12-肟醚脱氢枞酸化合物及其合成方法.pdf

1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201410193869.2 (22)申请日 2014.05.09 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 104016882 A (43)申请公布日 2014.09.03 (73)专利权人 上海大学 地址 200444 上海市宝山区上大路99号 (72)发明人 崔永梅王鹤云刘新兰王天骐 林海霞 (74)专利代理机构 上海上大专利事务所(普通 合伙) 31205 代理人 陆聪明 (51)Int.Cl. C07C 251/48(2006.01) C07C 251/52(20

2、06.01) C07C 251/54(2006.01) C07C 249/12(2006.01) A61K 31/195(2006.01) A61P 9/10(2006.01) A61P 21/00(2006.01) A61P 1/04(2006.01) A61P 25/08(2006.01) A61P 27/16(2006.01) (56)对比文件 CN 102702024 A,2012.10.03,权利要求1. CN 101972614 A1,2011.02.16,全文. WO 2012086409 A1,2012.06.08,全文. CN 102702026 A,2012.10.03,全

3、文. CN 103214390 A,2013.07.24,全文. WO 2012133336 A1,2012.10.04,全文. 崔国友 等.脱氢枞酸的应用研究进展. 精 细与专用化学品 .2006,第14卷(第20期),第6-8 页. 王鹤云 等.大电导钙激活钾通道(BKCa)及 其开放剂研究进展. 生命科学 .2012,第24卷 (第10期),第1141-1150页. 审查员 王化邦 (54)发明名称 12-肟醚脱氢枞酸化合物及其合成方法 (57)摘要 本发明涉及一种12-肟醚脱氢枞酸化合物及 其合成方法。 该化合物的结构式为： 其中， R1=H、 芳香系取代基或C1 C3直链或支链烷基；

4、 R2=H、 C1C8直链或支链或环 状烷基、 不饱和烯基、 不饱和炔基或芳香系取代 基。 本发明涉及一类高效、 简洁的12-肟醚脱氢枞 酸衍生物的制备方法。 该化合物及其药学可接受 的盐、 水合物、 溶剂化物、 晶体形式、 非对映异构 体、 前药或混合物等， 特别用于治疗与大电导钙 激活钾离子通道相关的病症。 权利要求书4页 说明书41页 CN 104016882 B 2017.01.04 CN 104016882 B 1.一种12-肟醚脱氢枞酸化合物， 其特征在于该化合物结构式为： 其中， R1=芳香系取代基或C1C3直链或支链烷基； R2=C1C8直链或支链或环状烷基、 不 饱和烯基、

5、不饱和炔基或芳香系取代基； 所述的芳香系取代基为： 苯基、 2,4-二氯苯基、 苄基、 对甲基苄基、 对氟苄基、 对三氟甲 氧基苄基、 对溴苄基、 1-萘酚甲基或2-萘酚甲基； 所述的不饱和烯基为： 烯丙基或3,3-二甲基烯丙基； 所述的不饱和炔基为： 炔丙基。 2.一种制备根据权利要求1所述的12-肟醚脱氢枞酸化合物的方法， 其特征在于该方法 的具体步骤为： a.将脱氢枞酸溶于甲醇中， 在8595温度下， 缓慢滴加浓硫酸催化剂， 搅拌反应至 原料反应完全； 静置冷却， 去除甲醇， 乙酸乙酯萃取， 有机相经洗涤、 干燥、 减压蒸去溶剂得 粗产品； 该粗产品经过分离提纯得产物脱氢枞酸甲酯， 其结

6、构式为：； b.将步骤a所得脱氢枞酸甲酯溶于硝基苯中， 搅拌下依次加入三氯化铝、 二氯甲基甲 醚， 脱氢枞酸甲酯、 三氯化铝和二氯甲基甲醚的摩尔比为1:5:1.1-1.3， 反应至原料反应完 全； 二氯甲烷萃取， 有机相经洗涤、 干燥、 去除溶剂得粗产品； 该粗产品经过柱层析分离提纯 得微黄粉末12-醛基-脱氢枞酸甲酯， 其结构式为：； c.将步骤b所得12-醛基-脱氢枞酸甲酯溶于乙醇中， 在8590下， 加入吡啶， 随后滴 加氯化羟胺的乙醇溶液， 12-醛基-脱氢枞酸甲酯、 吡啶和氯化羟胺的摩尔比为1:3:1.6- 2 .0， 搅拌反应至完全反应； 分离提纯得12-醛肟基-脱氢枞酸甲酯， 其

