含有取代的吡啶并或嘧啶并的6,6-或6,7-二环衍生物 发明背景
本发明涉及某些具有药学活性的含有取代的吡啶并或嘧啶并的6,6-或6,7-二环衍生物、含有它们的药物组合物和对于需要它们的促肾上腺皮质激素释放因子拮抗剂活性的患者的给药方法。
本案要求保护的取代的杂环衍生物表现出具有促肾上腺皮质激素释放因子(激素)CRF(CRH)拮抗剂的活性。
美国专利4605642和5063245中提到了CRF拮抗剂，分别指肽和吡唑啉酮。下列文献也有涉及：PCT专利申请PCT/IB 95/00439，指定美国，1995年6月6日提交，1995年12月14日公开；PCT专利申请PCT/IB 95/00373，指定美国，1995年5月18日提交，1995年12月21日公开；美国专利申请08/448539,1993年11月12日以PCT方式提交，1995年6月14日进入美国国家阶段；PCT专利申请WO95/10506，1993年10月12日提交，1995年4月20日公开，和美国专利申请08/481413,1993年11月26日以PCT方式提交，1995年7月24日进入美国国家阶段；美国专利申请08/254820,1995年4月19日提交；临时美国专利申请60/008396,1995年12月8日提交；和临时美国专利申请60/006333,1995年11月8日提交。所有上述专利申请全文结合在此作为参考。
文献中陈述了CRF拮抗剂的重要性，例如P.Black，《科学美国人科学与医学》1995,p.16-25；T.Lovenberg等《最新药学设计》1995,1,305-316；和美国专利5063245，指的是上述该专利文献。最近，M.J.Owens等《药理学评论》第43卷第425至473页(1991)概述了CRF拮抗剂所具有的不同活性，也结合在此作为参考。基于这两篇及其他参考文献所述的研究内容，CRF拮抗剂可有效治疗人和动物广泛的与应激反应有关的疾病，情绪障碍、例如抑郁症、重度抑郁性障碍、单发作性抑郁症、复发性抑郁症、儿童滥用药物诱发的抑郁症、产后抑郁症，精神抑郁症、两极性精神障碍和躁郁循环性气质；慢性疲劳综合征；进食障碍、例如神经性厌食症和神经性贪食症；综合性焦虑症；恐慌症；恐怖症；强迫观念-强迫行为症，创伤后应激反应障碍，痛觉、例如纤维肌痛；头痛；胃肠疾病；出血的应激反应；溃疡；应激反应诱发地精神病发作；发烧；腹泻；术后肠梗阻，结肠的过敏反应；过敏性大肠综合征；克罗恩氏病；痉挛性结肠；炎症、例如类风湿性关节炎和骨关节炎；疼痛；哮喘；牛皮癣；变态反应；骨质疏松症；早产；高血压，充血性心力衰竭；睡眠障碍；神经变性疾病，例如早老性痴呆、早老性痴呆型老年性痴呆、多梗塞性痴呆、帕金森病、亨廷顿病；头外伤；局部缺血性神经元损伤；兴奋毒素性神经元损伤；癫痫；中风；脊髓损伤；精神社会性侏儒症；甲状腺机能正常病综合征；不适当的止泻激素综合征；肥胖症；化学药品依赖和成瘾；药物和酒精脱瘾症状；不育症，癌症；不育症；肌肉痉挛；尿失禁；低血糖和免疫机能障碍，包括应激反应诱发的免疫机能不良、免疫抑制和人免疫缺陷病毒感染；应激反应诱发的感染。
据信，本发明化合物也是CRH结合蛋白抑制剂，因此可用于一些疾病的治疗，通过抑制该蛋白质来起到治疗作用或促进治疗。这些疾病的实例为早老性痴呆和肥胖症。
发明概述
本发明涉及下式化合物
虚线代表可选地为双键；
A为氮或CR7；
B为-NR1R2、-CR1R2R10、-C(=CR2R11)R1、-NHCR1R2R10、-OCR1R2R10、-SCR1R2R10、-CR2R10NHR1、-CR2R10OR1、-CR2R10SR1或-COR2，并以单键与D连接；或者B为-CR1R2，并以双键与D连接，且D为碳；
D为氮或CR4，并以单键与连接其上的所有原子连接，或者D为碳，并以双键与E连接或与B连接；
E为氧、氮、硫、C=O、C=S、CR6R12、NR6或CR6；或者E为两个原子的间隔基，其中一个原子为氧、氮、硫、C=O、C=S、CR6R12、NR6或CR6，另一个原子为CR6R12或CR9；
若以单键与两个邻近的成环原子连接，则K和G每个独立为C=O、C=S、硫、氧、CHR8或NR8，或者若以双键与一个邻近的成环原子连接，则K和G每个独立地为氮或CR8；
含有D、E、K和G的6元或7元环可含有一至三条双键，零至两个选自氧、氮和硫的杂原子，和零至两个C=O或C=S基团，其中这些基团的碳原子是环的一部分，氧原子和硫原子是环上的取代基；
R1为可选被一或两个取代基取代的C1-C6烷基，取代基独立选自羟基、氟、氯、溴、碘、C1-C4烷氧基、CF3、-C(=O)(C1-C4烷基)、-C(=O)-O-(C1-C4烷基)、-OC(=O)(C1-C4烷基)、-OC(=O)N(C1-C4烷基)(C1-C2烷基)、-NHCO(C1-C4烷基)、-COOH、-COO(C1-C4烷基)、-CONH(C1-C4烷基)、-CON(C1-C4烷基)(C1-C2烷基)、-S(C1-C4烷基)、-CN、-NO2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2(C1-C4烷基)、-SO2NH(C1-C4烷基)和-SO2N(C1-C4烷基)(C1-C2烷基)，其中在上述R1基团中，每个C1-C4烷基可选含有一或两条双键或叁键；
R2为可选含有一至三条双键或叁键的C1-C12烷基、芳基或(C1-C4亚烷基)芳基，其中所述的芳基和(C1-C4亚烷基)芳基的芳基部分选自苯基、萘基、噻吩基、苯并噻吩基、吡啶基、喹啉基、吡嗪基、嘧啶基、咪唑基、呋喃基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、异噻唑基、吡唑基、吡咯基、吲哚基、吡咯并吡啶基、噁唑基和苯并噁唑基；C3-C8环烷基或(C1-C6亚烷基)(C3-C8环烷基)，其中所述的环烷基和所述的(C1-C6亚烷基)(C3-C8环烷基)的5至8元环烷基部分的一或两个碳原子可选地和独立地被一个氧或硫置换，其中每个上述R2基团可选被一至三个取代基取代，取代基独立选自氯、氟、羟基和C1-C4烷基，或者被一个取代基取代，该取代基选自C1-C6烷氧基、-OC(=O)(C1-C6烷基)、-OC(=O)N(C1-C4烷基)(C1-C2烷基)、-S(C1-C6烷基)、氨基、-NH(C1-C2烷基)、-N(C1-C2烷基)(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)-CO-(C1-C4烷基)、-NHCO(C1-C4烷基)、-COOH、-COO(C1-C4烷基)、-CONH(C1-C4烷基)、-CON(C1-C4烷基)(C1-C2烷基)、-SH、-CN、-NO2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2(C1-C4烷基)、-SO2NH(C1-C4烷基)和-SO2N(C1-C4烷基)(C1-C2烷基)；
NR1R2或CR1R2R10可以构成一个环，选自饱和3至8元环、可选含有一或两条双键的5至8元环，其中该5至8元环的一或两个环碳原子可选地和独立地被一个氧原子或硫原子置换，或者被NZ3置换，其中Z3为氢或C1-C4烷基；
R3为氢、C1-C4烷基、-O(C1-C4烷基)、氯、氟、溴、碘、-S(C1-C4烷基)或-SO2(C1-C4烷基)；
R4为氢、C1-C2烷基、羟基或氟；
每个与碳原子连接的R6、R8和R9独立选自氢、C1-C2烷基、氟、氯、溴、碘、羟基、羟甲基、甲酰基、三氟甲基、氰基、氨基、硝基、-O(C1-C2烷基)、-N(C1-C2烷基)(C1-C2烷基)、-S(C1-C2烷基)、-CO(C1-C2烷基)、-C(=O)H或-C(=O)O(C1-C2烷基)，其中在上述R6、R8和R9基团中，每个C1-C2烷基部分可选含有一条双键或叁键；每个与氮原子连接的R6、R8和R9独立选自氢和C1-C4烷基；
R5为取代的苯基、萘基、吡啶基或嘧啶基，其中每个上述R5基团被二至四个取代基R15取代，其中一至三个所述取代基可以独立选自氯、C1-C6烷基、-O(C1-C6烷基)和-(C1-C6亚烷基)O(C1-C6烷基)，其中一个所述取代基可以独立选自溴、碘、甲酰基、氰基、三氟甲基、硝基、氨基、-NH(C1-C4烷基)、-N(C1-C2烷基)(C1-C6烷基)、-C(=O)O(C1-C4烷基)、-C(=O)(C1-C4烷基)、-COOH、-SO2NH(C1-C4烷基)、-SO2N(C1-C2烷基)(C1-C4烷基)、-SO2NH2、-NHSO2(C1-C4烷基)、-S(C1-C6烷基)和-SO2(C1-C6烷基)，其中在上述R5基团中，每个C1-C4烷基和C1-C6烷基部分可选被一或两个取代基取代，取代基独立选自氟、羟基、氨基、甲氨基、二甲氨基和乙酰基；
R7为氢、甲基、卤素(例如氯、氟、碘或溴)、羟基、甲氧基、-C(=O)(C1-C2烷基)、-C(=O)O(C1-C2烷基)、三氟甲氧基、羟甲基、三氟甲基或甲酰基；
R10为氢、羟基、甲氧基或氟；
R11为氢或C1-C4烷基；
R12为氢或甲基；
Z为NH、氧、硫、-N(C1-C4烷基)或CR13R14，其中R13和R14独立选自氢和甲基，但是R13和R14之一可选为氰基除外；
