一种鲜百合地黄粉在制备治疗抑郁症药物中的应用.pdf

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1、10申请公布号CN104208383A43申请公布日20141217CN104208383A21申请号201410444555522申请日20140903A61K36/8967200601A61P25/2420060171申请人河南中医学院地址450008河南省郑州市金水区金水路1号72发明人苗明三刘雅敏白明74专利代理机构郑州天阳专利事务所普通合伙41113代理人聂孟民54发明名称一种鲜百合地黄粉在制备治疗抑郁症药物中的应用57摘要本发明涉及鲜百合地黄粉在制备治疗抑郁症药物中的应用，可有效解决了鲜百合地黄汤无法常年应用治疗抑郁症的用药问题，其解决的技术方案是，将鲜百合、鲜地黄以重量比11混合。

2、在一起，置于匀浆机中制成浆液，在真空冷冻干燥机于温度80、真空度0008001MPA条件下干燥、制粉，得干粉，密封包装，阴凉储存，具有抗抑郁作用，有效解决了鲜百合地黄汤无法常年应用治疗抑郁症的用药问题，本发明原料丰富，易制备，按给出的重量比，可制得任意量的鲜百合地黄粉，服用方便，可常年应用，具有抗抑郁作用，效果好，是治疗抑郁症药物上的创新，经济和社会效益巨大。51INTCL权利要求书1页说明书12页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书12页10申请公布号CN104208383ACN104208383A1/1页21一种鲜百合地黄粉在制备治疗抑郁症药物中的应用，该鲜。

3、百合地黄粉是将鲜百合、鲜地黄以重量比11混合在一起，置于匀浆机中制成浆液，在温度80、真空度0008001MPA条件下于真空冷冻干燥机干燥、制粉，得干粉，实现鲜百合地黄汤常年在治疗抑郁症药物中的应用。权利要求书CN104208383A1/12页3一种鲜百合地黄粉在制备治疗抑郁症药物中的应用技术领域0001本发明涉及医药，特别是一种鲜百合地黄粉在制备治疗抑郁症药物中的应用。背景技术0002抑郁症是一种常见多发病，又称抑郁障碍，以显著而持久的心境低落为主要临床特征，是心境障碍的主要类型。临床可见心境低落与其处境不相称，情绪的消沉可以从闷闷不乐到悲痛欲绝，自卑抑郁，甚至悲观厌世，可有自杀企图或行为；。

4、甚至发生木僵；部分病例有明显的焦虑和运动性激越；严重者可出现幻觉、妄想等精神病性症状。每次发作持续至少2周以上、长者甚或数年，多数病例有反复发作的倾向，每次发作大多数可以缓解，部分可有残留症状或转为慢性。慢性应激可诱发抑郁症。0003慢性应激反应简称慢性应激。即指个体处于一种长期慢性的压力状态之中。这种压力不是某一个突发的紧急事件，而是让当事人感到无助无望的一种情境，而其结局也常常是“出乎意料之外，又在情理之中”。0004由慢性应激引发的抑郁症称为慢性应激抑郁症，目前治疗慢性应激抑郁症的药物有多种多样，但由于种种原因，均不尽人意。0005百合，学名LILIUMBROWNIIVARVIRIDUL。

5、UMBAKER又名强蜀、番韭、山丹、倒仙、重迈、中庭、摩罗、重箱、中逢花、百合蒜、大师傅蒜、蒜脑薯、夜合花等，是百合科百合属学名LILIUM多年生草本球根植物，甘、微苦、微寒，入心、肺经，养阴润肺、清心安神，主阴虚久嗽、痰中带血、热病后期、余热未清，或情志不遂所致的虚烦惊悸、失眠多梦、精神恍惚，痈肿、湿疮，刚收获的百合洗净泥土，称为鲜百合。0006鲜地黄拉丁学名REHMANNIAGLUTINOSAGAETNLIBOSCHEXFISCHETMEY，玄参科地黄属多年生草本植物，玄参科植物地黄的新鲜块根，洗净泥土，甘、苦，寒，归心、肝、肾经，清热生津，凉血，止血，用于热病伤阴，舌绛烦渴，发斑发疹，吐。

