲基、乙基或异丙基，R13的优选定义是氢，和R19的优选定义为R6-苯基。对于式I的化合物，R1优选是(C1-C6)烷基，尤其是甲基。
在式I的化合物中，R2优选是R7、R8、R9-苯基R7、R8、R9-吡啶基或其N-氧化物，或R7、R8、R9-嘧啶基。当R2是吡啶基时，优选是3-或4-吡啶基；和当是嘧啶基时，优选是5-嘧啶基。取代基R7和R8优选与碳环成员相连，所述的碳环成员相邻于把该环与该分子的其余部分连接在一起的碳原子，和取代基R9可以相连于任何剩余的未取代的碳环成员上，例如如下式所示结构：
优选取代基R7和R8是：(C1-C6)烷基，尤其是甲基；卤素，尤其是氯；和-NH2。优选的取代基R9是氢。
优选其中Ra是R6a-苯基的式II(1)化合物，尤其是其中R6a是单一取代基，和尤其是其中取代基R6a位于4位。另外优选式II(1)的化合物，其中Xa是-CHOR3、-C(R13)(R19)-或-C(＝NOR4)-；R3的优选定义为吡啶基，尤其是2-吡啶基，R4的优选定义为(C1-C6)烷基尤其是甲基、乙基或异丙基，R13的优选定义为氢，和R19的优选定义为R6-苯基。对于式II(1)的化合物，R1优选(C1-C6)烷基，尤其是甲基。此外，对于式II(1)的化合物，R14、R15和R16优选为氢。
优选其中Ra是R6b-苯基的式II(2)化合物，尤其是其中R6b是单一取代基，和尤其是其中取代基R6b位于4位。另外优选式II(2)的化合物，其中Xa是-CHOR3、-C(R13)(R19)-或-C(＝NOR4a)-；R3的优选定义为吡啶基，尤其是2-吡啶基，R4a的优选定义为环丙基甲基和三氟乙基，R13的优选定义为氢，和R19的优选定义为R6-苯基。对于式II(2)的化合物，R1优选(C1-C6)烷基，尤其是甲基。此外，对于式II(2)的化合物，R14、R15和R16优选为氢。
在式II(1)和(2)的化合物中，R2优选是R7、R8、R9-苯基；R7、R8、R9-吡啶基或其N-氧化物；或R7、R8、R9-嘧啶基。当R2是吡啶基时，优选3-或4-吡啶基，和当是嘧啶基时，优选5-嘧啶基。取代基R7和R8优选与碳环成员相连，该碳环成员相邻于把该环与该分子的其余部分连接在一起的碳原子，和取代基R9可以相连于任何剩余未取代的碳环成员上，如上面对式I的化合物所示的那样。对于式II的化合物，优选的R7和R8取代基是：(C1-C6)烷基，尤其是甲基；卤素、尤其是氯；和-NH2；优选的R9取代基是氢。
优选其中R是R8-苯基或R8-萘基的式III化合物，尤其是其中R8是单一的取代基，和尤其是其中取代基R8位于4位。对于R8-苯基，优选的R8取代基是-CF3、-OCF3、CH3SO2-、CH3CO-、CH3C(＝NOCH3)-、Br和I。对于R8-萘基，R8优选是C1-C6烷氧基。另外优选式III的化合物，其中R3是氢、(C1-C6)烷基、R8-苯基、R8-苄基或R8-吡啶基；对于R3更优选的定义为甲基、乙基、苯基、苄基和吡啶基。R1优选为氢。对于式III的化合物，R6优选是氢或甲基，尤其是甲基。R4优选甲基；R5和R7分别优选是氢。
在式III的化合物中，R2优选是R9、R10、R11-苯基R9、R10、R11-吡啶基或其N-氧化物，或R9、R10、R11-嘧啶基。当R2是吡啶基时，优选是3-或4-吡啶基；和当是嘧啶基时，优选是5-嘧啶基。取代基R9和R10优选与碳环成员相连，所述的碳环成员相邻于把该环与该分子的其余部分连接在一起的碳原子，和取代基R11可以相连于任何剩余未取代的碳环成员上，例如在下述结构中所示的那样：
优选的R9和R10取代基是：(C1-C6)烷基，尤其是甲基；卤素，尤其是氯或溴；-OH和-NH2。当R2是苯基时，R11优选是氢或-OH；当R2是吡啶基时，R11优选氢；和当R2是嘧啶基时，R11优选是氢、甲基或苯基。特别优选的基团R2的实例如下所示：
优选的式IV的化合物是那些在(1)中定义的化合物。
更加优选的是那些其中Ra是R8a-苯基或R8-萘基的式IV(1)化合物，其中R8a是-CF3、CF3O-或卤素和R8是C1-C6烷氧基。取代基R8a或R8优选是单一的取代基；尤其优选取代基R8a或R8位于4位。另外优选式IV(1)的化合物，其中R3是氢、(C1-C6)烷基、R8-苯基、R8-苄基或R8-吡啶基对于R3更优选的定义是甲基、乙基、苯基、苄基和吡啶基。R1优选是氢。对于式IV(1)的化合物，R6优选是氢或甲基，尤其是甲基。R4优选是甲基；R5和R7分别优选是氢。
式IV(1)中的R2优选如式III中定义，即R9、R10、R11-苯基，R9、R10、R11-吡啶基或其N-氧化物，或R9、R10、R11-嘧啶基，其中R9、R10、R11-取代如上文对优选的式III化合物所定义。
本发明还提供了聚乙二醇化干扰素-α、CCR5拮抗剂、利巴韦林和HAART在制备用于治疗被HIV-1和HCV合并感染的患者的药物中的应用。该治疗包含施用治疗有效量的聚乙二醇化干扰素-α联合治疗有效量的利巴韦林和治疗有效量的HAART和治疗有效量的由结构式I或II或III或IV表示的CCR5拮抗剂：或式I或II或III或IV的化合物的药学可接受盐；其用量足以降低HIV-1-RNA和HCV-RNA血浆水平。其中X、R和R1至R16如式I中定义；和其中X、Ra和R1至R16如式II(1)和II(2)中定义，和其中R、和R1至R17如式III中定义；和其中Ra和R1至R17如式IV中定义。
本发明还提供了聚乙二醇化干扰素-α、HAART和CCR5拮抗剂在制备用于治疗被HIV-1感染的儿科患者的药物中的应用。该治疗包含施用治疗有效量的聚乙二醇化干扰素-α联合治疗有效量的HAART和治疗有效量的由结构式I或II或III或IV表示的CCR5拮抗剂：或式I或II或III或IV的化合物的药学可接受盐；其用量足以降低HIV-1-RNA的血浆水平。其中X、R和R1至R16如式I中定义；和其中Xa、Ra和R1至R16如式II(1)和II(2)中定义，其中R、和R1至R17如式III中定义；和其中Ra和R1至R17如式IV中定义。
发明详述
在本文所用的下列术语如下文定义，除非另外说明。
烷基(包括烷氧基、烷基氨基和二烷基氨基的烷基部分)表示直链和支链的含有1-6个碳原子的碳链。
链烯基表示具有1或2个不饱和键的C2-C6碳链，条件是两个不饱和键彼此不相邻。
取代苯基是指可以在苯环上的任何可利用位置上可以被取代的苯基。
酰基是指具有式烷基-C(O)-、芳基-C(O)-、芳烷基-C(O)-、(C3-C7)环烷基-C(O)-、(C3-C7)环烷基-(C1-C6)烷基-C(O)-和杂芳基-C(O)-的羧酸的基团，其中烷基和杂芳基如本文定义；芳基是R12-苯基或R12-萘基；和芳烷基是芳基-(C1-C6)烷基，其中芳基定义如上。
杂芳基表示具有1或2个独立选自O、S或N的杂原子的5或6个原子的环状芳基或11-12个原子的双环基团，该杂原子间断该碳环结构并且具有足够数量的离域pi电子以提供芳香特征。对于6元杂芳环，碳原子可以被R7、R8或R9基团取代。氮原子可以形成N-氧化物。所有区域异构体也在考虑之中，例如2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基。典型的6元杂芳基是吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基及其N-氧化物。对于5元杂芳环，碳原子可以被R10或R11基团取代。典型的5元杂芳环是呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、异噻唑基、咪唑基、吡唑基和异噁唑基。具有1个杂原子的5元环可以经2-或3位相连；具有2个杂原子的5元环优选经4位相连。双环基团通常为由上述杂芳基衍生的苯并稠合环系，例如喹啉基、二氮杂萘基、喹唑啉基、苯并呋喃基、苯并噻吩基和吲哚基。
对于R2中6元杂芳基环来说优选的取代点如上所述。当R2是5元杂芳基时，R10和R11取代基优选与碳环成员相连，所述的碳环成员与把该环与该分子的其余部分连接在一起的碳相邻，和R11优选烷基；然而，如果杂原子与把环和分子的其余部分连接在一起的碳相邻时(即，如在2-吡咯基中)，R10优选与把环和分子的其余部分连接在一起的碳相邻的碳环成员相连。