其条件是：(a)在式Ⅰ的六元或七元环结构中，不能有两条双键彼此邻近；(b)若D为碳，并以双键与B连接，则B为CR1R2；
和该化合物的药学上可接受的盐。
式Ⅰ更具体的实施方式实例如下，其中(R)n代表零至两个取代基，其中该取代基是如上在式Ⅰ的定义中所定义的。和
本发明更具体的实施方式包括式Ⅰ化合物，其中B为-CHR1R2或-NR1R2，R1为可选被一个羟基、氟、三氟甲基或C1-C4烷氧基取代的C1-C6烷基，并且可选含有一条双键或叁键；R2为苄基或可选含有一条双键或叁键的C1-C6烷基，其中所述的C1-C6烷基和所述苄基的苯基部分可选被一个氟、C1-C2烷基、C1-C2烷氧基或氯取代。
本发明其他更具体的实施方式包括式Ⅰ化合物，其中R3为甲基、乙基、氯或甲氧基；R6、R8和R9独立选自氢和甲基；R5为二或三取代的苯基、吡啶基或嘧啶基，其中至多三个取代基可以独立选自C1-C4烷基、-O-(C1-C4烷基)和(C1-C2亚烷基)-O-(C1-C4烷基)，其中取代基之一可以独立选自三氟甲基、三氟甲氧基、-CHO、(C1-C4烷基)-OH、氰基、氯、氟、溴、碘和硝基，其中每个上述C1-C4烷基可选含有一条双键或叁键；Z为氧或NH。
本发明其他更具体的实施方式包括式Ⅰ化合物，其中A为氮或CH。
本发明优选的化合物实例为：
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-吡啶并[3,4-b]吡嗪-3-酮；
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-2-氧-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘-3-羧酸甲酯；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-2-氧-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘-3-羧酸异丙酯；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-3,4-二氢-1H-[1,6]二氮杂萘-2-酮；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘；
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘；
1-(1-乙基-丙基)-3,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-3,4-二氢-1H-3-氧杂-[1,6]-二氮杂萘-2-酮；和
1-(1-乙基-丙基)-3,3,6-三甲基-4-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶。
其他式Ⅰ化合物包括下列化合物：
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(4-溴-2,6-二甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-吡啶并[3,4-b]吡嗪-3-酮；
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(4-溴-2,6-二甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(4-溴-2,6-二甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-2-氧-5-(4-溴-2,6-二甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘-3-羧酸甲酯；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-2-氧-5-(4-溴-2,6-二甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘-3-羧酸异丙酯；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(4-溴-2,6-二甲基-苯氧基)-3,4-二氢-1H-[1,6]二氮杂萘-2-酮；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(4-溴-2,6-二甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(4-溴-2,6-二甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘；
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(4-溴-2,6-二甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘；
1-(1-乙基-丙基)-3,7-二甲基-5-(4-溴-2,6-二甲基-苯氧基)-3,4-二氢-1H-3-氧杂-[1,6]-二氮杂萘-2-酮；
1-(1-乙基-丙基)-3,3,6-三甲基-4-(4-溴-2,6-二甲基-苯氧基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶；
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(4-氯-2,6-二甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-吡啶并[3,4-b]吡嗪-3-酮；
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(4-氯-2,6-二甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(4-氯-2,6-二甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-2-氧-5-(4-氯-2,6-二甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘-3-羧酸甲酯；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-2-氧-5-(4-氯-2,6-二甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘-3-羧酸异丙酯；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(4-氯-2,6-二甲基-苯氧基)-3,4-二氢-1H-[1,6]二氮杂萘-2-酮；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(4-氯-2,6-二甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(4-氯-2,6-二甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘；
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(4-氯-2,6-二甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘；
1-(1-乙基-丙基)-3,7-二甲基-5-(4-氯-2,6-二甲基-苯氧基)-3,4-二氢-1H-3-氧杂-[1,6]-二氮杂萘-2-酮；
1-(1-乙基-丙基)-3,3,6-三甲基-4-(4-氯-2,6-二甲基-苯氧基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-嘧啶并[4,5-d][1,3]噁嗪；
[1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-1,4-二氢-2H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
[1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-1,4-二氢-2H-嘧啶并[4,5-d][1,3]噁嗪-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
3-[7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-4H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘-1-基]-戊-1-醇；
2-[7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-4H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘-1-基]-丁-1-醇；
