一种亚硒酸钠维生素注射液及其制备方法 【技术领域】
本发明属于兽药技术，主要涉及一种亚硒酸钠维生素注射液及其制备方法。
背景技术
硒和维生素A、D、E是奶牛维持正常生理活动、促进生长发育、提高繁殖和生产性能所必需的一类特殊的有机和无机元素。奶牛若缺乏上述物质会引起卵巢发育不全、不发情、不受精、死胎、犊牛白肌病、生长发育不全、产后胎衣不下、子宫炎发生率高等一系列生殖、生长疾病，极大的影响奶牛的生产性能，给养牛业带来重大的损失。一般补充微量物质的方式是口服和注射，口服维生素会在瘤胃中发生降解且吸收时间长效果不好，故此注射应是补充维生素及硒的最好方式。可是维生素A、D、E为脂溶性物质，补硒的无机物亚硒酸钠是水溶性物质，现在市场上有亚硒酸钠维生素E注射液和维生素ADE注射液，而将亚硒酸钠和维生素A、D、E制成一种复合水溶性注射液需要采用增溶、乳化等制药工艺的研究，市场上现在还没有产品。
【发明内容】
本发明的目的在于提供一种亚硒酸钠维生素注射液及其制备方法，通过增溶剂吐温80、司盘80、聚氧乙烯蓖麻油(35)将脂溶性的维生素溶解在水中与亚硒酸钠制成水剂注射液，达到硒和维生素A、D、E同补预防奶牛生殖、生长性疾病，性能稳定、生物利用率高、使用方便。
本发明的技术方案为：
亚硒酸钠维生素注射液，由如下重量配比的原料制备而成：维生素A 1000万-8000万单位、维生素D
3 1000万-8000万单位、维生素E 1-10g、亚硒酸钠0.5-10g、吐温80 1-400g、司盘80 1-400g、聚氧乙烯蓖麻油(35)1-400g、苯甲醇5-50g、2，6-二叔丁基对甲酚1-5g、注射用水400-800g。
本发明还提供了亚硒酸钠维生素注射液的制备方法，包括如下步骤：
称取含有上述重量比的原料；将维生素A、维生素D
3、维生素E、苯甲醇、2，6-二叔丁基对甲酚混合，置于60℃水浴锅中使其溶解均匀，加入部分注射用水及司盘80、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油(35)搅拌使溶解，将亚硒酸钠用少量注射用水溶解加入其中，搅匀，加注射用水至全量，搅匀，得淡黄色澄明溶液，过滤，分装，灭菌，即得。
本发明的优点和有益效果是：硒和维生素A、D、E同补，预防奶牛生殖、生长性疾病，药效稳定、生物利用率高、使用方便。
【具体实施方式】
下面举例对本发明进行详细描述。
实施例1：
按重量比称取维生素A 2000万单位、维生素D
3 2000万单位、维生素E 5g、亚硒酸钠1g、吐温80 150g、司盘80 50g、聚氧乙烯蓖麻油(35)50g、苯甲醇10g、2，6-二叔丁基对甲酚2g；将维生素A、维生素D
3、维生素E、苯甲醇、BHT混合，置60℃水浴锅中使溶解均匀，加入部分注射用水及司盘80、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油(35)搅拌使溶解，将亚硒酸钠用少量注射用水溶解加入其中，搅匀，加注射用水至全量，搅匀，得淡黄色澄明溶液，过滤，分装，灭菌，即得。注射用水至1000ml。
实施例2：
按重量比称取维生素A 8000万单位、维生素D
3 1000万单位、维生素E10g、亚硒酸钠10g、吐温80 100g、司盘80 100g、聚氧乙烯蓖麻油(35)20g、苯甲醇50g、2，6-二叔丁基对甲酚4g；将维生素A、维生素D
3、维生素E、苯甲醇、BHT混合，置60℃水浴锅中使溶解均匀，加入部分注射用水及司盘80、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油(35)搅拌使溶解，将亚硒酸钠用少量注射用水溶解加入其中，搅匀，加注射用水至全量，搅匀，得淡黄色澄明溶液，过滤，分装，灭菌，即得。注射用水至1000ml。
实施例3：
按重量比称取维生素A 1000万单位、维生素D
3 8000万单位、维生素E 2g、亚硒酸钠1g、吐温80 50g、司盘80 50g、聚氧乙烯蓖麻油(35)200g、苯甲醇30g、2，6-二叔丁基对甲酚5g；将维生素A、维生素D
3、维生素E、苯甲醇、BHT混合，置60℃水浴锅中使溶解均匀，加入部分注射用水及司盘80、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油(35)搅拌使溶解，将亚硒酸钠用少量注射用水溶解加入其中，搅匀，加注射用水至全量，搅匀，得淡黄色澄明溶液，过滤，分装，灭菌，即得。注射用水至1000ml。
将亚硒酸钠维生素注射液进行以下试验：
1、有效成分的含量测定试验：
亚硒酸钠维生素注射液有效成分为亚硒酸钠、维生素A、维生素D
