一种眼用嵌段聚合物 技术领域：
本发明涉及以由两种聚合物(A、B)片断组成的嵌段聚合物的眼用，其中聚合物中A、B片断分别为亲水性聚合物-聚乙二醇甲醚(mPEG)和疏水性聚合物-聚乳酸(PLA)或聚乙醇酸(PGA)或乙交酯-丙交酯聚合物(PLGA)，嵌段聚合物可以是AB型二嵌段聚合物或多嵌段聚合物。这种适合于眼内给药。
背景技术：
眼内给药是治疗眼部疾病的重要给药方式，眼内给药制剂包括滴眼剂、眼用凝胶剂等。目前，眼用制剂按治疗目的不同，可以分为：1)应透过角膜进入眼内的制剂，如盐酸哌仑西平为M1受体阻滞剂，可以阻止近视眼的进一步发展，其作用部位在眼内，故哌仑西平透过角膜进入眼内是必须的；2)应在眼结膜、角膜等眼表面作用的制剂，如治疗干眼病的环孢素A等，此类制剂应在保证在眼内滞留而不吸收或被泪液快速清洗。
眼用制剂的低生物利用度一直是困扰眼部给药的一个因素。一般来说，药物的角膜低渗透性、泪液的快速清洗以及吸收进入眼结膜是导致普通滴眼剂眼内生物利用度低的原因。提高药物眼内生物利用度的方法可以通过：(1)提高药物的角膜渗透性；(2)增加制剂在眼内的滞留时间，如制备眼用凝胶剂等；(3)制备具有部位选择性释放的制剂；(4)加入角膜渗透促进剂。
聚合物胶束是指以两亲性嵌段聚合物为材料制成的胶束，这种聚合物在水中自行组装成为一种花冠状结构，其中亲水性嵌段聚集在胶束外表面，形成栅栏状结构，疏水部分聚集在胶束的内核。这种花冠状结构具有稳定的物理性质，药物可以根据其溶解性能的不同分别包裹于花冠部分或内核部分，也可以包裹于花冠和内核的界面，例如，亲水性药物可以包裹于花冠部分，疏水性药物包裹于内核部分(Torchilin，V.P.，Structure and design of polymeric surfactant-based drug delivery systems.J ControlRelease，2001.73(2-3)：p.137-72)。这种嵌段聚合物与普通表面活性剂相比，具有临界胶束浓度(Critical Micellar Concentration，CMC)低的特点。这类嵌段聚合物作为辅料已经用于载运疏水性药物和生物大分子药物，用于注射途径地给药等，例如聚合物中A、B片断分别为亲水性聚合物-聚乙二醇甲醚(mPEG)和疏水性聚合物-聚乳酸(PLA)或聚乙醇酸(PGA)或乙交酯-丙交酯聚合物(PLGA)的聚合物，嵌段聚合物可以是AB型嵌段聚合物或多嵌段聚合物。
两亲性嵌段聚合物可以是AB型或AB的多嵌段型。截至目前，聚合物胶束的研究主要用于注射途径，用于载运疏水性药物或大分子生物药物，以达到靶向治疗作用或延长大分子生物半衰期的作用(Kazunori Kataoka，Atsushi Harada，Yukio Nagasaki，Block copolymer micelles for drug delivery：design，characterization and biologicalsignificance，Advanced Drug Delivery Reviews 47(2001)113-131)。通过改变聚合物中A/B的比例，可以改变AB型聚合物的分子量、临界胶束浓度(CMC)、胶束缔合度、胶束粒径。例如，mPEG-PLA二嵌段聚合物，随着疏水部分PLA的链增长，聚合物胶束的粒径变小，内核变小，花冠部分变大，当A/B的比例大于60/40后，聚合物胶束内核的体积逐渐增大，CMC提高，反之，当A/B的比例小于50/50后，聚合物胶束的内核变小，花冠部分体积增大，胶束较稳定。通过改变嵌段模式，可以改变聚合物的最低溶液温度(LCST)，例如mPEG-PLA的多嵌段聚合物(Kang Moo Huh，YouHan Bae，Synthesis and characterization of poly(ethylene glycol)/poly(l-lactic acid)alternating multiblock copolymers，Polymer 40(1999)6147-6155)，当调节聚合方式后，其LCST可以调节至30℃左右。