1-(1-乙基-丁基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘；
7-甲基-1-(1-丙基-丁基)-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氨基)-1,4-二氢-2H-吡啶并[3,4-b]吡嗪-3-酮；
8-(1-乙基-丙基)-2-甲基-4-(2,4,6-三甲基-苯氨基)-7,8-二氢-5H-蝶啶-6-酮；
8-(1-乙基-丙基)-2-甲基-4-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-7,8-二氢-5H-蝶啶-6-酮；
8-(1-乙基-丙基)-2-甲基-4-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-5,6,7,8-四氢-蝶啶；
[8-(1-乙基-丙基)-2-甲基-5,6,7,8-四氢-蝶啶-4-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
[1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪；
[1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-1,2,3,4-四氢-[1,6]-二氮杂萘-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
8-(1-乙基-丙基)-2-甲基-4-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-5,6,7,8-四氢-吡啶并[2,3-d]嘧啶；
[8-(1-乙基-丙基)-2-甲基-5,6,7,8-四氢-吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-嘧啶并[4,5-d][1,3]噁嗪；
[1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-1,4-二氢-2H-嘧啶并[4,5-d][1,3]噁嗪-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
[1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-1,4-二氢-2H-3-氧杂-,6-二氮杂-萘-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
1-(1-羟甲基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-吡啶并[3,4-b]吡嗪-3-酮；
1-(1-羟甲基-丙基)-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-吡啶并[3,4-b]吡嗪-3-酮；
2-[4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶并[3,4-b]吡嗪-1-基]-丁-1-醇；
2-[7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-3,4-二氢-2H-吡啶并[3,4-b]吡嗪-1-基]-丁-1-醇；
2-[7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-3,4-二氢-2H-[1,6]二氮杂萘-1-基]-丁-1-醇；
2-[4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-4H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘-1-基]-丁-1-醇；
5-(1-乙基-丙基)-3-甲基-1-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-异喹啉；
二乙基-[3-甲基-1-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-异喹啉-5-基]-胺；
[5-(1-乙基-丙基)-3-甲基-异喹啉-1-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
N-5-丁基-N-5-乙基-3-甲基-N-1-(2,4,6-三甲基-苯基)-异喹啉-1,5-二胺；
5-(1-乙基-丙基)-3-甲基-1-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-[2,6]二氮杂萘；
5-(1-乙基-丙基)-3-甲基-1-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-[2,7]二氮杂萘；
4-(1-乙基-丙基)-6-甲基-8-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-[1,7]二氮杂萘；
[5-(1-乙基-丙基)-3-甲基-[2,6 ]二氮杂萘-1-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氨基)-1H-[1,6]二氮杂萘-2-酮；
4-(1-乙基-丙基)-6-甲基-8-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1H-[1,7]二氮杂萘-2-酮；
4-二乙氨基-6-甲基-8-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1H-[1,7]二氮杂萘-2-酮；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-2,3-二氢-1H-4-氧杂-1,6-二氮杂-萘；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-2,3-二氢-1H-4-硫杂-1,6-二氮杂-萘；
[1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
[1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-2,3-二氢-1H-4-氧杂-1,6-二氮杂-萘-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
[1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-2,3-二氢-1H-4-硫杂-1,6-二氮杂-萘-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
[1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-硫杂-1,6-二氮杂-萘；
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[4,3-d]嘧啶；
1-(1-乙基-丙基)-3,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[4,3-d]嘧啶；
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]-二氮杂萘四氢-吡啶并[4,3-d-]嘧啶；
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-硫杂-1,6-二氮杂-萘；
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[4,3-d]嘧啶；
4-(1-乙基-丙基)-6-甲基-8-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-吡喃并[2,3-c]吡啶-2-酮；
1-仲丁基-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-吡啶并[3,4-b]吡嗪-3-酮；
1-仲丁基-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘；
1-仲丁基-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘；
1-仲丁基-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪；
1-仲丁基-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘；
1-仲丁基-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪；
7-甲基-1-(1-丙基-丁基)-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘；
