治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法.pdf

1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810873008.7 (22)申请日 2018.08.02 (71)申请人 广西壮族自治区药用植物园 地址 530023 广西壮族自治区南宁市兴宁 区长岗路189号 (72)发明人 欧春丽 龚小妹 王硕 候小利 缪剑华 莫单丹 唐炳兰 宋志军 周小雷 (74)专利代理机构 北京远大卓悦知识产权代理 事务所(普通合伙) 11369 代理人 靳浩 (51)Int.Cl. A61K 36/73(2006.01) A61K 9/20(2006.01) A61K 9/30(2006

2、.01) A61K 47/32(2006.01) A61K 47/10(2006.01) A61K 47/26(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种治疗乳腺癌鸡血藤片剂 的制备方法， 其包括以下步骤： 步骤一、 取鸡血藤 使用沸水进行提取， 过滤得第一提取液， 将第一 提取液浓缩至80时比重为1.0， 得第一浓缩液； 步骤二、 将第一浓缩液上大孔树脂柱， 依次用水、 体积分数为20的乙醇和体积分数为60的乙 醇洗脱大孔树脂柱， 收集60的乙醇洗脱溶液， 得洗脱液， 将洗脱液浓缩至80时比重为1

3、.08， 得浸膏； 步骤三、 将浸膏与辅料混匀后制粒、 压 片、 包衣， 即得鸡血藤片剂。 本发明提供的鸡血藤 片剂对乳腺癌的肿瘤细胞具有较好的抑制作用。 权利要求书2页 说明书10页 CN 108685998 A 2018.10.23 CN 108685998 A 1.治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 其特征在于， 其包括以下步骤： 步骤一、 取鸡血藤使用沸水进行提取， 过滤得第一提取液， 将第一提取液浓缩至80时 比重为1.0， 得第一浓缩液； 步骤二、 将第一浓缩液上大孔树脂柱， 依次用水、 体积分数为20的乙醇和体积分数为 60的乙醇洗脱大孔树脂柱， 收集60的乙醇洗脱溶液， 得洗脱液

4、， 将洗脱液浓缩至80时 比重为1.08， 得浸膏； 步骤三、 将浸膏与辅料混匀后制粒、 压片、 包衣， 即得鸡血藤片剂。 2.如权利要求1所述的治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 其特征在于， 每30kg鸡血藤 得1000粒鸡血藤片剂。 3.如权利要求1所述的治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 其特征在于， 所述辅料为玉 米粉、 硅酸钙、 羧甲基纤维素钠、 肉豆蔻醇、 鱼胶、 滑石中的一种或多种， 步骤三中辅料和浸 膏的质量比为25:1。 4.如权利要求3所述的治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 其特征在于， 步骤一鸡血藤 的提取具体为： 将鸡血藤洗净、 切碎后置于提取罐内， 向提取罐中加入沸水至

5、浸没鸡血藤， 保持沸水恒温提取2h， 重复提取两次， 收集两次滤液， 即得第一提取液。 5.如权利要求4所述的治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 其特征在于， 所述步骤二中 大孔树脂柱为弱极性的。 6.如权利要求1所述的治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 其特征在于， 洗脱液在浓缩 成浸膏之前， 经过了预处理， 具体为： S1、 按重量份数称取611份的山楂皮、 59份的乌梅皮和26份的石榴皮分别洗净混 合后磨碎成粉末， 得混合粉， 将混合粉与洗脱液按照重量比为1:2的比例混合， 得第一混合 物， 将第一混合物超声振荡处理25min后过滤收集第一滤液， 得预处理液； S2、 按重量份数称取25份的

6、黄芦叶、 38份的风箱果树皮、 812份的黑果腺肋花楸 果实、 13份的蓝靛果、 511份的水榆花楸和47份的山豆根， 分别洗净、 切碎、 干燥后进 行蒸汽爆破处理， 得爆破物； 用爆破物的5倍重量的体积分数为75乙醇浸泡提取三次， 每 次一周， 合并第二提取液， 将第二提取液与混合粉按照重量比为1:2的比例混合， 得第二混 合物， 将第二混合物超声振荡处理25min后过滤收集第二滤液， 将第二滤液浓缩至80时比 重为1.0， 得第二浓缩液； S3、 将预处理液与第二浓缩液按照重量比为0.02:1的比例混合均匀， 即得预处理后的 洗脱液。 7.如权利要求6所述的治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法，

7、 其特征在于， 所述步骤三具 体为： i、 将浸膏与辅料按照质量比为25:1的比例混匀后制粒、 压片的第一芯片， 第一芯片的 上、 下表面上均设有多个直径为0.20.4mm的第一凹槽， 第一侧面上设有第二凹槽， 与第一 侧面相对的第二侧面上设有可卡设于第二凹槽内的凸块； 将第一芯片置于05的冷箱中 保存， 510min后取出立即放入3040的第二混合物中浸泡， 23min后取出风干， 得第 二芯片； ii、 在第二芯片的外表面均匀的喷涂一层包衣液， 得第一片剂； 将跳跳糖块破碎过筛并 磨光为0.20.4mm粒径的圆滑的跳跳糖颗粒， 在第一片剂的上下表面的多个第一凹槽中放 权 利 要 求 书 1

