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一种聚驱后微生物采油方法
技术领域
本发明涉及微生物采油领域，具体涉及利用微生物采出聚合物驱后的剩余油的方法。
背景技术
石油是一种不可再生能源，为了有效地利用石油资源，世界各国正在寻求能够提高采收率的高效方法，以开采那些滞留于地层，用常规采油方法难以开采的原油。自上世纪80年代开始，很多国家开展了用微生物方法提高原油采收率技术的研究，经过二十多年的努力，该技术取得了极大进展。
大庆油田聚合物驱通过国家“八五”、“九五”重点科技攻关，取得了突破性的进展，已由先导性矿场试验进入到工业性应用阶段，采收率比水驱提高10％左右，年产量达1000万吨以上。截止2007年底，聚合物工业区块43个，动用面积达365.97Km²，动用地质储量5.95亿吨，成为大庆油田延长稳产期的重大技术措施。尽管如此，聚合物驱后油层中仍有近一半的原油未被采出。
为解决上述问题，研究人员提出了聚合物驱后利用微生物与化学剂驱结合进一步提高采收率的探索研究，以便最大限度地采出聚合物驱后的剩余油，进一步增加油田的可采储量，提高油田的最终采收率。众所周知，当聚合物经过储层时，一部分被吸附和滞留在岩石孔隙及表面上，据资料报道，每立方英尺储层滞留的聚合物达22.7-45.4公斤。
将可利用聚合物的微生物注入含有聚合物的油层，微生物在地下代谢消耗聚合物，并在地下形成一个外源的微生物群落。该方法有两个优点，一是微生物可分解聚合物，有效地清除堵塞油层的聚合物；二是注入的微生物在利用聚合物生长和代谢的过程中可产生有利于驱油的物质如有机酸、活性物质等，提高原油酸值，释放原油，增加产量，最终达到提高采收率的目的。
经过查新检索和搜集资料，美国专利US4450908(“降低聚合物驱生物降解的工艺”)介绍了在生物聚合物驱后注入各种微生物，其缺陷是注入微生物的流度控制较难。另外一个是Phillips石油公司在俄克拉荷马州Osage县North Burbank开发区进行了微生物提高地层渗透率的先导性试验，该油田井底温度为45℃。选择这个油田的原因之一是该油田80年代曾成功地实施过聚丙烯酰胺/柠檬酸聚合物处理，其增产量为9％。Pillips石油公司的微生物改善原油生产专利工艺是利用油层内本源微生物连续注入营养剂使其激活，但其结果没有报道(Slowing production decline andextending the economic life of an oil field：new MEOR technology.Brown L R，VadieA A.SPE59306)。
国内聚合物驱后利用微生物驱矿场试验的实例仅为大港油田1995年10月至1999年3月期间在港西四区3注7采的聚合物驱后的井组进行了微生物驱的先导性矿场试验，即先注入Micro-Bia菌种BB后再注入国产菌(大港油田微生物驱油探索研究项目进展，刘金峰，大港油田集团责任公司，1997.8)。
分析国内外的调研资料，发现微生物采油技术从1926年至今已经过半个多世纪的发展，但是，聚合驱后利用微生物/化学驱进一步提高采收率探索研究是比较尖端的前沿技术，无论室内研究还是现场试验，仅仅是进行初步的探索，还没有研究规律和可遵循的方法。而如何将微生物/化学驱很好组合并应用，仍然面临着很多的难题。
发明内容
本发明的目的是提供充分利用优选菌株的菌液，将微生物/化学驱很好组合，以提高聚合物驱后原油采收率的微生物采油方法。
可用于本发明中的优选菌株，包括但不限于梭形芽孢杆菌(Lysinibacillusfusiformis)6#，该菌株已于2008年06月06日保藏于位于中国北京朝阳区大屯路的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.2439；波茨坦短芽孢杆菌株是(Brevibacillus borstelensis，)Po，该菌株已于2008年06月06日保藏于位于中国北京朝阳区大屯路的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.2441；地衣芽孢杆菌菌株是(Bacilluslicheniformis)U1-3，该菌株已于2008年06月06日保藏于位于中国北京朝阳区大屯路的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.2437。
本发明中，所述菌液是以上菌株与营养基的混合液或发酵液；营养基可以直接为pH6.8-7.5的水，或是按以下组成配制的营养液：K₂HPO₄ 0.1-0.5％，KH₂PO₄ 0.1-0.5％，NH₄NO₃ 0.1-0.2％，MgSO₄·7H₂O 0.01-0.1％，FeSO₄0.001-0.01％，CaCl₂ 0.001-0.01％，ZnSO₄ 0.01-0.02％，CuSO₄，0.0005-0.001％，尿素0.01-0.1％，原油1-10％，聚合物(分子量1400万)0.05-0.1％，其余为水。菌株和营养基混合时重量份数比为1-10∶100。