6、血，衄血，咽喉肿痛。0007那么能否将鲜百合和鲜地黄相复配是中医著名的百合地黄汤，但鲜药受时间、季节的限制，无法常年应用。本发明采用鲜地黄、鲜百合按11比例配比，匀浆机匀浆后真空冷冻干燥，然后密闭阴凉处保存，保存了鲜药的疗效特点，又可常年应用于治疗慢性应激抑郁症患者，未见有公开报导。发明内容0008针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种鲜百合地黄粉在制备治疗慢性应激抑郁症药物中的应用，可有效解决了鲜百合地黄汤无法常年应用治疗抑郁症的用药问题。0009本发明解决的技术方案是，将鲜百合、鲜地黄以重量比11混合在一起，置于匀浆机中制成浆液，在真空冷冻干燥机于温度80、真空度00。

7、08001MPA条件下干燥、制粉，得干粉，密封包装，阴凉储存，具有抗抑郁作用，有效解决了鲜百合地黄汤无法常年应用治疗慢性应激抑郁症的用药问题。说明书CN104208383A2/12页40010本发明原料丰富，易制备，按给出的重量比，可制得任意量的鲜百合地黄粉，服用方便，可常年应用，具有抗抑郁作用，效果好，是治疗慢性应激抑郁症药物上的创新，经济和社会效益巨大。具体实施方式0011以下结合实施例对本发明的具体实施方式作详细说明。0012本发明在具体实施中，一种鲜百合地黄粉在制备治疗抑郁症药物中的应用，所述的鲜百合地黄粉是，将鲜百合600G、鲜地黄600G的重量比放至匀浆机内匀浆，在真空冷冻干燥机于。

8、温度80、真空度0008001MPA条件下干燥、制粉，得干粉，密封包装，阴凉储存，该干粉具有抗抑郁之功效，有效用于制备治疗慢性应激抑郁症的药物，并经试验取得了非常满意的有益技术效果，有关试验资料如下0013一、动物试验00141材料与方法001511实验材料0016111药品试剂0017本发明鲜百合地黄干粉；盐酸氯米帕明，上海信谊九福药业有限公司生产；MDA检测试剂盒，南京建成生物工程研究所生产；SOD检测试剂盒，南京建成生物工程研究所生产；邻苯二甲醛，上海化学试剂采购供应五联化工厂生产；正丁醇，天津市凯通化学试剂有限公司生产；盐酸，莱阳市双双化工有限公司生产；正庚烷，天津市四通化工厂生产；去。

9、甲肾上腺素NE，SIGMA公司；多巴胺DA，SIGMA公司；5羟色胺5HT，SIGMA公司；高碘酸钠，天津市福晨化学试剂厂生产；EDTANA2，宝信生物科技有限公司生产；磷酸氢二钠，天津市凯通化学试剂有限公司生产；磷酸二氢钠，天津市福晨化学试剂厂生产；醋酸钠，天津市化学试剂三厂生产；亚硫酸钠，天津市凯通化学试剂有限公司生产；无水乙醇，莱阳市双双化工有限公司生产；碘，天津市科密欧化学试剂有限公司生产。0018动物给药剂量换算鲜百合地黄百合地黄汤，两者比例按11每天临床用量按两者各60G/60KG计。大鼠给药按临床用量的20、15、10倍。鲜百合地黄出粉率约为6。0019则大鼠用量为鲜百合地黄粉大。

10、、中、小剂量分别为24G鲜粉/KG、18G鲜粉/KG、12G鲜粉/KG。002012实验动物WISTAR大鼠，150180G，雄性，由河北省医学实验动物中心提供，许可证号701022002113实验仪器0022F4500型荧光分光光度计，日立公司生产；UV2000紫外可见分光光度计，尤尼柯上海仪器有限公司生产；恒温水浴锅，北京市光明仪器厂生产；离心机，北京医疗仪器修理厂生产；FAN/JAN系列电子天平，上海民桥精密仪器有限公司生产；可调式移液器，上海雷勃分析仪器有限公司生产；恒温箱，北京市永光明医疗仪器厂生产；TGL16G高速冷冻离心机，上海安亭科学仪器厂生产；大鼠敞箱，自制。002314统计。

