一种豺皮樟的快速繁殖方法.pdf

摘要
申请专利号：	CN201410463083.8	申请日：	2014.09.12
公开号：	CN104160965A	公开日：	2014.11.26
当前法律状态：	公开	有效性：	审中
法律详情：	公开
IPC分类号：	A01H4/00	主分类号：	A01H4/00
申请人：	南京通泽农业科技有限公司
发明人：	杨存
地址：	210046 江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边108号1幢701室
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内容摘要

本发明涉及一种豺皮樟的快速繁殖方法，包括茎段的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导和炼苗移栽。本发明豺皮樟组培方法操作简便，增殖率高，克服野生资源有限，采集困难，可以短期内获得大量的豺皮樟幼苗，为豺皮樟的开发提供基础。

权利要求书

1.   一种豺皮樟的快速繁殖方法，包括腋芽的消毒、丛生芽的诱导、丛生芽的增殖、生根培养，其主要步骤如下：
（1）取豺皮樟带腋芽的茎段，对其进行常规消毒处理；
（2）将步骤（1）灭菌处理过的豺皮樟带芽茎段接入改良WS+IAA0.2mg/L+6-BA0.8mg/L+150g/L香蕉汁培养基中培养，附加蔗糖3%，琼脂0.6%，PH5.8-5.9，光照1000lx，温度24℃；
（3）取步骤（2）生长出来的豺皮樟腋芽，放入增殖培养基改良WS +IBA0.05-0.15mg/L+6-BA0.5-1.0mg/L+硫代硫酸钠100mg/L+0.2mg/LGA₃附加蔗糖3%，琼脂0.6%，PH5.8-5.9，光照1500lx，温度24℃；
（4）取步骤（3）增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/4-3/4MS+NAA0.5mg/L，附加蔗糖2%，琼脂0.55%，PH5.8-5.9，光照2000lx；
（5）取步骤（4）生根后的豺皮樟试管苗移栽到大田进行炼苗培养。

2.   按照权利要求1所述的一种豺皮樟的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述豺皮樟带芽茎段的灭菌处理为：取豺皮樟带芽茎段，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗40min，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理15min，无菌水冲洗5-7遍。

3.   按照权利要求1所述的一种豺皮樟的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（2）腋芽诱导培养中附加了150g/L香蕉汁，有助于不定芽的分化。

4.   按照权利要求1所述的一种豺皮樟的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（3）中的增殖培养基中附加了硫代硫酸钠100mg/L，可以防止褐化现象的发生。

5.   按照权利要求1所述的一种豺皮樟的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（4）中筛选1/4、1/2、3/4对豺皮樟生根的诱导。

6.   按照权利要求1所述的一种豺皮樟的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（5）中豺皮樟的炼苗培养方法为将试管苗掀去封口膜，在培养室中培养一周后从培养瓶中取出，洗去根部培养基，栽植于野外培养，选山坡地或梯田较好，土壤不能是冷土，选择沙土地，深耕，栽植前施农家肥，栽植后使用喷雾器喷洒0.2%多菌灵，培养20天后，统计成活率。

