用作药物递送系统的无纺布膜.pdf

本发明定义了用于在身体的待处理区域治疗或化妆用活性剂受控和缓慢释放的无纺布膜。该无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和被缠结在所述纳米纤维之间的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述活性剂具有低的水溶性。

1.  无纺布膜，包含生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，所述纳米纤维属于单一类型的聚合物，特征在于所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，且其在溶解后被从所述膜释放。

2.  如权利要求1所述的无纺布膜，特征在于其至少包含：含有生物相容性电纺纳米纤维的第一层、含有生物相容性电纺纳米纤维和缠结在所述纳米纤维之间的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒的第二层；以及含有生物相容性电纺纳米纤维的第三层。

3.  如权利要求1所述的无纺布膜，特征在于所述至少一种治疗或化妆用活性剂具有0.001-33mg/mL的水溶解度。

4.  如权利要求1所述的无纺布膜，特征在于所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒为微晶。

5.  如权利要求1所述的无纺布膜，特征在于所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径。

6.  如权利要求1所述的无纺布膜，特征在于所述至少一种治疗或化妆用活性剂以相对于所述无纺布膜总重量的0.001％-20％重量加载。

7.  如权利要求1所述的无纺布膜，特征在于所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径。

8.  如权利要求1所述的无纺布膜，特征在于所述生物相容性电纺纳米纤维由选自以下的单一类型的生物相容性和生物可降解的聚合物组成：聚乙醇酸、聚D,L-乳酸、D,L-乳酸-乙醇酸共聚物、聚己酸内酯、 聚二氧环己酮、聚乙烯醇、胶原、纤维素、透明质酸及它们的组合。

9.  定制的套装，其包含权利要求1-8中任一项所述的无纺布膜以覆盖实体组织的特定区域。

10.  获得权利要求1-8中任一项所述的无纺布膜的方法，特征在于其包括以下步骤：
(a)电纺单一类型的生物相容性聚合物溶液；以及
(b)同时倒入至少一种治疗或化妆用活性剂微粒的悬液以获得电纺无纺布膜，所述电纺无纺布膜包含生物相容性电纺纳米纤维和被缠结在所述纳米纤维之间的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒。

11.  如权利要求10所述的方法，特征在于其包括以下步骤：
(i)至少电纺单一类型的生物相容性聚合物的溶液以收集无纺布膜的第一层，所述第一层包含生物相容性电纺纳米纤维；
(ii)至少电纺单一类型的生物相容性聚合物的溶液，并同时倒入至少一种治疗或化妆用活性剂微粒的悬液以收集无纺布网的位于所述第一层上的第二层，所述第二层包含生物相容性电纺纳米纤维和被缠结在所述纳米纤维之间的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒；以及
(iii)至少电纺单一类型的生物相容性聚合物的溶液以收集无纺布膜的位于所述第二层上的第三层，所述第三层包含生物相容性电纺纳米纤维。

