一种治疗中风的中药及其制备方法 所属技术领域
本发明涉及一种治疗中风的中药及其制备方法，尤其涉及以中草药为原料制备的一种治疗中风病恢复期和后遗症的药物，属于中药领域，药品名称为龟龙中风丸。
背景技术
我国人口老年化趋势日益明显，全国每年约有1000万个中风病人，死亡率占各种疾病的第一位，约89万人。目前，对于中风病急性期的抢救治疗，由于开展了全国急症协作，取得了很大进展。但经治疗，保全性命者，恢复期和后遗症治疗方面，尚存在较大难题，许多人留下了“偏瘫”、“语言障碍”等病症，给患者及其家人带来了极大痛苦和生活上的不便。因此，中风病恢复期和后遗症的治疗，实属当务之急。而目前对于治疗中风病恢复期和后遗症的药物则很少，中风病所引起的后遗症偏瘫，无论是出血性中风或脑血栓缺血性中风所造成的半身不遂，考察其临床特点，主要病理为肝阴血不足、筋脉失濡、风阳内动，兼痰瘀交阻，临床表现多见患侧肢体筋脉拘急、挛缩、屈伸不利、肌肉抽动、伴见头眩、语言蹇涩、或有肢体酸痛不适，病程久渐者可有肌肉削瘦，情绪急躁易怒等。而一般的治疗中风的药物，虽然有一定的治疗作用，但对于抑制血小板聚集及血栓形成，改善脑功能，增加记忆力等方面仍不能令人满意。
【发明内容】
本发明所要解决的技术问题是提供一种治疗中风的中药及其制备方法，它解决了中风患者在恢复期和后遗症治疗方面的问题，它既具有增加脑血流量，降低血管通透性，改善微循环，提高脑组织的耐缺血、缺氧能力，并减轻缺血后地病理改变，降低脑含水量，减轻脑水肿等作用；同时又具有明显抑制血小板聚集及血栓形成，改善脑功能，增加记忆力的作用。
本发明各原料的重量比值范围是经过发明人进行大量的摸索和实验总结得出的，各原料的重量比在下述重量范围都具有较好的疗效。本发明采用下述二十种药物进行组合，将这些药物组合使得各药物功效产生协同作用，从而能够有效的治疗中风病。
它是由下述原料按重量比构成：熟地黄∶白芍∶当归∶川芎∶牛膝∶龙骨∶龟板∶丹参∶桃仁∶赤芍∶地龙∶石菖蒲∶天竺黄∶木瓜∶伸筋草∶薏苡仁∶桑枝∶丝瓜络∶全蝎∶杜仲碳＝(8-12)∶(8-12)∶(3-7)∶(3-7)∶(3-7)∶(6-10)∶(3-7)∶(8-12)∶(3-7)∶(3-7)∶(3-7)∶(3-7)∶(8-12)∶(6-10)∶(4-8)∶(8-12)∶(8-12)∶(3-7)∶(1-5)∶(1-3)。
本发明可以采用中药制剂的常规方法制成任何常规内服制剂。例如可以将这些原料药研成粉末混合均匀制成散剂冲服、也可以制成片剂等。但是水丸便于吞服，又不易吸潮，有利于保管贮存，因水丸粘合剂为水，并有一定量的药材细粉入药，服后较容易溶散吸收，显效较快，本文件重点表述水丸的制备工艺。但是这些不能用于限制本发明的保护范围。
其制备工艺如下：
a.以上二十味药，取符合上述原料配比的天竺黄、石菖蒲、薏苡仁、地龙、全蝎粉碎成粗粉；
b.取符合上述原料配比的熟地黄、白芍、当归、川芎、牛膝、龙骨、龟板、丹参、桃仁、赤芍、木瓜、伸筋草、桑枝、丝瓜络十四味药加水煎煮若干次，每次过滤得滤液；
c.将上述每次煎煮所得的滤液合并，浓缩至稠膏，相对密度1.28-1.30(50-60℃)；
d.在上述稠膏内加入天竺黄、石菖蒲、薏苡仁、地龙、全蝎五味药粗粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，用水泛丸，65-95℃干燥；
e.用杜仲碳包衣打光，即得。
本发明的优选原料比值为：熟地黄∶白芍∶当归∶川芎∶牛膝∶龙骨∶龟板∶丹参∶桃仁∶赤芍∶地龙∶石菖蒲∶天竺黄∶木瓜∶伸筋草∶薏苡仁∶桑枝∶丝瓜络∶全蝎∶杜仲碳＝10∶10∶5∶5∶5∶8∶5∶10∶5∶5∶5∶5∶10∶8∶6∶10∶10∶5∶3∶2。
优选原料制备工艺如下：
a.以上二十味药，取符合上述原料配比的取符合上述原料配比的天竺黄、石菖蒲、薏苡仁、地龙、全蝎粉碎成粗粉；
