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预防或治疗与IL-12生成 过量有关疾病的药物组合物
    【发明领域】

    本发明涉及PDE4抑制剂或其药学上可接受的盐制备用于预防或治疗与IL-12生成过量有关疾病的药物的用途。发明背景

    树突细胞是职业的抗原呈递细胞(antigen-presenting cell，APC)，因为它们对于活化原初T细胞具有独特的性能，所以在免疫系统中发挥关键作用。当树突细胞上的CD40和活化T辅助淋巴细胞上的CD40L之间相互作用时，树突细胞生成IL-12p70。IL-12通过诱导T细胞和天然杀伤(NK)细胞生成γ-干扰素(IFN-γ)、提高NK细胞的细胞毒性和促进细胞毒性T细胞的发育而起核心作用。

    白介素-12(IL-12)是由髓单核细胞生成的细胞因子，其为由两条二硫键连接的链p35和p40组成的杂二聚体，其中P35和P40由独立链编码。生物活性IL-12p70杂二聚体的生成需要两种基因的同时表达。

    此外，IL-12已经对T辅助细胞1(Th1)型应答显示出直接的免疫反应，其特征在于高水平干扰素-γ和低水平IL-4的生成。由于Th1型细胞的过量发生在多种病变中，典型地包括自身免疫性疾病、多发性硬化、糖尿病、关节炎以及自身免疫性脱髓鞘疾病，所以在本领域中需要能够抑制这些病变中的IL-12生成的化合物。

    在本领域中某些分子业已表现出能够抑制树突细胞的IL-12生成，例如沙丁胺醇，β2-激动剂(Panina-Bordignon P.等人，1997，J.Clin.Invest.，100卷(6)：1513-1519)，前列腺素E2(Kalinski P.等人，1997等，The Journalof Immunology，159(1)：28-35)和霍乱毒素(Braun M.C.等人，1999，TheJournal of Experimental Medicine，189卷(3)：541-552)。然而，这些分子，特别是霍乱毒素和前列腺素E2无法安全地用来治疗患者。

    因此，需要可以作用于涉及IL-12生成地疾病、例如自身免疫性疾病的药物。发明概述

    本发明涉及PDE4抑制剂制备用于预防和/或治疗与IL-12生成过量有关疾病的药物的用途，以及通过使用至少一种PDE4抑制剂治疗所述疾病的方法。

    本发明还涉及用于预防和/或治疗与IL-12生成过量有关疾病的药物组合物，该组合物含有有效量的至少一种PDE4抑制剂。附图简述

    图1说明了PDE4抑制剂对LPS加IFN-γ-导的未成熟DC的细胞因子生成的抑制作用。将指定浓度的PDE4抑制剂(Ariflo或环戊苯吡酮)与LPS和IFN-γ结合使用刺激DC(2×104个细胞/孔)。结果以双份培养物(24小时上清液)的平均细胞因子产量来表示，单位为ng/ml。A：IL-12p70；B：TNF-α；C：IL-6。细胞因子产量表示为ng/ml。

    图2说明了PDE4抑制剂对CD40诱导的未成熟DC的IL 12生成的抑制作用。在10μM指定PDE4抑制剂(Ariflo、环戊苯吡酮、二氮杂并-吲哚(diazepino-indole)或吡唑并(pirazolo)[4，3-e]二氮杂)的存在下，用J558-CD40L细胞刺激DC(2×104细胞/孔)。结果以细胞培养基24小时上清液的细胞因子产量来表示，单位为ng/ml。所示数据选自给出相似结果的三个试验中的一个代表性试验。

    图3A说明了在树突细胞的成熟期间PDE4抑制剂存在的表型效应的缺乏。在PDE4抑制剂Ariflo或环戊苯吡酮存在或不存在下，用LPS使树突细胞成熟2天，利用流式细胞计数分析细胞表面分子的表达。在各图的左角为平均荧光强度(Mn)。

    图3B说明在树突细胞的成熟期间PDE4抑制剂存在的表型效应的缺乏。在PDE4抑制剂Ariflo或环戊苯吡酮存在或不存在下，用成熟因子TNF-α加IL-1β(称作MF)使树突细胞成熟2天，利用流式细胞计数分析细胞表面分子的表达。在各图的左角为平均荧光强度(Mn)。

    图4说明PDE4对成熟树突细胞的细胞因子生成的作用。在PDE4抑制剂或PGE2不存在或存在下，用IL-1β/TNF-α诱导树突细胞的成熟。48小时后收获不同成熟程度的树突细胞，洗涤除去残余因子，用J558-CD40L和IFN-γ刺激。利用ELISA测定24小时上清液中细胞因子的浓度。结果以双份培养物的平均细胞因子生成来表示，单位为ng/ml+/-SD。发明详述

    在本领域中，已知PDE4抑制剂对于T细胞具有直接活性，其主要是通过抑制T细胞增殖、尤其是下调抗原驱使的增殖。

    本发明人惊奇地发现，一旦随后通过例如LPS和IFN-γ的组合或CD40L(T细胞的一种表面受体)刺激这些树突细胞时，PDE4抑制剂可以通过抑制树突细胞生成炎性细胞因子IL-12的能力来对树突细胞生成直接作用。他们还显示，虽然PDE4抑制剂能够抑制被刺激树突细胞的IL-12生成，这些抑制剂不改变成熟树突细胞的表型。

    此外，根据本发明显示，PDE4抑制剂对树突细胞的直接活性能够诱导T辅助细胞群的改变。更具体地，当在成熟期间通过用PDE4抑制剂预处理的成熟树突细胞活化时，PDE4抑制剂对树突细胞的直接活性指导原初T细胞对Th2型应答的免疫反应。此外，PDE4抑制剂对树突细胞的直接活性导致Th1群的显著减少。

    本发明的第一个目的涉及至少一种PDE4抑制剂或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗与IL-12生成过量有关疾病的药物中的用途。