11、学处理0024数据分析用SPSS100FORWINDOWS统计软件，计量结果采用表示；计量资料组间比较采用单因素方差分析，等级资料采用RIDIT分析。说明书CN104208383A3/12页5002512实验方法0026121实验分组及给药0027所有大鼠适应环境一周后采用OPENLED法评分，选取评分相近的大鼠72只，同时注意体重，糖水消耗量无显著差别，将动物随机分为6组，其中5组造大鼠慢性应激抑郁模型，另1组为空白对照组。造模型5组分别灌服盐酸氯米帕明混悬液阳性对照，给药剂量为20MG/KG，临用前用生理盐水配成2MG/M1，1ML/100G，大、中、小剂量鲜百合地黄干粉混悬液24G/KG。

12、、18G/KG、12G/KG，含生药浓度分别为024G/M1、018G/M1、012G/M1，1ML/100G，分别相当于临床用量的20、15、10倍，模型组和空白对照组灌服同体积的生理盐水，给药体积均为1ML/100G。造模型同时给药，每天给药1次，连续给药21D。0028122造模方法0029正常组每笼5只饲养，正常饮食饮水，不给任何刺激外。造模型5组均为每笼饲养1只大鼠，每天随机给予不同刺激。7种应激因子按随机方法在21D内应用通宵照明24H；禁食24H；禁水24H；4冷水游泳5MIN，1MIN夹尾，5MIN高速水平振荡；2H行为限制。每天随机给予一种刺激，每种刺激不能连续出现，连续21。

13、D。0030123造慢性应激抑郁模型日程安排0031说明书CN104208383A4/12页60032124实验动物处理00331241糖水摄入量测试说明书CN104208383A5/12页70034模型制备开始前1天和结束后第1天上午测试各组大鼠1蔗糖水消耗量，测试前禁水12H，测定1H内蔗糖水摄入量。00351242OPENLED法测试0036实验装置为立方形敞箱，高40CM，长宽分别为80CM，周壁、底面为黑色，底面由面积相等的25块组成，用白线划分。实验时将大鼠置于敞箱中心方格内，观察大鼠在3MIN内穿越底面块数四爪均进入的方格方可记数的水平活动CROSSING得分，以及后肢直立次数两。

14、前爪腾空或攀附墙壁的垂直活动REARING得分。每次实验完后须将粪便彻底清除。每只动物于实验开始前1天和实验结束后1天上午各测定1次，比较各组得分差异。此实验在安静的房间内进行。00371243血浆中MDA水平与红细胞SOD活力的测定0038行为学测试完毕后，大鼠眼眶取血，肝素钠抗凝，3000R/MIN离心10MIN，分离血浆，按试剂盒说明书分别测定血浆中MDA水平和红细胞SOD活力。003912431血浆中MDA水平测定0040MDA试剂盒测试原理过氧化脂质降解产物中的丙二醛MDA可与硫代巴比妥酸TBA缩合，形成红色产物，在532NM出有最大吸收峰。因底物为硫代巴比妥酸THIBABITURI。

15、CACIDTBA所以此法称TBA法。0041100T试剂盒组成与配制0042试剂1液体20ML1瓶，室温保存。天冷时会凝固，每次测试前适当水浴加温以加速溶解，直至透明方可应用。0043试剂2液体6ML1瓶，用时每瓶加340ML双蒸水混匀，4冷藏。0044试剂3粉剂1支，用时将粉剂加入到90100的热双蒸水60ML中，在溶解过程中可适当加热，充分溶解后用双蒸水补足至60ML，混匀，配好的试剂避光冷藏。0045试剂4标准品10NMOL/M1四乙氧基丙烷5ML1瓶，4冷藏。0046操作方法混合试剂的配制将样本总数N放宽4只量分别乘以1，2，3号试剂，按计算量将3种试剂混合在一起。混合试剂总量N4注1。