b.取熟地黄、白芍、当归、川芎、牛膝、龙骨、龟板、丹参、桃仁、赤芍、木瓜、伸筋草、桑枝、丝瓜络加水煎煮二次，第一次用6倍量的水，煎煮2个小时，过滤；第二次用5倍量的水，煎煮1.5小时，过滤；；
c.将上述煎煮所得的滤液合并，浓缩至稠膏，相对密度1.29(55℃)；
d.在上述稠膏内加入天竺黄、石菖蒲、薏苡仁、地龙、全蝎五味药粗粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，用水泛丸，65-95℃干燥；
e.用杜仲碳包衣打光，即得，每30丸重5g。
本发明具有如下优点：
本发明对中风病的治疗，中医症候的恢复、血液流变学、血小板聚集指标的改善均有明显的作用。本发明具有滋补肝肾，潜阳熄风，柔养筋脉，活血化瘀，化痰通络的功效。主治由风痰瘀血、痹阻脉络及阴虚风动证引起的半身不遂、口舌歪斜、舌强语蹇、偏身麻木、头晕目眩或烦躁失眠、眩晕耳鸣、手足心热为主要临床表现的中风病病人，对风痰瘀血，痹阻脉络及阴虚风动证的中医症候异常均有明显的治疗作用。本发明的丸粒体积小，用杜仲碳包衣表面致密光滑，既便于吞服，又不易吸潮，有利于保管贮存。因其粘合剂为水，并有一定量的药材细粉入药，服后较容易溶散吸收，显效快。
【附图说明】
图1是本发明的制备工艺流程方框图。
【具体实施方式】
以下通过实验例来进一步阐述本发明药物(以下称龟龙中风丸)的有益效果，这些实验包括药效学实验和长期毒性实验。
(实验例1)
龟龙中风丸长期毒性实验研究
龟龙中风丸主治中风，为对该药有无毒副作用作出评价，以确保临床用药安全，按《新药审批办法》的有关规定，我们对龟龙中风丸进行了长期毒性试验，现将结果报告如下：
一、材料
1、动物：SD种大白鼠，体重150-180克。雌雄各半。购自国家计划生育科研所动物中心。
2、药物：龟龙中风丸，由沈阳中药厂提供。
3、给药途径：灌胃给药。
二、方法：
1、大白鼠60只，雌雄各半，随机分为三组，每组雌雄各10只。
2、给药剂量：大剂量组：37.5g生药/kg(干浸膏14.76g/kg相当于临床用量的50倍)，小剂量组：18.75g生药/kg(干浸膏7.38g/kg相当于临床用量的25倍)，灌胃给药，每日一次，连续给药5个月。
3、实验程序：观察动物的一般状况，行为体重等变化。每给药一个月称一次体重，根据体重相应增加药量。五个月后各组分别称重，腹主动脉取血检查血常规、肝肾功能等生化指标。取心、肝、脾、肺、肾称重、计算脏器指数，并取上述组织及胃、大肠、小肠、肾上腺等脏器进行病理学检查。
三、结果：
1、一般状况：用药后各剂量组及对照组大鼠的食欲，活动等均无异常改变。
2、对体重的影响：每个月各组分别称重结果见表1
表1 龟龙中风丸对大鼠体重的影响(X±SD)
给药前(g) 1个月 2个月 3个月 4个月 5个月
对 照 159.66±20.27 234.6±27.56 281.9±23.86 320.8±22.86 356.6±32.81 384.9±28.33
大剂量 160.55±39.13 243.5±32.39 286.3±37.54 328.4±30.43 358.7±29.04 399.0±30.37
小剂量 167.50±47.67 247.6±26.56 284.3±36.90 334.6±23.89 360.4±38.54 384.8±43.54
由表1可见各组动物体重增长与正常对照组比较无显著差异。P＞0.05。
3、对大鼠外周血象的影响：结果见表2
表2 龟龙中风丸对大鼠外周血象的影响(X±SD)
白细胞(万个/mm2) 分类(％) 血红蛋白(g/％)
中性 淋巴
对 照 0.69±0.28 27.5±5.89 72.5±5.89 15.46±1.98
大剂量 0.61±0.21 27.3±3.35 72.7±3.35 15.19±1.44