12.  如权利要求10-11中任一项所述的方法，特征在于通过向至少一种治疗或化妆用活性剂的溶液中添加所述活性剂不能溶于其中的溶剂来制备所述微粒的悬液。

13.  如权利要求10-11中任一项所述的方法，特征在于通过向至少一种治疗或化妆用活性剂的溶液中添加具有所述活性剂不可溶的pH的溶液来制备所述微粒的悬液。

14.  如权利要求1-8中任一项所述的无纺布膜用于以受控和持续性的方式将治疗或化妆用活性成分局部递送至待处理的身体区域的用途。

15.  包含权利要求1-9中任一项所述的无纺布膜的定制的套装用于覆盖选自以下的实体组织的特定区域的用途：皮肤、黏膜、骨、肌肉、内脏器官和实体瘤。

用作药物递送系统的无纺布膜
技术领域
本发明涉及药物递送系统(DDS)领域。具体而言，本发明涉及用于治疗或化妆用活性剂在待处理的身体区域的受控和缓慢释放的无纺布膜。该无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和被缠结于所述纳米纤维之间的纯的活性剂微粒，所述活性剂具有有限的水溶性。
发明背景
用于癌症治疗的药物递送系统现在被数百万的患者使用，并且使得产生了新的疗法和对现有疗法的改善。抗癌药物在获得抗肿瘤活性所需的系统浓度下可产生巨大的毒性；因此，它们的局部递送使得可能改善其安全性和功效。
因此，局部植入的聚合装置在过去数十年中已积累了临床上的关注。一个实例由用于治疗胶质瘤的装载卡莫司汀的膜片(wafer)提供。此类制剂存在于装载于聚酐聚合物聚[二(对羧基苯氧基)丙烷癸二酸中的药物卡莫司汀(BCNU)的固体圆片中。装载BCNU的膜片被批准用于在手术后治疗脑瘤(胶质瘤)(Attenello et al.,Use of Gliadel(BCNU)Wafer in the Surgical Treatment of Malignant Glioma:A 10-Year Institutional Experience.Ann.Surg.Oncol.,200815(10):2887-93)。
聚合纳米纤维已被推荐为用于组织工程的可延展平台和在特定应用位点局部递送治疗药剂的载体。此类基于纳米纤维的系统组合了几个重要的方面，如大表面积和高孔隙率，其促进掺入纳米纤维的活性剂的透水性和扩散。已证明3种不同的技术可在常规生产纳米纤维结构中取得成功：(i)自组装，(ii)相分离和(iii)电纺。
用于从肽两亲化合物合成纳米纤维的自组装，由于其温和的制备条件和可获得的较小尺寸而具有吸引力。专利申请WO 2008/067145提供了从自组装肽形成纳米纤维的方法。然而，该技术仅适用于有限的聚合物 类群，且难以深入到宏观结构。从这些小纤维获得缓释动力学也存在挑战。
相分离技术需要将聚合物凝胶化和抽提溶剂，且因缺少对纤维排列的控制而受到损害。所需的溶剂抽提步骤还会过早地滤除任何包埋在纤维中的药物。另外，仅少数聚合物适合该方法，且其严格上为实验室规模的技术(Liu et al.,The nanofibrous architecture of poly(L-lactic acid)-based functional copolymers,Biomaterials 31(2010)259-269)。
电纺技术改善了上述用于获得纳米纤维的方法，因为其有助于技术的规模扩大并免除了溶剂抽提步骤。用于生物医学应用的电纺纳米纤维在过去几年中吸引了大量的注意。例如，电纺纳米纤维已被用于组织工程学、固定化酶和催化剂、伤口敷料和人造血管。它们还可用作防止手术后引发的黏附的屏障和用于受控的药物递送系统的媒介物。
已报导单轴和同轴电纺纳米纤维均以持续的方式吸收和释放抗生素、药物和蛋白。药物和生物活性剂被封装、包埋或掺入至纤维的体相，使得它们的释放动力学依赖于它们至纤维外的扩散和纤维降解/侵蚀。例如，在Xie et al.(Xie et al.,Electrospun micro-and nanofibers for sustained delivery of paclitaxel to treat C6glioma in vitro,Pharm.Res.23(2006),1817-1826)中，将含有疏水性抗癌药物如紫杉醇的生物可降解的聚合物溶液直接电纺以产生释放药物的纳米纤维网。同样，Xu et al.(Xu et al.,BCNU-loaded PEG-PLLA ultrafine fibers and their in vitro antitumor activity against Glioma C6cells,Journal of Controlled Release 114(2006)307-316)开发出了可植入的装载BCNU的聚合物纤维，以用于BCNU的受控释放。通过使用电纺法，该抗肿瘤剂被良好地掺入并均匀分布在生物可降解的聚(乙二醇)-聚(乳酸)(PEG-PLLA)共聚物纳米纤维中。在专利申请WO 2009/064767中，从以下物质的混合物形成了抗微生物纳米纤维：作为聚合物材料的电处理的醋酸纤维素、作为抗微生物剂的CHX和作为交联剂的有机钛酸盐，以这种方式将氯己定(clorhexidine,CHX)与纳米纤维共价相连。专利申请WO 2009/133059公开了通过电纺超支化聚酯和一水肌酸的溶液形成的纳米纤维基质，以用于肌酸的受控释放。
然而，许多引人关注的生物活性剂本质上为蛋白和核，其不溶于有 机溶剂且在分布于聚合物溶液中时可能经历生物活性损失。药物溶解于水核溶液中而聚合物溶解于有机壳溶液中的同轴电纺，是一种能够通过用两个同轴的喷嘴分别喷出所述核和壳溶液来克服该缺陷的方法。在专利申请WO 2008/013713中，公开了具有核和环绕核的聚合物壳的同轴电纺纳米纤维，其中生长因子或腺病毒被封装在核中。
在一些情况下，可将电纺纳米纤维的表面化学功能化，以通过不同生物活性分子如蛋白、酶、生长因子或药物的物理吸附实现持续递送。例如，将治疗蛋白和核酸进行物理固定以用于受控递送(Patel et al.,Bioactive nanofibers:synergistic effects of nanotopography and chemical signaling on cell guidance,Nano Lett.7(2007)2122-8)，并将抗菌剂进行物理固定以用于从纳米纤维表面即时释放(Bolgen et al.,In vivo performance of antibiotic embedded electrospun PCL membranses for prevention of abdominal adhesions,J.Biomed.Mater.Res.B Appl.Biomater.81B(2007)530-543)。
最近，Cai et al.(Cai et al.,International Journal of Pharmaceutics 419(2011)240-246)提议，通过将5-氟尿嘧啶(5-FU)掺入至通过冷冻干燥制备的羧甲基纤维素钠亚微米纤维作为电纺纳米纤维的替代物，来实现其缓慢释放。来自该可膨胀的基质的药物释放主要是基于至纤维外的扩散。专利申请US 2005/0158362A1中提议了类似的系统，其中生物活性化合物如牛血清白蛋白在电纺前被悬浮或溶解于聚合物溶液中，产生活性剂主要装载在纳米纤维中的系统。