这种聚合物胶束的粒径一般在直径数十纳米，这提供了一种获得功能纳米颗粒的新途径。研究表明：聚合物胶束具有很好的透过细胞膜的作用(Jeffrey A.Hubbell，Science，2003，25 April，595-596)，因此，作为一种携带药物的载体可以有效地促进药物透过角膜进入眼内。
美国专利6,579,519申请了一种载运非甾体抗炎药的眼用聚合物胶束，其中其聚合物为三嵌段随机聚合物，通式为(X+Y+Z-)m，m为大于2的整数，X为可降低眼刺激性的具有胶凝特性的单体，通常为乙烯基化合物，如乙烯吡咯啉酮，Y通常为具有热敏性的聚合物(其通式为formula R1-R2N-(C＝O)-CH＝CH2，R1＝a proton or CnH2n+1, n为3-6间的数，R2为碳链数为3-6的烷基)，如聚N-异丙基丙烯酰胺，Z为具有黏膜黏附性及pH敏感性的聚合物，如聚丙烯酸。该专利表明：聚合物胶束可以显著提高药物的角膜透过率而无毒性。
发明内容：
本发明提供由两种聚合物片断组成的嵌段聚合物作为眼药载体的应用，其中两种聚合物片段分别为A片段和B片断，它们分别为亲水性聚合物片段和疏水性聚合物片段，亲水性聚合物片段为聚乙二醇甲醚(mPEG)的片段，疏水性聚合物的片段为聚乳酸(PLA)的片段、聚乙醇酸(PGA)的片段或乙交酯-丙交酯聚合物(PLGA)的片段，分别可以称为：mPEG-PLA嵌段聚合物，mPEG-PGA嵌段聚合物，mPEG-PLGA嵌段聚合物，嵌段聚合物可以是AB型二嵌段聚合物或多嵌段聚合物。这类具有两亲性部分的嵌段聚合物在水中可以形成聚合物胶束，药物可以被聚合物胶束载运，其中疏水性药物包于胶束核心(Core)，而亲水性药物存在于胶束的花冠部分(Corolla)，这类载药聚合物胶束也可以称为嵌段聚合物载药胶束。
本发明优选的嵌段聚合物是mPEG-PLA聚合物，其可以是AB型二嵌段聚合物或多嵌段聚合物。其载药胶束也可以称为mPEG-PLA二嵌段聚合物载药胶束和mPEG-PLA多嵌段聚合物载药胶束。
本发明的目的是将嵌段聚合物用于适合眼部给药的药物的载体。本发明还提供含有嵌段聚合物的眼用药物组合物。
本发明意外的发现，嵌段聚合物可以使药物进入眼内的利用度提高，而通过调节多嵌段物的种类和比例，可以改变聚合物的最低溶液温度(LCST)，使药物特异地分布于眼内不同组织。
本专利所述的嵌段聚合物是已知物质，优选的mPEG-PLA二嵌段聚合物，记载在文献Kazunori Kataoka，Atsushi Harada，Yukio Nagasaki，Block copolymer micelles fordrug delivery：design，characterization and biological significance，Advanced DrugDelivery Reviews 47(2001)113-131中，其通式为：
其中：m为聚乳酸的聚合度，其数值为5-100；n为聚乙二醇的聚合度，其数值为6-50。该聚合物可按文献方法经开环聚合获得，与表面活性剂相比，mPEG-PLA二嵌段聚合物，临界胶束浓度(CMC)低，可以载运具有亲水性和亲脂性的药物，促进药物的角膜透过性。
