CN200410037769.7
2004.05.12
CN1568678A
2005.01.26
驳回
无权
发明专利申请公布后的驳回|||实质审查的生效|||公开
A01K61/00
中国水产科学研究院黄海水产研究所;
刘淇; 李健; 王群; 刘忠强; 殷帮忠
266071山东省青岛市市南区南京路106号
北京英特普罗知识产权代理有限公司
马东晓
一种鱼类疫苗的浸泡免疫接种方法，采用在密闭容器中充入纯氧的方式，提高鱼类浸泡免疫接种密度，降低疫苗用量，提高被接种鱼类养殖成活率。以牙鲆为例，采用本发明鱼类疫苗浸泡免疫接种方法可比在养殖池浸泡法减少疫苗用量94.80％，比大桶浸泡法减少疫苗用量75.02％；免疫保护率提高11.2％。
1、一种鱼类疫苗的浸泡免疫接种方法，其特征在于：将配制好的疫苗溶液倒 入接种容器中，再将待接种的鱼苗放入该容器，充入相当于疫苗溶液体积的 0.5～4倍的纯氧，然后密封该容器，浸泡待接种鱼苗1～120分钟。 2、根据权利要求1所述的一种鱼类疫苗的浸泡免疫接种方法，其特征在于： 所述的接种容器可以是可充氧的普通塑料袋或充氧袋或可密封水桶。 3、根据权利要求1所述的一种鱼类疫苗的浸泡免疫接种方法，其特征在于： 所充入的氧气可以是工业级或者医用级纯氧，也可以是纯度不低于98％的氧 气。 4、根据权利要求1所述的一种鱼类疫苗的浸泡免疫接种方法，其特征在于： 充入纯氧时可以先将充气头浸入疫苗溶液中，充气0.5～3分钟，排出溶液和 容器中的空气，再将接种容器密封充氧。 5、根据权利要求1所述的一种鱼类疫苗的浸泡免疫接种方法，其特征在于： 对待接种鱼苗浸泡接种时，可以将密封的接种容器置于无阳光直射的避光阴 凉处。
一种鱼类疫苗的浸泡免疫接种方法技术领域 本发明属于水产领域，涉及一种鱼类疫苗的免疫接种方法，具体地说涉及 一种鱼类疫苗的浸泡免疫接种方法。 背景技术 随着我国集约化和规模化的水产类养殖业的快速发展，鱼类病害也日益频 繁发生，给鱼类养殖业造成很大的经济损失。为了预防和控制鱼类疾病的发生， 渔用药物和疫苗被广泛使用。其中，渔用药物主要是各种抗生素，但采用抗生 素等药物在水产养殖中已经越来越受到限制；而疫苗免疫具有免疫时间长、无 药物残留以及安全卫生等优点，目前已经成为未来鱼类病害防治的发展方向。 目前，鱼类疫苗的免疫接种方式有注射、浸泡、口服、喷雾四种，其中浸 泡免疫接种方式因为操作方便、免疫效果良好而受到普遍欢迎。但浸泡免疫接 种的方式普遍采用在养殖池(面积一般在几十平方米)或大桶(面积一般在1 平方米左右)中进行，造成疫苗使用量很大，存在着极大地增加了成本、且免 疫效果不稳定的缺点。 发明内容 本发明的目的是针对现有的疫苗浸泡免疫接种方法的缺点，提供一种能够 大大减少疫苗用量而且免疫效果更好的高密度疫苗浸泡免疫接种方法。 本发明的理论基础是：影响鱼类密度的主要因素为溶解氧的含量，因而在 本发明中采用纯氧代替空气，使得水体中溶解氧浓度大大提高，从而大大提高 浸泡免疫接种时的鱼类密度、减少疫苗用量。同时由于充入纯氧后将容器密封， 使得水体中压力增加，有利于水体中疫苗的有效成分进入鱼体，从而提高了免 疫接种效果。 