因为来自装载活性剂的聚合物纤维的释放高度依赖于所述纤维的组成、活性剂与聚合物之比、其他物质的共装载和纤维厚度，已开发出将活性剂装载在控制它们从纤维网释放的聚合物微球中的更新方法。专利WO 2010/096254开发出了这样的制剂，其中牛血清白蛋白(BSA)或硫酸软骨素被装载于聚苯乙烯(PS或PLGA)微球中，然后被装载于由电纺聚己酸内酯(PCL)和聚(环氧乙烷)(PEO)制备的纳米纤维中。PS微球可存在于一根纤维中或者靠近第一类纤维、第二类纤维或二者。BSA的释放动力学取决于其至相应的纤维外的扩散、该纤维的降解以及聚合微球壳的降解。
最近，Wang et al.(Wang et al.,Fabrication and Characterization of Prosurvival Growth Factor Releasing,Anisotropic Scaffolds for Enhanced Mesenchymal Stem Cell Survival/Growth and Orientation,Biomacromolecules 2009,10,2609-2618)开发出了释放胰岛素生长因子(IGF-1)的用于组织工程学的纳米纤维支架，以诱导细胞生长和存活。通过如下方法形成此类支架：电纺聚氨基甲酸乙酯脲(polyurethanurea)纳米纤维和将装载IGF-l的微球组装到所述支架中。生长因子的封装保护它们免受蛋白水解并允许它们缓慢释放；其释放动力学依赖于聚合物浓度、分子量和装载于微球中的生长因子。
然而，装载有含有活性剂的聚合物微球的纳米纤维的生产方法存在挑战，因为微球生产、分离、灭菌和装载在纳米纤维网中所需的技术工艺很复杂。另外，将活性剂封装于微球中的效率通常未达最优标准。活性成分的稳定性还可能受微胶囊化过程中使用的溶剂影响。因此，现有工艺水平仍然需要提供可供选择的局部药物递送系统，以用于治疗剂的持续和受控递送。
本发明的发明人已发现，当将活性成分配制为纯的活性成分的微粒并缠结在生物相容性电纺纳米纤维的无纺布膜的纤维网间时，它们可以持续性方式局部释放。即，制备的微粒悬浮在非溶剂中并被倒入纳米纤维网中。结果，它们被物理保持在膜中的纳米纤维之间，且不能释放至外部介质，但当其为溶解形式可以释放。该方法特别适合用于具有有限水溶性的活性成分。一旦放置于待处理的身体区域，当生理流体填充膜并溶解微粒时，即发生释放。尽管活性剂颗粒不像现有工艺水平的装载药物的微球那样得到聚合物壳的保护，但它们可以持续性、有效和导向性的方式释放。
发明目的
因此，本发明的一个目的是提供无纺布网，其包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度。很重要的是，需要强调治疗或化妆用活性 剂被放置在纳米纤维之间而非纳米纤维内。这些特性是非常重要的，因为本发明的无纺布膜的释放速率取决于治疗或化妆用活性剂的溶解性，而非纳米纤维的溶解性或降解速率。
本发明的另一目的是提供包含所述无纺布膜的定制的套装。
本发明的另一目的是提供获得所述无纺布膜的方法。
本发明的另一目的是提供所述无纺布膜和包含其的定制的套装的应用。
附图说明
图1显示了用于获得本发明的无纺布膜的电纺方法的方案。
图2显示了用于获得本发明的无纺布膜的SN-38微晶悬液的光学显微镜图。
图3显示了具有规则电纺PLA纳米纤维的本发明的无纺布膜，在装载SN-38微晶前的扫描电子显微照片。
图4显示了包含电纺PLA纳米纤维和被缠结于PLA纳米纤维之间的SN-38微晶的本发明无纺布膜的横切面扫描电子显微照片(x1180)。
图5显示了包含电纺PLA纳米纤维和被缠结于PLA纳米纤维之间的SN-38微晶的本发明无纺布膜的横切面扫描电子显微照片(x4700)。
图6显示了包含电纺PLA纳米纤维和被缠结于PLA纳米纤维之间的SN-38微晶的5mm直径的本发明无纺布膜的体外释放图。
图7显示了从包含电纺PLA纳米纤维和被缠结于PLA纳米纤维之间的SN-38微晶的5mm直径的本发明无纺布膜的累积SN-38释放。
图8显示了可溶的SN-38(未装载在本发明的无纺布膜中)溶液对几种成神经细胞瘤细胞系的体外活性，表示为相比未处理的对照小井的细胞活力百分比。
图9显示了装载在本发明的无纺布膜中的SN-38微晶对几种成神经细胞瘤细胞系的体外活性，表示为相比未处理的对照细胞的细胞活力百分比。
图10显示了根据本发明的预释放的无纺布膜和完整的无纺布膜(对照)的活性，表示为相比未处理细胞的细胞活力百分比。
图11显示了根据本发明的共孵育的无纺布膜(装载的和空的膜)和对照无纺布膜(装载的和空的膜，未共孵育)的活性，表示为相比未处理细胞的细胞活力百分比。
图12显示了在无胸腺小鼠皮下植入的装载了100μg SN-38的单个12mm直径膜的血浆药代动力学。
图13显示了相比对照(空白)膜，装载了100μg SN-38的膜抑制在无胸腺小鼠皮下植入的人肿瘤生长的活性。
发明详述
本发明提供了无纺布膜，其包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在纳米纤维之间(不在其内)，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度(下文称为“本发明的无纺布膜”)。
在本发明的上下文中，词语“无纺布膜”涉及任意地放置于固体表面(收集器)并通过以下方法中的一种或多种任选地缠结的一种或多种聚合电纺纳米纤维：物理方法如用生物相容性胶黏合、熔化或溶剂过量，以及机械方法如针刺法、水力缠结法和气动缠结法(neumatic entanglement)。
如技术人员所了解的，电纺是一种高度多能的技术，其组合应用了两种技术，即电喷射和纺纱。在电纺过程中，使通过其表面张力保持在毛细管末端的聚合物溶液处于电场中，由于该电场而在液面上诱导了电荷。当施加的电场达到临界值时，排斥性的电场力克服表面张力。最终，带电的溶液喷射流被从泰勒锥的尖端射出，并在毛细管尖端与收集器之间的空间中发生不稳定且快速的喷射流甩动(whipping)，这造成溶剂蒸发而留下聚合物，并使得一簇纳米纤维沉积在收集器上。电纺过程通过多个参数进行控制，通常归类为：溶液参数、工艺参数和环境参数。溶液参数包括黏度、电导率、分子量和表面张力。工艺参数包括施加的电场、毛细管与收集器之间的距离以及溶液流量。这些参数中的每一个均对通过电纺方法获得的纤维形态具有明显的影响，并且通过合适地调整这些参数，有可能产生具有期望的形态和直径的纳米纤维。此外，环境参数包括相对湿度和室温，其对电纺纤维的形态和直径也具有重要影响。
在本发明的上下文中，词语“至少一种活性剂”是指微粒可为一种或多种活性剂微粒。
在本发明的上下文中，“治疗剂”是指针对人或兽类疾病具有活性的分子。
在本发明的上下文中，“化妆用试剂”涉及局部施用以获得接受它们的对象认为作为化妆用形式有用的效果的分子或物质。
同样，在本发明的上下文中，词语“纯的形式的至少一种活性剂微粒”涉及活性剂具有最少量的或没有杂质这一事实，并且涉及微粒不具有其他成分而仅具有活性剂、具有最少的或没有杂质这一事实。因此，在本发明的上下文中，微粒核不含有任何聚合化合物。
在本发明的上下文中，术语“活性剂”是指治疗剂如化疗剂、抗生素、抗真菌剂或营养制剂，例如，或指活性蛋白如生长因子。在任何情况下，其应当具有小于33mg/mL的水溶解度。
在本发明的上下文中，词语“被缠结在纳米纤维之间”是指微粒在纳米纤维之间是游离的且被包埋于其中这一事实，即以这种方式进行物理保留而不能被释放但在其溶解时可被释放。
在本发明的上下文中，治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，即根据本领域的标准，活性剂在水中为几乎不溶的、极微溶的、微溶的或难容的。这些标准可为Sigma Aldrich的那些标准，例如下述的：