5-仲丁基-3-甲基-1-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-异喹啉；
二乙基-[3-甲基-1-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-异喹啉-5-基]-胺；
[5-仲丁基-3-甲基-异喹啉-1-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
N-5-丁基-N-5-乙基-3-甲基-N1-(2,4,6-三甲基-苯基)-异喹啉-1,5-二胺；
5-仲丁基-3-甲基-1-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-[2,6]二氮杂萘；
5-仲丁基-3-甲基-1-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-[2,7]二氮杂萘；
4-仲丁基-6-甲基-8-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-[1,7]二氮杂萘；
[5-仲丁基-3-甲基-[2,6]二氮杂萘-1-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
1-仲丁基-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氨基)-1 H-[1,6]二氮杂萘-2-酮；
4-仲丁基-6-甲基-8-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1H-[1,7]二氮杂萘-2-酮；
4-二乙氨基-6-甲基-8-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1H-[1,7]二氮杂萘-2-酮；
1-仲丁基-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪；
1-仲丁基-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-2,3-二氢-1H-4-氧杂-1,6-二氮杂-萘；
1-仲丁基-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-2,3-二氢-1H-4-硫杂-1,6-二氮杂-萘；
[1-仲丁基-7-甲基-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
[1-仲丁基-7-甲基-2,3-二氢-1H-4-氧杂-1,6-二氮杂-萘-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
[1-仲丁基-7-甲基-2,3-二氢-1H-4-硫杂-1,6-二氮杂-萘-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
[1-仲丁基-7-甲基-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺；
1-仲丁基-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-硫杂-1,6-二氮杂-萘；
1-仲丁基-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[4,3-d]嘧啶；
1-仲丁基-3,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[4,3-d]嘧啶；
1-仲丁基-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]-二氮杂萘四氢-吡啶并[4,3-d]嘧啶；
1-仲丁基-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-硫杂-1,6-二氮杂-萘；
1-仲丁基-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[4,3-d]嘧啶；和
4-仲丁基-6-甲基-8-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-吡喃并[2,3-c]吡啶-2-酮。
除非另有说明，本文所指的烷基以及本文所指其他基团(例如烷氧基)的烷基部分可以是直链或支链的，它们也可以是环状的(例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基)或者是直链或支链的，并且含有环的部分。
本发明也涉及一种药物组合物，该组合物用于治疗、预防或抑制哺乳动物、包括人的(a)一种疾病，通过拮抗CRF能够起到治疗作用或促进该疾病的治疗，包括但不限于由CRF诱发或促进的疾病，或(b)一种疾病，选自炎症、例如类风湿性关节炎和骨关节炎，疼痛，哮喘，牛皮癣和变态反应；综合性焦虑症；恐慌症；恐怖症；强迫观念-强迫行为症；创伤后应激反应障碍；应激反应诱发的睡眠障碍；痛觉，例如纤维肌痛；情绪障碍，例如抑郁症，包括重度抑郁症、单发作性抑郁症、复发性抑郁症、儿童滥用药物诱发的抑郁症、与月经前综合征有关的情绪障碍和产后抑郁症；精神抑郁症；两极性精神障碍；躁郁循环性气质；慢性疲劳综合征；应激反应诱发的头痛；癌症；过敏性大肠综合征；克罗恩氏病；痉挛性结肠；术后肠梗阻；溃疡；腹泻；应激反应诱发的发烧；人免疫缺陷病毒(HIV)感染；神经变性疾病，例如早老性痴呆病、帕金森病和亨廷顿病；胃肠疾病；进食障碍，例如神经性厌食症和神经性贪食症；出血的应激反应；化学药品依赖和成瘾(例如对酒精、尼古丁、可卡因、海洛因、苯并二氮类或其他药物)；药物和酒精脱瘾症状；应激反应诱发的精神病发作；甲状腺机能正常病综合征；不适当的止泻激素(ADH)综合征；肥胖症；不育症；头外伤；脊髓损伤；局部缺血性神经元损伤(例如脑缺血，如脑海马缺血)；兴奋毒素性神经元损伤；癫痫；中风；免疫机能障碍，包括应激反应诱发的免疫机能障碍(例如猪应激反应综合征、牛航运热、马阵发性纤维颤动、和分娩诱发的小鸡机能不良、羊偏转应激反应或人-动物相互作用相关的犬应激反应)；肌肉痉挛；尿失禁；早老性痴呆；多梗塞性痴呆；肌萎缩性脊髓侧索硬化；高血压；心动过速；充血性心力衰竭；骨质疏松症；早产；和低血糖，该组合物含有式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐，其含量对该疾病的治疗是有效的，和药学上可接受的载体。
本发明也涉及一种方法，该方法用于治疗、预防或抑制哺乳动物、包括人的(a)一种疾病，通过拮抗CRF能够起到治疗作用或促进该疾病的治疗，包括但不限于由CRF诱发或促进的疾病，或(b)一种疾病，选自炎症、例如类风湿性关节炎和骨关节炎，疼痛，哮喘，牛皮癣和变态反应；综合性焦虑症；恐慌症；恐怖症；强迫观念-强迫行为症；创伤后应激反应障碍；应激反应诱发的睡眠障碍；痛觉，例如纤维肌痛；情绪障碍，例如抑郁症，包括重度抑郁症、单发作性抑郁症、复发性抑郁症、儿童滥用药物诱发的抑郁症、与月经前综合征有关的心境障碍和产后抑郁症；精神抑郁症；两极性精神障碍；躁郁循环性气质；慢性疲劳综合征；应激反应诱发的头痛；癌症；过敏性大肠综合征；克罗恩氏病；痉挛性结肠；术后肠梗阻；溃疡；腹泻；应激反应诱发的发烧；人免疫缺陷病毒(HIV)感染；神经变性疾病，例如早老性痴呆病、帕金森病和亨廷顿病；胃肠疾病；进食障碍，例如神经性厌食症和神经性贪食症；出血的应激反应；应激反应诱发的精神病发作；甲状腺机能正常病综合征；不适当的止泻激素(ADH)综合征；肥胖症；不育症；头外伤；脊髓损伤；局部缺血性神经元损伤(例如脑缺血，如脑海马缺血)；兴奋毒素性神经元损伤；癫痫；中风；免疫机能障碍，包括应激反应诱发的免疫机能障碍(例如猪应激反应综合征、牛航运热、马阵发性纤维颤动、和分娩诱发的小鸡机能不良、羊偏转应激反应或人-动物相互作用相关的犬应激反应)；肌肉痉挛；尿失禁；早老性痴呆；多梗塞性痴呆；肌萎缩性脊髓侧索硬化；化学药品依赖和成瘾(例如对酒精、尼古丁、可卡因、海洛因、苯并二氮类或其他药物)；药物和酒精脱瘾症状；高血压；心动过速；充血性心力衰竭；骨质疏松症；早产；和低血糖，该方法包含在患者需要所述治疗时给以式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐，其用量对该疾病的治疗是有效的。
本发明也涉及治疗或预防哺乳动物、包括人的一种疾病或状态的方法，通过抑制CRH结合蛋白能够起到治疗或预防作用或促进该作用，该方法包含对所述哺乳动物给以CRH结合蛋白抑制量的一种式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐。
本发明也涉及一种药物组合物，该组合物用于治疗或预防哺乳动物、包括人的一种疾病或状态，通过抑制CRH结合蛋白能够起到治疗或预防作用或促进该作用，该组合物含有CRH结合蛋白抑制量的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体。
