作为分离剂的环果聚糖的组成物及方法.pdf

本发明涉及衍生环果聚糖化合物，包含衍生环果聚糖化合物的组成物，以及利用包含衍生环果聚糖化合物的组成物进行包括对映体的化学物质的色谱分离的方法。所述组成物可包含一固体载体及/或包含衍生环果聚糖化合物的聚合物。

权利要求书
1.  一种分子式Ⅰ的化合物，其特征在于，

其中：
n为1-3；
每个L独立地为，
O，CR2，NR2，
O-C(＝O)，
O-C(＝O)-NR2，
NC(＝O)-NR2，或

每个R独立地为，
H，
使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基
1 20
使用1-3R1选择性取代的(C-C
)环烷基
3 20
使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基
5 50
使用1-3R1选择性取代的杂芳基
(C1-C20)烷氧基(C1-C20)烷基，
H2C＝CH-(当L为O-C(＝O)时)，
H2C＝C(CH)-(当L为O-C(＝O)时)，烯烃基-N＝C＝O；
亚芳基-N＝C＝O；
-SOR5(当L为O时)，
使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基1(C-C
)烷基，或者
5 50
1 20
缺少羟基的糖类残基(当L为O时)；
R1独立地为使用1-3R6选择性取代的(C-C
)烷基、卤代、羟基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、
硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)；
1 10
R2独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
R3独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
R4独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
R5独立地为使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，使用1-3R1选择性取代的(C-C)
1 20
芳基，或者使用1-3R1选择性取代的杂芳基；
R6独立地为卤代、羟基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)
5 50
；以及
假设所有所述的R基团不同时为H或甲基。

2.  一种组成物，其特征在于，包含：一固体载体；以及一环果聚糖残基，共价连接至所述固体载体。

3.  一种组成物，其特征在于，包含：一固体载体；以及一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基：

其中：
n为1-3；
每个L独立地为，
O，CR2，NR2，
O-C(＝O)，
O-C(＝O)-NR2，
NC(＝O)-NR2，或

每个R独立地为，
H，
使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，
1 20
使用1-3R1选择性取代的(C-C
)环烷基，
3 20
使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基，
5 50
使用1-3R1选择性取代的杂芳基，
(C1-C20)烷氧基(C1-C20)烷基，
H2C＝CH-(当L为O-C(＝O))，
H2C＝C(CH)-(当L为O-C(＝O))，烯烃基-N＝C＝O；
亚芳基-N＝C＝O；
-SOR5(当L为O)，
使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基(C-C
)烷基，或者
5 50
1 20
缺少羟基的糖类残基(当L为O时)，或者包含至所述固体载体的一共价键；
R1独立地为使用1-3R6选择性取代的(C-C
)烷基、卤代、羟基、-NR3R4，-COOR2、-COR2、
硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)；
1 10
R2独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
R3独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
R4独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
R5独立地为使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，使用1-3R1选择性取代的(C-C)
1 20
芳基，或者使用1-3R1选择性取代的杂芳基；
R6独立地为卤代、羟基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)
5 50
；以及
其中一至五个R基团包含连至固体载体的共价键。

4.  如权利要求3所述的组成物，其特征在于，所述固体载体为一硅胶固体载体。

5.  如权利要求3所述的组成物，其特征在于，n为1。

6.  如权利要求3所述的组成物，其特征在于，n为2。

7.  如权利要求3所述的组成物，其特征在于，n为3。

8.  如权利要求3所述的组成物，其特征在于，至少一L为O。

9.  如权利要求3所述的组成物，其特征在于，至少一L为O-C(＝O)。

10.  如权利要求3所述的组成物，其特征在于，至少一L为O-C(＝O)-NR2。

11.  如权利要求3所述的组成物，其特征在于，至少一L为NC(＝O)-NR2。

12.  如权利要求3所述的组成物，其特征在于，每个R独立地为H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、环己基、苯基、甲苯基、三氯苯基、氯苯基、溴苯基、碘苯基、羟乙基、羟丙基、二氯苯基、苄基、氯甲苯基、萘乙基、硝基苯基、二硝基苯基、三硝基苯基、三氟甲基、二硝基、3，5-二甲基苯基或金刚烷基。

13.  如权利要求3所述的组成物，其特征在于，每个R独立地为异丙基、叔丁基、二甲苯基、二氯苯基、萘乙基或3，5-二甲基苯基。

14.  如权利要求3所述的组成物，其特征在于，每个R1独立地为羟丙基、羟乙基、甲基、三氯甲基、三氟甲基、氯代、溴代或碘代。

15.  一种组成物，其特征在于，包含：一固体载体；以及至少一聚合物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基：

其中：
每个n独立地为1-3；每个L独立地为，
O，CR2，NR2，
O-C(＝O)，
O-C(＝O)-NR2，
NC(＝O)-NR2，或

每个R独立地为，
Y，
Z，
H，
使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，
1 20
使用1-3R1选择性取代的(C-C
)环烷基，
3 20
使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基，
5 50
使用1-3R1选择性取代的杂芳基，
(C1-C20)烷氧基(C1-C20)烷基，
H2C＝CH-(当L为O-C(＝O))，
H2C＝C(CH)-(当L为O-C(＝O))，烯烃基-N＝C＝O；
亚芳基-N＝C＝O；
-SOR5(当L为O)，
使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基(C-C
)烷基，或者
5 50
1 20
缺少羟基的糖类残基(当L为O时)，
R1独立地为使用1-3R6选择性取代的(C-C
)烷基、卤代、羟基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、
硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)；
1 10
R2独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
R3独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
R4独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
R5独立地为使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，使用1-3R1选择性取代的(C-C)
1 20
芳基，或者使用1-3R1选择性取代的杂芳基；
R6独立地为卤代、羟基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)
5 50
；以及
Y包含连至不同单体残基的一共价键；以及Z包含连至所述固体载体的一共价键；以及其中零至五个R基团包含至固体载体的共价键。

16.  如权利要求15所述的组成物，其特征在于，所述聚合物在所述固体载体上形成一涂层。

17.  如权利要求15所述的组成物，其特征在于，所述聚合物共价连接至所述固体载体。

18.  如权利要求15所述的组成物，其特征在于，所述分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基在所述聚合物上形成一侧基。

19.  如权利要求15所述的组成物，其特征在于，所述分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基形成所述聚合物的骨架的一部分。

20.  一种色谱分离方法，其特征在于，包含：
提供，作为第一固定相，权利要求3或权利要求15的组成物以分离混合物中的化学物
质。

21.  如权利要求20所述的方法，其特征在于，通过高压液相色谱法执行所述色谱分离。

22.  如权利要求20所述的方法，其特征在于，通过气相色谱法执行所述色谱分离。

23.  如权利要求20所述的方法，其特征在于，通过毛细管色谱法执行所述色谱分离。

24.  如权利要求20所述的方法，其特征在于，通过填充管柱气相色谱法执行所述色谱
分离。

25.  如权利要求20所述的方法，其特征在于，通过超临界流体色谱法执行所述色谱分离。

26.  如权利要求20所述的方法，其特征在于，通过毛细管电色谱法执行所述色谱分离。

27.  如权利要求20所述的方法，其特征在于，进一步包含提供一流动相，包含至少一有机溶剂或超临界流体。

28.  如权利要求27所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂为极性有机溶剂。

29.  如权利要求20所述的方法，其特征在于，至少一所述L为O-C(＝O)-NR2；
至少一所述R为异丙基；以及
至少一所述R包含一连至所述固体载体的共价键。

30.  如权利要求20所述的方法，其特征在于，至少一所述L为O-C(＝O)-NR2；
至少一所述R为萘乙基；以及
至少一所述R包含一连至所述固体载体的共价键。

31.  如权利要求20所述的方法，其特征在于，至少一所述L为O-C(＝O)-NR2；
至少一所述R为3，5-二甲基苯基；以及
至少一所述R包含一连至所述固体载体的共价键。

32.  一种毛细管电泳的方法，其特征在于，包含：
提供一电解液，包含权利要求3或权利要求15的组成物，用以分离混合物中的化学物
质。

说明书作为分离剂的环果聚糖的组成物及方法
技术领域
[0001] 本发明涉及色谱领域。尤其是手性色谱。
背景技术
[0002]对映体液相色谱(LC)分离在过去的几十年里已备受关注。目前，已报导了百余种手性固定相(CSP)，并且藉由涂渍或连接手性选择剂至载体(通常是硅胶载体)而形成这些CSP。值得探讨的是仅有几种/类CSP在对映体分离领域为主流。多糖类CSP、大环抗生素CSP和π复合物CSP为主要种类的实例。并且在每类CSP中，通常有一个或两个主导实体。因此，尽管引入多种手性选择剂/CSP，但大多数分离仍仅使用少部分的手性选择剂/CSP。一般而言，为了产生实质作用，任意新的CSP必须满足一个或多个下述要求：(a)比现存CSP具有更广的适用性，(b)对特定对映体更好的分离特性(如更好的选择性、更高的效率、更有利的溶剂亲和性、更短的分离时间、低成本、使用超临界流体色谱法的能力增强等)或者(c)可填补没有其它CSP可奏效的重要的分众市场上的空缺。
[0003] 环果聚糖(CF)为大环低聚糖的一个相对较小部分。环糊精可能是该类分子的最有名成员。然而，各CF在其结构及作用上均不相同。CF为由六个或多个β-(2→1)-键合的D-呋喃果糖单元组成的环菊低聚糖。每个呋喃果糖单元包含四个手性中心和三个羟基。这些化合物的常用简写命名为CF6、CF7、CF8等，其中CFn表示在环状低聚体中具有n个果糖部分(如6、7、8等)的环果聚糖。
[0004] 环果聚糖由Kawamura和Uchiyama在1989年首先报导。通过环状芽孢杆菌(bacilluscirculans)的至少两个不同菌株凭借菊糖的发酵产生环果聚糖。产生环菊低聚糖果糖转移酶(CFTase)的基因已被分离，并且其序列已被确定并纳入常见酵母酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)。因此，可进行CF的便利生产。图1显示了CF的基本结构。从CF6的x-射线晶体结构可知，较小的CF如环糊精无疏水空腔。因此，在结合有机分子与环糊精时发挥重要作用的疏水包合物似乎与环果聚糖无关。
[0005]反之，CF的戊糖部分(果糖)在冠醚核单元周围形成一螺旋桨状边缘。例如，CF6的晶体结构显示六个呋喃果糖环以螺旋或螺旋桨式排列在18-冠-6核周围，相对冠醚平面朝上或朝下。六个3-位羟基交替地朝向或远离分子中心，且指向内部的三个氧原子彼此
非常接近显然在环果聚糖分子中存在大量内部氢键。结果，在大环的一侧进入
18-冠-6核的入口被氢键羟基所阻挡。中央凹陷处周围的-O-C-CH2-O-的亚甲基造成CF6的另一侧似乎更疏水。CF6的计算亲油模式还证实CF6显示出亲水及疏水表面的一清楚的“前/后”区域化。晶体结构及计算模型研究证明CF6似乎具有大量额外的内氢键。实际上三个3-OH基团完全覆盖18-冠-6环一侧以及核冠氧几乎折入分子内，使得CF6与其它
18-冠-6系手性选择剂大不相同。表1示出CF6、CF7和CF8的相关物理-化学资料。
[0006] 表1环果聚糖6-8的的物理-化学性质
[0007]