8、/2 页 2 CN 108685998 A 2 置跳跳糖颗粒， 一个第一凹槽中放置一个跳跳糖颗粒， 得第二片剂； iii、 在第二片剂的外表面均匀的喷涂一层包衣液， 干燥后得第三片剂； 每三个第三片 剂为一组， 将一组的三个第三片剂依次平行排列并连接， 形成第四片剂， 即得所述鸡血藤片 剂； 其中对于任一第一片剂的卡块卡设于相邻的一个第一片剂的第二卡槽中， 以实现三个 第一片剂的相对定位， 相邻的两个第三片剂接触的边缘处均匀喷涂一层包衣液。 权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 108685998 A 3 治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法 技术领域 0001 本发明涉及中药制备技术领域。 更

9、具体地说， 本发明涉及一种治疗乳腺癌鸡血藤 片剂的制备方法。 背景技术 0002 女性乳腺是由皮肤、 纤维组织、 乳腺腺体和脂肪组成的， 乳腺癌是发生在乳腺腺上 皮组织的恶性肿瘤。 据国家癌症中心和卫生部疾病预防控制局2012年公布的2009年乳腺癌 发病数据显示： 全国肿瘤登记地区乳腺癌发病率位居女性恶性肿瘤的第1位， 女性乳腺癌发 病率(粗率)全国合计为42.55/10万， 城市为51.91/10万， 农村为23.12/10万。 0003 鸡血藤为豆科(Leguminosae)密花豆属(Spatholobus)植物密花豆(Spatholobus suberectus Dunn)的干燥藤茎。

10、 鸡血藤为补血活血的传统中药， 近年来临床上常用鸡血藤 治疗贫血， 各种原因(如放疗、 化疗)引起的白细胞、 血小板、 红细胞等全血象减少和再生障 碍性贫血等疾病， 且疗效较好。 现代药理学研究证明， 鸡血藤还具有抗肿瘤、 抗病毒、 免疫调 节、 对酪氨酸酶双向调节、 抗炎、 抗氧化、 镇静催眠等作用。 鸡血藤作为治疗乳腺癌的主要药 理成分鲜有文献报道。 发明内容 0004 本发明的一个目的是解决至少上述问题， 并提供至少后面将说明的优点。 0005 本发明还有一个目的是提供一种治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 其能够提供 一种对乳腺癌细胞具有抑制效果的鸡血藤片剂。 0006 为了实现根据本发

11、明的这些目的和其它优点， 提供了一种治疗乳腺癌鸡血藤片剂 的制备方法， 其包括以下步骤： 0007 步骤一、 取鸡血藤使用沸水进行提取， 过滤得第一提取液， 将第一提取液浓缩至80 时比重为1.0， 得第一浓缩液； 0008 步骤二、 将第一浓缩液上大孔树脂柱， 依次用水、 体积分数为20的乙醇和体积分 数为60的乙醇洗脱大孔树脂柱， 收集60的乙醇洗脱溶液， 得洗脱液， 将洗脱液浓缩至80 时比重为1.08， 得浸膏； 0009 步骤三、 将浸膏与辅料混匀后制粒、 压片、 包衣， 即得鸡血藤片剂。 0010 优选的是， 所述的治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 每30kg鸡血藤得1000粒鸡

12、血藤片剂。 0011 优选的是， 所述的治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 所述辅料为玉米粉、 硅酸 钙、 羧甲基纤维素钠、 肉豆蔻醇、 鱼胶、 滑石中的一种或多种， 步骤三中辅料和浸膏的质量比 为25:1。 0012 优选的是， 所述的治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 步骤一鸡血藤的提取具体 为： 将鸡血藤洗净、 切碎后置于提取罐内， 向提取罐中加入沸水至浸没鸡血藤， 保持沸水恒 温提取2h， 重复提取两次， 收集两次滤液， 即得第一提取液。 说 明 书 1/10 页 4 CN 108685998 A 4 0013 优选的是， 所述的治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 所述步骤二中大孔树脂柱 为

13、弱极性的。 0014 优选的是， 所述的治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 洗脱液在浓缩成浸膏之前， 经过了预处理， 具体为： 0015 S1、 按重量份数称取611份的山楂皮、 59份的乌梅皮和26份的石榴皮分别洗 净混合后磨碎成粉末， 得混合粉， 将混合粉与洗脱液按照重量比为1:2的比例混合， 得第一 混合物， 将第一混合物超声振荡处理25min后过滤收集第一滤液， 得预处理液； 0016 S2、 按重量份数称取25份的黄芦叶、 38份的风箱果树皮、 812份的黑果腺肋 花楸果实、 13份的蓝靛果、 511份的水榆花楸和47份的山豆根， 分别洗净、 切碎、 干燥 后进行蒸汽爆破处理， 得爆破