本发明鱼类疫苗浸泡免疫接种方法是这样实现的： 将配制好的疫苗溶液倒入接种容器中，再将待接种的鱼苗放入该容器，然 后密封该容器，充入相当于疫苗溶液体积的0.5～4倍的纯氧，浸泡待接种鱼苗 1～120分钟。 其中，接种容器可以是可充氧的普通塑料袋或充氧袋或可密封水桶。 所充入的氧气可以是工业级或者医用级纯氧，也可以是纯度不低于98％的 氧气。 充入纯氧时可以先将充气头浸入疫苗溶液中，充气0.5～3分钟，排出溶液和 容器中的空气，再将接种容器密封充氧。 对待接种鱼苗浸泡接种时，可以将密封的接种容器置于无阳光直射的避光 阴凉处。 由于采用本发明鱼类疫苗浸泡免疫接种方法可使疫苗的用量大大减少，而 且免疫效果显著提高，且具有降低成本、提高养殖成活率的效果，使养殖业者 的经济效益明显提高，因此本发明具有良好的应用前景。以牙鲆为例，采用本 发明高密度鱼类疫苗浸泡免疫接种方法可比在养殖池浸泡法减少疫苗用量 94.80％，比大桶浸泡法减少疫苗用量75.02％；免疫保护率提高11.2％。本发明同 样适用于大菱鲆、真鲷、鲈鱼等海水鱼和草鱼、鲢鱼、罗非鱼等淡水鱼。 具体实施方式 下面以牙鲆鱼苗的浸泡免疫接种作为具体的实施方式之一来详细说明本发 明鱼类疫苗浸泡免疫接种方法。 (1)鱼苗选择：选择2～20cm规格的健康牙鲆，剔除正处于患病期间的鱼苗进 行免疫接种，接种前牙鲆鱼苗应至少停食12小时。 (2)疫苗配制：按疫苗使用说明书要求，用干净的养殖用海水配制疫苗，疫苗 的使用浓度为0.1％～10％。配制后疫苗溶液应尽快使用，存放时间不应超过6 小时。 (3)接种：将配制好的疫苗溶液倒入充氧袋中，使疫苗溶液体积占充氧袋有效 容积的5％～50％，将牙鲆鱼苗放入疫苗溶液中，每升疫苗溶液中牙鲆鱼苗的数 量控制在4～100尾(根据鱼苗规格大小可适当调整)。 (4)充氧：将充气头浸入疫苗溶液中，充入工业级纯氧1分钟，将疫苗溶液和 充氧袋中的空气排出，最后将充氧袋中充满纯氧，扎紧袋口。 (5)浸泡：将充氧袋放置于无阳光直射的阴凉地方5～30分钟后，将牙鲆鱼苗 轻轻捞出放入养殖池，按常规方式养殖。 下面结合实验数据对本实施例进一步说明： 表一为不同浸泡方式下水体中的溶解氧含量比较表。 表二为不同浸泡方式下每万尾牙鲆的疫苗用量比较表。 表三为不同浸泡方式下疫苗的免疫保护率比较表。 表一 浸泡方式 养殖池 大桶(箱) 充氧袋 溶解氧(mg/L) 7～8 7～8 17～19 如上表所示，在本发明所使用的充氧袋中溶解氧含量明显高于其它两种方 式。由于溶解氧的提高，使得浸泡疫苗时牙鲆鱼苗的密度可以大大提高，同时 可以降低浸泡时的水深，从而达到减少疫苗用量的目的。 表二 浸泡方式 养殖池 大桶(箱) 充氧袋高密度 浸泡时条件 底面积16m2， 水深0.2m，每次浸 泡5000尾牙鲆 底面积0.2m2， 水深0.2m，每次 浸泡300尾牙鲆 底面积0.1m2， 水深0.1m，每次 浸泡300尾牙鲆 所需水体(L) 6400 1333 333 疫苗用量(L) 64 13.33 3.33 注：以上数据是以牙鲆鱼苗规格为6～8cm情况下浸泡免疫1万尾牙鲆鱼苗为基准计算的，其中疫苗原液的 浓度为1×1010CFU/ml，疫苗的使用浓度为1％。 