[0008]a在此范围内熔化及分解
[0009]环果聚糖已用在各种应用中，大多数作为消费品中的添加物或者作为溶液中结合金属离子的媒介。作为消费品中添加物的CF的许多应用类似于环糊精的应用。例如，CF已用作纸张涂渍、食品和饮料苦味及涩味的缓和剂、褐变防护剂、乳液聚合剂、油墨配制剂、抑制异味的试剂、药物传递系统部分、润滑剂等。此外，CF已显示出具有冷冻保护效果并且用作一些离子的络合剂。然而，据我们所知，CF或其类似物从未用作广泛使用的CSP，其用于通过色谱进行对映体的分离。不限于理论约束，未衍生(或天然)的CF可能无法用作气液色谱(GLC)CSP，原因在于上述CF的熔点高且在其它液体GLC固定相中无法溶解。出于上述结构原因，天然CF6和其它CF受限形成疏水包合物及/或冠乙醚包合物。
发明内容
[0010]本发明涉及分子式Ⅰ的化合物，包含分子式Ⅰ化合物的组成物，以及利用包含分子式Ⅰ化合物的组成物进行化学物质色谱分离的方法，其中分子式Ⅰ如下：
[0011]

[0012]其中n、L和R如本发明所描述。
[0013]一方面，本发明提供一种组成物，该组成物包含一固体载体和共价连接至所述固体载体的一环果聚糖残基。另一方面，本发明提供一种组成物，该组成物包含一固体载体和分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基，其中n、L和R如本发明所描述并且其中一至五个R基团为连至固体载体的共价键。
[0014]再一方面，本发明提供一种组成物，该组成物包含一固体载体；以及至少一聚合物，其中所述聚合物包含至少一未衍生的环果聚糖的残基或分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基，其中n、L和R如本发明所描述并且其中零至五个R基团为连至固体载体的共价键。
附图说明
[0015]图1为环果聚糖的基本结构描述；
[0016]图2为包含本发明的固体载体和衍生环果聚糖残基的组成物的描述；
[0017]图3为一液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离正相模式(上曲线)、极性有机相模式(中曲线)和反相模式(下曲线)中的手性分析物的结果；
[0018]图4为一超临界流体色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离手性分析物的结果；
[0019]图5为一亲水作用液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP
的管柱来分离水杨酸、4-氨基水杨酸以及乙酰水杨酸的结果；
[0020] 图6为一液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离手性分析物的结果；
[0021] 图7A为一系列液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离手性分析物的结果；
[0022] 图7B为一系列液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离手性分析物的结果；
[0023] 图8为一系列液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离手性分析物的结果，其中添加剂的百分数从0.125变至0.50至2.0；
[0024] 图9A为一系列液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离手性分析物的结果；
[0025] 图9B为一系列液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离酪氨醇盐酸盐的对映体的结果；
[0026] 图10为一系列液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离1-(2-萘基)乙胺的对映体的结果；
[0027] 图11为一液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离手性分析物的结果；以及
[0028] 图12为一系列液相色谱，显示利用连接有包括本发明功能化环果聚糖的CSP的管柱来分离N-(3，5-二硝基苯甲酰)-苯甘氨酸的对映体的结果。
具体实施方式
[0029]定义
[0030]以下定义是为了清楚说明定义的术语，并不限制所定义的术语。如果本发明使用的特定术语未具体定义，该术语不应理解为不明确的。相反，在其接受的含义内使用术语。[0031]本发明使用的“环果聚糖”指的是由六个或多个β-(2→1)-键合的D-呋喃果糖单元组成的环菊低聚糖。
[0032] 本发明使用的“衍生环果聚糖”或“功能化环果聚糖”指的是使用其它官能团取代一个或多个羟基的环果聚糖。一般，在本发明的衍生或功能化CF6中使用其它官能团取代约2至18个羟基。一般，在本发明的衍生或功能化CF7中使用其它官能团取代约2至21个羟基。一般，在本发明的衍生或功能化CF8中使用其它官能团取代2至24个羟基。“低”衍生化指的是使用其它官能团取代大约2至7个羟基。类似地，“未衍生环果聚糖”或“天然环果聚糖”指的是不使用不同官能团取代羟基。
[0033]本发明使用的“烷基”指的是1至大约20个碳原子的脂肪烃链，优选1至大约10个碳原子，更优选1至大约6个碳原子，且更为优选1至大约4个碳原子，并且包括直链和支链，如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基和异己基。“低级烷基”指的是具有1至大约4个碳原子的烷基，其中“烷基”如此处所定义。
[0034]本发明使用的“烷烯基”指的是二价烷基，其中“烷基”如此处所定义。
[0035] 本发明使用的“芳烯基”指的是二价芳基，其中“芳基”如此处所定义。
[0036] 本发明使用的“芳基”指的是可选择性取代的单取代、二取代、三取代或其它多环芳香环体系，所述芳香环体系具有大约5至大约50个碳原子(以及其中碳原子的范围和具体数量的所有组合与次组合)，优选具有大约6至大约10个碳。非限制性实例包括如苯基、萘基、蒽基、菲基以及3，5-二甲基苯基。芳基可使用一个或多个如此处所定义的R1选择性取代。
[0037] 本发明使用的“杂芳基”指的是可选择性取代的单取代、二取代、三取代或其它多环芳香环体系，包括杂环，所述杂环包括至少一个，优选1至大约4个硫、氧或氮杂原子环成员。杂芳基可具有如大约3至大约50个碳原子(以及其中碳原子的范围和具体数量的所有组合与次组合)，优选具有大约4至大约10个碳原子。杂芳基的非限制性实例包括如吡咯基、呋喃基、吡啶基、1，2，4-噻二唑基、嘧啶基、噻吩基、异噻唑基、咪唑基、四唑基、吡嗪基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、苯硫基、苯并噻吩基、异苯并呋喃基、吡唑基、吲哚基、嘌呤基、咔唑基、苯并咪唑基以及异恶唑基。杂芳基可使用一个或多个如此处所定义的R1选择性取代。[0038] 本发明使用的“杂环”指的是稳定的5至7元单环或双环或7至10元双环杂环，所述杂环为饱和的、部分饱和或不饱和的(芳烃)，并且所述杂环包含碳原子以及1至4个杂原子，所述杂原子独立地选自由N、O和S组成的组群，并且杂环包括任何双环组群，其中任意上述所定义的杂环与苯环稠合。氮和硫原子可被选择性氧化。该杂环可在任何杂原子或碳原子处连接其侧基，从而产生稳定的结构。如果产生的化合物稳定，此处所描述的杂环可于碳或氮原子上取代。如果特别指出，杂环中的氮原子可被选择性四级化。优选的是当杂环中S和O原子的总数超过一个时，这些杂原子彼此不相邻。优选的是杂环中S和O原子的总数不超过一个。杂环的实例包括，但不限于，1H-吲唑基、2-吡咯烷酮基、2H，6H-1，5，2-二噻嗪基、2H-吡咯基、3H-吲哚基、4-呱啶基、4aH-咔唑基、4H-喹嗪基、6H-1，2，5-噻二嗪基、吖啶基、吖辛基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并苯硫基、苯并恶唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑基、咔唑基、4H-咔唑基、α-、β-、γ-咔啉基、苯并二氢吡喃基、苯并呱喃基、噌嗪基、十氢喹啉基、2H，6H-1，5，
2-二噻嗪基、二羟呋喃[2，3-b]四羟呋喃基、呋喃基、呋呫基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、
1H-吲唑基、吲哚烯基、吲哚啉基、吲嗪基、吲哚基、异苯并呋喃基、异苯并二氢吡喃基、异吲唑基、异吲哚啉基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异恶唑基、吗啉基、萘啶基、八氢异喹啉基、恶二唑、1，2，3-恶二唑、1，2，4-恶二唑、1，2，5-恶二唑、1，3，4-恶二唑、恶唑烷基、恶唑基、恶唑烷嘧啶基、啡啶基、啡啰啉基、啡恶嗪基、啡嗪基、啡噻嗪基、啡恶噻基、呔嗪基、呱嗪基、呱啶基、呱啶酮基、4-呱啶酮基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并恶唑基、吡啶并咪唑基、吡啶并噻唑基、吡啶基、氮苯基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎宁环基、咔啉基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、6H-1，2，5-噻二嗪基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并恶唑基、噻吩并咪唑基、苯硫基、三嗪基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1，2，5-三唑基、1，
3，4-三唑基、呫吨基。优选的杂环包括，但不限于，吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、吲哚基、苯并咪唑基、1H-吲唑基、恶唑烷基、苯并三唑基、苯并异唑基、羟吲哚基、苯并恶唑啉基或靛红酰基。还包括稠合环和含螺环化合物，例如上述杂环。
[0039] 本发明使用的“环烷基”指的是可选择性取代的、其结构中具有一个或多个环的烷基，该结构具有3至大约20个碳原子(以及其中碳原子的范围和具体数量的所有组合与次组合)，优选具有3至大约10个碳原子。多环结构可为桥连或稠合环结构。组群包括，但不限于，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环辛基、2-[4-异丙基-1-甲基-7-氧杂-二环[2.2.1]庚基]、2-[1，2，3，4-四氢-萘基]以及金刚烷基。环烷基可使用一个或多个如此处所定义的R1选择性取代。
[0040] 本发明使用的“卤代”或“卤素”指的是氯代、溴代、氟代和碘代或氯、溴、氟和碘。[0041] 本发明使用的“糖类残基”指的是单糖、二糖、低聚糖或多糖，或指包含单糖、二糖、低聚糖或多糖的化合物，其中可使用不同官能团选择性取代糖类残基的一个或多个羟基。[0042] 化合物
[0043] 本发明的实施例包含衍生环果聚糖，组成物及其使用方法。本发明可以各种方式具体化。
[0044] 本发明的部分实施例包含分子式Ⅰ的化合物：
[0045]

[0046] 其中：
[0047] n为1-3；
[0048] 每个L独立地为，
[0049] O，[0050] CR2，[0051] NR2，
[0052] O-C(＝O)，[0053] O-C(＝O)-NR2，[0054] NC(＝O)-NR2，或[0055]