小剂量 0.56±0.16 28.5±6.40 71.5±6.40 14.35±1.57
由表2可见该药各剂量组对大鼠血红蛋白、白细胞及分类无显著影响。P＞0.05
4、对肝、肾功能的影响：腹主动脉取血测ALT、AST(酶偶联法)及BUN(脲酶—钠氏试剂显示法)。结果见表3。
表3 龟龙中风丸对大鼠肝肾功能的影响(X±SD)
ALT(umol/sh) AST(umol/sh) BUN(mmol/l)
对 照 组 0.11±0.02 0.61±0.08 7.26±1.37
大剂量组 0.10±0.02 0.60±0.08 7.61±1.18
小剂量组 0.10±0.01 0.62±0.06 7.23±1.18
由表3可见龟龙中风丸各剂量组对大鼠肝肾功能均无影响。P＞0.05
5、各脏器病理学检查：
解剖动物，肉眼观察各组大鼠脏器均无异常改变，取心、肝、脾、肺、肾分别称重，计算脏器指数，结果见表4。
表4 龟龙中风丸对脏器指数的影响(X±SD)
心(％) 肝(％) 脾(％) 肺(％) 肾(％)
对 照 0.36±0.14 4.47±0.52 0.16±0.04 0.66±0.12 0.85±0.14
大剂量 0.35±0.11 4.39±0.48 0.18±0.05 0.64±0.15 0.84±0.11
小剂量 0.36±0.22 4.46±0.37 0.17±0.09 0.66±0.06 0.85±0.09
由表4可见，该药对各组大鼠脏器指数无明显影响P＞0.05
将上述脏器及脑、胃、大肠、小肠、肾上腺等用福尔马林溶液固定、浸蜡、包埋、切片、染色，在镜下进行病理学检查。
对照组及各给药组动物脑、心、肝、脾、肺、肾上腺、胃、大肠、小肠等脏器大体及镜下观察均无病理改变，结果如下：
结果显示：该药对各脏器无显著毒性。
四、结语
本实验结果表明，龟龙中风丸按临床用量的25及50倍，连续给药5个月，对动物的生长、体重、血象、肝肾功能无明显影响及毒副反应，脏器病理学检查也未见异常改变，可见该药可安全用于临床。
(实验例2)
龟龙中风丸药效学研究
A.龟龙中风丸对大鼠脑缺血后治疗作用的研究
一、材料
1、动物：Wistar种大鼠50只，雄性，体重228.1±25.1克。由本院动物室提供。
2、药物：龟龙中风丸，2.54g生药/g提取干浸膏，沈阳中药厂提供；华佗再造丸，广州奇星药厂，931301；青霉素G钾，华北制药厂9211410；戊巴比妥钠，上海化学试制采购供应站分装厂，86-01-22。
二、方法
动物以戊巴比妥钠(45mg/kg)腹腔麻醉，分离双侧颈总动脉(长度约2cm)，将BT87-2型实验性体内血栓形成测定仪的刺激电极及温度传感器钩于动脉上，以1.5mA直流电持续刺激血管壁7分钟，同时用温度传感器监测血管表面的温度变化及血栓形成情况，形成双侧血栓后，缝合伤口，肌肉注射青霉素G钾(40U/Kg)。术后次日开始给药。
动物随机分为5组，假手术组(未造模型)、模型组、华佗再造丸组(3g/Kg)、龟龙中风丸两个剂量组(10及4g生药/Kg)。
各给药组动物每日灌胃给药一次，持续一周，最后一次给药后一小时进行协调实验，然后断头处死。摘取脑及双侧颈总动脉处血栓，称量血栓重量及脑湿重，将脑置于100℃恒温烤箱中干燥48小时，称量脑干重，并计算脑指数及脑含水量，结果均进行统计学处理(t检验)。
脑指数＝脑湿重÷体重×100％
脑含水量＝(脑湿重—脑干重)÷脑湿重×100％
结 果
表 龟龙中风丸对大鼠脑缺血的影响
分 组 剂量 N 协调实验(s) 血栓重量(g) 脑指数(％) 脑含水量
假 手 术 组 10 48.20±14.28 0.0000±0.0000 0.565±0.052 78.565±0.372
模 型 组 10 10.00±8.01## 0.0132±0.0036## 0.623±0060# 79.034±0.284##