    术语“PDE4抑制剂”包括具有抑制PDE4酶能力的每一种化合物，其IC50值至少与在同样试验条件下测得的环戊苯吡酮的IC50值在同一数量级。就在无PDE4抑制剂的存在下用对照缓冲液测定的PDE4活性值而言，IC50值相当于能够抑制50％PDE4活性的PDE4抑制剂的摩尔浓度。

    如说明性实施方案所述，本领域技术人员可以按照TORPHY等人(1992，J.Pharm.Exp.Ther.263卷：1195-1205)所述方法测定PDE4的抑制作用。

    最优选地，特定PDE4抑制剂的IC50值的测定可以通过在不存在任何抑制剂下和有PDE4抑制剂存在下在抑制剂浓度范围内测定PDE4酶活性来实现，所述抑制剂浓度范围为0.01nM至100μM，优选0.01nM至1μM。

    抑制实验所采用的PDE4酶可以得自人体细胞系U937细胞的细胞溶质提取物。

    不希望受到任何特定理论的约束，本发明人相信PDE4抑制剂对树突细胞的IL-12生成的直接活性不是、或至少不仅仅是通过细胞内cAMP浓度的升高来介导。事实上，已有显示，那些已知能够提高cAMP水平的其它PDE抑制剂，如PDE7抑制剂，对树突细胞的IL-12生成不具有任何抑制活性。

    表述“IL-12生成过量”在此包括在生理情况中不期望的IL-12的生成，其中患者机体内免疫应答的发展引起强烈的炎性反应或辅助T细胞的高度活化，它们对所述患者的健康有害，可导致包括自身免疫性疾病在内的多种病变。

    与IL-12生成过量有关的疾病包括：自身免疫性疾病，如支气管炎症/影响支气管的病理状况，如支气管缩窄；多发性器官衰竭，骨关节炎，脓毒性休克(败血病)，炎症主诉或不调；消化系统的(慢性)炎性疾病，包括具有自身免疫组成的肠道病(出血性直肠结肠炎、溃疡性结肠炎、IBD)；慢性淋巴白血病；包括继发性免疫或炎性肝损伤的肝衰竭；移植排异，克罗恩氏病，慢性阻塞型支气管肺炎(慢性支气管炎、肺气肿、COPD)、急性肺发作、缺血引起的神经元损伤，与高水平TNF-α有关的再灌注缺血性疾病，急性呼吸窘迫综合征，急性胰腺炎，自身免疫性脱髓鞘失调，多发性硬化，I型糖尿病，慢性/复发性变应性脑脊髓炎，自身免疫性脑脊髓炎，炎性结肠炎；关节炎，包括类风湿关节炎；内样瘤病，高敏感性肺炎，自身免疫性眼色素层炎，炎性肠病(IBD)，牛皮癣，湿疹，接触性皮炎，以及其它Th1介导的人体疾病。

    在第一优选实施方案中，PDE4抑制剂选自环戊苯吡酮(Rolipram)和Ariflo。

    在第二优选实施方案中，PDE4抑制剂选自二氮杂并-吲哚家族化合物，优选[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚类，例如公开在PCT申请WO 97/36905和WO 96/11690中的那些化合物以及公开在PCT申请号WO 99/50270中的它们的代谢产物。

    优选的[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚类化合物是下列化合物：-(3R)-异喹啉-3-甲酸(9-羟基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)酰胺，-(3R)-4-叔丁氧基羰基氨基-N-(9-氨基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)苯甲酰胺，-(3R)-4-氨基-N-(9-氨基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-3，5-二氯苯甲酰胺，-(3R)-4-氨基-N-(9-氨基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-5-氯-2-甲氧基苯甲酰胺，-(3R)-N-(9-氨基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)异烟酰胺，-(3R)-3-叔丁氧基羰基氨基-N-(9-氨基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)异烟酰胺，-(3R)-异喹啉-3-甲酸(9-氨基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)酰胺，-(3R)-喹啉-3-甲酸(9-氨基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)酰胺，-(3R)-4，7-二甲基吡唑并[5，1-c][1，2，4]三嗪-3-甲酸(9-氨基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)酰胺，-(3R)-4-氨基-3，5-二氯-N-(9-二甲基氨基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)苯甲酰胺，-(3R)N-(9-氨基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-2-苯并呋喃甲酰胺，-(3R)4，7-二甲基-吡唑并[5，1-c][1，2，4]三嗪-3-甲酸[4-氧代-1-苯基-9-(吡咯烷-1-基)-3，4，6，7-四氢[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)酰胺，