本发明采油过程中，可以使用所述菌株的单一菌液，或使用它们的配伍菌液。当使用配伍菌液时，可将梭形芽孢杆菌、波茨坦短芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的单一菌液按任意比例混合，复配比例按重量优选为1∶1∶1。
本发明微生物采油方法方案一具体过程为：油层聚合物驱后，先水驱含水达100％；将菌液直接注入油层，保持7天，最后水驱。
本发明微生物采油方法方案二具体过程为：油层聚合物驱后，先水驱含水达100％；将菌液直接注入油层，再注聚合物保护段塞，保持7天，最后水驱。
本发明微生物采油方法方案三具体过程为：油层聚合物驱后，先水驱含水达100％；将菌液直接注入油层，再注三元复配驱油体系，然后注聚合物保护段塞，保持7天，最后水驱。
其中，先注聚合物(1000mg/L)0.57PV(聚合物的分子量1400万，固含量0.88％，水解度23mol％，粘度是50.2mPa·s)；水驱后注入的菌液的菌浓度稀释至10^6-7个/mL，注入菌液量0.2PV；三元复配驱油体系注入量0.3PV；再注聚合物0.2PV(粘度50.2mPa·s)作为保护段塞驱；三元复配体系的配方为：表活剂烷基苯磺酸钠0.1％，NaOH1.0％，聚合物聚丙烯酰胺0.25％。
本发明中，梭形芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)6# CGMCC No.2439是革兰氏阳性杆菌，细胞直径≤1μm，形成芽孢，芽孢膨大，且非圆形；其菌落呈乳白色，直径0.6-1.2μm；该菌在兼性厌氧条件下生长，生长温度范围：40-45℃，最适生长温度：45℃；生长酸碱度范围：pH＝5-9，最适pH＝7.2；其主要生化特性列于表1。
波茨坦短芽孢杆菌(Brevibacillus borstelensis)Po CGMCC No.2441，是革兰氏阳性杆菌，电镜观察结果，细胞直径≤1μm，形成芽孢，且非圆形；其菌落呈乳白色，直径0.8-1.2μm；该菌在兼性厌氧条件下生长，生长温度范围：45-50℃，最适生长温度：45℃；生长酸碱度范围：pH＝6.4-7.8，最适pH＝7.0。
地衣芽孢杆菌菌株(Bacillus licheniformis)U1-3 CGMCC No.2437是革兰氏阳性杆菌，电镜观察结果，细胞直径≤1μm，形成芽孢，芽孢不膨大，且非圆形；其菌落呈乳白色，直径0.6-1.5μm；该菌在兼性厌氧条件下生长，生长温度范围：45-50℃，最适生长温度：45℃；生长酸碱度范围：pH＝5-9，最适pH＝5.7。
本发明利用梭形芽孢杆菌(Lysinnibacillus fusiformis)6# CGMCC No.2439、波茨坦短芽孢杆菌(Brevibacillus borstelensis)Po CGMCC No.2441、地衣芽孢杆菌菌株(Bacillus licheniformis)U1-3 CGMCC No.2437进行生物驱油。这些菌是从大庆采油厂聚合物驱块取样，经多次摇床实验，平板划线分离，再对菌种进行性能评价，从中优选出的可利用聚合物和原油的菌种。这些菌能在聚合物和原油存在的条件下生长繁殖，并以原油和聚合物为生长的能源和碳源，同时利用细菌自我复制和代谢的有机酸、有机溶剂、表面活性剂等活性物质改变原油的性质，使其更容易被开采，增加原油产量。模型驱油实验结果表明，在聚合物驱后用这些菌驱油提高采收率幅度达3-5％(OOIP)，在聚合物驱后用该菌驱加聚合物保护段塞驱油提高采收率幅度约7-9％(OOIP)，而聚合物驱后用该菌驱加三元驱结合，之后再用聚合物保护段塞，可提高采收率幅度可达13％(OOIP)左右，模型实验表现出较好的重复性，因此利用微生物驱和化学驱相结合的方法为探索聚合物驱后提高采收率提出了一条新途径；菌种的扩大发酵实验结果证明该菌种能够达到设计的生产指标，能够保证批量生产。上述实验结果表明本发明可广泛应用于采油工程领域特别是微生物强化采油领域，适合大面积推广和应用。
下面结合具体实施例对本发明做进一步详细说明。
附图说明
图1A为波茨坦短芽孢杆菌(Brevibacillus borstelensis)Po CGMCC No.2441的聚合物驱后微生物的驱油效果图
图1B为梭形芽孢杆菌(Lysinnibacillus fusiformis)6# CGMCC No.2439的聚合物驱后微生物的驱油效果图
图1C为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)U1-3 CGMCC No.2437的聚合物驱后微生物的驱油效果图
图1D为配伍菌的聚合物驱后微生物的驱油效果图
图2A为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)U1-3 CGMCC No.2437注入模型前、后原油的流变曲线图
图2B为梭形芽孢杆菌(Lysinnibacillus fusiformis)6# CGMCC No.2439注入模型前、后原油的流变曲线图
图2C为波茨坦短芽孢杆菌(Brevibacillus borstelensis)Po CGMCC No.2441注入模型前、后原油的流变曲线图
图2D为配伍菌液注入模型前后原油的流变曲线图
具体实施方式