本发明进一步包括下式中间体化合物和
其中T为氯、溴、碘或-OSO2CF3；若D为碳，则U为CN、-COO(C1-C4烷基)、氯、溴、碘、-OSO2CF3、羟基或氨基，若D为氮，则U为氢。
本发明包括式Ⅰ化合物的所有旋光异构体和其他立体异构体。若这些化合物含有一个或多个手性中心，不言而喻的是，本发明包括这些化合物的外消旋混合物以及所有对映异构体与非对映异构体个体，和它们的混合物。
本发明化合物包括等同于上述的化合物，但是实际上一个或多个氢、氮或碳原子被其同位素所置换(例如氚或碳-14同位素)。这些化合物可用作药物代谢动力学研究和结合试验中的研究与诊断工具。
发明的详细说明
下列具有式Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ结构的化合物可用作合成式Ⅰ化合物的中间体。Ⅱ Ⅲ和Ⅳ
在上述式Ⅱ至Ⅳ化合物中，M为氯、溴、碘、-OSO2CF3或ZR5；P为NH、CHCN或CHCOO(C1-C4烷基)；Q为氨基、-(C1-C2烷基)CH[COO(C1-C4烷基)]2、(C2-C3烷基)-CN、羟基或巯基，A、B、D、E、K和G定义同上。
本发明化合物和组合物的制备方法如下所述。在下面的讨论和反应流程中，除非另有说明，R1至R14、R12、A、B、D、E、K、G、Z、T、M、P、Q和U、虚线和结构式Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ定义同上。
流程1
流程2
使式Ⅱ化合物与相应的式R5ZH化合物反应，藉此可制得式Ⅰ化合物。该反应一般是在一种碱的存在下进行，有无一种溶剂均可。反应温度为约0℃至约270℃，反应压力为约14psi至约300psi。适用的溶剂包括有机溶剂，例如四氢呋喃(THF)、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、丙酮、C2-C15醇、氯仿、二噁烷、氯苯、苯、甲苯、二甲苯、四氢噻吩砜、吡啶、喹啉、2,4,6-三甲基吡啶、乙酰胺、二-(C1-C2)烷基乙酰胺和1-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)。
若Z为NH，可以使用过量的R5ZH，既可作为试剂，也可作为碱。可以使用的除R5ZH以外的其他碱的实例包括碳酸钾、氢化钠、氢化钾、(C1-C4)醇钠、(C1-C4)醇钾、钠、氨基钠、三-[(C1-C6)烷基]胺、有机锂化合物或有机钠化合物，例如正丁基锂、仲丁基锂、叔丁基锂、二异丙氨基锂、双(三甲硅烷基)氨基锂、二异丙氨基钠或双(三甲硅烷基)氨基钠，和有机金属碱，例如格利雅试剂。该反应一般是在一种适当的溶剂中进行的(例如THF、二噁烷、四氢噻吩砜、DMSO、甲苯、DMF或NMP)，有无一种附加的催化剂均可，例如铜的卤化物、氧化物或硫酸盐(例如CuI、CuBr、Cu2O、CuCl、CuSO4、CuI2、CuBr2、CuCl2或Cu(O))，一种Pd(0)盐、例如Pd(PPH3)4，一种Pd(Ⅱ)盐、例如Pd(OAc)2(其中OAc为乙酸根)，反应使用外消旋的或(R)-或(S)-2,2-双(二苯膦基)-1,1-二萘基(BINAP)，反应温度为约室温至约270℃。
若Z为氧或硫，可以使用一种能够去除R5ZH质子的碱，例如碳酸钾、碳酸钠、钠、氨基钠、一种碱金属氢化物，例如氢化钠或氢化钾，(C1-C4)醇钠、(C1-C4)醇钾、氨基钠、三-[(C1-C6)烷基]胺或一种有机金属碱，例如正丁基锂、仲丁基锂、叔丁基锂、二异丙氨基锂、双(三甲硅烷基)氨基锂、二异丙氨基钠或双(三甲硅烷基)氨基钠。反应温度可以在约0℃至约180℃的范围内，优选为约50℃至约140℃。适用的溶剂包括DMSO、THF、四氢噻吩砜、二噁烷和NMP。
若Z为CHCN或CHCOO(C1-C4烷基)，可以使用一种能够去除R5ZH质子的碱，例如一种碱金属氢化物(例如氢化钠或氢化钾)、(C1-C4)醇钠或一种有机金属碱，例如正丁基锂、仲丁基锂、叔丁基锂、二异丙氨基锂、双(三甲硅烷基)氨基锂、二异丙氨基钠或双(三甲硅烷基)氨基钠，反应在一种适当的溶剂中，例如THF、DMSO、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、甲苯、二甲苯、苯或一种C1-C6链烷醇。
使其中Z为CHCN0的相应化合物先与一种碱反应，碱例如氢化钠或氢化钾等一种碱金属氢化物、正丁基锂、仲丁基锂、叔丁基锂、二异丙氨基锂、双(三甲硅烷基)氨基锂或二异丙氨基钠，然后与一种式R13L化合物反应，其中L为一种离去基团，例如碘、氯、溴、甲磺酸盐(OMs)或甲苯磺酸盐(OTs)，藉此可制得Z为CR13CN的式Ⅰ化合物。
使其中Z为CR13CN的相应化合物进行酸水解反应(例如85％磷酸)，然后在约120℃至约180℃油浴加热下进行脱羧反应，藉此可制得其中Z为CHR13的式Ⅰ化合物。进一步在碱和一种式R14L化合物的存在下进行烷基化反应，其中L定义同上，将得到其中Z为CR13R14的相应式Ⅰ化合物。
使其中Z为NH的相应化合物先与一种碱反应，然后与一种式(C1-C4烷基)-L化合物反应，其中L定义同上，藉此可制得Z为N(C1-C4烷基)的式Ⅰ化合物。可以使用的碱例如二异丙氨基锂、双(三甲硅烷基)氨基锂、二异丙氨基钠。适用的溶剂包括THF、二氯甲烷(CH2Cl2)、DMSO、DMP、NMP和二噁烷。反应温度可以在约20℃至约150℃的范围内，优选为约室温至约100℃。
在一种碱的存在下，使其中U为氯、溴或碘的相应式Ⅲ化合物与一种式BH化合物反应，藉此可制得其中D为碳、B为-NR1R2、-OCHR1R2或-SCHR1R2的式Ⅰ化合物，所用方法类似于上述式Ⅱ化合物转化为式Ⅰ化合物的方法。
使其中U为氰基的相应式Ⅲ化合物与一种含有所需R2基团的格利雅试剂反应，生成其中B为COR2的式Ⅰ化合物，藉此可制得其中D为碳、B为-CR1R2R10、-C(=CR2R11)R1、-CR2R10NHR1、-CR2R10OR1、-CR2R10SR1或-COR2的式Ⅰ化合物。进一步使该化合物与一种含有所需R1基团的格利雅试剂反应，将得到其中B为-CR1R2(OH)的式Ⅰ化合物。
使用本领域技术人员熟知的常规方法，可制得其中B为-CR1R2R11或-C(C=CR2R11)R1的式Ⅰ化合物。例如，其中B为-C(OH)R1R2的式Ⅰ化合物与一种酸、如乙酸中的浓硫酸，或一种Burgess惰性盐(如(羧基氨磺酰)三乙铵氢氧化物甲酯)反应，将得到其中B为-C(=CR2R11)R1的式Ⅰ化合物。使用本领域熟知的标准方法，用Pd/C(碳上的钯)或氧化铂催化剂氢化其中B为-C(=CR2R11)R1的式Ⅰ化合物，将得到其中B为-CHR1R2的式Ⅰ化合物。其中B为-CR1R2(OH)的式Ⅰ化合物与二乙氨基三氟化硫或三苯膦/四氯化碳反应，将分别得到其中B为-CR1R2F或-CR1R2Cl的式Ⅰ化合物。
在一种反应惰性溶剂中，例如(C1-C4醇)、THF或二噁烷，优选为甲醇，在约室温至约100℃的温度下，优选为约室温至约60℃，其中B为-COR2的式Ⅰ化合物与硼氢化钠反应，将得到其中B为-CHR2OH的式Ⅰ化合物。在一种碱(例如氢化钠、氢化钾或双(三甲硅烷基)氨基钠或锂)的存在下，在约室温下，用一种烷基卤(例如一种烷基碘)烷基化-CHR2OH基团，将得到其中B为-CHR2OR1的相应式Ⅰ化合物。在一种适当的溶剂(例如一种低级链烷醇或乙酸)中，借助本领域熟知的常规方法，例如用一种适当的胺和还原剂(例如氰基硼氢化钠或三乙酰氧基硼氢化钠)还原性胺化其中B为-COR2的相应式Ⅰ化合物，也可制得其中B为-CR2R10NHR1的式Ⅰ化合物。
在二甲基亚砜、THF、二氯甲烷、甲苯或DMF中，在约室温至约180℃的温度下，优选在约回流温度下，有无一种Pd(0)或Pd(Ⅱ)催化剂均可，使其中U为氯、溴、碘或-OCOCF3的相应式Ⅲ化合物与氰化钾或氰化铜反应，藉此可制得其中U为CN的式Ⅲ化合物。
其中U为氯、溴、碘或-OCOCF3的式Ⅲ化合物可从其中U为羟基或氨基的相应式Ⅲ化合物制得。在一种适当的溶剂中，例如乙腈、丙酮、甲苯、二氯甲烷或二氯乙烷，在约室温至约回流温度下，使其中U为氨基的式Ⅲ化合物与一种式(C1-C5烷基)-O-N=O和一种卤化铜(Ⅱ)反应，藉此可制得其中U为卤素或-OCOCF3的式Ⅲ化合物。该反应优选在乙腈中、在回流温度下进行。
使其中U为羟基的相应式Ⅲ化合物与一种式POX3化合物反应，其中X为氯或溴，其中有或无二-(C1-C4烷基)苯胺均可，藉此可制得其中U为氯或溴的式Ⅲ化合物。该反应可以纯净地进行，或者在一种溶剂中进行，例如二甲基甲酰胺、二氯乙烷或二氯甲烷，反应温度为约100℃至约180℃。在一种碱的存在下，例如三-(C1-C4烷基)胺或吡啶或一种适当的吡啶衍生物(例如二甲氨基吡啶)，在一种适当的溶剂中，例如二氯甲烷、DMF、DMSO、氯仿或THF，使其中U为OH的相应式Ⅲ化合物与Tf2O反应，藉此可制得其中U为-OTf(其中Tf为三氟甲磺酸)的式Ⅲ化合物。在一种适当的溶剂中，例如DMF、二甲基乙酰胺、N-甲基-吡咯烷酮(NMP)或DMSO，在约室温与约180℃之间的温度下，其中U为OTf的式Ⅲ化合物与一种式KX、NaX或CuX(其中X为氯、溴或碘)化合物反应，将得到其中U为氯、溴或碘的式Ⅲ化合物。
