一种杜仲叶的干燥方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201410418716.3

申请日:

2014.08.25

公开号:

CN104138402A

公开日:

2014.11.12

当前法律状态:

实审

有效性:

审中

法律详情:

实质审查的生效IPC(主分类):A61K 36/46申请日:20140825|||公开

IPC分类号:

A61K36/46; A61P9/12; A61K127/00(2006.01)N

主分类号:

A61K36/46

申请人:

济南康众医药科技开发有限公司

发明人:

马玉奎; 郭庆华; 冯立娟; 张为胜

地址:

250014 山东省济南市历下区科院路19号山东省科学院西楼4号

优先权:

专利代理机构:

代理人:

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内容摘要

本发明涉及一种杜仲叶的干燥方法,其特征在于:取鲜杜仲叶,堆闷至呈褐色,干燥,制备的杜仲叶,多种活性成分含量明显高,治疗高血压效果更好。

权利要求书

1.   一种杜仲叶的冻干方法,其特征在于:取鲜杜仲叶,堆闷至呈褐色,干燥。

说明书

一种杜仲叶的干燥方法
发明领域
本发明涉及药品制法,特别涉及一种杜仲叶的干燥方法,属医药技术领域
背景技术
中药干燥在我国有很长的历史,经干燥的中草药可保持一定的药用成分以及不易腐败变质,干燥作为保证中草药品质的重要措施,是中草药加工中一个必不可少的工艺过程,干燥与中药生产的关系密切,干燥的好坏将直接影响产品的质量。
《中国药典》(2010版一部)收载:杜仲叶为杜仲科植物杜仲的干燥叶。夏、秋二季枝叶茂盛时采收,晒干或低温烘干。我们发现这种方法干燥的杜仲叶有效成分含量低,临床效果差。
发明内容
本发明的目的是提供一种杜仲叶的干燥方法,该方法干燥的杜仲叶,多种有效成分含量明显高于《中国药典》(2010版一部)收载的干燥方法。
本发明的目的是这样实现的:
一种杜仲叶的冻干方法,其特征在于:取鲜杜仲叶,堆闷至呈褐色,干燥。
本发明的一种杜仲叶的干燥方法制备的杜仲叶的应用,其特征在于:用于治疗高血压。
至此完成了本发明,制备的杜仲叶,多种活性成分含量明显高。治疗高血压效果更好。
下面通过试验例进一步说明本发明的有益之处,试验例旨在进一步说明本发明的有益之处,而非对本发明的限制。
将同一批鲜杜仲叶,按以下方法进行加工。
1)晒干杜仲叶:取鲜杜仲叶,晒干。
2)堆闷晒干杜仲叶:取鲜杜仲叶,堆闷2天,察看呈紫褐色,晒干。
一、不同方法干燥的杜仲叶活性成分比较
1、主要仪器与设备
LC-20A高效液相色谱仪;UV-5300PC型紫外可见分光光度计;AG135型十万分之一电子天平,冻干机。
2、试剂:对照品绿原酸、京尼平苷、芦丁、咖啡酸均购自中国药品生物制品检定所,桃皮珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷酸均由山东中医药大学提供。乙腈(色谱纯,美国Tedia公司);磷酸(色谱纯,天津市科密欧化学试剂开发中心)。
3、试验方法
准确称取各样品适量,用60%的乙醇浸润12h后,再用超声波辅助提取1h,过滤至100mL容量瓶中,重复2次,合并滤液,用60%的乙醇定容至刻度,滤液过45μm滤膜,提取液备用。
1)高效液相色谱法测定绿原酸 色谱条件: 色谱柱Dimamonsil C18(250mm×4.6mm,5μm); 流动相甲醇∶水=35∶75;流速1.0mL/min 检测波长240nm; 进样体积20μL;温度25℃。
2)高效液相色谱法测定京尼平苷酸 色谱条件:色谱柱Dimamonsil C 18 ( 250 mm x 4.6,5μm);流速1.0 mL/min;检测波长240nm;进样体积20μL;温度25℃;二元高压梯度洗脱时间程序:0min时,甲醇:0.001%磷酸溶液=22:78;15 min时,甲醇:0.001%磷酸溶液=30:70;35 min时,甲醇:0.001%磷酸溶液=22:78 ;40min时,采样结束。
3)硝酸铝一亚硝酸钠比色法测定总黄酮 准确吸取适量提取液于10 mL容量瓶中,加含5%NaNO2水溶液0.3 mL,摇匀,静置6min;再加含10%Al(N03)3水溶液0.3mL,摇匀,静置6min;再加含1.0mol/L NaOH水溶液4mL,摇匀,静置15min;用蒸馏水定容至刻度。在400-600nm波长范围内扫描,确定最大吸收波长为506nm 。
4)对二甲氨基苯甲醛显色法测定桃皮珊瑚苷 准确吸取适量提取液于10 mL比色管中,依次加入95%的乙醇2.5 mL,Epstahl试剂1.7 mL,20%的盐酸0.5 mL,再用蒸馏水定容至刻度。置于水浴锅中在75℃下加热20min进行显色,取出冷却10min后,以试剂空白为参比,在500-700nm波长范围内扫描,确定最大吸收波长为596nm。
4、标准曲线  
依据上述方法分别对绿原酸、京尼平苷酸、总黄酮和桃皮珊瑚苷标样进行测定,绘制标准曲线。
5、结果与分析
采用上述实验方法检测不同方法处理的杜仲叶皮中多种活性成分的含量,结果如表1。
表1 不同方法干燥杜仲叶中有效成分含量结果(%)

