一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201410463162.9

申请日:

2014.09.12

公开号:

CN104160966A

公开日:

2014.11.26

当前法律状态:

公开

有效性:

审中

法律详情:

公开

IPC分类号:

A01H4/00

主分类号:

A01H4/00

申请人:

南京通泽农业科技有限公司

发明人:

杨存

地址:

210046 江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边108号1幢701室

优先权:

专利代理机构:

代理人:

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内容摘要

本发明涉及一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法,包括腋芽的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽。采用本发明的蒙古栎再生率高,操作简单且生长周期短,可以获得大量的蒙古栎幼苗。

权利要求书

1.   一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法,包括腋芽的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽,其主要步骤如下:
(1)取蒙古栎的腋芽,对其进行灭菌处理;
(2)将步骤(1)灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2,4-D2.0mg/l+柠檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导,附加蔗糖30g/L,琼脂5.5g/L,PH6.0,光照800lx;
(3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6-BA,附加蔗糖30g/L,琼脂5.5g/L,PH6.0,光照2000lx;
(4)取步骤(3)分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MS+NAA0.1-0.2mg/L+0.1-0.2mg/LIBA+EMT1.0-2.0mg/L;
(5)取步骤(4)生根后的蒙古栎试管苗进行炼苗培养。

2.
   按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(1)中所述蒙古栎无菌腋芽的获得为,取蒙古栎腋芽,在洗洁精中浸泡3min,清洗表面,流水冲洗0.5h,超净工作台上75%酒精处理20s,1%高锰酸钾处理15min,无菌水冲洗5遍。

3.
   按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(2)腋芽诱导过程中附加了柠檬酸,可以抗氧化,防止培养过程中褐化现象的产生。

4.
   按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(4)中的生根培养基中附加了EMT,可以促进蒙古栎的壮苗培养。

5.
   按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(5)中蒙古栎的炼苗培养方法为试管苗3cm,具有3-4条根,在自然光下炼苗一周,移栽到基质为草炭:锯末=1:1的基质中,基质提前在高压灭菌锅中灭菌。

说明书

一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法
技术领域
本发明涉及蒙古栎组织培养的快繁方法,属于植物技术领域
背景技术
蒙古栎,Quecusmongolica,为壳斗科、栎属,落叶乔木,国家二级珍贵树种,又名:柞木,柞栎,蒙栎,柞树,是中国东北林区中主要的次生林树种。蒙古栎主要分布在中国东北、华北、西北各地,华中地区亦少量分布。在俄罗斯、日本、蒙古及朝鲜半岛也有分布。喜光,在侧方庇荫条件下,高生长较快。适应性强,耐火,耐干旱瘠薄,耐寒性强,能耐-50℃低温。喜温凉气候,喜中性至酸性土壤,通常生于向阳干燥山坡。深根性,主根发达,不耐移植。 其树皮中药名为柞树皮,春、秋季采,刮去外层粗皮,晒干或煅灰。清热利湿,解毒消肿。主治痢疾;肠炎,小儿消化不良,气管炎,黄疸,痔疮等症。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种蒙古栎的快速繁殖方法,由该方法所制备的蒙古栎再生分化率高,遗传稳定性好,可以短期内获得大量的蒙古栎幼苗。
本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取蒙古栎腋芽,在洗洁精中浸泡3min,清洗表面,流水冲洗0.5h,超净工作台上75%酒精处理20s,1%高锰酸钾处理15min,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2,4-D2.0mg/l+柠檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导,附加蔗糖30g/L,琼脂5.5g/L,PH6.0,光照800lx,诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6-BA,附加蔗糖30g/L,琼脂5.5g/L,PH6.0,光照2000lx,分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MS+NAA0.1-0.2mg/L+0.1-0.2mg/LIBA+EMT1.0-2.0mg/L,试管苗3cm,具有3-4条根,在自然光下炼苗一周,移栽到基质为草炭:锯末=1:1的基质中,基质提前在高压灭菌锅中灭菌。
采用本发明制备的蒙古栎成活率高,周期短,产量大,能耗少,利于大规模种植。
下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
取蒙古栎腋芽,在洗洁精中浸泡3min,清洗表面,流水冲洗0.5h,超净工作台上75%酒精处理20s,1%高锰酸钾处理15min,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2,4-D2.0mg/l+柠檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导,附加蔗糖30g/L,琼脂5.5g/L,PH6.0,光照800lx,诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6-BA,附加蔗糖30g/L,琼脂5.5g/L,PH6.0,光照2000lx,分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MS+NAA0.1mg/L+0.1mg/LIBA+EMT1.0mg/L,试管苗3cm,具有3-4条根,在自然光下炼苗一周,移栽到基质为草炭:锯末=1:1的基质中,基质提前在高压灭菌锅中灭菌,再生植株成活率90%。
实施例2
取蒙古栎腋芽,在洗洁精中浸泡3min,清洗表面,流水冲洗0.5h,超净工作台上75%酒精处理20s,1%高锰酸钾处理15min,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2,4-D2.0mg/l+柠檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导,附加蔗糖30g/L,琼脂5.5g/L,PH6.0,光照800lx,诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6-BA,附加蔗糖30g/L,琼脂5.5g/L,PH6.0,光照2000lx,分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MS+NAA0.2mg/L+0.2mg/LIBA+EMT2.0mg/L,试管苗3cm,具有3-4条根,在自然光下炼苗一周,移栽到基质为草炭:锯末=1:1的基质中,基质提前在高压灭菌锅中灭菌,再生植株成活率88%。
实施例3
取蒙古栎腋芽,在洗洁精中浸泡3min,清洗表面,流水冲洗0.5h,超净工作台上75%酒精处理20s,1%高锰酸钾处理15min,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2,4-D2.0mg/l+柠檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导,附加蔗糖30g/L,琼脂5.5g/L,PH6.0,光照800lx,诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6-BA,附加蔗糖30g/L,琼脂5.5g/L,PH6.0,光照2000lx,分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MS+NAA0.2mg/L+0.2mg/LIBA+EMT1.0mg/L,试管苗3cm,具有3-4条根,在自然光下炼苗一周,移栽到基质为草炭:锯末=1:1的基质中,基质提前在高压灭菌锅中灭菌,再生植株成活率87%。