下述实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法。
实施例1、菌株的筛选、培养及保藏
富集培养基：K₂HPO₄ 0.1-0.5％，KH₂PO₄ 0.1-0.5％，NH₄NO₃ 0.1-0.2％，MgSO₄·7H₂O0.01-0.1％，FeSO₄0.001-0.01％，CaCl₂ 0.001-0.01％，ZnSO₄0.01-0.02％，CuSO₄，0.0005-0.001％，尿素0.01-0.1％，酵母浸粉0.02-0.2％，原油1-10％，聚合物(分子量1400万)0.05-0.1％，其余为水，pH 6.8-7.5，121℃，灭菌15-20min。45℃120rpm摇床培养5-7天。
油平板培养基：K₂HPO₄ 0.1-0.5％，KH₂PO₄ 0.1-0.5％，NH₄NO₃ 0.1-0.2％，MgSO₄·7H₂O0.01-0.1％，FeSO₄0.001-0.01％，CaCl₂ 0.001-0.01％，ZnSO₄ 0.01-0.02％，CuSO₄，0.0005-0.001％，尿素0.01-0.1％，酵母浸粉0.02-0.2％，原油1-10％，聚合物(分子量1400万)0.05-0.1％，琼脂1.5-2％，其余为水，pH6.8-7.5，121℃，灭菌15-20min。
斜面培养基：蛋白胨1％，牛肉膏0.3％，氯化钠0.5％，其余为水，pH7.0-7.2。
所要筛选的菌种不仅必须适应油藏的温度、压力、PH、矿化度和厌养等环境条件，还必须具有突出的降解聚合物和利用原油的能力，用下述方法对符合要求的菌株进行筛选、培养及保藏，具体方法包括以下步骤：
1、菌株的筛选
从大庆油田的各采油厂聚合物驱块取样256个，用淘汰等方法测定了菌种利用原油及聚合物的能力和油层水中本源菌兼容等特性，最后优化出能在油藏、聚合物溶液和原油存在的条件下存活、生长繁殖，并可代谢产生有机酸、活性物质、降解原油以提高采收率的菌株，具体方法为：先用富集培养基进行富集培养，在45℃下培养7天，然后利用微生物能够乳化原油的特性，将富集培养物用划线分离的方法接种于油平板培养基上，在45℃下置于400型厌氧箱中培养3-5天，然后观察菌落形态，挑选溶油(具有排油活性)的单菌落做进一步研究，结果经300多次摇床实验，平板划线后初步分离出142株菌，然后将从油平板上挑选的单菌落接种于斜面培养基上，在45℃下置于瑞士concept400型厌氧培养箱中培养3-5天，筛选出目的菌株三株，均属兼性厌氧菌。其中包括：
命名为6#的菌株：经鉴定，其16S rDNA具有序列表中序列1的核苷酸序列，证明该菌株为梭形芽孢杆菌(Lysinnibacillus fusiformis)，是革兰氏阳性杆菌，电镜观察结果，细胞直径≤1μm，形成芽孢，芽孢膨大，且非圆形；其菌落呈乳白色，直径0.6-1.2μm；该菌在兼性厌氧条件下生长，生长温度范围：40-45℃，最适生长温度：45℃；生长酸碱度范围：pH＝6-9，最适pH＝7.2；主要生化特性见表1。
命名为Po的菌株：经鉴定，其16S rDNA具有序列表中序列2的核苷酸序列，证明该菌株为波茨坦短芽孢杆菌(Brevibacillus borstelensis)，是革兰氏阳性杆菌，电镜观察结果，细胞直径≤1μm，形成芽孢，且非圆形；其菌落呈乳白色，直径0.8-1.2μm；该菌在兼性厌氧条件下生长，生长温度范围：45-50℃，最适生长温度：45℃；生长酸碱度范围：pH＝6.4-7.8，最适pH＝7.0；主要生化特性如表1所示。
命名为U1-3的菌株：经鉴定，其16S rDNA具有序列表中序列3的核苷酸序列，证明该菌株为地衣芽孢杆菌菌株(Bacillus licheniformis)，是革兰氏阳性杆菌，电镜观察结果，细胞直径≤1μm，形成芽孢，芽孢不膨大，且非圆形；其菌落呈乳白色，直径0.6-1.5μm；该菌在兼性厌氧条件下生长，生长温度范围：45-50℃，最适生长温度：45℃；生长酸碱度范围：pH＝5-9，最适pH＝5.7；主要生化特性如表1所示。
表1三株菌的部分生化特性

  试验项目  Po结果  6#结果  U1-3结果  接触酶  +  +  +  氧化酶  -  -  +  VP试验  -  -  +  VP＜pH 6  -  -  -  VP＞pH 7  -  -  -  MR试验  +  -  +  利用柠檬酸盐  +  -  +  7％NaCl生长  -  -  +  利用葡萄糖产酸  -  +  +  利用木糖产酸  -  +  +  利用L-阿拉伯糖产酸  -  +  +  利用甘露醇产酸  -  -  +  硝酸盐还原  +  -  +  淀粉水解  -  -  +  明胶液化  +  -  +  分解酪素  +  -  +
注：“+”表示反应阳性；“-”表示反应阴性。
2、菌株的培养及保藏
培养：菌株的摇瓶培养基与富集培养基相同，培养条件为在45℃、150rpm下振荡培养7-15天。在摇床培养中可采用两种方法，将装有培养基的三角瓶在无菌间制备后，一种是在摇床振荡培养观察细菌的生长情况与乳化原油的程度，另一种是将培养液放入厌氧培养箱中每天定时用手振荡让细菌与原油充分接触，同时观察细菌作用原油和发酵液的颜色变化情况。结果该菌种能在上述两种培养方法下生长，进一步证明所筛选的菌株属兼性厌氧菌。菌株发酵液作为菌液用于后续的驱油实验中。