14、物； 用爆破物的5倍重量的体积分数为75乙醇浸泡提取三 次， 每次一周， 合并第二提取液， 将第二提取液与混合粉按照重量比为1:2的比例混合， 得第 二混合物， 将第二混合物超声振荡处理25min后过滤收集第二滤液， 将第二滤液浓缩至80 时比重为1.0， 得第二浓缩液； 0017 S3、 将预处理液与第二浓缩液按照重量比为0.02:1的比例混合均匀， 即得预处理 后的洗脱液。 0018 优选的是， 所述的治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 所述步骤三具体为： 0019 i、 将浸膏与辅料按照质量比为25:1的比例混匀后制粒、 压片的第一芯片， 第一芯 片的上、 下表面上均设有多个直径为0.20

15、.4mm的第一凹槽， 第一侧面上设有第二凹槽， 与 第一侧面相对的第二侧面上设有可卡设于第二凹槽内的凸块； 将第一芯片置于05的冷 箱中保存， 510min后取出立即放入3040的第二混合物中浸泡， 23min后取出风干， 得第二芯片； 0020 ii、 在第二芯片的外表面均匀的喷涂一层包衣液， 得第一片剂； 将跳跳糖块破碎过 筛并磨光为0.20.4mm粒径的圆滑的跳跳糖颗粒， 在第一片剂的上下表面的多个第一凹槽 中放置跳跳糖颗粒， 一个第一凹槽中放置一个跳跳糖颗粒， 得第二片剂； 0021 iii、 在第二片剂的外表面均匀的喷涂一层包衣液， 干燥后得第三片剂； 每三个第 三片剂为一组， 将一

16、组的三个第三片剂依次平行排列并连接， 形成第四片剂， 即得所述鸡血 藤片剂； 其中对于任一第一片剂的卡块卡设于相邻的一个第一片剂的第二卡槽中， 以实现 三个第一片剂的相对定位， 相邻的两个第三片剂接触的边缘处均匀喷涂一层包衣液。 0022 本发明至少包括以下有益效果： 0023 1、 本发明选用鸡血藤作为药理成分的主要原料， 鸡血藤首先经过沸水提取， 利用 大孔树脂柱提纯， 最终获取含有药理成分的浸膏， 然后将浸膏与辅料混匀制成片剂， 其为天 然药物， 无毒副作用， 且对于人体乳腺癌细胞均具有抑制作用， 制作简单， 且急性毒性实验 和长期毒性试验表明其急性毒性低， 长期用药毒性低， 给药途径方

17、便， 病人易于接受， 绿色 环保， 为治疗和防止肿瘤提供一种新的途径和手段； 0024 2、 在鸡血藤的洗脱液中加入含有山楂皮、 乌梅皮和石榴皮的混合粉， 经过超声振 荡处理， 山楂皮、 乌梅皮和石榴皮组成的混合粉能够去除鸡血藤洗脱液中异味， 尤其是乙醇 携带的刺激气味， 同时混合粉能够增添洗脱液的甜味， 遮盖鸡血藤提取物的苦腥味， 最终达 到改善片剂的口感； 在洗脱液中加入中草药黄芦叶、 风箱果树皮、 黑果腺肋花楸果实、 蓝靛 果、 水榆花楸和山豆根， 通过各种组分的合理用量配比、 提取方法调控及各原料间理化性质 说 明 书 2/10 页 5 CN 108685998 A 5 产生配伍协同作

18、用制成抗癌片剂， 利用传统中医理论， 重视整体观念， 调节气血的生成、 运 行， 同时辨证论治， 对于乳腺癌具有显著的抑制效果， 同时增强免疫功能的双向作用， 同时 可配合放疗、 化疗使用， 增强疗效同时， 降低放疗化疗副反应， 给药途径方便， 病人易于接 受； 0025 3、 在病情较轻或后期病情转好后， 服用的药量会有所减少， 患者服用的药量可相 对减少， 现有的片剂通常为一个整体的较大一片， 不易分解， 给患者的服用带来不便； 本发 明制备的鸡血藤片剂为拼接式的， 三个第三片剂相互之间卡接， 在两个相邻的第三片剂接 触的边缘处喷涂一层较薄的包衣液， 使得第三片剂成为一个整体， 同时当需要