华佗再造丸组 3.0g/g 10 24.40±10.55** 0.0102±0.0029 0.598±0.040 78.729±0.312*
中风康大剂量组 10.0g/kg 10 24.20±18.08* 0.0104±0.0023 0.560±0.067* 78.811±0.540
中风康小剂量组 4.0g/kg 10 17.50±8.07 0.0105±0.0017 0.575±0.073 78.945±0.507
#、##：与假手术组比较P＜0.05、P＜0.01
*、**：与模型组比较P＜0.05、P＜0.01
一、协调实验
由表可见，模型组动物转轮时间明显缩短，与假手术组比较有显著性差异(P＜0.01)；龟龙中风丸大剂量组转轮时间明显延长，与模型组比较有显著性差异(P＜0.05)；小剂量组无明显影响；华佗再造丸组转轮时间亦有延长，与模型组比较有显著性差异(P＜0.01)。
二、对血栓重量的影响
由表可见，模型组颈总动脉内有明显的血栓形成，与假手术组比较有显著性差异(P＜0.01)；龟龙中风丸两个剂量组及阳性药华佗再造丸组血栓重量与模型组比较有减轻趋势，但无显著性差异。
三、对脑指数及脑含水量的影响
由表可见，模型组脑指数及脑含水量明显增加，与假手术组比较有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)；龟龙中风丸大剂量组脑指数明显减轻，与模型组比较有显著性差异(P＜0.05)，脑含水量亦见作用趋势，小剂量组脑指数及脑含水量仅见减轻趋势；华佗再造丸组脑指数有减轻趋势，但无显著差异，脑含水量则明显降低，与模型组比较有显著性差异(P＜0.01)。
结 语
龟龙中风丸临床用于中风的治疗。本实验以双侧颈总动脉血栓造成缺血模型，表现为脑含水量及脑指数增加，协调运动能力降低。实验采用治疗性给药，先造成脑缺血，然后再给药以观察药物的作用。
实践结果证实，模型组动物脑指数及脑含水量明显增加，高于正常组动物(假手术组)协调运动功能降低，表现为典型的脑缺血症状。龟龙中风丸组血栓重量有减轻趋势，脑指数明显降低，协调运动时间明显延长，症状明显改善。
龟龙中风丸能够明显改善实验性脑缺血，无论预防性给药，还是治疗性给药，均有明确的治疗作用。
B、龟龙中风丸对大鼠脑微循环障碍的影响
材料与方法
一、药物：龟龙中风丸、华佗再造丸、葡聚糖、生理盐水、戊巴比妥钠。
二、动物：Wistar种大白鼠40只，雌雄兼用，体重250-350克。
三、方法：将动物随机分为四组，用0.6％戊巴比妥钠(0.75ml/100g)腹腔给药麻醉。打开颅骨暴露大脑半球的额顶部约5mm×5mm，在冷光源45°角照射下，用XIL-01型显微镜放大40倍观察软脑膜微循环，分离一侧股静脉并注入10％葡聚糖(3ml/kg)，以形成软脑膜微循环障碍。20分钟后再给予实验药物，于药前及药后20分钟在相同视野观察下列指标。
1、血流速度：共分5级。
0级：微血管可见，但无血液细胞通过；I级：微血管内可见血细胞，有时出现血细胞聚集成团，数量较少，逐渐向前推进，时停时进；II级：微血管内血细胞充满管腔，慢慢向前流动；III级：血细胞充满管腔，流动呈线型，但镜下可分出流动中的血细胞；IV级：微血管中血细胞分辨不出，流动速度极快。
2、血液流态：共分5级。
0级：(-)，无血细胞聚集；I级：(+)，2-3个血细胞聚集成微细的颗粒状，不影响血流速度；II级：(++)，4-6个血细胞聚集成粗颗粒状；III级：(+++)，血细胞聚集成团块状而影响血流速度。IV级：(++++)，血流停止或形成微血栓。
统计方法采用等级序值法。
结 果
1、血流速度：对照组与各给药组药前血流速度未见明显差异(P＞0.05)。给药后盐水组未见改变：阳性药华佗再造丸组及龟龙中风丸大剂量组可见流速有所改善，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)；龟龙中风丸小剂量组流速未见改善。结果见表1。