7、结构式为： 权利要求书 1/4 页 2 CN 104016882 B 2 ； d.将步骤c所得12-肟基-脱氢枞酸甲酯和叔丁醇钾按照1:15-20的摩尔比加入到N,N- 二甲基甲酰胺中， 室温下搅拌反应至反应完全； 调解pH值为6-7， 乙酸乙酯萃取， 有机相经洗 涤、 干燥和减压蒸去溶剂得粗品； 该粗品经重结晶分离提纯得12-醛肟基-脱氢枞酸， 其结构 式为：； e.将步骤d所得12-肟基-脱氢枞酸酸、 氢氧化钾和相应的碘化物或溴化物按照1:10:5 的摩尔比加入到乙醇中， 加入催化剂无水碘化钠， 回流反应至反应完全； 减压蒸去溶剂， 在 冰浴条件下， 调解pH值为6-7， 乙酸乙酯萃取，

8、有机相经洗涤、 干燥和减压蒸去溶剂得粗品； 该粗品经分离提纯得12-醛肟醚-脱氢枞酸， 其结构通式为：； 所述的碘化物 的结构式为： CH3I； 所述的溴化物的结构式为：、 、 、或。 3.一种制备根据权利要求1所述的12-肟醚脱氢枞酸化合物的方法， 其特征在于该方法 的具体步骤为： a.将脱氢枞酸溶于甲醇中， 在8595温度下， 缓慢滴加浓硫酸， 搅拌反应至原料反 应完全； 静置冷却， 去除甲醇， 乙酸乙酯萃取， 有机相经洗涤、 干燥、 减压蒸去溶剂得粗产品； 权利要求书 2/4 页 3 CN 104016882 B 3 该粗产品经过分离提纯得产物脱氢枞酸甲酯， 其结构式为：； b.在惰性气

9、氛下， 将三氧化铝溶解于四氯化碳中， 在冰盐浴条件下， 滴入相应的酰氯， 将步骤a所得脱氢枞酸甲酯溶于四氯化碳中， 搅拌下缓慢滴入反应体系， 保持滴加过程中温 度低于-10， 脱氢枞酸甲酯、 三氯化铝和酰氯的摩尔比为1:2.3:1.5， 继续反应2小时后， 转 移至室温反应， 反应至原料反应完全； 二氯甲烷萃取， 有机相经洗涤、 干燥、 去除溶剂得粗产 品； 该粗产品经过柱层析分离提纯得相应的12-酰基基-脱氢枞酸甲酯， 其结构式为： ； 所述的酰氯的结构式为：、 或； c.将步骤b所得12-酰基-脱氢枞酸甲酯溶于乙醇中， 在8590下， 加入吡啶， 随后滴 加氯化羟胺的乙醇溶液， 12-醛基

10、-脱氢枞酸甲酯、 吡啶和氯化羟胺的摩尔比为1:3:1.6- 2 .0 ， 搅拌反应至完全反应 ； 分离提纯得12-肟基-脱氢枞酸甲酯 ， 其结构式为 ： ； d.将步骤c所得12-肟基-脱氢枞酸甲酯和叔丁醇钾按照1:15-20的摩尔比加入到N,N- 二甲基甲酰胺中， 室温下搅拌反应至反应完全； 调解pH值为6-7， 乙酸乙酯萃取， 有机相经洗 涤、 干燥和减压蒸去溶剂得粗品； 该粗品经重结晶分离提纯得12-肟基-脱氢枞酸， 其结构式 为：； e.将步骤d所得12-肟基-脱氢枞酸酸、 氢氧化钾和相应的碘化物或溴化物按照1:10:5 权利要求书 3/4 页 4 CN 104016882 B 4 的

11、摩尔比加入到乙醇中， 加入10%碘化钠催化， 在7080下回流反应至反应完全； 减压蒸 去溶剂， 在冰浴条件下， 加入1N盐酸， 调解pH值为6-7， 乙酸乙酯萃取， 有机相经洗涤、 干燥和 减压蒸去溶剂得粗品； 该粗品经分离提纯得一系列12-肟醚-脱氢枞酸， 其结构通式为： ； 所述的碘化物的结构式为： CH3I； 所述的溴化物的结构式为： 、 或。 4.一种根据权利要求1所述的12-肟醚脱氢枞酸化合物在制备用于治疗哺乳动物中大 电导钙激活钾离子通道相关病症的药物中的应用。 权利要求书 4/4 页 5 CN 104016882 B 5 12-肟醚脱氢枞酸化合物及其合成方法 技术领域 0001

12、 本发明涉及一种12-肟醚脱氢枞酸化合物及其合成方法。 背景技术 0002 大电导钙激活钾通道广泛分布在哺乳动物除心肌细胞外的各种组织中， 如平滑 肌、 骨骼肌、 神经元、 肾脏和内分泌细胞等， 并参与了许多生理过程。 大电导钙激活钾通道为 由形成孔道的 亚基和起调节作用的 亚基组成的四聚体结构。 大电导钙激活钾通道的 亚 基由单基因KCNM1编码， 可单独聚合为四聚体， 形成功能性离子通道， 通过对该基因的不同 剪接及与调节基因 亚基细微的联系影响通道的生理特性。 0003 在大脑内， 大电导钙激活钾通道广泛分布于树突、 轴突、 突触末端并在神经元兴奋 性调控方面起重要作用， 从而影响神经元