本发明优选的mPEG-PLA多嵌段聚合物，记载在文献Kang Moo Huh，You Han Bae，Synthesis and characterization of poly(ethylene glycol)/poly(1-lactic acid)alternatingmultiblock copolymers，Polymer 40(1999)6147-6155中，其通式为：
其中：X、Y分别代表聚合单元中不同的聚乳酸嵌段的聚合度，两者数值为5-100；m代表聚合单元中聚乙二醇的聚合度，其数值为6-50；n代表聚合单元的聚合度，其数值为2-50。该聚合物的LCST按X，Y，M，N的不同在25-40℃范围内。当LCST接近32℃时，嵌段聚合物在眼睛表面解离，使药物释放产生作用，可以用于眼睛表面疾病的治疗，如干眼病、结膜炎、角膜炎的治疗等。
本发明的嵌段聚合物可用于适合眼部给药的药物的载体，利用聚合物胶束对角膜的易透性，使药物抵达病灶，达到治疗眼部疾病的目的。
本发明的嵌段聚合物可用于眼睛表面疾病的治疗，延长药物在结膜、角膜的滞留时间，起到治疗作用。
以上所述眼部给药的药物，是指任何可以用于眼部给药的药物，主要选自：抗菌药物，抗病毒药物，抗炎药物，影响免疫系统的药物，治疗近视眼药物，治疗干眼症药物，治疗青光眼药物，治疗白内障药物等。这些药物具体可以是：
抗菌药物选自：盐酸四环素、多粘菌素B、两性霉素B、红霉素、磺胺醋酰钠、金霉素、利福平、硫酸链霉素、硫酸庆大霉素、盐酸林可霉素、氯霉素、氧氟沙星、左旋氧氟沙星、环丙沙星、诺氟沙星；
抗病毒药物选自：三氮唑核苷、：酞丁安、盐酸吗啉胍、阿昔洛韦、更昔洛韦；抗炎药物选自：：醋酸泼尼松、醋酸氢化可的松、地塞米松、阿斯匹林、消炎痛、氟联苯丙酸、双氯芬酸、炎痛喜康；
影响免疫系统的药物选自：环孢素A、麦考酚酯、硫唑嘌呤、奈多罗米、洛度沙胺；散瞳药、睫状肌麻痹药、抗近视眼药物选自：甲基硫酸新斯的明、硫酸阿托品、氢溴酸后马托品、盐酸哌仑西平；
治疗干眼症药物选自：环孢素A；
抗青光眼药物选自：硝酸毛果芸香碱、氨甲酰胆碱、毒扁豆碱、肾上腺素、地匹福林、可乐定、溴莫尼定、噻吗洛尔、乙酰唑胺、二氯磺胺、多唑胺、拉坦前列素、硫酸胍啶；
治疗白内障药物选自：硫普罗宁、谷光甘肽等；
本发明优选的是将嵌段聚合物用于近视眼的治疗和干眼症的治疗，其中所载药物优选的是哌仑西平或其药用盐和环孢素A。
本发明发现嵌段聚合物在作为眼部用药药物的载体时具有优越性，可以通过测定所载药物的角膜透过率加以证实，所述的角膜透过率是指药物透过角膜的程度。药物滴入眼睑后，通过测定药物在眼房水中的浓度而获得。
本发明的药物组合物，其中含有药物有效量的眼部用药物和嵌段聚合物。必要时本发明的组合物还可加入其他适合的药物可接受的辅料。眼部用药物在组合物中的比例可以是1-99％，嵌段聚合物在组合物中的比例可以是1-99％，在含有其他药物载体时，比例可以调整，所述比例为重量百分比。本发明的药物组合物，可以是任何一种眼部给药的剂型，如可以是如下剂型：普通滴眼剂、眼膏剂、眼用凝胶剂(包括生物粘附性凝胶、即位凝胶)等。
本发明的嵌段聚合物可以制成冻干粉或压制成片剂，用前溶于适宜的溶剂中，再与药物混合使用。
普通滴眼剂包括眼用溶液剂、混悬剂。眼膏剂是指以凡士林为赋形剂制成的眼用半固体制剂。
生物粘附凝胶剂是指以含有多个亲水基团的聚合物为材料制成的与角膜具有粘附力的凝胶剂。这类聚合物包括玻璃酸、羟丙甲基纤维素(HPMC)、聚乙烯醇(PVA)、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、聚丙烯酸(PAA)。这类凝胶剂通常呈非牛顿流体的流变学特性，即随着切应速度的提高，液体的粘度增加，这有利于制剂在眼内的停留，防止药物被泪液冲洗掉，从而提高药物透过角膜的比例。
