盐酸雷洛昔芬在制备治疗骨折迟缓愈合或不愈合症的药物中的应用.pdf

本发明涉及盐酸雷洛昔芬在制备治疗骨折迟缓愈合或不愈合症的药物中的应用。所述的治疗骨折迟缓愈合或不愈合症的药物可以为片剂、胶囊、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、溶液或持续释放的剂型。本发明采用盐酸雷洛昔芬治疗骨折延缓愈合和不愈合症具有疗程短、治愈率高、适用范围广、病人无明显痛苦、医疗费用低、后遗症少和使用方便、安全等一系列优点。

1.  盐酸雷洛昔芬在制备治疗骨折迟缓愈合或不愈合症的药物中的应用，所述的盐酸雷洛昔芬，其化学名称为：2-(4-羟基苯基)-3-{4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯甲酰基}-6-羟基苯并[b]噻吩盐酸盐，分子式：C₂₈H₂₇NO₄S·HCl，分子量：510.05，其分子结构式为：


2.  根据权利要求1所述的用途，其中所述的治疗骨折迟缓愈合或不愈合症的药物可以为片剂、胶囊、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、溶液或持续释放的剂型。

3.  根据权利要求1，2所述的用途，其中所述的治疗骨折迟缓愈合或不愈合症的药物为片剂，按该片剂的总重量计，其包含35％-45％盐酸雷洛昔芬，50％-60％稀释剂，2％-4％的崩解剂，0.5％-1％润滑剂和2％-3％的粘合剂。

- 盐酸雷洛昔芬在制备治疗骨折迟缓愈合或不愈合症的药物中的应用
技术领域
本发明涉及盐酸雷洛昔芬在制备治疗骨折迟缓愈合或不愈合症的药物中的应用。
背景技术
在日常生活中，经常由于意外的跌打损伤而造成骨折、骨列和软组织损伤等。骨折的愈合是比较困难的，新鲜骨折自然愈合需要2-3个月的时间，而对于陈旧性骨折、开放性骨折易出现迟缓愈合或甚至不愈合的现象。特别是由一般性骨折导致的长期不愈合性骨折或骨坏死，又实属多见，往往造成病员的终生残疾，这些问题是现代骨科学中的世界性疑难症之一。目前国内外治疗骨折迟缓愈合和不愈合症的方法主要有手术植骨和电刺激法两种，它们均系外科疗法即非药物疗法，而且都存在疗程长、治疗率低、病人痛苦大、医疗费用高等缺点。我国中医在此方面也作了许多研究，北京同仁堂制药厂生产的“七厘散”对骨折愈合有促进的作用，但仍存在愈合时间太长的缺陷。中国杭州市第三人民医院研制成功了一种“骨折愈合刺激素”的药物，用于骨折断端局部注射，对新鲜骨折，能缩短愈合时间1/3-1/2，对陈旧性骨折，包括延迟愈合和不愈合，总治愈率高达88.97％。虽然该药物疗效显著，但由于在该制剂中采用了防腐剂抑菌，导致了该药物的副作用，即引起患者的局部刺激、疼痛，而且该药物的价格昂贵。因此人们仍在不断研究和开发更好的药物来治疗骨折延缓愈合或不愈合症。
发明内容
本发明人在研究治疗骨折延缓愈合或不愈合症的过程中发现盐酸雷洛昔芬能促进骨折的快速愈合，对骨折迟缓愈合和不愈合症特别有效。
因此，本发明的目的就是提供盐酸雷洛昔芬在制备治疗骨折迟缓愈合或不愈合症的药物中的应用。
本发明还提供了包含盐酸雷洛昔芬的各种药物组合物，包括片剂、胶囊、悬浮剂、粉剂、颗粒剂，溶液、缓释剂等。
盐酸雷洛昔芬，其化学名称为：2-(4-羟基苯基)-3-{4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯甲酰基}-6-羟基苯并[b]噻吩盐酸盐，分子式：C₂₈H₂₇NO₄S·HCl，分子量：510.05，其分子结构式为：