13、的信号传导及神经递质的释放； 在平滑肌组织中, 大电导钙激活钾通道参与维持膜电位及调节肌紧张等生理过程， 调节血管、 输尿管、 子宫收 缩及肾小球滤过率； 在耳部， 大电导钙激活钾通道调节耳蜗毛细胞频率发放及神经递质的 释放等。 因此， 应用特异性大电导钙激活钾通道开放剂对治疗冠状动脉痉挛、 心肌缺血等心 血管疾病， 肌营养不良性疾病， 胃肠动力障碍性疾病， 特发性癫痫、 听觉丧失、 脑部缺血等疾 病具有广阔的应用前景。 0004 脱氢枞酸 （dehydroabieticacid,DHAA） 是一种来源于松香的天然二萜类树脂 酸， 为三环二萜类化合物， 具有多种生物活性， 例如抗菌、 抗病毒、

14、 抗肿瘤、 抗溃疡等， 其在化 妆品、 农业、 医药领域中具有巨大应用前景。 研究发现， 脱氢枞酸作为一类特殊结构的二萜 树脂酸， 具有大电导钙激活钾通道的开放活性， 进一步对其进行结构修饰在C环12， 14位引 入两个氯原子， B环7位引入烯丙基肟醚得到的化合物CYM04激活大电导钙激活钾通道的活 性与NS1619相当， 其与连接跨膜片段S6与胞内RCK1区域的门控铰链作用， 将力传递到通道 的孔道形成部分， 而使通道处于开放状态。 0005 由于脱氢枞酸化学结构中存在多个手性中心和共轭双键， 利用枞酸和脱氢枞酸为 原料可以合成多种具有生物活性的化合物。 脱氢枞酸的三环骨架及羧基可以进行一系

15、列化 学或生物改性， 通过引入不同的取代基或官能团可以得到一系列生物活性衍生物。 目前没 有任何论文或专利有对合成12-肟醚脱氢枞酸的描写。 发明内容 0006 本发明的目的之一在于提供在一种12-肟醚脱氢枞酸化合物， 该化合物是一类新 型特异性大电导钙激活钾通道开放剂。 0007 本发明的目的之二在于提供该类化合物的合成方法。 0008 根据上述理论， 本发明采用如下反应机理： 0009 方法一： 说明书 1/41 页 6 CN 104016882 B 6 0010 0011 方法二： 0012 0013 根据上述原理， 本发明采用如下技术方案： 0014 一种12-肟醚脱氢枞酸化合物， 其

16、特征在于该化合物结构式为： 0015 0016 其中， R1=H、 芳香系取代基或C1C3直链或支链烷基； R2=H、 C1C8直链或支链或环 状烷基、 不饱和烯基、 不饱和炔基或芳香系取代基。 0017上述的芳香系取代基为 ： 苯基、 2 ,4-二氯苯基、 说明书 2/41 页 7 CN 104016882 B 7 等。 0018上述的不饱和烯基为： 烯丙基、等。 0019 上述的不饱和炔基为： 炔丙基。 0020 一种制备上述的12-肟醚脱氢枞酸化合物的方法， 其特征在于该方法的具体步骤 为： 0021 a.将脱氢枞酸溶于甲醇中， 在8595温度下， 缓慢滴加浓硫酸催化剂， 搅拌反 应至原

17、料反应完全； 静置冷却， 去除甲醇， 乙酸乙酯萃取， 有机相经洗涤、 干燥、 减压蒸去溶 剂得粗产品； 该粗产品经过分离提纯得产物脱氢枞酸甲酯， 其结构式为：； 0022 b.将步骤a所得脱氢枞酸甲酯溶于硝基苯中， 搅拌下依次加入三氯化铝、 二氯甲基 甲醚， 脱氢枞酸甲酯、 三氯化铝和二氯甲基甲醚的摩尔比为1:5:1.1-1.3， 反应至原料反应 完全； 二氯甲烷萃取， 有机相经洗涤、 干燥、 去除溶剂得粗产品； 该粗产品经过柱层析分离提 纯得微黄粉末12-醛基-脱氢枞酸甲酯， 其结构式为：； 0023 c.将步骤b所得12-醛基-脱氢枞酸甲酯溶于乙醇中， 在8590下， 加入吡啶， 随 后滴