    在PCT申请号PCT/ER00/01174(WO 00/66584)公开的化合物中，优选1-氨基三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮类和/或-5-硫酮类，更特别地，优选下列化合物：1-(氮杂环庚烷(azepan)-1-基)-7-氯-4-(3-苯基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-1-二甲基氨基-4-((E)-3-吡啶-3-基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮1-(氮杂环庚烷-1-基)-7-氯-4-(4-氯代苄基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-(氮杂环庚烷-1-基)-7-氯-4-(4-氟代苄基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-(氮杂环庚烷-1-基)-7-氯-4-(3，4-二甲氧基苄基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-(氮杂环庚烷-1-基)-7-氯-4-(3-吡啶基甲基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-(氮杂环庚烷-1-基)-7-溴-4-(4-氯代苯甲基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-(1-氮杂环庚烷-1-基-7-溴-5-氧代-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4基甲基)苄腈，1-氮杂环庚烷-1-基-7-溴-4-(3，4-二甲氧基苄基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-(氮杂环庚烷-1-基)-7-溴-4-(3-苯基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-氮杂环庚烷-1-基-7-溴-4-((E)-3-吡啶-3-基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-氮杂环庚烷-1-基-7-溴-4-(3-吡啶-4-基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-4-(4-甲基苄基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-4-(4-氯代苄基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-4-(4-氟代苄基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-(7-溴-5-氧代-1-吡咯烷-1-基-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苄腈，4-(7-溴-5-氧代-1-吡咯烷-1-基-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯甲酸甲酯，7-溴-4-(4-硝基苄基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-4-(4-甲氧基苄基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，乙酸4-(7-溴-5-氧代-1-吡咯烷-1-基-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯酯，7-溴-4-(4-羟苄基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-4-(3，4二甲氧基苄基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-(吡咯烷-1-基)-7-溴-4-(3-苯基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-4-[(E)-3-(4-氯代苯基)烯丙基]-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-4-[3-(4-甲氧基苯基)烯丙基]-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-4-(3-吡啶-3-基烯丙基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-4-((E)-3-吡啶-4-基烯丙基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-4-(3，4-二甲氧基苄基)-1-哌啶-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-(哌啶-1-基)-7-溴-4-(3-苯基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-1-二甲基氨基-4-(4-甲基苄基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-(7-溴-1-二甲基氨基-5-氧代-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苄腈，7-溴-1-二甲基氨基-4-(4-羟基苄基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-(7-溴-1-二甲基氨基-5-氧代-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯甲酸甲酯，[4-(7-溴-1-二甲基氨基-5-氧代-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯基]乙腈，7-溴-1-二甲基氨基-4-(3-苯基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-1-二甲基氨基-4-(3-苯基-丙-2-炔基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-氮杂环庚烷-1-基-7-甲基-4-(3-苯基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-(3，4-二甲氧基苄基)-7-甲基-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，[4-(7-甲基-5-氧代-1-吡咯烷-1-基-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯基]乙酸，7-甲基-4-(3-苯基烯丙基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，[4-(1-二甲基氨基-7-甲基-5-氧代-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯基]乙酸，1-二甲基氨基-7-甲基-4-((E)-3-苯基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-二甲基氨基-7-甲基-4-(3-吡啶-3-基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，[4-(7-溴-5-氧代-1-全氢氮杂-1-基-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-3-基甲基)苯基]乙酸，4-苄基-7-溴-1-(吡咯烷-1-基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-苄基-7-溴-1-(2，5-二氢吡咯-1-基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-苄基-7-碘-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-氮杂环庚烷-1-基4-苄基-7-甲基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-(4-氨基苄基)-7-溴-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-氨基-4-((E)-3-苯基烯丙基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-氨基-1-氮杂环庚烷-1-基-4-苄基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-氨基-4-((E)-3-吡啶-3-基烯丙基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-氨基-1-二甲基氨基-4-((E)-3-苯基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-苄基-7-甲基氨基-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-(7-甲基氨基-5-氧代-1-吡咯烷-1-基-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苄腈，4-苄基-8-甲基氨基-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-苄基-7-乙基氨基-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-苄基-7-异丙基氨基-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，[4-(7-溴-5-氧代-1-吡咯烷-1-基-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯基]乙酸甲酯，2-[4-(7-溴-5-氧代-1-吡咯烷-1-基-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯基]-N-甲基乙酰胺，2-[4-(7-溴-1-二甲基氨基-5-氧代-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯基]乙酰胺，2-[4-(7-溴-5-氧代-1-吡咯烷-1-基-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯基]-N，N-二甲基乙酰胺，2-[4-(7-溴-5-氧代-1-吡咯烷-1-基-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯基]-N-羟基乙酰胺，1-二甲基氨基-7-甲基-4-(3-吡啶-3-基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-硫酮。

    在上述提到的化合物中，特别优选下列化合物：7-溴-1-二甲基氨基-4-((E)-3-吡啶-3-基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-(氮杂环庚烷-1-基)-7-氯-4-(3，4-二甲氧基苄基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-(氮杂环庚烷-1-基)-7-氯-4-(3-吡啶基甲基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-(1-氮杂环庚烷-1-基-7-溴-5-氧代-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苄腈，1-氮杂环庚烷-1-基-7-溴-4-(3，4-二甲氧基苄基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-(氮杂环庚烷-1-基)-7-溴-4-(3-苯基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-氮杂环庚烷-1-基-7-溴-4-((E)-3-吡啶-3-基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-氮杂环庚烷-1-基-7-溴-4-(3-吡啶-4-基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-4-(4-甲基苄基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-4-(4-氯代苄基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-4-(3，4-二甲氧基苄基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-(吡咯烷-1-基)-7-溴-4-(3-苯基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-4-(3-吡啶-3-基烯丙基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-(哌啶-1-基)-7-溴-4-(3-苯基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-(7-溴-1-二甲基氨基-5-氧代-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苄腈，4-(溴-二甲基氨基氧代-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯甲酸甲酯，7-溴-1-二甲基氨基-4-(3-苯基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-溴-1-二甲基氨基-4-(3-苯基丙-2-炔基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，1-氮杂环庚烷-1-基-7-甲基-4-(3-苯基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-(3，4-二甲氧基苄基)-7-甲基-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-甲基-4-(3-苯基烯丙基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-氨基-4-((E)-3-苯基烯丙基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，7-氨基-4-((E)-3-吡啶-3-基烯丙基)-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-苄基-7-甲基氨基-1-吡咯烷-1-基-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-酮，4-(7-甲基氨基-5-氧代-1-吡咯烷-1-基-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苄腈，[4-(7-溴-5-氧代-1-吡咯烷-1-基-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯基]乙酸甲酯，2-[4-(7-溴-5-氧代-1-吡咯烷-1-基-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯基]-N-甲基乙酰胺，2-[4-(7-溴-5-氧代-1-吡咯烷-1-基-5H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-4-基甲基)苯基]-N，N-二甲基乙酰胺，1-二甲基氨基-7-甲基-4-(3-吡啶-3-基烯丙基)-4H-[1，2，4]三唑并[4，3-a]喹唑啉-5-硫酮。

