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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201410853326.9(22)申请日 2014.12.31C12P 35/06(2006.01)C12P 35/02(2006.01)(71)申请人 华北制药河北华民药业有限责任公司地址 052165 河北省石家庄市经济技术开发区海南路 98 号(72)发明人 侯红杰 韦卫军 王梦谭 程俊山王刚 胡斌 李建强 于佩恩(74)专利代理机构 石家庄众志华清知识产权事务所(特殊普通合伙) 13123代理人 张明月(54) 发明名称3- 去乙酰基 -7- 氨基头孢烯酸的制备方法(57) 摘要本发明公开了一种药品中间体3-去乙酰基 -7- 氨。
2、基头孢烯酸的制备方法，属于医药技术领域。本发明方法采用两酶两步法，将头孢菌素C 钠盐料液经浓缩调酸，然后依次经过固定化 CPC酰化酶催化裂解、固定化去乙酰基酯酶催化裂解，最后经调酸析晶得到 D-7-ACA。本发明方法制备过程操作简单，D-7-ACA 产品的纯度高、反应收率高，而且两种酶可以重复利用，固定化 CPC 酰化酶的使用寿命高达600700批次，固定化去乙酰基酯酶的使用寿命高达 800 1000 批次，大大降低了生产成本，对工业化放大生产意义重大。(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书6页(10)申请公布号 CN 104480。
3、181 A(43)申请公布日 2015.04.01CN 104480181 A1/1 页21.一种 3- 去乙酰基 -7- 氨基头孢烯酸的制备方法，其特征在于包含以下步骤 ：A、将原料头孢菌素 C 钠盐料液浓缩至 20000 40000ug/ml，用氨水调 pH 至 6.5 7.0，得原料液 ；然后将原料液加入到装有固定化 CPC 酰化酶的 1# 裂解罐中，开启搅拌，在10 25下用氨水调节裂解液的 pH 为 6.0 9.0，反应结束 ；所述固定化 CPC 酰化酶的单位酶活力不低于 100u/g，1# 裂解罐中所盛装的固定化 CPC酰化酶的酶活总单位不小于 10000u/l ；B、将步骤 A 。
4、所得裂解液加入到装有固定化去乙酰基酯酶的 2# 裂解罐中，开启搅拌，在10 25下用氨水调节裂解液 pH 至 5.5 8.0，反应结束，得最终裂解液 ；所述固定化去乙酰基酯酶的单位酶活力不低于 400u/g，2# 裂解罐中所盛装的固定化去乙酰基酯酶的酶活总单位不小于 8000u/l ；C、将步骤B所得最终裂解液转移至结晶罐中，降温至010，滴加盐酸溶液调节体系 pH 至 4.5 6.0，控温养晶后过滤，洗涤后进行真空干燥，即得 D-7-ACA。2.根据权利要求 1 所述的一种 3- 去乙酰基 -7- 氨基头孢烯酸的制备方法，其特征在于 ：所述步骤 A 中，原料头孢菌素 C 钠盐浓缩液的浓度为 。
5、30000 35000ug/ml ；裂解反应温度为 13 18，裂解反应的终点 pH 为 8.30 8.50 ；用于调节头孢菌素 C 钠盐浓缩液 pH和裂解液 pH 的氨水浓度均为 3mol/L。3.根据权利要求 1 所述的一种 3- 去乙酰基 -7- 氨基头孢烯酸的制备方法，其特征在于 ：所述步骤B中，裂解反应温度为1318，裂解反应的终点pH为7.407.80 ；用于调节裂解液 pH 的氨水浓度为 6mol/L。4.根据权利要求 1 所述的一种 3- 去乙酰基 -7- 氨基头孢烯酸的制备方法，其特征在于 ：所述步骤C中，将步骤B所得最终裂解液转移至结晶罐中，降温至010，滴加质量分数为52。