18、加氯化羟胺的乙醇溶液， 12-醛基-脱氢枞酸甲酯、 吡啶和氯化羟胺的摩尔比为1:3: 1 .6-2 .0， 搅拌反应至完全反应； 分离提纯得12-醛肟基-脱氢枞酸甲酯， 其结构式为： ； 0024 d.将步骤c所得12-肟基-脱氢枞酸甲酯和叔丁醇钾按照1:15-20的摩尔比加入到 N,N-二甲基甲酰胺中， 室温下搅拌反应至反应完全； 调解pH值为6-7， 乙酸乙酯萃取， 有机相 经洗涤、 干燥和减压蒸去溶剂得粗品； 该粗品经重结晶分离提纯得12-醛肟基-脱氢枞酸， 其 说明书 3/41 页 8 CN 104016882 B 8 结构式为：； 0025 e.将步骤d所得12-肟基-脱氢枞酸酸、

19、氢氧化钾和相应的碘化物或溴化物按照1: 10:5的摩尔比加入到乙醇中， 加入催化剂无水碘化钠， 回流反应至反应完全； 减压蒸去溶 剂， 在冰浴条件下， 调解pH值为6-7， 乙酸乙酯萃取， 有机相经洗涤、 干燥和减压蒸去溶剂得 粗品； 该粗品经分离提纯得12-醛肟醚-脱氢枞酸， 其结构通式为：； 所述的碘 化物的结构式为： CH3I； 所述的溴化物的结构式为：、 、 、等。 0026 一种制备上述的12-肟醚脱氢枞酸化合物的方法， 其特征在于该方法的具体步骤 为： 0027 a.将脱氢枞酸溶于甲醇中， 在8595温度下， 缓慢滴加浓硫酸， 搅拌反应至原 料反应完全； 静置冷却， 去除甲醇， 乙

20、酸乙酯萃取， 有机相经洗涤、 干燥、 减压蒸去溶剂得粗 产品； 该粗产品经过分离提纯得产物脱氢枞酸甲酯， 其结构式为：； 0028 b.在惰性气氛下， 将三氧化铝溶解于四氯化碳中， 在冰盐浴条件下， 滴入相应的酰 氯， 将步骤a所得脱氢枞酸甲酯溶于四氯化碳中， 搅拌下缓慢滴入反应体系， 保持滴加过程 中温度低于-10， 脱氢枞酸甲酯、 三氯化铝和酰氯的摩尔比为1:2.3:1.5， 继续反应2小时 后， 转移至室温反应， 反应至原料反应完全； 二氯甲烷萃取， 有机相经洗涤、 干燥、 去除溶剂 得粗产品； 该粗产品经过柱层析分离提纯得相应的12-酰基基-脱氢枞酸甲酯， 其结构式为： 说明书 4/4

21、1 页 9 CN 104016882 B 9 ； 所述的酰氯的结构式为：、 、等； 0029 c.将步骤b所得12-酰基-脱氢枞酸甲酯溶于乙醇中， 在8590下， 加入吡啶， 随 后滴加氯化羟胺的乙醇溶液， 12-醛基-脱氢枞酸甲酯、 吡啶和氯化羟胺的摩尔比为1:3: 1 .6-2 .0， 搅拌反应至完全反应； 分离提纯得12-肟基-脱氢枞酸甲酯， 其结构式为： ； 0030 d.将步骤c所得12-肟基-脱氢枞酸甲酯和叔丁醇钾按照1:15-20的摩尔比加入到 N,N-二甲基甲酰胺中， 室温下搅拌反应至反应完全； 调解pH值为6-7， 乙酸乙酯萃取， 有机相 经洗涤、 干燥和减压蒸去溶剂得粗品；

22、 该粗品经重结晶分离提纯得12-肟基-脱氢枞酸， 其结 构式为：； 0031 e.将步骤d所得12-肟基-脱氢枞酸酸、 氢氧化钾和相应的碘化物或溴化物按照1: 10:5的摩尔比加入到乙醇中， 加入10%碘化钠催化， 在7080下回流反应至反应完全； 减 压蒸去溶剂， 在冰浴条件下， 加入1N盐酸， 调解pH值为6-7， 乙酸乙酯萃取， 有机相经洗涤、 干 燥和减压蒸去溶剂得粗品； 该粗品经分离提纯得一系列12-肟醚-脱氢枞酸， 其结构通式为： ； 所述的碘化物的结构式为： CH3I； 所述的溴化物的结构式为： 、 说明书 5/41 页 10 CN 104016882 B 10 、等。 0032

23、 一种根据上述的12-肟醚脱氢枞酸化合物在制备用于治疗哺乳动物中大电导钙激 活钾离子通道相关病症的药物中的应用。 0033 本发明的化合物具有脱氢枞酸骨架结构， 并在12位入醛基或酮基， 并且对醛基或 酮基进行肟化、 烷基化而得到一系列12-肟醚脱氢枞酸化合物， 研究表明， 在C环引入脂溶性 基团可以提高活性， 因此， 该类化合物具有更优良的生理活性。 本发明方法是一种高效、 简 洁的制备方法。 0034 本发明的化合物具有不对称中心， 包括所有光学异构体以及它们的化合物。 另外， 具有碳氮双键的化合物可以以Z-和E-形式存在， 化合物的所有异构形式都被包括在内。 这 些化合物可以是， 例如，