说明书

一种豺皮樟的快速繁殖方法
技术领域
本发明涉及组培条件下豺皮樟的培养，属于植物技术领域。
背景技术
豺皮樟，樟科，常绿灌木或小乔木，Litsea rotundifolia var. oblongifolia，又名：大灰木、百叶仔、白柴、香叶子分布于广东、广西、江西、湖南、贵州。生于山下灌木丛或疏林中。种子含脂肪油；果叶含芳香油；根含生物碱、酚类、氨基酸；叶含黄酮甙、酚类、氨基酸、糖类等。是一种中药材，以根入药，祛风除湿，行气止痛，活血通经。用于风湿性关节炎，腰腿痛，跌打损伤，痛经，胃痛，腹泻，水肿。目前豺皮樟的采集多采用野外采收，采收困难，组培方法可以克服这一缺点，且操作简单，遗传稳定性好，为豺皮樟的开发利用提供良好依据。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供豺皮樟的快速繁殖方法，组培方法操作简便、增殖率高，克服野生资源有限，采集困难，可以短期内获得大量的豺皮樟幼苗，为豺皮樟的开发提供基础。
为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：
取豺皮樟带芽茎段，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗40min，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理15min，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的豺皮樟带芽茎段接入改良WS+IAA0.2mg/L+6-BA0.8mg/L+150g/L香蕉汁培养基中培养，附加蔗糖3%，琼脂0.6%，PH5.8-5.9，光照1000lx，温度24℃，生长出来的豺皮樟腋芽，放入增殖培养基改良WS+IBA0.1mg/L+6-BA1mg/L+硫代硫酸钠100mg/L+0.2mg/LGA₃附加蔗糖3%，琼脂0.6%，PH5.8-5.9，光照1500lx，温度24℃，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MS+NAA0.5mg/L，附加蔗糖2%，琼脂0.55%，PH5.8-5.9，光照2000lx，生根后的豺皮樟试管苗移栽到大田进行炼苗培养，将试管苗掀去封口膜，在培养室中培养一周后从培养瓶中取出，洗去根部培养基，栽植于野外培养，选山坡地或梯田较好，土壤不能是冷土，选择沙土地，深耕，栽植前施农家肥，栽植后使用喷雾器喷洒0.2%多菌灵，培养20天后，统计成活率。
采用本发明制备的豺皮樟生长速度快，操作简单，能耗小，污染小。
下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
取豺皮樟带芽茎段，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗40min，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理15min，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的豺皮樟带芽茎段接入改良WS+IAA0.2mg/L+6-BA0.8mg/L+150g/L香蕉汁培养基中培养，附加蔗糖3%，琼脂0.6%，PH5.8-5.9，光照1000lx，温度24℃，生长出来的豺皮樟腋芽，放入增殖培养基改良WS+IBA0.05mg/L+6-BA0.5mg/L+硫代硫酸钠100mg/L+0.2mg/LGA₃附加蔗糖3%，琼脂0.6%，PH5.8-5.9，光照1500lx，温度24℃，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/4MS+NAA0.5mg/L，附加蔗糖2%，琼脂0.55%，PH5.8-5.9，光照2000lx，生根后的豺皮樟试管苗移栽到大田进行炼苗培养，将试管苗掀去封口膜，在培养室中培养一周后从培养瓶中取出，洗去根部培养基，栽植于野外培养，选山坡地或梯田较好，土壤不能是冷土，选择沙土地，深耕，栽植前施农家肥，栽植后使用喷雾器喷洒0.2%多菌灵，培养20天后，统计成活率。
实施例2
取豺皮樟带芽茎段，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗40min，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理15min，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的豺皮樟带芽茎段接入改良WS+IAA0.2mg/L+6-BA0.8mg/L+150g/L香蕉汁培养基中培养，附加蔗糖3%，琼脂0.6%，PH5.8-5.9，光照1000lx，温度24℃，生长出来的豺皮樟腋芽，放入增殖培养基改良WS+IBA0.15mg/L+6-BA1.0mg/L+硫代硫酸钠100mg/L+0.2mg/LGA₃附加蔗糖3%，琼脂0.6%，PH5.8-5.9，光照1500lx，温度24℃，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基3/4MS+NAA0.5mg/L，附加蔗糖2%，琼脂0.55%，PH5.8-5.9，光照2000lx，生根后的豺皮樟试管苗移栽到大田进行炼苗培养，将试管苗掀去封口膜，在培养室中培养一周后从培养瓶中取出，洗去根部培养基，栽植于野外培养，选山坡地或梯田较好，土壤不能是冷土，选择沙土地，深耕，栽植前施农家肥，栽植后使用喷雾器喷洒0.2%多菌灵，培养20天后，统计成活率。
实施例3
取豺皮樟带芽茎段，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗40min，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理15min，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的豺皮樟带芽茎段接入改良WS+IAA0.2mg/L+6-BA0.8mg/L+150g/L香蕉汁培养基中培养，附加蔗糖3%，琼脂0.6%，PH5.8-5.9，光照1000lx，温度24℃，生长出来的豺皮樟腋芽，放入增殖培养基改良WS+IBA0.1mg/L+6-BA0.5mg/L+硫代硫酸钠100mg/L+0.2mg/LGA₃附加蔗糖3%，琼脂0.6%，PH5.8-5.9，光照1500lx，温度24℃，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MS+NAA0.5mg/L，附加蔗糖2%，琼脂0.55%，PH5.8-5.9，光照2000lx，生根后的豺皮樟试管苗移栽到大田进行炼苗培养，将试管苗掀去封口膜，在培养室中培养一周后从培养瓶中取出，洗去根部培养基，栽植于野外培养，选山坡地或梯田较好，土壤不能是冷土，选择沙土地，深耕，栽植前施农家肥，栽植后使用喷雾器喷洒0.2%多菌灵，培养20天后，统计成活率。
实施例4
取豺皮樟带芽茎段，在漂白粉中浸泡3min，流水冲洗40min，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理15min，无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的豺皮樟带芽茎段接入改良WS+IAA0.2mg/L+6-BA0.8mg/L+150g/L香蕉汁培养基中培养，附加蔗糖3%，琼脂0.6%，PH5.8-5.9，光照1000lx，温度24℃，生长出来的豺皮樟腋芽，放入增殖培养基改良WS+IBA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L+硫代硫酸钠100mg/L+0.2mg/LGA₃附加蔗糖3%，琼脂0.6%，PH5.8-5.9，光照1500lx，温度24℃，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基3/4MS+NAA0.5mg/L，附加蔗糖2%，琼脂0.55%，PH5.8-5.9，光照2000lx，生根后的豺皮樟试管苗移栽到大田进行炼苗培养，将试管苗掀去封口膜，在培养室中培养一周后从培养瓶中取出，洗去根部培养基，栽植于野外培养，选山坡地或梯田较好，土壤不能是冷土，选择沙土地，深耕，栽植前施农家肥，栽植后使用喷雾器喷洒0.2%多菌灵，培养20天后，统计成活率。