卤素表示氟、氯、溴和碘。
氟(C1-C6)烷基表示被1-5个氟原子取代的直链或支链烷基链，其可以与同一或不同的碳原子相连，例如-CH2F、-CHF2、-CF3、F3CCH2-和-CF2CF3。
本发明治疗患有HIV-1感染的患者的方法包含施用治疗有效量的聚乙二醇化干扰素-α和治疗有效量的由结构式I或II或III或IV表示的CCR5拮抗剂化合物作为联合疗法，或者根据优良临床实践联合治疗有效量的至少一种单独或与抗HIV-1疗法(尤其是HAART)合用的利巴韦林、白介素-2(“IL-2”)、白介素-12(“IL-12”)和pentafuside，以用于最大限度地降低HIV-1-RNA血浆水平。参见例如A-M.Vandamme等发表的Antiviral Chemistry&Chemotherapy，9：187-203(1998)和The Medical Letter Vol.39(Issue 1015)December 5，1997，pages111-116中的″Drugs for HIV Infection″。在本发明的一个优选方面中，聚乙二醇化干扰素α和式I-IV的CCR5拮抗剂的联合形式联合利巴韦林和HAART一起施用给被HIV-1感染或被HIV-1和HCV合并感染的患者。本发明的特定特征在于，聚乙二醇化干扰素α、式I-IV的CCR5拮抗剂和HAART的组分各自在HIV-1治疗中分别具有不同的作用机理。
本发明的另一特有特征在于，聚乙二醇化干扰素α和式I-IV的CCR5拮抗剂不会彼此或由HAART的组分引起交叉耐药性。治疗有效量的聚乙二醇化干扰素α、利巴韦林和由结构式I或II或III或IV表示的CCR5拮抗剂化合物和HAART的联合形式的给药按照本发明可以在给予治疗有效量的聚乙二醇化干扰素-α和由结构式I或II或III或IV表示的CCR5拮抗剂化合物的联合形式之前、之后或同时开始进行。在本发明的一个实施方式中，治疗患有HIV-1感染的患者的方法包括两个疗程。在第一个疗程中，将治疗有效量的聚乙二醇化干扰素-α和由结构式I或II或III或IV表示的CCR5拮抗剂化合物的联合形式施用足以降低HIV-1-RNA血浆水平的第一疗程时间，优选比初始的HIV-1-RNA血浆水平低10的乘幂，更优选至少是10的二乘幂，即至少102。在第二疗程中，该方法必须根据良好的临床实践继续施用治疗有效量的聚乙二醇化干扰素-α联合由结构式I或II或III或IV表示的CCR5拮抗剂化合物和治疗有效量的HAART的联合形式以最大限度地降低HIV-1-RNA血浆水平。A-M.Vandamme等在Antiviral Chemistry&Chemotherapy，9：187-203(1998)中公开了现有的HIV-1感染的临床治疗方法，包括当开始多药疗法并且这些药物合用时。三重药物疗法可以包括两种NRTI类药物和一种PI药物，但在为任何患者选择正确的HAART中存在着许多有待考虑的问题。参见例如A-M.Vandamme等在上述文献中的表1&2和图2。
在本文所用的术语“CCR5拮抗剂化合物”和“CCR5拮抗剂”是指干扰病毒受体CCR5和HIV-1之间相互作用从而阻断HIV-1进入细胞的任何化合物。实验特别例如CCR5膜结合试验、HIV-1进入和HIV-1进入复制试验在此下文中提出用于鉴定化合物是否是CCR5拮抗剂并且测定其CCR5拮抗剂活性。
在本文所用的术语“被HIV-1感染的患者”是指任何被HIV-1感染的包括儿科患者在内的患者，并且包括患有HIV-1感染的首次治疗(treatment-naive)患者和已经治疗(treatment-experienced)的患者，以及被HIV-1和丙型肝炎病毒(“HCV”)合并感染的首次治疗患者和已经治疗的患者。
本文所用的术语“儿科患者”是指年龄小于17岁的患者，并且通常包括那些从出生到16岁的患者。
本文所用的术语“首次治疗患者”是指被HIV-1感染或被HIV-1和HCV合并感染的不曾使用任何抗反转录病毒药物如NRTI、NNRTI、PI或任何干扰素(包括但不限于干扰素-α或聚乙二醇化干扰素α)治疗过的患者。
本文所用的术语“已经治疗”的患者是指那些被HIV-1感染或被HIV-1和HCV合并感染并且已经开始采用某些形式的抗HIV疗法(包括但不限于HAART)或某些形式的抗HCV疗法(包括但不限于干扰素-α、聚乙二醇化干扰素α或利巴韦林)的患者。
本文所用的术语“患有丙型肝炎感染的患者”是指是指包括儿科患者在内的被丙型肝炎感染的任何患者，并且包括患有丙型肝炎感染的首次治疗患者和患有丙型肝炎感染的已经治疗的患者，以及那些儿科的、患有慢性丙型肝炎感染的首次治疗和已经治疗的患者。
这些患有丙型肝炎的患者包括那些被多HCV基因型(包括1型)感染的患者以及那些被例如HCV基因型2、3、4、5和/或6和其他可能HCV基因型感染的患者。
本文所用的术语“患有丙型肝炎感染的首次治疗患者”是指患有丙型肝炎的不曾用利巴韦林或任何干扰素(包括但不限于干扰素-α或聚乙二醇化干扰素α)治疗过的患者。
本文所用的术语“患有丙型肝炎感染的已经治疗的患者”是指患有丙型肝炎的已经用利巴韦林或任何干扰素(包括但不限于干扰素-α或聚乙二醇化干扰素α)治疗过的患者，包括复发感染者和无反应者。
本文所用的术语“复发感染者”是指患有丙型肝炎的已经治疗的患者在对单用干扰素或干扰素与利巴韦林合用的早期治疗初次反应后再次感染。
本文所用的术语“无反应者”是指患有丙型肝炎的已经治疗的患者对单用任何干扰素或干扰素与利巴韦林合用的先有治疗不产生反应。
当所施用的聚乙二醇化干扰素-α是聚乙二醇化干扰素α-2b时，根据本发明在治疗(包括第一疗程和第二疗程)中施用的治疗有效量的聚乙二醇化干扰素α-2b是每周约0.1-9.0μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b的范围，分一次或多次剂量给药，优选每周一次(QW)或每周二次(BIW)；优选在约0.1-约9.0μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b给药范围内每周一次(QW)给药；或在约0.05-约4.5μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b给药范围内每周二次(BIW)；或每周在约0.5-约3.0μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b范围内给药，优选在约0.5-约3.0μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b范围内给药每周一次(QW)或在约0.25-约1.5μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b范围内给药每周二次，或每周在约0.75-约1.5μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b范围内给药，首选在约0.75至约1.5μg/kg聚乙二醇化干扰素α-2b给药每周一次或约0.375-约0.75μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b给药每周二次。
