淫羊藿总黄酮甙的制备工艺 本发明属于一种淫羊藿总黄酮甙的制备工艺。
小檗科(Berberidaceae)淫羊藿属(Epimedium)植物全世界有40余种，主要分布于亚洲、中东和欧洲的温带及亚温带地区，在中国有18个种和几个变种。淫羊藿是中国传统中药，历代本草均有记载，《中华人民共和国药典》(一九九五年版，一部)将其定义为淫羊藿(E．brevicornum)、箭叶淫羊藿(E．sagittatum)、柔毛淫羊藿(E．pubescens)、乌山淫羊藿(E．wushanense)、或朝鲜淫羊藿(E．koreanum)的干燥地上部分，它具有补肾阳、强筋骨和祛风湿的功效，用于治疗阳痿遗精、筋骨痿软、风湿痹痛及更年期高血压症等。
淫羊藿含有的淫羊藿甙等多种淫羊藿黄酮甙成分是该中药的主要活性成分，其化学和药理研究的报道很多，但迄今为止见到的提取工艺研究的报道则很少。王维友等曾探索了淫羊藿的乙醇提取工艺(99中国药学会学术年会论文集，1999，p1023-1024)，但用乙醇提取的成本较高，纯度也不理想。用一般提取黄酮的水煮树脂吸附工艺，则收率太低。
本发明的目的是为开发这一祖国传统中药提出一种成本低、收率高的淫羊藿总黄酮甙制备工艺。
为了达到上述目的，本发明将淫羊藿粗粉用含抗氧化剂的水溶液煮沸提取，提取液通过大孔树脂柱吸附，用水充分洗涤后再用有机溶剂梯度洗脱，浓缩干燥后可得总黄酮含量大于50％的淫羊藿总黄酮甙。
下面结合附图对本发明作进一步详细说明。
1、粉碎：将淫羊藿粉碎成粗粉，放入提取罐中；
2、煮提：加入适量水，煮沸30～60分钟，趁热过滤，残渣再用含抗氧化剂(如Na2S2O5)地水溶液照前(煮沸30～60分钟)煮提2～3次(总用水量一般约为原料的20～40倍)；
3、树脂吸附：提取液通过大孔树脂柱吸附黄酮(树脂用量视原料中黄酮含量多少而定，一般树脂湿重为原料重量的0．3～1．5倍)，提取液上柱流速为每小时2～8个树脂床体积，吸附后用2～4个树脂床体积的水洗出糖分和无机盐等，再用有机溶剂洗脱(根据最终产品质量要求可用不同浓度的乙醇或丙酮进行梯度洗脱)，洗脱流速一般比吸附时慢一倍以上，为每小时1～4个床体积；
4、浓缩干燥：洗脱液真空浓缩，温度控制在60℃以下，最后可用喷雾干燥得到淫羊藿总黄酮甙干粉；
5、树脂的前处理及再生：在装柱之前，树脂需用稀氯化钠溶液(1％-5％)处理，水洗，以便去除抗氧化剂和其他残留物；树脂装柱以后，先将约5个树脂床体积的95％乙醇通过树脂层，再用水通过树脂柱以便置换掉乙醇；洗脱后树脂的再生可用5％氢氧化钠(NaOH)溶液进行再生，经水冲洗以后便可进入下一循环。
本工艺优点在于：
1、本工艺提取溶剂为水而不用有机溶剂，在工业生产中减少了脱脂等程序，可以大大降低生产成本，并且避免了使用有机溶剂而引起的易燃易暴等不安全因素；
2、提取时加入了抗氧化剂，可以防止黄酮在高温提取时及处理过程中被氧化，并且提取液在常温下放置十余天也不会发生霉变；
3、所选用大孔吸附树脂(如D140)对黄酮的吸附能力强，洗脱容易，再生方便；
4、本工艺步骤少，操作简单，方便应用于生产。
实施例：
取箭叶淫羊藿(E．sagittatum)地上部分干粉3．0公斤，加入0．5％(Na2S2O5)的水溶液60升，煮沸提取50分钟，过滤，滤渣再提取2次，每次加入0．5％(Na2S2O5)的水溶液40升，煮沸提取50分钟，过滤。三次提取液合并，上D140大孔树脂柱(树脂量湿重3．0公斤)后用20升水洗涤，然后用40％乙醇10升洗脱，得洗脱液9L，再用95％乙醇15升洗脱；洗脱液浓缩得：40％乙醇洗脱物：86克
95％乙醇洗脱物：60克(得率2％)，黄酮含量：53．6％
经TLC对照检查40％乙醇洗脱物不含淫羊藿甙；95％乙醇洗脱物主要含淫羊藿甙及另一个黄酮甙。
取20克95％乙醇洗脱物样品，以硅胶柱层析分离纯化(氯仿-甲醇梯度洗脱)得淫羊藿甙(icariin)和淫羊藿甙I(icariin I)，其1HNMR和13CNMR谱与文献值完全吻合。