24、 外消旋体或光学活性形式。 在这些情况下， 单个对映体， 即光学活性 形式， 可通过不对称合成或拆分外消旋体获得。 外消旋体的拆分可通过常规方法获得， 所述 常规方法如： 在拆分试剂存在下结晶或用例如手性高压液相色谱 （HPLC） 柱的色谱法。 当本 发明的化合物以各种互变形式存在时， 本发明不限于任何一个特定的互变异构体， 而包括 化合物的所有互变异构形式。 0035 本发明的化合物， 包括但不限于它们的药学可接受的酸加成盐。 无毒的 “药学可接 受的盐” 包括但不限于无机酸的盐， 如盐酸盐、 磷酸盐等； 或有机酸的盐， 如苹果酸盐， 马来 酸盐等。 类似地， 药学可接受的阳离子包括但不限于

25、钠、 钾、 钙、 铝和铵。 另外， 如果式A的化 合物以酸加成盐的形式获得， 其游离碱可通过碱化酸盐的溶液获得； 相反， 如果产物是游离 碱， 加成盐， 特别是药学可接受的加成盐， 可根据从碱化合物制备酸加成盐的常规方法， 通 过将游离碱溶解在合适溶剂中， 并用酸处理溶液获得。 0036 式A的化合物可以以含有常规无毒的药学可接受的载体、 辅剂和赋形剂的剂量单 元的形式口服、 局部、 非肠胃、 吸入、 喷雾或直肠给药。 式A的化合物给药时， 其用药剂量， 给 药方式， 根据患者的体型、 年龄、 体征及患病程度， 疾病减轻所需时间等而变。 0037 式A的化合物和大电导钙激活钾离子通道的相互作用

26、将导致其活性调节。 与大电 导钙激活钾通道通道相关的疾病包括但不限于冠状动脉痉挛、 心肌缺血等心血管疾病， 肌 营养不良性疾病， 胃肠动力障碍性疾病， 特发性癫痫、 听觉丧失、 脑部缺血等疾病。 本专利使 用膜片钳技术测定来预测这些希望的生理性质。 0038 膜片钳技术是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞上单一的 （或多数 的） 离子通道活动的技术。 它为从分子水平了解生物膜离子通道的门控动力学特征及通透 性、 选择性等膜信息， 提供了最直接的手段。 膜片钳技术自其发明以来， 被广泛用于生物学、 生理学、 生物化学、 药理学等多种学科的基础研究中， 并同其他许多技术进行了有机结合， 在

27、生命科学领域发挥了巨大的作用。 0039 PopulationPatchClampTM技术摒弃玻璃电极， 采用384孔PatchPlate平面电 极芯片。 该芯片含有多个小室， 每个小室中含有很多1-2mm的封接孔。 在记录时， 每个小室 中封接成功的细胞数目较多， 获得的记录是最高64个细胞的平均离子通道电流。 因此， 不同 小室其通道电流的一致性非常好， 变异系数很小。 这种创新性记录方式克服了记录单个细 胞时成功率低和细胞与细胞间生物差异性大的缺点。 0040 本发明中所涉及化合物的大电导钙激活钾通道开放活性均通过膜片钳技术得到。 说明书 6/41 页 11 CN 104016882 B

28、 11 在建立了hBKa的中华仓鼠卵母细胞(CHO)表达系统基础上， 采用分子仪器公司开发的 PopulationPatchClamp 技术， 对所合成的化合物进行筛选。 细胞被接种到Patch PlatePPC 基片上， 每个通道包含了多个记录点， 记录表达重组BKCa通道的细胞株中的 平均离子电流。 本实验钳制电压设置为-90mV， 从-90mV起以10mV阶跃除极至+100 mV， 持续时间为350ms， 记录添加待测化合物(30mM)后通道电流的变化。 平行测定八 次， 以通道电流(%ofcontrolat30mM)表示化合物活性， 数值100%说明化合物具 有开放活性。 具体实施方式

29、 0041 实施例1： (E)-12-肟基脱氢枞酸 0042 合成步骤： 0043 A.将化合物 （DHAA）（10.5g， 0.035mol） 溶于甲醇 （280mL） 中， 缓慢滴加浓H2SO4 （24mL） ， 超过十分钟， 90油浴连续搅拌约12小时， 分离提纯得9.9g无色透明晶体， 即化 合物 （W-1） ， 产率90.4%； 0044 B.将化合物 （W-1）（500mg， 1.59mmol） 溶解于硝基苯 （8mL） 中， 搅拌下依次加入 三氯化铝 （1.1g， 8.25mmol） 、 二氯甲基甲醚 （0.19mL， 2.07mmol） ， 室温下搅拌10小时， 后 处理后分离