当给儿科患者施用的聚乙二醇化干扰素-α是聚乙二醇化干扰素α-2b时，按照本发明在治疗过程(包括第一疗程和第二疗程)中施用的治疗有效量的聚乙二醇化干扰素α-2b每周在约0.1-9.0μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b的范围内，分一次或多次给药，优选每周一次(QW)或每周二次(BIW)，更优选施用约0.1-约9.0μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b每周一次(QW)；或每周施用约0.05-约4.5μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b，分一次或多次剂量给药，优选每周一次(QW)或每周二次(BIW)，更优选施用约0.05-约4.5μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b每周一次，或优选一次或分次施用约0.75-约3.0μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b，优选每周一次(QW)或每周二次(BIW)，更优选施用约0.75-约3.0μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b每周一次，或施用约0.375-约1.5μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b每周二次，和首选施用约2.25-约2.6μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b每周一次或施用约1.1-约1.3μg/kg的聚乙二醇化干扰素α-2b每周二次(BIW)。
当所施用的聚乙二醇化干扰素-α是聚乙二醇化干扰素α-2a时，按照本发明在治疗过程(包括第一疗程和第二疗程)中施用的治疗有效量的聚乙二醇化干扰素α-2a在约50μg-约500μg/周的范围内，优选约150μg-约250μg/周，或优选约180μg-约250μg/周或优选约150μg-约180μg/周，或首选约180μg/周，或有效量在约50μg-约500μg范围内每周一次(″QW″)，优选约150μg-约250μg QW，或优选约180μg-约250μgQW或优选约150μg-约180μg QW，或首选约180μg QW；或有效量在约25μg-约250μg的范围内每周二次(″BIW″)，优选约75μg-约125μg BIW，优选约75μg-约125μg BIW，或优选约75μg-约90μgBIW，或首选约90μgBIW。
当施用给儿科患者的聚乙二醇化干扰素-α是聚乙二醇化干扰素α-2a时，按照本发明在治疗过程(包括第一疗程)中给药的治疗有效量的聚乙二醇化干扰素α-2a是在约50μg-约500μg的范围内每周一次(″QW″)，优选约300μg-约375μg QW；或施用给儿科患者的治疗有效量的聚乙二醇化干扰素α-2a是在约50μg-约250μg每周二次，优选约150μg-约190μg每周一次。
利巴韦林与聚乙二醇化干扰素-α联合给予患者，其可以在聚乙二醇化干扰素α的给药之前、之后或同时给药。聚乙二醇化干扰素-α的剂量优选在患者接受利巴韦林的多个剂量的同一时期内施用。与聚乙二醇化干扰素-α同时给药的利巴韦林的给药量在约400-约1600mg/天，优选约600-约1200mg/天或约800-约1200mg/天并首选约1000-约1200mg/kg/天。还优选在儿科患者接受多个剂量的利巴韦林的同一时期施用聚乙二醇化干扰素-α的剂量。与聚乙二醇化干扰素-α同时给药给儿科患者的利巴韦林的给药量是约8-约15mg/kg/天，优选约8、12或15mg/kg/天，分多次给药。
聚乙二醇化干扰素-α制剂在口服给药时无效，因此优选的聚乙二醇化干扰素-α给药方法是非肠道给药，优选经皮下、IV或IM、注射给药。利巴韦林可以以胶囊、片剂或液体形式经口服与非肠道给药的聚乙二醇化干扰素-α联合给药。显然，两种药物的其它给药类型，只要它们可利用就值得考虑，例如通过鼻喷雾、经皮、利用栓剂、通过缓释剂型和通过肺吸入。可以采用任何形式给药，只要在施用适当剂型的同时不破坏活性成分。
本文所用的术语“核苷和核苷酸反转录酶抑制剂”(″NTRI″s)是指抑制HIV-1反转录酶的活性的核苷和核苷酸及其类似物，该酶催化病毒基因组HIV-1RNA转变为原病毒HIV-1DNA。
典型适用的NRTI类物质包括：齐多夫定(AZT)，由Glaxo-WellcomeInc.，Research Triangle，NC 27709以商品名RETROVIR出售；二脱氧肌苷(ddl)，由Bristol-Myers Squibb Co.，Princeton，NJ 08543以商品名VIDEX出售；扎西他宾(ddC)，由Roche Pharmaceuticals，Nutley，NJ 07110以商品名HIVID出售；司他夫定(stavudine)(d4T)，由Bristol-Myers Squibb Co.，Princeton，NJ 08543以商品名ZERIT出售；拉米夫定(3TC)，由GlaxoWellcome Research Triangle，NC 27709以商品名EPIVIR出售；阿贝卡维(abacavir)(1592U89)，公开在WO96/30025中且由Glaxo-Wellcome Research Triangle，NC 27709以商品名ZIAGEN出售；adefovir dipivoxil[bis(POM)-PMEA]，由Gilead Sciences，Foster City，CA 94404以商品名PREVON出售；洛布卡维(lobucavir)(BMS-180194)，一种核苷反转录酶抑制剂，公开在EP-0358154和EP-0736533中并由Bristol-MyersSquibb，Princeton，NJ 08543开发；BCH-10652，一种反转录酶抑制剂(是BCH-10618和BCH-10619的外消旋体混合物的形式)，由BiochemPharma，Laval，Quebec H7V，4A7，Canada开发；依米他宾(emitricitabine)[(-)-FTC]由Emory University在Emory Univ.U.S.Patent No.5,814,639中获得许可并由Triangle Pharmaceuticals，Durham，NC 27707开发；β-L-FD4(也称作β-L-D4C和称作β-L-2’，3’-二脱氧-5-氟胞苷(cytidene))由Yale University许可给VionPharmaceuticals，New Haven CT 06511；和DAPD，一种嘌呤核苷，(-)-β-D-2，6，-二氨基嘌呤二氧戊环，公开在EP 0656778中并由EmoryUniversity和the University of Georgia许可给TrianglePharmaceuticals，Durham，NC 27707；和洛丹辛(lodenosine)(FddA)，9-(2，3-二脱氧-2-氟-b-D-苏型-呋喃戊糖基)腺嘌呤，一种酸稳定的含嘌呤反转录酶抑制剂，由NIH发现并由U.S.Bioscience Inc.，WestConshohoken，PA.19428开发。
本文所用的术语“非核苷逆转录酶抑制剂”(“NNRTI”)是指抑制HIV-1反转录酶的活性的非核苷类化合物。
典型的适用非核苷反转录酶抑制剂包括：奈韦拉平(BI-RG-587)，由Boehringer Ingelheim，Roxane Laboratories的制造商，Columbus，OH 43216以商品名VIRAMUNE出售；地拉韦定(delaviradine)(BHAP，U-90152)，由Pharmacia&Upjohn Co.，Bridgewater NJ 08807以商品名RESCRIPTOR出售；依法韦伦(efavirenz)(DMP-266)，一种苯并噁嗪-2-酮，公开在WO 94/03440中并由DuPont Pharmaceutical Co.，Wilmington，DE 19880-0723以商品名SUSTIVA出售；DuPont 961和DuPont 083均由DuPont Pharmaceutical Co.，Wilmington，DE19880-0723开发；PNU-142721，一种呋喃并吡啶-硫代嘧啶，由Pharmacia&Upjohn，Bridgewater NJ 08807开发；卡泊韦林(capravirine)(先前称作AG-1549或Shionogi#；S-1153)；5-(3，5-二氯苯基)-硫代-4-异丙基-1-(4-吡啶基)甲基-1H-咪唑-2-基甲基碳酸酯，公开在WO 96/10019中并由Agouron Pharmaceuticals，Inc.，LaJolla CA 92037-1020临床开发；MKC-442 1-(乙氧基甲基)-5-(1-甲基乙基)-6-(苯基甲基)-(2，4(1H，3H)-嘧啶二酮，由MitsubishiChemical Co.发现并由Triangle Pharmaceuticals，Durham，NC 27707开发；和(+)-calanolide A(NSC-675451)和B香豆素衍生物，公开在NIH U.S.专利No.5,489,697，许可给Med Chem Research，其共同开发了具有生命包膜的(+)calanolide A作为可口服给药产品。