[0056] 每个R独立地为，
[0057] H，
[0058] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，
1 20
[0059] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)环烷基，
3 20
[0060] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基，
5 50
[0061] 使用1-3R1选择性取代的杂芳基，[0062] (C1-C20)烷氧基(C1-C20)烷基，[0063] H2C＝CH-(当L为O-C(＝O)时)，
[0064] H2C＝C(CH)-(当L为O-C(＝O)时)，
[0065]烯烃基-N＝C＝O；[0066]亚芳基-N＝C＝O；[0067]-SOR5(当L为O时)，
[0068] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基1(C-C
)烷基，或者
5 50
1 20
[0069] 缺少羟基的糖类残基(当L为O时)
[0070] R1独立地为使用1-3R6选择性取代的(C-C
)烷基、卤代、羟
基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)；
1 10
[0071] R2独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0072] R3独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0073] R4独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0074] R5独立地为使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，使用1-3R1选择性取代的
(C-C)芳基，或者使用1-3R1
1 20
选择性取代的杂芳基；
[0075] R6独立地为卤代、羟基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)；以
及
[0076] 假设所有所述的R基团不同时为H或甲基。
[0077] 在本发明的一些实施例中，一个或多个L基团为O。在这种情况下，O为二价并通过单键连接CF和R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为CR2。在这种情况下，CR2为二价并经由L基团的C原子和CF中的C原子之间的C-C单键连接至CF。该L基团经由L基团的C原子和R基团中的一原子之间的C-R单键连接至R基团。在一些实施例中，一个或多个L基团为NR2。在这种情况下，NR2为二价并经由L基团的N原子和CF中的C原子之间的N-C单键连接至CF。该L基团经由L基团的N原子和R基团中的一原子之间的N-R单键连接至R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为O-C(＝O)。在这种情况下，O-C(＝O)为二价并经由L基团的第一O原子和CF中的C原子之间的C-O
单键连接至CF。所述L基团的第一O原子接着通过C-O单键连接至L基团的羰基碳。该L基团经由L基团的羰基碳和R基团中的一原子之间的C-R单键连接至R基团。在本发明的另一其它实施例中，一个或多个L基团为O-C(＝O)-NR2。在这种情况下，O-C(＝O)-NR2为二价并经由L基团的第一O原子和CF中的C原子之间的C-O单键连接至CF。所述L基团的第一O原子接着通过C-O单键连接至L基团的羰基碳。该L基团的羰基碳接着经由C-N单键连接至L基团的N。该L基团经由L基团的N原子和R基团中的一原子之间的N-R单键连接至R基团。在本发明的一些实施例中，一个或多个L基团为NC(＝O)-NR2。在这种情况下，NC(＝O)-NR2为二价并经由L基团的第一N原子和CF中的C原子之间的C-N双键连接至CF。所述L基团的第一N原子接着通过C-N单键连接至L基团的羰基碳。该L基团的羰基碳接着经由C-N单键连接至L基团的第二N。该L基团经由L基团的第二N原子和R基团中的一原子之间的N-R单键连接至R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为叠氮化物和炔烃之间1，3-偶极环加成反应的环加成产物(链接化学)。在这种情况下，环加成产物为二价并能以两种方式连接至CF和R基团。第一，该CF可经由CF中的C原子和如上述具有两个单键(一个N-N单键以及一个C-N单键)的环加成产物中的N原子之间的C-N单键连接至L基团。然后在相对于连接至CF的环加成产物的N原子的β位，该L基团通过R基团的一原子和环加成产物中的C原子之间的C-R单键连接至R基团。该连接可在叠氮化物功能化CF和含炔烃的R基团之间产生推定反应。该L基团的第二种可能连接是反向的，而在炔烃功能化CF和含叠氮化物的R基团之间产生所推定的反应。[0078] 在本发明的一些实施例中，分子式Ⅰ中的L基团和部分R基团可共同包含用于连接环果聚糖骨架至另一部分的所有或部分官能团。在本发明的一些实施例中，分子式Ⅰ中的L基团和部分R基团可在CF和另一部分之间共同形成所有或部分氨基甲酸酯、酯、乙醚、烯烃、仲或叔胺、1，3-偶极环加成产物(链接化学)键合。在本发明的一些实施例中，分子式Ⅰ中无-LR基团为-OH或-O-甲基。在本发明的其它实施例中，分子式Ⅰ中无-LR基团为-OH或-O-甲基，但不是所有的-LR基团都相同。在本发明的另外实施例中，分子式Ⅰ中无-LR基团为-OH或-O-甲基，并且所有的-LR基团相同。在本发明的再一其它实施例中，分子式Ⅰ中至少一个但不是所有-LR基团为-OH或-O-甲基。
[0079]在一些实施例中，通过与本发明目的不相符的任何方式合成分子式Ⅰ中的化合物。在本发明的一些实施例中，如本发明所描述利用一反应简图以及一个或多个能够形成氨基甲酸酯、酯、乙醚、烯烃、仲或叔胺、13-偶极环加成产物(链接化学)连接的试剂，从天然CFn合成分子式Ⅰ中的化合物。
[0080]组成物
[0081]本发明的一些实施例包括含有衍生的或未衍生的环果聚糖的组成物。
[0082]在本发明的一些实施例中，一组成物包含一固体载体和与所述固体载体结合的环果聚糖残基。所述环果聚糖残基可通过与本发明目的不相符的任何方式与所述固体载体相结合。在本发明的一些实施例中，一组成物包含一固体载体和共价连接至所述固体载体的一环果聚糖残基。在包含固体载体的本发明其它实施例中，环果聚糖可直接吸附至一固体载体。参见图2，在一些实施例中，环果聚糖(组成部分10)可通过连接子(组成部分20)直接共价连接至一固体载体(组成部分30)。在另一些实施例中，环果聚糖可被吸附或共价连接至一聚合物或低聚物，而该聚合物或低聚物能被吸附、涂渍或连接至一固体载体。在本
发明的一些实施例中，一组成物包含一固体载体和共价连接至所述固体载体的一环果聚糖残基，其中所述环果聚糖残基未经硫酸盐功能化。
[0083]在本发明的实施例中，包括含有一固体载体和与所述固体载体结合的一环果聚糖残基的组成物，该环果聚糖残基可包含与本发明目的不相符的任何环果聚糖残基。在本发明的一些实施例中，该环果聚糖为天然环果聚糖。在其它实施例中，该环果聚糖为衍生环果聚糖。在本发明的另一些实施例中，一组成物包含一固体载体和分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基。
[0084]

[0085] 其中：
[0086] n为1-3；
[0087] 每个L独立地为，
[0088] O，[0089] CR2，[0090] NR2，
[0091] O-C(＝O)，[0092] O-C(＝O)-NR2，[0093] NC(＝O)-NR2，或
[0094]

[0095] 每个R独立地为，
[0096] H，
[0097] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，
1 20
[0098] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)环烷基，
3 20
[0099] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基，
5 50
[0100] 使用1-3R1选择性取代的杂芳基，[0101] (C1-C20)烷氧基(C1-C20)烷基，[0102] H2C＝CH-(当L为O-C(＝O))，
[0103] H2C＝C(CH)-(当L为O-C(＝O))，
[0104]烯烃基-N＝C＝O；[0105]亚芳基-N＝C＝O；[0106]-SOR5(当L为O)，
[0107] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基(C-C
)烷基，或者
5 50
1 20
[0108] 缺少羟基的糖类残基(当L为O时)，或者
[0109] 包含至所述固体载体的一共价键；
[0110] R1独立地为使用1-3R6选择性取代的(C-C
)烷基、卤代、羟
基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)；
1 10
[0111] R2独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0112] R3独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0113] R4独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0114] R5独立地为使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，使用1-3R1选择性取代的
(C-C)芳基，或者使用1-3R1
1 20
选择性取代的杂芳基；
[0115] R6独立地为卤代、羟基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)；
[0116]其中一至五个R基团包含连至固体载体的共价键。
[0117]在包含分子式Ⅰ的环果聚糖的本发明的一些实施例中，分子式Ⅰ中一个或多个L基团为O。在这种情况下，O为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为CR2。在这种情况下，CR2为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在一些实施例中，一个或多个L基团为NR2。在这种情况下，NR2为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为O-C(＝O)。在这种情况下，O-C(＝O)为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的另一其它实施例中，一个或多个L基团为O-C(＝O)-NR2。在这种情况下，O-C(＝O)-NR2为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的一些实施例中，一个或多个L基团为NC(＝O)-NR2。在这种情况下，NC(＝O)-NR2为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为叠氮化物和炔烃之间1，3-偶极环加成反应的环加成产物(链接化学)。在这种情况下，环加成产物为二价并可连接至此处描述的CF和R基团。
[0118]在包含分子式Ⅰ的环果聚糖的本发明的一些实施例中，n为1。在其它实施例中，
n为2。在另一些实施例中，n为3。
[0119]在包含分子式Ⅰ的环果聚糖的本发明的一些实施例中，至少一个L为O。在其它实施例中，至少一个L为O-C(＝O)。在另一些实施例中，至少一个L为O-C(＝O)-NR2。在一些实施例中，至少一个L为NC(＝O)-NR2。
[0120] 在包含分子式Ⅰ的环果聚糖的本发明的一些实施例中，每个R独立地为H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、环己基、苯基、甲苯基、三氯苯基、氯苯基、溴苯基、碘苯基、羟乙基、羟丙基、二氯苯基、苄基、氯甲苯基、萘乙基、硝基苯基、二硝基苯基、三硝基苯基、三氟甲基、二硝基、3，5-二甲基苯基或金刚烷基。在其它实施例中，每个R独立地为异丙基、叔丁基、二甲苯基、二氯苯基、3，5-二甲基苯基或萘乙基。
[0121] 在包含分子式Ⅰ的环果聚糖的本发明的一些实施例中，每个R1独立地为羟丙基、羟乙基、甲基、三氯甲基、三氟甲基、氯代、溴代或碘代。
[0122]在本发明的实施例中，包括含有一固体载体和与所述固体载体结合的一环果聚糖残基的组成物，该固体载体可为与本发明目的不相符的任何固体载体。在本发明的一些实施例中，一组成物包含一固体载体和分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基，其中所述固体载体为硅胶固体载体。
[0123] 在本发明的一些实施例中，一组成物包含一固体载体和至少一聚合物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基：
[0124]

[0125] 其中：
[0126] 每个n独立地为1-3；[0127] 每个L独立地为，[0128] O，
[0129] CR2，
[0130] NR2，
[0131] O-C(＝O)，[0132] O-C(＝O)-NR2，[0133] NC(＝O)-NR2，或
[0134]