如上表所示，使用本发明鱼类疫苗浸泡免疫方法疫苗用量仅为养殖池浸泡 法的5.20％，为大桶浸泡法的24.98％。极大地降低了疫苗的使用量，降低了成本， 经济效益显著。 表三 浸泡方式 养殖池 大桶(箱) 充氧袋高密度 免疫保护率(％) 44.4 44.4 55.6 注：免疫保护率是在浸泡免疫27天时进行人工攻毒试验测定的。 如上表所示，使用本发明鱼类疫苗浸泡免疫方法牙鲆的免疫保护率提高了 11.2％。
技术领域
本发明属于水产领域，涉及一种鱼类疫苗的免疫接种方法，具体地说涉及 一种鱼类疫苗的浸泡免疫接种方法。
背景技术
随着我国集约化和规模化的水产类养殖业的快速发展，鱼类病害也日益频 繁发生，给鱼类养殖业造成很大的经济损失。为了预防和控制鱼类疾病的发生， 渔用药物和疫苗被广泛使用。其中，渔用药物主要是各种抗生素，但采用抗生 素等药物在水产养殖中已经越来越受到限制；而疫苗免疫具有免疫时间长、无 药物残留以及安全卫生等优点，目前已经成为未来鱼类病害防治的发展方向。
目前，鱼类疫苗的免疫接种方式有注射、浸泡、口服、喷雾四种，其中浸 泡免疫接种方式因为操作方便、免疫效果良好而受到普遍欢迎。但浸泡免疫接 种的方式普遍采用在养殖池(面积一般在几十平方米)或大桶(面积一般在1 平方米左右)中进行，造成疫苗使用量很大，存在着极大地增加了成本、且免 疫效果不稳定的缺点。
发明内容
本发明的目的是针对现有的疫苗浸泡免疫接种方法的缺点，提供一种能够 大大减少疫苗用量而且免疫效果更好的高密度疫苗浸泡免疫接种方法。
本发明的理论基础是：影响鱼类密度的主要因素为溶解氧的含量，因而在 本发明中采用纯氧代替空气，使得水体中溶解氧浓度大大提高，从而大大提高 浸泡免疫接种时的鱼类密度、减少疫苗用量。同时由于充入纯氧后将容器密封， 使得水体中压力增加，有利于水体中疫苗的有效成分进入鱼体，从而提高了免 疫接种效果。
本发明鱼类疫苗浸泡免疫接种方法是这样实现的：
将配制好的疫苗溶液倒入接种容器中，再将待接种的鱼苗放入该容器，然 后密封该容器，充入相当于疫苗溶液体积的0.5～4倍的纯氧，浸泡待接种鱼苗 1～120分钟。
其中，接种容器可以是可充氧的普通塑料袋或充氧袋或可密封水桶。
所充入的氧气可以是工业级或者医用级纯氧，也可以是纯度不低于98％的 氧气。
充入纯氧时可以先将充气头浸入疫苗溶液中，充气0.5～3分钟，排出溶液和 容器中的空气，再将接种容器密封充氧。
对待接种鱼苗浸泡接种时，可以将密封的接种容器置于无阳光直射的避光 阴凉处。
由于采用本发明鱼类疫苗浸泡免疫接种方法可使疫苗的用量大大减少，而 且免疫效果显著提高，且具有降低成本、提高养殖成活率的效果，使养殖业者 的经济效益明显提高，因此本发明具有良好的应用前景。以牙鲆为例，采用本 发明高密度鱼类疫苗浸泡免疫接种方法可比在养殖池浸泡法减少疫苗用量 94.80％，比大桶浸泡法减少疫苗用量75.02％；免疫保护率提高11.2％。本发明同 样适用于大菱鲆、真鲷、鲈鱼等海水鱼和草鱼、鲢鱼、罗非鱼等淡水鱼。
具体实施方式