2、血液流态：对照组与给药组药前血液流态没有明显差异(P＞0.05)，给药后盐水组血细胞聚集未见改善；龟龙中风丸大剂量和华佗再造丸药后血细胞聚集程度减轻，与对照组比较有显著性(P＜0.05)，龟龙中风丸小剂量组未见明显改善。见表2。
表1 对大鼠软脑膜微循环血流速度的影响
组别 剂量 动物数 分 级 P值
(g/kg) (只) 1 1.5 2 2.5
药对照组 10 1 4 5
华佗再造丸组 10 1 5 4 ＞0.05
龟龙中风丸大组 10 1 5 4 ＞0.05
前龟龙中风丸小组 10 2 3 4 1 ＞0.05
药对照组 10 1 5 4 ＞0.05
华佗再造丸组 3 10 4 3 3 ＜0.05
龟龙中风丸大组 10 10 5 3 2 ＜0.05
后龟龙中风丸小组 4 10 1 3 5 1 ＞0.05
表2 对大鼠软脑膜微循环血液流态的影响
组别 剂量 动物数 分 级 P值
(g/kg) (只) 1.5 2 2.5 3
药对照组 10 1 5 2 2
华佗再造丸组 10 1 5 2 2 ＞0.05
龟龙中风丸大组 10 1 5 1 3 ＞0.05
前龟龙中风丸小组 10 2 4 4 ＞0.05
药对照组 10 1 5 2 2 ＞0.05
华佗再造丸组 3 10 4 5 1 ＜0.05
龟龙中风丸大组 10 10 6 2 2 ＜0.05
后龟龙中风丸小组 4 10 2 5 2 ＞0.05
结果表明，龟龙中风丸大剂量组可使软脑膜微循环的血液流速加快，血液流态明显改善，血细胞聚集程度明显减轻，与对照组比较呈显著差异。
结 语
高分子葡聚糖静脉注射能造成动物多系统微循环障碍，本实验用葡聚糖形成大鼠软脑膜微循环障碍模型，表现为血流速度减慢，血细胞发生聚集。
对照组给予生理盐水后，血液流速及血液流态均未见好转。华佗再造丸和龟龙中风丸大剂量组给药20分钟后，血流速度加快。血液流态明显改善，血细胞聚集程度明显减轻。
实践证明，龟龙中风丸具有改善动物脑微循环障碍的作用，可使血流速度及血液流态改善，从而改善脑组织的供血供氧而起到治疗作用。
C、龟龙中风丸体外给药对家兔血小板聚集影响的研究
材料与方法
一、材料
(一)药物龟龙中风丸、华佗再造丸、灭菌生理盐水、花生四烯酸。
(二)仪器BS631型血小板聚集仪，北京生化仪器厂产品。
(三)动物健康雄性新西兰种大耳白兔，体重为2.0-3.0kg，购于军事医学科学院动物室，在本院动物室饲养一周用于实验。
二、方法
(一)PRP制备家兔用戊巴比妥钠(30mg/kg)经耳静脉麻醉，切开腹腔暴露腹主动脉，用硅化注射器穿刺取血，用3.8％枸椽酸钠溶液抗凝(血∶抗凝剂＝9∶1)，200×g离心8分钟，吸取上清部分即富血小板血浆，剩余部分2200×g离心15分钟，取上清部分即贫血小板血浆中血小板计数为4.0×105/mm3左右。
(二)观察及分析方法采用改良Born氏比浊法(1-2)。置盛有0.45mlPRP、一小磁棒以及适量待试药或生理盐水的比浊管于血小板聚集仪中，37℃保温搅拌1分钟，调好基线，加入5mg/mlAA1Oul诱导聚集。根据记录仪上所描记的聚集曲线分析药物对血小板聚性的影响。按下列公式(2)计算聚集率和抑制率：
结 果
龟龙中风丸和华佗再造丸各三个剂量组血小板聚集率均明显低于生理盐水组(P＜0.01)呈很好的量效关系。而抑制率间也存在很好的量效关系。同时也看出龟龙中风丸抑制血小板聚集作用强于华佗再造丸。结果见附表。
附表 龟龙中风丸对AA诱导的家兔血小板聚集性的影响
(X±SD％，n＝6)
药物和剂量 聚集率(％) 抑制率(％)
生理盐水 60.9±1.7
中风康 25mg生药/ml 32.0±9.3※ 47.9±13.8
35mg生药/ml 20.4±8.1※ 68.6±12.4