    其它优选化合物是那些在PCT申请WO 98/49169中公开的化合物，其中最优选二氮杂并-吲哚酮类化合物，并且特别优选下列化合物：(3S)3-(2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，9-甲氧基-3-(2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，2-甲基-3-(9-甲氧基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸甲酯，2-甲基-3-(9-甲氧基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸，D-葡糖胺2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸盐，(3R)2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸，(3S)2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸2-吗啉-4-基-乙基酯，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸2-乙酰氧基-乙酯的盐，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸2-甲氧基-乙酯的盐，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸2-羟基-乙酯的盐，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸1-(2S)-甘油酯的盐，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸2-羟基3-吗啉-4基丙酯的盐，9-甲基-3-(2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，(3S)9-甲基-3-(2，5-二甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]哚-4-酮，(3S)9-甲基-3-(2，6-二甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，(3S)9-甲基-3-(2，6-二甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，(3S)9-甲基-3-(2，8-二甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(5-甲氧基-2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)9-甲基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(7-甲氧基-2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)9-甲基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(6-甲氧基-2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)9-甲基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(6-溴-2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-9-甲基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(5-羟甲基-2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)9-甲基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉5-甲酸叔丁酯(tertiobutylicester)，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-5-甲酸，3-(7-羟甲基-2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-9-甲基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，(3S)3-(5-氟-2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)9-甲基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(5-氯-2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)9-甲基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，(9-甲基-3-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-2-甲酸乙酯，5-氯-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-2-甲酸乙酯，[3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-2-基]-乙酸乙酯，乙酸3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-2-基甲酯，9-甲基-3-(2-甲氧基甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，9-甲基-3-(2-羟甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，琥珀酸单[[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]和[3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-2-基]甲基]酯，乙酸单[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]和[3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-2-基]甲基]酯，N-(2-吗啉-4-基-乙基)-琥珀酰胺酸3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-2-基-甲酯，琥珀酸3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-2-基甲酯2-吗啉-4-基乙酯，6-叔丁氧基羰基氨基-2-{3-[3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-2-基甲氧基羰基]-丙酰基氨基}己酸甲酯，3-[3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-2-基]-丙酸乙酯，(3S)3-(2-甲基-4-氧代-4H-吡啶并[3，4-d]嘧啶-3-基)9-甲基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-1-酮，3-(2-甲基-4-氧代-4H-蝶啶-3-基)9-甲基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，9-氨基-3-(2-甲基-4-氧代-4H-吡啶并[3，4-d]嘧啶-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-9-硝基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(2，5-二甲基-4-氧代-4H-喹唑啉3-基)9-硝基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(2，6-二甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)9-硝基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(2，7-二甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)9-硝基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(2，8-二甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-9-硝基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(2，6，8-三甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)9-硝基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(8-溴-2，6-二甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)9-硝基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，(3S)3-(2-甲基-4-氧代-4H-吡啶并[3，4-d]嘧啶-3-基)-9-硝基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，5-氯-2-甲基3-(9-硝基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉，(3S)9-氨基-3-(2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，3-(9-氨基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-2-甲基-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸甲酯及其对映异构体，3-(9-氨基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-2-甲基-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸，9-氨基-3-(2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，9-氨基-3-(2，5-二甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]哚-4-酮，9-氨基-3-(2，6-二甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，9-氨基-3-(2，8-二甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，9-氨基-3-(2，6，8-三甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，9-氨基-3-(5-氯2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酰胺，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲腈，9-甲基-3-[2-甲基-4-氧代-7-(1H-四唑-5-基)-4H-喹唑啉-3-基]-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-N-二甲基甲酰胺，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-N-甲基甲酰胺，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸(2-吗啉-4-基乙基)酰胺，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸(3-(吗啉-4-基-丙基)酰胺，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-(2-氨基-)乙基甲酰胺及其盐酸盐，3-{7-[4-(2-羟乙基)-哌嗪-1-羰基]-2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基}-9-甲基-1-苯基-6，7-二氢-3H-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-4-酮及其盐酸盐，(2S)6-叔丁氧基羰基氨基-2-{[2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-羰基]-氨基}己酸甲酯，(2S)6-氨基-2-{[2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-羰基]-氨基}己酸甲酯，2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-甲酸五氟苯酯，N-(2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-羧基-)酪氨酸，N-(2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-羧基-)-丙氨酸，N-(2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-羧基-)-苯基-丙氨酸，N-(2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-羧基-)-甘氨酸，N-(2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-羧基-)-亮氨酸，N-(2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-羧基-)-天门冬氨酸，N-(2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-羧基-)-谷氨酸，N-(2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-羧基-)-赖氨酸，2-[2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-羰基]-氨基}-3-苯基-(L)-丙酸乙酯，N-(2-甲基-3-(9-甲基-4-氧代-1-苯基-3，4，6，7-四氢-[1，4]二氮杂并[6，7，1-hi]吲哚-3-基)-4-氧代-3，4-二氢-喹唑啉-7-羧基-)-脯氨酸。