下面以牙鲆鱼苗的浸泡免疫接种作为具体的实施方式之一来详细说明本发 明鱼类疫苗浸泡免疫接种方法。
(1)鱼苗选择：选择2～20cm规格的健康牙鲆，剔除正处于患病期间的鱼苗进 行免疫接种，接种前牙鲆鱼苗应至少停食12小时。
(2)疫苗配制：按疫苗使用说明书要求，用干净的养殖用海水配制疫苗，疫苗 的使用浓度为0.1％～10％。配制后疫苗溶液应尽快使用，存放时间不应超过6 小时。
(3)接种：将配制好的疫苗溶液倒入充氧袋中，使疫苗溶液体积占充氧袋有效 容积的5％～50％，将牙鲆鱼苗放入疫苗溶液中，每升疫苗溶液中牙鲆鱼苗的数 量控制在4～100尾(根据鱼苗规格大小可适当调整)。
(4)充氧：将充气头浸入疫苗溶液中，充入工业级纯氧1分钟，将疫苗溶液和 充氧袋中的空气排出，最后将充氧袋中充满纯氧，扎紧袋口。
(5)浸泡：将充氧袋放置于无阳光直射的阴凉地方5～30分钟后，将牙鲆鱼苗 轻轻捞出放入养殖池，按常规方式养殖。
下面结合实验数据对本实施例进一步说明：
表一为不同浸泡方式下水体中的溶解氧含量比较表。
表二为不同浸泡方式下每万尾牙鲆的疫苗用量比较表。
表三为不同浸泡方式下疫苗的免疫保护率比较表。
表一 浸泡方式 养殖池 大桶(箱) 充氧袋 溶解氧(mg/L) 7～8 7～8 17～19
如上表所示，在本发明所使用的充氧袋中溶解氧含量明显高于其它两种方 式。由于溶解氧的提高，使得浸泡疫苗时牙鲆鱼苗的密度可以大大提高，同时 可以降低浸泡时的水深，从而达到减少疫苗用量的目的。
表二 浸泡方式 养殖池 大桶(箱) 充氧袋高密度 浸泡时条件 底面积16m2， 水深0.2m，每次浸 泡5000尾牙鲆 底面积0.2m2， 水深0.2m，每次 浸泡300尾牙鲆 底面积0.1m2， 水深0.1m，每次 浸泡300尾牙鲆 所需水体(L) 6400 1333 333 疫苗用量(L) 64 13.33 3.33
注：以上数据是以牙鲆鱼苗规格为6～8cm情况下浸泡免疫1万尾牙鲆鱼苗为基准计算的，其中疫苗原液的 浓度为1×1010CFU/ml，疫苗的使用浓度为1％。
如上表所示，使用本发明鱼类疫苗浸泡免疫方法疫苗用量仅为养殖池浸泡 法的5.20％，为大桶浸泡法的24.98％。极大地降低了疫苗的使用量，降低了成本， 经济效益显著。
表三 浸泡方式 养殖池 大桶(箱) 充氧袋高密度 免疫保护率(％) 44.4 44.4 55.6
注：免疫保护率是在浸泡免疫27天时进行人工攻毒试验测定的。 如上表所示，使用本发明鱼类疫苗浸泡免疫方法牙鲆的免疫保护率提高了 11.2％。
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一种鱼类疫苗的浸泡免疫接种方法，采用在密闭容器中充入纯氧的方式，提高鱼类浸泡免疫接种密度，降低疫苗用量，提高被接种鱼类养殖成活率。以牙鲆为例，采用本发明鱼类疫苗浸泡免疫接种方法可比在养殖池浸泡法减少疫苗用量94.80，比大桶浸泡法减少疫苗用量75.02；免疫保护率提高11.2。。
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