6、0的盐酸溶液，直至有少量晶体出现 ；停止滴加，控温010养晶3060分钟 ；然后二次滴加盐酸溶液，至体系pH为4.05.0，降温至4以下，养晶3060分钟 ；过滤，洗涤滤饼后真空干燥，即得 D-7-ACA。5.根据权利要求 4 所述的一种 3- 去乙酰基 -7- 氨基头孢烯酸的制备方法，其特征在于 ：所述步骤C中，将步骤B所得最终裂解液转移至结晶罐中，降温至510，滴加质量分数为 10的盐酸溶液，直至有少量晶体出现 ；停止滴加，控温 5 10养晶 30 60 分钟 ；然后二次滴加10盐酸溶液，至体系pH为4.854.95 ；降温至4以下，养晶3060分钟 ；过滤，洗涤滤饼后真空干燥，即得 D-。
7、7-ACA。6.根据权利要求4或5任一项所述的一种3-去乙酰基-7-氨基头孢烯酸的制备方法，其特征在于 ：所述用于洗涤滤饼的溶剂为水、甲醇、乙醇、丙酮中的任意一种。7.根据权利要求 6 所述的一种 3- 去乙酰基 -7- 氨基头孢烯酸的制备方法，其特征在于 ：所述用于洗涤滤饼的溶剂为丙酮。权 利 要 求 书CN 104480181 A1/6 页33- 去乙酰基 -7- 氨基头孢烯酸的制备方法技术领域0001 本发明涉及一种药品中间体的制备方法，具体地说是一种3-去乙酰基-7-氨基头孢烯酸的制备方法，属于医药技术领域。背景技术0002 3-去乙酰基-7-氨基头孢烯酸，简称D-7-ACA，是生产头。
8、孢菌素类抗生素的医药中间体，能够用于合成头孢克肟、头孢呋辛、头孢匹罗、头孢卡品酯、头孢地尼、头孢他啶等一系列头孢类抗生素。与 7-ACA(7- 氨基头孢烷酸 ) 和 7-ADCA(7- 氨基 -3- 去乙酰氧基头孢烷酸 ) 相比，D-7-ACA 结构中位于 3 位的羟基具有较高的反应活性，有利于合成新型的头孢菌素产品，能够简化生产工艺路线，并具有修饰简单、容易纯化、产品质量好、生产成本低等优点，需求量不断增加。0003 D-7-ACA 的 分 子 式 为 C8H10N2O4S， 分 子 量 230.24， 分 子 结 构 为 ：0004 目前 D-7-ACA 的制备方法主要有化学法、化学生物酶。
9、法和生物酶法三种，一般均以头孢菌素 C 为原料。化学法通常是将头孢菌素 C 提取液先制成其钠盐或锌盐，再通过醋化、氯化、醚化和水解四步反应得到 7-ACA 溶液，加氨水结晶得到 7-ACA ；然后再将 7-ACA 溶解，用氢氧化钠裂解得到 D-7-ACA。化学生物酶法通常是将头孢菌素 C 提取液先制成其钠盐，然后用 D- 氨基酸氧化酶和戊二酰 -7-ACA 酰化酶催化得到 7-ACA 溶液，加盐酸结晶得到 7-ACA ；最后将 7-ACA 溶解，用氢氧化钠或头孢菌素醋酶裂解得到 D-7-ACA。生物酶法通常是先将头孢菌素 C 提取液用 D- 氨基酸氧化酶催化制备戊二酰 -7-ACA 溶液，再用。
10、戊二酰 -7-ACA 酰化酶和头孢菌素酯酶催化制得 D-7-ACA。上述三种工艺路线都较长，而且包含多次结晶过程，造成了很大的物料损失，降低了产品收率。其中化学法采用的裂解，需要高温、高压和低冷，而反应物料中使用的有机溶剂如二氯甲烷、苯胺、氯硅烷等均为有毒有害的强污染物，还使用大量强酸强碱，使得 D-7-ACA 的生产要承担较重的能耗成本与治污成本。化学生物酶法裂解 7-ACA 在结晶时面临结晶产品发粘、难以离心和干燥的问题，需要添加溶媒辅助结晶，并且需使用大量的分离设备，导致能耗和人工成本增加，不利于放大生产。0005 中国专利CN102827912B公开了一种两酶一步法制备医药中间体D-7。
11、-ACA的工艺，以头抱菌素 C 钠盐浓缩液为底物，采用固定化 CPC 酯化酶和固定化去乙酰基酯酶组合一步酶法催化制备 D-7-ACA。该工艺简化了工艺路线，提高了头抱菌素 C 发酵组分的利用率，缩短了生产周期，避免了三酶两步酶法中液氧的使用，提高了生产安全性，且整个过程均采用酶法生产工艺，具有条件温和、设备简单、无污染、收率高、副产物少、成本低等优点，有利于我国绿色制药工业的发展，是一条可持续的工艺路线。说 明 书CN 104480181 A2/6 页40006 但是，两酶一步法将两种生物酶在同一介质条件下使用，但是由于两种生物酶的性质不同，且生物酶本身活性受介质环境的影响非常大，因此将两种酶。