由表1得知,堆闷后干燥杜仲叶中绿原酸、京尼平苷酸、总黄酮和桃叶珊瑚苷的含量明显高于晒干杜仲叶,进而可知临床疗效好。
二、不同方法干燥的杜仲叶降压效果比较
1、材料
1.1主要仪器 大鼠电脑血压心率仪,四导生理记录仪。
1.2动物 自发性高血压大鼠(SHR),全部为雄性10周龄,体重(223.5±23)g,血压均大于20kPa。 
1.3制备药液 分别取各样品,加水提取3次,加水量分别为药材重量的10、6、6倍,提取时间为1.5、1、1h,合并提取液, 浓缩并定容至每毫升相当于原药材0.25g,即得。
2、方法和结果
2.1动物造模 取大鼠饲养在恒温观察室内,室温(21±2)℃,人工照明12 h·d-1,自由饮水,喂以21%高蛋白饲料,1周后测定血压,高于22.7 kPa者为自发性高血压大鼠,将其随机分为晒干杜仲叶组、堆闷晒干杜仲叶组和高血压组,每组8只。各用药组分别以1.12g·kg-1灌胃,每日2次,连续10d;正常大鼠8只,与高血压组以同量蒸馏水灌胃。
2.2血压、心率的测定 大鼠末次给药后2h,采用无创伤性间接测压仪测定清醒状态下大鼠的尾动脉血压、心率。正式测量前每天测压训练1次,共5d,待大鼠适应环境、血压稳定后,开始实验观察。测压前将大鼠放入(37±1)℃电热恒温箱内预热15min后,测定大鼠尾动脉收缩压(SBP)及心率(HR),重复测量3次。不同方法干燥杜仲叶对SHR血压、心率的影响 结果见表2。
表2   不同方法干燥的杜仲叶降压效果

分组 剂量(g·kg-1)SBP(kPa)SR(次·min-1)正常对照组——15.07±0.68354±9.64高血压组——22.93±1.65486±15.16晒干杜仲叶1.1219.16±1.10441±14.15堆闷晒干杜仲叶1.1216.82±1.14359±12.41

由表2可见, 2种方法干燥的杜仲叶对实验动物的血压和心率有不同程度的影响,其中堆闷晒干杜仲叶组的降压作用优于晒干杜仲叶组,说明本发明方法干燥的杜仲叶降压效果好。
具体实施方式
实施例1
取鲜杜仲叶,堆闷3天,察看呈紫褐色,晾干。
实施例2
取鲜杜仲叶,堆闷至呈褐色,晒干。
实施例3
取鲜杜仲叶,堆闷至呈褐色,60℃烘干。
实施例4
取鲜杜仲叶,堆闷1天,察看呈褐色,晒干。
实施例5
取鲜杜仲叶,堆闷3天,察看呈褐色,60℃烘干。