可选在一种有机或无机碱的存在下，使其中R3为氯、溴、OTs或碘的相应式Ⅰ化合物与一种式R20H亲核试剂反应，其中R20H是一种(C1-C6)链烷醇或(C1-C6)烷硫醇，藉此可制得式Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ化合物，其中Z和R5定义同上式Ⅰ，R3为-O-(C1-C4)烷基或-S-(C1-C4)烷基(即R20)。适用的碱包括钠、氢化钠、氢化钾、二异丙氨基锂、双(三甲硅烷基)氨基锂和二异丙氨基钠。
使用本领域技术人员熟知的标准方法，使其中R3为氯、溴、碘、-OCOCF3或-OSO2CF3的相应化合物与氟化四丁铵、氟化钾或其他适用的氟化剂反应，藉此可制得其中R3为氟的式Ⅰ化合物。
正如流程1所示，其中G为O、S或NR8的式Ⅰ化合物可从式Ⅳ-a化合物制得。参照流程1，在一种碱的存在下，例如三-(C1-C4烷基)胺、吡啶或一种取代的吡啶，在一种适当的溶剂中，例如二氯甲烷、氯仿、THF、DMSO、二噁烷、乙醚、二甲氧基乙烷，在约0℃至约180℃的温度下，优选为约室温至约60℃，使适当的式Ⅳ-a化合物与一种酰基卤、如L-(CH2)n-COX(其中X为氯、溴、碘、甲磺酸盐、甲苯磺酸盐、三氟甲磺酸盐或OCOCF3；L为氯、溴、碘、羟基、甲磺酸盐、甲苯磺酸盐、三氟甲磺酸盐或OCOCF3)，或一种酸酐(例如[(C1-C4烷基)CO]2O)反应，式Ⅳ-a中B为-CR1R2R10、-C(=CR2R11)R1、-CR1R10OR1、-CR2R10SR1或-COR2，Y为O、S、NR8，A为CR7或N，藉此可制得式Ⅳ-b化合物。
使相应的式Ⅳ-b化合物与一种碱反应，藉此可制得式Ⅰ-a化合物。适用于该反应的碱包括钠、氢化钠、氢化钾、二异丙氨基锂、丁基锂、双(三甲硅烷基)氨基锂、二异丙氨基钠或碳酸钾钠或钾。在一种适当的溶剂中，例如乙醚、THF、二氯甲烷、二噁烷、苯、甲苯或二甲氧基乙烷(DME)，有无六甲基磷酰胺(HMPA)均可，在约-78℃至约室温的温度下，用一种碱烷基化所得式Ⅰ-a化合物，然后用烷基卤淬火，将得到相应的式Ⅰ-c化合物。适用于该反应的碱包括二异丙氨基锂、双(三甲硅烷基)氨基锂、二异丙氨基钠和丁基锂。用一种还原剂，例如硼烷甲硫醚配合物(BH3·DMS)、硼烷(BH3)、硼烷THF配合物(BH3·THF)、氢化二异丁基铝或氢化锂铝，还原式Ⅰ-a或Ⅰ-c化合物，将分别得到相应的式Ⅰ-b或Ⅰ-d化合物。
正如流程2所示，其中G为碳的式Ⅰ化合物可从式Ⅳ-c化合物制得。参照流程2，使用文献中熟知的形成酰胺的标准方法，环化式Ⅳ-c化合物，其中Q为(C1-C2烷基)CR4(COOC1-C4烷基)2、(C1-C2烷基)CR4(COOC1-C4烷基)、(C1-C2烷基)CR4(CN)2、(C1-C2烷基)CR4(CN)或(C1-C2烷基)CR4COOH，藉此可制得式Ⅰ-e化合物。这些方法包括酸环化反应(例如：(a)在约100℃至约150℃下，在40-85％磷酸中加热；(b)在含水乙酸/盐酸中加热；或(c)碱水解；然后脱羧，再酰胺环化)。使用类似于以上式Ⅰ-a化合物转化为式Ⅰ-b化合物所述的方法，还原相应的式Ⅰ-e化合物，藉此可得到式Ⅰ-f化合物。
在约0℃至约150℃的温度下，优选为约10℃至约60℃，在一种适当的溶剂中，例如THF、DMSO、DMF、一种(C1-C5烷基)醇、乙腈、丙酮、甲苯、NMP或二甲基乙酰胺，式Na-、K-或Li-CR4(COOC1-C4烷基)2或Na-、K-或Li-CR4(CN)2化合物与其中Q为CHR8X或CHR8CHR4X(其中X为氯、溴或碘)的式Ⅳ-c化合物反应，可制得其中Q为(C1-C2烷基)CR4(COOC1-C4烷基)2或(C1-C2烷基)CR4(CN)2的式Ⅳ-c化合物。优选的溶剂为DMSO。借助类似于国际专利申请WO 95/33750所述的方法可制得其他式Ⅳ化合物，该申请指定美国，于1995年5月18日公开。该申请全文结合在此作为参考。
在一种适当的溶剂中，例如苯、甲苯、二甲苯、一种C1-C5烷基醇或乙腈，在酸催化剂的存在下，例如p-TsOH、H2SO4或HCl，在约室温至约160℃的温度下，优选在回流温度下，使其中O为CHR8OH的式Ⅳ-c化合物与含水甲醛或R6CHO反应，藉此可制得式Ⅰ化合物，其中E为CR6，G为CR8，D为氮，K为氧。甲苯或苯是优选的溶剂。
借助类似于国际专利申请WO 95/33750所述的方法可制得式Ⅳ-c化合物，该申请指定美国，于1995年5月18日公开。
用一化学当量的药学上可接受的酸处理相应的游离碱的溶液或悬液，藉此可以以常规方式制得式Ⅰ化合物的酸加成盐。可以使用常规的浓缩或结晶工艺来进行盐的分离。适用的酸例如乙酸、乳酸、琥珀酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、葡萄糖酸、抗坏血酸、苯甲酸、肉桂酸、富马酸、硫酸、磷酸、氢氯酸、氢溴酸、氢碘酸、氨基磺酸、磺酸和有关的酸，磺酸例如甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸。
式Ⅰ化合物及其药学上可接受的盐(以下总称为“本发明的活性化合物”)可以分单剂量或多剂量单独给药，或与药学上可接受的载体结合给药。适用的药物载体包括惰性固体稀释剂或填充剂、无菌水溶液和各种有机溶剂。结合新颖的式Ⅰ化合物与药学上可接受的载体而形成的药物组合物易以各种剂型给药，例如片剂、粉剂、锭剂、糖浆剂、可注射溶液等等。如果需要的话，这些药物组合物可含有附加成分，例如矫味剂、粘合剂、赋型剂等等。因此为了口服给药，可以使用片剂，片剂中含有各种赋型剂，例如柠檬酸钠、碳酸钙和磷酸钙，和各种崩解剂，例如淀粉、甲基纤维素、藻酸和某些复合硅酸盐，以及粘合剂，例如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明胶和阿拉伯胶。另外，润滑剂经常也用于片剂制备，例如硬脂酸镁、月桂基硫酸钠和滑石。相似类型的固体组合物也可用作软胶囊和硬胶囊的填充剂。该组合物优选的物料包括乳糖或奶糖和高分子聚乙烯醇。若口服给药需要水悬液或酏剂，必要的有效成分可以结合各种甜味剂或矫味剂、色素或染料，如果需要的话，还有乳化剂或悬浮剂，以及稀释剂，例如水、乙醇、丙二醇、甘油及其组合。
对胃肠外给药来说，可以使用本发明的活性化合物或其药学上可接受的盐在芝麻油或花生油、含水丙二醇中的溶液或无菌水溶液。如果必要的话，应对该水溶液进行适当缓冲，先用足量盐水或葡萄糖赋予液体稀释剂等渗性。这些特定的水溶液尤其适用于静脉内、肌内、皮下和腹膜内给药。所用无菌含水介质借助本领域技术人员已知的标准技术，均是易于得到的。
本发明的活性化合物的有效剂量将取决于所要使用的给药途径和一般为医师所知的因素，例如患者的年龄和体重。剂量也取决于所治疗的具体疾病。例如，用于应激反应诱发的疾病、炎症、早老性痴呆病、胃肠疾病、神经性厌食症、出血的应激反应和药物与酒精脱瘾症状的每日剂量一般将为约0.1至约50mg/kg所治疗患者体重。
《内分泌学》116,1653-1659(1985)和《肽》10,179-188(1985)中描述了可用于测定本发明的活性化合物及其药学上可接受的盐的CRF拮抗剂活性的方法。式Ⅰ化合物的结合活性,以IC50值表示，一般为约0.5纳摩尔至约10毫摩尔。《脑研究》(1997),745(1,2),248-255中描述了可用于测定式Ⅰ化合物的CRF结合蛋白抑制活性的方法。
下列实施例举例说明本发明。不过不言而喻的是，本发明不限于这些实施例的具体描述。熔点是未校正的。在氘代氯仿(CDCl3)溶液中测量了质子核磁共振谱(1H NMR)和C13核磁共振谱(C13NMR)，峰位以相对于四甲基硅烷(TMS)低磁场的百万比率(ppm)表示。峰形表示如下：s，单峰；d，双峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；b，宽峰。
实施例中使用下列缩写：Ph=苯基；iPr=异丙基；HRMS=高分辨质谱。
例1
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-吡啶并[3,4-b]吡嗪-3-酮
在-78℃下，向2-氯-N-[4-(1-乙基-丙氨基)-6-甲基-2-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-吡啶-3-基]-乙酰胺(170mg,0.42mml)的2ml无水THF溶液中加入1M双(三甲硅烷基)氨基锂的THF(0.84ml,0.84mmol)溶液。使混合物逐渐升温至室温，在室温下搅拌2小时。在-78℃下另加入0.42ml的1M双(三甲硅烷基)氨基锂的THF溶液，所得混合物在室温下搅拌过夜。混合物用水淬火，用乙酸乙酯萃取。有机层干燥并浓缩至干，得到160mg黄色固体。该固体残余物通过硅胶柱色谱法精制，用15％乙酸乙酯(EtOAc)己烷溶液作为洗脱液，得到91mg(59％)目标化合物，为白色晶体。1H NMR(CDCl3)δ7.84(s,1H),6.88(s,2H),6.22(s,1H),3.82(s,2H),3.58(m,1H),2.30(s,3H),2.18(s,3H),2.08(s,6H),1.63(m,4H),0.95(m,6H)ppm.