30、提纯得304mg微黄粉末， 即化合物 （W-2） ， 产率55.8%； 0045 C.将化合物 （W-2）（200mg， 0.58mmol） 溶于乙醇 （8mL） 中， 加入吡啶 （0.13mL） ， 随后滴加氯化羟胺 （64.5mg， 0.94mmol） 的乙醇溶液， 90油浴搅拌3-4小时， 分离提纯得 微黄油状物130mg， 即化合物 （W-3） ， 产率70.3%； 0046 D.将化合物 （W-3）（50mg， 0.14mmol） 和叔丁醇钾 （230mg， 2.10mmol） 加入到N, N-二甲基甲酰胺中， 混合物室温下搅拌4小时， 后处理后重结晶得白色晶体44mg， 即化合物

31、（W-4） ， 产率86.0%。 0047 该化合物的结构为： 0048 0049 分子式： C21H29NO3 0050 中文命名： (E)-12-肟基-脱氢枞酸 0051 英文命名： (1R,4aS)-6-(E)-(hydroxyimino)methyl)-7-isopropyl-1,4a- dimethyl-1,2,3,4,4a,9,10,10a-octahydrophenanthrene-1-carboxylicacid 0052 分子量： 343.21 0053 外观： 白色固体 0054 核磁共振氢谱1HNMR(500MHz,CDCl3): 8.42(s,1H),7.59(s,1H

32、), 6.95(s,1H),4.24(q,J=7.0Hz,2H),3.23(hept,J=6.9Hz,1H),2.94- 2.90(m,2H),2.39(d,J=12.6Hz,1H),2.23-2.20(m,1H),1.90-1.71(m, 说明书 7/41 页 12 CN 104016882 B 12 5H),1.58-1.51(m,2H),1.35-1.20(m,15H). 0055 核磁共振碳谱13CNMR(125MHz,CDCl3):185.60,147.40,147.09, 144.15,137.10,126.95,125.94,122.78,69.49,60.46,47.40,44

33、.49,37.80, 36.76,29.96,28.50,25.01,23.79,23.55,21.62,18.47,16.25,14.66,14.21. 0056 低分辨质谱C23H33NO3(M+H),344.2. 0057 实施例2： (E)-12-甲基肟基脱氢枞酸的合成步骤： 0058 A.将化合物 （DHAA）（10.5g， 0.035mol） 溶于甲醇 （280mL） 中， 缓慢滴加浓H2SO4 （24mL） ， 超过十分钟， 90油浴连续搅拌约12小时， 分离提纯得9.9g无色透明晶体， 即化 合物 （W-1） ， 产率90.4%； 0059 B.将化合物 （W-1）（500mg

34、， 1.59mmol） 溶解于硝基苯 （8mL） 中， 搅拌下依次加入 三氯化铝 （1.1g， 8.25mmol） 、 二氯甲基甲醚 （0.19mL， 2.07mmol） ， 室温下搅拌10小时， 后 处理后分离提纯得304mg微黄粉末， 即化合物 （W-2） ， 产率55.8%； 0060 C.将化合物 （W-2）（200mg， 0.58mmol） 溶于乙醇 （8mL） 中， 加入吡啶 （0.13mL） ， 随后滴加氯化羟胺 （64.5mg， 0.94mmol） 的乙醇溶液， 90油浴搅拌3-4小时， 分离提纯得 微黄油状物130mg， 即化合物 （W-3） ， 产率70.3%； 0061

35、D.将化合物 （W-3）（50mg， 0.14mmol） 和叔丁醇钾 （230， 2.10mmol） 加入到N,N-二 甲基甲酰胺中， 混合物室温下搅拌4小时， 后处理后重结晶得白色晶体44mg， 即化合物 （W- 4） ， 产率86.0%。 0062 E.将化合物 （W-4）（100mg， 0.29mmol） 、 氢氧化钾 （164mg， 2.91mmol） 和烯丙基 溴 （90 L， 1.64mmol） 加入到乙醇中， 80油浴搅拌8-12小时， 后处理后分离提纯得黄色油 状物51mg， 即化合物 （W-5a） ， 产率47.7%。 0063 该化合物的结构为： 0064 0065 分子式

36、： C22H31NO3 0066 中文命名： (E)-12-甲基肟基-脱氢枞酸 0067 英文命名： (1R,4aS)-7-isopropyl-6-(E)-(methoxyimino)methyl)-1,4a- dimethyl-1,2,3,4,4a,9,10,10a-octahydrophenanthrene-1-carboxylicacid 0068 分子量： 357.23 0069 外观： 白色固体 0070 核磁共振氢谱1HNMR(500MHz,CDCl3): 8.40(s,1H),7.59(s,1H), 6.95(s,1H),3.97(s,3H),3.20(hept,J=6.9Hz,