3、维生素E。本发明使用自拟质量标准对上述有效成分分别通过原子吸收仪、紫外分光光度计、高效液相色谱仪、气相色谱法对连续三批产品含量进行检测。含量应为标示量的90.0％-110.0％。
批号 亚硒酸钠 (标示量％) 维生素A (标示量％) 维生素D3 (标示量％) 维生素E (标示量％)
080201 99.71 94.45 98.21 92.39
080202 99.58 96.28 98.50 94.11
080203 99.64 98.41 99.43 92.78
上述三批制剂为同一制备工艺实施例产品，生产投料量为处方量的105％，在生产过程中维生素与空气中的氧发生氧化降解，有一定量的损失属于正常现象。由上述数据可产品工艺合理、稳定，可进行批量生产。
2、稳定性试验：将三批产品按成品包装在温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置12个月，每3个月取样一次，分别于0个月、3个月、6个月、9个月、12个月按稳定性重点考察项目进行检测。12个月以后，分别于18个月、24个月取样进行外观、含量检测。
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结论：本发明的性状、含量检测、无菌试验均合格，符合《中华人民共和国兽药典2005版》相关要求。
4、安全性试验
(1)过敏试验：取健康豚鼠18只，随机分成3组每组6只：亚硒酸钠维生素注射液组，0.9％氯化钠注射液组，5％鸡蛋清生理盐水阳性对照组。分别用以上3种试剂腹腔注射给药0.5毫升/只。然后各组又分2组，每组3只，第1组于首次注射后14天，由后肢隐静脉分别注射2.0毫升/只；第2组于首次注射后21天，由后肢隐静脉分别注射2.0毫升/只。观察注射后有无用爪搔鼻、喷嚏、竖毛、抽搐、呼吸困难、大小便失禁、休克及死亡等反应。结果：氯化钠注射液组豚鼠攻击注射后15min内，未出现抓鼻、颤抖或竖毛、呼吸困难、休克等过敏反应。5％鸡蛋清生理盐水组豚鼠攻击注射后，出现烦躁不安、搔耳、喷嚏、呼吸困难、痉挛症状，并于3min内先后全部死亡。亚硒酸钠维生素注射液第14天和21天攻击均无任何症状，无过敏反应，说明亚硒酸钠维生素注射液豚鼠过敏试验阴性。
(2)溶血性试验：取新鲜家兔血5ml，置洁净三角瓶中，用玻璃棒搅拌去除纤维蛋白，然后将去纤维蛋白血移入刻度离心管内，加入适量氯化钠注射液，摇匀后以2000r/min离心5min，然后将所得红细胞按其容积，用氯化钠注射液稀释成2％的混悬液。在2％兔血红细胞混悬液中，分别加入亚硒酸钠维生素注射液0.1-0.5ml，未见对红细胞有明显溶血或凝集作用。
(3)血管刺激试验：取兔6只，分3组，每组2只。第1组亚硒酸钠维生素注射液1ml/kg；第2组亚硒酸钠维生素注射液2ml/kg；第3组0.9％氯化钠注射液2ml/kg。以无菌操作方法，每只兔耳缘静脉缓慢注射，每日1次，连续注射6天。处死动物，肉眼观察耳注射部位血管有无充血、瘀血等异常反应，详细记录，并取耳缘静脉近心端血管组织2cm作病理切片检查。结果：0.9％的氯化钠注射液对照组、亚硒酸钠维生素注射液大、小剂量注射6天，静脉管腔内皮完整，平滑肌及外膜无增厚，血管周围纤维结缔组织无水肿，无炎细胞浸润。
(4)肌肉注射试验：取兔4只，分别于左、右两侧后肢股四头肌部位注射莲必治氯化钠注射液1mL，阴性对照组注射氯化钠注射液，48h后切开皮肤，肉眼观察注射部位有无充血、水肿、变性或坏死，并作病理切片检查。结果：给药部位无明显变化。
结论：亚硒酸钠维生素注射液对豚鼠无过敏反应。对兔血红细胞无明显溶血或凝聚作用。兔耳缘静脉滴注亚硒酸钠维生素注射液后，内皮完整、光滑，管壁未见炎症反应，管腔内未见有血栓形成，故该药对局部静脉血管无明显刺激作用。肌肉注射该药后也未见局部刺激反应。
5、应用效果试验
发明人在哈尔滨杏林牧业奶牛场将自制的亚硒酸钠维生素注射液进行了近一年的应用试验。采用随机分组的方法将150头各自情况相近的奶牛分成2组，对照组不作处理，试验组配种前、产前60天、30天、产后1小时内各肌肉注射25ml亚硒酸钠维生素注射液。结果：与对照组比较，试验组产后瘫痪减少5头次；胎衣不下少了8头次；犊牛平均初生重增加了1.4千克；犊牛白肌病减少2头次；30日龄内犊牛的发病率下降27.3％。子宫恢复时间平均缩短2.8天。奶牛产犊与发情适配间隔平均缩短4.5天。
结论：亚硒酸钠维生素注射液能改善奶牛营养情况，增强奶牛体质，促进发情，可提高人工受精受胎率；预防奶牛子宫炎及产后胎衣不下；促进犊牛健康发育，预防犊牛白肌病的发生。