保藏：该三菌株已于2008年06月06日保藏于位于中国北京朝阳区大屯路的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号分别为梭形芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)6#CGMCC No.2439，波茨坦短芽孢杆菌株(Brevibacillus borstelensis，)Po CGMCC No.2441，地衣芽孢杆菌菌株(Bacilluslicheniformis)U1-3 CGMCC No.2437。
3、菌种性能
通过模拟在油层厌氧有聚合物和原油存在的条件下，对这些菌种进行了18项分析评价实验，实验结果表明：
1)菌种能利用聚合物和原油为碳源生长繁殖，并在油藏条件下生长良好；
2)通过对该菌种发酵液的界面张力、发酵液有机酸含量等性能进行评价，确定该菌种能氧化降解原油和聚合物，使其粘度下降，并具有产酸、表面活性剂的能力，经该菌种作用后原油性质发生了变化，色谱分析结果证明轻组份增加，重组份相对减少，∑C₂₁/∑C₂₂比值增加了27.0％，C₂₁+C₂₂/C₂₈+C₂₉比值增加了35.1％，油水间的界面张力由空白样的35.38mN/m降至12.89mN/m，菌种代谢的有机酸含量由300mg/L上升到852mg/L，菌种作用后原油的酸值由0.015mg(KOH)/g增加到0.3381mg(KOH)/g，酸值提高了21.54倍，含蜡量降低了39.2％、含胶量下降了1.17％、凝固点降低了34.15％，恩氏蒸馏初流点降低了80℃；
3)用牛顿指数、粘度变化量、提高采收率指数评价了该菌种的特性，结果表明该菌种改变了原油性质，特别是有效地改变了原油的流动性能，使菌种作用后原油的性质移向牛顿流体，粘度变化量参数较高，相对的提高采收率指数也较高，可以认为该菌种利用原油的性能较好；
4)为综合评价该菌种适应油层的特性，还开展了与油层本源菌的兼容、pH值及毒性实验，结果该菌种在聚合物存在的条件下，活菌数达10^9-11个/mL，并将聚合物的粘度由18.6mPa·s降至1.00mPa·s。
实施例2、人造胶结岩心驱油实验
实验模型：实验用模型均为人造非均质胶结岩心，变异系数Vk＝0.72，模型长cm＝31.131.3，截面积cm²＝12.38-12.46。
实验用水、油、菌液：
实验用的饱和水是按大庆油田平均地层水人工配制的盐水(配方为：NaCl 0.3977％CaCl₂0.0028％、MgCl₂·6H2O 0.0046％、Na₂SO₄ 0.0093％、NaHCO₃ 0.2634％)，矿化度为6778mg/L。
实验用油是取自大庆采油三厂北2区-J5--P25井的原油，经脱水后原油的粘度是47.2mPa·s。
注入水是大庆采油三厂聚合物注入站的注入水。
实验用菌液：是实施例1中所述各菌株的单一菌株发酵液。或是用菌株与水直接配制的pH值为5.0-9.0水溶液。或是三种菌的发酵液按梭形芽孢杆菌：波茨坦短芽孢杆菌：地衣芽孢杆菌为1∶1∶1混合的配伍菌液。
实验用聚合物：均为聚丙烯酰胺。
实验一：该实验是对注聚合物后水驱的岩心，直接注微生物驱油实验。
实验操作依次为：岩心抽空饱和地层水，注入饱和油，水驱含水达100％，注聚合物(1000mg/L)0.57PV(聚合物的分子量1400万，固含量0.88％，水解度23mol％，粘度是50.2mPa·s)，水驱含水达100％；将菌液的菌浓度分别稀释至10^6-7个/mL，然后注菌液0.2PV，45℃恒温保持7天，再水驱含水达100％，结束实验。
驱油实验每两块岩心为一组平行样，共做了两组模型驱油实验。另外，将从微生物驱油模型中驱出来的原油离心脱水和注入模型之前的原油做了流变性分析，观察注入模型之前的原油和模型中驱出来的原油间的粘度变化。
聚合物驱后微生物驱油效果如图1A～1D所示，聚合物驱后微生物驱油模型数据如表2所示，聚合物后直接水驱模型数据如表2所示。
表2聚合物驱后微生物驱油模型数据汇总表
  编  号  菌液  孔隙体积  mL  孔隙度  ％  渗透率  ×10-3μm²  含油饱和度  ％  水驱采收  率％  聚合物EOR  ％  MEOR  ％  1  水驱  95.05  24.56  1338  74.69  40.85  11.26  0.00  1  #6  90.57  23.46  1138  71.76  32.30  15.38  4.18  2  #6  95.71  24.79  1209  68.74  44.98  15.20  3.03  1  Po  101.74  25.79  1256  66.98  40.56  14.99  4.09  2  Po  96.09  24.07  1189  69.52  46.73  14.79  3.84  1  U1-3  92.56  27.89  1146  68.24  45.77  14.87  4.20  2  U1-3  99.07  27.33  1278  70.05  43.56  15.47  3.72  1  配伍菌  90.18  23.36  1164  67.64  43.44  14.75  4.8  2  配伍菌  90.01  23.32  1195  77.76  36.57  14.28  5.51
