一种用毛霉发酵制备豆类饮品的方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201010624056.6

申请日:

2010.12.30

公开号:

CN102106400A

公开日:

2011.06.29

当前法律状态:

终止

有效性:

无权

法律详情:

未缴年费专利权终止IPC(主分类):A23C 11/10申请日:20101230授权公告日:20140129终止日期:20141230|||授权|||著录事项变更IPC(主分类):A23C 11/10变更事项:发明人变更前:宾丽萍 宾丽英变更后:宾丽英|||专利申请权的转移IPC(主分类):A23C 11/10变更事项:申请人变更前权利人:宾丽萍变更后权利人:广东工业大学变更事项:地址变更前权利人:523000 广东省东莞市南城区元美东路菊香苑39栋1003室变更后权利人:510000 广东省广州市越秀区东风东路729号登记生效日:20131204|||实质审查的生效IPC(主分类):A23C 11/10申请日:20101230|||公开

IPC分类号:

A23C11/10

主分类号:

A23C11/10

申请人:

宾丽萍

发明人:

宾丽萍; 宾丽英

地址:

523000 广东省东莞市南城区元美东路菊香苑39栋1003室

优先权:

专利代理机构:

北京轻创知识产权代理有限公司 11212

代理人:

张永忠

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内容摘要

本发明提供了一种用毛霉发酵制备豆类饮品的方法,包括以下步骤:(1)发酵菌种的驯化:将毛霉划线于大豆固体培养基培养;(2)固定化毛霉;(3)制备发酵培养液:以大豆为原料制备得发酵培养基;(4)发酵:将固定化毛霉置于步骤(2)所得发酵,得发酵液;(5)过滤,得滤液;(6)调配:在滤液中添加糖得成品,其工艺简单,原料来源丰富,易于规模化生产。由本发明制备得的大豆饮品营养丰富,口感细滑,易于吸收,具有较高的社会价值和经济价值。

权利要求书

1: 一种用毛霉发酵制备豆类饮品的方法, 其特征在于, 包括以下步骤 : (1) 发酵菌种的驯化 : 将毛霉划线于大豆固体培养基培养 ; (2) 固定化毛霉 ; (3) 制备发酵培养液 : 以大豆为原料制备得发酵培养基 ; (4) 发酵 : 将固定化毛霉置于步骤 (2) 所得发酵, 得发酵液 (5) 过滤, 得滤液 ; (6) 调配 : 在滤液中添加糖得成品。
2: 根据权利要求 1 所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法, 其特征在于, 所述发酵菌 种的驯化包括 : 将毛霉划线于大豆固体培养基, 25℃的恒温培养 4 天, 挑取毛霉菌放在大豆 液体培养基中, 于 25℃的恒温摇床培养, 得毛霉菌液。
3: 根据权利要求 1 所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法, 其特征在于, 所述固定化 毛霉包括 : (21) 用无菌水将海藻酸钠调成糊状, 再加入无菌水, 加热搅拌 10min, 冷却至室温, 毛 霉菌固定剂 ; (22) 毛霉菌液放入毛霉菌固定剂中, 搅匀, 以恒定的速度加入 5%的氯化钙溶液中得 固定化的毛霉。
4: 根据权利要求 1 所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法, 其特征在于, 步骤 (3) 所述 制备发酵培养液还包括 : 将大豆清洗干净, 水煮沸 5 分钟, 搅碎成浆, 加水, 静置, 去上清液, 加入稳定剂 ( 氯化钠 ), 加入葡萄糖, 灭菌, 得发酵培养液。
5: 根据权利要求 4 所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法, 其特征在于, 所用大豆占 水质量的 5%。
6: 根据权利要求 1 所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法, 其特征在于, 步骤 (4) 所述的发酵还包括 : 发 酵 温 度 为 23-27 ℃、 发 酵 时 间 为 22-26h, 葡萄糖添加量控制为 3.2% -4.8%。
7: 根据权利要求 6 所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法, 其特征在于, 所述发酵温 度优选 25℃。
8: 根据权利要求 6 所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法, 其特征在于, 所述发酵时 间优选 22h。
9: 根据根据权利要求 6 所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法, 其特征在于, 所述葡 萄糖添加量优选 3.2%。
10: 根据权利要求 1 所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法, 其特征在于, 步骤 (6) 所 述调配包括 : 添加 4%的白砂糖。