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资源描述

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1、10申请公布号CN104138402A43申请公布日20141112CN104138402A21申请号201410418716322申请日20140825A61K36/46200601A61P9/12200601A61K127/0020060171申请人济南康众医药科技开发有限公司地址250014山东省济南市历下区科院路19号山东省科学院西楼4号72发明人马玉奎郭庆华冯立娟张为胜54发明名称一种杜仲叶的干燥方法57摘要本发明涉及一种杜仲叶的干燥方法,其特征在于取鲜杜仲叶,堆闷至呈褐色,干燥,制备的杜仲叶,多种活性成分含量明显高,治疗高血压效果更好。51INTCL权利要求书1页说明书3页19中华。

2、人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页10申请公布号CN104138402ACN104138402A1/1页21一种杜仲叶的冻干方法,其特征在于取鲜杜仲叶,堆闷至呈褐色,干燥。权利要求书CN104138402A1/3页3一种杜仲叶的干燥方法发明领域0001本发明涉及药品制法,特别涉及一种杜仲叶的干燥方法,属医药技术领域。背景技术0002中药干燥在我国有很长的历史,经干燥的中草药可保持一定的药用成分以及不易腐败变质,干燥作为保证中草药品质的重要措施,是中草药加工中一个必不可少的工艺过程,干燥与中药生产的关系密切,干燥的好坏将直接影响产品的质量。0003中国药典2010版。

3、一部收载杜仲叶为杜仲科植物杜仲的干燥叶。夏、秋二季枝叶茂盛时采收,晒干或低温烘干。我们发现这种方法干燥的杜仲叶有效成分含量低,临床效果差。发明内容0004本发明的目的是提供一种杜仲叶的干燥方法,该方法干燥的杜仲叶,多种有效成分含量明显高于中国药典2010版一部收载的干燥方法。0005本发明的目的是这样实现的一种杜仲叶的冻干方法,其特征在于取鲜杜仲叶,堆闷至呈褐色,干燥。0006本发明的一种杜仲叶的干燥方法制备的杜仲叶的应用,其特征在于用于治疗高血压。0007至此完成了本发明,制备的杜仲叶,多种活性成分含量明显高。治疗高血压效果更好。0008下面通过试验例进一步说明本发明的有益之处,试验例旨在进。

4、一步说明本发明的有益之处,而非对本发明的限制。0009将同一批鲜杜仲叶,按以下方法进行加工。00101)晒干杜仲叶取鲜杜仲叶,晒干。00112)堆闷晒干杜仲叶取鲜杜仲叶,堆闷2天,察看呈紫褐色,晒干。0012一、不同方法干燥的杜仲叶活性成分比较1、主要仪器与设备LC20A高效液相色谱仪;UV5300PC型紫外可见分光光度计;AG135型十万分之一电子天平,冻干机。00132、试剂对照品绿原酸、京尼平苷、芦丁、咖啡酸均购自中国药品生物制品检定所,桃皮珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷酸均由山东中医药大学提供。乙腈(色谱纯,美国TEDIA公司);磷酸(色谱纯,天津市科密欧化学试剂开发中心)。001。

5、43、试验方法准确称取各样品适量,用60的乙醇浸润12H后,再用超声波辅助提取1H,过滤至100ML容量瓶中,重复2次,合并滤液,用60的乙醇定容至刻度,滤液过45M滤膜,提取液备用。说明书CN104138402A2/3页400151)高效液相色谱法测定绿原酸色谱条件色谱柱DIMAMONSILC18(250MM46MM,5M);流动相甲醇水3575;流速10ML/MIN检测波长240NM;进样体积20L;温度25。00162)高效液相色谱法测定京尼平苷酸色谱条件色谱柱DIMAMONSILC18250MMX46,5M);流速10ML/MIN;检测波长240NM进样体积20L;温度25二元高压梯度。