在本发明的无纺布膜的具体实施方案中，治疗或化妆用活性剂具有0.001-33mg/mL的水溶解度。
在本发明的无纺布膜的优选实施方案中，治疗或化妆用活性剂具有 10-33mg/mL的水溶解度。在本发明的无纺布膜的另一优选实施方案中，治疗或化妆用活性剂具有1-10mg/mL的水溶解度。在本发明的无纺布膜的另一优选实施方案中，治疗或化妆用活性剂具有0.1-1mg/mL的水溶解度。在本发明的无纺布膜的另一优选实施方案中，治疗或化妆用活性剂具有小于0.1mg/mL的水溶解度。在本发明的无纺布膜的另一优选实施方案中，治疗或化妆用活性剂具有0.1-0.01mg/mL的水溶解度。在本发明的无纺布膜的另一优选实施方案中，治疗或化妆用活性剂具有0.01-0.001mg/mL的水溶解度。
在具体的实施方案中，无纺布膜由生物相容性的单一类型的电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种活性剂微粒组成，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度。
在本发明的无纺布膜的其他具体实施方案中，其至少包含：含有单一类型的生物相容性电纺纳米纤维的第一层、含有单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和被缠结在所述纳米纤维之间的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒的第二层；以及含有单一类型的生物相容性电纺纳米纤维的第三层。
在本发明的无纺布膜的优选实施方案中，其包含：一个含有单一类型的生物相容性电纺纳米纤维的第一层、一个含有单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和被缠结在所述纳米纤维之间的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒的第二层；以及一个含有生物相容性单一类型的电纺纳米纤维的第三层。
在最优选的实施方案中，本发明的无纺布膜由以下组成：一个含有单一类型的生物相容性电纺纳米纤维的第一层、一个含有单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和被缠结在所述纳米纤维之间的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒的第二层；以及一个含有生物相容性单一类型的电纺纳米纤维的第三层。
本发明的无纺布膜的所述至少的第一层、第二层和第三层可具有相同的或不同的纳米纤维直径、相同的或不同的厚度，和/或可包含由相同的或不同的生物相容性聚合物制备的纳米纤维。而且，当无纺布膜包含多于一个第二层时，可能的第二层可包含不同的治疗或化妆用活性剂的 微粒。
因此，在本发明的无纺布膜的具体实施方案中，其包含：含有单一类型的生物相容性电纺纳米纤维的第一层、含有单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和被缠结在所述纳米纤维之间的至少一种第一治疗或化妆用活性剂微粒的第二层；含有单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和被缠结在所述纳米纤维之间的至少一种第二治疗或化妆用活性剂微粒的第二层；以及含有单一类型的生物相容性电纺纳米纤维的第三层。
任选地，可对如先前定义的本发明的无纺布膜的一个侧面进行包被，以获得朝向膜的一个侧面的单向释放。在具体的实施方案中，在一个侧面对本发明的无纺布膜进行包被。可通过如下方法中的一种对膜的一个侧面进行包被：用生物相容性胶黏合；与聚合物溶剂(例如，二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、二甲基甲酰胺、二甲亚砜)接触；机械穿刺；或有利于纤维黏合的电纺参数。
在本发明的无纺布膜的具体实施方案中，纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒为微晶。
可通过从分子状态起构建微粒(如沉淀)或通过破碎较大的颗粒(如研磨)，形成治疗或化妆用活性剂的微晶。在本发明中，优选通过沉淀方法，即通过溶剂不相容的或依赖pH的结晶制备微晶。然而，存在可用于获得根据本发明的微粒的其他技术。例如，可通过冷冻干燥获得活性蛋白微粒。该后一方法可用于获得具有小于33mg/mL的水溶解度的生长因子微粒。在任何情况下，本发明的微粒或微米级的固体形式可为结晶状态、无定形状态或二者的组合，这取决于它们的生长速率，而生长速率取决于温度和过饱和条件。然后将这些微粒以悬液的形式使用，以制备本发明的无纺布膜，如下文所述。
用于制备本发明无纺布膜的微粒的悬液具有这样的粒径分布，其平均粒径为0.1μm-20μm。因此，在本发明的无纺布膜的具体实施方案中，至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径。在本发明的无纺布膜的优选实施方案中，所述微粒具有3-10μm的平均直径。在本发明的无纺布膜的另一优选实施方案中，所述微粒具有0.5-5μm的平均直径。
如先前所定义，包含在本发明的无纺布膜中的活性剂可为具有小于33mg/mL的水溶解度的治疗剂、化妆用试剂或活性蛋白。更具体而言，活性剂可为例如治疗剂如化疗剂、营养制剂、抗生素或抗真菌剂。可选地，活性剂可为例如活性蛋白如生长因子。作为化疗剂，可列出如下物质：SN-38(7-乙基-10-羟基喜树碱)、紫杉醇、顺铂、卡铂、依托泊苷、卡莫司汀、美法仑、喜树碱、5-氟尿嘧啶、氨甲喋呤、埃罗替尼、吉非替尼、舒尼替尼、凡德他尼、达沙替尼、拉帕提尼、Nutlin、吉西他滨、多西他赛、硼替佐米、丙戊酸、维莫德吉(vismodegib)、西那卡塞(cinacalcet)、曲贝替定(trabectedin)、拓扑替康、MLN4924、奥拉帕尼(olaparib)、依尼帕尼(iniparib)、三氧化二砷、克唑替尼、塞来昔布、哌立福辛、雷帕霉素、替西罗莫司(temsirolimus)和依维莫司。作为营养制剂，可列出如下物质：姜黄素、白藜芦醇、染料木素和懈皮素。同样，作为抗生素或作为抗真菌剂，可列出如下物质：氯霉素、盘尼西林G普鲁卡因、梭链孢酸、甲苯咪唑和阿苯达唑。作为生长因子，可列出如下物质：PDGF、TGF-B、EGF、VEGF、IGF-I、bFGF和HGF。
在本发明的无纺布膜的具体实施方案中，活性剂为选自化疗剂和营养制剂的治疗剂。在本发明的无纺布膜的优选实施方案中，活性剂为化疗剂，优选为SN-38、紫杉醇、凡德他尼、Nutlin或硼替佐米。在本发明的无纺布膜的另一优选实施方案中，活性剂为营养制剂，优选为懈皮素、白藜芦醇、姜黄素或染料木素。在本发明的无纺布膜的另一优选实施方案中，活性剂为生长因子，优选为PDGF、TGF-B、EGF、VEGF、IGF-I、bFGF或HGF。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含两种活性剂。
在本发明的无纺布膜中，生物相容性电纺纳米纤维可由本领域任何合适的生物相容性和生物可降解的聚合物制备。该聚合物可为聚酯、聚酐、聚磷腈、聚醚等。
在本发明的无纺布膜的具体实施方案中，生物相容性电纺纳米纤维由选自以下的单一类型的生物相容性和生物可降解的聚合物组成：聚乙醇酸、聚D,L-乳酸、D,L-乳酸-乙醇酸共聚物、聚己酸内酯、聚二氧环己酮、聚乙烯醇、胶原、纤维素、透明质酸及它们的组合。在本发明的无 纺布膜的具体实施方案中，生物相容性电纺纳米纤维由聚D,L-乳酸(PLA)组成。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度。在另一具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述活性剂中的一种为SN-38。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述活性剂中的一种为SN-38。