[0135] 每个R独立地为，
[0136] Y，
[0137] Z，
[0138] H，
[0139] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，
1 20
[0140] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)环烷基，
3 20
[0141] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基，
5 50
[0142] 使用1-3R1选择性取代的杂芳基，[0143] (C1-C20)烷氧基(C1-C20)烷基，[0144] H2C＝CH-(当L为O-C(＝O))，
[0145] H2C＝C(CH)-(当L为O-C(＝O))，
[0146]烯烃基-N＝C＝O；[0147]亚芳基-N＝C＝O；[0148]-SOR5(当L为O)，
[0149] 芳基(C-C)使用1-3R1
选择性取代的(C5-C50)烷基，或者
[0150] 缺少羟基的糖类残基(当L为O时)，
[0151] R1独立地为使用1-3R6选择性取代的(C-C
)烷基、卤代、羟
基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)；
1 10
[0152] R2独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0153] R3独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0154] R4独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0155] R5独立地为使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，使用1-3R1选择性取代的
(C-C)芳基，或者使用1-3R1
1 20
选择性取代的杂芳基；
[0156] R6独立地为卤代、羟基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)；以
及
[0157]Y包含一连至不同单体残基的共价键；以及
[0158]Z包含一连至所述固体载体的共价键；以及
[0159]其中零至五个R基团包含连至固体载体的共价键。
[0160]在本发明的实施例中，包含一含有一固体载体和至少一聚合物的组成物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基，所述固体载体可为如此处所述的与本发明目的不相符的任何固体载体。
[0161]在本发明的实施例中，包含一含有一固体载体和至少一聚合物的组成物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基，所述至少一衍生环果聚糖的残基可为与本发明目的不相符的任何衍生环果聚糖的残基，如此处所述。
[0162] 在本发明的实施例中，包含一含有一固体载体和至少一聚合物的组成物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基，所述聚合物可为与本发明目的不相符的任何聚合物。在本发明的一些实施例中，包含一含有一固体载体和至少一聚合物的组成物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基，所述聚合物在所述固体载体上形成一涂层。在本发明的其它实施例中，包含一含有一固体载体和至少一聚合物的组成物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基，所述聚合物共价连接至所述固体载体。在本发明的另一些实施例中，包含一含有一固体载体和至少一聚合物的组成物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基，所述分子式Ⅰ
的衍生环果聚糖的残基在所述聚合物上形成一侧基。在本发明的一些实施例中，包含一含有一固体载体和至少一聚合物的组成物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基，所述分子式Ⅰ的衍生环果聚糖的残基形成一所述聚合物骨架部分。
[0163]一般，本发明的含环果聚糖的聚合物可分为两类：(1)具有CF单元作为骨架的聚合物以及(2)具有CF作为侧基的聚合物。利用与本发明目的不相符的任何方式藉由聚合CF，可形成包含具有CF单元作为骨架的聚合物的本发明实施例。在一些实施例中，在碱性条件下，于干燥的N，N’-二甲基甲酰胺(DMF)或表氯醇中利用六亚甲基二异氰酸酯来聚合CF，从而提供具有CF单元作为骨架的聚合物。以该方式制备的含CF的聚合物能被涂渍在一固体载体上或共价连接至如此处所述的固体载体(如经由氨基甲酸盐连接)。藉由制备丙烯酸功能化CF(如甲基丙烯酸-CF)用作含CF的单体并接着共聚合这些单体及其它单体(如丙烯酰胺、丙烯酸、N-乙烯吡咯烷酮)，以提供具有CF单元作为骨架的聚合物，即可形成包含具有CF单元作为骨架的聚合物的本发明实施例。以该方式制备的含CF聚合物可被涂渍或连接至一此处描述的固体载体，也可藉由将一含CF单体锚定于一固体载体并接着在该固体载体表面上与其它单体共聚合，来形成含具有CF单元作为骨架的聚合物的本发明实施例。
[0164] 藉由制备一以适当的官能团(如p-甲苯磺酰基)衍生的CF并接着使适当衍生的CF与聚合物(如聚(丙烯胺)、聚(乙烯亚胺)、聚(乙烯胺)或聚(乙烯基咪唑))反应，以提供具有CF单元作为侧基的聚合物，即可形成含具有CF单元作为侧基的聚合物的本发明实施例。以该方式制备的含CF的聚合物可被涂渍或连接至此处描述的固体载体上。也可藉由首先涂渍一适当的聚合物至一此处描述的固体载体上，并接着使适当衍生化的CF与此处描述的经聚合物涂渍或经聚合物连接的固体载体反应，来形成含具有CF单元作为侧基的聚合物的本发明实施例。
[0165]方法
[0166]本发明的一些实施例包含色谱分离的方法，包括手性色谱分离。
[0167]在本发明的一些实施例中，色谱分离的方法包含提供一组成物作为第一固定相来分离混合物中的化学物质，其中该组成物包含一固体载体和一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基：
[0168]

[0169] 其中：
[0170] n为1-3；
[0171] 每个L独立地为，
[0172] O，[0173] CR2，[0174] NR2，
[0175] O-C(＝O)，[0176] O-C(＝O)-NR2，[0177] NC(＝O)-NR2，或者
[0178]

[0179] 每个R独立地为，
[0180] H，
[0181] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，
1 20
[0182] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)环烷基，
3 20
[0183] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基，
5 50
[0184] 使用1-3R1选择性取代的杂芳基，[0185] (C1-C20)烷氧基(C1-C20)烷基，[0186] H2C＝CH-(当L为O-C(＝O))，
[0187] H2C＝C(CH)-(当L为O-C(＝O))，
[0188]烯烃基-N＝C＝O；[0189]亚芳基-N＝C＝O；[0190]-SOR5(当L为O)，
[0191] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基(C-C
)烷基，或者
5 50
1 20
[0192] 缺少羟基的糖类残基(当L为O时)，或者
[0193] 包含至所述固体载体的一共价键；
[0194] R1独立地为使用1-3R6选择性取代的(C-C
)烷基、卤代、羟
基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)；
1 10
[0195] R2独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0196] R3独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0197] R4独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0198] R5独立地为使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，使用1-3R1选择性取代的
(C-C)芳基，或者使用1-3R1
1 20
选择性取代的杂芳基；
[0199] R6独立地为卤代、羟基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)；以
及
[0200]其中一个至五个R基团包含连至固体载体的共价键。
[0201]在包含分子式Ⅰ的环果聚糖的本发明的一些实施例中，分子式Ⅰ中一个或多个L基团为O。在这种情况下，O为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为CR2。在这种情况下，CR2为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在一些实施例中，一个或多个L基团为NR2。在这种情况下，NR2为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为O-C(＝O)。在这种情况下，O-C(＝O)为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的另一其它实施例中，一个或多个L基团为O-C(＝O)-NR2。在这种情况下，O-C(＝O)-NR2为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的一些实施例中，一个或多个L基团为NC(＝O)-NR2。在这种情况下，NC(＝O)-NR2为二价并连接至此处描述的CF和R基团。在本发明的其它实施例中，一个或多个L基团为叠氮化物和炔烃之间1，3-偶极环加成反应的环加成产物(链接化学)。在这种情况下，环加成产物为二价并可连接至此处描述的CF和R基团。
[0202]在本发明的一些实施例中，色谱分离的方法包含提供一组成物作为第一固定相来分离混合物中的化学物质，其中该组成物包含一固体载体和至少一聚合物，其中所述聚合物包含至少一分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基：
[0203]

[0204] 其中：
[0205] 每个n独立地为1-3；[0206] 每个L独立地为，[0207] O，
[0208] CR2，
[0209] NR2，
[0210] O-C(＝O)，[0211] O-C(＝O)-NR2，[0212] NC(＝O)-NR2，或
[0213]