    其它优选化合物是那些在PCT申请PCT/EP00/13380中公开的取代吡咯并-[4，3-e]二氮杂类的化合物，最优选下列化合物：1-乙基-5-(4-甲氧基-苯基)-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(4-溴-苯基)-1-乙基-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1，3-二甲基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(4-甲氧基-苯基)-1，3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(4-溴-苯基)-1，3-二甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3-甲基-5-萘-2-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(3-氯-噻吩-2-基)-1-乙基-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-(1-乙基-3-异丙基-8-氧代-1，6，7，8-四氢-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-5基)丙酸甲酯，1-乙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(4-氯-苯基)-1-乙基-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(4-氨基-苯基)-1-乙基-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-5-(4-氟-苯基)-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(3-溴-苯基)-1-乙基-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-甲基-5-苯基-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-异丙基-3-甲基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，(±)1-乙基-3-甲基-5-苯基-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-(2-羟基-乙基)-3-甲基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3-甲基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-硫酮，1-乙基-5-(4-甲氧基-苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-5-(3-甲氧基-苯基)-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(2-氨基-苯基)-1-乙基-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-5-(2-甲氧基-苯基)-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3-异丙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-叔丁基-1-乙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3-甲基-5-苯基-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮异构体1，1-乙基-3-甲基-5-苯基-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮异构体2，3-甲基-5-苯基-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-硫酮，1-乙基-3-甲基-5-对甲苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(3-氨基-苯基)-1-乙基-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-叔丁基-1-乙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-硫酮，1-乙基-3-异丙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-硫酮，5-(4-氨基-苯基)-3-叔丁基-1-乙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(4-氨基-苯基)-1-乙基-3-异丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-5-(4-羟基-苯基)-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(4-氨基-苯基)-3-甲基-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-甲基-5-苯基-1-(2，2，2-三氟乙基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1，5-二乙基-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-环己基-1-乙基-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3-甲基-5-吡啶-4-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，(±)1-乙基-3-甲基-5-吡啶-4-基-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-叔丁基-1-乙基-3-甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(4-二乙基氨基-苯基)-1-乙基-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-丁基-1-乙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，N-[4-(1-乙基-3-甲基-8-氧代-1，6，7，8-四氢-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-5-基)-苯基]乙酰胺，4-(1-乙基-3-甲基-8-氧代-1，6，7，8-四氢-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-5-基)苄腈，5-叔丁基-1-乙基-3-异丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3-异丙基-5-对甲苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，4-(1-乙基-3-异丙基-8-氧代-1，6，7，8-四氢-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-5-基)苄腈，1-乙基-3-异丙基-5-(4-吡咯烷-1-基苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(2，4-二甲氧基-苯基)-1-乙基-3-异丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-叔丁基-3-异丙基-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-异丙基-1-丙基-5-对甲苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，4-(3-异丙基-8-氧代-1-丙基-1，6，7，8-四氢-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-5-基)-苄腈，3-异丙基-1-丙基-5-(4-吡咯烷-1-基-苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(2，4-二甲氧基-苯基)-3-异丙基-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3，5-二叔丁基-1-乙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-叔丁基-1-乙基-5-对甲苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，4-(3-叔丁基-1-乙基-8-氧代-1，6，7，8-四氢-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-5-基)-苄腈，3-叔丁基-1-乙基-5-(4-吡咯烷-1-基苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-叔丁基-5-(2，4-二甲氧基-苯基)-1-乙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3，5-二叔丁基-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-叔丁基-1-丙基-5-对甲苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，4-(3-叔丁基-8-氧代-1-丙基-1，6，7，8-四氢-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-5-基)-苄腈，3-叔丁基-1-丙基-5-(4-吡咯烷-1-基-苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-叔丁基-5-(2，4-二甲氧基-苯基)-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-丁基-1-乙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-硫酮，1-乙基-3-甲基-5-吡啶-3-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3-甲基-5-吡啶-2-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3-甲基-5-苯基-1，6-二氢-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-基-氨腈，N-[4-(1-乙基-3-甲基-8-氧代-1，6，7，8-四氢-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-5-基)-苯基]-(苯基磺酰基)苯磺酰胺，(1-乙基-3-甲基-5-苯基-1，6-二氢-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-基)-甲胺，1-乙基-3-异丙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-亚基-氨腈，3-叔丁基-1-乙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-亚基-氨腈，1-环戊基-3-甲基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-环丙基甲基-3-甲基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-环丁基甲基-3-甲基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-烯丙基-3-甲基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3-甲基-5-(4-三氟甲基-苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3-异丙基-5-(4-三氟甲基-苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-叔丁基-1-乙基-5-(4-三氟甲基-苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-异丙基-1-丙基-5-对甲苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-硫酮，3，5-二叔丁基-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-硫酮，5-叔丁基-3-异丙基-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-硫酮，1-乙基-3-异丙基-5-对甲苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-硫酮，5-叔丁基-1-乙基-3-异丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-硫酮，(±)3-仲丁基-1-乙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，(±)3-仲丁基-1-乙基-5-吡啶-4-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，(±)3-仲丁基-5-苯基-1-丙基-4-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，(±)3-仲丁基-1-丙基-5-吡啶-4-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-环己基-1-乙基-5-苯基-4-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-环己基-1-乙基-5-吡啶-4-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-环己基-5-苯基-1-丙基-4-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-环己基-1-丙基-5-吡啶-4-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-环己基甲基-1-乙基-5-吡啶-4-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-环己基甲基-5-苯基-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-环己基甲基-1-丙基-5-吡啶-4-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-环己基甲基-1-乙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-8-氧代-5-苯基-1，6，7，8-四氢-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-3-甲酸乙酯，5-叔丁基-1-乙基-3-异丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-亚基-氨腈，1-乙基-3-异丙基-5-对甲苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-亚基-氨腈，1-乙基-3-异丙基-5-(4-甲氧基-苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-5-(4-甲氧基-苯基)-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-硫酮，1-乙基-5-(4-甲氧基-苯基)-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-亚基-氨腈，3-异丙基-5-(4-甲氧基-苯基)-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-叔丁基-1-乙基-5-(4-甲氧基-苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-叔丁基-5-(4-甲氧基-苯基)-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-5-(4-羟基-苯基)-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-亚基-氮腈，(±)3-仲丁基-1-乙基-5-(4-甲氧基-苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，(±)3-仲丁基-5-(4-甲氧基-苯基)-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3-甲基-5-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-5-(3-羟基-苯基)-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-5-(2-羟基-苯基)-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3-甲基-5-(2，3，4-三甲氧基-苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3，5-二苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-5-(4-羟基-苯基)-3-异丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(4-羟基-苯基)-3-异丙基-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-叔丁基-1-乙基-5-(4-羟基-苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，5-(2，6-二甲氧基-苯基)-1-乙基-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-乙氧基甲基-1-乙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮。