12、在同一条件下使用，会使酶解率降低，从而出现副反应增多、杂质增多的现象，导致产品的收率和含量同时降低 ；而且，生物酶长期在非最佳环境内生存、其使用寿命也大大降低。发明内容0007 本发明需要解决的技术问题是提供一种 3- 去乙酰基 -7- 氨基头孢烯酸的制备方法，该方法将两种生物酶分开使用、使生物酶的活性最大化，反应产品质量好、收率高，酶使用寿命大幅提高，且反应步骤简单、操作方便，适合工业化生产。0008 为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是 ：0009 一种 3- 去乙酰基 -7- 氨基头孢烯酸的制备方法，包含以下步骤 ：0010 A、将原料头孢菌素C钠盐料液浓缩至2000040000。
13、ug/ml，用氨水调pH至6.57.0，得原料液 ；然后将原料液加入到装有固定化 CPC 酰化酶的 1# 裂解罐中，开启搅拌，在10 25下用氨水调节裂解液的 pH 为 6.0 9.0，反应结束 ；0011 所述固定化CPC酰化酶的单位酶活力不低于100u/g，1#裂解罐中所盛装的固定化CPC 酰化酶的酶活总单位不小于 10000u/l ；0012 B、将步骤 A 所得裂解液加入到装有固定化去乙酰基酯酶的 2# 裂解罐中，开启搅拌，在 10 25下用氨水调节裂解液 pH 至 5.5 8.0，反应结束，得最终裂解液 ；0013 所述固定化去乙酰基酯酶的单位酶活力不低于 400u/g，2# 裂解罐。
14、中所盛装的固定化去乙酰基酯酶的酶活总单位不小于 8000u/l ；0014 C、将步骤B所得最终裂解液转移至结晶罐中，降温至010，滴加盐酸溶液调节体系 pH 至 4.5 6.0，控温养晶后过滤，洗涤后进行真空干燥，即得 D-7-ACA。0015 本发明的进一步改进在于 ：所述步骤 A 中，原料头孢菌素 C 钠盐浓缩液的浓度为30000 35000ug/ml ；裂解反应温度为 13 18，裂解反应的终点 pH 为 8.30 8.50 ；用于调节头孢菌素 C 钠盐浓缩液 pH 和裂解液 pH 的氨水浓度均为 3mol/L。0016 本发明的进一步改进在于 ：所述步骤 B 中，裂解反应温度为 13。
15、 18，裂解反应的终点 pH 为 7.40 7.80 ；用于调节裂解液 pH 的氨水浓度为 6mol/L。0017 本发明的进一步改进在于 ：所述步骤C中，将步骤B所得最终裂解液转移至结晶罐中，降温至010，滴加质量分数为520的盐酸溶液，直至有少量晶体出现 ；停止滴加，控温010养晶3060分钟 ；然后二次滴加盐酸溶液，至体系pH为4.05.0，降温至 4以下，养晶 30 60 分钟 ；过滤，洗涤滤饼后真空干燥，即得 D-7-ACA。0018 本发明的进一步改进在于 ：所述步骤 C 中，将步骤 B 所得最终裂解液转移至结晶罐中，降温至 5 10，滴加质量分数为 10的盐酸溶液，直至有少量晶体。
16、出现 ；停止滴加，控温 5 10养晶 30 60 分钟 ；然后二次滴加 10盐酸溶液，至体系 pH 为 4.85 4.95 ；降温至 4以下，养晶 30 60 分钟 ；过滤，洗涤滤饼后真空干燥，即得 D-7-ACA。0019 本发明的进一步改进在于 ：所述用于洗涤滤饼的溶剂为水、甲醇、乙醇、丙酮中的任意一种，优选为丙酮。0020 由于采用了上述技术方案，本发明所取得的技术进步在于 ：0021 本发明提供了一种 3- 去乙酰基 -7- 氨基头孢烯酸的制备方法，采用两酶两步法，说 明 书CN 104480181 A3/6 页5制备过程操作简单，所得 D-7-ACA 产品的纯度高、反应收率高，而且两。
17、种酶可以重复利用，固定化 CPC 酰化酶的使用寿命高达 600 700 批次，固定化去乙酰基酯酶的使用寿命高达800 1000 批次，大大降低了生产成本，对工业化放大生产意义重大。0022 本发明采用两酶两步法，根据两种酶的不同活性确定了最佳反应条件，先使用固定化 CPC 酰化酶对头孢菌素 C 去酰化制得 7-ACA，然后再使用固定化去乙酰基酯酶对 7-ACA去酯化制得 D-7-ACA，最后经酸化析晶提纯得到高纯度的 D-7-ACA。固定化 CPC 酰化酶和固定化去乙酰基酯酶分开使用，使得每一步反应的体系单一，每步反应用酶都保持很高活性，不易发生副反应，从而有效保证了产品的纯度和反应收率，并延。