资源描述

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1、10申请公布号CN104160965A43申请公布日20141126CN104160965A21申请号201410463083822申请日20140912A01H4/0020060171申请人南京通泽农业科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边108号1幢701室72发明人杨存54发明名称一种豺皮樟的快速繁殖方法57摘要本发明涉及一种豺皮樟的快速繁殖方法，包括茎段的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导和炼苗移栽。本发明豺皮樟组培方法操作简便，增殖率高，克服野生资源有限，采集困难，可以短期内获得大量的豺皮樟幼苗，为豺皮樟的开发提供基础。51INTCL权利要求书1页说明书3。

2、页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页10申请公布号CN104160965ACN104160965A1/1页21一种豺皮樟的快速繁殖方法，包括腋芽的消毒、丛生芽的诱导、丛生芽的增殖、生根培养，其主要步骤如下（1）取豺皮樟带腋芽的茎段，对其进行常规消毒处理；（2）将步骤（1）灭菌处理过的豺皮樟带芽茎段接入改良WSIAA02MG/L6BA08MG/L150G/L香蕉汁培养基中培养，附加蔗糖3，琼脂06，PH5859，光照1000LX，温度24；（3）取步骤（2）生长出来的豺皮樟腋芽，放入增殖培养基改良WSIBA005015MG/L6BA0510MG/L硫代硫酸钠。

3、100MG/L02MG/LGA3附加蔗糖3，琼脂06，PH5859，光照1500LX，温度24；（4）取步骤（3）增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/43/4MSNAA05MG/L，附加蔗糖2，琼脂055，PH5859，光照2000LX；（5）取步骤（4）生根后的豺皮樟试管苗移栽到大田进行炼苗培养。2按照权利要求1所述的一种豺皮樟的快速繁殖方法，其特征在于步骤（1）中所述豺皮樟带芽茎段的灭菌处理为取豺皮樟带芽茎段，在漂白粉中浸泡3MIN，流水冲洗40MIN，超净工作台上75酒精处理30S，次氯酸钠处理15MIN，无菌水冲洗57遍。3按照权利要求1所述的一种豺皮樟的快速繁殖方法，其特征在于步骤。

