用于治疗更年期综合征的广防风根提取物制剂及制备方法.pdf

本发明涉及用于治疗妇女更年期综合征的广防风根提取物制剂及制备方法。该制剂是由广防风根提取物和药用辅料组成的各种口服制剂，其中广防风根提取物是由广防风根部经水提、浓缩后获得的浸膏，含广防风苷A 0.10～1.50％。本发明广防风根制剂不含激素，服用后不需要加服孕激素来预防不良反应，临床疗效确切，质量稳定、可控，安全性好，特别适合更年期妇女长期服用。

1、  一种广防风根提取物制剂，其特征在于该制剂是由广防风根提取物和药用辅料组成的各种口服制剂，其中广防风根提取物是由广防风根部经水提、浓缩后获得的浸膏，含广防风苷A0.10～1.50％。

2、  根据权利要求1所述的广防风根提取物制剂，其特征在于其中所述的口服制剂为医学上可接受的各种口服剂型包括硬胶囊、软胶囊、颗粒剂、片剂或口服液。

3、  根据权利要求1所述的广防风根提取物制剂的制备方法，其特征在于所述的广防风根提取物制剂制备包括下述步骤：
1)取广防风根，粉碎，加10倍量的水提取两次，每次1-2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.01～1.08的清膏，喷雾干燥或真空干燥，得提取物；用高压液相法测定，广防风根提取物含广防风苷A0.10％～1.50％；
2)将提取物与辅料按比例混匀后，干法或湿法制粒，按常规方法制成各种制剂。

4、  根据权利要求3所述的广防风根提取物制剂的制备方法，其特征在于其中所述的广防风根提取物中的广防风苷A的含量测定方法包括：
1)仪器与材料：
仪器：Aglient1100高效液相色谱仪
对照品：广防风苷A
试剂：甲醇、乙腈、蒸馏水等所有试剂为分析纯
样品：广防风根提取物(上海药港生物技术有限公司自制)
2)色谱条件：
色谱柱：Discovery C18(250*4.6mm，5um)
流动相：乙腈∶水＝27∶73
流速：1.0ml/min 柱温：室温
检测波长：320nm 进样量：20ul
3)标准曲线
①标准储备液的制备：精密称取对照品4.95mg，加甲醇超声溶解，定量到25ml；
②标准曲线的绘制：精密吸取对照品储备液各0.4，0.8，1.2，1.6，2.0于2ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，分别得浓度为39.6ug/ml，79.2ug/ml，118.8ug/ml，158.4ug/ml，198ug/ml的Y1标准液，采用以上色谱条件，进样20ul。以峰面积Y为纵坐标，Y1浓度X为横坐标，进行线性回归，得回归方程Y＝20.139X-154.35；R2＝0.9994，线形范围：0.792～3.96ug，Y1出峰时间为9.55min；
4)样品测定
对照品溶液配制：精密称取对照品一定量，加甲醇超声溶解，定容，分别吸取供试品溶液20ul，按上诉液相条件测定，记录峰面积，并用标准曲线计算Y1的含量；
供试液的制备：取广防风根提取物粉末，精密称取170.5mg，置于离心管中，加水超声提取两次，离心，取上清液，残渣再用水洗，合并上清液和洗液，定容至10ml容量瓶中，进样前用0.45μm滤膜过滤；
取以上供试液在色谱条件下进样，按双点校正法计算样品中所含组分的含量，计算公式如下：
Y＝20.139X-154.35
Y为峰面积值；
X为样品的浓度ug/ml；
则样品中广防风苷A的含量为X*10/取样量*100％。