50mg生药/ml 0 100
华佗再 25mg/ml 49.0±5.3※ 19.6±7.6
造丸 35mg/ml 32.4±5.4※ 49.5±8.9
50mg/ml 16.1±3.5※ 74.6±6.9
注：※P＜0.01
结 语
本实验结果表明，龟龙中风丸和华佗再造丸均能抑制AA诱导的家兔血小板聚集性，且这种效应呈很好的量效关系。给药剂量越大，抑制效应越强。龟龙中风丸抑制血小板聚集性作用强于华佗再造丸。
D、龟龙中风丸对大鼠血栓形成的影响
材料与方法
一、材料：
(一)药品：龟龙中风丸、华佗再造丸、生理盐水。
(二)动物：SD大鼠70只，体重为180-200g雌雄各半。
(三)仪器：体外血栓形成仪：SDZ-A1型，江苏无锡县电子仪器二厂生产。
二、方法：健康SD大鼠随机分为7组。
此实验是动态观察血栓形成全过程。以离体的血液及体外旋转环内模拟体内血流状态，在流体效应作用下形成血栓。这种在血流处于流动状态下形成的血栓，其结构与体内形成的血栓很相似(1)。
(一)模拟条件：
聚乙稀管内径4.0mm，长240mm，旋转环半径为30.0mm，旋转环与水平夹角74.0度，旋转环转速为17±1转/分，观察时间为10分钟，实验温度37℃。
(二)血样收聚：
大鼠用戊巴比钠(30mg/kg)腹腔注射麻醉，切开腹腔暴露腹主动脉，用硅化注射器穿刺取血2ml(切勿带气泡)，立刻注入含0.2ml药液或生理盐水的旋转环内，注入的血量应充满旋转环1/2以下(1.8ml)。从血注入注射器至旋转环开始转动的时间应为90秒内。
(三)观察方法：
当旋转环转动后，环内血柱在一定的平衡位置上相对管壁流动，观察并读出血柱前凹面所处的角度位置。在血柱相对管壁流动的过程中出现血栓形成，血栓形成的过程为(2)：首先出现血小板质点，随之发生“雪暴”一样的现象，从旋转环转动开始至上述现象出现，为血小板聚集时间。接着血小板血栓逐渐形成，而后纤维蛋白原转变成纤维蛋白而连接在血小板血栓上形成纤维蛋白柱，在此阶段纤维蛋白栓不断增大，血栓所处角度也不断变化。当血栓开展完全时，角度不再变化，10分钟后停止转动，倾出血栓，量其长度，将血栓条置80℃烤箱烤4小时，恒重后称其干重。
结 果
一、对体外血栓长度的影响。
龟龙中风丸对大鼠体外血栓长度的影响：结果见表1
表1 龟龙中风丸对大鼠体外血栓长度的影响(X±SD)
药物 浓度※ 例数 血栓长度(mm) P
NS 10 21.2±1.13
中 风 康 12.5mg/ml 10 17.3±2.11 ＜0.05
25mg/ml 10 14.8±1.03 ＜0.05
50mg/ml 10 10.8±1.65 ＜0.05
华佗再造丸 12.5mg/ml 10 16.0±1.26 ＞0.05
25mg/ml 10 13.8±1.75 ＞0.05
50mg/ml 10 9.3±1.56 ＞0.05
※浓度：为旋转环内终浓度。
由上表可见，龟龙中风丸各剂量组的体外血栓长度比NS组的体外血栓短，且随着浓度的增加而更为明显，说明龟龙中风丸对大鼠体外血栓长度有缩短作用，并有良好的量效关系。华佗再造丸对大鼠体外血栓长度也有缩短作用。
E、龟龙中风丸对东莨菪碱所致小鼠记忆障碍影响
一、材料与方法
1、药物：龟龙中风丸、华佗再造丸、脑复康。
2、动物：昆明种小白鼠，雄性，体重18-22克，购于中国科学院动物所。
3、方法：[1、2、3]将小鼠随机分为7组，每组10-12只。<1>正常对照组；<2>东莨菪碱组(0.005g/kg)；<3>脑复康组(0.4g/kg)；<4>华佗再造丸组(10g/kg)；<5>龟龙中风丸大剂量组(10g/kg)；<6>龟龙中风丸中剂量组(5g/kg)；<7>龟龙中风丸小剂量组(2.5g/kg)。各给药组均灌胃给药，正常对照组和东莨菪碱组给予等量蒸馏水，每日一次，连续七日。末次给药50分钟后，<2>-<7>组每只小鼠皮下注射氢溴东莨菪碱5mg/kg，造成记忆获得障碍，10分钟后，开始跳台法训练24小时后测验动物3min内受电击数(错误次数)。进行组间比较及统计学处理。