16、号试剂015MLN42号试剂3MLN43号试剂1ML。注按所需检测的样本数加上标准管及标准空白管的数，再放宽2只避免吸到最后试剂量不够。混合试剂需现用现配，见表1。0047表1混合试剂的配制004800490050旋涡混匀器混匀，试管口用保鲜膜扎紧，用针头刺一小孔，95水浴或用锅开盖煮沸40MIN，取出后流水冷却，然后35004000R/MIN，离心10MIN，取上清，522NM处，1CM光径，蒸馏水调零，测各管吸光度值。005112432红细胞中超氧化物歧化酶SOD活力的测定说明书CN104208383A6/12页80052测定原理通过黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子自由基O2，后者氧化羟。

17、胺形成亚硝酸盐，在显色剂的作用下呈现紫红色，用可见分光光度计测其吸光度。当被测样品中含SOD时，则对超氧阴离子自由基有专一性的抑制作用，使形成的亚硝酸盐减少，比色时测定管的吸光度值低于对照管的吸光度值，通过公式计算可求出被测样品中的SOD活力。0053试剂的组成与配制0054试剂1贮备液10ML1瓶天冷时或放冰箱会有部分结晶析出，需热水浴溶解后再用；试剂1应用液的配制用时每瓶加蒸馏水稀释至100ML，4保存。0055试剂2液体10ML1瓶，410保存。0056试剂3液体10ML1瓶，410保存。0057试剂4液体350L2支，4保存，不可冷冻；4号稀释液10ML1瓶，4保存。用时二者按114稀。

18、释，可以一次稀释，也可以分次稀释。配好的试剂4保存，不可冷冻。配好后可保存23个月。注所用吸嘴最好为专用且消毒处理过。0058试剂5粉剂1支，用时加7080热双蒸水75ML溶解后备用，若加热过程中水分蒸发减少，此时必须用蒸馏水补充至75ML，配好后的试剂避光4冷藏。0059试剂6粉剂1支，用时加蒸馏水75ML溶解后备用，配好后的试剂避光4冷藏保存。0060显色剂的配制按照试剂5试剂6冰乙酸332的体积比配成显色剂，4避光冷藏。用旋涡混匀器充分混匀，制37恒温水浴40MIN混匀，室温放置10MIN，于波长550NM处，1CM光径比色杯，蒸馏水调零，比色，见表2。0061表2总SODTSOD活力测。

19、定步骤006200631244对脑内单胺类神经递质的影响0064将大鼠取血后处死，取脑，制备脑组织匀浆，用荧光法测定脑组织匀浆中单胺类神经递质5HT、NE、DA的含量。006512441前处理0066将脑组织去除血膜、嗅球和小脑后称重，以5倍量酸化正丁醇以1000M1正丁醇中加入浓盐酸085M1在冰水浴中制成匀浆。旋涡振荡5MIN，离心5MIN3000R/MIN。取上清液25M1，放入另一带塞离心管内，加正庚烷5M1和01MOL/L盐酸12M1，旋涡振荡5MIN，离心5MIN，得到分层溶液水相I含5HT，DA，NE。006712442标准贮存液00685HT、DA、NE分别用00LMOL/L盐。

20、酸配制成500G/M1作为标准储存液。存放于说明书CN104208383A7/12页92冰箱中。006912443标准应用液0070临用时各取上述贮存液025M1，用00LMOL/LHCL稀释至100M1标准应用液。每个标准品浓度125G/M1。007112444脑组织中5HT、NE和DA的测定00721244415HT的测定0073取水相I05M1加入05半胱氨酸新鲜配置01M1，0005邻苯二甲醛3M1以L0MOL/LHCL临时配成，002高碘酸钠0LML，沸水浴10MIN，冷却至室温，测定。05半胱氨酸，用01MO1/L盐酸配制。0074标准管和空白管0075标准管取标准应用液05ML，。

21、空白管取重蒸馏水05M1；加酸化正丁醇45M1，旋涡振荡5MIN，离心5MIN3000R/MIN。取上清液25M1，放入另一带塞离心管内，加正庚烷5M1和01MOL/L盐酸10ML，旋涡振荡5MIN，离心5MIN，得到分层溶液水相I含5HT、DA、NE。0076取水相I05M1加入05半胱氨酸0LML，0005邻苯二甲醛3M1以L0MOL/LHCL配成，002高碘酸钠0LML，沸水浴10MIN，冷却至室温，测定。00775HT最大发射波长EM475NM，最大激发波长EX355NM。0078124442NE和DA的测定0079取水相I05M1，加入1/15MOL/L磷酸缓冲盐溶液PH7217M1。