在本发明的无纺布膜的具体实施方案中，以相对于无纺布膜总重量的0.001-20％重量的百分比装载至少一种治疗或化妆用活性剂。在本发明的无纺布膜的优选实施方案中，以相对于无纺布膜总重量的0.5-5％重量的百分比装载至少一种治疗或化妆用活性剂。在本发明的无纺布膜的最优选实施方案中，以相对于无纺布膜总重量的0.75％重量的百分比装载至少一种治疗或化妆用活性剂。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，且以相对于无纺布膜总重量的0.001-20％重量的百分比被装载。在另一具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且以相对于无纺布膜总重量的0.001-20％重量的百分比被装载。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且以相对于无纺布膜总重量的0.001-20％重量的百分比被装载。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相 容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，且以相对于无纺布膜总重量的0.5-5％重量的百分比被装载。在另一具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且以相对于无纺布膜总重量的0.5-5％重量的百分比被装载。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且以相对于无纺布膜总重量的0.5-5％重量的百分比被装载。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，且以相对于无纺布膜总重量的0.75％重量的百分比被装载。在另一具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且以相对于无纺布膜总重量的0.75％重量的百分比被装载。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且以相对于无纺布膜总重量的0.75％重量的百分比被装载。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，且所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径。在另一具体的实施方案中，本发明的无纺布膜 包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，且所述至少一种活性剂微粒具有3-10μm的平均直径。在另一具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有3-10μm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有3-10μm的平均直径。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，且所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.5-5μm的平均直径。在另一具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.5-5μm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺 布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.5-5μm的平均直径。
本发明的电纺纤维具有数纳米数量级的直径，形成具有大的比表面积的膜。在本发明的无纺布膜的具体实施方案中，生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径。在本发明的无纺布膜的优选实施方案中，生物相容性电纺纳米纤维具有200-600nm的平均直径。在本发明的无纺布膜的另一优选实施方案中，生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径。在另一具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有200-600nm的平均直径。在另一具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治 疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且所述生物相容性电纺纳米纤维中的一种具有200-600nm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有200-600nm的平均直径。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径。在另一具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂中的一种为SN-38，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径。
在本发明的无纺布膜的具体实施方案中，所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径，且所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径。在本发明的无纺布膜的优选的实施方案中，所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径，且所述微粒具有3-10μm的平均直径。在本发明的无纺布膜的另一优选实施方案中，所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径，且所述微粒具有0.5-5μm的平均直径。
在本发明的无纺布膜的具体实施方案中，所述生物相容性电纺纳米纤维具有200-600nm的平均直径，且所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径。在本发明的无纺布膜的具体的实施方案中，所述生物相容性电纺纳米纤维具有200-600nm的平均直径，且所述 至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有3-10μm的平均直径。在本发明的无纺布膜的具体实施方案中，所述生物相容性电纺纳米纤维具有200-600nm的平均直径，且所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.5-5μm的平均直径。
在另一具体实施方案中，生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径，且所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径。在另一具体实施方案中，生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径，且所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有3-10μm的平均直径。在另一具体实施方案中，生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径，且所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.5-5μm的平均直径。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径。在另一具体实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有 小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有3-10μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径。在另一具体实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有3-10μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有3-10μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.5-5μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径。