18、长了酶的使用寿命 ；而且，两步裂解反应的温度进一步降低，工业化生产时无需消耗能量加热，更加利于工业化生产。0023 步骤 A 中首先将原料头孢菌素 C 钠盐料液进行浓缩至 20000 40000g/ml、优选30000 35000g/ml，再进行裂解反应，这样能保证后续反应具有适当的裂解转化时间，避免产物的降解，保证了产品收率。如果浓缩液的浓度过大，就需要较长的反应时间才能使头孢菌素 C 转化完全，这样就有可能造成产物的降解，从而降低收率，并且会造成产品含量降低、杂质增多、色级升高 ；如果浓缩液的浓度过小，调节 pH 的氨水用量会大大增加，同产量不仅增加裂解批次，降低产品收率，而且显著提高生产。
19、成本。0024 本发明步骤 A 中，通过固定化 CPC 酰化酶对头孢菌素 C 作用生成 7-ACA，裂解反应温度为 10 25、优选为 13 18，反应终点 pH6.0 9.0、优选 8.3 8.5，该条件下CPC 酰化酶的活性保持最佳，催化裂解速度快，反应效率和反应收率高。如果反应温度高于25或介质 pH 大于 9.0，会导致副反应的杂质增加，甚至 CPC 酰化酶失去活性，无法催化裂解 ；但若反应温度低于 10或介质 pH 小于 6.0，CPC 酰化酶的活性降低，催化效果大大降低，反应时间延长，且容易导致反应不完全，反应杂质增多。0025 本发明步骤 B 中，通过固定化去乙酰基酯酶对 7-A。
20、CA 作用生成 D-7-ACA，反应温度为 10 25、优选 13 18，反应终点 pH 为 5.0 8.0、优选 7.4 7.8，该条件下去乙酰基酯酶的活性保持最佳，催化裂解速度快，反应效率和反应收率高。如果反应温度高于25或介质 pH 大于 8.0，会导致副反应的杂质增加，甚至去乙酰基酯酶失去活性，无法催化裂解 ；但若反应温度低于10或介质pH小于5.5，去乙酰基酯酶的活性降低，催化效果大大降低，反应时间延长，且容易导致反应不完全，反应杂质增多。0026 本发明步骤 C 中，通过调酸将溶解在溶剂中的 D-7-ACA 钠盐酸化、并使其析出；用于调酸析晶的盐酸浓度为 5 20，优选 10，滴入。
21、少量上述浓度的盐酸溶液就能使D-7-ACA 析出，并保证析出产品的晶型，且能避免杂质析出，进一步保证了 D-7-ACA 的纯度和质量。如果盐酸浓度过高，会导致盐酸滴入后局部浓度过大，析出晶体的晶型过细，不易过滤，且杂质也会随之析出，从而影响 D-7-ACA 产品的质量。如果盐酸浓度过低，则需要相当量的盐酸滴入才能使产品析出，反应液体积大，批处理量降低。0027 本发明步骤 C 中，限定调酸终点的 pH 为 4.0 5.0，优选 4.85-4.95 ；在此 pH 范围下，能够使体系中的绝大部分D-7-ACA产品析出，同时有效避免副产物-氨基己二酸的析出，这样就保证了 D-7-ACA 产品的纯度，。
22、并使其收率达到最高。0028 本发明步骤 C 中优选使用丙酮作为滤饼洗涤溶剂，丙酮由于具有更低的沸点，因此回收套用简单方便，降低了生产成本，有利于工业化生产。0029 将河南健康元药业集团、瑞士 Sandoz 公司、石药集团中润药业有限公司所生产销说 明 书CN 104480181 A4/6 页6售的 D-7-ACA 产品和本发明产品进行质量测试，测试具体方法为 ：使用高效液相色谱检测法检测含量和杂质含量，使用卡尔费休法检测水分，使用分光光度法检测透光率。测试数据见下表 ：0030 质量指标 本发明产品 河南健康元 Sandoz 公司 石药中润药业水分， 0.04 0.01 0.06 0.17。