[0214] 每个R独立地为，
[0215] Y，
[0216] Z，
[0217] H，
[0218] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，
1 20
[0219] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)环烷基，
3 20
[0220] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基，
5 50
[0221] 使用1-3R1选择性取代的杂芳基，[0222] (C1-C20)烷氧基(C1-C20)烷基，[0223] H2C＝CH-(当L为O-C(＝O))，
[0224] H2C＝C(CH)-(当L为O-C(＝O))，
[0225]烯烃基-N＝C＝O；[0226]亚芳基-N＝C＝O；[0227]-SOR5(当L为O)，
[0228] 使用1-3R1选择性取代的(C-C
)芳基(C-C
)烷基，或者
5 50
1 20
[0229] 缺少羟基的糖类残基(当L为O时)，
[0230] R1独立地为使用1-3R6选择性取代的(C-C
)烷基、卤代、羟
基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)；
1 10
[0231] R2独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0232] R3独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0233] R4独立地为H或者(C-C
)烷基；
1 10
[0234] R5独立地为使用1-3R1选择性取代的(C-C
)烷基，使用1-3R1选择性取代的
(C-C)芳基，或者使用1-3R1
1 20
选择性取代的杂芳基；
[0235] R6独立地为卤代、羟基、-NR3R4、-COOR2、-COR2、硝基、三卤代烷基或者-Si(OR2)；以
及
[0236] Y包含一连至不同单体残基的共价键；以及
[0237] Z包含一连至所述固体载体的共价键；以及
[0238] 其中零至五个R基团包含至固体载体的共价键。
[0239]在包含色谱分离方法的本发明实施例中，通过与本发明目的不相符的任何方法执行所述色谱分离。在包含色谱分离方法的本发明某些实施例中，通过高压液相色谱法执行所述色谱分离。在包含色谱分离方法的本发明其它实施例中，通过气液色谱法执行所述色谱分离。在包含色谱分离方法的本发明另一些实施例中，通过毛细管色谱法执行所述色谱分离。在包含色谱分离方法的本发明一些实施例中，通过填充管柱气相色谱法执行所述色谱分离。在包含色谱分离方法的本发明其它实施例中，通过超临界流体色谱法执行所述色谱分离。在包含色谱分离方法的本发明另一些实施例中，通过毛细管电色谱法执行所述色谱分离。
[0240] 在包含色谱分离方法的本发明一些实施例中，该方法进一步包含提供一流动相，该流动相包含至少一有机溶剂或超临界流体。在包含色谱分离方法的本发明一些实施例中，进一步包含提供一流动相，该流动相包含至少一有机溶剂或超临界流体，所述有机溶剂为极性有机溶剂。
[0241] 在包含色谱分离方法的本发明优选实施例中，所述色谱分离为手性分离，用以分
离外消旋混合物或立体异构体的其它混合物。
[0242] 在包含色谱分离方法的本发明实施例中，包含提供一含分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基的组成物作为第一固定相，可使用与本发明目的不相符的任何衍生环果聚糖残基。在包含色谱分离方法的本发明一些实施例中，包含提供一含分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基的组成物作为第一固定相，分子式Ⅰ中所述L的至少其中之一为O-C(＝O)-NR2，分子式Ⅰ中所述R的至少其中之一为异丙基，并且所述R的至少其中之一为连至所述固体载体的共价键。在包含色谱分离方法的本发明其它实施例中，包含提供，作为第一固定相，含分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基的组成物，分子式Ⅰ中所述L的至少其中之一为O-C(＝O)-NR2，分子式Ⅰ中所述R的至少其中之一为萘乙基，并且所述R的至少其中之一为至所述固体载体的共价键。在包含色谱分离方法的本发明另一些实施例中，包含提供，作为第一固定相，含分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基的组成物，分子式Ⅰ中所述L的至少其中之一为O-C(＝O)-NR2，分子式Ⅰ中所述R的至少其中之一为3，5-二甲苯基，并且所述R的至少其中之一为连至所述固体载体的共价键。
[0243]包含本发明衍生或未衍生环果聚糖的固定相可由各种方式制备。在本发明的一些实施例中，如此处描述，藉由化学连接一天然环果聚糖至氧化硅，然后选择性地使此处描述的天然环果聚糖衍生化来制备手性固定相。在本发明的其它实施例中，藉由首先使此处描述的环果聚糖部分衍生化，接着连接所述部分衍生的环果聚糖至此处描述的氧化硅来制备手性固定相。在本发明的一些实施例中，在部分衍生的环果聚糖连接至一固体载体之后，进一步予以衍生以达成完全衍生化。在本发明的其它实施例中，在部分衍生的环果聚糖被连接至一固体载体之后，使用不同部分功能化，从而提供一非均相衍生环果聚糖。
[0244] 含色谱分离方法的本发明实施例包含提供一含分子式Ⅰ的衍生环果聚糖残基的组成物作为第一固定相，其对于一系列广泛的分析物的分离是有用的，该分析物包括酸、碱、氨基酸衍生物、伯胺、仲胺、叔胺及其它。本发明的一些实施例对于广泛的伯胺分离来说尤其有用。此外，本发明的CF6-系CSP相对于普通有机溶剂显示出良好的稳定性，在超过
1000次注射之后观察的管柱性能中无不利的变化。此外，本发明的CF6-系CSP可同时用作分析级和制备级色谱的固定相。
[0245] 不拘于理论，兹认为可根据本发明主旨将环果聚糖功能化，从而提供两种不同类型的手性选择剂，两种手性选择剂是经由两种不同的机理来分离对映体及其它化学物质。例如，确信的是在本发明的一些实施例中，使用较小脂肪族部分而最低程度功能化的CF6具有一弛豫结构，该结构显示其冠醚核以及额外的羟基。不拘于理论，兹认为该结构可达有机溶剂中手性伯胺的相互作用及分离，这在以前是不可能的。在本发明的其它实施例中，使用芳香族部分而高度衍生化的CF6具有一立体拥塞结构，该结构阻碍进入其分子核但提供围绕其周边的足够其它反应位置。不拘于理论，兹认为在一些实施例中，这些位置为广泛的化合物提供手性识别。
[0246] 此外，本发明的一些实施例包含毛细管电泳的方法，该方法包含提供含分子式Ⅰ的组成物的电解液，用以分离混合物中的化学物质。
[0247] 实例
[0248] 本发明的一些示例性实施例将在以下具体、非限制实例中说明。应注意的是一些以下实例涉及具体CF原料或试剂，如CF6。然而，在这些情况中，在不改变或违反本发明的
主旨下，CF7或CF8可代替CF6。实例中使用的缩写如下：
[0249] AA＝乙酸[0250] ACN＝乙腈[0251] CF＝环果聚糖
[0252] DMF＝二甲基甲酰胺[0253] DMSO＝二甲亚砜[0254] EDTA＝乙二胺四乙酸
[0255] ESI-MS＝电喷雾电离-质谱
[0256] IP＝异丙基
[0257] IP-CFn＝异丙基-氨基甲酸盐功能化CFn
[0258] MW＝分子量
[0259] RN＝(R)-萘乙基
[0260] RN-CFn＝(R)-萘乙基-氨基甲酸盐功能化CFn
[0261] TEA＝三乙胺[0262] TFA＝三氟乙酸[0263] THF＝四氢呋喃[0264] 实例1
[0265] 衍生环果聚糖残基4，6-二-O-戊基-3-三氟乙酰基CF6的合成
[0266] 在冰浴中冷却CF6(1.00g)和无水DMSO(～15mL)的混合物。将精细研磨的NaOH(2.03g)和1-溴戊烷(6.05g)添加至上述混合物中，并且反应48小时。之后，将二氯甲烷(～60mL)和水(～60mL)添加至上述混合物中。产生的有机相被收集两次并用水冲洗数次。藉由旋转蒸发移除二氯甲烷之后接着在真空烘箱干燥一夜，得到淡黄色的粘性液体。ESI-MS证实CF已被戊基化，具有11-12的平均取代度。为了产生三氟乙酰基衍生物，在二氯甲烷中使用过量三氟乙酸酐处理4，6-二-O-戊基CF产物。终产物为液体。
[0267] 实例2
[0268] 衍生环果聚糖残基3，4，6-二-O-甲基CF6的合成
[0269] 藉由在室温下搅拌无水DMSO(～5mL)和NaH(0.864g)30分钟来制备二甲基亚磺酰基负碳离子溶液。接着，将CF6(0.600g)添加至该混合物中，并在室温下持续搅拌4小时。之后，在冰浴中冷却上述反应混合物，并且添加碘甲烷(8.1mL)。然后，室温搅拌该混合物一夜。接着添加二氯甲烷(～50mL)来抑制反应。使用水冲洗收集的有机相。藉由旋转蒸发移除二氯甲烷之后接着在真空烘箱干燥一夜，得到略微灰白色的固体。ESI-MS用于证实该产物：(m/z)1247(M+Na)+。
[0270] 实例3
[0271] 衍生环果聚糖残基丙基硫酸盐CF6(CF6-CHCHCHSO-)的合成
[0272] 在CF6(1当量)溶于无水DMF的溶液中添加过量的NaH(10当量)。室温下搅拌该产生的混合物12小时。然后，添加1，3-丙磺酸内酯(10当量)，接着室温搅拌12小时。然后通过甲醇的添加移除过量的NaH，得到衍生环果聚糖残基丙基硫酸盐CF6(CF6-CHCHCHSO-)。[0273] 实例4
[0274] 具有氨基甲酸酯连接子的衍生环果聚糖残基的合成
[0275]该实例显示在本发明的一些实施例中，一环果聚糖可衍生有一氨基甲酸酯连接子。
[0276]在100mL三口烧瓶中，将1gCF6置于烘箱内110℃下干燥5小时。然后，添加30ml无水吡啶以溶解CF6。在干燥氮气环境下，对该CF6溶液逐滴滴加0.6mL4-甲基苯基异氰酸酯/10mL吡啶。接着，将该混合物回流4小时。当该溶液冷却至室温时，根据本发明描述的步骤，其立即可连接至二氧化硅。
[0277]实例5
[0278]具有酯连接的衍生环果聚糖残基的合成
[0279]该实例显示在本发明的一些实施例中，一环果聚糖可衍生有一酯连接子。
[0280]在100mL三口烧瓶中，将1gCF6置于烘箱内110℃下干燥5小时。然后，添加30ml
无水吡啶以溶解CF6。在干燥氮气环境下，对该CF6溶液逐滴滴加0.6mL对甲基苯甲酰氯
/10mL吡啶。接着，将该混合物回流4小时。当该溶液冷却至室温时，根据本发明描述的步骤，其立即可连接至二氧化硅。
[0281]实例6
[0282]具有醚连接子的衍生环果聚糖残基的合成
[0283]该实例显示在本发明的一些实施例中，一环果聚糖可衍生有一醚连接子。
[0284]在100mL烧瓶中，将1gCF6置于烘箱内110℃下干燥5小时。然后，藉由在氩气环境下搅拌，添加30mL无水DMF来溶解CF6。接着，将0.2gNaH添加至该溶液中，再将温度缓慢升至70℃并保持30min。在氩保护下，添加1g1-氯-2，4-二硝基苯，并且将该混合物
100℃加热5小时。通过过滤移除产生的盐，并通过旋转蒸发移除DMF。使用3×100mL二乙醚冲洗该产物，并过滤及干燥该棕色固体产物。根据本发明描述的步骤，衍生的CF6随后可立即连接至二氧化硅。
[0285]除了实例1-6，亦制备许多其它衍生环果聚糖残基。表2列出了本发明衍生环果聚糖残基的一些实例。
[0286]表2本发明的一些衍生环果聚糖残基
[0287]

[0288]