即位凝胶是指滴眼剂本身为可以自由流动的液体，受pH、温度变化，制剂在滴入眼睑后形成凝胶，从而增加制剂在眼中的驻留，提高角膜透过率。pH触变的即位凝胶主要由纤维素醋酸酞酸酯(CAP)、卡波沫等组成，当制剂在pH7.4的条件下能迅速变为凝胶剂。温度触变的即位凝胶主要由在32-36℃可变为凝胶的聚合物组成，这类聚合物包括结冷胶等组成。
在上述嵌段聚合物眼用制剂中，可以加入适量其它辅料，这些辅料包括：等渗调节剂、其它角膜吸收促进剂、防腐剂等。
等渗调节剂主要用于调节制剂的渗透压，使之与泪液的渗透压相当，以降低刺激性。等渗调节剂包括氯化钠、氯化钾等。
角膜促进剂包括依地酸二钠、阳离子型表面活性剂(如苯扎氯铵)、聚山梨酯(如聚山梨酯20、80等)、胆酸盐(如胆酸钠、脱氧胆酸钠等)。
本发明的药物组合物可以通过以下方法制备：
1、嵌段聚合物载药胶束的制备：嵌段聚合物胶束的制备采用常用的办法，如熔融法、溶解-溶剂蒸发法、乳化-溶剂蒸发法等。以溶解-溶剂蒸发法为例，分别称取药物和mPEG-PLA置于烧瓶中，加入有机溶剂(通常为乙腈或乙醇)，加热、搅拌至溶解。在真空下加热缓慢蒸去乙腈(旋转蒸发仪)，得到胶状物，胶状物用注射用水在60℃下溶解，以0.22mm微孔滤膜滤过除菌，灌装入冻干瓶中，冻干。
2、眼用聚合物载药胶束制剂的制备：聚合物胶束可以制备成滴眼液、眼用凝胶剂、眼膏等。
A)稀释剂：将等渗调节剂、缓冲盐及其它物料溶于注射用水中，121℃下灭菌30分钟作为稀释剂。
B)取嵌段聚合物载药胶束冻干品适量，加入稀释剂中，即可。
本发明的优点还表现在：可以根据治疗要求使药物在眼内不同部位特异地释放，达到靶向治疗作用。提高药物在靶部位的利用度，提高疗效，降低副作用。
具体实施方式：
下面为本专利的实施例，但下述实施例并不限置本专利的权利范围。
实施例1本实施例为眼用哌仑西平聚合物胶束凝胶剂的制备
材料与方法
D，L-丙交酯：购自Sigma公司，用前采用无水乙酸乙酯在60℃重结晶三次，室温下在P2O5中真空干燥24小时。辛酸亚锡和甲基聚乙二醇(分子量2000)均购自Sigma公司。
1.甲基聚乙二醇-聚乳酸(mPEG-PLA)二嵌段聚合物的合成：
采用开环聚合方法，分别制备质量比例为75/25的甲基聚乙二醇-聚乳酸嵌段聚合物。即：称取甲基聚乙二醇7.5g和丙交酯2.5g，置于密闭的反应器中，在氮气气流下升温至120-140℃使固体熔化，加入辛酸亚锡50mg，升高温度至150-180℃C反应3-6小时。冷却，得白色固体粗品。粗品以二氯甲烷5ml溶解后，在搅拌下加入100ml乙醚中，滤过，反复三次，产品真空干燥24小时，即可。
嵌段聚合物采用凝胶色谱法测定分子量为8530，核磁共振(1HNMR)证明甲基聚乙二醇-聚乳酸的质量比例为75∶25，其CMC为200μg/ml。
2.哌仑西平游离碱的制备：
取100g盐酸哌仑西平溶于适量蒸馏水，经阳离子交换树脂交换、以甲醇洗脱，除去甲醇，得哌仑西平游离碱。
3.哌仑西平聚合物胶束的制备
分别称取2g哌仑西平和2g甲基聚乙二醇-聚乳酸嵌段聚合物置于烧瓶中，加入乙腈50ml，加热、搅拌至溶解。在60℃、真空下缓慢蒸去乙腈(旋转蒸发仪)，样品用水调整体积至100ml。产品以0.22mm微孔滤膜滤过除菌，灌装入冻干瓶中，每瓶2ml，冻干。
4.眼用哌仑西平聚合物胶束凝胶剂的制备：
