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1、10申请公布号CN104312714A43申请公布日20150128CN104312714A21申请号201410577379222申请日20141027C11B1/0020060171申请人南京帝道农业科技有限公司地址211225江苏省南京市溧水区白马镇工业集中区72发明人刘东锋杨成东54发明名称一种双花千里光挥发油的提取方法57摘要本发明公开了一种双花千里光挥发油的提取方法。该制备方法包括以干燥的双花千里光花为原料，粉碎，过20目筛，采用生物酶进行发酵35天；将发酵后的原料加入35倍的7080的乙醇溶液，采用双频超声波进行萃取，超声频率为20KHZ、40KHZ，功率为500600W，于60。
2、70连续提取23H，过滤，滤液于旋转蒸发仪中浓缩至无醇味，有机溶剂萃取23次，合并滤液，无水硫酸钠干燥脱水，减压浓缩，即得双花千里光挥发油。本发明采用生物酶发酵预处理结合双频超声法提取双花千里光挥发油，工艺简单、提取时间短、耗能小，且挥发油的得率显著高于传统提取法，适用于工业化生产。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104312714ACN104312714A1/1页21一种双花千里光挥发油的提取方法，其特征在于，包括如下步骤以干燥的双花千里光花为原料，粉碎，过20目筛，加入原料23的生物酶，混合均匀。
3、，喷洒与原料等量的PH为4555的醋酸/醋酸钠缓冲溶液，薄膜包裹，于5060发酵35天；将发酵后的原料加入35倍的7080的乙醇溶液，采用双频超声波进行萃取，超声频率为20KHZ、40KHZ，功率为500600W，于6070连续提取23H，过滤，滤液于旋转蒸发仪中浓缩至无醇味，有机溶剂萃取23次，合并滤液，无水硫酸钠干燥脱水，减压浓缩，即得双花千里光挥发油。2根据权利要求1所述的一种双花千里光挥发油的提取方法，其特征在于，所述的生物酶为质量比为21的纤维素酶与半纤维素酶，其酶的活性为4060U/MG。3根据权利要求1所述的一种双花千里光挥发油的提取方法，其特征在于，所述的超声功率为双频超声20。
4、KHZ与40KHZ作用时总功率各取一半。4根据权利要求1所述的一种双花千里光挥发油的提取方法，其特征在于，所述的萃取溶剂为乙醚、石油醚或环己烷中的一种。权利要求书CN104312714A1/2页3一种双花千里光挥发油的提取方法技术领域0001本发明涉及一种双花千里光挥发油的提取方法，具体涉及一种生物酶发酵辅助双频超声提取双花千里光挥发油的方法。背景技术0002西藏药用植物双花千里光为一种菊科千里光属的多年生草本植物，具有清热解毒的特效。近年来一些藏族同胞将双花千里光用作美容，效果良好。千里光属植物种类较多，文献显示目前对其研究主要集中在倍半萜及水溶性生物碱方面，以及其挥发油的化学成分，而对其挥。
5、发油的提取方法研究较少。双花千里光的花精油所含化学成分较多，主要为单萜、倍半萜和脂肪酸及其酯，包括异薄荷脑、桉油醇、薄荷烯醇、棕榈酸甲酯、棕榈酸、亚油酸甲酯、亚油酸等。0003挥发油是中药中的一类有效成分，现有的挥发油的提取方法主要有水蒸气蒸馏法。这些方法存在提取率低、溶剂消耗多、成本高、易造成环境污染等问题。而水蒸气蒸馏法是挥发油提取最常用的方法，它具备设备要求简单、操作简单等优点，在植物挥发油的提取中应用广泛。但是水蒸气蒸馏法的不足之处是提取温度较高、耗时较长，容易使挥发油中对湿热不稳定和易氧化的化学成分发生分解。0004经文献检索，未见与本发明相同的的公开文献报道。发明内容0005本发明。
6、的目的在于提供一种双花千里光挥发油的制备方法，本发明工艺简单、提取率高、溶剂用量少且易于回收。0006本发明是通过如下技术方案完成的以干燥的双花千里光花为原料，粉碎，过20目筛，加入原料23的生物酶，混合均匀，喷洒与原料等量的PH为4555的醋酸/醋酸钠缓冲溶液，薄膜包裹，于5060发酵35天；将发酵后的原料加入35倍的7080的乙醇溶液，采用双频超声波进行萃取，超声频率为20KHZ、40KHZ，功率为500600W，于6070连续提取23H，过滤，滤液于旋转蒸发仪中浓缩至无醇味，有机溶剂萃取23次，合并滤液，无水硫酸钠干燥脱水，减压浓缩，即得双花千里光挥发油。0007所述的生物酶为质量比为2。
7、1的纤维素酶与半纤维素酶，其酶的活性为4060U/MG。0008所述的超声功率为双频超声20KHZ与40KHZ作用时总功率各取一半。0009所述的萃取溶剂为乙醚、石油醚或环己烷中的一种。0010本发明的有益效果在于利用复合酶采用自然发酵法，有效地破坏了植物的细胞结构，减少了细胞内成分溶出的屏障；双频超声提取减少了驻波所造成的死角，充分利用超声的空化效应、热效应和机械振动等作用，加速了有效成分进入溶剂，提高提取率，缩短提取时间，简化了操作步骤。说明书CN104312714A2/2页40011下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。0012具体实施方式。
8、实施例1以干燥的双花千里光花为原料，粉碎，过20目筛，取1KG粉末，加入原料2的生物酶（纤维素酶与半纤维素酶的质量比为21，其活性为40U/MG），混合均匀，喷洒与原料等量的PH为45的醋酸/醋酸钠缓冲溶液，薄膜包裹，于50发酵3天；将发酵后的原料加入3倍的70的乙醇溶液，采用双频超声波进行萃取，超声频率为20KHZ、40KHZ，功率为500W，于60连续提取2H，过滤，滤液于旋转蒸发仪中浓缩至无醇味，石油醚萃取2次，合并滤液，无水硫酸钠干燥脱水，减压浓缩，即得淡黄色的双花千里光挥发油191ML。0013实施例2以干燥的双花千里光花为原料，粉碎，过20目筛，取1KG粉末，加入原料25的生物酶（。
9、纤维素酶与半纤维素酶的质量比为21，其活性为60U/MG），混合均匀，喷洒与原料等量的PH为50的醋酸/醋酸钠缓冲溶液，薄膜包裹，于60发酵5天；将发酵后的原料加入5倍的75的乙醇溶液，采用双频超声波进行萃取，超声频率为20KHZ、40KHZ，功率为600W，于70连续提取3H，过滤，滤液于旋转蒸发仪中浓缩至无醇味，乙醚萃取3次，合并滤液，无水硫酸钠干燥脱水，减压浓缩，即得淡黄色的双花千里光挥发油224ML。0014实施例3以干燥的双花千里光花为原料，粉碎，过20目筛，取1KG粉末，加入原料3的生物酶（纤维素酶与半纤维素酶的质量比为21，其活性为50U/MG），混合均匀，喷洒与原料等量的PH为55的醋酸/醋酸钠缓冲溶液，薄膜包裹，于55发酵4天；将发酵后的原料加入4倍的80的乙醇溶液，采用双频超声波进行萃取，超声频率为20KHZ、40KHZ，功率为600W，于65连续提取3H，过滤，滤液于旋转蒸发仪中浓缩至无醇味，环己烷萃取3次，合并滤液，无水硫酸钠干燥脱水，减压浓缩，即得淡黄色的双花千里光挥发油183ML。说明书CN104312714A。