[0289] 实例7
[0290] 通过醚键的氧化硅键合环果聚糖残基的制备
[0291] 用于化学键合非衍生(天然)环果聚糖的步骤与用于键合各种衍生环果聚糖的步骤基本相同。仅为了说明目的，以氧化硅键合非衍生环果聚糖残基的制备作为一实例。然而，熟悉本领域的人员应理解类似的步骤可达氧化硅键合衍生环果聚糖残基的制备。[0292] 在250mL三口烧瓶中，将3g硅胶(Kromasil，5μm球半径， 孔径)置
于110℃下干燥3小时。添加无水甲苯(150mL)，并利用迪安-斯达克分离器移除剩余水。将产生的混合物冷却至小于40℃，并添加1.3mL3-环氧丙氧丙基三甲氧基氧化硅烷。将该混合物100℃加热5小时。接着冷却并过滤该混合物。使用20mL甲苯、乙腈、甲醇、丙酮冲洗该固体产物。将产生的环氧功能化的氧化硅置于真空烘箱内干燥一夜。
[0293] 分别将1gCF6置于110℃下干燥5小时，并且接着在100mL圆底烧瓶中将CF6搅拌溶于30mL无水DMF。然后，在干燥氩气氛下，添加0.2gNaH至该溶液中并搅拌10min。通过真空过滤移除未反应的NaH。接着，添加3.3g干燥环氧功能化的氧化硅至100mL圆底烧瓶内的该滤液中。然后将该混合物140℃加热3小时。冷却并过滤该混合物。使用20mLDMF、乙腈、甲醇和丙酮冲洗该固体产物。接着将产生的氧化硅键合CF残基置于真空烘箱内干燥一夜，得到3.5g产物。
[0294] 实例8
[0295] 利用二异氰酸酯通过氨基甲酸酯键的氧化硅键合环果聚糖残基的制备
[0296]以至少两种方式将环果聚糖通过氨基甲酸酯键键合至硅胶。该实例描述了一种方法，同时实例9描述了另一种方法。此外，应注意的是该实例使用1，6-二异氰氧基己烷。但是也可使用在两个异氰酸酯之间具有不同距离的其它二异氰酸酯，如4，4’-二苯基甲烷二
异氰酸酯和1，4-苯二异氰酸酯。此外，用于化学键合非衍生(或“天然”)环果聚糖的步骤与用于键合各种衍生环果聚糖的步骤实质上相同。仅为了说明目的，以氧化硅键合非衍生环果聚糖残基的制备作为一实例。然而，熟悉本领域的人员应理解类似的步骤可达氧化硅键合衍生环果聚糖残基的制备。
[0297] 在250mL三口烧瓶中，将3g硅胶(Kromasil，5μm球半径， 孔径)置于110℃下干燥3小时。添加无水甲苯(150mL)，并利用迪安-斯达克分离器移除剩余水。将产生的混合物冷却至小于40℃，并逐滴滴加1mL3-氨丙基三甲氧基氧化硅烷。将该混合物回流4小时。接着冷却并过滤该混合物。使用乙腈、甲醇、丙酮冲洗该固体产物。然后将该固体产物真空干燥一夜，得到3.3g氨基功能化氧化硅。
[0298] 在250mL烧瓶中，添加180mL无水甲苯至干燥的3.3g氨基功能化氧化硅，并利用迪安-斯达克分离器移除剩余水。将该混合物冷却至室温，并添加2mL1，6-二异氰氧基己烷至干燥的氨基氧化硅甲苯匀浆，其保持在冰浴中。接着将该混合物70℃加热4小时。然后冷却并真空过滤该混合物。使用20mL无水甲苯冲洗该固体产物两次。然后，添加1g溶于20mL吡啶的干燥CF6，将该混合物70℃加热15小时。接着冷却并过滤该混合物。使用吡啶、乙腈、甲醇和丙酮冲洗该固体产物并将固体产物真空干燥一夜，得到3.7g产物。[0299] 实例9
[0300]利用异氰酸氧化硅烷通过氨基甲酸酯键的氧化硅键合环果聚糖残基的制备
[0301]以至少两种方式将环果聚糖通过氨基甲酸酯键键合至硅胶。该实例描述了一种方法，同时实例8描述了另一种方法。此外，用于化学键合非衍生(或“天然”)环果聚糖的步骤与用于键合各种衍生环果聚糖的步骤基本相同。仅为了说明目的，以氧化硅键合非衍生环果聚糖残基的制备作为一实例。然而，熟悉本领域的人员应理解类似的步骤可达氧化硅键合衍生环果聚糖残基的制备。
[0302]在100mL三口圆底烧瓶中，将1gCF6置于110℃下干燥5小时。然后搅拌添加40mL无水吡啶。接着，在干燥氩气氛下将0.7mL3-(三乙氧氧化硅基)丙基异氰酸酯逐滴滴加至该溶液中。接着将该混合物90℃加热5小时。在250mL三口烧瓶中，将3g硅胶(Kromasil，
5μm球半径， 孔径)置于110℃下干燥3小时。添加无水甲苯(150mL)，并利用迪安-斯达克分离器移除剩余水。在两混合物均冷却至室温之后，将环果聚糖混合物添
加至氧化硅-甲苯匀浆并于105℃加热一夜。接着冷却并过滤最终混合物。使用乙腈、甲醇
和丙酮冲洗该固体产物。在真空烘箱干燥一夜之后，得到3.4g产物。
[0303]实例10
[0304]通过醛基官能团与羟基官能团反应的氧化硅键合环果聚糖残基的制备
[0305]根据实例6中描述的步骤，氧化硅功能化有环氧基团。在3.5g环氧功能化氧化硅中，添加100mL0.01MHCl水溶液。将产生的混合物90℃加热3小时。然后冷却并过滤该混合物。使用水、甲醇和丙酮冲洗该固体产物并于真空烘箱内干燥一夜，得到3.5g二醇功能化氧化硅。将100mL60mM溶于水/甲醇(4∶1)的高碘酸钠添加至该二醇功能化氧化硅中并室温搅拌12小时。过滤、冲洗并干燥产生的醛功能化氧化硅。然后，混合1gCF6，
3.5g醛功能化氧化硅以及100mL通入HCl的甲苯并且回流一夜。接着冷却并过滤该混合物。冲洗并干燥该固体产物。然后，将50mL20mM溶于磷酸缓冲液(pH＝3)的氰基硼氢化钠(NaCHBH3)添加至该固体产物并室温搅拌5小时，从而减少剩余醛基。然后过滤并使用
水、甲醇、乙腈和丙酮冲洗该固体产物。
[0306] 实例11
[0307] 通过1，3-偶极环加成反应(链接化学)的氧化硅键合环果聚糖残基的制备[0308] 该实例显示叠氮化物和炔烃的1，3-偶极环加成反应可用于连接非衍生和衍生环果聚糖至硅胶。在本发明的一些实施例中，在链接反应之前，该硅胶可修饰有叠氮化物官能团，同时环果聚糖衍生有炔烃。在其它实施例中，硅胶可修饰有炔烃，同时环果聚糖衍生有叠氮化物官能团。在该实例中，仅为说明目的，炔烃功能化硅胶与叠氮化物修饰的环果聚糖反应以提供共价键合的环果聚糖固定相。
[0309] 使2gCF6和2gNaOH悬浮于200mL水中。将4.2g对甲苯磺酰氯/10mL乙腈逐滴滴至CF6溶液中。室温磁力搅拌反应2小时，过滤移除沉淀，并将该滤液保存于冰箱一夜。过滤并真空干燥回收所得沉淀，得到2.5g产物(单-6-脱氧-6-(对甲苯磺酰基)-CF6)。然后将产物(2g)置于6mL干燥N，N’-二甲基甲酰胺中并加热至65℃。接着，添加0.15g碘化钾和1.0g叠氮化钠，并将该反应混合物65℃搅拌24小时。然后，将该混合物冷却至室温并使用安伯来特(Amberlite)MB-3树脂处理移除盐。添加丙酮产生一白色沉淀，藉由过滤沉淀该白色沉淀并真空干燥一夜，得到1.4g产物(单-6-脱氧-6-叠氮基-CF6)。
[0310]将10g3-异氰酸丙基三乙氧基氧化硅烷溶于100mL无水DMF，添加3g炔丙胺至该溶液中，并且将该反应混合物加热至80℃磁力搅拌12小时。然后，在反应混合物冷却至室温之后，将10g预干燥的硅胶(110℃烘箱4h)添加至该反应混合物中。于95℃下搅拌该悬浮液16小时，得到炔烃修饰的硅胶。在将该产物真空干燥一夜之前，过滤并使用DMF、甲醇和丙酮冲洗该产物。
[0311] 接着，使1.5g单-6-脱氧-6-叠氮基-CF6、0.1g抗坏血酸钠、0.025g硫酸铜和
3.0g炔烃修饰的硅胶悬浮于120mL50％(v/v)甲醇水溶液中并室温搅拌72小时。过滤并依次使用甲醇、水、10％EDTA、水、甲醇和丙酮冲洗所得产物，然后真空干燥，得到共价连接的环果聚糖。
[0312] 实例12
[0313] 通过环果聚糖混合衍生物的氧化硅键合环果聚糖残基的制备
[0314] 首先，将1g干燥CF6溶于30mL无水吡啶。接着，搅拌添加2g10-十一烯酰氯。将该混合物回流2小时。然后，在干燥氩气环境下添加1.6g3，5-二甲基苯基异氰酸酯。接着将该混合物回流2小时。在该混合物冷却至室温之后，旋转蒸发移除溶剂。使用氯仿和乙醇冲洗该固体产物。然后将产生的衍生环果聚糖溶于丙酮并连接至3.5g结合硅胶。蒸发溶剂之后，添加0.1gAIBN(α，α’-偶氮二异丁腈)，并使该固体材料100℃反应2小时。然后使该固体悬浮于氯仿中并加热回流2小时。在反应混合物冷却至室温之后，过滤并使用氯仿和丙酮冲洗该固体氧化硅。
[0315] 实例13
[0316] 具有氨基甲酸酯连接子的氧化硅键合环果聚糖的衍生化
[0317]该实例以及实例14和15显示了在本发明的一些实例中，环果聚糖可首先连接至氧化硅，然后被衍生化以形成一氧化硅键合衍生环果聚糖。在该实例中，该环果聚糖发挥一氨基甲酸酯连接子的重要作用。
[0318] 将3.5gCF6-键合氧化硅(如本发明所描述制备)真空干燥一夜。将该材料置于
250mL三口烧瓶内，并添加150mL无水吡啶至该烧瓶中。利用迪安-斯达克分离器移除剩余水。然后，添加1.3mL4-甲基苯基异氰酸酯。将产生的混合物回流4小时。当该混合物冷却至室温时，过滤该混合物。使用吡啶、乙腈、水、甲醇和丙酮冲洗该固体产物，并真空干燥一夜，得到3.8g产物。
[0319]实例14
[0320]具有酯连接子的氧化硅键合衍生环果聚糖的合成
[0321]该实例以及实例13和15显示了在本发明的一些实例中，环果聚糖可首先连接至氧化硅，然后被衍生化以形成一氧化硅键合衍生环果聚糖。在该实例中，该环果聚糖发挥一酯连接子的重要作用。
[0322]将3.5gCF6-键合氧化硅(如本发明所描述制备)真空干燥一夜。将该材料置于
250mL三口烧瓶内，并添加150mL无水吡啶至该烧瓶中。利用迪安-斯达克分离器移除剩余水。然后，添加0.8mL对甲基苯甲酰氯。将产生的混合物回流4小时。当该混合物冷却至室温时，过滤该混合物。使用吡啶、乙腈、水、甲醇和丙酮冲洗该固体产物，并真空干燥一夜，得到3.8g产物。
[0323]实例15
[0324]具有醚连接的氧化硅键合衍生环果聚糖的合成
[0325]该实例以及实例13和14显示了在本发明的一些实例中，环果聚糖可首先连接至氧化硅，然后被衍生化以形成一氧化硅键合衍生环果聚糖。在
[0326]该实例中，该环果聚糖发挥一醚连接子的重要作用。
[0327]将3.5gCF6-键合氧化硅(如本发明所描述制备)真空干燥一夜。将该材料置于
250mL三口烧瓶内，并添加40mL无水DMF。接着，在氩保护下搅拌添加0.1gNaH。室温搅拌
30min后，添加4-氯-3，5-二硝基三氟甲苯(0.27g)。将该混合物100℃加热5小时。将该混合物冷却至室温并过滤。使用DMF、乙腈、水、甲醇和丙酮冲洗该固体产物，并真空干燥一夜，得到3.7g棕色产物。
[0328]实例16
[0329]完全衍生环果聚糖固定相的合成
[0330]在100mL三口烧瓶中，将1gCF6置于烘箱内110℃下干燥5小时。然后，添加30mL无水吡啶溶解CF6。接着在干燥氮气保护下，将1.0mL3，5-二甲基苯基异氰酸酯/10mL吡啶逐滴滴加至环果聚糖溶液中。接着回流该混合物4小时。当该溶液冷却至室温时，在干燥氩保护下，将0.7mL3-(三乙氧氧化硅基)丙基异氰酸酯/10mL吡啶的逐滴滴加至该溶液中。接着将该混合物90℃加热5h。
[0331]同时，在250mL三口烧瓶中，将3g硅胶(Kromasil，5μm球半径，孔径)置于110℃下干燥3h。添加无水甲苯(150mL)，并利用迪安-斯达克分离器移除剩余
水。
[0332]然后将两种混合物冷却至室温，将环果聚糖混合物倒入氧化硅-甲苯匀浆并于
105℃加热一夜。接着冷却并过滤所得混合物。使用乙腈、甲醇和丙酮冲洗该固体产物。在真空烘箱干燥一夜，得到3.5g产物。然后，将该产物置于250mL三口烧瓶中，对其添加150mL无水吡啶。利用迪安-斯达克分离器移除剩余水。然后，添加1.8mL3，5-二甲基苯基异氰酸酯。将该混合物回流4小时。当该溶液冷却至室温时，过滤该溶液。使用吡啶、乙腈、水、
甲醇和丙酮冲洗该固体产物，并真空干燥一夜，得到3.8g产物。
[0333] 实例17
[0334] 具有两种不同衍生基团的环果聚糖类似物的合成
[0335] 该实例描述了用于衍生具有二硝基苯基和二甲基苯基的CF6的步骤。在100mL烧瓶中，将1gCF6置于烘箱内110℃下干燥5小时。然后，在氩保护下搅拌添加30mL无水DMF溶解CF6。接着，将0.2gNaH添加至该溶液中，再将温度缓慢升至70℃并保持30分钟。在氩保护下，添加1g1-氯-2，4-二硝基苯，并且将该混合物100℃加热5小时。通过过滤移除产生的盐，并通过旋转蒸发移除DMF。使用3×100mL二乙醚冲洗所得固体产物。过滤并干燥所得棕色固体。然后，将1.3g产物溶于30mL吡啶。接着在干燥氩保护下，将0.7mL
3-(三乙氧氧化硅基)丙基异氰酸酯/10mL吡啶逐滴滴加至该溶液中。将该混合物90℃加热5小时。
[0336] 同时，在250mL三口烧瓶中，将3g硅胶(Kromasil，5μm球半径， 孔径)置于110℃下干燥3小时。添加无水甲苯(150mL)，并利用迪安-斯达克分离器移除
剩余水。将两种混合物冷却至室温，将环果聚糖反应混合物添加至氧化硅-甲苯匀浆并于
105℃加热一夜。冷却并过滤最终混合物。使用乙腈、甲醇和丙酮冲洗该固体产物并置于真空烘箱干燥一夜，得到3.6g产物。然后，将该固体产物置于250mL三口烧瓶中，对其添加
150mL无水吡啶。利用迪安-斯达克分离器移除剩余水。然后，添加1.8mL3，5-二甲基苯基异氰酸酯。将该混合物回流4小时。当该溶液冷却至室温时，过滤该溶液并使用吡啶、乙腈、水、甲醇和丙酮冲洗。在真空干燥一夜后，得到3.9g产物。
[0337] 实例18
[0338] 通过氨基甲酸酯连接子的聚合环果聚糖的合成以及包含该聚合环果聚糖的聚合
CSP的制备
[0339] 该实例以及实例19-24描述了聚合CF的合成以及包含该聚合CF的CSP的制备。尽管实例18-24中的一些描述了天然CF聚合物及包含该聚合CF的CSP的制备，但是使用衍生CF取代天然CF，可相近地制备衍生CF聚合物及CSP。
[0340]将六亚甲基二异氰酸酯(1-12当量)及CF6(1当量)溶于干燥的DMF中，CF∶交联剂摩尔比范围为1∶12至1∶1，并于80℃加热24-28小时。使产生的聚合物在大量甲醇中沉淀，过滤分离，并于50℃真空干燥24小时。将干燥聚合CF涂渍在3-氨丙基三乙氧基氧化硅烷基功能化大孔硅胶上，得到包含该聚合CF的聚合CSP。
[0341] 实例19
[0342] 通过醚连接子的聚合环果聚糖的合成以及包含该聚合环果聚糖的聚合CSP的制备
[0343] 将天然CF6(1当量)加至浓缩氢氧化钠溶液中搅拌4小时。然后将该溶液加热至30℃，并快速添加表氯醇交联剂(1-12当量)。该反应于30℃保持5小时并通过丙酮的添加而停止。随后经由倾析移除丙酮。然后使用盐酸中和该溶液并抽压过滤。蒸发剩余溶剂，并使用丙酮碎解剩余固体。通过过滤分离该聚合物并于50℃真空干燥24小时。然后，将CF聚合物(MW～25,000g/mol)涂渍在3-氨丙基三乙氧基氧化硅烷基功能化大孔硅胶上，得到包含该聚合CF的聚合CSP。
[0344] 实例20
[0345]聚合甲基丙烯酸酯功能化的环果聚糖的合成以及包含该聚合甲基丙烯酸酯功能化环果聚糖的聚合CSP的制备
[0346] 将甲基丙烯酸酯功能化CF6(CF6-MA；1当量)和1-乙烯基-2-吡咯烷酮(VP；1-12当量)溶于去离子水中，并将产生的溶液保持在80℃。然后添加引发剂过硫酸钾(K2S2O8)，并且搅拌所得化合物24小时。利用水透析所得小分子量CF6-MA聚合物并冰冻干燥；过滤、冲洗所得大分子量CF6-MA聚合物，并于50℃真空干燥24小时。然后将纯化及干燥的大分子量CF6-MA聚合物涂渍或连接至未功能化的硅胶上，得到包含聚合CF6-MA的聚合物CSP。[0347] 实例21
[0348]包含降冰片烯功能化环果聚糖的聚合CSP的制备
[0349]将硅胶及降冰片-2-烯-5-基三氯氧化硅烷置于甲苯中加热，提供表面结合共聚降冰片-2-烯基团。然后添加引发剂Cl2Ru(＝CHPh)(PCy3)2，其中Cy＝环己基，使其与结合于表面的降冰片-2-烯基团反应。最后，添加降冰片烯取代的CF6至非匀相引发剂并在硅胶表面形成接枝，得到包含CF6的聚合CSP。
[0350]实例22
[0351]聚合3-氯-2-羟丙基-功能化环果聚糖的合成以及包含该聚合3-氯-2-羟丙基-功能化环果聚糖的聚合CSP的制备
[0352]实例22和23共同说明了形成包含聚合3-氯-2-羟丙基-功能化环果聚糖的CSP的两种不同方法。在实例22中，首先合成单体3-氯-2-羟丙基-功能化环果聚糖，接着连接至一聚乙烯咪唑，然后用于制备CSP。
[0353]藉由在四氟硼酸锌(Zn(BF4)2)存在下、酸性介质中，使CF6与表氯醇于80℃反应数小时来制备3-氯-2-羟丙基CF6衍生物。用水回流加热数小时以将该产物共价连接至聚乙烯咪唑(MW＝8000)。将产生的聚合物涂渍或连接至未功能化的硅胶上。
[0354]实例23
[0355]包含3-氯-2-羟丙基-功能化环果聚糖的聚合CSP的制备
[0356] 实例22和23共同说明了形成包含聚合3-氯-2-羟丙基-功能化环果聚糖的CSP的两种不同方法。在实例23中，将单体3-氯-2-羟丙基-功能化环果聚糖连结至一事先涂渍或连接至一氧化硅的聚乙烯咪唑，从而衍生CF的添加构成了CSP制备的最终步骤。[0357] 首先将聚乙烯咪唑(PVI；MW＝8000)涂渍或连接至未功能化的硅胶。使产生的PVI-涂渍或连接的硅胶固体载体悬浮于0.1MpH7.4的磷酸缓冲液中并加热。然后添加
3-氯-2-羟丙基-功能化CF6，并将该混合物加热至100℃且保持48小时。过滤并使用水和乙醇冲洗该终产物，于50℃真空干燥24小时。
[0358]实例24
[0359]包含6-O-(对甲苯磺酰基)功能化环果聚糖的聚合CSP的制备
[0360]该实例说明了形成CSP的方法，该方法类似于实例23中描述的方法，但使用不同的功能化CF衍生物及不同的聚合物。
[0361]首先将聚乙烯亚胺(PEI)涂渍或连接至未功能化的硅胶。使产生的PEI-涂渍或连接的硅胶固体载体悬浮于甲醇/二甲基乙酰胺2/1(v/v)混合溶剂中。然后添加6-O-(对甲苯磺酰基)功能化CF6，并将该混合物加热至50℃且保持48小时。过滤并使用甲醇和丙酮冲洗该终产物，于50℃真空干燥24小时。
[0362]实例25
[0363]包括含3，4，6-三-O-(甲基)功能化环果聚糖的聚合CSP的气相色谱管柱的制备
[0364]该实例说明了用于形成包含本发明CSP的色谱管柱的静态涂渍方法。
[0365]如本发明所述制备衍生CF残基3，4，6-三-O-甲基CF6。确定的是14％氰丙基苯基和86％甲基聚氧化硅氧烷可溶解足够量的衍生CF残基。接着，将2.5mg3，4，6-三-O-甲基CF6和22.5mg甲基聚氧化硅氧烷溶于10mL二氯甲烷及氰丙基苯基中，从而产生一涂渍溶液，该涂渍溶液用于填充未经处理的熔融石英毛细管(10m×250μm)。当该毛细管被填充时，一端被紧紧密封，以及另一端连接至真空泵。然后将该毛细管置于水浴中(40℃)，并施加真空，进而移除溶剂，在毛细管壁上留下固定相(3，4，6-三-O-甲基CF6/14％氰丙基苯基
/86％甲基聚氧化硅氧烷)的均匀薄膜。在完成涂渍之后，在氦气流及高温下，将该管柱在气相色谱仪中活化，即形成包括含3，4，6-三-O-(甲基)功能化环果聚糖的聚合CSP的色谱管柱。
[0366]实例26
[0367]利用连接有包括(R)-1-异丙基萘功能化CF6的CSP的管柱的不同模式手性分析物的液相色谱分离
[0368]该实例说明了用于利用液相色谱达成手性分离的衍生CF的功效。如图3所示，连接有包括(R)-1-异丙基萘功能化CF6的CSP的管柱对于在正相模式(上曲线)、极性有机相模式(中曲线)和反相模式(下曲线)中分离手性分析物是有效的。在正相模式中流动相为70％庚烷/30％乙醇。在极性有机相模式中流动相为60％乙腈/40％甲醇/0.3％乙酸
/0.2％三乙胺。
[0369]实例27
[0370]利用连接有包括(R)-1-异丙基萘功能化CF6的CSP的管柱的对映体1，2-二苯基环氧化物的超临界流体色谱(SFC)分离
[0371]该实例说明了用于利用超临界流体色谱达成手性分离的衍生CF的功效。如图4所示，连接有包括(R)-1-异丙基萘功能化CF6的CSP的管柱对于将对映体1，2-二苯基环氧化物分为(S，S)和(R，R)对映体是有效的。流动相为95％二氧化碳和5％甲醇。
[0372]实例28
[0373]利用连接有包括丙基硫酸盐功能化CF6的CSP的管柱的水杨酸相关化合物的亲水作用液相色谱(HILIC)分离
[0374]该实例说明了用于利用亲水作用液相色谱(HILIC)达成数种水杨酸相关化合物分离的衍生CF的功效。如图5所示，连接有包括丙基硫酸盐功能化CF6的CSP的管柱对于分离水杨酸、4-氨基水杨酸以及乙酰水杨酸是有效的。流动相为93％乙腈和7％醋酸铵缓冲液(pH＝4.2)。
[0375]实例29
[0376]利用连接有包括丙基硫酸盐功能化CF6的CSP的管柱的极性有机相模式中对映体砜的液相色谱分离
[0377] 该实例说明了用于达成极性有机相模式中砜的对映体分离的衍生CF的功效。如图6所示，连接有包括丙基硫酸盐功能化CF6的CSP的管柱对于分离砜的对映体是有效的。流动相为90％甲醇、10％乙腈和0.1％乙酸。
[0379] 利用连接有包括天然、异丙基功能化及RN-CF6的CSP的管柱，对映体伯胺的液相色谱分离
[0380] 如图7A所示，该实例说明了相对于天然CF6仅部分取代有异丙基基团的功能化CF6亦可提高功效。然而，该实例还显示CF6分子取代度的进一步增加会导致分离伯胺能力明显恶化，如图7B所示。分析物/流动相如下：图7A：去甲变肾上腺素盐酸盐，75％ACN/25％MeOH/0.3％AA/0.2％TEA(上曲线)，60％ACN/40％MeOH/0.3％AA/0.2％TEA(下曲线)；图7B：1-氨基茚满，60％ACN/40％MeOH/0.3％AA/0.2％TEA(上和下曲线)。[0381] 实例31
[0382] 添加剂对于利用连接有包括功能化CF的CSP的管柱的对映体的液相色谱分离的影响
[0383] 该实例显示酸性及碱性添加剂对于极性有机相模式中伯胺分离的影响。为了评估极性有机相模式中酸性及碱性添加剂对于伯胺分离的影响，研究了不同种类及量的碱性添加剂。结果显示于表3中。利用三乙胺和乙酸的组合作为添加剂得到了最高对映选择性。此外，已优化酸性/碱性添加剂的比率，并且确定添加0.3％乙酸/0.2％三乙胺一般可产生最高选择性。
[0384] 还研究了AA和TEA总浓度的影响。当浓度比保持相同时，总浓度分别变为
0.125％、0.5％和2.0％。如图8所示，藉由减少伸舌峰或拖尾峰，增加添加剂的总浓度可引起更尖锐及更对称的峰。因此，该实例显示藉由改变添加剂的总浓度可提高对映体分离，尤其是当观察到非对称峰时。
[0385] 表3添加剂对于IP-CF6管柱上极性有机相模式中(±)反-1-氨基-2-茚醇(伯胺)分离的影响
[0386]