盐酸雷洛昔芬最早是作为雌性激素受体选择性调节剂，可降低吸收，减少代谢的生化指标，其于1997年12月获美国FDA批准，1998年1月在美国上市。
目前，本发明人对盐酸雷洛昔芬能促进骨折快速愈合的机理还不太清楚。据分析，可能是盐酸雷洛昔芬促进了骨折处及附近骨外膜生发层内前成骨细胞、成骨细胞暴发性同步增殖；促进了软骨细胞增殖、分裂、使软骨细胞的数量骤增；促进骨髓细胞DNA合成作用。
盐酸雷洛昔芬可用已知的方法制备，例如用美国专利4133814和4418068详述的方法制备。通常，该方法由带6-羟基和2-(4-羟苯基)基团的苯并噻吩开始，该起始化合物被保护、烷基化和脱保护，最终形成盐酸雷洛昔芬。关于盐酸雷洛昔芬(1)的合成途径，国外文献报道了以下一种合成路线：即以α-溴对甲氧基苯乙酮和间甲氧基苯硫酚为起始原料，在强碱氢氧化钾存在下发生缩合反应，得到4-甲氧基-α-[(3-甲氧基苯基)硫代]苯乙酮(2)，在多聚磷酸催化下，产品(2)分子内环合为6-甲氧基-2-(4-甲氧基苯基)苯并[b]噻吩(3)。又利用4-羟基苯甲酸甲酯和N-(2-氯乙基)哌啶盐酸盐为起始原料，在碳酸钾存在下反应，得到4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯甲酸甲酯(4)，在氢氧化钠作用下使(4)水解，得到4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯甲酸盐酸盐(5)，后者与氯化亚砜反应制备成酰氯后再与中间体(3)反应，得到的化合物不需要分离再与乙硫醇反应脱去甲基得到最终产品(1)。
本发明还提供了用于治疗骨折延缓愈合和不愈合的包含盐酸雷洛昔芬的各种药物组合物。该药物组合物可用现有技术已知的方法配制。例如，将盐酸雷洛昔芬与常用的赋形剂、稀释剂或载体一起配制，制成片剂、胶囊、悬浮剂、粉剂等。常用的赋形剂、稀释剂和载体的例子包括诸如微晶纤维素稀释剂，填充剂如淀粉、糖、甘露糖醇和硅衍生物；粘合剂如乙醇、羧甲基纤维素和其它纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮；增湿剂如甘油；崩解剂如羧甲淀粉钠、琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠；表面活性剂如鲸蜡醇、单硬脂酸甘油脂；吸附载体如高岭土和膨润土；润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙和硬脂酸镁和固体聚乙二醇。也可将盐酸雷洛昔芬配制成便于口服的颗粒剂、溶液或持续释放的剂型。
本发明治疗骨折迟缓愈合或不愈合症的药物，按药物的总重量计，包含35％-45％盐酸雷洛昔芬，50％-60％稀释剂，2％-4％的崩解剂，0.5％-1％润滑剂和2％-3％的粘合剂。
治疗骨折延缓愈合和不愈合症所用的盐酸雷洛昔芬的有效剂量可为30-200mg，可给需要治疗的患者每日给药一次。
本发明采用盐酸雷洛昔芬治疗骨折延缓愈合和不愈合症，同现有的手术植骨和电刺激疗法相比较，它具有疗程短、治愈率高、适用范围广、病人无明显痛苦、医疗费用低、后遗症少和使用方便、安全等一系列优点。经临床197例的试用验证，总显著率达95％，总有效率达98％；其中治疗骨延缓愈合病人48人次，治愈率达98％，结合手术治疗骨不连病人20人次，治愈率达95％。
具体实施方式
以下采用实施例具体说明本发明。
实施例1：盐酸雷洛昔芬(1)的制备：
1)4-甲氧基-α-[(3-甲氧基苯基)硫代]苯乙酮(2)的制备
在室温下向反应瓶中依次加入150mL乙醇、60mL水和8.0g氢氧化钾，冰浴冷却下滴加3-甲氧基苯硫酚(20.0g，0.142mol)。在内温不超过25℃的温度下，滴加4-甲氧基-α-溴代苯乙酮(32.5g，0.142mol)在50mL乙酸乙酯中的溶液。室温下把该反应混合物搅拌过夜后，浓缩至干。将该残余物溶于水和乙酸乙酯中，分离有机层，以乙酸乙酯提取水层一次。合并有机相，以1N盐酸、水、饱和碳酸氢钠水溶液先后洗涤，并用水再次洗涤，最后用饱和氯化钠溶液洗涤一次。以无水硫酸镁干燥有机层，过滤，真空蒸发，得到47.3g黄色的油。以120mL热的甲醇处理该油状残余物，并在搅拌下冷却至室温，然后在冰箱中放置过夜。过滤收集固体，以20mL冷的甲醇洗涤滤饼。将滤饼在己烷中研磨30分钟并再次过滤。真空干燥，得到白色固体(33.7g，82.3％)，m.p.51～52.5℃。
2).6-甲氧基-2-(4-甲氧基苯基)苯并[b]噻吩(3)的制备
将配备机械搅拌器的250mL反应瓶置于电热套上。在反应瓶中加入76.0g多聚磷酸。搅拌下将该酸加热至85℃后，撤除电热套，然后在不超过100℃的内温下，小份分批加入化合物4-甲氧基-α-[(3-甲氧基苯基)硫代]苯乙酮(12.84g，0.0446mol)。加入完成后，在85～90℃下将该混合物搅拌1小时，随后冷却至70℃左右，缓慢倾入到剧烈搅拌下的400g冰水中，送入冰箱中冷冻。将结块状固体研碎，滤集沉淀的固体，并用水洗涤。干燥。得到粗品10.8g。然后，把以上粗品在丙酮中回流1小时，活性炭脱色，抽滤，冷至室温。滤集得到白色固体，以冷的丙酮洗涤，在60℃下恒温干燥。得到白色结晶(7.93g，66.7％)，m.p.193～194℃。