由表2模型实验数据可以看出，梭形芽孢杆菌(Lysinnibacillus fusiformis)6# CGMCC No.2439的两只平行样提高采收率的幅度是3.03-4.18％，波茨坦短芽孢杆菌(Brevibacillus borstelensis)Po CGMCC No.2441的两只平行样提高采收率的幅度是3.84-4.09％，地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)U1-3 CGMCC No.2437的两只平行样提高采收率的幅度是3.72-4.20％，配伍菌样两只平行样提高采收率的幅度是4.8-5.51％；从模型曲线图中分析聚合物驱含水由100％下降至80％，微生物驱含水由100％下降至90％左右，表明菌液注入后能够使含水降低，采收率提高。
对实验结果进行分析，注入水的pH值是8，从模型中产出水的pH值是5-6；当模型后续水驱时，观察了三菌种在模型中的生长状态：当模型出口产出液10mL时活菌数是10⁸个/mL，产出液45mL(0.5PV)时活菌数是10⁹个/mL，模型末端产出液90mL(1PV)时活菌数是10⁸个/mL。从岩心产出液中的活菌数说明细菌迁移至整个岩心，因为模型注菌液0.2PV，实际上菌液仅进入模型入口的1/5处，当菌种消耗掉附近的营养物后移向新的食物聚合物碳源进行生长代谢。
流变性分析结果如表3和图2A～2D所示，菌液作用后原油粘度随着剪切速率的增加而下降，降粘率基本达50％以上；表明菌液具有较好的驱油效果。
表3菌液注入模型前、后原油粘度与剪切速率的关系


实验二：该实验是对注聚合物后水驱的岩心，先注微生物，再注聚合物保护段塞驱油实验。
(A)实验操作依次为：岩心抽空饱和地层水，注入饱和油，水驱含水达100％，注聚合物(1000mg/L)0.57PV(聚合物的分子量1400万，固含量0.88％，水解度23mol％，粘度是50.2mPa·s)，水驱含水达100％；将菌液的菌浓度分别稀释至10^6-7个/mL，然后注菌液0.2PV，再注0.2PV聚合物粘度(50.2mPa·s)保护段塞驱，45℃恒温保持7天，最后水驱含水达100％，结束实验。
(B)降低保护段塞驱聚合物粘度，实验操作依次为：岩心抽空饱和地层水，注入饱和油，水驱含水达100％，注聚合物(1000mg/L)0.57PV(聚合物的分子量1400万，固含量0.88％，水解度23mol％，粘度是22.4mPa·s)，水驱含水达100％；将三种菌液的菌浓度稀释至10^6-7个/mL，然后注菌液0.2PV，再注0.2PV聚合物粘度(22.4mPa·s)保护段塞驱，45℃恒温保持7天，最后水驱含水达100％，结束实验。
应用(A)和(B)各进行了人造岩心平行驱油实验，实验结果如表4所示。
表4聚合物驱后微生物驱-聚合物保护段塞驱油实验数据
  菌液  孔隙体积  mL  孔隙度  ％  渗透率  ×10^-3μm²  油饱和度  ％  水驱采收  率％  聚合物EOR  ％  MEOR+  后段塞％  #6(A)  91.02  23.10  1305  72.5  39.41  15.90  9.85  #6(B)  92.01  23.14  1281  73.6  38.97  11.02  7.35  Po(A)  93.86  23.90  1329  75.6  40.14  16.91  11.97  Po(B)  93.86  23.90  1329  75.6  38.21  14.31  10.08
  U1-3(A)  97.09  24.16  1254  77.35  36.49  14.99  9.58  U1-3(B)  94.00  23.98  1326  73.4  41.30  10.14  6.95  配伍(A)  93.25  24.01  1346  71.25  40.69  12.35  13.51  配伍(B)  92.58  23.68  1295  73.41  41.23  14.10  12.03
从表4和表2数据对照可以看出，实验二采收率提高幅度更明显，实验二的驱油效果好于实验一。主要原因是在注微生物后加了聚合物保护段塞，经微生物作用后的原油能被聚合物均匀推进，使微生物作用后的原油被富积集中驱出，提高了波及体积，从而增加了驱油幅度。
将实验二(A)和(B)的实验数据进行比较，(A)的EOR％和MEOR％的采油幅度均高于(B)，这主要是因为(A)聚合物溶液的注入粘度(50.6mPa·s)高于(B)的聚合物溶液的注入粘度(22.4mPa·s)所致。
在实验的过程中还检测了注入模型前、后聚合物溶液的粘度。结果实验二(A)模型注入前的聚合物溶液的原始粘度是50.2mPa·s，段塞是0.57PV在注入模型的过程中用50mL量筒接从模型中产出液0.5PV检测聚合物的粘度是16.5mPa·s，聚合物溶液通过多孔介质过滤后粘度下降了3倍多，当驱出1PV时的粘度是2.0mPa·s，继续驱出1.5-2PV时的粘度是0.0mPa·s，表明聚合物在油层中已被岩石和孔喉产生了吸附和滞留。