A)取羟丙甲基纤维素K100M适量，按2％的比例使溶于注射用水中，加入苯扎氯胺(万分之一)、依地酸二钠(万分之四)，加氯化钠适量(约1％)，滴加1N HCl或NaOH调节pH7.0，121℃下灭菌30分钟作为稀释剂。
B)取哌仑西平聚合物胶束冻干品适量，加入稀释剂中，使溶解，得哌仑西平的浓度为2％，即可。
实施例2本实施例为眼用哌仑西平聚合物胶束凝胶剂的离体角膜透过实验
取家兔，麻醉致死。摘除眼球置于中。沿距角膜边缘2mm的巩膜处做横切，分离角膜。除去晶状体、玻璃体等眼球后部组织，剥离虹膜，得带有2mm巩膜环的角膜。处死动物后20min内开始角膜透过实验。采用渗透扩散装置，包括供给池和接受池，保持离体角膜的形状将其固定在两池之间，使上皮层面向供给池。供给池内加入盐酸哌仑西平溶于实施例1中稀释剂得到的凝胶剂2mL或眼用哌仑西平聚合物胶束凝胶剂，接受池为林格溶液，整个装置放入(34±0 5)℃恒温水浴中开始实验。于试验开始后的第5，15，30，45，60，90，120min从接受池取样1mL并立即补充等体积的空白预先用95％∶5％O2和CO2混合气体饱和的34℃林格溶液。样品用0.22μm的微孔滤膜过滤，取续滤液测定哌仑西平的浓度，按下式计算各种盐的角膜透过系数。
Papp=ΔQΔt·C0·A·3600]]>
结果表明：哌仑西平有机酸盐的角膜透过系数显著提高。
表1眼用哌仑西平聚合物胶束凝胶剂角膜透过系数测定数据(n＝6)
盐酸盐 眼用聚合物胶束凝胶剂
角膜透过系数 1.07±0.08 2.18±0.29
×105(ug/s·cm2)
实施例3哌仑西平聚合物胶束凝胶剂、滴眼剂家兔房水中的药物动力学
40只兔按取样时间随机分为8组，每组5只兔。每隔两周更换处方给药，共2次(分别盐酸哌仑西平眼用凝胶剂和哌仑西聚合物胶束平眼用凝胶剂)。给药时分别在一眼结膜囊内滴配制好的哌仑西平滴眼剂2滴(100μL)，左眼不用药。于滴眼后的0.5、1、2、4、8、12、24、48h时，共8个时间点，分别抽取右眼的房水0.2ml。取房水0.1mL，加入0.1mL甲醇，漩涡混合，以沉淀蛋白及杂质。以16000r/min速度离心10min，取上清液，注入高效液相色谱仪，记录峰面积，以外标法计算含量。每个时间点取5只眼，以其平均值作为该时间点哌仑西平在房水中的浓度。
结果表明：眼用聚合物AUC明显提高，而其具有一定的缓释作用，提示哌仑西平自聚合物胶束中缓慢释放。
表2哌仑西平家兔眼内房水中的浓度随时间的变化(ng/ml)
时间
0.5 1 2 4 8 12 24 48
盐酸哌仑西 21.61± 49.08± 60.37± 77.51± 80.23± 34.62± 25.59± 12.34±
平凝胶 13.08 21.23 15.37 12.14 16.5 10.76 11.34 9.26
眼用聚合物
17.91± 45.19± 62.33± 99.14± 100.2± 60.32± 28.37± 11.31±
胶束凝胶剂 10.12 12.82 17.31 23.11 36.13 21.35 14.21 10.24
实施例4本实施例为眼用环孢素A聚合物胶束凝胶剂的制备
材料与方法
L-乳酸、琥珀酸：上海化学试剂公司。N-二甲基氨基吡啶(DMAP)、双环己基碳二酰亚胺(DCC)均购自Sigma公司。
1.甲基聚乙二醇-聚乳酸多嵌段聚合物(PEO/PLA)的合成：
1.1二羧基PLA的合成：取100g L-乳酸与5g琥珀酸置于双颈瓶中，充入氮气，油浴中加热至190-200℃，24小时后，停止充氮气，在真空下保持3天。产物溶于丙酮，用蒸馏水沉淀，过滤，白色产物在真空下干燥过夜。