二、结果
本实验通过给小鼠皮下注射东莨菪碱，造成记忆获得障碍模型，结果见表。龟龙中风丸三个剂量组错误次数均有不同程度的减少，其中大剂量组错误次数为0.82±0.75与东莨菪碱组1.60±0.80比较有显著性差异，P＜0.05。说明龟龙中风丸有一定的改善小鼠学习记忆的能力，对小鼠记忆获得障碍具有保护作用。脑复康组错误次数与东莨菪碱相比较明显减少，P＜0.05；华佗再造丸对小鼠跳台实验无明显影响。
表：龟龙中风丸对东莨菪碱所致记忆获得障碍的影响：(X±SD)
组别 剂量(g/kg) 东莨菪碱(g/kg) 动物数(只) 错误次数(次)
正常对照组 10 0.10±0.30
东莨菪碱组 0.005 10 1.60±0.80△△△
脑复康组 0.4 0.005 11 0.64±0.81※
中风康大剂量组 10 0.005 11 0.82±0.75※
中风康中剂量组 5 0.005 11 1.09±0.70
中风康小剂量组 2.5 0.005 12 0.92±0.79
华佗再造丸组 10 0.005 11 1.40±1.00
注：△△△＜0.001与正常对照组比较
※P＜0.05与东莨菪碱组比较
三、结语
实验证明，龟龙中风丸可改善小鼠学习记忆的能力，对东莨菪碱引起小鼠记忆获得具有一定的保护作用，并与脑复康的作用相似。
实施例一
本发明一种治疗中风的中药(龟龙中风丸)是由下述优选原料按重量比构成：熟地黄∶白芍∶当归∶川芎∶牛膝∶龙骨∶龟板∶丹参∶桃仁∶赤芍∶地龙∶石菖蒲∶天竺黄∶木瓜∶伸筋草∶薏苡仁∶桑枝∶丝瓜络∶全蝎∶杜仲碳＝8∶8∶3∶3∶3∶6∶3∶8∶3∶3∶3∶3∶8∶6∶4∶8∶8∶3∶1∶1。
其制备工艺如下(图1)：
a.以上二十味药，取天竺黄32g、石菖蒲12g、薏苡仁32g、地龙12g、全蝎4g粉碎成粗粉；
b.取熟地黄32g、白芍32g、当归12g、川芎12g、牛膝12g、龙骨24g、龟板12g、丹参32g、桃仁12g、赤芍12g、木瓜24g、伸筋草16g、桑枝32g、丝瓜络16g加水煎煮二次，第一次用4倍量的水，煎煮1个小时，过滤；第二次用7倍量的水，煎煮2.5小时，过滤；
c.将上述两次滤液合并，浓缩至稠膏，减压缩至相对密度1.28(50℃)；
d.在上述稠膏内加入天竺黄、石菖蒲、薏苡仁、地龙、全蝎五味药粗粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，用水泛丸，65℃干燥，得素丸；
e.用4g杜仲碳将素丸包衣、打光，即得成品丸。每30丸重5g。
实施例二
本发明一种治疗中风的中药(龟龙中风丸)是由下述优选原料按重量比构成：熟地黄∶白芍∶当归∶川芎∶牛膝∶龙骨∶龟板∶丹参∶桃仁∶赤芍∶地龙∶石菖蒲∶天竺黄∶木瓜∶伸筋草∶薏苡仁∶桑枝∶丝瓜络∶全蝎∶杜仲碳＝12∶12∶7∶7∶7∶10∶7∶12∶7∶7∶7∶7∶12∶10∶8∶12∶12∶7∶5∶3。
本发明的制备工艺如下(图1)：
a.以上二十味药，取天竺黄48g、石菖蒲28g、薏苡仁48g、地龙28g、全蝎20g粉碎成粗粉；
b.取熟地黄48g、白芍48g、当归28g、川芎28g、牛膝28g、龙骨40g、龟板28g、丹参48g、桃仁28g、赤芍28g、木瓜40g、伸筋草32g、桑枝48g丝瓜络28g加水煎煮二次，第一次用4倍量的水，煎煮1个小时，过滤；第二次用7倍量的水，煎煮2.5小时，过滤；
c.将上述两次滤液合并，浓缩至稠膏，减压缩至相对密度1.30(60℃)；
d.在上述稠膏内加入天竺黄、石菖蒲、薏苡仁、地龙、全蝎五味药粗粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，用水泛丸，95℃干燥，得素丸；