实验三：该实验是对注聚合物后水驱的岩心，先注微生物，再注化学驱油剂，然后注聚合物保护段塞驱油实验。
实验操作依次为：岩心抽空饱和地层水，注入饱和油，水驱含水达100％，注聚合物(1000mg/L)0.57PV(聚合物的分子量1400万，固含量0.88％，水解度23mol％，粘度是50.2mPa·s)，水驱含水达100％；将菌液的菌浓度稀释至10^6-7个/mL，然后注菌液0.2PV，再注三元体系0.3PV(三元体系的配方：表活剂烷基苯磺酸钠0.1％，NaOH1.0％，聚合物聚丙烯酰胺0.25％)，然后注0.2PV聚合物粘度(50.2mPa·s)保护段塞驱，45℃恒温保持7天，最后水驱含水达100％，结束实验。
为了比较微生物模型驱油实验的幅度，用人造非均质岩心做了聚驱后直接注0.3PV三元体系进行驱油，后再注0.2PV聚合物保护段塞的驱油对照试验，实验结果如表5所示。
表19聚合物驱后+微生物+化学驱+聚合物保护段塞模型实验数据
  菌液  孔隙体  积ml  孔隙度  ％  渗透率  ×10^-3μm²  油饱和度  ％  水驱采收  率％  聚合物  EOR％  MEOR+三元+后  段塞％  #6  75.30  20.26  1317  67.07  41.58  10.89  16.56  Po  78.28  18.69  1368  66.90  40.34  10.66  16.90  U1-3  73.59  20.56  1325  67.89  42.12  9.85  15.19  配伍菌  75.10  21.84  1351  68.91  43.25  11.23  17.53  化学驱  105.96  22.43  1345  77.38  41.46  10.36  3.66
从上述的实验数据看到聚驱后注完微生物后继续注化学驱扣除对照试验的3.66％，提高采收率幅度在13％左右。
序列表
<160>3
<210>1
<211>1446
<212>DNA
<213>梭形芽孢杆菌(Lysinnibacillus fusiformis)6# CGMCC No.2439
<400>1
tgcggcgtgc ctatacatgc aagtcgagcg aacagaaaag gagcttgctc ctttgacgtt      60
agcggcggat gggtgagtaa cacgtgggca acctacccta tagtttggga taactccggg     120
aaaccggggc taataccgaa taatctcttt tgcttcatgg tgagagactg aaagacggtt     180
tcggctgtcc ctataggatg ggcccgcggc gcattagcta gttggggagg taacggctca     240
ccaaggggac gatgcgtagc ccacctgaga cggtgatcgg ccacactggg actgagacac     300
ggcccagact cctacgggag gcagcagtag ggaatcttcc acaatgggcg aaagcctgat     360
ggagcaacgc cgcgtgagtg aagaaggttt tccgatcgta aaactctgtt gtaagggaag     420
aacaagtaca gtagtaactg gctgtacctt gacggtacct tattagaaag ccacggctaa     480
ctacgtgcca gcagccgcgg taatacgtaa gtggcaagcg ttgtccggga attattgggc     540
gtaaagcgcg cgcaggcggt cctttaagtc tgatgtgaaa gcccacggct caaccgtgga     600
aggtcattgg aaactggggg acttgagtgc agaagaagaa agtggaattc caagtgtagc     660
ggtgaaatgc gtagagattt ggaggaacac cagtggcgaa ggcgactttc tggtctgtaa     720
ctgacgctga ggcgcgaaag cgtggggagc aaacaggatt agataccctg gtagtccacg     780
ccgtaaacga tgagtgctaa gtgttagggg gtttccgccc cttagtgctg cagctaacgc     840
attaagcact ccgcctgggg agtacggtcg caagactgaa actcaaagga attgacgggg     900
gcccgcacaa gcggtggagc atgtggttta attcgaagca acgcgaagaa ccttaccagg     960
tcttgacatc ccgttgacca ctgtagagat atagtttccc cttcgggggc aacggtgaca    1020