22、，01MOL/LEDTANA2以1MO1/L醋酸钠溶液配制，以L0MOL/LNAOH调PH至7004M1，加碘试剂0LML，静置2MIN，加碱性亚硫酸钠溶液05M125亚硫酸钠10M1，5MOL/L氢氧化钠9M1临时混匀，静置2MIN。加入6MO1/LHAC液05M1，沸水浴20MIN，冷却至室温，分别测定NE，DA。0080碘试剂配制002MO1/L碘液和5碘化钠以70乙醇溶解，临用前以11体积比混合。0081标准管和空白管标准管取标准应用液05ML，空白管取重蒸馏水05ML，以酸化正丁醇45M1，旋涡振荡5MIN，离心5MIN3000R/MIN。取上清液25ML，放入另一带塞离心管内，加正。

23、庚烷5M1和01MO1/L盐酸12M1，旋涡振荡5MIN，离心5MIN，得到分层溶液水相I含5HT，DA，NE。0082取水相I05M1，加入1/15MOL/L磷酸缓冲盐溶液PH7217M1，01MO1/LEDTANA2以LMOL/L醋酸钠溶液配制，以10MOL/LNAOH调PH至7004M1，加碘试剂02M1，静置2MIN，加碱性亚硫酸钠溶液05M125亚硫酸钠10M1，5MOL/L氢氧化钠9M1临时混匀，静置2MIN。加入6MOL/LHAC液05M1，沸水浴20MIN，冷却至室温，分别测定NE，DA。0083NE最大发射波长EM475NM，最大激发波长EX385NM；DA最大发射波长EM3。

24、70NM，最大激发波长EX322NM。0084124443计算公式0085样品单胺类递质含量G/G脑组织RIRIB/RRRRB05ML125UG/M1实际脑重0086RI为供试品荧光读数；RIB为供试品空白荧光读数；0087RR为对照品荧光读数；RRB为对照品空白读数。00881245对胸腺和脾脏组织形态的影响说明书CN104208383A8/12页100089大鼠取血后处死，解剖，取胸腺和脾脏，10福尔马林固定，经包埋、切片、染色、镜检，观察对免疫器官的影响。00902实验结果009121对大鼠慢性应激抑郁模型体重的影响0092在实验开始、实验第1周、实验第2周和实验第3周，分别给各组大鼠称。

25、重，比较各组大鼠在造模型和给药过程中体重的变化，结果见表3。0093表3鲜百合地黄粉对大鼠慢性应激抑郁模型体量的影响009400950096与模型组比P005，与模型组比P0010097从上表可看出，在给药前各组大鼠体重之间无明显差异，说明分组均匀；与空白对照组比，模型组大鼠从第1周开始体重减轻，到第3周体重明显低于空白对照组P005，说明大鼠慢性应激抑郁模型体重比正常减小。与模型组比，在第1周和第2周各给药组体重均有增加，在第3周，大剂量组鲜百合地黄粉组和小剂量组鲜百合地黄粉组均可使大鼠体重明显增加P005，其他各给药组也可使大鼠体重增加的趋势。009822对大鼠慢性应激抑郁模型糖水消耗量的。

26、影响0099在实验结束，分别测定各组大鼠在实验结束1天后1H内蔗糖水的摄入量，结果见表4。0100表4鲜百合地黄粉对大鼠慢性应激抑郁模型糖水消耗量的影响01010102与模型组比P005，与模型组比P0010103从上表可看出，与空白对照组比，模型组大鼠糖水消耗量显著减少P001，说明造大鼠慢性应激抑郁模型成功。与模型组比，大、中、小剂量鲜百合地黄粉组和盐酸氯米帕明组均可显著增加大鼠糖水消耗量P001。010423对大鼠慢性应激抑郁模型水平运动得分和垂直运动得分的影响说明书CN104208383A109/12页110105按OPENLED实验规定的实验方法，观察各组大鼠在实验结束后1天内3MI。

