鲜青蚓的养殖方法.pdf

本发明公开了鲜青蚓的养殖方法，它包括如下步骤：(1)制备养殖床；(2)蚓种投放；(3)养殖管理：(4)收获：饲养4-6月，收获成蚓，即可。本发明通过特定养殖方法制备得到了一种改良型的湖北环毛蚓——鲜青蚓，其溶栓活性良好，不仅优于原生品种，还优于药典地龙，其临床应用前景良好。

1.  一种鲜青蚓的养殖方法，其特征在于：它包括如下步骤：
(1)制备养殖床：翻耕土地，整畦，洒水，使土壤含水量为20-30％；
(2)蚓种投放：放原生湖北环毛蚓300—400条/平方米，让其自动钻入泥土中，15-20分钟后，去除未入土之蚓种；
(3)养殖管理：
投料：每隔3天定点投放饲料1次，每次投料180～240g/平方米；
湿度：保持土壤含水量在20-30％；
温度：日最高气温超过35℃时，每天洒水3-5次，每次0.1-0.2kg/平方米；冬天时，养殖地铺10-20cm厚稻草垫；
(4)收获：饲养4-6月，收取成蚓。

2.  根据权利要求1所述的养殖方法，其特征在于：步骤(1)中，所述整畦的具体方式是：整理成宽2米的畦，两畦间隔40cm，在畦中央开沟，沟深30cm，沟宽30cm，在沟中放饲料，再在上面覆盖10cm厚泥土。

3.  根据权利要求1或2所述的养殖方法，其特征在于：所述饲料由如下重量百分比的组分发酵制备而成：粪料20％、植物饲料75％和其它成分5％；
其中，粪料由重量比为1:1的牛粪和猪粪组成；
植物饲料由如下重量百分比的组分组成：稻草20％、玉米杆20％和青饲60％；
其它成分由重量比为1:1:1的猪血粉、玉米粉和小麦麸组成。

4.  根据权利要求3所述的养殖方法，其特征在于：所述发酵方法如下：
a、堆料：铺植物饲料，然后铺植物饲料1/2厚度的粪料，重复8次，洒水，薄膜覆盖保温；
b、10天后揭膜、翻堆，再洒水；重复一次；
c、堆置1个月，得腐熟物；
d、将腐熟物与其他成分混匀，即可。