ggtggtgcat ggttgtcgtc agctcgtgtc gtgagatgtt gggttaagtc ccgcaacgag    1080
cgcaaccctt gatcttagtt gccatcattt agttgggcac tctaaggtga ctgccggtga    1140
caaaccggag gaaggtgggg atgacgtcaa atcatcatgc cccttatgac ctgggctaca    1200
cacgtgctac aatggacgat acaaacggtt gccaactcgc gagagggagc taatccgata    1260
aagtcgttct cagttcggat tgtaggctgc aactcgccta catgaagccg gaatcgctag    1320
taatcgcgga tcagcatgcc gcggtgaata cgttcccggg ccttgtacac accgcccgtc    1380
acaccacgag agtttgtaac acccgaagtc ggtgaggtaa ccttttggac ccagccgccg    1440
aaggtg                                                               1446
<210>2
<211>1437
<212>DNA
<213>波茨坦短芽孢杆菌(Brevibacillus borstelensis)Po CGMCC No.2441
<400>1
gtgccctgcg gcgtgctata catgcaagtc gagcgagtcc cttcgggggc tagcggcgga      60
cgggtgagta acacgtaggc aacctgcccg taagctcggg ataacatggg gaaactcatg     120
ctaataccgg atagggtctt ctctcgcatg agaggagacg gaaaggtggc gcaagctacc     180
acttacggat gggcctgcgg cgcattagct agttggtggg gtaacggcct accaaggcga     240
cgatgcgtag ccgacctgag agggtgaccg gccacactgg gactgagaca cggcccagac     300
tcctacggga ggcagcagta gggaattttc cacaatggac gaaagtctga tggagcaacg     360
ccgcgtgaac gatgaaggtc ttcggattgt aaagttctgt tgtcagagac gaacaagtac     420
cgttcgaaca gggcggtacc ttgacggtac ctgacgagaa agccacggct aactacgtgc     480
cagcagccgc ggtaatacgt aggtggcaag cgcttgtccg ggaattattg ggcgtaaagc     540
ggcgcaggcg gctatgtaag tctggtgtta aagcccgggg ctcaaccccg gttcgcatcg     600
gaaactgtgt agcttgagtg cagaagagga aagcggtatt ccacgtgtag cggtgaaatg     660
cgtagagatg tggaggaaca ccagtggcga aggcggcttt ctggtctgta actgacgctg     720
aggcgcgaaa gcgtggggag caaacaggat tagataccct ggtagtccac gccgtaaacg     780
atgagtgctg agtgttgggg gtttcaatac cctcagtgcc gcagctaacg caataagcac     840
tccgcctggg gagtacgctc gcaagagtga aactcaaagg aattgacggg ggcccgcaca     900
agcggtggag catgtggttt aattcgaagc aacgcgaaga accttaccag gtcttgacat     960
cccgctgacc gtcctagaga tagggcttcc cttcggggca gcggtgacag gtggtgcatg    1020
gttgtcgtca gctcgtgtcg tgagatgttg ggttaagtcc cgcaacgagc gcaaccctta    1080
tctttagttg ccagcattca gttgggcact ctagagagac tgccgtcgac aagacggagg    1140
aaggcgggga tgacgtcaaa tcatcatgcc ccttatgacc tgggctacac acgtgctaca    1200