本文所用的术语“蛋白酶抑制剂”(“P1”)是指HIV-1蛋白酶的抑制剂，这是一种病毒多蛋白前体(例如病毒GAG和GAG Pol多蛋白)蛋白水解裂解所需要的酶，使所述前体成为感染性HIV-1中所发现各种功能蛋白。HIV蛋白酶抑制剂包括具有拟肽结构、高分子量(7600道尔顿)和基本肽特征的化合物，例如CRIXIVAN(购自Merck)和非肽蛋白酶抑制剂，例如VIRACEPT(购自Agouron)。
典型适用的蛋白酶抑制剂包括：沙奎那韦(Ro 31-8959)，由RochePharmaceuticals，Nutley，NJ 07110-1199以商品名INVIRASE的硬凝胶胶囊和商品名为FORTOUASE的软凝胶胶囊出售；利托那韦(ritonavir)(ABT-538)，由Abbott Laboratories，Abbott Park，IL60064以商品名NORVIR出售；印地那韦(indinavir)(MK-639)，由Merck&Co.，Inc.，West Point，PA 19486-0004以商品名CRIXIVAN出售；MK-994，由Merck&Co.，Inc.，West Point，PA 19486-0004开发；奈福那韦(nelfnavir)(AG-1343)，由Agouron Pharmaceuticals，Inc.，LaJolla，CA 92037-1020以商品名VIRACEPT出售；Ag 1776，由AgouronPharmaceuticals，Inc.，LaJolla，CA 92037-1020开发；安普那韦(amprenavir)(141W94)，一种非肽蛋白酶抑制剂，商品名为AGENERASE，由Vertex Pharmaceuticals，Inc.，Cambridge，MA 02139-4211开发并由Glaxo-Wellcome，Research Triangle，NC以一种扩大发病规划(expanded access program)出售；拉西那韦(lasinavir)(BMS-234475)，由Bristol-Myers Squibb，Princeton，NJ 08543出售(最初由Novartis，Basel，Switzerland(CGP-61755)发现)；DMP-450，一种环脲，由Dupont发现并由Triangle Pharmaceuticals开发；BMS-2322632，PD 178390，由Pake-Davis.Morris Plains，NJ 07050开发；氮杂肽类化合物，由Bristol-Myers Squibb，Princeton，NJ 08543开发成为第二代HIV-1 PI；和ABT-378，由Abbott，Abbott Park，IL60064开发；和AG-1549，一种口服活性咪唑氨基甲酸酯，由Shionogi(Shionogi#S-1153)发现并由AgouronPharmaceuticals，Inc.，LaJolla CA 92037-1020开发。
本文所用的术语“抗HIV-1疗法”是指任何发现的单独或作为多药联合疗法，尤其是三重或四重联合药物疗法(称作HAART)的组成部分，有效治疗HIV-1感染的任何抗HIV-1药物。
典型的适用抗HIV-1疗法包括但不限于多药联合疗法，例如(i)至少三种抗HIV-1药物，选自两种NRTI类药物、一种PI、第二种PI和一种NNRTI；和(ii)至少两种抗HIV-1药物，选自NNRTI和PI类药物；参见下文的表I、II和III。
典型的适用HAART-多药联合疗法-包括(a)三重联合疗法，例如两种NRTI和一种PI；或(b)两种NRTI和一种NNRTI；和(c)四重联合疗法，例如两种NRTIs，一种PI和第二种PI或一种NNRTI。在首次治疗患者中，优选从三重联合疗法开始抗HIV-1治疗；优选采用两种NRTI和一种PI，除非存在对PI类药物的不耐受性。药物顺从性是必须的。应该每3-6个月监测CD4+和HIV-1-RNA血浆水平。可以增加一个病毒负荷平台，第四种药物，例如一种PI或一种NNRTI。参见下文表A。
表A
抗HIV-1多药联合疗法A.三重联合疗法1.两种NRTI1类+一种PI22.两种NRTI1+一种NNRTI3B.四重联合疗法4
两种NRTI+一种PI+第二种PI或一种NNRTIC.选择方案：5
两种NTRI1
一种NTRI5+一种PI2
两种PI6±一种NTRI7或NNRTI3
一种pI2+一种NRTI7+一种NNRTI3
表A的脚注
1.下列之一：齐多夫定+拉米夫定；齐多夫定+二脱氧肌苷；司他夫定+拉米夫定；司他夫定+二脱氧肌苷；齐多夫定+扎西他宾；也参见表I；
2.印地那韦、奈福那韦、利托那韦或沙奎那韦软凝胶胶囊。
利托那韦因其麻烦的副作用而很少使用。
沙奎那韦的旧制剂很少使用，因为其不良的生物利用度和有限的有效性，但新的沙奎那韦制剂应更加有效。也参见表II1。
3.奈韦拉平或地拉韦定。也参见表II。
4.参见A-M.Vandamne等Antiviral Chemistry+Chemotherapy 9：187第193-197页和图1+2。
5.选择方案是指用于因顺从性问题或毒性无法接受所推荐的方案的患者，而且可用于那些对所推荐方案失败或复发的患者。双重核苷联用可能在许多患者中导致HIV耐药性和临床失败。
6.多数数据得自沙奎那韦和利托那韦(分别400mgbid)。也参见表III。
7.齐多夫定、司他夫定或二脱氧肌苷。也参见表I。
其它适合与聚乙二醇化干扰素α联合给药的抗HIV-1药物包括：羟基脲、利巴韦林、IL-2和IL-12；和Yissum Project No.11607。上述抗HIV-1药物也可以联合聚乙二醇化干扰素α、联合任何抗HIV-1药物疗法给药，尤其是三重和四重药物联用，称作HAART。
羟基脲(Droxia)是核糖核苷三磷酸还原酶抑制剂，该酶参与T细胞的活化。NCI发现的羟基脲由Bristol-Myers Squibb开发。在临床前研究中，其显示出对二脱氧肌苷的活性具有协同作用并且已经利用司他夫定作研究。
Yissum Project No.11607，一种基于HIV-1 Vif蛋白的合成蛋白，由Yissum Research Development Co.，Jerusalem 91042，Israel作临床前期的开发。
IL-2公开在Ajinomoto的EP-0142268、Takeda的EP-0176299和Chiron的U.S.专利Nos.RE 33653、4530787、4569790、4604377、4748234、4752585和4949314中，由Chiron Corp.，Emeryville，CA94608-2997以商品名PROLEUKIN(aldesleukin)出售，其为用水重构和稀释的IV输注或皮下(sc)给药的冻干粉剂；优选的皮下剂量为约1-约20百万IU/天；更优选的皮下剂量约为15百万IU/天。
IL-12公开在WO 96/25171中并由Roche Pharmaceuticals，Nutley，NJ 07110-1199和American Home Products，Madison，NJ 07940出售；皮下剂量为约0.5μg/kg/天-约10μg/kg/天。