27、N内水平运动次数和垂直运动得分，结果见表5。0106表5鲜百合地黄粉对大鼠慢性应激抑郁模型行为学的影响01070108与模型组比P005，与模型组比P0010109从上表可看出，与空白对照组比，模型组大鼠3MIN内水平运动得分和垂直运动得分均显著减少P001，说明造大鼠慢性应激抑郁模型成功。与模型组比，中、小剂量鲜百合地黄粉组和盐酸氯米帕明组均可明显增加大鼠3MIN内水平运动得分P005，大剂量组鲜百合地黄粉组有增加大鼠3MIN内水平运动得分的趋势；大、中剂量鲜百合地黄粉组可明显增加大鼠3MIN内垂直运动得分P005，小剂量鲜百合地黄粉组和盐酸氯米帕明组均可显著增加大鼠3MIN内垂直运动得分P。

28、001。011024对大鼠慢性应激抑郁模型红细胞SOD活力及血浆中MDA水平的影响0111按SOD试剂盒及MDA试剂盒所提供的方法，检测慢性应激抑郁模型大鼠红细胞SOD活力及血浆中MDA水平，结果见表6。0112表6鲜百合地黄粉对大鼠慢性应激抑郁模型红细胞SOD活力及血浆中MDA水平的影响01130114与模型组比P005，与模型组比P0010115从上表可看出，与空白对照组比，模型组大鼠红细胞SOD活力明显减少P005，血浆MDA水平有增加趋势，说明大鼠慢性应激抑郁模型抗氧化能力明显减小。与模型组比，大、中剂量鲜百合地黄粉组可明显增加模型大鼠红细胞SOD活力P005，盐酸氯米帕明组可显著增加。

29、模型大鼠红细胞SOD活力P001，小剂量鲜百合地黄粉组有增加模型大鼠红细胞SOD活力的趋势；大、中、小剂量鲜百合地黄粉组有降低模型大鼠血浆说明书CN104208383A1110/12页12MDA水平的趋势。011625对大鼠慢性应激抑郁模型脑匀浆中单胺类神经递质水平的影响0117应用荧光分光光度计法，按5HT、NE和DA试剂盒说明书，分别测定脑组织匀浆中的5HT、NE和DA水平，结果见表7。0118表7鲜百合地黄粉对大鼠慢性应激抑郁模型脑内单胺类神经递质水平的影响011901200121与模型组比P005，与模型组比P0010122从上表可看出，与空白对照组比，模型组大鼠脑组织中NE水平、5H。

30、T水平和DA水平均显著降低P001，说明造大鼠慢性应激抑郁模型成功。与模型组比，大、中、小剂量鲜百合地黄粉组和盐酸氯米帕明组均可显著增加大鼠脑组织中NE水平、5HT水平和DA水平P001。012326对大鼠慢性应激抑郁模型胸腺组织形态的影响0124取大鼠胸腺和脾脏，经固定、包埋、切片、染色、镜检，观察鲜百合地黄粉对大鼠慢性应激抑郁模型免疫器官组织形态的影响。0125在光学显微镜下观察胸腺可见，空白对照组大鼠胸腺小叶分叶清楚，皮质与髓质分界清楚，皮质淋巴细胞密集；模型组大鼠胸腺萎缩，皮质髓质分界不太清，皮质明显变薄，淋巴细胞数量及密度均降低；盐酸氯米帕明组大鼠胸腺小叶分叶清楚，皮质较模型有所增厚。

31、，细胞密度明显增加；大剂量鲜百合地黄粉组大鼠胸腺分叶清楚，皮质厚度较模型组增厚，细胞密度和数量有所增加；中剂量鲜百合地黄粉组大鼠胸腺清楚，皮质较模型组明显增厚，细胞密度和数量明显增加；小剂量鲜百合地黄粉组大鼠胸腺皮质明显增厚，细胞密度和数量明显增加。结果见表8。0126表8鲜百合地黄粉对大鼠慢性应激抑郁模型胸腺病理变化的影响0127说明书CN104208383A1211/12页130128表示与模型组比较P005；表示与模型组比较P0010129从上表可看出，与空白对照组比，模型组大鼠动物胸腺皮质厚度和皮质细胞个数均显著减少P001，说明造大鼠慢性应激抑郁模型后胸腺萎缩。与模型组比，大、中、小。