在另一具体实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.5-5μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.5-5μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有50-1000nm的平均直径。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相 容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有200-600nm的平均直径。在另一具体实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有200-600nm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有200-600nm的平均直径。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有3-10μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有200-600nm的平均直径。在另一具体实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有3-10μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有200-600nm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有3-10μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米 纤维具有200-600nm的平均直径。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.5-5μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有200-600nm的平均直径。在另一具体实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.5-5μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有200-600nm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜由PLA组成的包含生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.5-5μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有200-600nm的平均直径。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径。在另一具体实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗 或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.1-20μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有3-10μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径。在另一具体实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有3-10μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有3-10μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径。
在具体的实施方案中，本发明的无纺布膜包含由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂的微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.5-5μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径。在另一具体实施方案中，本发明的无纺布膜包含单一类型的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.5-5μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径。在优选的实施方案中，本发明的无纺布膜包含 由PLA组成的生物相容性电纺纳米纤维和纯的形式的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间，其中所述治疗或化妆用活性剂具有小于33mg/mL的水溶解度，所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒具有0.5-5μm的平均直径，且所述生物相容性电纺纳米纤维具有400-1000nm的平均直径。
本发明的无纺布膜的性能(柔软度、亮度、延展性和耐受度)使得它们适合定做定制的套装，以覆盖待处理的实体组织(例如肿瘤)的特定区域。
因此，在另一个方面，本发明提供了包含先前定义的无纺布膜的定制的套装(下文中称为“本发明的定制的套装”)，以覆盖实体组织的特定区域。
例如，可根据以下方法获得本发明的包含本发明的无纺布膜的定制的套装：首先，通过常规成像技术(例如，通过超声波或通过磁共振成像)获得组织/器官的三维成像。然后，相应地裁剪本发明的无纺布膜，以包裹处理的组织/器官的表面。
另外，在另一个方面，本发明提供了获得先前定义的无纺布膜的方法(下文中称为“本发明的方法”)，其包括以下步骤：
(a)电纺单一类型的生物相容性聚合物的溶液；并
(b)同时在收集器的顶部倒入至少一种治疗或化妆用活性剂微粒的悬液，以获得包含生物相容性电纺纳米纤维和至少一种治疗或化妆用活性剂微粒的电纺无纺布膜，所述微粒被缠结在所述纳米纤维之间。
步骤(a)的生物相容性聚合物溶液可为溶于合适的溶剂中的聚合物溶液，或者可选地该聚合物为熔化的，并且其可通过本领域任何合适的方法进行制备。
该方法的合适溶剂的选择是研究的非常重要的参数，因为其确定纤维是否能够形成以及是否影响纤维孔隙率。为了在毛细管尖端与收集器之间发生足够的溶剂蒸发，必须使用挥发性溶剂。当纤维喷射流经过空气朝收集器移动时，在沉积固体聚合物纤维前会发生相分离，该过程受到溶剂挥发性的极大影响。
例如研究期间发现的用于溶解PLA的最合适溶剂为二氯甲烷和氯仿，因为它们是非常有效的溶剂且允许进行电纺过程。然而，放弃了将 氯仿用作溶剂，因为其具有毒性且在电纺过程中操作方面较复杂。用于本发明方法的其他可能的溶剂可为乙酸乙酯、丙酮、二甲基甲酰胺和二甲亚砜(DMSO)。在任何情况下，技术人员都将依据待溶解的聚合物的性质来选择溶剂。
被挑选用于实施本研究的溶剂为二氯甲烷，因为其被认为是毒性最小的简单有机氯化合物。然而，该溶剂展现出一些健康风险，因为其高挥发性使得其具有严重的吸入危害。为了避免溶剂吸入风险，电纺装置应提供有抽气机。
在本发明的方法的具体实施方案中，步骤(a)的生物相容性聚合物溶液为于二氯甲烷中的PLA溶液。
在选择合适的溶剂后，需要确定最佳的聚合物浓度，因为其决定了溶液的可纺性，即是否形成纤维。聚合物浓度影响溶液的黏度和表面张力，二者均为电纺过程中的非常重要的参数。
在本发明的方法中，最佳的条件提供为10％溶液重量的聚合物浓度。超过10％的高浓度溶液极大增加了溶液黏度，这使得其难以控制溶液通过毛细管的流量，以及随后的电纺过程。在一些实验中还观察到获得的膜的纤维直径能够随溶液浓度增加而增加。如果溶液太过稀释，由于对表面张力和黏度的影响减小，发生了继发性且同时的过程，即电喷射，其中聚合物纤维在到达收集器之前破碎成为小滴。
在本发明的方法的具体实施方案中，聚合物浓度范围为溶液重量的8％-15％。在本发明的方法的优选实施方案中，聚合物浓度为10％的溶液重量。