Pentafuside(DP-178，T-20)是一种36个氨基酸的合成肽，公开在U.S.专利No.5,464,933中，由Duke University许可给Trimeris，其与Duke University合作开发了pentafuside；pentafuside通过抑制HIV-1与靶向膜的融合起作用。Pentafuside(3-100mg/天)作为连续sc输注或注射与依法韦伦和两种PI类药物对HIV-1阳性患者给药，该患者难以用三重联合疗法治疗；优选施用100mg/天。第二代输注抑制剂T-1249(39aa)由Trimeris开发。正在开发的其它抑制剂包括CXCR4、AM03100和Merck&Co的INTERGRASE。
利巴韦林，1-β-D-呋喃核糖基-1H-1，2，4-三唑-3-甲酰胺，由ICNPharmaceuticals，Inc.，Costa Mesa，California出售，它在莫克索引中描述为化合物No.8199，第11版。其制备和制剂公开在美国专利No.4,211,771。
聚乙二醇化干扰素α，PEG12000-IFN-α2b(购自Schering P1oughResearch Institut，Kenilworth，NJ)可以提高利巴韦林的体外抗HIV-1活性。利用植物凝集素(“PHP”-P)活化外周血液单核细胞(“PBMC”)，PEG12000-IFN-α2b和利巴韦林的联合形式在动物和人体中所观察的相应血浆浓度的剂量下可以抑制HIV体外复制。通过Ficoll-Hypaque密度梯度离心法由一种HIV血清反应阴性供血者的血沉棕黄层分离出健康的PBMC。PBMC在细胞培养基A中2天内由1μg/ml植物凝集素(PHA-P)激活，细胞培养基A是：RPMI 1640补充了10％热灭活(+56℃，45分钟)胎牛血浆(FCS)、2mM L-谷氨酰胺和三种抗生素的混合物(青霉素、链霉素、新霉素；PSN)。这两天后，冲洗细胞并在1×106个细胞/ml下在细胞培养基B中培养，细胞培养基B是：细胞培养基A中补充了20IU/ml重组人白介素-2。细胞保持在+37℃下在5％CO2-空气加湿气氛中。用其它供血者的细胞重复2次该试验。总之，进行三次独立的试验。
PBMC用参比HIV-1-LAI菌株的1,000 50％组织培养感染剂量(TCID50)[F.Barre’-Sinoussi，Science，1983，220，868-871]感染。该菌株用PHA-P-活化的脐血单核细胞(UBMC)扩增。随后病毒储备液基于PHA-P活化的PBMC通过终点稀释法滴定。TCID50随后用Karber氏公式[Arch.Exp.Path.Pharmak.，1931，162，126-133]计算。
单独和合用的PEG12000-IFN-α2b和利巴韦林在HIV-1感染之前24小时给药，并且在培养中始终保持，同时用AZT作为对照。采用三种剂量的PEG12000-IFN-α2b和利巴韦林。
将200,000PHA-P-活化的PBMC加入到96孔微量滴定平板的各孔中。在感染之前用参比HIV-1-LAI菌株感染预处理细胞24小时。每周二次，收集细胞上清液，更新药物和培养基。第7天，在细胞上清液中测定RT活性，利用显微镜观察评估药物和药物联合形式的潜在细胞毒性效应。
利用Retro-Sys试剂盒按照制造商的介绍(Innovagen，Lund，Sweden)通过测定细胞上清液中反转录酶(″RT″)的活性可以测量病毒的复制。
利用累积RT活性和Chou J.&TC.微机软件计算有效剂量。
利用联合指数(CI)[Chou&Talalay，1984]用J&TC Chou微机软件，或分级抑制浓度(FIC)指数[Antimicrob.Agents.Chemother.，1987，31，1613-1617]分析联合效果。当CI或FIC指数等于1时，联合作用是加和的。当小于1.0时，联合作用是协同性的，并且当其大于1.0时，联合作用被判断为是拮抗性的。
在小鼠和HIV-1感染患者中测量的相应血浆浓度的剂量下，PEG12000-IFN-α2b以及PEG12000-IFN-α2b和利巴韦林的联合形式可以抑制HIV复制[BE.Gilbert，et al.Antimicrob.Agents Chemother.，1988，32.117-121；E.Connor at al.，Antimicrob.AgentsChemother.，1993，37，537-539]。
上文所列的这些抗HIV-1药物也可以联合聚乙二醇化干扰素α、联合任何抗HIV-1药物疗法一起给药，尤其是三重和四重药物联合疗法，称作HAART。
本文所用的术语“干扰素-α”是指抑制病毒复制、细胞增殖和调节免疫应答的高度同种特异性蛋白的家族。典型适用的干扰素-α类包括但不限于：重组干扰素α-2b，例如购自Schering Corporation，Kenilworth，N.J.的Intron-A干扰素；重组干扰素α-2a，例如购自Hoffmann-La Roche，Nutley，N.J.的Roferon干扰素；重组干扰素α-2C，例如购自Boehringer Ingelheim Pharmaceutical，Inc.，Ridgefield，CT.的Berofor α2干扰素；干扰素α-n1，天然α干扰素的提纯混合物，例如购自Sumitomo，Japan的Sumiferon或购自Glaxo-Wellcome Ltd.，London，Great Britain的Wellferon干扰素α-n1(INS)，或共有α干扰素，例如那些公开在U.S.PatentNos.4,897,471和4,695,623(尤其是其实施例7、8或9)中的干扰素和购自Amgen，Inc.，Newbury Park，CA的特定产品；或干扰素α-n3，天然α干扰素的混合物，由Interferon Sciences制备且购自PurdueFrederick Co.，Norwalk，CT.以商品名Alferon出售的产品。优选使用干扰素α-2a或α2b。在所有干扰素中，由于干扰素α2b在全世界内业已被最广泛地批准用于治疗慢性丙型肝炎感染，所以，首选该药物。干扰素α2b的制备公开在U.S.Patent No.4,530,901中。
本文所用的术语“聚乙二醇化干扰素α”是指干扰素α、优选干扰素α-2a和-2b的聚乙二醇修饰偶联物。优选的聚乙二醇-干扰素α-2b偶联物是PEG12000-干扰素α2b。在此所用的术语“12,000分子量聚乙二醇偶联的干扰素α”和“PEG12000-IFNα”是指按照例如国际专利申请No.WO 95/13090的方法制备的偶联物并且在干扰素α-2a或-2b氨基和平均分子量为12000的聚乙二醇之间具有尿烷键。
优选的PEG12000-干扰素α-2b是通过将PEG聚合物附着在IFNα-2b分子中的赖氨酸残基的ε氨基上制得的。单个PEG12000分子经尿烷键与IFNα-2b分子上的游离氨基偶联。这种偶联物的特征在于附加了PEG12000的分子量。该PEG12000-IFNα-2b偶联物配制为注射用冻干粉。IFNα与PEG偶联的目的在于通过显著延长其血浆半衰期来改善蛋白的转运，并由此提供IFNα的延迟活性。
其它干扰素α偶联物可以通过偶联干扰素α到水溶性聚合物上制得。此类聚合物的非限定示例包括其它聚亚烷基氧化物均聚物如聚丙二醇类化合物、聚氧乙烯化多元醇、及其共聚物和嵌段共聚物。除了含聚亚烷基氧化物的聚合物以外，有效的非抗原性物质如葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮类、聚丙烯酰胺类、聚乙烯醇类、含糖聚合物等也可以采用。所说的干扰素α-聚合物偶联物描述在美国专利No.4,766,106、美国专利No.4,917,888、欧洲专利申请No.0 236 987、欧洲专利申请No.0510 356、0 593 868和0 809 996(聚乙二醇化干扰素α-2a)和国际专利公开No.WO 95/13090中。