6、洗脱时间程序0MIN时,甲醇0001磷酸溶液2278;15MIN时,甲醇0001磷酸溶液3070;35MIN时,甲醇0001磷酸溶液2278;40MIN时,采样结束。00173)硝酸铝一亚硝酸钠比色法测定总黄酮准确吸取适量提取液于10ML容量瓶中,加含5NANO2水溶液03ML,摇匀,静置6MIN;再加含10ALN033水溶液03ML,摇匀,静置6MIN;再加含10MOL/LNAOH水溶液4ML,摇匀,静置15MIN;用蒸馏水定容至刻度。在400600NM波长范围内扫描,确定最大吸收波长为506NM。00184)对二甲氨基苯甲醛显色法测定桃皮珊瑚苷准确吸取适量提取液于10ML比色管中,依次加入。

7、95的乙醇25ML,EPSTAHL试剂17ML,20的盐酸05ML,再用蒸馏水定容至刻度。置于水浴锅中在75下加热20MIN进行显色,取出冷却10MIN后,以试剂空白为参比,在500700NM波长范围内扫描,确定最大吸收波长为596NM。00194、标准曲线依据上述方法分别对绿原酸、京尼平苷酸、总黄酮和桃皮珊瑚苷标样进行测定,绘制标准曲线。00205、结果与分析采用上述实验方法检测不同方法处理的杜仲叶皮中多种活性成分的含量,结果如表1。0021表1不同方法干燥杜仲叶中有效成分含量结果()由表1得知,堆闷后干燥杜仲叶中绿原酸、京尼平苷酸、总黄酮和桃叶珊瑚苷的含量明显高于晒干杜仲叶,进而可知临床疗。

8、效好。0022二、不同方法干燥的杜仲叶降压效果比较1、材料11主要仪器大鼠电脑血压心率仪,四导生理记录仪。002312动物自发性高血压大鼠SHR,全部为雄性10周龄,体重223523G,血压均大于20KPA。002413制备药液分别取各样品,加水提取3次,加水量分别为药材重量的10、6、6倍,提取时间为15、1、1H,合并提取液,浓缩并定容至每毫升相当于原药材025G,即得。00252、方法和结果21动物造模取大鼠饲养在恒温观察室内,室温212,人工照明12HD1,自由饮水,喂以21高蛋白饲料,1周后测定血压,高于227KPA者为自发性高血压大鼠,将其随机分为晒干杜仲叶组、堆闷晒干杜仲叶组和高。

9、血压组,每组8只。各用药组分别以112GKG1灌胃,每日2次,连续10D;正常大鼠8只,与高血压组以同量蒸馏水灌胃。说明书CN104138402A3/3页5002622血压、心率的测定大鼠末次给药后2H,采用无创伤性间接测压仪测定清醒状态下大鼠的尾动脉血压、心率。正式测量前每天测压训练1次,共5D,待大鼠适应环境、血压稳定后,开始实验观察。测压前将大鼠放入371电热恒温箱内预热15MIN后,测定大鼠尾动脉收缩压SBP及心率HR,重复测量3次。不同方法干燥杜仲叶对SHR血压、心率的影响结果见表2。0027表2不同方法干燥的杜仲叶降压效果分组剂量GKG1SBPKPASR次MIN1正常对照组1507。

10、068354964高血压组22931654861516晒干杜仲叶11219161104411415堆闷晒干杜仲叶11216821143591241由表2可见,2种方法干燥的杜仲叶对实验动物的血压和心率有不同程度的影响,其中堆闷晒干杜仲叶组的降压作用优于晒干杜仲叶组,说明本发明方法干燥的杜仲叶降压效果好。具体实施方式0028实施例1取鲜杜仲叶,堆闷3天,察看呈紫褐色,晾干。0029实施例2取鲜杜仲叶,堆闷至呈褐色,晒干。0030实施例3取鲜杜仲叶,堆闷至呈褐色,60烘干。0031实施例4取鲜杜仲叶,堆闷1天,察看呈褐色,晒干。0032实施例5取鲜杜仲叶,堆闷3天,察看呈褐色,60烘干。说明书CN104138402A。

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