说明书


一种用毛霉发酵制备豆类饮品的方法

    技术领域 本发明涉生物发酵技术领域, 特别地涉及到利用微生物发酵制备饮料的方法, 尤 其是利用毛霉发酵大豆制备大豆饮料的方法。
     背景技术 毛霉又叫黑霉、 长毛霉。 接合菌亚门接合菌纲毛霉目毛霉科真菌中的一个大属。 以 孢囊孢子和接合孢子繁殖。 菌丝无隔、 多核、 分枝状, 在基物内外能广泛蔓延, 无假根和匍匐 菌丝。 不产生定形菌落。 菌丝体上直接生出单生、 总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗。 各分枝 顶端着生球形孢子囊, 内有形状各异的囊轴, 但无囊托。囊内产大量球形、 椭圆形、 壁薄、 光 滑的孢囊孢子。孢子成熟后孢子囊即破裂并释放孢子。有性生殖和异宗配合或同宗配合, 形成一个接合孢子。某些种产生厚垣孢子。毛霉菌丝初期白色, 后灰白色至黑色, 这说明孢 子囊大量成熟。毛霉菌丝体每日可延伸 3 厘米左右, 生产速度明显高于香菇菌丝。
     毛霉在土壤、 粪便、 和草及空气等环境中存在。在高温、 高湿度以及通风不良的条 件下生长良好。毛霉的用途很广, 常出现在酒药中, 能糖化淀粉并能生成少量乙醇, 产生蛋 白酶, 有分解大豆蛋白的能力, 我国多用来做豆腐乳、 豆鼓。许多毛霉能产生草酸、 乳酸、 琥 珀酸及甘油等, 有的毛霉能产生脂肪酶、 果胶酶、 凝乳酶等。常用的毛霉主要有鲁氏毛霉和 总状毛霉。腐生, 广泛分布于酒曲、 植物残体、 腐败有机物、 动物粪便和土壤中。有重要工业 应用, 如利用其淀粉酶制曲、 酿酒 ; 利用其蛋白酶以酿制腐乳、 豆豉等。
     大豆发酵食品营养价值极高, 在我国已有上千年的历史, 但传统发酵大豆食品的 含盐量过高, 损害了其生理活性, 限制了其规模化生产。因此优化其生产工艺, 降低其含盐 量是微生物发酵制备大豆类食品的关键。
     发明内容
     本发明目的在于采用固定化毛霉的方法发酵, 以获得易于分离、 口感好、 营养丰富 的大豆饮品。
     本发明为解决上述技术问题所采用的技术方案为 :
     一种用毛霉发酵制备豆类饮品的方法, 包括以下步骤 :
     (1) 发酵菌种的驯化 : 将毛霉划线于大豆固体培养基培养 ;
     (2) 固定化毛霉 ;
     (3) 制备发酵培养液 : 以大豆为原料制备得发酵培养基 ;
     (4) 发酵 : 将固定化毛霉置于步骤 (2) 所得发酵, 得发酵液
     (5) 过滤, 得滤液 ;
     (6) 调配 : 在滤液中添加糖得成品 ;
     所述发酵菌种的驯化包括 : 将毛霉划线于大豆固体培养基, 25℃的恒温培养 4 天, 挑取毛霉菌放在大豆液体培养基中, 于 25℃的恒温摇床培养, 得毛霉菌液。
     所述固定化毛霉包括 :(21) 用无菌水将海藻酸钠调成糊状, 再加入无菌水, 加热搅拌 10min, 冷却至室 温, 毛霉菌固定剂 ;
     (22) 毛霉菌液放入毛霉菌固定剂中, 搅匀, 以恒定的速度加入 5%的氯化钙溶液 中得固定化的毛霉。
     步骤 (3) 所述制备发酵培养液还包括 : 将大豆清洗干净, 水煮沸 5 分钟, 搅碎成浆, 加水, 静置, 去上清液, 加入稳定剂 ( 氯化钠 ), 加入葡萄糖, 灭菌, 得发酵培养液。
     步骤 (4) 所述的发酵还包括 : 发酵温度为 23-27℃、 发酵时间为 22-26h, 葡萄糖添 加量控制为 3.2% -4.8%。
     所述发酵温度优选 25℃。
     所述发酵时间优选 22h。
     所述葡萄糖添加量优选 3.2%。
     步骤 (6) 所述调配包括 : 添加 4%的白砂糖。
     发明的有益效果
     本发明提供了一种工艺简单, 条件易控制的利用毛霉发酵制备大豆饮品的方法 ;
     本发明制备得一种口感好, 营养丰富, 易于吸收的大豆食品。
     下面结合实施例, 对本发明进一步说明。具体实施方式
     实施例 1
     一种毛霉发酵制备豆类饮品的方法, 包括以下步骤 :
     (1) 菌种的驯化
     称取 1g 腐乳曲, 放在烧杯中, 放入 10ml 无菌水, 溶解并浸泡 30min。然后, 用纱布 将其过滤, 再加上 990ml 无菌水稀释。最后, 将菌液涂布在牛肉膏蛋白胨培养基上, 在 25℃ 培养 2 天。
     两天后, 在菌落中挑取毛霉在大豆固体培养基中划线, 继续在 25℃的恒温培养箱 培养两天。
     再两天后, 在大豆固体培养基中, 挑取毛霉菌丝, 放在大豆液体培养基中, 然后, 将 培养液放于 25℃的恒温摇床中培养、 备用。
     (2) 发酵液的制备
     称取 50g 大豆, 清洗干净, 用些许水煮沸 5 分钟。然后放入豆浆机里面, 加水至 1000ml 打浆 ( 大豆∶水= 5% )。接着, 让豆浆静止 5 分钟, 倒取上清液 800ml, 加入 4g 稳 定剂, 1g 氯化钠防止沉淀。最后, 分别取 250ml 放入三个烧瓶中, 并分别加入不同量的葡萄 糖, 以作因素分析。最后在灭菌锅中灭菌。
     (3) 固定化毛霉的制备
     称取海藻酸钠 10g 于大烧杯中, 然后加入总量为 290ml 的无菌水少许, 将海藻酸钠 调成糊状, 再将剩余水加入, 最后, 将其放入加热搅拌器中加热搅拌 10min。之后, 冷却至室 温备用。
     在经过驯化的毛霉菌液中吸取 10ml, 放入冷却至室温的海藻酸钠中, 搅匀。然后, 利用移液枪取混合物以恒定的速度地道盛有 5%的氯化钙溶液的烧杯中, 得固定化毛霉。(4) 发酵
     将固定化毛霉接种在大豆发酵液中, 25℃, 发酵 22h, 得发酵液。
     (5) 制备豆类饮品
     将发酵液过滤, 取滤液, 添加 4%的白砂糖, 得豆类饮品。
     实施例 2
     本实施例与实施例 1 基本相同, 其区别在于, 发酵条件不同, 本实施的发酵条件 为: 发酵温度为 23℃, 葡萄糖量为 3.2%, 发酵时间为 22h。
     实施例 3
     本实施例与实施例 1 基本相同, 其区别在于, 发酵条件不同, 本实施的发酵条件 为: 发酵温度为 27℃, 葡萄糖量为 4.8%, 发酵时间为 22h。
     实施例 4
     本实施例与实施例 1 基本相同, 其区别在于, 发酵条件不同, 本实施的发酵条件 为: 发酵温度为 25℃, 葡萄糖量为 4%, 发酵时间为 24h。
     本发明并不限于上述实施方式, 凡是能实现本发明目的的所有等同的实施方式, 均在本发明的保护范围之内。5