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资源描述

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1、10申请公布号CN104160966A43申请公布日20141126CN104160966A21申请号201410463162922申请日20140912A01H4/0020060171申请人南京通泽农业科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边108号1幢701室72发明人杨存54发明名称一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法57摘要本发明涉及一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法,包括腋芽的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽。采用本发明的蒙古栎再生率高,操作简单且生长周期短,可以获得大量的蒙古栎幼苗。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知。

2、识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104160966ACN104160966A1/1页21一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法,包括腋芽的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽,其主要步骤如下(1)取蒙古栎的腋芽,对其进行灭菌处理;(2)将步骤(1)灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW6BA03MG/L2,4D20MG/L柠檬酸10MG/L诱导培养基中进行愈伤组织诱导,附加蔗糖30G/L,琼脂55G/L,PH60,光照800LX;(3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKWNAA005MG/LTDZ005MG/L25MG/L6B。

3、A,附加蔗糖30G/L,琼脂55G/L,PH60,光照2000LX;(4)取步骤(3)分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MSNAA0102MG/L0102MG/LIBAEMT1020MG/L;(5)取步骤(4)生根后的蒙古栎试管苗进行炼苗培养。2按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法,其特征在于步骤(1)中所述蒙古栎无菌腋芽的获得为,取蒙古栎腋芽,在洗洁精中浸泡3MIN,清洗表面,流水冲洗05H,超净工作台上75酒精处理20S,1高锰酸钾处理15MIN,无菌水冲洗5遍。3按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法,其特征在于步骤(2)腋芽诱导过程中附加了柠檬酸,可以抗氧。

4、化,防止培养过程中褐化现象的产生。4按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法,其特征在于步骤(4)中的生根培养基中附加了EMT,可以促进蒙古栎的壮苗培养。5按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法,其特征在于步骤(5)中蒙古栎的炼苗培养方法为试管苗3CM,具有34条根,在自然光下炼苗一周,移栽到基质为草炭锯末11的基质中,基质提前在高压灭菌锅中灭菌。权利要求书CN104160966A1/2页3一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法技术领域0001本发明涉及蒙古栎组织培养的快繁方法,属于植物技术领域。背景技术0002蒙古栎,QUECUSMONGOLICA,为壳斗科、栎属,落叶乔。