23、0031 420nm 透光率， 98.7 96.7 92.6 97.3质量含量， 99.6 99.2 99.2 99.5DO-7-ACA， 0.44 0.45 0.25 0.497-ACA， 0.05 0.02 未检出 0.06头孢菌素 C， 未检出 未检出 未检出 未检出最大单杂， 0.22 0.07 0.40 0.35杂质总和， 0.84 0.83 1.1 1.40032 通过上述对比数据可以看出，本发明产品的质量含量高于其他三个厂家的D-7-ACA 产品，而杂质总和的含量低于其他三个厂家的 D-7-ACA 产品，420nm 条件下的透光率高，进一步证明本发明产品质量优异、纯度高、杂质少，。
24、得到了广大用户的认可。具体实施方式0033 下面结合实施例对本发明做进一步详细说明 ：0034 下列实施例中，所使用的头孢菌素 C 钠盐浓缩液来自华北制药河北华民药业有限公司莱欣工厂 ；固定化 CPC 酰化酶来自湖南福来格生物技术有限公司，单位酶活力为 100u/g ；固定化去乙酰基酯酶来自湖南福来格生物技术有限公司，单位酶活力为 400u/g ；其他原料均为市售产品。0035 实施例中所使用的 HPLC 检测条件为 ：0036 色谱柱 ：十八烷基硅烷键合硅胶，5m，4.6mm250mm ；0037 柱温 ：30 ；0038 检测器 ：紫外检测器 254nm ；0039 流动相 ：pH 4.2。
25、 醋酸钠缓冲液 ；0040 流速 ：1.0ml/min ；0041 进样量 ：20l。0042 实施例 10043 A、使用高效液相色谱法监测浓缩液的效价，将头孢菌素C钠盐料液浓缩至说 明 书CN 104480181 A5/6 页730000ug/ml ；量取1000ml，用3mol/L氨水调pH至6.5，得原料液 ；然后将原料液加入到装有100g 固定化 CPC 酰化酶 ( 单位酶活力为 100u/g) 的裂解罐中，开启搅拌，在 13 18下用 3mol/L 氨水调节裂解液的 pH 为 8.30，反应结束 ；0044 B、将步骤 A 所得裂解液加入到装有 20.0g 固定化去乙酰基酯酶 ( 。
26、单位酶活力为400u/g) 的裂解罐中，开启搅拌，在 13 18下用 6mol/L 氨水调节裂解液 pH 为 7.40，反应结束，得最终裂解液 ；0045 C、将步骤 B 所得最终裂解液转移至结晶罐中，降温至 5 10，滴加质量分数为 10盐酸直至有少量晶体出现 ；停止滴加，控温 5 10养晶 30 分钟 ；然后二次滴加10盐酸，直至体系pH为4.90，降温至4以下，养晶60分钟 ；过滤，使用丙酮洗涤滤饼，真空干燥后即得 D-7-ACA 产品。0046 所得 D-7-ACA 产品质量为 12.97g，反应总收率 43.23。0047 实施例 20048 A、使用高效液相色谱法监测浓缩液的效价，。
27、将头孢菌素C钠盐料液浓缩至31000ug/ml ；量取1000ml，用3mol/L氨水调pH至6.7，得原料液 ；然后将原料液加入到装有100g 固定化 CPC 酰化酶 ( 单位酶活力为 100u/g) 的裂解罐中，开启搅拌，在 13 18下用 3mol/L 氨水调节裂解液的 pH 为 8.40，反应结束 ；0049 B、将步骤 A 所得裂解液加入到装有 20.0g 固定化去乙酰基酯酶 ( 单位酶活力为400u/g) 的裂解罐中，开启搅拌，在 13 18下用 6mol/L 氨水调节裂解液 pH 为 7.60，反应结束，得最终裂解液 ；0050 C、将步骤 B 所得最终裂解液转移至结晶罐中，降温。
28、至 5 10，滴加质量分数为10盐酸，直至有少量晶体出现 ；停止滴加，控温510养晶60分钟 ；然后二次滴加10盐酸，直至体系pH为4.95，降温至4以下，养晶60分钟 ；过滤，使用丙酮洗涤滤饼，真空干燥后即得 D-7-ACA 产品。0051 所得 D-7-ACA 产品质量为 13.57g，反应总收率 43.77。0052 实施例 30053 A、使用高效液相色谱法监测浓缩液的效价，将头孢菌素C钠盐料液浓缩至32000ug/ml，量取1000ml，用3mol/L氨水调pH至7.0，得原料液 ；然后将原料液加入到装有100g 固定化 CPC 酰化酶 ( 单位酶活力为 100u/g) 的裂解罐中，。