一旦制备了生物相容性聚合物溶液，即将其递送给电纺装置中的电纺过程(图1)，所述电纺装置可为本领域的任一装置。为了该目的，聚合物溶液通过其在毛细管末端的表面张力被保留，并被置于电场中。当施加的电场达到临界值时，排斥性电场力克服表面张力。最终，溶液的带电喷射流从泰勒锥的尖端射出，并在毛细管尖端与收集器之间的空间中发生不稳定且快速的喷射流甩动，这造成溶剂蒸发，留下聚合物并使得一簇纳米纤维沉积在收集器上。
施加于喷射流的高电压张力的临界值范围为8kV-20kV，且发现的 改善该过程的最佳施加电压为10kV。在该电压下，可均匀地进行电纺过程，形成泰勒锥，不具有形成珠的缺陷且产生纳米级直径的规则聚合纤维。发现了针对纺纱流量、喷丝嘴至收集器的距离、收集器的大小、形状和性质、室温和湿度以及纺丝仓几何学的其他最佳配置。
电纺进行15-40min的时间，优选进行20min的时间，聚合物溶液流量为0.4-0.6ml/h，优选为0.5ml/h，这取决于所用的针的直径。
如此获得的无纺布膜的形状和尺寸将由专家根据其最终目的进行评估。
在本发明的方法的具体实施方案中，无纺布膜的厚度范围为0.05-0.5mm。在本发明的方法的优选实施方案中，无纺布膜的厚度为0.2mm。
在聚合物溶液的电纺期间，将微粒的悬液同时加载至膜中。可通过允许将微粒截留在纳米纤维之间的任何方法实施加载过程。例如，可将特定剂量的于悬液中的微粒加载至与输送泵连接的注射器中，并在电纺过程中以固定的时间间隔倒在收集器顶部。
可通过先前所述的本领域的不同方法制备步骤(b)的所述至少一种治疗或化妆用活性剂微粒的悬液。
可通过沉淀法，即通过溶剂不相容的或依赖pH的结晶，优选通过依赖pH的结晶，来制备治疗剂微晶的悬液。另外，可通过冻干法和进一步加入合适的溶剂来获得活性蛋白微粒的悬液。
在本发明的方法的具体实施方案中，通过冻干至少一种治疗或化妆用活性剂的溶液，然后加入溶剂来制备微粒悬液，其中所述溶剂以小于33mg/mL的浓度溶解。
在本发明的方法的具体实施方案中，通过沉淀制备微粒悬液。在本发明的方法的具体实施方案中，通过向至少一种治疗或化妆用活性剂的溶液中添加溶剂来制备微粒悬液，其中所述治疗或化妆用活性剂为不可溶的。在本发明的方法的具体实施方案中，通过向至少一种治疗或化妆用活性剂的溶液中添加具有所述活性剂不可溶的pH的溶液来制备微粒悬液。
任选地，使用表面活性剂来稳定微粒悬液。可在添加治疗或化妆用活性剂在其中不溶的溶剂或溶液前，向至少一种活性剂的溶液中添加表 面活性剂。任选地，可向治疗或化妆用活性剂在其中不溶的溶剂或溶液中添加表面活性剂，然后向至少一种治疗或化妆用活性剂的溶液中添加该混合物。可选地，可向至少一种治疗或化妆用活性剂的溶液和治疗或化妆用活性剂在其中不溶的溶剂或溶液中添加表面活性剂。
该表面活性剂可为FDA或其他管理机构批准的非离子型表面活性剂，如Pluronic表面活性剂(F68,F127F108,L101,L121,P85,P105或P123)、Tetronic表面活性剂(T1307,T1107或T904)、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、卵磷脂、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮或吐温80。表面活性剂可以溶液总体积的0.01-10％重量，优选2％重量的浓度使用。在任何情况下，最小量的表面活性剂可保留在治疗或化妆用活性剂微粒中，并在将无纺布膜放置于待处理区域时能有助于将其溶解。
在本发明的方法的具体实施方案中，通过将至少一种治疗或化妆用活性剂的溶液与包含表面活性剂且具有治疗或化妆用活性剂不溶的pH的溶液混合来制备微粒悬液。
任选地，本发明的方法可包括干燥如此获得的无纺布膜的另外的步骤。在本发明的方法的具体实施方案中，在室温和真空下干燥步骤(b)中获得的无纺布膜。
任选地，还可通过如下的一种方法对如此获得的无纺布膜的一个侧面进行包被：用生物相容性胶黏合；与聚合物溶剂接触；机械穿刺或有利于纤维黏合的电纺参数。在本发明的方法的具体实施方案中，将步骤(b)中获得的无纺布膜的一个侧面包被。在本发明的方法的具体实施方案中，干燥步骤(b)中获得的无纺布膜，然后将其一个侧面包被。
在本发明的方法的具体实施方案中，其包括以下步骤：
(i)至少电纺单一类型的生物相容性聚合物溶液，以收集无纺布膜的包含生物相容性电纺纳米纤维的第一层；
(ii)至少电纺单一类型的生物相容性聚合物溶液，并同时倒入至少一种治疗或化妆用活性剂微粒的悬液，以收集无纺布网的位于所述第一层上的第二层，其包含生物相容性电纺纳米纤维和被缠结在所述纳米纤维之间的至少一种单一类型的活性剂微粒；以及
(iii)至少电纺单一类型的生物相容性聚合物的溶液，以收集无纺布 膜的位于所述第二层上的第三层，其包含生物相容性电纺纳米纤维。
参数和条件类似于先前所公开的那些。
如此获得的无纺布膜的每层的形状和尺寸将由专家根据其最终目的进行评估。
在本发明的方法的具体实施方案中，无纺布膜的每层的厚度范围为0.05-0.5mm。在本发明的方法的优选实施方案中，无纺布膜的每层的厚度为0.2mm。
在本发明的方法的优选实施方案中，其包括以下步骤：
(i)电纺单一类型的生物相容性聚合物的一种溶液，以收集无纺布膜的包含生物相容性电纺纳米纤维的一个第一层；
(ii)电纺单一类型的生物相容性聚合物的一种溶液，并同时倒入至少一种治疗或化妆用活性剂微粒的悬液，以收集无纺布网的位于所述第一层上的一个第二层，其包含生物相容性电纺纳米纤维和被缠结在所述纳米纤维之间的至少一种治疗或化妆用活性剂微粒；以及
(iii)电纺单一类型的生物相容性聚合物的一种溶液，以收集无纺布膜的位于所述第二层上的一个第三层，其包含生物相容性电纺纳米纤维。
在本发明的方法的另一优选实施方案中，其包括以下步骤：
(i)至少电纺单一类型的生物相容性聚合物的溶液，以收集无纺布膜的包含生物相容性电纺纳米纤维的第一层；
(ii)至少电纺单一类型的生物相容性聚合物的溶液，并同时倒入至少一种第一治疗或化妆用活性剂微粒的悬液，以收集位于所述第一层上的无纺布网的在先的第二层，其包含生物相容性电纺纳米纤维和被缠结在所述纳米纤维之间的至少一种第一治疗或化妆用活性剂微粒；
(ii')至少电纺单一类型的生物相容性聚合物的溶液，并同时倒入至少一种第二治疗或化妆用活性剂微粒的悬液，以收集无纺布网的位于所述在先的第二层上的随后的第二层，其包含生物相容性电纺纳米纤维和被缠结在所述纳米纤维之间的至少一种第二治疗或化妆用活性剂微粒；以及
(iii)至少电纺单一类型的生物相容性聚合物的溶液，以收集无纺布膜的位于所述随后的第二层上的第三层，其包含生物相容性电纺纳米纤 维。
在本发明的方法的具体实施方案中，在室温和真空下干燥步骤(iii)中获得的无纺布膜。
任选地，可通过如下的一种方法进一步对如此获得的无纺布膜的一个侧面进行包被：用生物相容性胶黏合；与聚合物溶剂接触；机械穿刺或有利于纤维黏合的电纺参数。在本发明的方法的具体实施方案中，在对步骤(iii)中获得的无纺布膜的一个侧面进行包被。在本发明的方法的具体实施方案中，干燥步骤(iii)中获得的无纺布膜，然后对其一个侧面进行包被。在本发明的方法的更具体实施方案中，对步骤(iii)中获得的无纺布膜第一层的所述侧面进行包被。在本发明的方法的另一更具体实施方案中，对步骤(iii)中获得的无纺布膜第三层的所述侧面进行包被。在本发明的方法的具体实施方案中，干燥步骤(iii)中获得的无纺布膜，然后对所述第一层的所述侧面进行包被。在本发明的方法的另一优选实施方案中，干燥步骤(iii)中获得的无纺布膜，然后对所述第三层的所述侧面进行包被。
在另一方面，本发明提供了先前定义的无纺布膜用于以受控和持续性的方式将治疗或化妆用活性成分局部递送至待处理的身体区域的应用。
在其他方面，本发明提供了先前定义的定制的套装用于覆盖实体组织的特定区域的应用，所述实体组织选自皮肤、黏膜、骨、肌肉、内脏器官和实体瘤。
在肿瘤学中，例如，本发明的无纺布膜和/或定制的套装可用于治疗肿瘤，包括具有重要血管的不可切除区域，以治疗其中留有肿瘤残留的手术边缘，或治疗具有肿瘤浸润或阳性骨扫描的骨组织。它们还可通过处理再生因子被释放的受损组织而用于组织再生，或者用于释放抗体至手术后区域。
可通过覆盖待处理表面然后将膜边缘缝合至周围组织来使用本发明的无纺布膜。
可通过包裹待处理组织或器官表面来使用包含本发明的无纺布膜的定制的套装。
装载在本发明的无纺布膜中的药物的局部递送产生了肿瘤块中的高药物浓度，减少了全身性药物暴露且对周围健康组织安全。
以下实施例阐释了本发明，且不应当被认为是对本申请范围的限制。
实施例1
包含电纺PLA纳米纤维和SN-38微晶的无纺布膜的制备。
1.1 SN-38微晶悬液的制备。