5、木,国家二级珍贵树种,又名柞木,柞栎,蒙栎,柞树,是中国东北林区中主要的次生林树种。蒙古栎主要分布在中国东北、华北、西北各地,华中地区亦少量分布。在俄罗斯、日本、蒙古及朝鲜半岛也有分布。喜光,在侧方庇荫条件下,高生长较快。适应性强,耐火,耐干旱瘠薄,耐寒性强,能耐50低温。喜温凉气候,喜中性至酸性土壤,通常生于向阳干燥山坡。深根性,主根发达,不耐移植。其树皮中药名为柞树皮,春、秋季采,刮去外层粗皮,晒干或煅灰。清热利湿,解毒消肿。主治痢疾;肠炎,小儿消化不良,气管炎,黄疸,痔疮等症。发明内容0003本发明所要解决的技术问题是提供一种蒙古栎的快速繁殖方法,由该方法所制备的蒙古栎再生分化率高,遗传。

6、稳定性好,可以短期内获得大量的蒙古栎幼苗。0004本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的取蒙古栎腋芽,在洗洁精中浸泡3MIN,清洗表面,流水冲洗05H,超净工作台上75酒精处理20S,1高锰酸钾处理15MIN,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW6BA03MG/L2,4D20MG/L柠檬酸10MG/L诱导培养基中进行愈伤组织诱导,附加蔗糖30G/L,琼脂55G/L,PH60,光照800LX,诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKWNAA005MG/LTDZ005MG/L25MG/L6BA,附加蔗糖30G/L,琼脂55G/L,PH60,光照2000LX,分化出来的芽。

7、苗放入生根培养基1/4MSNAA0102MG/L0102MG/LIBAEMT1020MG/L,试管苗3CM,具有34条根,在自然光下炼苗一周,移栽到基质为草炭锯末11的基质中,基质提前在高压灭菌锅中灭菌。0005采用本发明制备的蒙古栎成活率高,周期短,产量大,能耗少,利于大规模种植。0006下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施方式0007实施例1取蒙古栎腋芽,在洗洁精中浸泡3MIN,清洗表面,流水冲洗05H,超净工作台上75酒精处理20S,1高锰酸钾处理15MIN,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW6BA0。

8、3MG/L2,4D20MG/L柠檬酸10MG/L诱导培养基中进行愈伤组织诱导,附加蔗糖30G/L,琼脂55G/L,PH60,光照800LX,诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKWNAA005MG/LTDZ005MG/L25MG/L6BA,附加蔗糖30G/L,琼脂55G/L,PH60,光照2000LX,分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MSNAA01MG/L01MG/LIBAEMT10MG/L,试说明书CN104160966A2/2页4管苗3CM,具有34条根,在自然光下炼苗一周,移栽到基质为草炭锯末11的基质中,基质提前在高压灭菌锅中灭菌,再生植株成活率90。0008实施例2取蒙古栎腋芽,在洗。

9、洁精中浸泡3MIN,清洗表面,流水冲洗05H,超净工作台上75酒精处理20S,1高锰酸钾处理15MIN,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW6BA03MG/L2,4D20MG/L柠檬酸10MG/L诱导培养基中进行愈伤组织诱导,附加蔗糖30G/L,琼脂55G/L,PH60,光照800LX,诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKWNAA005MG/LTDZ005MG/L25MG/L6BA,附加蔗糖30G/L,琼脂55G/L,PH60,光照2000LX,分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MSNAA02MG/L02MG/LIBAEMT20MG/L,试管苗3CM,具有34条根,在自。

10、然光下炼苗一周,移栽到基质为草炭锯末11的基质中,基质提前在高压灭菌锅中灭菌,再生植株成活率88。0009实施例3取蒙古栎腋芽,在洗洁精中浸泡3MIN,清洗表面,流水冲洗05H,超净工作台上75酒精处理20S,1高锰酸钾处理15MIN,无菌水冲洗5遍,灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW6BA03MG/L2,4D20MG/L柠檬酸10MG/L诱导培养基中进行愈伤组织诱导,附加蔗糖30G/L,琼脂55G/L,PH60,光照800LX,诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKWNAA005MG/LTDZ005MG/L25MG/L6BA,附加蔗糖30G/L,琼脂55G/L,PH60,光照2000LX,分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MSNAA02MG/L02MG/LIBAEMT10MG/L,试管苗3CM,具有34条根,在自然光下炼苗一周,移栽到基质为草炭锯末11的基质中,基质提前在高压灭菌锅中灭菌,再生植株成活率87。说明书CN104160966A。

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