    取代的吡唑并-[4，3-e]二氮杂类化合物是优选的，特别优选下列化合物：1-乙基-3-异丙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-叔丁基-1-乙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3-异丙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-硫酮，5-(4-氨基-苯基)-1-乙基-3-异丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-5-(4-羟基-苯基)-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，4-(1-乙基-3-异丙基-8-氧代-1，6，7，8-四氢-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-5-基)-苄腈，5-叔丁基-3-异丙基-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，4-(3-异丙基-8-氧代-1-丙基-1，6，7，8-四氢-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-5-基)-苄腈，3-叔丁基-1-乙基-5-对甲苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-丁基-1-乙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-硫酮，(±)3-仲丁基-1-乙基-5-吡啶-4-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，(±)3-仲丁基-1-丙基-5-吡啶-4-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-环己基-1-丙基-5-吡啶-4-基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-叔丁基-5-(4-甲氧基-苯基)-1-丙基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-5-(2-羟基-苯基)-3-甲基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，3-叔丁基-1-乙基-5-(4-羟基-苯基)-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-酮，1-乙基-3-异丙基-5-苯基-6，7-二氢-1H-吡唑并[4，3-e][1，4]二氮杂-8-亚基-氨腈。

    按照上述定义，所述药物采取适合通过全身或局部给药的形式。

    所述药物可以适合于吸入，因此可以以粉末或喷雾剂的形式存在。

    全身给药优选用来治疗如多发性硬化、糖尿病、变态反应和自身免疫性脑脊髓炎等疾病。

    本发明所采用的PDE4抑制剂包括其溶剂化物、水合物及其药学上可接受的盐。

    就适当生成的盐而论，药学上可接受的盐包括乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、酒石酸氢盐、乙酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、柠檬酸盐、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、gluceptate、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰对氨苯基胂酸盐、己基间苯二酚盐、哈胺、氢溴化物、氢氯化物、碳酸氢盐、羟萘甲酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、羟嗪(双羟萘酸盐)、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐或半琥珀酸盐、硫酸盐或半硫酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐或半酒石酸盐、δ-氯茶碱、三乙碘化物(triethiodide)、苄星、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺、普鲁卡因、铝、铵、四甲基铵、钙、锂、镁、钾、钠和锌。(也可以参见“Pharmaceutical salts”，Berge S.M.等人(1997)J.Pharm.Sci.66：1-19，其在此被引入作为参考)。

    本发明的另一目的是用于预防或治疗与IL-12生成过量有关疾病的药物组合物，其含有有效量的与至少一种药学上可接受载体相结合的至少一种磷酸二酯酶E4(PDE4)抑制剂或其药学上可接受的盐。

    根据本发明，短语PDE4抑制剂的“有效量”是指通过剂量单位能够向正常体重(即70kg)的成年患者施用约2mg至约1000mg PDE4抑制剂/天的PDE4抑制剂的量。

    本发明药物组合物中优选采用的PDE4抑制剂是那些在说明书上文中所述的。

    本发明的药物组合物可以含有两种或多种PDE4抑制剂的组合，优选2至4种、最优选2至3种PDE4抑制剂。

    本发明药物组合物采取适合全身或局部途径给药的形式。

    通过把活性成分以剂量单位形式与至少一种药学上可接受载体或赋形剂进行配制，可以制成包括其一种盐在内的本发明PDE4抑制剂的药物组合物。为了从本发明所用的PDE4抑制剂制备药物组合物，惰性的药学上可接受载体可以是固体或液体。

    用于口服给药的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉末和颗粒剂。在这些固体剂型中，PDE4抑制剂与至少一种惰性常规赋形剂(或载体)如柠檬酸钠或磷酸二钙混合或与(a)填充剂或补充剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸，(b)粘合剂，例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶，(c)润湿剂，如甘油，(d)崩解剂，例如琼脂-琼脂、碳酸钙、土豆或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐和碳酸钠，(e)溶液延迟剂，例如石蜡，(f)吸收促进剂，例如季铵化合物，(g)湿润剂，如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯，(h)吸附剂，例如高岭土和膨润土，和(i)润滑剂，例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或它们的混合物混合。在胶囊、片剂和丸剂的情况中，剂型也可以含有缓冲剂。

    相似类型的固体组合物也可以在采用赋形剂(如乳糖)和高分子量聚乙二醇等的软和硬填充明胶胶囊中用作填充物。

    固相剂型如片剂、锭剂、胶囊、丸剂和颗粒剂也可以制成带有包衣和外壳的形式，例如肠溶包衣和其它本领域熟知的形式。它们也可以是以延迟方式将PDE4抑制剂释放在肠道某个部分的组合物。可以采用的包埋组合物的实例是聚合物质和蜡类。如果适合，活性成分也可以采取带有一种或多种上述赋形剂的微包囊形式。

    用于口服给药用的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、混悬液、糖浆和酏剂。除了PDE4抑制剂以外，液体剂型还可以含有本领域常用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇等。

    除了PDE4抑制剂以外，混悬液还可以含有助悬剂，例如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇和脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂-琼脂和黄蓍胶，或这些物质的混合物等。

    用于直肠给药的组合物优选栓剂，其可以通过将本发明化合物与适当非刺激性赋形剂或载体如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡进行混合制成，所述栓剂常温下为固体但在体温下为液体，因此可在直肠熔化并释放活性成分。

    适合非肠道注射的组合物可以含有生理上可接受无菌水或非水溶液、分散体、混悬液或乳液，以及可重构为无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末。合适的液体载体、稀释剂、溶剂或赋形剂的实例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油等)及其合适的混合物。

    这些组合物也可以含有辅料，例如防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。利用多种抗细菌剂和抗真菌剂可以确保预防微生物的作用，例如对羟基苯甲酸酯类、氯丁醇、苯酚、山梨酸等。也可以根据需要含有等渗剂，例如糖、氯化钠等。

    优选地，药物制剂为单位剂型。以这种形式，可将制剂分成含有适量PDE4抑制剂的单位剂量。单位剂型可以为包装制剂，该包装中含有非连续量的制剂，例如小包片剂、胶囊和存在于小瓶或安瓿中的粉末。单位剂型也可以是胶囊、扁囊剂或片剂本身，或可以是适当数量的上述任何包装形式。剂量单位形式的一些实例为片剂、胶囊、丸剂、粉末、栓剂、水和非水口服溶液和悬浮液，以及包装在含有一个或较大数量的剂量单位并且能够细分为独立剂量容器内的非肠道溶液。