4、（2）腋芽诱导培养中附加了150G/L香蕉汁，有助于不定芽的分化。4按照权利要求1所述的一种豺皮樟的快速繁殖方法，其特征在于步骤（3）中的增殖培养基中附加了硫代硫酸钠100MG/L，可以防止褐化现象的发生。5按照权利要求1所述的一种豺皮樟的快速繁殖方法，其特征在于步骤（4）中筛选1/4、1/2、3/4对豺皮樟生根的诱导。6按照权利要求1所述的一种豺皮樟的快速繁殖方法，其特征在于步骤（5）中豺皮樟的炼苗培养方法为将试管苗掀去封口膜，在培养室中培养一周后从培养瓶中取出，洗去根部培养基，栽植于野外培养，选山坡地或梯田较好，土壤不能是冷土，选择沙土地，深耕，栽植前施农家肥，栽植后使用喷雾器喷洒02多菌。

5、灵，培养20天后，统计成活率。权利要求书CN104160965A1/3页3一种豺皮樟的快速繁殖方法技术领域0001本发明涉及组培条件下豺皮樟的培养，属于植物技术领域。背景技术0002豺皮樟，樟科，常绿灌木或小乔木，LITSEAROTUNDIFOLIAVAROBLONGIFOLIA，又名大灰木、百叶仔、白柴、香叶子分布于广东、广西、江西、湖南、贵州。生于山下灌木丛或疏林中。种子含脂肪油；果叶含芳香油；根含生物碱、酚类、氨基酸；叶含黄酮甙、酚类、氨基酸、糖类等。是一种中药材，以根入药，祛风除湿，行气止痛，活血通经。用于风湿性关节炎，腰腿痛，跌打损伤，痛经，胃痛，腹泻，水肿。目前豺皮樟的采集多采用野。

6、外采收，采收困难，组培方法可以克服这一缺点，且操作简单，遗传稳定性好，为豺皮樟的开发利用提供良好依据。发明内容0003本发明所要解决的技术问题是提供豺皮樟的快速繁殖方法，组培方法操作简便、增殖率高，克服野生资源有限，采集困难，可以短期内获得大量的豺皮樟幼苗，为豺皮樟的开发提供基础。0004为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案取豺皮樟带芽茎段，在漂白粉中浸泡3MIN，流水冲洗40MIN，超净工作台上75酒精处理30S，次氯酸钠处理15MIN，无菌水冲洗57遍，灭菌处理过的豺皮樟带芽茎段接入改良WSIAA02MG/L6BA08MG/L150G/L香蕉汁培养基中培养，附加蔗糖3，琼脂06，PH。

7、5859，光照1000LX，温度24，生长出来的豺皮樟腋芽，放入增殖培养基改良WSIBA01MG/L6BA1MG/L硫代硫酸钠100MG/L02MG/LGA3附加蔗糖3，琼脂06，PH5859，光照1500LX，温度24，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MSNAA05MG/L，附加蔗糖2，琼脂055，PH5859，光照2000LX，生根后的豺皮樟试管苗移栽到大田进行炼苗培养，将试管苗掀去封口膜，在培养室中培养一周后从培养瓶中取出，洗去根部培养基，栽植于野外培养，选山坡地或梯田较好，土壤不能是冷土，选择沙土地，深耕，栽植前施农家肥，栽植后使用喷雾器喷洒02多菌灵，培养20天后，统计成活率。

8、。0005采用本发明制备的豺皮樟生长速度快，操作简单，能耗小，污染小。0006下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施方式0007实施例1取豺皮樟带芽茎段，在漂白粉中浸泡3MIN，流水冲洗40MIN，超净工作台上75酒精处理30S，次氯酸钠处理15MIN，无菌水冲洗57遍，灭菌处理过的豺皮樟带芽茎段接入改良WSIAA02MG/L6BA08MG/L150G/L香蕉汁培养基中培养，附加蔗糖3，琼说明书CN104160965A2/3页4脂06，PH5859，光照1000LX，温度24，生长出来的豺皮樟腋芽，放入增殖培养基改良WSIBA005M。