5.  根据权利要求3所述的养殖方法，其特征在于：步骤a中，洒水的量为500-100kg/平方米。

6.  根据权利要求3所述的养殖方法，其特征在于：步骤b中，洒水的量为10--20kg/平方米。

7.  根据权利要求1所述的养殖方法，其特征在于：步骤(3)中，投放饲料时，在19点-21点投料，每平方米投6个点，每个点投料30～40g。

8.  权利要求1～7任意一项所述方法得到的鲜青蚓在制备溶栓药物中的 用途。

鲜青蚓的养殖方法
技术领域
本发明涉及一种鲜青蚓的养殖方法。
背景技术
地龙为钜蚓科动物参环毛蚓Pheretimaaspergillum(E.Perrier)、通俗环毛蚓PheretimavulgarisChen、威廉环毛蚓Pheretimaguillelmi(Michaelsen)或栉盲环毛蚓PheretimaPectiniferaMichaelsen的干燥体。其性味：咸，寒。归经：归肝、脾、膀胱经。功效：清热定惊，通络，平喘，利尿。主治：用于高热神昏，惊病抽搐，关节痹痛，肢体麻木，半身不遂。肺热喘咳，尿少水肿；高血压。现代医学研究表明，地龙的有效成分为溶解血栓的纤溶酶，因而其具有良好的溶栓作用。
湖北环毛蚓PheretimahupeienisMichaelsen1895体长70一222毫米，体宽3一6毫米，体节110一138个。口前叶为上叶的，背孔自XI一XII节间始。环带占3节。腹面有刚毛，其他部分刚毛细而密，每节70一132条，环带后较疏。背腹中线几乎紧接。14一22(VIII)在受精囊孔间。10一16在雄孔间。雄孔在XVIII节腹侧的刚毛线一平顶乳突上开孔。受精囊孔3对。盲肠锥状。贮精囊、精巢和精漏斗所在体节被包裹在一大膜质囊中，背、腹两面相通。无精巢囊。前列腺发达。副性腺圆形，附于体壁上。受精囊狭长形，其管粗，盲管比本体长2倍以上，内4/5弯曲，末端稍膨大。活时背部体色为草绿色，背中线为紫绿色带深橄榄色，腹面青灰色，环带为乳黄色。
原生湖北环毛蚓PheretimahupeienisMichaelsen1895同为蚯蚓，其也具有溶栓的功效，但是溶栓效果不如药典地龙。
发明内容
为了解决上述问题，本发明通过特定的养殖方法，可以养殖得到改良型的湖北环毛蚓，将其命名为鲜青蚓，其溶栓功效明显优于原生的湖北环毛蚓，而且还优于药材地龙(中国药典)。
另外，本发明养殖方法得到的鲜青蚓，其环带颜色与原生湖北环毛蚓不同，原生湖北环毛蚓的颜+色为乳黄色，鲜青蚓的环带为土黄色。
本发明鲜青蚓的养殖方法，它包括如下步骤：
(1)制备养殖床：翻耕土地，整理成宽2米的畦，两畦间隔40cm，在畦中央开沟，沟深30cm，沟宽30cm，在沟中放饲料，再在上面覆盖10cm厚泥土，洒水，使土壤保持20-30％含水量；
(2)蚓种投放：将养殖床洒水湿润，使泥土润滑，便于蚓种钻入泥土中，每平方放上种蚓300--400条，让其自动钻入泥土，15-20分钟后，未钻入泥土中的蚓种，不是受伤就是严重脱水的，应除去。
注：第一批蚓种是野外挖取的原生湖北环毛蚓。
(3)养殖管理：
投料：每隔3天定点投放饲料1次，每次投料180～240g/平方米；
湿度：保持土壤含水量在20--30％；
温度：日最高气温超过35℃时，洒水降温，每天洒水3-5次，每次0.1-0.2kg/平方米；冬天时，鲜青蚓钻入泥土中冬眠，养殖地铺10—20cm厚稻草垫既可保温，又可缓解和防止冷风直吹；
(4)收获：饲养4-6月，即可收取成蚓。
步骤(1)或步骤(3)中的饲料由如下重量百分比的组分发酵制备而成：粪料20％、植物饲料75％和其它成分5％；
其中，粪料由重量比为1:1的牛粪和猪粪组成；
植物饲料由如下重量百分比的组分组成：稻草20％、玉米杆20％和青饲60％；
其它成分由重量比为1:1:1的猪血粉、玉米粉和小麦麸组成。
优选地，所述发酵方法如下：
a、堆料：铺植物饲料，然后铺植物饲料1/2厚度的粪料，重复8次，洒水，薄膜覆盖保温；
b、10天后揭膜、翻堆，再洒水；重复一次；
c、堆置1个月，得腐熟物；
d、将腐熟物与其他成分混匀，即可。
具体地，可以按照如下方式操作：
a、堆料：铺20厘米厚的植物饲料，然后铺10厘米厚的粪料，重复8次，洒水，薄膜覆盖；
b、10天后接膜、翻堆，再洒水；重复一次；
c、堆置1个月，得腐熟物；
d、将腐熟物与其他成分混匀，即可。
步骤a中，洒水的量为500-100kg/平方米，当每一层的植物饲料厚度为20厘米、粪料厚度为10厘米时，即是50--100kg/2.4立方米。
步骤b中，洒水的量为10--20kg/平方米，当每一层的植物饲料厚度为20厘米、粪料厚度为10厘米时，即是10--20kg/2.4立方米。
步骤(3)中，投放饲料时，在19点-21点投料，每平方米投6个点，每个点投料30～40g。
本发明还提供了前述中药材鲜青蚓在制备溶栓药物中的用途。
本发明通过特定养殖方法和饲料制备，得到了一种改良型的湖北环毛蚓——鲜青蚓，其溶栓活性良好，不仅优于原品种生湖北环毛蚓，还优于药典地龙，临床应用前景良好。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
实施例1本发明鲜青蚓的制备
(一)饲料配方
粪料20％，植物饲料75％，其它成分5％。
1粪料组成：牛粪和猪粪各一份。(由养牛场和养猪场提供)
