楮头红提取物及其应用.pdf

本发明公开了一种楮头红提取物，取楮头红全草，粉碎后用95％乙醇提取六次，每次1周，过滤，浓缩得到浸膏。该提取物可应用于保肝降酶的药物中。本发明的楮头红提取物可以广泛的影响各种细胞因子水平，通过调节细胞因子网络的平衡来实现保肝降酶的药理活性，为其临床应用提供科学依据。

权利要求书1.  一种楮头红提取物，其特征在于，取楮头红全草，粉碎后用95％乙醇提取六次，每次1周，过滤，浓缩得到浸膏。2.  如权利要求1所述的楮头红提取物，其特征在于：取所述浸膏加水稀释，用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取，得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水溶物；所述石油醚萃取物用硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯系统梯度洗脱，分离纯化，重结晶得到化合物3、化合物4、化合物9、化合物11和化合物17；所述乙酸乙酯萃取物用硅胶柱层析，以氯仿-甲醇系统梯度洗脱，分离纯化，重结晶得到化合物1、化合物2、化合物5、化合物6、合物7、化合物8、化合物10、化合物16和化合物18；所述正丁醇萃取物包括化合物12、化合物15和化合物20；所述水溶物包括化合物13、化合物14、化合物19、化合物21、化合物22、化合物23、化合物24、化合物25、化合物26和化合物27；所述化合物结构如下3.  一种药物或药物组合，其特征在于，所述药物或药物组合包括如权利要求1所述楮头提取物。4.  如权利要求3所述的药物或药物组合，其特征在于，所述药物或药物用于保肝降酶，抑制肝损伤。5.  如权利要求4所述的药物或药物组合，其特征在于，所述药物、药物组合和护理用品包括加入药剂学允许的各种辅料制成的片剂、丸剂、胶囊剂、口服液、注射液和粉针剂。

说明书楮头红提取物及其应用
技术领域
本发明属于化学领域，具体涉及一种楮头红提取物及其应用。
背景技术
楮头红(Sarcopyramis nepalensis Wall.)，又名尼泊尔肉穗草、风鼓斗草(风柜斗草)，属于野牡丹科(Melastomaceae)中的肉穗草属(Sarcopyramis Wall1)。主要分布于东南亚和我国的四川、云南、湖北、广西、广东、江西、台湾、福建等地。据《中药大词典》记载：楮头红全草可药用，具有清热解毒、清肝泻火之效，是治疗急性肝炎、肺热咳嗽、蛇头疔、无名肿毒、胃肠炎等疾病的珍稀名贵中草药。对急性肝炎(甲肝、乙肝急性期)疗效最佳，对慢性肝炎及乙肝病毒携带者有效，在福建、湖北等民间广为使用，是一种极有价值的天然药用植物和中草药资源。对该植物的化学成分、药理活性、药效关系等的研究目前尚未见系统报道。为了解其含有的主要化学成分及保肝降酶物质基础，本课题组开展了如下实验研究，以期为临床用药提供科学依据。
发明内容
本发明的目的之一是为解决楮头红的化学成分研究不多以及生物活性方面的问题，提供一种楮头红提取物及其应用。
本发明提供一种楮头红提取物，取楮头红全草，粉碎后用95％乙醇提取六次，每次1周，过滤，浓缩得到浸膏。
进一步的，取所述浸膏加水稀释，用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取，得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水溶物；
所述石油醚萃取物用硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯系统梯度洗脱，分离纯化，重结晶得到化合物3、化合物4、化合物9、化合物11和化合物17；
所述乙酸乙酯萃取物用硅胶柱层析，以氯仿-甲醇系统梯度洗脱，分离纯化，重结晶得到化合物1、化合物2、化合物5、化合物6、合物7、化合物8、化合物10、化合物16和化合物18；
所述正丁醇萃取物包括化合物12、化合物15和化合物20；
所述水溶物包括化合物13、化合物14、化合物19、化合物21、化合物22、化合物23、化合物24、化合物25、化合物26和化合物27；
所述化合物结构如下




进一步的，所述药物或药物组合包括上述楮头红提取物。
进一步的，所述药物或药物用于保肝降酶，抑制肝损伤。
进一步的，所述药物、药物组合和护理用品包括加入药剂学允许的各种辅料制成的片剂、丸剂、胶囊剂、口服液、注射液和粉针剂。
本发明的有益效果在于：本发明的楮头红提取物可以广泛的影响各种细胞因子水平，通过调节细胞因子网络的平衡来实现保肝降酶的药理活性，为其临床应用提供科学依据。
具体实施方式
下文将结合具体实施例详细描述本发明。应当注意的是，下述实施例中描述的技术特征或者技术特征的组合不应当被认为是孤立的，它们可以被相互组合从而达到更好的技术效果。
本发明提供一种楮头红提取物，取楮头红全草，粉碎后用95％乙醇提取六次，每次1周，过滤，浓缩得到浸膏。
取所述浸膏加水稀释，用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取，得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水溶物；
石油醚萃取物用硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯系统梯度洗脱，分离纯化，重结晶得到化合物3、化合物4、化合物9、化合物11和化合物17；
乙酸乙酯萃取物用硅胶柱层析，以氯仿-甲醇系统梯度洗脱，分离纯化，重结晶得到化合物1、化合物2、化合物5、化合物6、合物7、化合物8、化合物10、化合物16和化合物18；
正丁醇萃取物包括化合物12、化合物15和化合物20；
水溶物包括化合物13、化合物14、化合物19、化合物21、化合物22、化合物23、化合物24、化合物25、化合物26和化合物27；
所述化合物结构如下