用于治疗更年期综合征的广防风根提取物制剂及制备方法
技术领域：
本发明涉及中药制药领域，具体涉及一种用于治疗妇女更年期综合征的广防风根提取物制剂及制备方法。
背景技术：
对更年期综合征的治疗，长期以来都是使用雌激素类制剂，但由于激素有诸多的副作用及不良反应，甚至可能导致癌症，不易被广大妇女所接受。因此，就目前来说，在临床上尚无较为理想地药物。
广防风，又名防风草，拉丁名Epimeredi indica(L.)Rothmalex，在《中药大辞典》中有记载，为唇形科植物防风草的全草，主要用于治疗感冒身热，呕吐，腹痛，筋骨疼痛，疮疡，湿疹，痔疾等；在中华人民共和国卫生部部颁标准《中药成方制剂》第二十册的贯防感冒片，是组方中的一味药。
本发明申请人已在中国专利申请02110522.7中公开了广防风根的新用途。广防风根具有改善卵巢功能和调节雌激素和孕激素的作用，可用于制备治疗预防与雌激素、孕激素平衡失调有关的疾病的药物或保健品。
发明内容：
本发明所要解决的技术问题是在中国专利申请02110522.7的基础上，进一步开发广防风根提取物制剂，提供一种活性成份含量确切，质量稳定的新型广防风根口服制剂。
本发明公开的广防风根提取物制剂是由广防风根提取物和药用辅料组成的各种口服制剂，其中广防风根提取物是由广防风根部经水提、浓缩后获得的浸膏，含广防风苷A 0.10～1.50％。
本发明所述药用辅料为常规制剂使用的药用辅料，所述的口服制剂为医学上可接受的各种口服剂型包括硬胶囊、软胶囊、颗粒剂、片剂或口服液等。
本发明所要解决的另一技术问题是公开上述广防风根提取物制剂的制备方法和活性成份检测方法。
本发明公开的广防风根提取物制剂制备包括下述步骤：
1、取广防风根，粉碎，加10倍量的水提取两次，每次1-2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.01～1.08(25～30℃测)的清膏，喷雾干燥或真空干燥，得提取物；用高压液相法测定，广防风根提取物含广防风苷A 0.10％～1.50％；
2、将提取物与辅料按比例混匀后，干法或湿法制粒，按常规方法制成各种制剂。
本发明所述广防风根提取物中的广防风苷A的含量测定方法包括：
1、仪器与材料：
仪器：Aglient1100高效液相色谱仪
对照品：广防风苷A
试剂：甲醇、乙腈、蒸馏水等所有试剂为分析纯
样品：广防风根提取物(上海药港生物技术有限公司自制)
2、色谱条件：
色谱柱：DiscoveryC18(250*4.6mm，5um)
流动相：乙腈∶水＝27∶73
流速：1.0ml/min  柱温：室温
检测波长：320nm  进样量：20ul
3、标准曲线
①标准储备液的制备：精密称取对照品4.95mg，加甲醇超声溶解，定量到25ml；
②标准曲线的绘制：精密吸取对照品储备液各0.4，0.8，1.2，1.6，2.0于2ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，分别得浓度为39.6ug/ml，79.2ug/ml，118.8ug/ml，158.4ug/ml，198ug/ml的Y1标准液，采用以上色谱条件，进样20ul。以峰面积(Y)为纵坐标，Y1浓度(X)为横坐标，进行线性回归，得回归方程Y＝20.139X-154.35；R²＝0.9994，线形范围；0.792～3.96ug，Y1出峰时间为9.55min；
4、样品测定
对照品溶液配制：精密称取对照品一定量，加甲醇超声溶解，定容，分别吸取供试品溶液20ul，按上诉液相条件测定，记录峰面积，并用标准曲线计算Y1的含量；
供试液的制备：取广防风根提取物粉末，精密称取，置于离心管中，加水超声提取两次，离心，取上清液，残渣再用水洗，合并上清液和洗液，定容至10ml容量瓶中，进样前用0.45μm滤膜过滤；
取以上供试液在色谱条件下进样，按双点校正法计算样品中所含组分的含量，计算公式如下：
Y＝20.139X-154.35
Y为峰面积值；
X为样品的浓度ug/ml；
则样品中广防风苷A的含量为X*10/取样量*100％。
本发明使用的对照品广防风苷A是从广防风根提取物中分离纯化获得的有效成份单体，即取广防风根提取物用正丁醇萃取，分别上大孔树脂和C-18硅胶柱，醇洗脱，收集，薄层检查，合并，回收获得的。其HPLC图见图2，其结构为：

对本发明广防风苷A的含量测定方法进行方法学考察：
(1)标准曲线的建立
①标准储备液的制备：精密称取对照品4.95mg，加甲醇超声溶解，定量到25ml；
②标准曲线的绘制：精密吸取对照品储备液各0.4，0.8，1.2，1.6，2.0于2ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，分别得浓度为39.6ug/ml，79.2ug/ml，118.8ug/ml，158.4ug/ml，198ug/ml的Y1标准液，采用以上色谱条件，进样20ul。以峰面积(Y)为纵坐标，Y1浓度(X)为横坐标，进行线性回归，得回归方程Y＝20.139X-154.35；R²＝0.9994，线形范围：0.792～3.96ug，Y1出峰时间为9.55min
峰面积