3).4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯甲酸甲酯(4)的制备
在2L的三口瓶中加入4-羟基苯甲酸甲酯(100g，0.66mol)、800mL甲苯、新炒干燥的无水碳酸钾(220g，1.64mol)和N-(2-氯乙基)哌啶盐酸盐(140g，0.75mol)，在100℃下搅拌反应2小时。然后滤除固体，将滤液以碳酸钠溶液、水和饱和氯化钠溶液依次洗涤，经硫酸镁干燥。减压下回收溶剂，得到棕色油状物，TLC检测显示为一个斑点。该产物无须纯化可进行下一步反应。
4).4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯甲酸(5)盐酸盐地制备
把上述油状产物溶于600mL甲醇中，并加入5N氢氧化钠的水溶液200mL。搅拌回流7小时。蒸发该反应混合物，除去大部分甲醇，并将该残余物以水稀释至1L。在冰浴冷却下，向该混合物缓慢滴加6N盐酸至pH 1～2，析出白色沉淀。过滤，收集沉淀的白色固体，以1.2L甲醇重结晶，得到白色结晶(146.9g，78.2％)，m.p.235～237℃。
5).盐酸雷洛昔芬(1)的制备
在配备有温度计、机械搅拌器、氮气导入管、球形冷凝器(装有干燥管和尾气吸收装置)的四口瓶中加入中间体(5)(48g，0.168mol)、氯苯(500mL)、二氯亚砜(80mL)和1.0mL二甲基甲酰胺，通入氮气，在75～79℃下把该反应混合物搅拌2小时。减压蒸出氯苯和过量的二氯亚砜，再加入氯苯300mL，继续减压蒸除氯苯和残余的二氯亚砜。向该残余物加入二氯甲烷(1000mL)、三氯化铝(160g，1.2mol)，并分批加入中间体(3)(43.2g，0.16mol)，在室温下搅拌1.5小时后，加入乙硫醇(51.0mL，0.70mol)，再在32～34℃下搅拌0.5小时。然后于30℃下加入四氢呋喃(600mL)、20％盐酸(160mL)和水(600mL)，过滤，分别以水及四氢呋喃洗涤，得到产物69.0g。
实施例2：制备盐酸雷洛昔芬片：
盐酸雷洛昔芬片芯处方：
成份                           用量
盐酸雷洛昔芬                   60g
微晶纤维素                     80g
羧甲淀粉钠                     5g
硬脂酸镁                       0.9g
70％乙醇                      适量
将盐酸雷洛昔芬、微晶纤维素、羧甲淀粉钠，分别粉碎，过80目筛，硬脂酸镁过100目筛，羧甲淀粉钠预先105℃，干燥0.5小时备用；按处方量称取盐酸雷洛昔芬，微晶纤维素与半量的羧甲淀粉钠，混匀均匀，用70％乙醇溶液作粘合剂制软材，用20目不锈钢筛，制颗粒，60℃左右通风干燥，将颗粒用20目不锈钢筛整粒，加入另一半羧甲淀粉钠及硬脂酸镁，混匀均匀，压片，制成1000片盐酸雷洛昔芬片芯。
盐酸雷洛昔芬包衣液处方
成份                         量
羟丙甲纤维素                 20g
聚乙二醇4000                 5g
滑石粉                       5g
硬脂酸镁                     5g
吐温-80                      5g
70％乙醇                     1000g
水                           适量
包衣液的配制
(1)先将羟丙甲纤维素加适量水使溶胀，制成溶液A，
(2)按处方量称取聚乙二醇4000、滑石粉、硬脂酸镁和吐温-80，加入部分乙醇，配成混合液B，
(3)溶液A与混合液B，混合，加入计算量的乙醇溶液，投入快速搅拌器中，搅拌均匀。
(4)将配好的包衣液过100目筛，备用。
然后按常规薄膜包衣法将盐酸雷洛昔芬片芯包衣即得，每片含盐酸雷洛昔芬60mg。
本发明制备的盐酸雷洛昔芬经毒理、致癌、致畸和致突变试验，结果表明该药物无毒、无致癌、致畸和致突变的副作用。
            盐酸雷洛昔芬促进骨折愈合的实验研究
                     材料与方法
1.动物模型：实验选用Wistar种大白鼠，雄性，体重100-160g，共54只，分成实验组I和对照组II两组，每组27只。用定支点手法折骨，造成实验动物左胫腓骨中段闭合性骨折。不用内、外固定，任其自由活动。实验和对照组在相同条件下，用混合鼠料喂养。
2.药物：实施例2制备的盐酸雷洛昔芬片剂。每片含盐酸雷洛昔芬60mg。用生理盐水配成浓度为4％的混悬液。实验组按每只0.4g/kg体重/日用灌胃法给药。第一次给药在骨折后6小时，以后上、下午各给药一次。对照组给等量的生理盐水。连续给药21日。
3.两组分别在1、2、3周时各处死9只，进行组织学和X线片观察，结果如下：