19、调整药量时 又能够很轻松得将片剂掰开， 本发明所用的包衣液由重量比为5:2:1:180的包衣料、 增塑 剂、 表面活性剂和溶媒组成； 包衣料为聚丙烯酸树脂； 增塑剂为聚乙二醇； 表面活性剂为 聚山梨酯80； 溶媒为丙酮； 第二芯片上的第一层包衣液、 第二片剂上的第二层包衣液和相邻 的两个第三芯片接触的边缘处的第三层包衣液， 第一层包衣液、 第二层包衣液和第三层包 衣液的厚度比为1:0.8:0.5， 三层包衣液对药理性的芯片的增重为1.5； 0026 4、 本发明在鸡血藤片剂中加入了跳跳糖， 在服用本发明提供的鸡血藤片剂时， 最 外层的包衣很快在唾液作用下融化开， 跳跳糖与唾液接触并在嘴里跳动，

20、 增添了患者服药 的乐趣， 缓解患者服用药物的抗拒情绪， 改善服用过程中片剂在口腔中产生的苦腥味的不 适感， 提高治疗乳腺癌片剂的整体品质。 0027 本发明的其它优点、 目标和特征将部分通过下面的说明体现， 部分还将通过对本 发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。 具体实施方式 0028 下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明， 以令本领域技术人员参照说明书 文字能够据以实施。 0029 应当理解， 本文所使用的诸如 “具有” 、“包含” 以及 “包括” 术语并不配出一个或多 个其它元件或其组合的存在或添加。 0030 需要说明的是， 下述实施方案中所述实验方法， 如无特殊说明， 均

21、为常规方法， 所 述试剂和材料， 如无特殊说明， 均可从商业途径获得。 0031 0032 一种治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 其包括以下步骤： 0033 步骤一、 取30kg鸡血藤洗净、 切碎后置于提取罐内， 向提取罐中加入沸水至浸没鸡 血藤， 保持沸水恒温提取2h， 重复提取两次， 收集两次滤液， 得第一提取液， 将第一提取液浓 缩至80时比重为1.0， 得第一浓缩液； 0034 步骤二、 将第一浓缩液上弱极性的D101大孔树脂柱， 依次用水、 体积分数为20的 乙醇和体积分数为60的乙醇洗脱大孔树脂柱， 收集60的乙醇洗脱溶液， 得洗脱液， 将洗 脱液浓缩至80时比重为1.08， 得浸

22、膏； 0035 步骤三、 将浸膏与辅料按照质量比为25:1的比例混匀后制粒、 压片、 包衣， 即得鸡 血藤片剂。 所用辅料包括重量比为1:1:1的玉米粉、 羧甲基纤维素钠和肉豆蔻醇。 0036 0037 一种治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 其包括以下步骤： 说 明 书 3/10 页 6 CN 108685998 A 6 0038 步骤一、 取30kg鸡血藤洗净、 切碎后置于提取罐内， 向提取罐中加入沸水至浸没鸡 血藤， 保持沸水恒温提取2h， 重复提取两次， 收集两次滤液， 得第一提取液， 将第一提取液浓 缩至80时比重为1.0， 得第一浓缩液； 0039 步骤二、 将第一浓缩液上弱极性的D

23、101大孔树脂柱， 依次用水、 体积分数为20的 乙醇和体积分数为60的乙醇洗脱大孔树脂柱， 收集60的乙醇洗脱溶液， 得洗脱液， 将洗 脱液浓缩至80时比重为1.08， 得浸膏； 0040 其中， 洗脱液在浓缩成浸膏之前经过预处理， 具体为： 0041 S1、 按重量份数称取6份的山楂皮、 5份的乌梅皮和2份的石榴皮分别洗净混合后磨 碎成粉末， 得混合粉， 将混合粉与洗脱液按照重量比为1:2的比例混合， 得第一混合物， 将第 一混合物超声振荡处理20min后过滤收集第一滤液， 得预处理液； 0042 S2、 按重量份数称取2份的黄芦叶、 3份的风箱果树皮、 8份的黑果腺肋花楸果实、 1 份的

24、蓝靛果、 5份的水榆花楸和4份的山豆根， 分别洗净、 切碎、 干燥后进行蒸汽爆破处理， 得 爆破物； 用爆破物的5倍重量的体积分数为75乙醇浸泡提取三次， 每次一周， 合并第二提 取液， 将第二提取液与混合粉按照重量比为1:2的比例混合， 得第二混合物， 将第二混合物 超声振荡处理20min后过滤收集第二滤液， 将第二滤液浓缩至80时比重为1.0， 得第二浓 缩液； 0043 S3、 将预处理液与第二浓缩液按照重量比为0.02:1的比例混合均匀， 即得预处理 后的洗脱液； 0044 步骤三、 将经过预处理后的浸膏与辅料按照质量比为25:1的比例混匀后制粒、 压 片、 包衣， 即得鸡血藤片剂。