37、1H),2.93-2.89(m,2H), 2.40(d,J=12.3Hz,1H),2.22-2.19(m,1H),1.90-1.71(m,5H),1.57-1.50 (m,2H),1.29-1.19(m,12H). 说明书 8/41 页 13 CN 104016882 B 13 0071 核磁共振碳谱13CNMR(125MHz,CDCl3):183.54,147.58,147.14, 144.19,137.24,126.68,125.95,122.70,61.79,47.32,44.54,37.82,36.92, 36.72,29.96,29.71,28.49,24.99,23.77,23.5

38、3,21.59,18.45,16.30. 0072 低分辨质谱C22H31NO3(M+H),358.2. 0073 实施例3： (E)-12-乙基肟基脱氢枞酸的合成步骤： 0074 A.将化合物 （DHAA）（10.5g， 0.035mol） 溶于甲醇 （280mL） 中， 缓慢滴加浓H2SO4 （24mL） ， 超过十分钟， 90油浴连续搅拌约12小时， 分离提纯得9.9g无色透明晶体， 即化 合物 （W-1） ， 产率90.4%； 0075 B.将化合物 （W-1）（500mg， 1.59mmol） 溶解于硝基苯 （8mL） 中， 搅拌下依次加入 三氯化铝 （1.1g， 8.25mmol）

39、 、 二氯甲基甲醚 （0.19mL， 2.07mmol） ， 室温下搅拌10小时， 后 处理后分离提纯得304mg微黄粉末， 即化合物 （W-2） ， 产率55.8%； 0076 C.将化合物 （W-2）（200mg， 0.58mmol） 溶于乙醇 （8mL） 中， 加入吡啶 （0.13mL） ， 随后滴加氯化羟胺 （64.5mg， 0.94mmol） 的乙醇溶液， 90油浴搅拌3-4小时， 分离提纯得 微黄油状物130mg， 即化合物 （W-3） ， 产率70.3%； 0077 D.将化合物 （W-3）（50mg， 0.14mmol） 和叔丁醇钾 （230， 2.10mmol） 加入到N,N

40、-二 甲基甲酰胺中， 混合物室温下搅拌4小时， 后处理后重结晶得白色晶体44mg， 即化合物 （W- 4） ， 产率86.0%。 0078 E.将化合物 （W-4）（100mg， 0.29mmol） 、 氢氧化钾 （164mg， 2.91mmol） 和烯丙基 溴 （111 L， 1.64mmol） 加入到乙醇中， 80油浴搅拌8-12小时， 后处理后分离提纯得黄色 油状物62mg， 即化合物 （W-5b） ， 产率57.4%。 0079 该化合物的结构为： 0080 0081 分子式： C23H33NO3 0082 中文命名： (E)-12-乙基肟基-脱氢枞酸 0083 英文命名： (1R,4

41、aS)-6-(E)-(ethoxyimino)methyl)-7-isopropyl-1,4a- dimethyl-1,2,3,4,4a,9,10,10a-octahydrophenanthrene-1-carboxylicacid 0084 分子量： 371.25 0085 外观： 白色固体 0086 核磁共振氢谱1HNMR(500MHz,CDCl3): 8.42(s,1H),7.59(s,1H), 6.95(s,1H),4.24(q,J=7.0Hz,2H),3.23(hept,J=6.9Hz,1H),2.94- 2.90(m,2H),2.39(d,J=12.6Hz,1H),2.23-2.2

42、0(m,1H),1.90-1.71(m, 5H),1.58-1.51(m,2H),1.35-1.20(m,15H). 0087 核磁共振碳谱13CNMR(125MHz,CDCl3):185.60,147.40,147.09, 说明书 9/41 页 14 CN 104016882 B 14 144.15,137.10,126.95,125.94,122.78,69.49,60.46,47.40,44.49,37.80, 36.76,29.96,28.50,25.01,23.79,23.55,21.62,18.47,16.25,14.66,14.21. 0088 低分辨质谱C23H33NO3(M+

43、H),372.3. 0089 实施例4： (E)-12-异丙基肟基脱氢枞酸的合成步骤： 0090 A.将化合物 （DHAA）（10.5g， 0.035mol） 溶于甲醇 （280mL） 中， 缓慢滴加浓H2SO4 （24mL） ， 超过十分钟， 90油浴连续搅拌约12小时， 分离提纯得9.9g无色透明晶体， 即化 合物 （W-1） ， 产率90.4%； 0091 B.将化合物 （W-1）（500mg， 1.59mmol） 溶解于硝基苯 （8mL） 中， 搅拌下依次加入 三氯化铝 （1.1g， 8.25mmol） 、 二氯甲基甲醚 （0.19mL， 2.07mmol） ， 室温下搅拌10小时，