适合非肠道给药的聚乙二醇化干扰素α的药物组合物可以用适当的缓冲剂如Tris-HCl、乙酸盐或磷酸盐(如二碱价磷酸钠/一碱价磷酸钠缓冲剂)和药学可接受赋形剂(例如蔗糖)、载体(例如人血浆白蛋白)、毒性剂(例如NaCl)、防腐剂(例如硫柳汞、甲酚或苄醇(benylalcohol))和表面活性剂(例如吐温或多乙氧基醚类(polysorabates))在灭菌注射用水中配制。聚乙二醇化干扰素α可以在2-8℃的冰箱中作为冻干粉末保存。当在2℃和8℃下保存时该重构水溶液稳定并且可以在重构的24小时内使用。参见例如美国专利No，4,492,537、5,762,923，和5,776,582。并且重构水溶液也可以保存在预装多剂量注射器中，例如那些释放药物如胰岛素所用的注射器。典型的适用注射器包括包含预装瓶的体系，该预装瓶与笔式注射器如NOVOLET Novo Pen(购自NovoNordisk)相连，以及易于使用者自己注射的预装、笔式注射器。其它注射体系包括带有玻璃药筒的笔式注射器，该药筒在分开的隔室中含有稀释剂和冻干的聚乙二醇化干扰素α粉末。
某些由结构式I或II或III或IV表示的CCR5拮抗剂化合物可能存在不同的异构(例如对映体、非对映体和阻转异构体(atropisomers))形式。本发明包括所有这些单纯形式和混合物形式的异构体，包括外消旋混合物。
某些式I或II或III或IV的化合物本质为酸性，例如那些具有羧基或酚羟基的化合物。这些化合物可以形成药学可接受盐。此类盐的示例包括钠、钾、钙、铝、金和银盐。也可以考虑与药学可接受胺如氨、烷基胺、羟烷基胺、N-甲基谷氨酰胺等生成的盐。
某些式I或II或III或IV的碱性化合物也可以形成药学可接受盐，例如酸加成盐。譬如，吡啶-氮原子可以与强酸形成盐，而且具有碱性取代基如氨基的化合物还可以与弱酸形成盐。适合盐形成的酸的示例为盐酸、硫酸、磷酸、乙酸、柠檬酸、草酸、丙二酸、水杨酸、苹果酸、富马酸、琥珀酸、抗坏血酸、马来酸、甲磺酸和其它所属领域熟知的无机和羧酸类。所说的盐是以常规方式通过使游离碱形式与足够量的所需酸接触生成盐制得。通过用适当碱的稀释水溶液例如NaOH、碳酸钾、氨和碳酸氢钠稀水溶液处理所说的盐可以再生得到游离碱形式。游离碱形式在某些物理特性上或多或少地不同于其相应的盐，例如在极性溶剂中的溶解度，但酸和碱式盐在本发明的目的上等同于其相应的游离碱。
所有上述酸和碱式盐在本发明范围内是药学可接受盐，并且所有酸和碱式盐在本发明的目的上等同于相应的式I或II化合物的游离形式。
式I或II或III或IV的化合物是其它发明实体的发明。式I或II的化合物及其制备方法共同公开在共有的美国专利申请中(Attorney’sDocket#；INO1031)，并且式III或IV的化合物公开在共有的美国专利申请SN中(Attorney’s Docket#；IN01032)，其分别与本申请在同一天提交，其在此引入作为参考。
式I或II或II或IV的化合物也可以利用所属领域的已知方法制备，例如通过下列反应路线所述的方法、利用下列实施例所述的方法和采用WO 96/26196、WO 98/05292、WO 98/10425和WO 98/06697制备。
为了从式I或II或III或IV的化合物制备药物组合物，惰性、药学可接受载体可以是固体或液体。固体形式的制剂包括粉末、片剂、离散颗粒剂、胶囊、扁囊剂和栓剂。粉末和片剂可以含有约5-约95％的活性成分。适用的固体载体为所属领域已知，例如碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、糖或乳糖。片剂、粉末、扁囊剂和胶囊可以用作适合口服给药的固体剂型。药学可接受载体的实例和制备各种组合物的方法可以参见A.Gennaro(ed.)，Remington’s Pharmaceutical Sciences，18thEdition，(1990)，Mack Publishing Co.，Easton，Pennsylvania。
液体形式的制剂包括溶液、混悬液和乳液。实例可提及用于非肠道注射的水或水-丙二醇溶液或添加了甜味剂和遮光剂的口服溶液、混悬液和乳液。液体形式的制剂还可以包括鼻内给药的溶液。
适合吸入的气溶胶制剂可以包括溶液和粉末形式的固体，其可以与药学可接受载体合用，例如惰性压缩气体，如氮气。
还包括固体形式的制剂，其在使用之前立刻转化为口服或非肠道给药用的液体形式制剂。此类液体形式包括溶液、混悬液和溶液。
式I或II或III或IV的化合物还可以经皮给药。经皮组合物可以采取霜剂、洗剂、气溶胶和/或乳液的形式，并且可以含在所属领域为此目的常用的基质或储库型的透皮贴剂中。
优选式I或II或III或IV的化合物经口服给药。
优选所述药物制剂是单位剂量形式。在这种形式中，制剂被细分为含有适量活性化合物的适宜大小的单位剂量，例如获得所需目的的有效量。
按照具体的应用，式I或II或III或IV的活性化合物在制剂的单位剂量中的含量可以在约10mg-约500mg内改变或调整，优选约25mg-约300mg，更优选约50mg-约250mg，和首选约55mg-约200mg。
所用的实际剂量可以根据患者的需要和被治疗病症的严重性变化。判断具体情况中的适当剂量方案属于所属领域技术人员的技术范围内。通常，总的日剂量可以分开并且根据需要在当天内分次给药。
式I或II或III或IV的化合物和/或其药学可接受盐的给药量和频率应按照主治医师的判断考虑到多种因素如患者的年龄、情况和规模以及被治疗症状的严重性来调整。式I或II或III或IV化合物口服给药的典型推荐日剂量方案可以是约100mg/天-约300mg/天，优选150mg/天-250mg/天，更优选约200mg/天，分2-4次给药。
一名患有慢性丙型肝炎感染的患者可以表现出一种或多种下列体征或症状：
(a)ALT升高，
(b)抗HCV抗体试验为阳性，
(c)存在HCV，由血清中存在HCV-RNA的阳性试验证实，
(d)慢性肝病的临床特征，
(e)肝细胞损伤。
在本发明的一个优选方面，治疗有效量的聚乙二醇化干扰素-α和由结构式I或II或II或IV表示的CCR5拮抗剂化合物的联合疗法在第一疗程和第二疗程中与治疗有效量的利巴韦林和抗反转录病毒疗法(如HAART)联合施用给被HIV-1感染且表现出一种或多种体征或症状的患者，其用量足以消除或至少缓解一种或多种体征或症状，同时使HCV-RNA的血浆水平降低至少10的乘幂，而且优选至少在第二疗程结束时消除可检测到的HCV-RNA，并且在第二疗程后至少24周内保持无法检测到的HCV-RNA。第一疗程和第二疗程的时间之和约为40-50周，优选48周。利巴韦林的给药可以在第二疗程结束后中断，这取决于主治医师的判断。
在本发明全文中所用的术语“无法检测到的HCV-RNA”是指利用定量多循环反转录酶PCR法测定的HCV-RNA在每1ml患者血浆中少于100个拷贝。HCV-RNA在本发明中优选通过专业临床医师熟知的基于研究的RT-PCR方法来测量。该方法在此称作HCV-RNA/qPCR。HCV-RNA的检测下限为100拷贝/mL。血清HCV-RNA/qPCR测试和HCV基因型测试将由中心实验室进行。另外参见J.G.McHutchinson et al.(N.Engl.J.Med.，1998，339：1485-1492)，和G.L.Davis et al.(N.Engl.J.Med.339：1493-1499)。
在本发明的一个优选实施方案中，那些被HIV-1和HCV共同感染的患者在临床医师和患者适当考虑下用聚乙二醇化干扰素α和由式I或II或III或IV表示的CCR5拮抗剂化合物的联合疗法结合有关的利巴韦林和HAART联合形式来治疗；优选采用Schering Corp.以商品名REBETRON出售的干扰素α-2b-利巴韦林联合治疗。也参见J.G.McHutchinson et al.(N.Engl.J.Med.，1998，339：1485-1492)，和G.L.Davis et al.(N.Engl.J.Med.339：1493-1499)。利巴韦林，一种1-β-D-呋喃核糖基-1H-1，2，4-三唑-3-甲酰胺，购自ICNPharmaceuticals，Inc.，Costa Mesa，California，描述在莫克索引中，化合物编号为8199，第11版。其制备和制剂公开在美国专利4,211,771。
对于被HIV-1和HCV共同感染的儿科患者，适用的HAART包括NRTI+PI，如Nelfinavir+NNRTI；例如，依法韦伦联合上文所列的聚乙二醇化干扰素α和利巴韦林的剂量和剂量方案。也参见下文表I-IV。人生长激素如重组rDNA源的多肽激素，促生长素(somatropin)(由EliLilly&Co.，Indianapolis，IN 46285以商品名HUMATROPE出售)，可以以产品说明书中所列出的剂量和给药时间表、咨询有关的主治医师给予儿科患者，以减轻与聚乙二醇化干扰素α治疗有关的生长迟缓。