例2
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-吡啶并[3,4-b]吡嗪-3-酮
在-78℃下，向1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-吡啶并[3,4-b]吡嗪-3-酮(50mg,0.136mmol)的2ml无水THF溶液中加入1M双(三甲硅烷基)氨基锂的THF(0.14ml)溶液，混合物在该温度下搅拌20分钟。在-78℃下加入过量的甲基碘，所得混合物在该温度下搅拌20分钟，然后逐渐升温至室温，另外搅拌2小时。混合物用水淬火，用乙酸乙酯萃取。有机层干燥并浓缩，得到61mg淡黄色固体。该固体通过硅胶柱色谱法精制，用10％乙酸乙酯己烷溶液作为洗脱液，得到28mg目标化合物，为白色晶体，mp112-114℃；1H NMR(CDCl3)δ6.89(s,2H),6.29(s,1H),3.63(s,2H),3.59(s,3H),3.48(m,1H),2.31(s,3H),2.18(s,3H),2.10(s,6H),1.60(m,4H),0.94(t,6H)ppm.
例3
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪
将1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-吡啶并[3,4-b]吡嗪-3-酮(21mg,0.055mmol)与2M硼烷二甲基硫醚配合物(BH3·DMS)(0.07ml,0.14mmol)在2ml无水THF中的混合物加热回流3小时。混合物冷却至0℃，用0.2ml甲醇和0.2ml浓盐酸(HCl)淬火。所得混合物在室温下搅拌2小时，浓缩至干。残余物用水淬火，用氯仿萃取。有机层干燥并浓缩，得到19mg澄清油状物，通过硅胶柱色谱法精制，用10％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液，得到11mg目标化合物，为白色晶体，mp78-80℃；1H NMR(CDCl3)δ6.85(s,2H),6.28(s,1H),3.73(m,1H),3.12(m,4H),2.85(s,3H),2.29(s,3H),2.13(s,3H),2.11(s,6H),1.61(m,4H),0.90(t,6H) ppm.
例4
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-吡啶并[3,4-b]吡嗪
从1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-吡啶并[3,4-b]吡嗪-3-酮开始，通过类似于例3的方法，制得目标化合物，为褐色晶体，mp138-140℃,1H NMR(CDCl3)δ6.87(s,2H),6.17(s,1H),3.62(m,1H),3.39(m,2H),3.32(m,2H),229(s,3H),2.13(s,3H),2.11(s,6H),1.59(m,4H),0.91(t,6H)ppm.
例5
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-2-氧-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘-3-羧酸甲酯
将2-[4-(1-乙基-丙氨基)-6-甲基-2-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-吡啶-3-基甲基]-丙二酸二甲酯(22mg,0.048mmol)与2ml乙酸与HCl(g)气泡的混合物在130℃下加热30小时。反应混合物冷却并浓缩至干。残余物用水淬火，用乙酸乙酯萃取。有机层干燥并浓缩，得到7mg目标化合物。1H NMR(CDCl3)δ6.89(s,2H),6.59(s,1H),4.4(m,1H),3.72(s,3H),3.6-3.8(m,1H),3.4-3.6(m,1H),3.l-3.2(dd,1H),2.31(s,3H),2.28(s,3H),2.06(s,6H),1.8-22(m,4H),0.92(t,6H)ppm.
例6
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-2-氧-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘-3-羧酸异丙酯
从2-[4-(1-乙基-丙氨基)-6-甲基-2-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-吡啶-3-基甲基]-丙二酸二异丙酯开始，通过类似于例5的方法，制得目标化合物，1H NMR(CDCl3)δ6.88(s,2H),6.57(s,1H),5.00(m,1H),3.4-3.6(m,2H),3.15(dd,1H),2.30(s,3H),2.24(s,3H),2.05(s,6H),2.0-2.3(m,3H),1.75-1.95(m,2H),1.22(d,3H),1.14(d,3H),0.93(t,6H)ppm.
例7
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-3,4-二氢-1H-[1,6]二氮杂萘-2-酮
将2-[4-(1-乙基-丙氨基)-6-甲基-2-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-吡啶-3-基甲基]-丙二酸二异丙酯(40mg,0.078mmol)与85％磷酸的混合物在73℃下加热过夜，然后在133℃下加热1小时。反应混合物冷却，用水淬火，用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到一棕色油状物。该油状残余物通过硅胶柱色谱法精制，用3％乙酸乙酯己烷溶液作为洗脱液，得到28mg(98％)目标化合物。1HNMR(CDCl3)δ6.89(s,2H),6.56(s,1H),4.4(m,1H),3.00(m,2H),2.67(m,2H),2.31(s,3H),2.25(s,3H),2.07(s,6H),1.86(m,4H),0.90(t,6H)ppm.
例8
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,2,3,4-四氢-[1,6]二氮杂萘
从1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-3,4-二氢-1H-[1,6]二氮杂萘-2-酮开始，通过类似于例3的方法，制得目标化合物，为白色固体。1H NMR(CDCl3)δ6.83(s,2H),6.14(s,1H),3.63(m,1H),3.08(m,2H),2.75(m,2H),2.26(s,3H),2.10(s,3H),2.07(s,6H),1.90(m,2H),1.54(m,4H),0.87(t,6H)ppm.
例9
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘
将[1-(1-乙基-丙氨基)-6-甲基-2-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-吡啶-3-基]-甲醇(42mg,0.122mmol)与37％甲醛(0.05ml)与对甲苯磺酸(p-TsOH)(35mg)在3.5ml甲苯中的混合物在迪安-斯达克装置中加热回流15小时。混合物用水、饱和碳酸氢钠淬火，用乙酸乙酯萃取。有机层干燥并浓缩，得到52mg粗产物，为浅绿色固体。粗物料通过硅胶柱色谱法精制，用1∶1己烷/CHCl3作为洗脱液，得到34mg(86％)目标化合物，为白色晶体，mp 112-114℃。1HNMR(CDCl3)δ6.86(s,2H),6.25(s,1H),4.92(s,2H),4.68(s,2H),3.54(m,1H), 2.29(s,3H),2.17(s,3H),2.07(s,6H),1.5-1.7(m,4H),0.95(t,6H)ppm.