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1、10申请公布号CN102106400A43申请公布日20110629CN102106400ACN102106400A21申请号201010624056622申请日20101230A23C11/1020060171申请人宾丽萍地址523000广东省东莞市南城区元美东路菊香苑39栋1003室72发明人宾丽萍宾丽英74专利代理机构北京轻创知识产权代理有限公司11212代理人张永忠54发明名称一种用毛霉发酵制备豆类饮品的方法57摘要本发明提供了一种用毛霉发酵制备豆类饮品的方法,包括以下步骤1发酵菌种的驯化将毛霉划线于大豆固体培养基培养;2固定化毛霉;3制备发酵培养液以大豆为原料制备得发酵培养基;4发酵。

2、将固定化毛霉置于步骤2所得发酵,得发酵液;5过滤,得滤液;6调配在滤液中添加糖得成品,其工艺简单,原料来源丰富,易于规模化生产。由本发明制备得的大豆饮品营养丰富,口感细滑,易于吸收,具有较高的社会价值和经济价值。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页CN102106403A1/1页21一种用毛霉发酵制备豆类饮品的方法,其特征在于,包括以下步骤1发酵菌种的驯化将毛霉划线于大豆固体培养基培养;2固定化毛霉;3制备发酵培养液以大豆为原料制备得发酵培养基;4发酵将固定化毛霉置于步骤2所得发酵,得发酵液5过滤,得滤液;6调配在滤液中添加糖得成品。2根据权利。