1.2甲基聚乙二醇-聚乳酸多嵌段聚合物(PEO/PLA)的缩合：取等摩尔的聚乙二醇2000(5mmol)与上述获得的二羧基PLA溶于70ml无水二氯甲烷。加入1.3mmolDMAP作为催化剂，13mmol DCC作为偶联剂，室温下充氮气搅拌反应12小时，过滤除去副产物二环己基脲。滤液经减压浓缩，搅拌下加入100ml冰乙醚，得到大量白色沉淀。滤取沉淀，用二氯甲烷溶解、乙醚沉淀，反复三次。
2.眼用环孢素A聚合物胶束凝胶剂的制备
分别称取50mg环孢素A和200mgPEO/PLA聚合物置于烧瓶中，加入乙腈50ml，加热、搅拌至溶解。在60℃、真空下缓慢蒸去乙腈(旋转蒸发仪)，样品用生理盐水调整体积至100ml。产品以0.22mm微孔滤膜滤过除菌，灌装入冻干瓶中，每瓶2ml，冻干。
取羟丙甲基纤维素K100M适量，按2％的比例使溶于注射用水中，加入苯扎氯胺(万分之一)，滴加1N HCl或NaOH调节pH7.0，121℃下灭菌30分钟作为稀释剂。
取环孢素A聚合物胶束冻干品适量，加入稀释剂中，使溶解，得环孢素A的浓度为0.05％，即得眼用环孢素A聚合物胶束。
实施例5本实施例为眼用环孢素A聚合物胶束凝胶剂的刺激性试验
试验动物：取健康家兔，体重2.1-2.4kg，10只，随机分为2组，每组5只，即眼用环孢素A花生油(0.05％)组，眼用环孢素A聚合物胶束凝胶剂(0.05％)组。采用同体左右侧自身对比法，左侧给药，右侧给生理盐水。
给药方法：每只眼睛滴入0.1ml受试物，然后轻合眼睑约10秒，每日3次，连续7天。
眼部观察：单次给药眼刺激试验，在给药后1、24、48和72小时对眼部进行检查；多次给药眼刺激试验，每天给药前以及最后一次给药后1、24、48和72小时对眼部进行检查。结果表明：眼用环孢素A聚合物胶束凝胶剂几乎未见刺激性，而眼用环孢素花生油溶液有明显的刺激性。
实施例6眼用环孢素A聚合物胶束凝胶剂家兔眼内药物分布
取健康家兔5只。同体左右侧自身对比法，左侧给环孢素A花生油(0.05％)，右侧给环孢素A聚合物胶束(0.05％)。每日三次，两天后麻醉处死家兔，取眼房水0.1ml，分离眼球，取结膜，分离眼边缘组织、角膜，精密称重，置于-20℃冷冻48小时，组织取出后在室温下与0.2mL甲醇涡漩混合5分钟，16000r/min速度离心10min，取上清液，进行液质联用分析计算含量。
结果表明：眼用聚合物胶束与油溶液相比，两者在眼表面的药物相当。
表3 环孢素A家兔眼组织分布情况(ng/g)
结膜 边缘组织 角膜 房水
眼用油溶液 0.13±0.08 0.45±0.32 35.23±12.25 43.25±22.18
眼用聚合物胶束
3.35±1.15 1.00±0.23 32.14±10.38 21.33±13.24
凝胶剂
实施例7本实施例为眼用氯霉素聚合物胶束滴眼液的制备
分别称取2g氯霉素和2g mPEG-PLA(50/50)置于烧瓶中，加入乙腈50ml，加热、搅拌至溶解。在60℃、真空下缓慢蒸去乙腈(旋转蒸发仪)，样品用水调整体积至100ml。产品以0.22mm微孔滤膜滤过除菌，灌装入冻干瓶中，每瓶2ml，冻干，得氯霉素聚合物胶束。
取氯化钠适量(约1％)，加入苯扎氯胺(万分之一)、依地酸二钠(万分之四)，滴加1N HCl或NaOH调节pH6.5，121℃下灭菌30分钟作为稀释剂。
取氯霉素聚合物胶束适量，加入稀释剂中，使溶解，得氯霉素的浓度为2％，即可。
实施例8本实施例为眼用阿昔洛韦聚合物胶束滴眼液的制备
分别称取0.2g阿昔洛韦和1g mPEG-PLA(60/40)置于烧瓶中，加入乙腈30ml，加热、搅拌至溶解。在60℃、真空下缓慢蒸去乙腈(旋转蒸发仪)，样品用水调整体积至100ml。产品以0.22mm微孔滤膜滤过除菌，灌装入冻干瓶中，每瓶2ml，冻干，得阿昔洛韦聚合物胶束。