总膏急性毒性观察
普通级昆明小鼠40只，22-25g，雌雄各半，适应性喂养1周后，给药前禁食12小时，随即分配到4个剂量组考察褚头红的急性口服毒性试验，每组10只，雌雄各半。按照剂量5mg/kg、50mg/kg、500mg/k、5000mg/kg，灌胃，观察2周内动物的饮食，活动，毛泽及存亡等情况。
造模
CCl4所致小鼠急性肝损伤模型的建立
CCl4油溶液的配制
精密量取0.2mL CCl4，以等量递加法加入100mL大豆油，充分搅拌均匀，配成0.2％CCl4溶液。
水飞蓟索混悬液的配制
取益肝灵片(38.5mg/片)，研碎，以适量蒸馏水配制成20.0mg/mL备用。
急性肝损伤模型的建立
取雄性小鼠30只，随机分为正常组、模型组、水飞蓟素组。水飞蓟素组在造模前以20.0mg/mL、0.1mL/10g体重灌胃，每天1次，连续10d。正常组和模型组均灌胃等体积生理盐水，于末次给药后1h，除空白组外，其余各组小鼠均腹腔注射0.2％CCl4油溶液0.1mL/10g体重。正常组腹腔注射等体积大豆油。采血前禁食不禁水12h，于腹腔注射24h后眼眶取血，静置2h后，以3000r/min离心15min，取上层血清。赖氏法测定血清中谷丙转氨(GPT/ALT) 和血清谷草转氨酶(GOT/AST)活性并摘取肝脏，用10％甲醛溶液固定，HE染色，做病理切片检查。
楮头红不同极性部位保肝降酶活性筛选
取雄性小鼠80只，随机分成正常对照组，病理模型对照，水飞蓟素组，石油醚部位给药组，乙酸乙酯部位给药组，正丁醇部位给药组，水部位给药组，总膏给药组共8组。正常对照组和模型对照组每天灌胃给予同等体积0.5％吐温-80溶液；水飞蓟素组每天灌胃给予200mg/kg/d水飞蓟素，其余组给药剂量折算为生药材均为10g/kg小鼠体重，连续给药10天，第10天给药1小后，正常对照组腹腔注射同等体积大豆油，其他组均腹腔注射0.2％CCl4油溶液，采血前禁食不禁水12h，于腹腔注射24h后眼眶取血，静置2h后，以3000r/min离心15min，取上层血清。赖氏法测定血清中谷丙转氨酶(GPT/ALT)活性和血清谷草转氨酶(GOT/AST)并摘取肝脏，用10％甲醛溶液固定，HE染色，做病理切片检查。
实验结果
总膏急性毒性观察结果
灌胃给药后动物外观和行为表现正常，4个剂量均无任何毒性反应，无-中毒死亡。结果表明在剂量高达5000mg/kg时仍无任何毒性反应，认为该方法提取的褚头红的总膏毒性级别非常低或无毒，口服安全。
腹腔注射CCl4 24h后，病理模型组大鼠血清中ALT和AST两种转氨酶的显著升高，肝脏切片HE染色显示典型四氯化碳中毒的病理变化，主要表现为弥漫性肝小叶中心带中间带肝细胞气球样病变伴小叶中心管肝细胞胞浆凝聚。而正常组动物血清转氨酶正常，肝细胞结构完整，肝小叶清晰可见。病理模型组与正常对照组比较有显著性差异，说明本实验造模成功。结果见表2.1
表2.1不同处理组对小鼠血清AST，ALT的影响(n＝10，)

*p≤0.05与正常对照比较.
Δp≤0.05与模型对照比较
楮头红不同极性部位保肝降酶活性筛选结果见表2.2，其HE染色结果见附录一，结果初步显示在同等生药剂量条件下，总膏和正丁醇部位有一定对抗CCl4所致急性肝损伤的作用。
楮头红不同极性部位保肝降酶活性筛选结果()

*p≤0.05与正常对照比较.
Δp≤0.05与模型对照比较
本发明的楮头红提取物可以广泛的影响各种细胞因子水平，通过调节细胞因子网络的平衡来实现保肝降酶的药理活性，为其临床应用提供科学依据。
本文虽然已经给出了本发明的一些实施例，但是本领域的技术人员应当理解，在不脱离本发明精神的情况下，可以对本文的实施例进行改变。上述实施例只是示例性的，不应以本文的实施例作为本发明权利范围的限定。