HAART联合聚乙二醇化干扰素-α施用给患者，也就是聚乙二醇化干扰素-α剂量可以在患者接受HAART的给药之前、之后或在同一时期内给药。人生长激素如重组rDNA源的多肽激素，促生长素(somatropin)(由Eli Lilly&Co.，Indianapolis，IN 46285以商品名HUMATROPE出售)，可以联合HAART和聚乙二醇化干扰素α根据产品说明书中所列出的剂量和给药时间表、咨询有关主治医师施用给被HIV-1感染的儿科患者。
在本发明的一个优选实施方式中，聚乙二醇化干扰素α是在由结构式I或II或III或IV表示的CCR5拮抗剂化合物和HAART的开始给药之前施用给HIV-1感染患者，并且优选在HAART开始给药之前约2-约4周。在本发明的另一优选实施方式中，聚乙二醇化干扰素α的给药同时开始，即在与结构式I或II或III或IV表示的CCR5拮抗剂化合物和HAART的给药当天开始。在本发明的另一优选实施方式中，聚乙二醇化干扰素-α是在HIV-1患者开始使用结构式I或II或III或IV表示的CCR5拮抗剂化合物和HAART之后给药。
本发明的HIV-1疗法的目标在于使HIV-1-RNA病毒负荷降低到可检测限以下。本发明全文中的“HIV-1-RNA的可检测限”是指利用定量、多循环反转录酶PCR方法测量的HIV-1RNA在每1ml患者血浆中少于约200至少于约约50个拷贝。HIV-1-RNA在本发明中优选利用扩增子(Amplicor)-1 Monitor 1.5(购自Roche Diagnsotics)或NuclisensHIV-1 QT-1的方法测量。该方法公开在Schooley，RT，AntiviralTherapy(1997)，2(Suppl.4)：59-70中。
NRTI类、NNRTI类、PI、pentafuside、IL-2、IL-12、由结构式I或II或III或IV表示的CCR5拮抗剂化合物和聚乙二醇化干扰素α的剂量和剂量方案应由主治医师鉴于包装内插入的许可剂量和剂量方案或根据考虑患者年龄、性别和状况以及HIV-1和HCV感染的严重性的方案作出判断。对于被HIV-1感染或被HIV-1和HCV合并感染的儿科患者，适用的HAART包括NRTI+PI，如Nelfinavir+NNRTI；例如，依法韦伦联合上文所列的聚乙二醇化干扰素α和利巴韦林的剂量和剂量方案。参见下文表I-IV的剂量和剂量方案。
下面的临床方案可以用于施用本发明的抗HIV-1疗法。这种临床方案的许多改进对于专业临床医师来说是显而易见的，下列研究设计不应解释为限定本发明方法的范围，本发明的范围仅由下文的权利要求书限定。例如参见J.G.McHutchinson et al.(N.Engl.J.Med.，1998，339：1485-1492)，和G.L.Davis et al.(N.Engl.J.Med.339：1493-1499)。
研究群体应该包括诊断被HIV-1感染的男性和女性患者，其或是首次治疗或是已经治疗，如果它们符合下列入选和排除标准就应该入选：对象入选标准：
·被诊断为被HIV-1感染的患者，其或是首次治疗或已经治疗。
·HIV-RNA通过扩增子(Amplicor)试验(1.5版)测定大于500个拷贝/mL。
·CD4+计数大于100个拷贝/ml，优选大于200个细胞/mL。
·对象身体健康良好并且具有临床可接受的安全实验室试验结果和ECG。
·下列实验室参数必须符合：
◆血小板计数·100,00/mL。
◆血红蛋白·9gm/dL(90gm/L)
◆绝对嗜中性白血病数·1500/μL
◆肌酸酐∠1.5倍正常值的上限
◆SGOT/SGPT≤5x正常值的上限
◆胆红素＜2.5x正常值的上限
·妊娠尿试验为阴性(只限女性)
对象必须愿意和能够提交书面报告并且能够坚持完成方案中规定的程序表。对象排除标准
·授乳或妊娠妇女或没有使用适当节育的妇女。
·对大肠杆菌蛋白产生变态反应的对象。
·患有严重的早年医学/精神病病史的对象，尤其是抑郁或痴呆。
在本发明的一个优选实施方式中，对象随机接受聚乙二醇化干扰素α2b，即PEG12000-干扰素α2b，剂量为0.5-4.5μg/kg，例如0.5、1.0、1.5、3.0或4.5μg/kg剂量，通过每周皮下注射一次。与聚乙二醇化干扰素α同时给药的利巴韦林的用量是约400-约1600mg/天，优选约600-约1200mg/天或约800-约1200mg/天和首选约1000-约1200mg/kg/天。
根据具体的应用，式I或II或III或IV的CCR5拮抗剂化合物在制剂的单位剂量中的含量可以在约10mg-约500mg内变化或调整，优选约25mg-约300mg，更优选约50mg-约250mg，和首选约55mg-约200mg。
HAART还可以在聚乙二醇化干扰素α2b，即PEG12000-干扰素α2b、式I或II或III或IV的CCR5拮抗剂化合物和利巴韦林的给药之前开始或同时给药。
下列结构的CCR5拮抗剂化合物是适用于本发明的式I和II的代表化合物：其中R6、X和R2如下表定义：
下列结构的CCR5拮抗剂化合物是适用于本发明的式III和IV的代表化合物：其中R、R3、R6和R2如下表中定义：
所用的实际剂量可以根据患者的需要和被治疗病症的严重性变化。判断具体情况的适当剂量方案属于所属领域专业人员的技术范围。通常，总的日剂量可以分开并且按需要在当天分次给药。总体设计和研究计划：
基本功效目标是使HIV-I-RNA血浆水平降低10倍或更多。
血浆HIV-1-RNA/qPCR测试是在中心实验室进行。阳性HIV-1-RNA试验结果必需在基线；只有对HIV-1-RNA呈阳性的患者才合格参加。
表I
核苷反转录酶抑制剂(NRTI)的剂量和剂量方案NRTI(商品名，销售商) 常规成人剂量齐多夫定，AZT(Retrovir-Glaxo 200mg PO tid或300mg PO bidWellcome)*司他夫定(Zerit-Bristol-Myers 40mg PO bid1Squibb)*二脱氧肌苷(Videx-Bristol-Myers 200mg PO bid2Squibb)*拉米夫定(Epivir-Glaxo 150mg PO bid3Wellcome)*扎西他宾(Hivid-Roche) 0.75mg PO tid齐多夫定+拉米夫定(Combivir- 1片 PO bid4Glaxo Wellcome)阿贝卡维(Ziagen-Glaxo-Wellcome) 200或400mg PO tidAdefovir dipivoxi l(Prevon- 125或200mg PO qd5Gilead Sciences)洛布卡维(BMS-180194-BMS) 200mg PO bid6
200mg PO，qidBCH-10652(Biochem Pharma) 400mg PO，qid7依米他宾((-)-FTC-Triangle 200mg PO qd8Pharmaceuticals)Beta-L-FD4(B-L-D4C-Vion 0.2-25mg/ky/天9Pharmaceutical)DAPD(Triangle Pharmaceuticals) _____10洛丹辛(FddA-U.S.Bioscience) 1.6-3.2mg/Kg PO bid11
表I的脚注*以液体制剂获得。1对于体重小于60kg的患者，30mg PO bid。2对于片剂；＜60kg的患者，125mg PO bid；＞60kg的患者，200mg PO bid；对于粉末，剂量在167mg(＜60kg)-250mg PO(＜60kg)bid内变化。剂量应在进食之前至少30分钟或至少2小时之后摄取。