25、所用辅料包括重量比为1:1:1的硅酸钙、 鱼胶和滑石。 0045 0046 提供一种治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 其包括以下步骤： 0047 步骤一、 取30kg鸡血藤洗净、 切碎后置于提取罐内， 向提取罐中加入沸水至浸没鸡 血藤， 保持沸水恒温提取2h， 重复提取两次， 收集两次滤液， 得第一提取液， 将第一提取液浓 缩至80时比重为1.0， 得第一浓缩液； 0048 步骤二、 将第一浓缩液上弱极性的D101大孔树脂柱， 依次用水、 体积分数为20的 乙醇和体积分数为60的乙醇洗脱大孔树脂柱， 收集60的乙醇洗脱溶液， 得洗脱液， 将洗 脱液浓缩至80时比重为1.08， 得浸膏； 004

26、9 其中， 洗脱液在浓缩成浸膏之前经过预处理， 具体为： 0050 S1、 按重量份数称取11份的山楂皮、 9份的乌梅皮和6份的石榴皮分别洗净混合后 磨碎成粉末， 得混合粉， 将混合粉与洗脱液按照重量比为1:2的比例混合， 得第一混合物， 将 第一混合物超声振荡处理30min后过滤收集第一滤液， 得预处理液； 0051 S2、 按重量份数称取5份的黄芦叶、 8份的风箱果树皮、 12份的黑果腺肋花楸果实、 3 份的蓝靛果、 11份的水榆花楸和7份的山豆根， 分别洗净、 切碎、 干燥后进行蒸汽爆破处理， 得爆破物； 用爆破物的5倍重量的体积分数为75乙醇浸泡提取三次， 每次一周， 合并第二 提取液

27、， 将第二提取液与混合粉按照重量比为1:2的比例混合， 得第二混合物， 将第二混合 物超声振荡处理30min后过滤收集第二滤液， 将第二滤液浓缩至80时比重为1.0， 得第二 浓缩液； 0052 S3、 将预处理液与第二浓缩液按照重量比为0.02:1的比例混合均匀， 即得预处理 说 明 书 4/10 页 7 CN 108685998 A 7 后的洗脱液； 0053 步骤三、 将经过预处理后的浸膏与辅料按照质量比为25:1的比例混匀后制粒、 压 片、 包衣， 即得鸡血藤片剂。 所用辅料包括重量比为1:1:1的硅酸钙、 鱼胶和滑石。 0054 0055 一种治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 其包括

28、以下步骤： 0056 步骤一、 取30kg鸡血藤洗净、 切碎后置于提取罐内， 向提取罐中加入沸水至浸没鸡 血藤， 保持沸水恒温提取2h， 重复提取两次， 收集两次滤液， 得第一提取液， 将第一提取液浓 缩至80时比重为1.0， 得第一浓缩液； 0057 步骤二、 将第一浓缩液上弱极性的D101大孔树脂柱， 依次用水、 体积分数为20的 乙醇和体积分数为60的乙醇洗脱大孔树脂柱， 收集60的乙醇洗脱溶液， 得洗脱液， 将洗 脱液浓缩至80时比重为1.08， 得浸膏； 0058 其中， 洗脱液在浓缩成浸膏之前经过预处理， 具体为： 0059 S1、 按重量份数称取9份的山楂皮、 7份的乌梅皮和4份

29、的石榴皮分别洗净混合后磨 碎成粉末， 得混合粉， 将混合粉与洗脱液按照重量比为1:2的比例混合， 得第一混合物， 将第 一混合物超声振荡处理25min后过滤收集第一滤液， 得预处理液； 0060 S2、 按重量份数称取3份的黄芦叶、 6份的风箱果树皮、 10份的黑果腺肋花楸果实、 2 份的蓝靛果、 8份的水榆花楸和6份的山豆根， 分别洗净、 切碎、 干燥后进行蒸汽爆破处理， 得 爆破物； 用爆破物的5倍重量的体积分数为75乙醇浸泡提取三次， 每次一周， 合并第二提 取液， 将第二提取液与混合粉按照重量比为1:2的比例混合， 得第二混合物， 将第二混合物 超声振荡处理25min后过滤收集第二滤液

30、， 将第二滤液浓缩至80时比重为1.0， 得第二浓 缩液； 0061 S3、 将预处理液与第二浓缩液按照重量比为0.02:1的比例混合均匀， 即得预处理 后的洗脱液； 0062 步骤三、 将经过预处理后的浸膏与辅料按照质量比为25:1的比例混匀后制粒、 压 片、 包衣， 即得鸡血藤片剂。 所用辅料包括重量比为1:1:1的硅酸钙、 鱼胶和滑石。 0063 0064 一种治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 其与实施例2的区别在于， 步骤三的方法 不同， 具体为： 0065 i、 将浸膏与辅料按照质量比为25:1的比例混匀后制粒、 压片的第一芯片， 第一芯 片的上、 下表面上均设有多个直径为0.2mm