9、G/L6BA05MG/L硫代硫酸钠100MG/L02MG/LGA3附加蔗糖3，琼脂06，PH5859，光照1500LX，温度24，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/4MSNAA05MG/L，附加蔗糖2，琼脂055，PH5859，光照2000LX，生根后的豺皮樟试管苗移栽到大田进行炼苗培养，将试管苗掀去封口膜，在培养室中培养一周后从培养瓶中取出，洗去根部培养基，栽植于野外培养，选山坡地或梯田较好，土壤不能是冷土，选择沙土地，深耕，栽植前施农家肥，栽植后使用喷雾器喷洒02多菌灵，培养20天后，统计成活率。0008实施例2取豺皮樟带芽茎段，在漂白粉中浸泡3MIN，流水冲洗40MIN，超净工作台上。

10、75酒精处理30S，次氯酸钠处理15MIN，无菌水冲洗57遍，灭菌处理过的豺皮樟带芽茎段接入改良WSIAA02MG/L6BA08MG/L150G/L香蕉汁培养基中培养，附加蔗糖3，琼脂06，PH5859，光照1000LX，温度24，生长出来的豺皮樟腋芽，放入增殖培养基改良WSIBA015MG/L6BA10MG/L硫代硫酸钠100MG/L02MG/LGA3附加蔗糖3，琼脂06，PH5859，光照1500LX，温度24，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基3/4MSNAA05MG/L，附加蔗糖2，琼脂055，PH5859，光照2000LX，生根后的豺皮樟试管苗移栽到大田进行炼苗培养，将试管苗掀去封口。

11、膜，在培养室中培养一周后从培养瓶中取出，洗去根部培养基，栽植于野外培养，选山坡地或梯田较好，土壤不能是冷土，选择沙土地，深耕，栽植前施农家肥，栽植后使用喷雾器喷洒02多菌灵，培养20天后，统计成活率。0009实施例3取豺皮樟带芽茎段，在漂白粉中浸泡3MIN，流水冲洗40MIN，超净工作台上75酒精处理30S，次氯酸钠处理15MIN，无菌水冲洗57遍，灭菌处理过的豺皮樟带芽茎段接入改良WSIAA02MG/L6BA08MG/L150G/L香蕉汁培养基中培养，附加蔗糖3，琼脂06，PH5859，光照1000LX，温度24，生长出来的豺皮樟腋芽，放入增殖培养基改良WSIBA01MG/L6BA05MG/。

12、L硫代硫酸钠100MG/L02MG/LGA3附加蔗糖3，琼脂06，PH5859，光照1500LX，温度24，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MSNAA05MG/L，附加蔗糖2，琼脂055，PH5859，光照2000LX，生根后的豺皮樟试管苗移栽到大田进行炼苗培养，将试管苗掀去封口膜，在培养室中培养一周后从培养瓶中取出，洗去根部培养基，栽植于野外培养，选山坡地或梯田较好，土壤不能是冷土，选择沙土地，深耕，栽植前施农家肥，栽植后使用喷雾器喷洒02多菌灵，培养20天后，统计成活率。0010实施例4取豺皮樟带芽茎段，在漂白粉中浸泡3MIN，流水冲洗40MIN，超净工作台上75酒精处理30S，次。

13、氯酸钠处理15MIN，无菌水冲洗57遍，灭菌处理过的豺皮樟带芽茎段接入改良WSIAA02MG/L6BA08MG/L150G/L香蕉汁培养基中培养，附加蔗糖3，琼脂06，PH5859，光照1000LX，温度24，生长出来的豺皮樟腋芽，放入增殖培养基改良WSIBA01MG/L6BA10MG/L硫代硫酸钠100MG/L02MG/LGA3附加蔗糖3，琼脂06，PH5859，光照1500LX，温度24，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基3/4MSNAA05MG/L，附加蔗糖2，琼脂055，PH5859，光照2000LX，生根后的豺皮樟试管苗移栽到大田进行炼苗培养，将试管苗掀去封口膜，在培养室中培养一周后从培养瓶中取出，洗去根部培养基，栽植于野外培养，选山坡地或梯田较好，土壤不能是冷土，选择沙土说明书CN104160965A3/3页5地，深耕，栽植前施农家肥，栽植后使用喷雾器喷洒02多菌灵，培养20天后，统计成活率。说明书CN104160965A。

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