向50mL pH 5.0醋酸盐缓冲液中加入2％Pluronic F68。然后将SN-38(4mg/mL)溶于NaOH 0.1N中，比例9:1。室温搅拌下将醋酸盐缓冲液(450μL)倒在SN-38溶液(50μL,在eppendorf管中)上。在室温的第一小时期间未观察到浑浊。1小时后，出现小的晶体。将样品在4℃下储存24h，每小时进行搅动。此后未观察到聚集，因为悬液非常稳定。通过光学显微镜测定，悬液中微晶的平均直径为0.5-5μm。图2显示了如此制备的SN-38微晶悬液的光学显微镜图。
1.2 包含电纺PLA纳米纤维和被缠结在所述PLA纳米纤维之间的SN-38微晶的无纺布膜的制备。
制备了无纺布膜，其具有电纺PLA纳米纤维的第一层，电纺PLA纳米纤维和被缠结在所述PLA纳米纤维之间的SN-38微晶的第二层，以及电纺PLA纳米纤维的第三层。
简而言之，以10％重量的浓度将PLA溶解于二氯甲烷中，装载在注射器中，并引入与电纺仪连接的恒定流量泵。
对17mg的PLA纺纱(进行20min，PLA溶液流量为0.5ml/小时，且电压为10kV)，以形成位于植物性纸基底上的PLA无纺布膜的无药物的第一层，其具有50mm直径和0.2mm厚度。该无纺布膜具有如图3所示的规则的PLA纳米纤维。该第一层用作将到来的药物加载层的支撑物。
然后，将在1.1中制备的(1mL，含有400μg结晶的SN-38)微粒悬液分成20份，且在电纺另外20mg的PLA的过程中将每份以1分钟的时间间隔倒入。第二层由装载了药物且具有50mm直径和0.2mm厚度的 PLA无纺布膜组成。
在加载完全的药物微粒悬液后，对17mg的PLA纺纱(20min，PLA溶液流量为0.5ml/小时，且电压为10kV)，以形成无药物且具有50mm直径和0.2mm厚度的PLA无纺布膜的第三层。
最后，在室温和真空下将如此制备的无纺布膜干燥24h。图4和图5为不同放大倍数(分别为x 1180和x 4700)下获得的无纺布膜的扫描电子显微照片。
在制备的无纺布膜中，PLA纳米纤维具有通过扫描电镜测得的400-1000nm的平均直径，SN-38微晶具有0.5-5μm的平均直径，且加载的SN-38的理论量为0.75％重量(即，54mg的膜中加载0.4mg的SN-38)。
实施例2
实施例1中获得的无纺布膜的体外定征。
进行了检测以定征所制备膜的体外释放模式和体外活性。
体外释放模式
为了研究包裹在本发明的无纺布膜中的药物的释放曲线，使用含有5μg SN-38晶体的5mm直径膜进行了体外实验。37℃下将膜引入每个孔含有400μL细胞培养基(RPMI)的24孔板中。在确定的时间点(8、24、48和96小时)移走完整的体积并更换成新鲜培养基。利用高效液相色谱(Shimadzu)使用荧光检测器定量释放的药物。在每个时间点释放的药物显示在图6中，且累积释放显示在图7中。
图6显示了所制备的5mm直径膜的体外释放曲线。单个的点代表单个膜释放的药物，且线代表拟合所述释放模式的模型。
图7显示了从所制备的5mm直径膜的累积SN-38释放。点代表均值，且线代表最佳拟合曲线。
体外活性
实验A-制备本发明的无纺布膜后活性剂的抗肿瘤活性的保留
为了确定在膜的制备过程后药物的抗肿瘤活性是否得到保留，本发 明的发明人将膜与成神经细胞瘤细胞系共孵育。在先前的实验中，本发明的发明人确定了SN-38抑制成神经细胞瘤的程度。按如下进行该实验：将LAN-1、SK-N-BE(2)c和SK-N-AS细胞系暴露于溶于RPMI中的SN-38的新鲜溶液，该新鲜溶液从SN-38的储备溶液(1mg/mL于DMSO中)制备而来。简而言之，将细胞接种于96孔板中的RPMI培养基中，每孔3000个细胞。24小时后，将细胞暴露于SN-38(浓度范围为10-0.000001μΜ)。4小时后，回收药物并添加新鲜培养基。4天后，通过使用MTS细胞活力检测(Promega)定量细胞培养物的活力。确定的IC50值为如下纳摩尔范围：LAN-1、SK-N-BE(2)c和SK-N-AS细胞分别为10nM、46nM和190nM(图8)。
图8显示了溶解的SN-38新鲜溶液针对几种成神经细胞瘤细胞系的体外活性，表示为相比未处理对照孔的细胞活力百分比。每个点代表3-5个孔的均值(±SD)。
为了研究所制备的膜的抗肿瘤活性，在24孔板中将装载了5μgSN-38微晶的5mm直径膜与细胞共孵育。简而言之，以每孔12000个细胞密度接种细胞，并在孵育器中保持24小时。然后，将一个膜加入每个孔中，并在预定的时间点(8、24、48和96小时)回收。在每个时间点，从所有的孔(包括处理的孔和对照未处理的孔)移走细胞培养基并添加新鲜培养基。96小时后，使用MTS检测评估培养物的活力。本发明的发明人观察到，所述膜显著抑制了肿瘤细胞的生长，作为药物保留了活性的标志(图9)。本发明的发明人还观察到，所述膜的较长的暴露诱导了更有效的抗肿瘤活性，这表明了来自所述制剂的持续的药物释放。
图9显示了装载有SN-38的无纺布膜对几种成神经细胞瘤细胞系的体外活性，表示为相比未处理对照细胞的细胞活力百分比。表示了3个孔的均值(±SD)。
实验B-来自本发明的无纺布膜的活性剂的持续释放
为了证实来自膜的活性药物的缓释，本发明的发明人设计了实验，其中膜在转移至细胞培养物前在培养基中进行预释放。简而言之，如同在实验A中那样接种细胞，同时于37℃下将膜在无细胞的400μL的新 鲜培养基中预释放24或48小时。然后，将膜转移至细胞培养物，如同实验A中那样。孵育3天后，移走膜并使用MTS检测定量细胞活力。本发明的发明人观察到，预释放的膜相比完整的膜(对照)保留了大部分的活性，表明制剂在较长的时间段(至少48小时)内具有活性，且能够携带在膜中(图10)。
图10显示了预释放的膜和对照(完整)膜的活性，表示为相比未处理细胞的细胞活力百分比。表示了3个孔的均值(±SD)。
实验C-预释放膜的细胞毒性是源自包裹的未释放的活性剂的证明。
为了进一步证明实验B中观察到的预释放的膜的细胞毒性是源自包裹的未释放的药物，且并非是由于先前释放的溶解药物的吸附或是由于基质本身，本发明的发明人在24孔板中将空膜(对照膜)与装载了SN-38的膜共培养24小时。在每个孔中，本发明的发明人将一个加载的膜与一个空的膜在400μL的RPMI培养基中共孵育。将两个共孵育的膜在5mL的新鲜PBS中洗涤，然后逐个转移至成神经细胞瘤细胞培养物(如同实验A和B中那样接种)。将细胞与膜培养3天，然后进行MTS检测。结果表明，空膜没有毒性，即使在与加载的膜共孵育后仍无毒性，这确保了空膜没有吸附携带溶解的药物。相反，加载的膜，无论是完整的或是在与空膜共孵育期间预释放了24小时的膜，均保留了其预期的活性，如同实验A和B中已证明的那样。
图11显示了共孵育的无纺布膜(加载的和空的膜)和对照无纺布膜(加载的和空的膜，未共孵育)的活性，表示为相比未处理细胞的细胞活力百分比。表示了3个孔的均值(±SD)。
实施例3
实施例1中获得的膜的体内定征。
将膜剪成12mm直径的圆片，每片含有100μg SN-38。将一片膜经皮下插入CD1裸小鼠(n＝11；Charles River)；即，每只小鼠(平均重25g/只小鼠)接受4mg/kg剂量的SN-38。在48小时期间不同的时间点从眶后血管丛获得血液样品(100μL)，并通过高效液相色谱测定SN-38水平。结 果显示在图12中。该结果表明，在SN-38从膜局部释放至周围组织期间，SN-38暴露于血浆中水平较低且是无毒的，这与本发明的发明人先前的假设一致。在药代动力学实验后，在接下来的几天至几周中密切观察小鼠的不利影响。在开始几天中观察到轻微肿胀。在肿胀消除后，膜周围的皮肤保持轻微突起直到实验结束(从插入膜开始至少12周)；这部分是由于PLA纳米纤维保持未降解。该观察现象预期是由于PLA的长的降解半衰期。未观察到小鼠的体重减轻。总之，所述膜看起来在所选定的实验条件下是安全的。
实施例1中获得的膜的体内活性。
对6只裸小鼠(Harlan)经皮下植入小块(2mm直径)的侵入性人成神经细胞瘤，每个侧面植入一个。肿瘤在接下来的27天中生长直到达到1000-4000mm³。在第27天，作为不完全的肿瘤切除模型，在完全麻醉下切除95％的肿瘤体积，并在每侧留有具活力的血管化肿瘤部分(5％体积)。然后，将12mm直径的膜，即无药物的膜(对照)或装载了药物的膜(含有100μg SN-38)经皮下分别插入右侧和左侧残留肿瘤的顶部，并用缝合线封闭伤口。在接下来的23天中，用卡尺测量小鼠恢复和肿瘤生长。图13中的结果表明，相比对照膜，以局部植入的装载了药物的膜实现了肿瘤生长抑制。我们的实验证明，DDS的活性是由于药物的局部释放，且并非由于从DDS实现的全身性药物暴露，因为只有与装载了药物的膜接触的肿瘤响应了治疗。