32、剂量鲜百合地黄粉组和盐酸氯米帕明组均可显著增加大鼠胸腺皮质厚度P001、显著增加大鼠胸腺皮质淋巴细胞个数P001。以中、小剂量鲜百合地黄粉组对胸腺萎缩的结抗作用为好。0130在光学显微镜下观察脾脏可见，空白对照组大鼠脾脏红白髓分界清，脾窦和脾小均正常；模型组大鼠脾脏红白髓分界不太清，脾小结明显缩小，淋巴细胞明显减少；盐酸氯米帕明组大鼠脾脏红白髓分界清楚，脾小结及淋巴细胞数较模型组有所增大和增多；大剂量鲜百合地黄粉组大鼠脾脏脾小结较模型增大，淋巴细胞密度增加、淋巴细胞增多；中剂量鲜百合地黄粉组大鼠脾脏脾小结较模型组明显增大，细胞密度增加、淋巴细胞增多；小剂量鲜百合地黄粉组大鼠脾脏脾小结明显增大，。

33、细胞密度增加、淋巴细胞明显增多。结果见表9。0131表9鲜百合地黄粉对大鼠慢性应激抑郁模型脾脏病理变化的影响01320133表示与模型组比较P005；表示与模型组比较P0010134从上表可看出，与空白对照组比，模型组大鼠脾小节显著缩小P001，淋巴细胞数显著减少P001，说明造大鼠慢性应激抑郁模型后脾脏萎缩。与模型组比，大、中、小剂量鲜百合地黄粉组和盐酸氯米帕明组均可显著使大鼠脾脏脾小节增大P001、使脾脏皮质淋巴细胞数均显著增多P001。以小剂量鲜百合地黄粉组对脾脏萎缩的拮抗作用为好。P001。01353结论0136由上述试验表明，综合运用应激和孤养两种经典方法，利用长期不可预见性的应激，。

34、造成孤养动物抑郁状态。并用本发明药物试验对慢性应激大鼠抑郁模型血浆SOD活力、说明书CN104208383A1312/12页14脑中单胺类递质5HT、NE、DA含量有明显影响。与模型组比较，可提高SOD活力，显著增加脑递质含量。实验提示，鲜百合地黄粉的抗抑郁作用可能与提高机体清除自由基、抗氧化能力与增加脑中单胺类神经递质5HT，NE，DA含量有关。0137鲜百合地黄粉各剂量组对慢性应激大鼠造模过程中胸腺、脾脏出现的损伤具有不同程度的改善作用。提示鲜百合地黄粉抗抑郁作用可能是通过提高大鼠机体免疫力来实现的。0138实验证明，与空白对照相比，模型组大鼠水平穿越格数、站立次数、蔗糖溶液消耗量均显著减。

35、少，第三周时大鼠体重明显减少。这些表现说明动物表现出抑郁状态、兴趣丧失和快感缺乏，与抑郁症临床诊断中的精神运动改变、兴趣或快感的丧失有一定程度的相似性，提示大鼠抑郁模型的复制是成功的。结果表明，与模型组相比，鲜百合地黄粉各组大鼠的水平穿越格数、站立次数、蔗糖溶液消耗量、大鼠体重均有增加，说明鲜百合地黄粉可以改善慢性应激大鼠的抑郁症状，具有抗抑郁作用。并经临床应用取得了未预料的有益技术效果。0139二、临床试验0140经对158例患有轻度慢性应激抑郁症的患者用本发明鲜百合地黄粉进行治疗，每天临床用量按120G/60KG，即人体每60KG重，每天用量为120G，可早晚各服一次，每次各20G，经30天后评定疗效，统计证明，在158例患者中，只有1人其抑郁症没有得到明显改善或改善，其余都有不同程度的症状改善，生活质量有了不同程度的提高和改善，有效率高达99以上，其效果之好，是原未曾料到的。0141总之，由上述试验可以清楚的看出，本发明的鲜百合地黄粉制备方法简单，原料丰富，开拓了鲜百合、鲜地黄组合物的药用价值，实现了鲜百合地黄粉在制备治疗慢性应激抑郁症药物中的应用，是治疗慢性应激抑郁症药物上的创新，经济和社会效益巨大。说明书CN104208383A14。