[0387] a流动相由60％乙腈/40％甲醇/0.3％乙酸(等于52mM)/14mM碱性添加剂组成
[0388] b体积分数
[0389] 实例32
[0390] 管柱温度对于利用连接包括功能化CF的CSP的管柱的对映体的液相色谱分离的
影响
[0391]该实例显示在低温时，在本发明的一些实施例中，对映选择性通常增加，但牺牲效率。图9A和图9B说明当包括功能化CF的CSP用于分离对映体环氧化物和酪氨醇盐酸盐时，降低管柱温可明显提高对映选择性及分辨率。因此该实例显示了藉由降低管柱温来提高对映体分离。
[0392]图9A中的分析物为反-氧化吡烯。衍生CF为IP-CF6。流动相为100％庚烷。色谱资料如下：上曲线：k1＝0.62，α＝1.10，Rs＝1.3；下曲线：k1＝0.80，α＝1.16，Rs
＝2.0。图9B中的分析物为酪氨醇盐酸盐。衍生CF为IP-CF6。流动相为70％甲醇/30％乙腈/0.3％乙酸/0.2％三乙胺。色谱资料如下：上曲线：k1＝1.28，α＝1.16，Rs＝2.2；中曲线：k1＝1.00，α＝1.12，Rs＝1.5；下曲线；k1＝0.79，α＝1.08，Rs＝1.1。
[0393]实例33
[0394]乙腈浓度对于利用连接包括功能化CF的CSP的管柱的对映体的液相色谱分离的影响
[0395]该实例显示，在本发明的一些实施例中，乙腈可用作利用连接有包括功能化CF的CSP的管柱，对映体伯胺的液相色谱分离中流动相的优选组成物。作为流动相的有机改性剂，测试乙腈、THF、二恶烷和乙酸乙酯。
[0396]图10显示了利用70％甲醇/30％改性剂/0.3％乙酸/0.2三乙胺，在IP-CF6固定相分离1-(2-萘基)乙胺的色谱图。在上述四种改性剂中，使用二恶烷观察到最差对映体选择性及分辨率，而使用乙酸乙酯作为改性剂得到最低效率及非对称峰。一般，使用乙腈作为改性剂可产生最佳结果。
[0397]表4显示了保留系数、选择性、效率及分辨率随着ACN浓度变化，酸性/碱性添加剂浓度保持恒定。增加乙腈浓度可提高保留系数，同时略微减小了选择性。使用20-40％乙腈时观察到最高效率。还应注意的是当乙腈百分数超过50％时，峰显示略微伸舌。当使用
50-60％乙腈时得到最大分辨率，产生更长的保留时间。因此该实例显示在本发明的一些实施例中，藉由优化流动相中使用的ACN的量，可提高对映体分离。
[0398]表4通过包括IP-功能化-CF6的CSP，ACN百分数对于极性有机相模式中1-(2-萘基)乙胺的对映体分离的影响
[0399] [0400]