取氯化钠适量(约0.9％)，加入苯扎氯胺(万分之一)，滴加1N HCl或NaOH调节pH7.2，121℃下灭菌30分钟作为稀释剂。
取阿昔洛韦聚合物胶束适量，加入稀释剂中，使溶解，得阿昔洛韦的浓度为0.2％，即可。
实施例9本实施例为眼用地塞米松聚合物胶束滴眼液的制备
分别称取0.1g地塞米松和0.5g mPEG-PLA(60/40)置于烧瓶中，加入乙醇20ml，加热、搅拌至溶解。在60℃、真空下缓慢蒸去乙腈(旋转蒸发仪)，样品用水调整体积至100ml。产品以0.22mm微孔滤膜滤过除菌，灌装入冻干瓶中，每瓶2ml，冻干，得地塞米松聚合物胶束。
取氯化钠适量(约0.9％)，加入苯扎氯胺(万分之一)，滴加1N HCl或NaOH调节pH7.0，121℃下灭菌30分钟作为稀释剂。
取地塞米松聚合物胶束适量，加入稀释剂中，使溶解，得地塞米松的浓度为0.1％，即可。
实施例10本实施例为眼用氟联苯丙酸聚合物胶束滴眼液的制备
分别称取0.3g氟联苯丙酸和1g mPEG-PLA(60/40)置于烧瓶中，加入乙醇30ml，加热、搅拌至溶解。在60℃、真空下缓慢蒸去乙腈(旋转蒸发仪)，样品用水调整体积至100ml。产品以0.22mm微孔滤膜滤过除菌，灌装入冻干瓶中，每瓶2ml，冻干，得氟联苯丙酸聚合物胶束。
取氯化钠适量(约0.9％)，加入苯扎氯胺(万分之一)，滴加1N HCl或NaOH调节pH7.4，121℃下灭菌30分钟作为稀释剂。
取氟联苯丙酸聚合物胶束适量，加入稀释剂中，使溶解，得氟联苯丙酸的浓度为0.3％，即可。
实施例11本实施例为眼用毛果芸香碱聚合物胶束滴眼液的制备
分别称取0.1g毛果芸香碱(游离碱)和0.5g mPEG-PLA(75/25)置于烧瓶中，加入乙腈30ml，加热、搅拌至溶解。在60℃、真空下缓慢蒸去乙腈(旋转蒸发仪)，样品用水调整体积至100ml。产品以0.22mm微孔滤膜滤过除菌，灌装入冻干瓶中，每瓶2ml，冻干，得毛果芸香碱聚合物胶束。
取氯化钠适量(约0.9％)，加入苯扎氯胺(万分之一)，滴加1N HCl或NaOH调节pH6.0，121℃下灭菌30分钟作为稀释剂。
取毛果芸香碱聚合物胶束适量，加入稀释剂中，使溶解，得毛果芸香碱的浓度为0.1％，即可。
实施例12本实施例为眼用噻吗洛尔聚合物胶束滴眼液的制备
分别称取0.25g噻吗洛尔(游离碱)和0.25g mPEG-PLA(80/20)置于烧瓶中，加入乙腈30ml，加热、搅拌至溶解。在60℃、真空下缓慢蒸去乙腈(旋转蒸发仪)，样品用水调整体积至100ml。产品以0.22mm微孔滤膜滤过除菌，灌装入冻干瓶中，每瓶2ml，冻干，得噻吗洛尔聚合物胶束。
取氯化钠适量(约0.9％)，加入苯扎氯胺(万分之一)，滴加1N HCl或NaOH调节pH6.2，121℃下灭菌30分钟作为稀释剂。
取噻吗洛尔聚合物胶束适量，加入稀释剂中，使溶解，得噻吗洛尔的浓度为0.25％，即可。
实施例13本实施例为眼用硫普罗宁聚合物胶束滴眼液的制备
分别称取0.05g硫普罗宁和0.5g mPEG-PLA(80/20)置于烧瓶中，加入乙腈10ml，加热、搅拌至溶解。在60℃、真空下缓慢蒸去乙腈(旋转蒸发仪)，样品用水调整体积至100ml。产品以0.22mm微孔滤膜滤过除菌，灌装入冻干瓶中，每瓶2ml，冻干，得硫普罗宁聚合物胶束。
取氯化钠适量(约0.9％)，加入苯扎氯胺(万分之一)、依地酸二钠(万分之四)，滴加1N HCl或NaOH调节pH7.2，121℃下灭菌30分钟作为稀释剂。
取硫普罗宁聚合物胶束适量，加入稀释剂中，使溶解，得硫普罗宁的浓度为0.05％，即可。