29、开启搅拌，在 13 18下用 3mol/L 氨水调节裂解液的 pH 为 8.50，反应结束 ；0054 B、将步骤 A 所得裂解液加入到装有 20.0g 固定化去乙酰基酯酶 ( 单位酶活力为400u/g) 的裂解罐中，开启搅拌，在 13 18下用 6mol/L 氨水调节裂解液 pH 为 7.80，反应结束，得最终裂解液 ；0055 C、将步骤B所得最终裂解液转移至结晶罐中，降温至8，滴加质量分数为10盐酸，直至有少量晶体出现 ；停止滴加，控温 5 10养晶 50 分钟 ；然后二次滴加 10盐酸，直至体系pH为4.95，降温至4以下，养晶60分钟 ；过滤，使用丙酮洗涤滤饼，真空干燥后即得 D-7。
30、-ACA 产品。0056 所得 D-7-ACA 产品质量为 13.94g，反应总收率 43.56。0057 实施例 40058 A、使用高效液相色谱法监测浓缩液的效价，将头孢菌素C钠盐料液浓缩至说 明 书CN 104480181 A6/6 页835000ug/ml，量取1000ml，用3mol/L氨水调pH至6.8，得原料液 ；然后将原料液加入到装有100g固定化CPC酰化酶(酶活为100u/g)的裂解罐中，开启搅拌，在1318下用3mol/L 氨水调节裂解液的 pH 为 8.30，反应结束 ；0059 B、将步骤 A 所得裂解液加入到装有 20.0g 固定化去乙酰基酯酶 ( 单位酶活力为40。
31、0u/g) 的裂解罐中，开启搅拌，在 13 18下用 6mol/L 氨水调节裂解液 pH 为 7.60，反应结束，得最终裂解液 ；0060 C、将步骤B所得最终裂解液转移至结晶罐中，降温至7，滴加质量分数为10盐酸，直至有少量晶体出现 ；停止滴加，控温 5 10养晶 30 分钟 ；然后二次滴加 10盐酸，直至体系pH为4.85，降温至4以下，养晶60分钟 ；过滤，使用丙酮洗涤滤饼，真空干燥后即得 D-7-ACA 产品。0061 所得 D-7-ACA 产品质量为 15.33g，反应总收率 43.80。0062 实施例 50063 本实施例为对比实施例，按中国专利CN102827912A说明书实施。
32、例1的方法进行制备，具体制备方法为 ：0064 据高效液相色谱法测得头孢菌素 C 钠盐浓缩液效价，将头孢菌素 C 钠盐浓缩液稀释至 31000ug/ml，用质量分数为 5氨水调节 pH 至 6.8 后，将 1000ml 上述稀释料液加入到装有 75.0g 固定化 CPC 酰化酶 ( 单位酶活力为 100u/g) 和 18.0g 固定化去乙酰基酯酶 ( 单位酶活力为 400u/g) 的裂解罐中，在 22下由质量分数为 4.5的氨水通过酶裂解罐调节裂解液 pH 为 8.30，反应结束，得最终裂解液。将最终裂解液转移至结晶罐内，降温至 5，滴加质量分数为 14的盐酸溶液调节 pH 至 5.0，2下养。
33、晶 1.2 小时，过滤，甲醇洗涤，真空干燥即得 D-7-ACA。0065 所得 D-7-ACA 产品质量为 12.00g，反应总收率 38.72。0066 取实施例 1 实施例 5 产品进行性能检测，使用 HPLC 法检测产品含量和杂质含量，使用分光光度法检测透光率。检测数据见表 1。0067 表 1 实施例产品性能检测数据0068 检测项目 实施例 1 实施例 2 实施例 3 实施例 4 实施例 5纯度 ( ) 99.29 99.31 99.38 99.27 98.0质量含量 ( ) 99.51 99.73 99.83 99.79 98.48最大单杂 ( ) 0.22 0.12 0.16 0.18 0.45DO-7-ACA( ) 0.44 0.38 0.41 0.45 0.55420nm 透光率 ( ) 98.82 98.64 99.14 98.42 84.610069 由表 1 中数据可以看出，实施例 1 实施例 4 的产品性能显著优于实施例 5 产品，而且，实施例1实施例4的反应收率也高于实施例5产品。本发明方法与专利CN102827912A 的方法相比，具有显著的优势和技术进步。说 明 书CN 104480181 A。