3、要求1所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法,其特征在于,所述发酵菌种的驯化包括将毛霉划线于大豆固体培养基,25的恒温培养4天,挑取毛霉菌放在大豆液体培养基中,于25的恒温摇床培养,得毛霉菌液。3根据权利要求1所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法,其特征在于,所述固定化毛霉包括21用无菌水将海藻酸钠调成糊状,再加入无菌水,加热搅拌10MIN,冷却至室温,毛霉菌固定剂;22毛霉菌液放入毛霉菌固定剂中,搅匀,以恒定的速度加入5的氯化钙溶液中得固定化的毛霉。4根据权利要求1所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法,其特征在于,步骤3所述制备发酵培养液还包括将大豆清洗干净,水煮沸5分钟,搅碎成浆,加水,静置,去上。

4、清液,加入稳定剂氯化钠,加入葡萄糖,灭菌,得发酵培养液。5根据权利要求4所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法,其特征在于,所用大豆占水质量的5。6根据权利要求1所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法,其特征在于,步骤4所述的发酵还包括发酵温度为2327、发酵时间为2226H,葡萄糖添加量控制为3248。7根据权利要求6所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法,其特征在于,所述发酵温度优选25。8根据权利要求6所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法,其特征在于,所述发酵时间优选22H。9根据根据权利要求6所述的用毛霉发酵制备豆类饮品的方法,其特征在于,所述葡萄糖添加量优选32。10根据权利要求1所述的用毛霉发酵。

5、制备豆类饮品的方法,其特征在于,步骤6所述调配包括添加4的白砂糖。权利要求书CN102106400ACN102106403A1/3页3一种用毛霉发酵制备豆类饮品的方法技术领域0001本发明涉生物发酵技术领域,特别地涉及到利用微生物发酵制备饮料的方法,尤其是利用毛霉发酵大豆制备大豆饮料的方法。背景技术0002毛霉又叫黑霉、长毛霉。接合菌亚门接合菌纲毛霉目毛霉科真菌中的一个大属。以孢囊孢子和接合孢子繁殖。菌丝无隔、多核、分枝状,在基物内外能广泛蔓延,无假根和匍匐菌丝。不产生定形菌落。菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗。各分枝顶端着生球形孢子囊,内有形状各异的囊轴,但无囊托。囊内产大。

6、量球形、椭圆形、壁薄、光滑的孢囊孢子。孢子成熟后孢子囊即破裂并释放孢子。有性生殖和异宗配合或同宗配合,形成一个接合孢子。某些种产生厚垣孢子。毛霉菌丝初期白色,后灰白色至黑色,这说明孢子囊大量成熟。毛霉菌丝体每日可延伸3厘米左右,生产速度明显高于香菇菌丝。0003毛霉在土壤、粪便、和草及空气等环境中存在。在高温、高湿度以及通风不良的条件下生长良好。毛霉的用途很广,常出现在酒药中,能糖化淀粉并能生成少量乙醇,产生蛋白酶,有分解大豆蛋白的能力,我国多用来做豆腐乳、豆鼓。许多毛霉能产生草酸、乳酸、琥珀酸及甘油等,有的毛霉能产生脂肪酶、果胶酶、凝乳酶等。常用的毛霉主要有鲁氏毛霉和总状毛霉。腐生,广泛分布。

7、于酒曲、植物残体、腐败有机物、动物粪便和土壤中。有重要工业应用,如利用其淀粉酶制曲、酿酒;利用其蛋白酶以酿制腐乳、豆豉等。0004大豆发酵食品营养价值极高,在我国已有上千年的历史,但传统发酵大豆食品的含盐量过高,损害了其生理活性,限制了其规模化生产。因此优化其生产工艺,降低其含盐量是微生物发酵制备大豆类食品的关键。发明内容0005本发明目的在于采用固定化毛霉的方法发酵,以获得易于分离、口感好、营养丰富的大豆饮品。0006本发明为解决上述技术问题所采用的技术方案为0007一种用毛霉发酵制备豆类饮品的方法,包括以下步骤00081发酵菌种的驯化将毛霉划线于大豆固体培养基培养;00092固定化毛霉;0。