atggctggta caacgggaag ctagctcgcg agagtatgcc aatctcttaa aaccagtctc    1260
agttcggatt gcaggctgca actcgcctgc atgaagtcgg aatcgctagt aatcgcggat    1320
cagcatgccg cggtgaatac gttcccgggc cttgtacaca ccgcccgtca caccacggga    1380
gtttgcaaca cccgaagtcg gtgaggtaac cgcaaggagc cagccgccga aggtggt       1437
<210>3
<211>1459
<212>DNA
<213>地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)U1-3 CGMCC No.2437
<400>1
cccttttgac tgcggcgtgc tatacatgca agtcgagcgg accgacggga gcttgctccc     60
ttaggtcagc ggcggacggg tgagtaacac gtgggtaacc tgcctgtaag actgggataa    120
ctccgggaaa ccggggctaa taccggatgc ttgattgaac cgcagggggc aatcataaaa    180
ggtggctttt agctaccact tgcagtagga cccgcggcgc attagctagt tggtgaggta     240
acggctcacc aaggcgacga tgcgatgccg accggagagg gtgatcggcc acactgggac     300
ggagacacgg cccagcaccc tacgggaggc agcagtaggg aatcttccgc aatggacgaa     360
agtctgacgg agcaacgccg cgtgagtgat gaaggttttc ggatcgtaaa actctgttgt     420
tagggaagaa caagtaccgt tcgaataggs sgscaccttg acggtaccta accagaaagc     480
cacggcccta actacgtgcc agcagccgcg gtaatacgta ggtggcaagc gttgtccgga     540
attattgggc gtaaagcccg cgcaggcggt ttcttaagtc tgatgtgaaa gcccccggct     600
caaccgggga gggtcattgg aaactgggga acttgagtgc agaagaggag agtggaattc     660
cacgtgtagc ggtgaaatgc gtagagatgt ggaggaacac cagtggcgaa ggagactctc     720
tggtctgtaa ctgacgctga ggcgcgaaag cgtggggagc gaacaggatt agataccctg     780
gtagtccacg ccgtaaacga tgagtgctaa gtgttagagg gtttccgccc tttagtgctg     840
cagcaaacgc attaagcact ccgcctgggg agtacggtgg caagactgaa actcaaagga     900
attgacgggg gcccgcacaa gcggtggagc atgtggttta attcgaagca acgcgaagaa     960
ccttaccagg tcttgacatc ctctgacaac cctagagata gggccttccy cttcgggggc    1020
agaggtgaca ggtggtgcat ggttgtcgtc agctcgtgtc gtgagatgtt gggttaagtc    1080
ccgcaacgag cgcaaccctt gatcttagtt gccagcattc agttgggcac tctaaggtga    1140
ctgccggtga caaaccggag gaaggtgggg atgacgtcaa atcatcatgc cccttatgac    1200
ctgggctaca cacgtgctac aatgggcaga acaaagggca gcgaagccgc gaggctaagc    1260
caatcccaca aatctgttct cagttcggat cgcagtctgc aactcgactg cgtgaagctg    1320
gaatcgctag taatagctgc gggatcagca tgccgcggtg aatacgttcc cgggccttgt    1380
acacacccgc ccgtcacacc acgagagttt gtaacacccg aaagtcggtg aggtaacctt    1440
ttggagccag ccgccgaag                                                 1459