e.用杜仲碳将素丸包衣、打光，即得成品丸。每30丸重5g。
实施例三
本发明一种治疗中风的中药(龟龙中风丸)是由下述优选原料按重量比构成：熟地黄∶白芍∶当归∶川芎∶牛膝∶龙骨∶龟板∶丹参∶桃仁∶赤芍∶地龙∶石菖蒲∶天竺黄∶木瓜∶伸筋草∶薏苡仁∶桑枝∶丝瓜络∶全蝎∶杜仲碳＝10∶10∶5∶5∶5∶8∶5∶10∶5∶5∶5∶5∶10∶8∶6∶10∶10∶5∶3∶2。
本发明的制备工艺如下(图1)：
a.以上二十味药，取天竺黄40g、石菖蒲20g、薏苡仁40g、地龙20g、全蝎12g粉碎成粗粉；
b.取熟地黄40g、白芍40g、当归20g、川芎20g、牛膝20g、龙骨32g、龟板20g、丹参40g、桃仁20g、赤芍20g、木瓜32g、伸筋草24g、桑枝40g、丝瓜络20g加水煎煮二次，第一次用6倍量的水，煎煮2个小时，过滤；第二次用5倍量的水，煎煮1.5小时，过滤；
c.将上述两次滤液合并，浓缩至稠膏，减压缩至相对密度1.29(55℃)；
d.在上述稠膏内加入天竺黄、石菖蒲、薏苡仁、地龙、全蝎五味药粗粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，用水泛丸，85℃干燥，得素丸；
e.用杜仲碳将素丸包衣、打光，即得1000丸成品丸。每30丸重5g。
实施例四
本发明一种治疗中风的中药(龟龙中风丸)是由下述优选原料按重量比构成：熟地黄∶白芍∶当归∶川芎∶牛膝∶龙骨∶龟板∶丹参∶桃仁∶赤芍∶地龙∶石菖蒲∶天竺黄∶木瓜∶伸筋草∶薏苡仁∶桑枝∶丝瓜络∶全蝎∶杜仲碳＝11∶11∶6∶6∶6∶9∶6∶11∶6∶6∶6∶6∶11∶9∶7∶11∶11∶6∶4∶2。
本发明的制备工艺如下(图1)：
a.以上二十味药，取天竺黄44g、石菖蒲24g、薏苡仁44g、地龙24g、全蝎16g粉碎成粗粉；
b.取熟地黄44g、白芍44g、当归24g、川芎24g、牛膝24g、龙骨36g、龟板24g、丹参44g、桃仁24g、赤芍24g、木瓜36g、伸筋草28g、桑枝44g丝瓜络24g加水煎煮二次，第一次用5倍量的水，煎煮1.5个小时，过滤；第二次用7倍量的水，煎煮2小时，过滤；
c.将上述两次滤液合并，浓缩至稠膏，减压缩至相对密度1.29(60℃)；
d.在上述稠膏内加入天竺黄、石菖蒲、薏苡仁、地龙、全蝎五味药粗粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，用水泛丸，85℃干燥，得素丸；
e.用8g杜仲碳将素丸包衣、打光，即得成品丸。每30丸重5g。
实施例五
本发明一种治疗中风的中药(龟龙中风丸)是由下述优选原料按重量比构成：熟地黄∶白芍∶当归∶川芎∶牛膝∶龙骨∶龟板∶丹参∶桃仁∶赤芍∶地龙∶石菖蒲∶天竺黄∶木瓜∶伸筋草∶薏苡仁∶桑枝∶丝瓜络∶全蝎∶杜仲碳＝9∶9∶4∶4∶4∶7∶4∶9∶4∶4∶4∶4∶9∶7∶5∶9∶9∶4∶1∶1。
其制备工艺如下(图1)：
a.以上二十味药，取天竺黄36g、石菖蒲16g、薏苡仁36g、地龙16g、全蝎4g粉碎成粗粉；
b.取熟地黄36g、白芍36g、当归16g、川芎16g、牛膝16g、龙骨28g、龟板16g、丹参36g、桃仁16g、赤芍16g、木瓜28g、伸筋草20g、桑枝36g、丝瓜络16g加水煎煮二次，第一次用4倍量的水，煎煮1个小时，过滤；第二次用7倍量的水，煎煮2.5小时，过滤；
c.将上述两次滤液合并，浓缩至稠膏，减压缩至相对密度1.28(50℃)；
d.在上述稠膏内加入天竺黄、石菖蒲、薏苡仁、地龙、全蝎五味药粗粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，用水泛丸，65℃干燥，得素丸；
e.用4g杜仲碳将素丸包衣、打光，即得成品丸。每30丸重5g。