44、后 处理后分离提纯得304mg微黄粉末， 即化合物 （W-2） ， 产率55.8%； 0092 C.将化合物 （W-2）（200mg， 0.58mmol） 溶于乙醇 （8mL） 中， 加入吡啶 （0.13mL） ， 随后滴加氯化羟胺 （64.5mg， 0.94mmol） 的乙醇溶液， 90油浴搅拌3-4小时， 分离提纯得 微黄油状物130mg， 即化合物 （W-3） ， 产率70.3%； 0093 D.将化合物 （W-3）（50mg， 0.14mmol） 和叔丁醇钾 （230， 2.10mmol） 加入到N,N-二 甲基甲酰胺中， 混合物室温下搅拌4小时， 后处理后重结晶得白色晶体44mg，

45、即化合物 （W- 4） ， 产率86.0%。 0094 E.将化合物 （W-4）（100mg， 0.29mmol） 、 氢氧化钾 （164mg， 2.91mmol） 和异丙基 溴 （126 L， 1.64mmol） 加入到乙醇中， 80油浴搅拌8-12小时， 后处理后分离提纯得无色 透明油状物72mg， 即化合物 （W-5c） ， 产率64.0%。 0095 该化合物的结构为： 0096 0097 分子式： C23H35NO3 0098 中文命名： (E)-12-异丙基肟基-脱氢枞酸 0099 英文命名： (1R,4aS)-6-(E)-(isopropoxyimino)methyl)-7-is

46、opropyl-1,4a- dimethyl-1,2,3,4,4a,9,10,10a-octahydrophenanthrene-1-carboxylicacid 0100 分子量： 385.26 0101 外观： 无色透明油状 0102 核磁共振氢谱1HNMR(500MHz,CDCl3): 8.39(s,1H),7.58(s,1H), 6.95(s,1H),4.48(hept,J=6.3Hz,1H),3.26(hept,J=6.8Hz,1H),2.94- 2.90(m,2H),2.38(d,J=12.5Hz,1H),2.23-2.20(m,1H),1.89-1.71(m, 5H),1.58-

47、1.51(m,2H),1.32-1.20(m,12H). 0103 核磁共振碳谱13CNMR(125MHz,CDCl3):185.68,147.60,147.56, 144.66,137.46,127.79,126.49,123.46,75.90,61.00,47.95,45.04,38.32, 说明书 10/41 页 15 CN 104016882 B 15 37.43,37.31,30.50,29.05,25.57,24.34,24.09,22.30,19.02,16.79,14.76. 0104 低分辨质谱C23H35NO3(M+H),386.3. 0105 实施例5： (E)-12-正

48、辛基肟基脱氢枞酸的合成步骤： 0106 A.将化合物 （DHAA）（10.5g， 0.035mol） 溶于甲醇 （280mL） 中， 缓慢滴加浓H2SO4 （24mL） ， 超过十分钟， 90油浴连续搅拌约12小时， 分离提纯得9.9g无色透明晶体， 即化 合物 （W-1） ， 产率90.4%； 0107 B.将化合物 （W-1）（500mg， 1.59mmol） 溶解于硝基苯 （8mL） 中， 搅拌下依次加入 三氯化铝 （1.1g， 8.25mmol） 、 二氯甲基甲醚 （0.19mL， 2.07mmol） ， 室温下搅拌10小时， 后 处理后分离提纯得304mg微黄粉末， 即化合物 （W-

49、2） ， 产率55.8%； 0108 C.将化合物 （W-2）（200mg， 0.58mmol） 溶于乙醇 （8mL） 中， 加入吡啶 （0.13mL） ， 随后滴加氯化羟胺 （64.5mg， 0.94mmol） 的乙醇溶液， 90油浴搅拌3-4小时， 分离提纯得 微黄油状物130mg， 即化合物 （W-3） ， 产率70.3%； 0109 D.将化合物 （W-3）（50mg， 0.14mmol） 和叔丁醇钾 （230， 2.10mmol） 加入到N,N-二 甲基甲酰胺中， 混合物室温下搅拌4小时， 后处理后重结晶得白色晶体44mg， 即化合物 （W- 4） ， 产率86.0%。 0110 E.将化合物 （WHY-4）（100mg， 0.29mmol） 、 氢氧化钾 （164mg， 2.91mmol） 和溴辛 烷 （251 L， 1.64mmol） 加入到乙醇中， 80油浴搅拌8-12小时， 后处理后分离提纯得黄色 油状物73mg， 即化合物 （W-5d） ， 产率55.2%。 0111 该化合物的结构为： 0112 0113 分子式： C29H45NO3 0114 中文命名： (E)-12-正辛基肟基-脱氢枞酸 0115 英文命名： (1R,4aS)-7-i