31、的第一凹槽， 第一侧面上设有第二凹槽， 与第一 侧面相对的第二侧面上设有可卡设于第二凹槽内的凸块； 将第一芯片置于0的冷箱中保 存， 5min后取出立即放入30的第二混合物中浸泡， 2min后取出风干， 得第二芯片； 0066 ii、 在第二芯片的外表面均匀的喷涂一层包衣液， 得第一片剂； 将跳跳糖块破碎过 筛并磨光为0.2mm粒径的圆滑的跳跳糖颗粒， 在第一片剂的上下表面的多个第一凹槽中放 置跳跳糖颗粒， 一个第一凹槽中放置一个跳跳糖颗粒， 得第二片剂； 0067 iii、 在第二片剂的外表面均匀的喷涂一层包衣液， 干燥后得第三片剂； 每三个第 三片剂为一组， 将一组的三个第三片剂依次平行排

32、列并连接， 形成第四片剂， 即得所述鸡血 藤片剂； 其中对于任一第一片剂的卡块卡设于相邻的一个第一片剂的第二卡槽中， 以实现 三个第一片剂的相对定位， 相邻的两个第三片剂接触的边缘处均匀喷涂一层包衣液。 说 明 书 5/10 页 8 CN 108685998 A 8 0068 0069 一种治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 其与实施例3的区别在于， 步骤三的方法 不同， 具体为： 0070 i、 将浸膏与辅料按照质量比为25:1的比例混匀后制粒、 压片的第一芯片， 第一芯 片的上、 下表面上均设有多个直径为0.4mm的第一凹槽， 第一侧面上设有第二凹槽， 与第一 侧面相对的第二侧面上设有可卡设

33、于第二凹槽内的凸块； 将第一芯片置于5的冷箱中保 存， 10min后取出立即放入40的第二混合物中浸泡， 3min后取出风干， 得第二芯片； 0071 ii、 在第二芯片的外表面均匀的喷涂一层包衣液， 得第一片剂； 将跳跳糖块破碎过 筛并磨光为0.4mm粒径的圆滑的跳跳糖颗粒， 在第一片剂的上下表面的多个第一凹槽中放 置跳跳糖颗粒， 一个第一凹槽中放置一个跳跳糖颗粒， 得第二片剂； 0072 iii、 在第二片剂的外表面均匀的喷涂一层包衣液， 干燥后得第三片剂； 每三个第 三片剂为一组， 将一组的三个第三片剂依次平行排列并连接， 形成第四片剂， 即得所述鸡血 藤片剂； 其中对于任一第一片剂的卡

34、块卡设于相邻的一个第一片剂的第二卡槽中， 以实现 三个第一片剂的相对定位， 相邻的两个第三片剂接触的边缘处均匀喷涂一层包衣液。 0073 0074 一种治疗乳腺癌鸡血藤片剂的制备方法， 其与实施例4的区别在于， 步骤三的方法 不同， 具体为： 0075 i、 将浸膏与辅料按照质量比为25:1的比例混匀后制粒、 压片的第一芯片， 第一芯 片的上、 下表面上均设有多个直径为0.3mm的第一凹槽， 第一侧面上设有第二凹槽， 与第一 侧面相对的第二侧面上设有可卡设于第二凹槽内的凸块； 将第一芯片置于3的冷箱中保 存， 8min后取出立即放入35的第二混合物中浸泡， 2.5min后取出风干， 得第二芯片

35、； 0076 ii、 在第二芯片的外表面均匀的喷涂一层包衣液， 得第一片剂； 将跳跳糖块破碎过 筛并磨光为0.3mm粒径的圆滑的跳跳糖颗粒， 在第一片剂的上下表面的多个第一凹槽中放 置跳跳糖颗粒， 一个第一凹槽中放置一个跳跳糖颗粒， 得第二片剂； 0077 iii、 在第二片剂的外表面均匀的喷涂一层包衣液， 干燥后得第三片剂； 每三个第 三片剂为一组， 将一组的三个第三片剂依次平行排列并连接， 形成第四片剂， 即得所述鸡血 藤片剂； 其中对于任一第一片剂的卡块卡设于相邻的一个第一片剂的第二卡槽中， 以实现 三个第一片剂的相对定位， 相邻的两个第三片剂接触的边缘处均匀喷涂一层包衣液。 0078

36、0079 1.1急性毒性试验 0080 动物毒性试验报告： 0081 选取体重为203g， NIH小鼠(SPF级)80只， 雌雄各半， 小鼠随机分为8组， 每组10 只， 其中7组为给药组(分别为实施例1给药组、 实施例2给药组、 实施例3给药组、 实施例4给 药组、 实施例5给药组、 实施例6给药组、 实施例7给药组)、 及剩余一组为对照组， 实验前禁食 12h， 给药组将对应的鸡血藤片剂分别分散于水中， 控制浓度为4.65g生药/mL(水)， 进行灌 胃， 灌胃溶剂为5mL(水)/kg(鼠)， 对照组给予等量的生理盐水， 一天给药2次(即按照体重 计， 小鼠日进药量为56.5g/kg(鼠)