8、0103制备发酵培养液以大豆为原料制备得发酵培养基;00114发酵将固定化毛霉置于步骤2所得发酵,得发酵液00125过滤,得滤液;00136调配在滤液中添加糖得成品;0014所述发酵菌种的驯化包括将毛霉划线于大豆固体培养基,25的恒温培养4天,挑取毛霉菌放在大豆液体培养基中,于25的恒温摇床培养,得毛霉菌液。0015所述固定化毛霉包括说明书CN102106400ACN102106403A2/3页4001621用无菌水将海藻酸钠调成糊状,再加入无菌水,加热搅拌10MIN,冷却至室温,毛霉菌固定剂;001722毛霉菌液放入毛霉菌固定剂中,搅匀,以恒定的速度加入5的氯化钙溶液中得固定化的毛霉。001。

9、8步骤3所述制备发酵培养液还包括将大豆清洗干净,水煮沸5分钟,搅碎成浆,加水,静置,去上清液,加入稳定剂氯化钠,加入葡萄糖,灭菌,得发酵培养液。0019步骤4所述的发酵还包括发酵温度为2327、发酵时间为2226H,葡萄糖添加量控制为3248。0020所述发酵温度优选25。0021所述发酵时间优选22H。0022所述葡萄糖添加量优选32。0023步骤6所述调配包括添加4的白砂糖。0024发明的有益效果0025本发明提供了一种工艺简单,条件易控制的利用毛霉发酵制备大豆饮品的方法;0026本发明制备得一种口感好,营养丰富,易于吸收的大豆食品。0027下面结合实施例,对本发明进一步说明。具体实施方式。

10、0028实施例10029一种毛霉发酵制备豆类饮品的方法,包括以下步骤00301菌种的驯化0031称取1G腐乳曲,放在烧杯中,放入10ML无菌水,溶解并浸泡30MIN。然后,用纱布将其过滤,再加上990ML无菌水稀释。最后,将菌液涂布在牛肉膏蛋白胨培养基上,在25培养2天。0032两天后,在菌落中挑取毛霉在大豆固体培养基中划线,继续在25的恒温培养箱培养两天。0033再两天后,在大豆固体培养基中,挑取毛霉菌丝,放在大豆液体培养基中,然后,将培养液放于25的恒温摇床中培养、备用。00342发酵液的制备0035称取50G大豆,清洗干净,用些许水煮沸5分钟。然后放入豆浆机里面,加水至1000ML打浆大。

11、豆水5。接着,让豆浆静止5分钟,倒取上清液800ML,加入4G稳定剂,1G氯化钠防止沉淀。最后,分别取250ML放入三个烧瓶中,并分别加入不同量的葡萄糖,以作因素分析。最后在灭菌锅中灭菌。00363固定化毛霉的制备0037称取海藻酸钠10G于大烧杯中,然后加入总量为290ML的无菌水少许,将海藻酸钠调成糊状,再将剩余水加入,最后,将其放入加热搅拌器中加热搅拌10MIN。之后,冷却至室温备用。0038在经过驯化的毛霉菌液中吸取10ML,放入冷却至室温的海藻酸钠中,搅匀。然后,利用移液枪取混合物以恒定的速度地道盛有5的氯化钙溶液的烧杯中,得固定化毛霉。说明书CN102106400ACN102106。

12、403A3/3页500394发酵0040将固定化毛霉接种在大豆发酵液中,25,发酵22H,得发酵液。00415制备豆类饮品0042将发酵液过滤,取滤液,添加4的白砂糖,得豆类饮品。0043实施例20044本实施例与实施例1基本相同,其区别在于,发酵条件不同,本实施的发酵条件为发酵温度为23,葡萄糖量为32,发酵时间为22H。0045实施例30046本实施例与实施例1基本相同,其区别在于,发酵条件不同,本实施的发酵条件为发酵温度为27,葡萄糖量为48,发酵时间为22H。0047实施例40048本实施例与实施例1基本相同,其区别在于,发酵条件不同,本实施的发酵条件为发酵温度为25,葡萄糖量为4,发酵时间为24H。0049本发明并不限于上述实施方式,凡是能实现本发明目的的所有等同的实施方式,均在本发明的保护范围之内。说明书CN102106400A。

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