[0401]a峰显示伸舌
[0402]b流动相由乙腈/甲醇/0.3％乙酸/0.2％三乙胺组成
[0403]实例34
[0404]利用连接包括二甲基苯基-氨基甲酸酯功能化CF7的CSP的管柱的化学物质的液相色谱分离
[0405]该实例显示CF7系衍生CF用作手性选择剂的使用。如图11所示，衍生CF7CSP成功分离了丹酰-N-亮氨酸环己基铵盐的对映体。通过所有试验的衍生CF6管柱仅部分分离该分析物。流动相为80％庚烷/20％EtOH/0.1％TFA。
[0406]实例35
[0407]利用包括衍生CF的CSP的高负荷色谱
[0408]该实例显示包括衍生CF的CSP可用作制备级液相色谱的固定相，包括HPLC。在极性有机相模式中对包括RN-CF6的CSP注入N-(3，5-二硝基苯甲酰)-苯甘氨酸以执行负荷试验。如图12所示，4200μg消旋分析物为分析管柱上分离的基线。应注意的是注入量受流动相中分析物的溶解度限制。流动相为85％ACN/15％MeOH/0.3％AA/0.2TEA。注入体积为5μL(上曲线)和100μL(下曲线)。在350nm进行UV检测。从该实例可清楚看到当保持基线分辨率时，可将更多量分析物负载至含本发明CSP的管柱上。
[0409]除了之前所述，执行利用连接有包括衍生环果聚糖残基的CSP的管柱的各种其它色谱分离。表5-9列出了利用连接有本发明CSP的管柱的色谱分离的一些额外实例。利用以下实验条件及步骤来执行利用连接有本发明CSP的管柱的色谱分离的所有实例。
[0410]高效液相色谱(HPLC)管柱填充系统由空气驱动流体泵(HASKEL，DSTV-122)、空气压缩机、压力调节器、低压计、两个高压计(10,000和6,000psi)、匀浆室、止回阀和管道组成。所述CSP被匀浆填充至25cm×0.46cm(内径，I.D.)不锈钢管柱中。
[0411] 该HPLC系统为安捷伦(Agilent)1100系统(AgilentTechnologies，PaloAlto，CA)，该系统由二极管数组检测器、自动取样器、二元泵、温度控制管柱室和化学工作站软件组成。如上所述将所有手性分析物溶于乙醇、甲醇或其它合适的流动相中。对于LC分析，注入量和流速分别为5μL和1mL/min。如果未特别指出则在室温下(～20℃)执行分离。UV检测的波长为195、200、210和254nm。通过真空超声波处理5min对流动相进行脱气。每个样品分析两次。除非另有说明，否则检测三操作模式(正相模式、极性有机相模式和反相
模式)。在正相模式中，庚烷和乙醇或异丙醇作为流动相。在一些情况下，三氟乙酸(TFA)用作添加剂，如上所述。极性有机相的流动相由乙腈/甲醇以及少量的乙酸和三乙胺组成。水/乙腈或乙腈/乙酸酯缓冲液(20mM，pH＝4.1)用作反相模式中的流动相。
[0412]使用两种不同超临界流体色谱仪器。一种为BergerSFC单元，具有FCM1200流量控制模块、TCM2100热管柱模块、复式泵控制模块以及管柱选择阀。流速为4mL/min。助溶剂由甲醇/乙醇/异丙醇＝1∶1∶1和0.2％二乙胺(DEA)组成。梯度流动相组成物为
5％助溶剂持续0-0.6min，5-60％持续0.6-4.3min，60％持续4.3-6.3min，60％-5％持续
6.3-6.9min，以及5％持续6.9-8.0min。另一个SFC系统为Jasco(MD，USA)系统，该系统由自动取样单元(AS-2059-SFPlus)、复式泵模块(PU-2086Plus)、管柱恒温器模块(CO-2060
Plus)、UV/Vis检测器(UV-2075Plus)和背压调节器模块(SCH-Vch-BP)。除非特定指出，流动相由CO2/甲醇(0.1％TFAor0.1％二乙胺)组成。流速为3mL/min。
[0413] 对于色谱数据的计算，通过由样品溶剂导致的折射率变化的峰来确定“死时间”t0
或通过在正相模式中注入1，3，5-三-叔-丁苯来确定“死时间”t0。
[0414] 表5利用连接有本发明的CSP的管柱的色谱分离实例
[0415]
[0416]

[0417]

[0418] 表5缩写：
[0419] k1＝保留系数
[0420] α＝选择性
[0421] Rs＝分辨率
[0422]

[0423] ACN：乙腈；ETOH：乙醇；IPA：异丙醇；TFA：三氟乙酸；AA：乙酸；TEA：三乙胺；CF6：由6环果聚糖单元组成的环果聚糖；CF7：由7环果聚糖单元组成的环果聚糖
[0424] 表6利用连接有本发明的CSP的管柱的伯胺色谱分离实例
[0425]

[0426]

[0427] aCSP的缩写：ME＝氨基甲酸甲酯-CF6CSP；IP＝氨基甲酸异丙酯-CF6CSP；RN-L
＝具有低衍化度的R-氨基甲酸萘乙酯-CF6CSP。
[0428] b流动相的缩写：A＝乙腈；M＝甲醇；AA＝乙酸；T＝三乙胺。
[0429] 表7利用连接有本发明CSP的管柱的各种化学物质的色谱分离的实例
[0430]

[0431]

[0432]

[0433]

[0434]

[0435] aCSP缩写：DMP＝二甲基苯基氨基甲酸酯-CF6CSP；DCP＝二氯苯基氨基甲酸酯-CF6CSP；RN＝R-萘乙基氨基甲酸酯-CF6CSP；SMP＝S-甲基苄基氨基甲酸酯-CF6
CSP；IP＝异丙基氨基甲酸酯-CF6CSP；ME＝甲基氨基甲酸酯-CF6CSP。
[0436] b流动相缩写：H＝庚烷；I＝异丙醇；E＝乙醇；A＝乙腈；M＝甲醇；AA＝乙酸；T
＝三乙胺；TFA＝三氟乙酸
[0437] 表8利用连接有包括IP-CF6的CSP的管柱，含消旋伯胺化合物的色谱分离的实例
[0438]
[0439]

[0440]

[0441]

[0442]

[0443]

[0444]

[0445]

[0446] a缩写：A＝乙腈；M＝甲醇；AA＝乙酸；T＝三乙胺；H＝庚烷；E＝乙醇；TFA＝三
氟乙酸；0C＝管柱温设定为0℃.
[0447] b使用折射率检测器检测；管柱流速为0.5mL/min。[0448] c使用折射率检测器检测；管柱流速为1mL/min。[0449] d使用管柱后荧光衍生化法检测。
[0450] e该分析物由两对对映体组成。
[0451] f流速为0.5mL/min。
[0452] 表9利用连接有包括RN-CF6的管柱的含消旋伯胺化合物的色谱分离的实例
[0453]

[0454]

[0455] a未由IP-CF6CSP分离分析物的对映体。[0456] b缩写：H＝庚烷；E＝乙醇；TFA＝三氟乙酸[0457] c流速为0.5mL/min.
[0458]可包括通过各种实施例显示的优选特点，但并不是本发明所有实施例都必须包括，但不限于以下：提供广泛的衍生环果聚糖，包括聚合环果聚糖；提供独特的手性选择剂，其可“调整”以分离不同类型分子的对映体以及非对映体的其它化学物质；提供CSP，其可有效分离各种有机溶剂、超临界CO2和溶剂水溶液中的各种化学物质；以及提供用于分离各种化学物质的分析及制备级色谱方法。
[0459]在达成本发明各种目的下已描述本发明的各种实施例。显然这些实施例仅为本发明主旨的说明。对于熟悉本领域人员显而易见的是在不脱离本发明精神和范围内可进行各种修饰和变更。