37、/日)， 给药间隔10h， 给药后连续观察15天， 实验结果表 明： 与对照组比较， 给药组的小鼠的全身状况、 饮食、 体重增长、 饮水等均未见明显差异， 正 常。 本发明的中药临床用药量为4.52g生药/人/日， 按照成人体重为60kg计算， 成人日进药 说 明 书 6/10 页 9 CN 108685998 A 9 量为0.075g生药/kg(人)/日， 即小鼠口服灌胃本发明中药的耐受量为临床用量的753倍。 因 此本发明实施例17的鸡血藤片剂急性毒性低， 临床用药安全。 0082 1.2长期毒性试验 0083 选取体重为203g， NIH小鼠(SPF级)20只， 雌雄各半， 随机分为两组

38、， 两组小鼠分 别将实施例7制得的鸡血藤含片按照6.78g生药/kg(鼠)/次、 30.5g生药/kg(鼠)/次进行灌 胃， 每天两次， 两次的间隔时间为10h， 连续用药16周， 停药四周， 检查小鼠， 发现实施例7的 鸡血藤片剂对小鼠各性状无明显影响， 即实施例7的鸡血藤片剂的长期用药毒性小， 停药后 无异样反应， 用药安全。 0084 本发明根据中医药理论， 根据乳腺癌疾病的发病特点， 采用辨证论治的理论进行 筛选组方及其用量， 用药严谨科学， 通过以上实验结果表明， 本发明提供的具有抗乳腺癌活 性的鸡血藤片剂具有明显的抑制乳腺肿瘤的生长和转移作用， 促使肿瘤细胞的凋亡， 并具 有免疫力

39、促进功效， 且无明显毒副作用。 0085 2、 鸡血藤片剂的药理实验 0086 2.1鸡血藤片剂对裸鼠体内人乳腺癌(MCF-7)细胞的抑制作用实验： 0087 实验方法： 制备人乳腺癌MCF-7细胞悬液， 调整细胞浓度， 每鼠右前腋皮下接种人 乳腺癌MCF-7细胞5106个/0.2ml， 共接种90只， 随机分成8个治疗组(分别采用本发明实施 例17制备得到的鸡血藤片剂、 市售的治疗乳腺癌的片剂作为对比例， 灌胃给药， 2g/kg)和 空白组(等容量生理盐水)， 每组10只， 24小时后， 开始用药， 每天一次， 连续24天， 停药后， 处 死动物， 观察肿瘤生长情况并剖取瘤组织称重， 计算每

40、组瘤重， 具体实验结果见表1。 0088 表1对裸鼠体内人乳腺癌(MCF-7)细胞的抑制作用 0089 组别瘤重/g抑制率/ 实施例10.490.1372.5 实施例20.280.0384.3 实施例30.300.0583.1 实施例40.290.0483.7 实施例50.120.0393.3 实施例60.110.0293.8 实施例70.090.0194.9 对比例0.670.1162.4 空白组1.780.11 0090 2.2体外抗乳腺癌活性测试 0091 细胞株： 人乳腺癌(MCF-7)细胞； 96孔板购自Costar公司； RMPI1640培养基购自 Gibco公司； DMEM培养基

41、购自Gibco公司； 新生牛血清购自杭州四季青公司； 噻唑蓝(MTT)和 DMSO购自Amresco公司。 0092 以下实施例所使用的实验仪器如下： 0093 实验仪器： 超净工作台(苏州净化型号SW-CJ-IFD)， 0094 CO2培养箱(SANYO型号： XD101)， 0095 酶标仪BIO-RAD(Model NO.550Serial NO.16971 说 明 书 7/10 页 10 CN 108685998 A 10 0096 以下实施例所使用的实验方法如下： 0097 实验方法： 0098 空白对照组： 100 L的密度为5104个/ml的细胞悬液和100 L的RMPI-164

42、0培养 基。 0099 阴性对照组： 100 L的密度为5104个/ml的细胞悬液和100 L的含0.1DMSO的 RMPI-1640培养基。 0100 实验组： 100 L的密度为5104个/ml的细胞悬液和分别加入100 L浓度为10 g/ml 的鸡血藤片剂。 0101 使用改良MTT法对本发明实施例17制备得到的鸡血藤片剂进行体外抗人乳腺癌 细胞实验： 将人乳腺癌(MCF-7)用胰酶进行消化、 计数、 制成浓度为5104个/ml的细胞悬 液。 将96孔板中每孔加入100 l细胞悬液(每孔5103个细胞)， 然后置于37， 5CO2培养箱 中培养24小时； 每8个孔为一组， 选择8组作为给