例10
1-(1-乙基-丙基)-4,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-1,4-二氢-2H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘
从1-[4-(1-乙基-丙氨基)-6-甲基-2-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-吡啶-3-基]-乙醇开始，通过类似于例9所述的方法，制得目标化合物，为一白色固体。1H NMR(CDCl3)δ6.87(s,2H),6.26(s,1H),5.16(q,1H),4.7(Abq,2H),3.63(m,1H),2.29(s,3H),2.15(s,3H),2.08(s,6H),1.65(d,3H),1.5-1.8(m,4H),0.96(m,6H)ppm.
例11
1-(1-乙基-丙基)-3,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-3,4-二氢-1H-3-氧杂-[1,6]-二氮杂萘-2-酮
将2-[4-(1-乙基-丙氨基)-6-甲基-2-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-吡啶-3-基甲基]-2-甲基-丙二酸二甲酯(130mg)与85％磷酸(4ml)与水(4ml)的混合物加热回流16小时。混合物用水淬火，用乙酸乙酯萃取。有机层用水和饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，干燥并浓缩，得到80mg澄清油状物。该油状物通过硅胶柱色谱法精制，用己烷至10％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液，得到67mg(64％)目标化合物，为一白色固体。1H NMR(CDCl3)δ6.87(s,2H),6.53(s,1H),4.3(m,1H),3.14(m,1H),2.69(m,2H),2.29(s,3H),2.22(s,3H),2.05(s,6H),1.83(m,4H),1.25(d,3H),0.86(t,6H)ppm.
例12
1-(1-乙基-丙基)-3,3,6-三甲基-4-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
将1-(1-乙基-丙基)-3,7-二甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-3,4-二氢-1H-3-氧杂-[1,6]-二氮杂萘-2-酮(56mg)的4ml无水THF溶液用2.0M硼烷二甲基硫醚配合物的THF(0.3ml)溶液处理，加热回流1小时。混合物用水淬火，用乙酸乙酯萃取。有机层干燥并浓缩，得到50mg目标化合物，为无色油状物。该油状物通过硅胶柱色谱法精制，用10％乙酸乙酯己烷溶液作为洗脱液，得到22mg目标化合物，为白色固体，1H NMR(CDCl3)d 6.83(s,2H),6.15(s,1H),3.65(m,1H),3.12(m,1H),2.98(m,1H),2.62(m,1H),2.26(s,3H),2.23(m,1H),2.12(s,3H),2.06(s,6H),1.95(m,1H),1.57(m,4H),1.07(d,3H),0.87(t,6H)ppm.
例13
[1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-1,4-二氢-2H-3-氧杂-1,6-二氮杂-萘-5-基]-(2,4,6-三甲基-苯基)-胺
将[4-(1-乙基-丙氨基)-6-甲基-2-(2,4,6-三甲基-苯氨基)-吡啶-3-基]-甲醇(280mg,0.82mmol)、37％甲醛(0.35ml)与p-TsOH(78mg,0.41mmol)在10ml甲苯中的混合物用迪安-斯达克(Dean-Stark)设备加热回流3小时。混合物用水淬火，用乙酸乙酯萃取。分离有机层，干燥并浓缩，得到280mg绿色油状物。该油状物通过硅胶柱色谱法精制，用EtOAc作为洗脱液，得到目标化合物，为一棕色油状物。1H NMR(CDCl3)δ6.89(s,2H),6.09(s,1H),4.51(s,2H),4.19(s,2H),3.53(m,1H),2.25(s,6H),2.15(s,6H),1.55(m,4H),0.90(t,6H)ppm.
例14
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氨基)-3,4-二氢-1H-[1,6]-二氮杂萘-2-酮
将2-[4-(1-乙基-丙氨基)-6-甲基-2-(2,4,6-三甲基-苯氨基)-吡啶-3-基甲基]-丙二酸二甲酯(100mg,0.219mmol)、85％磷酸(3ml)与水(3ml)的混合物加热回流2小时。反应混合物冷却至室温，用水稀释，用稀NaOH中和至pH6，用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，经无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩至干，得到61mg黄色泡沫。该油状物通过硅胶柱色谱法精制，用10％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液，得到41mg目标化合物，为一褐色固体，mp44-46℃.1H NMR(CDCl3)δ6.87(s,2H),6.36(s,1H),5.64(brs,1H),4.21(m,1H),2.51(m,2H),2.37(m,2H),2.29(s,3H),2.27(s,3H),2.11(s,6H),2.02(m,2H),1.76(m,2H),0.86(t,6H)ppm.
例15
1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-5-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-3,4-二氢-1H-吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-酮
在0℃下，向[3-氨基甲基-6-甲基-2-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-吡啶-4-基]-(1-乙基-丙基)-胺(100mg,0.292mmol)在无水THF中的混合物中加入三光气(34mg,0.114mmol)。使反应混合物逐渐升温至室温，搅拌2小时。混合物用水淬火，用乙酸乙酯萃取。有机层干燥并浓缩至干，得到130mg澄清油状物。该固体通过硅胶柱色谱法精制，用10％EtOAc的己烷溶液作为洗脱液，得到89mg(82.4％)目标化合物，为一白色晶状固体，mp 197-199℃.1H NMR(CDCl3)d 6.86(s,2H),6.44(s,1H),5.14(brs,1H),4.49(s,2H),4.20(m,1H),2.28(s,3H),2.22(s,3H),2.04(s,6H),1.67(m,4H),0.94(t,6H)ppm.
制备A
2-氯-N-[4-(1-乙基-丙氨基)-6-甲基-2-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-吡啶-3-基]-乙酰胺
在0℃下，将2-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-N-4-(1-乙基-丙基)-6-甲基-吡啶-3,4-二胺(250mg,0.76mmol)与三乙胺(0.11ml,0.76mmol)在5ml无水THF中的混合物用氯乙酰氯(0.06ml,0.76mmol)处理。所得混合物在室温下搅拌1小时。混合物用水淬火，用乙酸乙酯萃取。有机层干燥并浓缩，得到310mg绿色晶体，通过硅胶柱色谱法精制，用10％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液，得到280mg(90％)目标化合物，为褐色晶体，mp152-154℃.1H NMR(CDCl3)δ8.07(s,1H),6.88(s,2H),6.16(s,1H),4.75(brs,1H),4.25(s,2H),3.33(m,1H),2.30(s,3H),2.18(s,3H),2.08(s,6H),1.4-1.8(m,4H),0.97(t,6H)ppm.
制备B
2-[4-(1-乙基-丙氨基)-6-甲基-2-(2，4，6-三甲基-苯氧基)-吡啶-3-基甲基]-2-甲基-丙二酸二甲酯
将二甲基丙二酸甲酯(260mg)与60％油(70mg)中的氢化钠在4mlDMSO中的混合物在室温下搅拌10分钟。加入[3-氯甲基-6-甲基-2-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-吡啶-4-基]-(1-乙基-丙基)-胺(200mg)的2mlDMSO溶液。混合物在室温下搅拌3小时。混合物用水淬火，用乙酸乙酯萃取。有机层干燥并浓缩，得到粗物料，通过硅胶精制，用己烷至10％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱液，得到137mg2-[4-(1-乙基-丙氨基)-6-甲基-2-(2,4,6-三甲基-苯氧基)-吡啶-3-基]甲基]-2-甲基-丙二酸二甲酯，为一白色固体。1H NMR(CDCl3)δ6.83(s,2H),6.01(s,1H),5,00(m,1H),3.70(s,6H),3.40(s,2H),3.25(m,1H),2.27(s,3H),2.12(s,3H),2.05(s,6H),1.5-1.7(m,4H),1.48(s,3H),0.94(t,6H)ppm.