表I的脚注3对于轻于50kg的患者，2mg/kg PO bid。4各个片剂含有300mg的齐多夫定和150mg的拉米夫定。5在扩大发病规划下利用-NIH-第III自发阶段试验6阶段II。7阶段I/II；参见PharmaProjects，sections J5A&J5Z。8阶段II/III；参见PharmaProjects，sections J5A&J5Z。9临床前；在鸭HBV模型中有效；参见PharmaProjects，sections J5A&J5Z。10临床前；PO和IV有效；DAPD是另一二氧杂环戊烯(dioxolene)嘌呤的前药，DXG。参见PharmaProjects，sections J5A&J5Z。11阶段II，FddA对于每天给药一次有效。
表II非核苷反转录酶抑制剂(NNRTI)的剂量和剂量方案NNRTI(商品名，销售商) 常规成人剂量和剂量方案奈韦拉平(Viramune-Roxane) 200mg PO bid1Delavirdine(Rescriptor- 400mg PO tidPharmacia&Upjohn)依法韦伦(Sustiva，Du Pont) 200mg PO qid2PNU-142721(Pharmacia+Upjohn) __3AG-1549(Agouvon __4Pharmaceuticals)MKC-442(Triangle 750mg PO bid5Pharmaceuticals)(+)-Calanolide A(Med Chem 800mg PO6Research)1在用奈韦拉平治疗以降低皮疹危险性的第一个两周内，患者应仅摄取一次200-mg片剂/天。2依法韦伦与印地那韦+两种NRTI的四重疗法或依法韦伦+AZT+拉米夫定的三重疗法。3临床前阶段；参见PharmaProjects，sections J5A&J5Z4阶段I/II评估其它抗HIV-1疗法的剂量和共同(comcomitant)使用；参见Pharmaprojects，sections J5A&J5Z.5(a)MKC-442与司他夫定和拉米夫定或二脱氧肌苷，或(b)MKC-442与奈福那韦(nelfinavir)(qv)和NRTI的三重疗法。6阶段I；参见Pharmaprojects，sections J5A&J5Z
表III
蛋白酶抑制剂(PI)的剂量和剂量方案PI(商品名，销售商) 剂量+剂量方案沙奎那韦(Invirase-硬凝胶胶囊- 600mg PO tid1Roche)(Fortovase-软凝胶胶囊-Roche) 1100mg PO tid1利托那韦(Norvir-Abbott) 600mg PO bid2印地那韦(Crixivan-Merck) 800mg PO qid3奈福那韦(Viracept-Agouron) 750mg PO tid4Agenerase(安普那 900mg-1200mg PO bid5韦，141W94，Glaxo)拉西那韦(BMS-234475，BMS) __6DMP-450(Triangle __7Pharmaceuticals)BMS-2322623(BMS) __8ABT-378(Abbott) 60mg PO bid91与进餐同时或在进餐后2小时内。2进食。该液体制剂具有令人不快的味道；制造商建议与巧克力奶或液体营养补剂一起摄取。3与水一起，或在进食前1小时或进食后2小时。摄入印地那韦的患者应该每天饮用至少48盎司(1.5L)的水。4与食物一起。5安普那韦与AZT+拉米夫定+阿贝卡维的四重联合疗法。6阶段I/II；参见Pharmaprojects，sections J5A&J5Z。7阶段II；参见Pharmaprojects，sections J5A&J5Z。8临床前研究；前药BMS 2322623的酯促进口服吸收；参见Pharmaprojects，sections J5A&J5Z。9阶段I的研究显示，ABT-378比利托那韦有效10X；参见Pharmaprojectssections J5A&J5Z。
表IV
其它抗HIV-1药物药物(商品名，销售商) 常用成人剂量和剂量方案羟基脲(Droxia，BMS) 1000mg PO qid1利巴韦林(Rebetol，Schering- 600mg-1200mg/天，POPlough)IL-2(Proleukin，Chiron Corp.) 1-20百万IU/天，scIL-12(Roche) 0.5-10μg/kg/day，scYissumProjectNo.11607(Yissum) __21羟基脲与400mg ddl+500mgAZT的三重疗法；参见PharmaProjects，section B3C1。2临床前；参见Pharmaprojects，sections J5A&J5Z。
下列试验可以来鉴定作为CCR5拮抗剂的化合物并且测定式I-IV的化合物的CCR5拮抗活性。这些试验公开在共有的美国专利申请(Attorney’s Docket#；INO1031)和共有的美国专利申请SN(Attorney’s Docket#；INO1032)中，与本申请在同一天提交。CCR5膜结合试验：
利用CCR5膜结合试验的高产率筛选鉴别RANTES结合的抑制剂。该试验采用由表达人CCR5趋化因子受体的NIH 3T3细胞制备的膜，所述受体具有结合RANTES的能力，RANTES是该受体的一种天然配体。使用96孔平板格，膜制品与125I-RANTES在化合物存在或不存在的条件下培养1小时。化合物连续稀释在0.001ug/ml-1ug/ml的宽范围内并且试验一式三份。利用玻璃纤维滤器收获该反应混合物，充分洗涤。将重复试验的总数平均，并且数据报告为抑制50％全部125I-RANTES结合作用所需要的浓度。在膜结合试验中具有有效活性的化合物进一步在次级的基于细胞的HIV-1进入和复制试验中定性。HIV-1进入试验：
按照Connor等Virology，206(1995)，p.935-944所述通过编码HIV-1的NL4-3菌株的质粒(其业已通过包膜基因的突变和荧光素酶受体质粒的引入修饰)和编码若干HIV-1包膜基因之一的质粒共转染制备复制缺损性HIV-1受体病毒体。在通过磷酸钙沉淀使两种质粒转染后，在第3天收获病毒的上清液，测定功能病毒的滴定度。随后用这些储备液感染稳定表达CD4和趋化因子受体CCR5的U87细胞，其已经在试验化合物存在或不存在的条件下预培养。感染在37℃下进行2小时，冲洗细胞并用含有化合物的新培养基更换培养基。令细胞培养3天，溶解并且测定荧光素酶活性。结果报告为化合物抑制50％的对照培养物中的荧光素酶活性所需要的浓度。HIV-1复制试验：
本试验采用原代外周血单核细胞或稳定的U87-CCR5细胞系来测定抗CCR5化合物阻断初级HIV-1菌株的感染的效果。由正常健康捐献者提纯初级淋巴细胞并且在感染之前用PHA和IL-2体外刺激3天。使用96孔平板格，细胞用药物在37℃下预处理1小时，随后用亲M(M-tropic)-HIV-1分离物感染。感染后，冲洗细胞除去残余接种物，在化合物存在下培养4天。收获培养上清液，通过测定病毒p24抗原浓度来测量病毒的复制。钙通量试验：
在加入化合物或天然CCR5配体之前使表达HIV共同受体CCR5的细胞负荷钙敏感染料。具有激动特性的化合物将在细胞中引起钙通量信号，而CCR5拮抗剂被证实是本身无法引起信号但能够通过天然配体RANTES阻断这种信号的化合物。GTPγS结合试验：
GTPγS结合试验测定CCR5配体对受体的活化试验。这个试验测定35S标记-GTP与受体偶联G-蛋白的结合，这种结合的出现是受体被适当配体活化的结果。在本试验中，使CCR5配体RANTES与得自CCR5表达细胞的膜一起培养，通过分析结合的35S标记来测定对受体活化(或结合)的结合。该试验通过诱导受体的活化来定量测定化合物是否具有激动特性，或者通过测量对RANTES结合以竞争或非竞争方式的抑制来测定化合物的是否具有拮抗特性。趋化性试验：
趋化性试验是定性分析试验化合物的激动剂对拮抗剂特性的功能试验。该试验测定表达人CCR5的非粘连鼠细胞系(BaF-550)在应答试验化合物或天然配体(即RANTES、MIP-1β)中迁移跨越膜的能力。细胞通过跨过可渗透膜迁移向具有激动活性的化合物。拮抗剂化合物不但无法引起趋化性，而且还可以抑制对已知CCR5配体响应的细胞迁移。
在测定抑制RANTES结合的试验中，式I-IV的化合物的活性范围是约0.5-约1500nM的Ki，优选的化合物具有约0.5-约750nM的活性范围，更优选约0.5-300nM，和首选约0.5-50nM。