    活性成分在上述组合物中的百分比可以在宽限度内变化，但出于实际目的，其优选以占固体组合物至少10％的浓度和占初始液体组合物至少2％的浓度存在。最令人满意的组合物是那些存在更高比例活性成分、例如10％-90％(重量)的组合物。

    本发明还涉及预防和/或治疗与IL-12生成过量有关疾病的方法，该方法包括给需要治疗的对象施用有效量的至少一种PDE4抑制剂或其药学上可接受的盐。事实上试验的结果表明：

    -PDE4抑制剂通过抑制IL-12p70和其它炎症细胞因子如TNF-α和在某种程度上抑制IL-6的生成而对未成熟或成熟DC具有直接影响。

    -PDE4抑制剂不修饰这些细胞的表型。

    -通过PDE4抑制剂对DC的细胞因子生成的直接抑制作用，原初T细胞的Th-1与Th-2分化的平衡朝着Th-2向Th-1细胞损害的方向移动。

    术语“患者”包括哺乳动物，尤其是人类。

    根据本发明，实施预防和治疗与IL-12生成过量有关疾病的方法所需要做的全部工作是施用至少一种预防或治疗损伤病症有效量的PDE4抑制剂。对于正常体重(即70kg)的成年人来说，PDE4抑制剂的有效量一般为约2mg至约1000mg。

    本发明进一步举例说明，但不限于下面实施例。实施例实施例的材料和方法材料和方法细胞因子和试剂

    PDE4抑制剂咯利普兰、二氮杂并-吲哚、吡唑并(pirazolo)[4，3-e]二氮杂和Ariflo配制为溶于DMSO中的0.1M储备液，保存在-20℃下，在使用之前即刻稀释为完全培养基。所有试验中包括DMSO的1∶104最终稀释液作为载体对照组。

    人类rGM-CSF(比活性(SA)1.5×107U/mg)、人类rIL-4(S.A.2.9×107U/mg)、人类rIFN-γ(S.A.2×107U/mg)全部得自R&D Systems Europe(Oxon，U.K.)。由外周血液单核细胞体外生成树突细胞(DC)

    通过静脉穿刺术采集健康捐献者的静脉血至含肝素钠的试管(VT100H；Venoject，Terumo Europe，Leuven，Belgium)。在Lymphoprep(Nycomed，Torshov，Norway)上通过密度离心分离外周血单核细胞(PBMC)。随后，PBMC在Percoll(Pharmacia，Uppsala，Sweden)梯度上离心，该梯度由三个密度层(1.076、1.059和1.045g/ml)组成。主要含有单核细胞的轻密度部分飘浮在中间层上，将其以5×105细胞/孔的密度接种在24孔培养平板(Costar，Cambridge，MA)中。37℃下培育30分钟后，除去未粘附细胞；在Lscove氏修饰的Dulbecco氏培养基(Life Technologies，Paisley，U.K.)中培养粘附细胞，培养基中含有庆大霉素(86μg/ml；Duchefa，Haarlem，The Netherlands)和1％FCS(Hyclone，Logan，UT)，并且补充GM-CSF(500U/ml)和IL-4(250U/ml)，得到DC。在第3天时，更新包括补充物的培养基。在第6天时，得到未成熟CD1a+CD14-DC。

    在一些试验中，利用单核细胞分离试剂盒(Miltenyi Biotec，BergischGladbach，德国)通过阴性选择从PBMC纯化单核细胞。所得单核细胞部分在RPMI-1640(Life Technologies，Paisley，U.K)中进行体外培养，所述培养基含有10％FCS、1％非必需氨基酸、1％丙酮酸钠、100μg/ml卡那霉素(均得自Life Technologies，Paisley，U.K)，并且补充得自R&D Systems Europe，Oxon，U.K.的rhGM-CSF(500U/ml)和rh-IL4(250U/ml)。在第3天时，更新包括补充物的培养基。

    在两种方案中，得到相似的未成熟CD1a+CD14-DC制剂。PDE4抑制剂存在或不存在下DC成熟的诱导

    在第6天时，通过与LPS(250ng/ml；Difcoo，Detroit，MI)或细胞因子rhIL-1β(10ng/ml)和TNF-α(25ng/ml)(均得自Pharma Biotechnologie，Haunover，Germany)的组合接触2天诱导CD1a+DC的成熟。在PDE4抑制剂(10μM，除非另外说明)或PGE2(10-6M；Sigma，St.Louis，MA)不存在或存在下诱导成熟。其中指出，DC在2天内保持非成熟状态。成熟DC的细胞因子分泌诱导

    在第8天，收获成熟DC，充分洗涤，在IFN-γ(103U/ml)不存在或存在下，在96孔平底培养平板(Costar，cambridge，MA)内的IMDM中，用CD40L转染J558细胞系(2×104个细胞/孔)刺激2×104个细胞/200μL，IMDM中含有10％FCS。24小时后收获上清液，保存在-20℃下用于通过ELISA进行IL-12p70、IL-6和TNF-α的水平测定。利用流式细胞计数分析细胞表面分子的表达

    采用抗下列人类分子的小鼠mAbs：CD1a(OkT6；Ortho Diagnostic System，Beerse，Belgium)、ICAM-1、CD86(Pharmingen，San Diego，CA)、CD83(HB15a，IgG2b；Immunotech，Marseille，France)，随后采用FITC结合的山羊抗小鼠mAb(Jackson Immunoresearch Laboratories，West Grove，PA)。细胞因子的测定

    利用特异性固相夹层ELISA OptEIATM人类IL-12P70(Pharmingen SanDiego，CA)测定培养物上清液中的IL-12p70的水平。通过ELISA，利用成对的特异性mAb和得自BioSource International(Camarillo，CA)的重组细胞因子标准测定IL-6和TNF-α。这些ELISA的检测限如下所示：IL-6，20pg/ml；IL-12p70，3pg/ml；以及TNF-α，20pg/ml。与DC共培养的CD4+CD45RA+CD45RO-原初细胞的分离以及成熟Th细胞中记忆型细胞因子的诱导