43、药组(实施例17所得片剂， 选用市售的治 疗乳腺癌的片剂作为对比例)， 选用17制备得到的鸡血藤片剂和市售的治疗乳腺癌的片 剂分别用DMSO溶剂配置10 g/ml的药液， 对于任一给药组分别每孔加入100 L相应的药液， 同时设计阴性对照组、 空白对照组， 再将96孔板置于37， 5CO2培养箱中培养72小时。 然 后每孔加入20 L MTT(5mg/ml)， 继续培养4小时， 终止培养， 弃去培养基， 每孔加入150 LDMSO溶解， 摇床10分钟轻轻混匀。 在 4570nm、 620nm两波长下用酶标仪检测每孔的吸光 度即OD值， 以各复孔的平均值作为该组细胞的OD值， 计算各组药物的抑制

44、率， 结果详见表2。 0102 表2对人乳腺癌(MCF-7)的抑制作用结果 0103 组别阴性对照组实施例1实施例2实施例3实施例4实施例5实施例6实施例7对比例 OD0.3780.1160.0920.0930.0920.0520.0530.0520.123 抑制率69.375.775.475.786.286.086.20.7 0104 2.3具有抗乳腺癌活性的中药复方组合物对免疫调节作用的实验 0105 对小鼠IgA、 IgG、 IgM含量的影响 0106 实验方法： 取ICR小白鼠50只， 体重1822g， 随机分为正常对照组， 荷瘤对照组和8 个治疗组， 常规接种S180肉瘤， 接种后2

45、4小时， 8个治疗组灌服本发明实施例17制备得到 的鸡血藤片剂和市售的治疗乳腺癌的片剂， 灌药量为0.3ml/只(2g/kg)， 第15天小白鼠眼球 采血。 测定IgA、 IgG、 IgM含量， 具体实验结果见表3。 0107 表3对小鼠IgA、 IgA、 IgM含量的影响(mg/dl) 0108 组别IgA(mg/dl)IgA(mg/dl)IgM(mg/dl) 正常对照组915.787813813.3 荷瘤对照组685.351817523.5 实施例1825.376814722.5 实施例2854.278513762.0 实施例3844.378314772.3 实施例4844.2787127

46、622 实施例5872.485114791.9 实施例6872.685313802.0 说 明 书 8/10 页 11 CN 108685998 A 11 实施例7882.585412811.8 对比例816.373715692.9 0109 由以上表13的结果表明： 本发明提供的鸡血藤片剂和市售的治疗乳腺癌的片剂 对人乳腺癌裸鼠体内移植具有明显的抑制作用， 体外也具有明显抑制人乳腺癌细胞生长的 作用。 表明本发明提供的鸡血藤片剂具有很强的抗人乳腺癌的作用， 可以用于乳腺癌疾病 的治疗。 本发明具有抗乳腺癌活性的鸡血藤片剂可以明显提高荷瘤小鼠的IgA、 IgG、 IgM含 量， 表明本发明提供

47、的具有抗乳腺癌活性的鸡血藤片剂具有免疫促进作用， 可以提高肿瘤 患者自身的免疫功能， 从而有利于肿瘤患者生活质量的改善和自身抗乳腺癌作用。 且本发 明提供的鸡血藤片剂的疗效显著优于市售的治疗乳腺癌的片剂的疗效， 尤其是实施例57 的效果最为显著， 说明在鸡血藤片剂中引入中草药黄芦叶、 风箱果树皮、 黑果腺肋花楸果 实、 蓝靛果、 水榆花楸和山豆根， 能够进一步增加片剂的疗效。 0110 以下结合临床资料及典型病例来进一步说明其有益效果： 0111 一、 临床资料： 0112 1、 临床数据 0113 选取2015.2-2018.2的门诊及住院的原发性乳腺癌患者200例， 年龄3058岁， 平

48、均45.2岁； 0114 2、 诊断标准： 均经细胞学和病理学切片诊断为乳腺癌； 0115 3、 治疗方法： 分别采用本发明实施例7制备得到的鸡血藤片剂作为内服药物， 1个 月为1个疗程； 0116 4、 疗效评定标准： 完全缓解(CR)： 所有可见病灶完全消失， 至少维持4周以上； 部分 缓解(PR):肿瘤最大直径及最大垂直径的乘积减少50以上， 无其他病灶进展， 无任何新病 灶出现； 疾病稳定无变化(SD)： 肿瘤最大直径及最大垂直径的乘积减少小于50， 或增大不 超过25， 无任何新病灶出现； 进展(PD)： 肿瘤最大直径及最大垂直径的乘积增大大于 25； CR+PR为总有效率。 0117 5、 治疗结果： 三个疗程后， CR 190例， PR 10例， SD及PD均为0， 治愈率为95， 有效 率为100。 0118 二、 典型病例 0119 病例1： 李某， 女， 42岁。 患者有乳房有肿块， 疼痛， 腋窝淋巴结肿大， 并伴有身体乏 力， 食欲不振， 睡眠质量差等症状， 到医院就诊。 经医院经细胞学