2植物饲料组成稻草20％，玉米杆20％，蔬菜等青饲60％。(由农户提供)
3其它成分猪血粉，玉米粉，小麦麸各1份。(由农资市场提供)
(二)饲料标准及制备方法
1饲料标准：棕色或褐色、无酸臭、氨气等异味，质地松软不沾手，用手抓捏，从指缝中能流出1-2滴水珠，pH值在6—8之间，重金属含量应符合国家相关标准。
2饲料制备方法
取粪料20％，植物饲料75％，堆料发酵。
堆料植物饲料切成5cm长，先铺地上20厘米厚，然后铺粪料10厘米，再铺植物饲料20厘米，粪料10厘米，直至堆到8层，占地长度和宽度不限，料堆松散，做成方形料堆，慢慢洒水，用水量50-100kg/平方米(即是50--100kg/2.4立方米)，直到四周有水浸出为止，用薄膜覆盖保温。
发酵料堆开始自然发酵升温，10多天后，料堆温度达到60--70℃时，揭覆盖膜，进行翻堆，即上层翻到下层，四边的翻到中间，把粪料和草料拌匀，再洒水10--20kg/平方米(即是10--20kg/2.4立方米)湿润，再覆盖薄膜保温，使之充分发酵。
腐熟10天后再翻堆，进行第三次重新制堆，盖膜。经过一个月的堆制发酵，得腐熟物。
混合将腐熟物与上述其它成分(血粉，玉米粉，小麦麸各1份)混匀，即得。
(三)鲜青蚓养殖步骤
1养殖床准备
在蔬菜地四周挖：深40cm，宽30cm的排水沟，翻耕土地，深度30厘米，并整理成宽2米的畦，两畦间隔40cm，在畦中央开沟，沟深30cm，沟宽30cm，在沟中放饲料，再在上面覆盖10cm厚泥土，洒水，使土壤保持20--30％含水量。
2蚓种投放
先将养殖床洒水润湿，使泥土润滑，便于蚓种钻入泥土中。在养殖床上放上成年种蚓，每平方300--400条，让其自动钻入泥土，15-20分钟后，未钻入泥土中的蚓种，不是受伤就是严重脱水，应除去。
注明：第一批蚓种是野外挖取的原生湖北环毛蚓成蚓。
可以在养殖床上面种些新鲜蔬菜等农作物，一方面有青饲料来源，另外也可为鲜青蚓生长、活动遮阴避雨。
3养殖管理
投料每隔3天定点投料1次。晚上约7-9点钟，把饲料均匀地投放在养殖床的表面，每平方米投6个点，每个点投料30—40g，雨天不投料。
湿度保持土壤含水量在20-30％，若遇干燥季节，洒水调节。
土壤湿度简易测定法：取土少许，用手捏紧能成团块状，而将其丢掷在地面上时，又能自行碎裂。
温度日最高气温超过35℃时，洒水降温，每天洒水3-5次，每次0.1-0.2kg/平方米。冬天时，鲜青蚓钻入地下冬眠，养殖地铺10—20cm厚稻草垫，既可保温，又可缓解或防止冷风直接吹到养殖床上。
(4)养殖场地种植蔬菜等农作物时，不得使用农药，化肥等。
(5)要防止老鼠等侵袭。
(四)养殖周期
经过4-6月的饲养，就可以收取成蚓，同时还有一定数量的幼蚓和蚓茧。
(五)成蚓采收方法
诱取法：把饲料堆放在鲜青蚓养殖床上，3-5天后就有蚯蚓诱集，用耙子收取成蚓，即可。
收获的成蚓即为鲜青蚓，其形态特征：体长77—220mm，体宽3—6mm，体节数110-138。雄孔1对,在18节腹面两侧的1个平顶乳头突上，稍偏内侧在17/18和18/19节间沟两侧,各有1对大而呈椭圆形的乳头突。受精囊孔3对，6/7～8/9节间沟后孔周围及腹面均无乳头突，体背面呈草绿至青灰色，背中线深绿。腹面带青灰色，环带土黄色。
以下用试验例的方式来说明本发明的有益效果：
试验例1本发明鲜青蚓、原生湖北环毛蚓及威廉环毛蚓溶栓活性测定
鲜青蚓，原生湖北环毛蚓，威廉环毛蚓《中国药典》的供试品制备：
取实施例1制备的鲜青蚓和成都地区原生湖北环毛蚓，及购置威廉环毛蚓适量，分别称定重量，加入生理盐水适量，分别于常温下研磨20分钟，转入容量瓶，用生理盐水洗涤研磨2次，洗涤液加入容量瓶，最后用生理盐水定容，分别超声提取10min,离心(4000rmp×10min)，吸取上清液备用。
1、溶解家兔肺血栓试验
参照Nowak法稍加改良，将家兔随机分成：鲜青蚓，原生湖北环毛蚓，威廉环毛蚓，生理盐水对照组。用戊巴比妥钠30mg/kg静脉麻醉。从颈总动脉采血1ml，按稍加机良的Chandle法制备血栓，自血栓头部向下截取40mg左右的栓子，依文氏蓝染色后备用。各组于灌胃给药20ml。1小时后，以15ml生理盐水在1分钟内经颈外静脉将栓子推入肺动脉内，24小时后杀死动物，取出栓子称重，与原栓重进行比较，结果见表。
试验家兔灌胃给药24小时后，溶栓结果如下(X±SD)

(p值均<0.05)
结论：“鲜青蚓”有显著的体内溶栓功效，其溶栓功略优于原生湖北环毛蚓和威廉环毛蚓(药典地龙)。
2、体外溶解血栓试验
参照Chandler法稍加改良，先取1只家兔用戊巴比妥纳30mg/kg静脉麻醉后，分离出颈总动脉，用干燥注射器自动脉取血2ml,均分于两个管环内，血液在37℃环境中，17r/min旋转30min，按拉丁方法设计的给药顺序分别向每根环的两端各加药2ml，再转动60min，自环内倾出血栓，立即称重。按上述步骤再取血作其余两组。然后重复上述实验。结果见表。
参照Nowak法稍加改良，鲜青蚓，原生湖北环毛蚓，威廉环毛蚓组的血栓湿重均较生理盐水组轻(p值均<0.05)。
给药60分钟后，溶栓结果如(X±SD)

结论：鲜青蚓具有显著的体外溶栓活性，且略优于原品种生湖北环毛蚓和威廉环毛蚓《药典地龙》。
综上，本发明方法制备一种新的中药材——鲜青蚓，溶栓活性良好，不仅优于原品种生湖北环毛蚓，还优于药典地龙，临床应用前景良好。