    利用阴性选择人类CD4+/CD45RO-柱试剂盒(R&D Systems Europe，Oxon，U.K.)由外周血白细胞分离原初Th细胞(ThN)。正如流式血细胞计数评估的，这种方法可生成高纯度(＞98％)的CD4+CD45RA+CD45RO-ThN。如段落“PDE4抑制剂存在下DC成熟的诱导”中所述，将用rhIL-1β和TNF-α成熟化的DC充分洗涤除去任何残余抑制剂。在96孔平底培养平板中，使ThN(20.000个细胞/孔)与10.000DC/孔在1ng/mlSEB存在下共培养。在第5天，加入IL-2(10U/ml)，进一步培养9天。在第14天，收获静止记忆的ThN细胞，洗涤，用10ng/ml PMA、1μg/ml伊屋诺霉素和10μg/ml布雷菲德菌素A(均得自Sigma)再次刺激6小时。细胞用4％低聚甲醛固定，与含有BSA(0.5％)和皂甙(0.5％)的PBS渗透，用FITC标记的抗IFN-α和PE-标记的抗IL-4 mAb(Becton & Dickinson)染色，并且用FACScan(Becton & Dickinson)分析。

    按照上述“材料和方法”部分中所述的技术进行试验。实施例1：PDE4抑制剂对未成熟树突细胞(DC)的细胞因子分泌的直接作用

    利用因子如LPS以及IFN-γ，或通过在与CD40L表达T细胞接触后与CD40结合可以诱导IL-12的生成。

    如图1所示，在咯利普兰或Ariflo存在下，用LPS和IFN-γ刺激的未成熟DC所表现出的生成IL-12p70和TNF-α的能力比DMSO处理的DC低。相反地，未成熟DC的IL-6生成不受任何抑制剂的影响。

    所以，该实施例证实PDE4抑制剂通过明显降低其细胞因子的分泌而对树突细胞具有直接作用。实施例2：几种PDE4抑制剂对未成熟树突细胞的IL-12p70分泌的直接作用的对比

    在不存在任何PDE抑制剂或在10μM PDE4抑制剂(Ariflo，咯利普兰，二氮杂并-吲哚或吡唑并[4，3-e]二氮杂)存在下，用J558-CD40L细胞刺激树突细胞生成IL-12。图2中所示的数据显示，所有被测PDE4抑制剂能够通过刺激树突细胞抑制IL-12生成，并具有相同数量级的抑制活性。实施例3：DC成熟期间PDE4抑制剂的存在不改变DC的成熟表型

    DC的成熟过程与CD83的出现以及共刺激分子如CD86的增量调节有关。为了研究DC成熟期间PDE4抑制剂的存在是否可能影响DC相关性标记CD1a、共刺激分子CD86和ICAM-1以及DC成熟标记CD83的细胞表面表达，所以在处理后对这些标记的表达进行研究。

    如图3A和B所示，当与经载体处理的对照成熟DC比较时，PDE4抑制剂对DC处理2天不影响由成熟因子(TNF-α加IL-1β，称作MF)或由LPS诱导的表面分子的表达。

    所以，数据表明尽管PDE4抑制剂调节DC的细胞因子生成，但它们不阻碍其由炎性细胞因子或LPS诱导的表型成熟。实施例4：在DC的成熟期间PDE4抑制剂处理对其后续细胞因子分泌的影响

    本实施例研究只在DC体外成熟过程中用PDE4抑制剂处理DC对后续刺激时DC生成细胞因子能力的影响。用PGE2作为对照。DC成熟是在PDE4抑制剂的不存在或存在下由炎症细胞因子(TFN-α加IL-1β)的组合诱导的。

    如图4所示，在附加PDE4抑制剂存在下，用IL-1β加TNF-α成熟化的DC显示出在用J558-转染CD40L细胞随后刺激时生成IL-12p70和TNF-α的能力降低(抑制率为40-60％)。

    从试验看，在PDE4抑制剂存在下成熟的DC显示出受到抑制的(如图4所示)IL-6生成。实施例5：PDE4抑制剂对原初T细胞分化的影响

    按照在上述“材料和方法”部分中所述技术进行试验。

    从人体外周血白细胞分离出原初Th细胞(ThN)，随后与在不同PDE4抑制剂存在下成熟的树突细胞共培养。原初Th细胞向Th1和Th2的分化通过带有标记抗IFN-γ和抗IL-4单克隆抗体的T-细胞细胞内染色以及流式细胞计数分析观察。

    在树突细胞(DC)成熟期间，在IL 1β和TNFα(成熟因子或MF)存在下加入PDE4抑制剂。成熟2天后，洗涤树突细胞并且用来起动原初T细胞。

    分别通过IFNγ阳性和IL4阳性细胞的细胞内染色评估向Thr/Th2的分化，并且表示为阳性细胞的百分比。

    结果报告在下表1中。

                                   表1               实施例1                实施例2              实施例3             IFN-γ(％) IL-40(％) IFN-γ(％) IL-4(％) IFN-g(％) IL-4(％)MF-DC-DMSO     14.1     12.6      42.5       0.9      37.7      1.7MF-DC-         4.7      15.1      29.6       2.0      24.0      6.2Ariflo(10μM)MF-DC-咯利普兰 7.2      13.5      35.4       1.1      24.5      5.7(10μM)

    如表1所示，正如细胞内IFNγ/IL4染色显示的，在PDE4抑制剂存在下，树突细胞的成熟促进了原初T细胞向Th2样表型的分化。

    更准确地说，PDE4抑制剂对树突细胞的直接活性导致Th1群中INF-γ生成的减少。

    这些数据表明PDE4抑制剂可以调节树突细胞极化能力，由此PDE4抑制剂非常适用于治疗任何涉及树突细胞的IL-12生成并且其中生成了非期望数量的Th1型T细胞的疾病。